EVALUACIÓN DE SEGURIDAD DE

PRODUCTOS COSMÉTICOS

1. Ética y alternativas en la
experimentación animal (3Rs)
2. Test de irritación ocular y dérmica
3. Test de sensibilización dérmica
4. Desarrollo e implementación de
pruebas alternativas.
 Unión Europea
Definición:

“toda sustancia o preparación destinada a ser

puesta en contacto con las diversas partes externas
del cuerpo humano (epidermis, sistema piloso y
capilar, uñas, labios y órganos genitales externos) o
con los dientes o membranas mucosas de la
cavidad oral, exclusiva o principalmente de
limpiarlos, perfumarlos, modificar su aspecto y/o
corregir olores corporales y/o protegerlos y
mantenerlos en buena condición”.
EU Cosmetics Directive (76/768/EEC)
 IRRITACIÓN OCULAR
ANTECEDENTES:
1.El ojo puede resultar dañado accidentalmente por el uso
de muchos productos de uso rutinario (ej. Cosméticos).
2. La seguridad de los consumidores está respaldado en la
estimación potencial de irritación ocular de estos
productos.
3. Este tipo de irritación se estima in vivo mediante el test
de Draize ocular (cuestionamientos éticos y científicos).
4.La evaluación del riesgo ocular también puede hacerse
mediante pruebas toxicológicas in vitro (3Rs).
5.Los métodos alternativos requieren procesos rigurosos de
estandarización / validación / implementación.
 Evolución normativa UE

1976: Directiva de Cosméticos 76/768/CEE (julio 27 /1976)

1986: Directiva 86/609/CEE (protección animales)
1991: Creación ECVAM
1999: Creación de REMA
2003: Directiva 2003/15/EC Prohibición uso de animales.
2005: Real Decreto 1201/2005 Adaptación a la legislación
europea
 EFECTOS INDESEABLES DE UN
COSMÉTICO
1. Local: Irritación (inflamación), corrosión
2. Sensibilizante: Fotoirritación y reacción alérgica
3. Sistémico: Paso de compuestos al organismo en general.

“Eye irritation is the production of changes in the eye

following the application of a test substance to the anterior
surface of the eye, which are fully reversible within 21
days of application.
Eye corrosion is the production of tissue damage in the eye,
or serious physical decay of vision, following application
of a test substance to the anterior surface of the eye,
which is not fully reversible within 21 days of application”.
OECD-TG: 405/2002
TEST DE DRAIZE
DE IRRITACIÓN EN OJO Y PIEL
DE CONEJO

John Henry Draize, farmacólogo (USA,1900-1992).

Draize JH, Woodard G, Calvery HO. (1944). Method for the study
of irritation and toxicity of substance applied topically to the skin
and mucous membranes. J. Pharm. Exp. Ther. 82: 377-390.
TEST DE DRAIZE
DE IRRITACIÓN EN OJO DE CONEJO
z Evidenciar potencial daño de químicos a los ojos
z Una sola dosis en un ojo (el otro es el control)
Líquido 0.1 mL /ojo - sólidos 100 mg /ojo
z Conejos albinos jóvenes
z Aplicación en el saco conjuntival, se cierran los
párpados durante un segundo.
z Se evalúa lesiones en conjuntiva, córnea e iris
z Observación durante 21 días: 1, 24, 48 y 72
horas. Días 3, 7, 14 y 21
 …CRÍTICAS

z Crueldad con los animales (test agresivo:

severo dolor y diestrés)
z Diferencia entre la estructura ocular del
conejo vs humano
z Pobre lacrimación de los conejos
z Dosis excepcionalmente altas
z Diferencia en la respuesta entre conejos
z Subjetividad en la evaluación
OPACIDAD
OPACIDAD

1 2

3 4
HIPEREMIA
HIPEREMIA

0 1

2 3
IRITIS
IRITIS

1 2

1 2
QUEMOSIS
QUEMOSIS

1 2

3 4
 MÉTODOS ALTERNATIVOS

Punto Opacidad Opacidad

final Permeabilidad Citotoxicidad
Hinchamiento córnea
Histopatología Histopatología
ATLA, 30 Suppl 2: 69-74 (2002)
MÉTODOS ALTERNATIVOS
…MÉTODOS ALTERNATIVOS
OPACIDAD CORNEAL
Test de Draize en piel de conejo
Dermal irritation is the production of reversible damage of
the skin following the application of a test substance for
up to 4 hours.
Dermal corrosion is the production of irreversible damage
of the skin; namely, visible necrosis through the epidermis
and into the dermis, following the application of a test
substance for up to four hours. Corrosive reactions are
typified by ulcers, bleeding, bloody scabs, and, by the end
of observation at 14 days, by discolouration due to
blanching of the skin, complete areas of alopecia, and
scars.
TEST DE DRAIZE
DE IRRITACIÓN EN PIEL DE CONEJO

z Una sola dosis, vía tópica

z Conejos albinos, dorso rasurado 24 h antes
z Aplicación en el área rasurada (6cm²), se cubre
con gasa por 4 h. Líquidos 0.5 mL, sólidos 0.5 g
z Se observa eritema y edema
z Observación: 1, 24, 48 y 72 horas, hasta día 14
 FORMACIÓN DE ERITEMA Y
ESCARA
z No eritema 0
z Eritema ligero (apenas perceptible) 1
z Eritema bien definido 2
z Eritema severo a moderado 3
z Eritema severo (rojo remolacha) a
formación de escara que hace
imposible la graduación del eritema 4
 FORMACIÓN DE EDEMA

z No edema 0
z Edema muy ligero (apenas perceptible) 1
z Edema ligero (bordes del área bien
definidos por un pápula perceptible) 2
z Edema moderado (pápula de 1 mm aprox) 3
z Edema severo (pápula más de 1 mm
rebasando el área de exposición) 4
ÍNDICE DE IRRITACIÓN PRIMARIO

Categoría de Puntuación
la reacción promedio
Insignificante De 0 a 0,4

Leve De 0,5 a 1,9

Moderada De 2 a 4,9

Grave De 5 a 8

ISO 10993-10 1995

MÉTODOS ALTERNATIVOS
IRRITACIÓN DÉRMICA
 Test de sensibilización

Test de Maximización (Magnusson y Kligman) Test de Buehler

Definiciones…

Skin sensitisation (allergic contact

dermatitis) is an immunologically mediated
cutaneous reaction to a substance. In the
human, the responses may be
characterised by pruritis, erythema,
oedema, papules, vesicles, bullae or a
combination of these. In other species the
reactions may differ and only erythema
and oedema may be seen.
 Test de Buehler

z Rasurado de la piel
z Día 0, 6 y 13: aplicación tópica del
producto, vendaje oclusivo.
z Día 21: nueva aplicación, retirar apósito
valorar edema/ eritema.