BASES ANALITICAS DEL CONTROL DE IDENTIDAD Y CALIDAD DE DROGAS El empleo con fines teraputicos de las drogas vegetales debe

esta sometido a rigurosos controles antes de que estas puedan ser empleadas como tal. Esta operacin comprende del control de identidad y calidad de la droga. La identificacin, es donde descartando posibles falsificaciones y se realiza fundamentalmente el reconocimiento botnico o por mtodos fisicoqumicos, a travs de una serie de ensayos de tipo cualitativo. Y por otro lado, la determiancion de su calidad y pureza, que es la verificacin de su actividad biolgica, as como sus posibles adulteraciones. Ensayos botnicos Comprende de un examen de las caractersticas organolpticas que se contempla con un reconocimiento de las caractersticas morfolgicas y con el anlisis microscpico. * Estudio de las caractersticas organolpticas: Estudio a travs de los rganos de los sentidos; incluye el olor, el sabor y ocasionalmente, el ruido o chasquido de su fractura y la sensacin que la droga produce al tacto. Junto con los morfolgicos o macroscpicos suele ser suficiente para identificar la mayora de las drogas enteras. Olor trminos generales empleados son: aromtico, aliceo, alcanforceo, nauseabundo, desagradable, a especia, etc. Hay planta que cuentan con olores caractersticos como lo son la menta y la canela entre otras. Color la observacin del color, por ejemplo si es o no uniforme si presenta fragmentos de distinto color. Sabor puede ser dulce, amargo, acido, salino, astringente, punzante, nauseabundo, aromtico, etc. Hay la existencia de drogas con sabores caractersticos como la canela y la vainilla. Estudio morfolgico: son determinadas en cada rgano se conocen examinando sus caractersticas tpicas. No obstante, en cada rgano debemos advertir una serie de caracteres generales que le son propios. Tallos si es de tipo leoso, erecto o rastrero; seccin cuadrangular, acanalada, redondeada, etc. Hojas forma del limbo, tipo de nerviacin; presencia o no de pelos; textura; superficie, etc. Inflorescencias disposicin de la flores, presencia o no de brcteas, etc. Flores nmero de piezas del cliz y de la corola; disposicin de los estambres; nmero de los carpelos; disposicin del ovario, etc. Frutos tipos; forma y dimensiones; caractersticas del pericarpio; dehiscencia, etc. Semilla tamao; color y forma; presencia o no de pelos en el tegumento; etc. Corteza color; estriaciones; arrugas; fractura, etc. Leo Zonas de crecimiento; radios medulares; vasos; fractura, etc. rganos subterrneos forma; aspecto de la superficie; caracterstica del corte transversal; consistencia, etc.

Drogas no organizadas aspecto; coloracin; propiedades organolpticas, etc. Anlisis microscpico. Es indispensable para confirmar la identidad de las drogas cuando los datos morfolgicos han sido insuficientes; y se desea descartar la presencia de posibles adulteraciones. Cortes histolgicos se realiza la identificacin a travs del reconocimiento microscpico de los elementos celulares caractersticos, as como de sus contenidos celulares. Ellos se debe a los rganos que la componen y desempean una funcin esencial para la planta y la histologa nos revela el carcter y distribucin de estos tejidos. Los estudios histolgicos se llevan a cabo mediante cortes transversales o longitudinales mediante micrtomo con la ayuda de tcnicas de aclarado y coloracin. Los rganos delgados como las hojas y los ptalos se examinan tras su introduccin aclarante que se disuelve parte del contenido celular tal como el hidrato de cloral, potasa alcohlica al 5%, lacto fenol, etc. Los rganos oleaginosos como las semillas pueden ser desengrasados previamente en soluciones de alcohol-ter. Otro reactivo aclarante es el hipoclorito de sodio que disuelve todo el contenido celular excepto el oxalato de calcio que nos permite observar mejor las membranas. Tras el aclarado puede utilizarse reactivos que coloreen las membranas y tejidos, tales como el verde de yodo para tejidos lignificados o carmn para los celulsicos (doble coloracin). Otro reactivo puede ser el floroglucinol clorhdrico, que colorea en rojo los tejidos lignificados y el cloroioduro de zinc, que colorea en azul-violeta los tejidos celulsicos y en amarillo marrn los lignificados y suberificados. Las principales caractersticas anatmicas a observar el los cortes histolgicos dependern de la partea a estudiar de la droga: Hojas clulas epidrmicas, el tejido parenquimtico, la posible presencia y caractersticas de estomas y pelos o tricomas (tectores o secretores). Races y tallos la epidermis, el sber, la presencia y la naturaleza de los elementos esclerificados en el parnquima cortical, regin pericclica y lber, y las caractersticas del leo. Corteza caractersticas de sber, los tipos de elementos esclerosos y los elementos secretores. Frutos y semillas la estructura de pericarpio y tegumento. Con respecto al contenido celular, las plantas comprenden carbohidratos, protenas, aceites fijos, y grasas, alcaloides y purinas, taninos, glucsidos, aceites esenciales, gomas y muclagos, resinas, oxalato clcico, carbonato clcico y slice. Puede identificarse sobre el propio corte con la ayuda de reacciones qumicas (histoqumica); as podemos identificar cristales de carbonato clcico (soluble en acido actico); el almidn, que se colorea de azul en presencia de yodo-iodurado; la inulina, que cristaliza en esferocristales con etanol; la gomas y mucilagos, que se colorean de rojo violeta con hematoxilina; los derivados antracnicos, que dan coloracin roja con lcalis; los lpidos, que presentan coloracin negra con cido smico y roja

con Sudan III; las protenas, que ofrecen una coloracin roja con el reactivo de Millon en caliente; los alcaloides, que precipitan con una solucin yodo yodurada y que para diferenciarlos de las protenas, se debe practicar la reaccin antes y despus de tratar con acido tartrico, que disuelve los alcaloides; los derivados flavonicos dan coloracin roja en medio cido con Mg o Zn; los taninos, se colorean de color pardo negruzco en presencia de cloruro frrico, y los aceites esenciales, resinas y ltex, dan color rojo con Sudan III. Drogas pulverizadas: en esta se encuentran rotas las clulas, (excepto paredes lignificadas), desapareciendo la ordenacin de los tejidos y encontrndose fragmentos de los distintos tipos de estructuras tisulares, as como el contenido celular. El examen microscpico preliminar de los polvos vegetales las caractersticas tales como el color y el olor, la presencia o ausencia de elementos formes, el aspecto cualitativo de la reaccin con yod o con floroglucina y la existencia o falta de cristales de oxalato de calcio ofrecen criterios tiles para ir clasificando los polvos en amplios grupos. No obstante, las observaciones ms concluyentes se obtienen a partir de los caracteres anatmicos, tales como los elementos conductores, clulas epidrmicas, estomas, clulas de parnquima, clulas de colnquima, clulas de sber, fibras pelos, etc. 1. Contenido clulas son diversos los productos procedentes del contenido celular que puede encontrarse en una preparacin. a. Granos de fcula se determina su tamao, que se mantiene dentro de mrgenes establecidos, y forma, que puede ser tpica para cada especie. En presencia de agua de yodo o cloroyoduro de zinc dan coloracin azul oscuro o violeta. b. Granos de aleurona Protena que se encuentra en las semillas y aparecen como corpsculos semejantes a los granos de fcula. Son parcialmente solubles en agua y presentan color amarillo, y con reactivo Millon color rojo. c. Cristales son muy abundantes y pueden presentarse en forma de arena microcristalina, de drusas, de rafidios y cristales aislados. d. Grasas y esencias debido a su insolubilidad se presentan como gotas minsculas incoloras o amarillentas. Dan coloracin roja con Sudan III y negra con cido smico. e. Otros componentes celulares para su observacin se aplican reactivos empleados en las reacciones de coloracin y precipitacin. 2. Elementos celulares. Son numerosos los elementos anatmicos que pueden observarse en una muestra pulverizada. a. Elementos conductores: vasos y traqueidas la forma y el diferente engrosamiento de sus paredes permiten clasificarlos en distintos tipos: anulares, escaleriformes,

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reticulados, anillados, punteados, espiralados y con puntuaciones areoladas (traqueidas). En races y rizomas los vasos son generalmente grandes y de tipos reticulado; en tanto que los rganos jvenes en rpido desarrollo son ms pequeos y anulares o espiralados. Clulas epidrmicas existen distintos tipos de epidermis diferencindose segn la forma y tamao de sus clulas. Segn la disposicin de las clulas epidrmicas con respecto a los estomas estos se clasifican en: i. Anomocticos: las clulas epidrmicas que rodean a los estomas, no presentan una disposicin en particular. ii.Anisocticos: poseen tres clulas epidrmicas alrededor del estoma, y una de ellas en ms pequea que las otras dos. iii.Paracticos: con una o ms clulas epidrmicas a cada lado del estoma, en posicin paralela al eje longitudinal del mismo. iv.Diactico: envuelve al estoma, y su membrana en comn forma ngulos rectos con el eje longitudinal del mismo. Clulas del parnquima las formas de estas clulas pueden ser muy variadas, aunque generalmente son clulas vivas, isodiamtricas y de paredes finas. Su valor diagnostico depende del contenido celular que tenga. Clulas del colenquima sus paredes al estar constituidas por celulosa, tiene una gran flexibilidad y por ello el colnquima constituye el tejido mecnico o de sostn tpico de los tallos herbceos jvenes y del nervio medio de las hojas. Clulas de sber su presencia indica que estamos ante un tallo, raz o corteza. Son clulas muertas y sus membranas suberificadas se tien con colorantes lipidicos como el Sudn III. Segn la forma de pared de la clula se pueden clasificar en diferentes tipos: pared gruesa y rectangular, fina y rectangular; sber de clulas poligonales, etc. Clulas de esclernquima bajo esta denominacin se incluye a un conjunto complejo de clulas con membranas engrosadas generalmente lignificada. Segn su forma tamao y origen se divide en esclereidas o clulas ptreas y fibras. La primeras son clulas generalmente isodiamtricas con las paredes engrosadas y lignificadas, pudiendo encontrarse aisladas o en grupos. Existen distintos tipos de esclereidas segn su forma y tamao. En cuanto a las fibras, se trata de clulas alargadas en

sentido axial, con paredes engrosadas, lumen estrecho y generalmente los extremos puntiagudos. g. Pelos o tricomas estructuralmente son de formas muy diversas y se presentan en las clulas epidrmicas. Segn su funcin se clasifican en : i. Tectores se clasifican segn: 1. Nmero de clulas que los componen: unicelulares y pluricelulares. 2. Forma y tamao: cnicos, afilados, verrucosos, curvos, ramificados, estrellados, etc. ii.Glandulosos o secretores se clasifican segn: 1. Pie: unicelular o pluricelular 2. La cabeza o glndula: uni-, bi- o pluricelular. Ensayos fisicoqumicos cualitativos * Reacciones de identificacin Reacciones de coloracin o precipitar se trata de reacciones simples que actan como identificador de especficas de algn principio activo. Las reacciones a veces tiene un inters limitado y no son aplicables a todas las drogas debido a la interferencia que pueden ser observadas con sustancias qumicas parecidas a aquellas que se pretenden identificar. Estos ensayos son muy tiles debido a su sencillez y rapidez y se realizan directamente sobre el extracto de la planta, que suele ser el extracto alcohlico por ser el ms apropiado para detectar la presencia de los principios activos ms importantes. Fluorescencia la luz rica en longitudes de onda corta es muy activa en cuanto a la produccin de fluorescencia, tal como sucede con la luz fuertemente ultravioleta, que produce fluorescencia en muchas sustancias que no dan fluorescencia visible a la luz natural. Micro sublimacin suele realizarse con principios activos fcilmente sublimables (antraquinonas, alcaloides). El estudio de las constantes cristalogrficas, la determinacin de punto de fusin o la produccin de determinadas reacciones coloreadas caractersticas de los cristales formados sirven para la identificacin de la droga. Anlisis cromatogrfico se puede decir que todas las tcnicas cromatogrficas se basan en un mismo principio: la separacin de las sustancias presentes en una mezcla dada, entre dos fases; una permanece fija (fase estacionaria), que puede ser slida o lquida, mientras que la otra eluye a travs de la primera (fase mvil) y que puede ser un lquido o un gas o la combinacin de ambos. Esto permite distinguir entre dos sistemas cromatogrficos: el de adsorcin y el de particin. Cromatografa de adsorcin esta depende de la diferente polaridad que presentan los distintos productos, as como de su configuracin molecular. Es especialmente valida en el aislamiento y purificacin de vitaminas, hormonas, diversos alcaloides, hetersidos cardiotnicos, antraquinonas, etc.

Cromatografa de particin la separacin de los componentes va a depender de los diferentes coeficientes de particin: una fase acuosa y una fase orgnica no miscible; por tanto la separacin se basa en la solubilidad entre las dos fases. Cromatografa en papel (CP) y en capa fina (CCF) tcnica simples donde la separacin de las sustancias viene determinada por un conjunto complejo de propiedades fsicas: velocidad de difusin, solubilidad del soluto y naturaleza del solvente, capacidad de adsorcin, intercambio, etc. La cromatografa en papel ha sido sustituida en gran medida por la de capa fina que es una tcnica ampliamente usada en los controles de toda clase de productos naturales y se ha establecido como un mtodo analtico muy importante en las modernas farmacopeas, permitiendo identificar de forma rpida el nmero de componentes presentes en un material vegetal. Cromatografa gaseosa (CG) utilizada principalmente para drogas con componentes voltiles, permitiendo identificar aceites esenciales, alcanfor, cidos vegetales, algunos alcaloides, resinas y compuestos esteroides. Cromatografa lquida de alta resolucin (CLAR) tcnica muy sencilla y muy sencilla que se realiza directamente cobre el extracto acuoso o alcohlico. Permite la separacin de molculas muy parecidas, incluso ismeros. Se puede aplicar a una amplia gama de compuestos fijos no voltiles, tales como alcaloides, hetersidos, lpidos, esteroides, glcidos, protenas, vitaminas, etc. Electroforesis se basa en el transporte de sustancias cargadas en un campo elctrico. Para ello se impregna un soporte en un electrolito que lo hace conductor; en el centro del mismo se coloca las sustancia problema y se somete a diferencia de potencial generada por dos electrodos. El paso de corriente elctrica determina la separacin de la sustancia en funcin de la naturaleza, carga, masa electrolito y concentracin de iones del mismo, diferencia de potencial aplicado, etc.

GLOSARIO Carpelo: Hoja transformada para formar un pistilo o parte de un pistilo. Dehiscencia: Accin de abrirse naturalmente las anteras de una flor o el pericarpio de un fruto, para dar salida al polen o a la semilla. Estoma: Abertura microscpica en la epidermis de las partes verdes de los vegetales superiores que permite el intercambio de gases y lquidos con el exterior. Parnquima: Tejido vegetal constituido por clulas de forma aproximadamente esfrica o cbica y con espacios de separacin. Pericarpio: Parte exterior del fruto de las plantas, que cubre las semillas. Sber: es un tejido muerto que protege a otros tejidos interiores de una planta de la desecacin, dao mecnico, insectos y herbvoros.

Tricomas: son excrecencias de origen epidrmico y de formas muy variables, pudiendo ser glandulares o no. Pueden hallarse vivos o muertos a su madurez y tienen caracteres suficientemente constantes en distintas especies como para llegar a tener mucho valor en la identificacin de plantas. Comentario En este captulo se abarca principalmente como identificar las drogas con fines teraputicos y menciona los principales mtodos para realizar esta identificacin tanto de la planta como de los componentes que la definen y por otro lado como consecuencia de la identificacin tambin se le acua la demostracin de que un producto natural sea de calidad y pureza que nos permite conocer si hay o no una falsificacin de estas drogas. Todo esto a travs de diferentes ensayo que van desde una simple identificacin de las caractersticas organolpticas y morfolgicas hasta el uso de reacciones e incluso tcnicas ms complejas de alta sensibilidad como lo son tcnicas de cromatografa y electroforesis.