MARCO TEORICO

La espectrofotometra se refiere a la medida de cantidades relativas de luz absorbida por una muestra, en funcin de la longitud de onda. Cada componente de la solucin tiene su patrn de absorcin de luz caracterstico. Comparando la longitud de onda y la intensidad del mximo de absorcin de luz de una muestra versus soluciones standart, es posible determinar la identidad y la concentracin de componentes disueltos en la muestra (solucin incgnita). Los mtodos espectrofotomtricos se basan en la medida de la radiacin electromagntica emitida o absorbida por la materia; los mtodos de emisin utilizan la radiacin emitida cuando un analito es excitado por energa trmica, elctrica o radiante; los mtodos de absorcin estn basados en la disminucin de la potencia de la radiacin electromagntica como consecuencia de la absorcin que se produce en su interaccin con el analito. Si se aplica energa a un tomo, esta puede ser absorbida y un electrn externo puede ser promovido a una configuracin conocida como estado excitado; dado que ese estado es inestable, el tomo retornara inmediatamente al estado fundamental, emitiendo energa. La absorcin de las radiaciones ultravioletas, visibles e infrarrojas depende de la estructura de las molculas, y es caracterstica para cada sustancia qumica. Por lo tanto se dice que la espectrofotometra es fundamental en el estudio de sustancias desconocidas. Cuando la luz atraviesa una sustancia, parte de la energa es absorbida; la energa radiante no puede producir ningn efecto sin ser absorbida. El color de las sustancias se debe a que estas absorben ciertas longitudes de onda de luz blanca que incide sobre ellas y solo dejan pasar a nuestros ojos aquellas longitudes de onda no absorbidas.

La espectrofotometra es realizada utilizando un aparato denominado espectrofotmetro, que es un instrumento usado en la fsica ptica que sirve para medir, en funcin de la longitud de onda, la relacin entre valores de una misma magnitud fotomtrica relativos a dos haces de radiaciones. Este Instrumento tiene la capacidad de manejar un haz de radiacin electromagntica (REM), comnmente denominado luz, separadondolo en facilitar la identificacin, calificacin y cuantificacin de su energa. Su eficiencia, resolucin, sensibilidad y rango espectral, dependern de las variables de diseo y de la seleccin de los componentes pticos que lo conforman. Tambin es utilizado en los laboratorios de qumica para la cuantificacin de sustancias y microorganismos. Componentes de un espectrofotmetro:

Fuente de luz La misma ilumina la muestra de la que se vaya a usar. Debe cumplir con las condiciones de estabilidad, direccionalidad, distribucin de energa espectral continua y larga vida. Las fuentes empleadas son lmpara de tungsteno y lmpara de xenn. Monocromador Para obtener luz monocromtica, constituido por las rendijas de entrada y salida, colimadores y el elemento de dispersin, entre la rendija de entrada y salida se encuentra el colimador el cual es un lente que lleva el haz de luz que entra con una determinada longitud de onda hacia un prisma el cual separa todas las longitudes de onda de ese haz y la longitud deseada se dirije hacia otra lente que direcciona ese haz se hacia la rendija de salida. El monocromador asla las radiaciones de longitud de onda deseada que inciden o se reflejan desde le conjunto. Fotodetectores En los instrumentos modernos se encuentra una serie de 16 fotodetectores para percibir la seal en forma
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simultnea en 16 longitudes de onda, cubriendo el espectro visible. Esto reduce el tiempo de medida, y minimiza las partes mviles del equipo Ventajas de la espectrofotometra:
Las ventajas de la espectrofotometra sobre otros mtodos analticos de laboratorio son varias: es rpida, ,verstil, fcil de usar y eficiente en costo. Los espectrofotmetros se han mejorado en precisin y versatilidad en los ltimos aos con los avances de tecnologa, y hoy se consideran indispensables en un laboratorio de qumica analtica. La espectrofotometra se usa para diversas aplicaciones como: anlisis cuantitativo y cualitativo de soluciones desconocidas en un laboratorio de investigacin .Deteccin de niveles de contaminacin en aire y agua, determinacin de trazas de impurezas en alimentos y en reactivos entre otras. Esta gran cantidad de ventajas se debe a que el espectrofotmetro tiene la capacidad de proyectar un haz de luz monocromtica (de una longitud de onda particular) a travs de una muestra. Esto le permite al experimentador realizar dos funciones:
Nos da in formacin sobre la naturaleza de la sustancia en la muestra.

Esto podemos lograrlo midiendo la absorbancia (ABS) a distintos largos de onda(I) y graficar estos valores en funcin del largo de onda, formando un espectrograma. Como cada sustancia tiene unas propiedades espectrales nicas, distintas sustancias producen distintos espectrogramas. Esto se debe a que cada sustancia tiene un arreglo de tomos tridimensional particular que hace que cada sustancia tenga caractersticas nicas. Nos dice cuanta cantidad de la sustancia que nos interesa est presente en la muestra. La concentracin es proporcional a la absorbancia, segn la ley beer-Lambert: a mayor cantidad de molculas presentes en la muestra, mayor ser la cantidad de energa absorbida por sus electrones.

A=KCL

K: coeficiente de extincin molar C: concentracin

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L: distancia que viaja la luz a travs de la muestra.(normalmente es de 1 cm

Una de las aplicaciones ms importantes de las leyes de Lambert-Beer es el anlisis de mezclas. Mediante la realizacin de una espectrofotometra se pueden calcular las concentraciones de los componentes de una mezcla. En esta prctica se lleva a cabo el anlisis de una mezcla de Nitrato de Cobalto y Nitrato de Nquel, por medio de la espectrofotometra, a las longitudes mximas, de cada uno de los componentes por separados. Y con los resultados obtenidos se obtienen fcilmente las concentraciones de Nitrato de Cobalto y el Nitrato de Nquel presentes en la mezcla, por medio de las siguientes ecuaciones: AT( AT( Siendo: AT: El valor de absorbancia de la mezcla obtenido por el espectrofotmetro.
1 1

)=EA (

) b x CA + EB (

)bxC

)=EA (

) b x CA + EB (

) b x CB

: la longitud de onda mxima del nitrato de cobalto : la longitud de onda mxima del nitrato de nquel

EA ( 1): el coeficiente de extincin molar de nitrato de cobalto a ( 1) EB ( 1): el coeficiente de extincin molar de nitrato de nquel a ( 1) CA : concentracin de nitrato de cobalto en la mezcla CB : concentracin de nitrato de Nquel en la mezcla b: espesor de la cubeta (1 cm)