METALOPROTEINASAS (MMPs) E INHIBIDORES DE LAS MMPs EN EL TRACTO RESPIRATORIO: IMPLICACIONES EN EL ASMA Y OTRAS ENFERMEDADES PULMONARES Resumen En pulmn sano,

las Metaloproteinasas de la Matriz (MMP) y sus inhibidores fisiolgicos, los Inhibidores Tisulares de las Metaloproteinasas de Matriz (TIMP), son producidas en las vas respiratorias por un panel de diferentes clulas estructurales. Estas actividades son obligatorias para muchos procesos fisiolgicos, incluyendo el desarrollo, la cicatrizacin de heridas y el trfico celular. La desregulacin de la red proteoltica-antiproteoltica y secrecin inadecuada de varias MMPs por estimulacin de las clulas estructurales e inflamatorias, se cree que toman parte en la fisiopatologa de numerosas enfermedades pulmonares incluyendo el asma, la Enfermedad Pulmonar Obstructiva Crnica (EPOC), fibrosis pulmonar y cncer de pulmn. Las citoquinas y factores de crecimiento estn involucrados en estos procesos inflamatorios y algunos de los mediadores interactan directamente con las MMPs y los TIMPs dando lugar a una regulacin de su expresin o cambios en sus actividades biolgicas mediante fragmentacin proteoltica. A su vez, las citoquinas y los factores de crecimiento, modulan la secrecin de las MMPs estableciendo una compleja red de interacciones recprocas. Cada MMP parece jugar un papel ms especfico, y algunas variaciones de su expresin se observan en diferentes enfermedades pulmon ares. El papel exacto de estas enzimas y sus inhibidores es ahora estudiado en profundidad, ya que podra representar relevancia teraputica para muchas enfermedades. De hecho, la inhibicin de las MMPs puede conducir, bien a una disminucin de la intensidad de un proceso patolgico o, por el contrario, para algunos de ellos, a un aumento de la severidad de la enfermedad. En esta revisin, nos centramos en el papel que desempean las MMPs y TIMPs en el asma y proporcionar una visin general de sus posibles funciones en la EPOC, fibrosis pulmonar y cncer de pulmn, con un especial nfasis en los lazos importantes entre MMPs y citoquinas y factores de crecimiento en estas enfermedades. Conceptos Las metaloproteinasas de matriz (MMP) son una familia de endopeptidasas, dependientes de 10 zinc que degradan protenas y casi todos los dems componentes de la matriz extracelular (MEC). Las MMPs que tienden ms a degradar la MEC sern expuestos un apartado posterior. La Matriz Extracelular est compuesta de glucosaminoglucanos y proteoglucanos que forman un gel muy hidratado en el cual las protenas fibrosas se hallan inmersas. Estas protenas fibrosas pueden ser estructurales (colgeno o elastina) o adhesivas (laminina o fibronectina). El colgeno tipo IV, la laminina y la fibronectina estn sintentizadas por clulas eopiteliales bronquiales. La Membrana Basal es una capa delgada de MEC especializada que forma una estructura de soporte para el crecimiento de las clulas epiteliales. Se piensa que la membrana b asal no sirve solo de soporte mecnico sino que tambin influencia el comportamiento celular. A diferencia de la MEC circundante, los componentes moleculares fundamentales de la membrana basal son el colgenos tipo IV, los complejos laminina/entactina/nidogeno y proteoglucanos. La degradacin de protenas extracelulares es esencial para que cualquier clula individual pueda interaccionar con su ambiente circundante y para que los organismos multicelulares funcionen y se desarrollen. Las MMPs tambin degradan molculas de la superficie celular y 11 otras protenas pericelulares, reguladoras del comportamiento celular en diversas vas. .

1. Metaloproteinasas de la Matriz (MMP) e Inhibidores de las Metaloproteinasas (TIMPs) Las metaloproteinasas de matriz (MMP), o matrixins, pertenecen a la superfamilia metzincin de las metaloproteinasas, que tambin incluye astacinas, ADAMs (una protena con A Desintegrina y Dominio Metaloproteasa) y proteasas ADAM-TS (ADAM con un motivo similar de trombospondina). Las MMP son enzimas proteolticas que se cree que estn implicadas en muchos procesos fisiolgicos y patolgicos, incluyendo el desarrollo embrionario, la morfognesis, reproduccin, procesos oxidativos, remodelado seo, cicatrizacin de heridas, cncer, artritis, arteriosclerosis. Ademas, como se dijo mas arriba, estas enzimas pueden degradar la MEC. La matriz extracelular es una red compleja de molculas como colgeno, fibronectina, laminina, entactina/nidogeno y heparn sulfato proteoglicanos. La matriz extracelular es un soporte mecnico para las clulas que tambin acta como un reservorio de citoquinas y factores de crecimiento (Factor de Crecimiento Vascular Endotelial (VEGF), Factor de Crecimiento Transformante- (TGF- )). Las MMP, por su actividad proteoltica, pueden, por un lado, afectar a la adherencia de las clulas a la matriz extracelular y, por otro lado, la liberacin tanto de fragmentos bioactivos de molculas de la matriz extracelular y mediadores bioactivos "Atrapados", proporcionando seales del microambiente a las clulas lo que les permite reaccionar a los estmulos. Por ejemplo, la laminina-5A, un componente de la membrana basal, es liberada de la matriz por la actividad proteoltica de algunas MMPs (especialmente por la actividad de MT1-MMP y la MMP-2). Se demostr que la cadena -2 de la laminina-5 induce la migracin de clulas epiteliales permitiendo que la actividad de las MMPs participen en la regulacin del comportamiento de las clulas epiteliales. En este contexto, las MMPs tambin desempean importantes roles positivos o negativos en la angiognesis por diferentes mecanismos. La MMP-9 ha sido, por ejemplo, informada que es esencial para la movilizacin de VEGF en la matriz extracelular. Las MMP-2 y MMP-9 promueven la angiogenesis por la exposicin de un eptopo crptica en el colgeno IV. Por el contrario, la MMP-7 tiene la capacidad de generar factores angiogenicos mediante la liberacin de fragmentos de la endostatina de la matriz extracelular. Desde su primera descripcin por Gross y Lapierre en 1962, se han descrito 28 MMP e identificado 24 MMP en vertebrados (Tabla 3), y 22 en humanos.11 La taxonoma de las MMPs fue construido por primera vez de acuerdo a su especificidad de sustrato, pero otra clasificacin de las MMP en base a su similitud estructural fue propuesto por Egeblad y Werbel el 2002. (Fig. 11). Las MMP estn hechas realmente hechos de diferentes dominios y la mayora son secretadas por las clulas latentes como proenzimas que requiere la ruptura de un dominio amino-terminal de aproximadamente 10 kDa (dominio propptido) para ser activado. Los mecanismos exactos implicados in vivo en la activacin es an desconocida, pero probablemenre se trate del sistema plasmingeno/plasmina. Hay muchas diferencias estructurales entre los miembros de la familia de las MMPs, que participan en muchos casos en la puesta a punto de propiedades proteolticas (Sustratos, actividades) y en la regulacin de las interacciones matriz-proteasa (adherencia, la selectividad del sustrato). Todas las MMPs comparten un pro-dominio que contienen en algunos casos, un furina sitio de escisin que , permite la activacin intracelular (MMP-11, MMP-21, MMP-23, MMP-28, MT-MMP). En la subfamilia gelatinasa de las MMPs (MMP-2 y MMP-9), el dominio cataltico que incluye la 2+ vinculacin del sitio de Zn tambin contiene modulos de fibronectina que permite la capacidad 12 de unir la gelatina a su principal sustrato. Otros dominios compartidos por la mayora de las MMPs estn en una regin bisagra rica en prolina, un dominio responsable similar a hemopexina para la mayor especificidad de sustrato y la unin a inhibidores especficos y, por lo menos, un dominio carboxi-terminal. Las MMP tipo membrana (MT-MMP) representan una subclase de las MMPs que estn ancladas a la membrana plasmtica por un dominio transmembrana adicional especifico.

Fig. 11. MMPs Humanas. Representacin esquemtica de la estructura de las 24 metaloproteinasas de la matriz (MMPs), que han sido clasificadas dentro de 4 grupos 12 diferentes en base a la organizacin de sus dominios.
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La t i las Ps sus funci nes se i en t es i nci ales ecanismos, incluyen: acti aci la t anscri ci n, procesamiento post transcripcional li eraci n e ro-dominios, ertimiento de la superficie celular y el control e su acti i ad por una familia de inhi idores ), endgenos conocidos colecti amente como I hi idores isulares de las etaloproteinasas n I P). Las citoquinas y factores de crecimiento, que muestran una compleja relacin con las Ps como se descri e en otra seccin de esta revisin, pueden actuar directamente sobre la modulacin gnica de la expresin de las Ps. omo un ejemplo, el actor de Necrosis umoral N - ) o la Interleucina-1 IL-1 ) son capaces de producir induccin del gen de las Ps en tumores, mientras que el - es ms bien conocido por ser un represor de la expresinde los genes de las Ps. omo se mencion anteriormente, las Ps son secretadas en una forma latente y necesitan ser activados por protelisis. Esta conversin de los pro-MMP en forma activa se puede reali ar in itro por los radicales de oxgeno reactivo o condiciones fsicas como el pH o la temperatura. In i o, la activacin de las MMPs implica otras MMPs o serino proteasas. Por ejemplo, la activacin de proMMP-2 se lleva a cabo por una MMP de Membrana ipo 1 M T1-MMP). tro nivel de control para la actividad de las MMPs es su inhibicin por los inhibidores endgenos como TIMP y macroglobulina- 2. Este s l timo est presente principalmente en la fase fluida del plasma mientras que los TIMPs se consideran inhibidores clave en los tejidos. Hasta la fecha, se han identificado cuatro TIMPs en vertebrados TIMP-1 a TIMP-4). Los TIMPs se componen de un dominio N-terminal y un dominio -terminal estabili ado por lmites de disulfuro. En cuanto a las MMPs, la expresin de TIMPs en los tejidos ests estrechamente reguladas para mantener un equilibrio entre la proteolisis y la inhibicin de la protelisis de la matri extracelular asi como un medio estable manteniendo las capacidades de plstico.
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La regulacin de la actividad de las MMP es importante en el modelaje tisular, crecimiento tumoral, metstasis y en enfermedades inflamatorias como el asma y la enfermedad pulmonar 9 obstructiva crnica (EPOC). La desregulacin de cualquiera de las actividades de los TIMP o las actividades de las MMPs conduce a estados de rotacin exagerada de la matriz extracelular, lo que conduce a la remodelacin o acumulacin lo que conduce a fibrosis. En los casos de cncer, el balance neto entre la actividad proteasa e inhibicin determina la capacidad proteoltica del tumor, por lo que una disminucin en los niveles de TIMP est 10 generalmente correlacionada con una mayor progresin tumoral. Los cuatro TIMPs tienen diferentes afinidades para las diferentes MMPs. TIMP-1, TIMP-2, TIMP-4 son protenas secretadas, mientras que TIMP-3 est anclada en la matriz extracelular. Las TIMPs inhiben las MMPs en una relacin estequimetrica 1:1 y de una manera reversible. TIMP-1 y TIMP-2 son capaces de formar complejos con formas activas de MMP-2 y MMP-9, y con la forma latente de MMP-9 y MMP-2, respectivamente. TIMP-2 promueve una activacin efectiva de proMMP-2 por la formacin de un complejo ternario con MT1-MMP en la superficie celular. Por el contrario, un exceso de TIMP-2 inhibe la activacin proMMP-2. Recientemente se han descrito nuevas protenas que actan como inhibidores de MMPs, observando que algunas contienen dominios homlogos a los dominios de los TIMPs. Por ejemplo, la protena inductora de la reversin rica en cistena con motivos Kazal (RECK) es un inhibidor que juega un papel regulador en la integridad de la matriz extracelular y en la 13 angiognesis. Ademas el caso del inhibidor del factor tisular 2 (TFPI2), una serina proteasa que puede actuar como un inhibidor de MMP.14

Muchos tipos de clulas han sido identificadas como productoras de MMP y TIMPs en el s pulmn. Estas enzimas y sus inhibidores son producidas por las clulas estructurales del rbol bronquial y alvolos y por las clulas inflamatorias a la estimulacin. En el pulmn sano, los fibroblastos producen constitutivamente MMP-2, pero tambin son una fuente celular para la MMP-1 y TIMP-1. Las clulas epiteliales bronquiales liberan MMP-2, MMP-9 y su inhibidor importante, TIMP-1. Adems de estas ltimas clulas, el epitelio alveolar y neumocitos tipo II, producen TIMP-2 y MMP-1. Las clulas musculares lisas producen MMP-2, que controla su proliferacin. Las clulas musculares lisas son tambin una fuente de MT1 -MMP, TIMP-1 y TIMP-2 y producen MMP-3 y MMP-7 R Am a niveles moderados. Entre las clulas inflamatorias, los neutrfilos producen MMP-9, MMP-8 y TIMP-1 que son sintetizados y liberados de sus grnulos secundarios a la activacin Los macrfagos alveolares producen . MMP-1, MMP-9, MMP-12 y TIMP-1. Los mastocitos juegan un papel clave en los procesos inflamatorios que ocurren en la pared bronquial y una vez activados por linfocitos, producen menos MMP-9. En condiciones patolgicas, la actividad y el perfil de secrecin de estas clulas pueden ser modificadas cambiando la expresin y la actividad de MMPs y TIMPs, y la representacin de estas enzimas y sus inhibidores implicados en muchas enfermedades pulmonares. 2. Implicacin de las MMPs en la patognesis del asma El asma bronquial es una enfermedad pulmonar caracterizada por el desarrollo de hiperreactividad bronquial crnica e infiltracin persistente de la pared de las vas areas por clulas inflamatorias, y los cambios estructurales de las vas respiratorias que se refiere a un remodelacin bronquial". Este ltimo probablemente conduce a una mayor tasa de disminucin de la funcin pulmonar durante la vida. Los principales cambios estructurales descritos en los bronquios de los asmticos son:(A) un engrosamiento epitelial y una fibrosis subepitelial, principalmente vinculados a la deposicin de los subtipos de colgeno (tipos I yIII) y fibronectina, (B) cambios en la composicin de la matriz extracelular (por ejemplo, la fragmentacin las fibras elsticas, deposicin de tenascina), (C) hiperplasia de clulas
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musculares lisas, (D) clulas productoras de moco ("clulas cliz") hiperplasia, (E) aumento de la superficie de los vasos sanguneos en las paredes de las vas respiratorias y pericondrales (F) fibrosis. La MMP-9 fue la primera MMP en ser estudiada en profundidad por su implicacin en la patologa del asma. iveles aumentados de MMP-9 se detectaron en el lavado broncoalveolar, esputo inducido por la inhalacin hipertnica de solucin salina y en el suero de pacientes asmticos. El aumento de la actividad de la MMP-9 observada en las vas respiratorias de los pacientes asmticos parece estar relacionado con un aumento en nmero de granulocitos y , ms precisamente, neutrfilos en las vas respiratorias. Otros autores han sugerido que los eosinfilos, son clulas clave en la inflamacin de las vas relacionadas con asma. Tambin podra ser una importante fuente de MMP-9 en esta enfermedad. Han y colaboradores, del GuangzhouInstitute of Respiratory Diseases, de la Repblica Popular China, compararon las biopsias de 30 pacientes asmticos con las de 18 pacientes portadores de enfermedad pulmonar obstructiva crnica (EPOC) y 10 voluntarios de control. Simultneamente se someti a los participantes a pruebas de funcin pulmonar y de reactividad de la va area. La inmunoreactividad de las MPM-9 se determin mediante un sistema de anlisis de imgenes. Los especimenesbipsicos de los sujetos asmticos contenan significativamente ms eosinfilos (p< 0,001) que los de los portadores de EPOC. Los controles sanos no mostraron eosinfilos. Se identific inmunorreactividad a las MPM-9 en todas las muestras de pacientes asmticos y en el 40% de las de los pacientes con EPOC, pero no en las de los controles sanos. La inmunorreactividad a las MPM-9, establecida mediante gelatinasa-B, se localiz tanto en el epitelio bronquial como en la matriz extracelular submucosa, prominente en el epitelio desnudo. El puntaje inmunohistoqumico de las MPM-9 mostr correlacin significativa con el recuento de eosinfilos en la mucosa bronquial. Aunque el inters de la investigacin es mostrar el equilibrio entre la MMP-9 y TIMP-1 probablemente ocurrira exclusivamente en la zona pericelular, algunos autores han reportado un desequilibrio observado entre la MMP-9 y TIMP-1 medidos en secreciones bronquiales o lavado broncoalveolar, con un significativo aumento de la produccin de TIMP-1 en comparacin con la MMP-9, se cree que favorece la deposicin de matriz extracelular Sin . embargo, otros autores en el estudio de los fluidos (lavado broncoalveolar o esputo inducido) o de la pared bronquial no reportaron un desequilibrio, lo que sugiere que la inflamacin bronquial dara lugar a una carga proteoltica seguido por la formacin de la cicatriz que resulta en una desorganizacin de la matriz extracelular. Por otra parte, en asmticos, el TIMP-1 se inform que se secretan en menor medida por los granulocitos, lo que sugiere que podra existir un desequilibrio entre la actividad proteoltica y anti-proteolticaa a nivel pericelular en la pared de la va area. Los niveles de MMP-9 se incrementaron en el esputo de asmticos alrgicos despus de la exposicin de alrgenos, en comparacin con los sujetos control, y se correlacion con el porcentaje de eosinfilos, mientras que los niveles de TIMP-1 no variaron significativamente. Esta observacin sugiere que la matriz extracelular puede ser agredida despus del contacto con alrgenos y est vinculada a inflamacin bronquial aguda inducida por alrgenos. Siguiendo las investigaciones de Han y col. el puntaje inmunohistoqumico de las MPM-9 mostr correlacin significativa con el recuento de eosinfilos en la mucosa bronquial. Los valores esperados del volumen espiratorio forzado en el primer segundo (VEF1) sobre la capacidad vital forzada (%) (r = 0,52, 0,41, 0,37, respectivamente; p< 0,01) no mostraron correlacin con el VEF1(PD20) en los sujetos asmticos. La severidad del asma tambin es un factor influyente en la secrecin de proteasas en las vas respiratorias. Los niveles de MMP-9 en el esputo de los pacientes con asma grave, particularmente aquellos que tienen obstruccin irreversible de las vas areas, son incluso ms altos en comparacin con los pacientes con asma leve. Por lo tanto, en nivel de las mediciones de MMP-9 podra ser propuesta como una herramienta til para determinar uno de los aspectos de la gravedad de la enfermedad. La regulacin de la secrecin de MMP-9 en las vas respiratorias parece compleja ya que tanto las clulas inflamatorias y estructurales son capaces de producir esa proteasa. En la superficie
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de las clulas epiteliales, los receptores proteasa sensibles pueden ser encontrados como el Receptor Activado por Proteinasa-2 (PAR-2) que se activa principalmente por las proteasas de serina, tales como la tripsina y la triptasa de los mastocitos, e inducen la liberacin de MMP-9 por las clulas epiteliales de las vas respiratorias, lo que sugiere que estos receptores podran estar implicados en la remodelacin de los tejidos que ocurre en el asma. Adems de la liberacin de MMP-9, la activacin mediada de PAR-2 por las clulas epiteliales de las vas respiratorias tambin induce liberacin del Factor Estimulante de Colonias de Granulocitos Macrfagos (GM-CSF) y eotaxina, que promueve la activacin y supervivencia de eosinfilos, as como el reclutamiento de estas clulas inflamatorias a las vas areas, respectivamente. En vivo, la estimulacin intranasal de ratones con IL-17, conocido por promover el reclutamiento de neutrfilos, indujo la liberacin activa de proMMP-9 y MMP-9 en el lavado broncoalveolar, asociadas a una acumulacin de neutrfilos local que mostro una tincin positiva para la MMP-9. En modelos ratn con asma, la ausencia de la MMP-9 es responsable de una disminucin de la infiltracin de las vas respiratorias y lavado broncoalveolar por clulas inflamatorias. En ratones knock-out (KO) MMP-9, estos no desarrollaron hiperreactividad de las vas areas inducida por alrgenos. La delecin del gen de MMP-9 parece ser eficaz en procesos inflamatorios inducida por alrgenos, disminuyendo el trfico celular dendrtico, que es uno de los eventos clave durante el inicio de respuestas inmunes alrgicas incluyendo el asma. Curiosamente, otro estudio utilizando tambin con Ratones KO MMP-9, se inform que la MMP-9 no es esencial para la migracin de leucocitos y que la supresin de la MMP-9 podra promover tanto la inflamacin y la hiperactividad de las vas areas. La diferencia entre estos dos ltimos estudios se puede atribuir a una diferencia significativa en el protocolo de la exposicin al alrgeno, el ltimo estudio que se realizo fue con un antgeno 5 veces mayor de concentracin. Los neutrfilos juegan un papel importante en el asma tan pronto como la enfermedad se convierte en grave. Adems de la produccin de MMP-9, los neutrfilos tambin producen la MMP-8, que se almacena en sus grnulos secundarios y son liberados por estimulacin. Un aumento de la expresin de MMP-8 ha sido reportado en las biopsias bronquiales y lavado broncoalveolar de pacientes asmticos, lo que sugiere que esta enzima podra desempear un papel importante en esta enfermedad. Para comprobar esta hiptesis, se ha aplicado un modelo en ratones deficientes de MMP-8 (MMP-8 KO) y se ha encontrado sorprendentemente que, en los ratones que carecen de MMP-8, muestran una inflamacin severa granuloctica en las vas respiratorias despus de la exposicin del alrgeno. En este modelo, la apoptosis de neutrfilos fue menor en los ratones KO MMP-8 despus de la exposicin al alrgeno, indicando un probable rol de la MMP-8 en la regulacin de procesos que conducen al clearance de los neutrfilos. Adems de su posible papel en la inflamacin de las vas respiratorias aqu descritos, las MMP se cree que tambin juegan un papel importante en el proceso de remodelamiento tisular. Clulas inflamatorias, como las clulas T, eosinfilos y los mastocitos, pero tambin algunas clulas estructurales como las clulas musculares lisas, se cree que causan cambios irreversibles de las vas respiratorias, por tanto la secrecin de MMPs y la produccin de citoquinas pro-inflamatorias o factores de crecimiento pueden ser activados o inactivados por escisin proteoltica resultante de la actividad de MMPs. Por ejemplo, el depsito de colgeno I, III y fibronectina en la capa reticular de la membrana basal se cree que es causada por los ciclos de degradacin y dao de la matriz, y podra verse favore cido por la produccin excesiva de TGF- activado. Este proceso implica probablemente por lo menos MMP-2 y MMP9, que comparten la capacidad de alterar la membrana basal normal. La MMP-1, secretada por clulas musculares lisas hiperplsicas, puede desempear un papel en la hiperplasia de estos ltimos, probablemente mediante la activacin del Factor de Crecimiento similar a la Insulina (IGF). IGF-1 es, en efecto, producido por las clulas epiteliales de las vas respiratorias y es un potente factor de crecimiento para la proliferacin de las clulas musculares lisas, tal vez por su capacidad de regular la MMP-2, as como reconocer clulas musculares lisas mitgenas, en varios niveles. En condiciones normales, en los seres humanos, la MMP-2 es secretada por las clulas de msculo liso de las vas areas y es eficaz en la proliferacin celular de una manera autocrina. El incremento de masa muscular liso bronquial es quizs el componente ms importante en el proceso de remodelacin de la pared de las vas respiratorias en el asma. La inhibicin de la MMP-2 reduce significativamente la proliferacin de clulas musculares lisas.

El panorama se vuelve an ms complejo cuando se considera la interaccin de diferentes sistemas incluido el sistema proteasa-antiproteasa y el sistema plasmina/plasmingeno. Dos activadores de plasmingeno (activador del plasmingeno tipo uroquinasa y activador del plasmingeno tisular (uPA y tPA)) convierten el plasmingeno en plasmina. El principal inhibidor fisiolgico de activadores del plasmingeno (Inhibidor del Activador del Plasmingeno1 (PAI) -1) se sabe que regulan la adhesin y la migracin de una variedad de clulas durante la respuesta inflamatoria y se cree que interactan con el sistema de MMPs en el pulmn. De hecho, el PAI-1 se produce principalmente por los mastocitos y puede promover la deposicin de matriz extracelular, por lo menos por la inhibicin de la actividad de MMP-9. Esto alcanza a demostrar el papel desempeado por el PAI-1 en la homeostasis de la matriz extracelular, ya que los ratones mostraron menos colgeno y deposicin de fibrina en la pared de las vas respiratorias, y una mayor actividad de MMP-9. 2.1. Interacciones entre las MMPs y citocinas Factores de crecimiento en el asma. Complejas interacciones se producen entre las MMPs, TIMPs, citocinas y factores de crecimiento. En el asma, la inflamacin se conduce por una subclase especfica de los linfocitos T denominados linfocitos Th2 que organizan y perpetuan la inflamacin y remodelacin a travs de la secrecin de citoquinas especficas, principalmente Interleucina-4 (IL-4), IL-5, IL-9 e IL-13, que desempean papeles distintos. La IL-4 es el principal factor que regula la produccin de IgE por clulas B, y es necesario Th2 para una ptima diferenciacin. En cuanto al papel clave de las citoquinas en procesos inflamatorios inducido por alrgenos, las terapias anti-citoquinas se han investigado en el asma. Estos estudios revelaron que el bloqueo de la IL-4 no es suficiente para inhibir el desarrollo del asma en modelos de animales experimentales. Por el contrario, la inhibicin de la IL-13, otra citoquina Th2 cuyas seales superpone con la va de transduccin de la IL-4, bloquea totalmente la hiperreactividad las vas respiratorias, la fibrosis subepitelial y la progresin de la inflamacin en modelos de ratn con asma. Estos efectos se asociaron con una inhibicin de la MMP-9, la neutralizacin de la IL-13 resultando en una reduccin en niveles de MP-9 en el tejido pulmonar de los ratones. Algunas citoquinas Th2 contribuyen de manera significativa en la patologa del asma y otras enfermedades pulmonares inflamatorias por interactuar directamente con MMPs o TIMPs resultando en un aumento o disminucin de su expresin y actividad. La IL-4 disminuyo la protena MMP-2 y los niveles de mR A en cultivo humano de fibroblastos bronquiales, pero no alter la produccin deTIMP-2, dando lugar a un aumento de la relacin TIMP-2/MMP-2. Adems, la IL-4 regula positivamente la transcripcin de procolgeno I mediante activacin directa, apoyando de esta manera el efecto profibrtico de esta citoquina. Basndose en estas observaciones, la IL-4, pudiera ser considerada como un posible vnculo entre la inflamacin y el depsito de colgeno observados en las vas respiratorias asmticas. Se ha descrito que los inhibidores de las MMPs administrados por va intratraqueal en modelos de ratn con asma pueden ejercer un efecto directo sobre las citoquinas y son capaces de derogar significativamente el incremento de la expresin de citoquinas, incluyendo la IL-4 AR m en el tejido pulmonar y los niveles de IL-4 en el lavado broncoalveolar. La IL-5 es otra citoquina Th2 importante que ejerce un efecto sobre la produccin, maduracin, activacin de eosinfilos y actuar como un agente quimiotctico fuerte para esas clulas. Esta citoquina podra, por lo tanto, contribuir significativamente al dao tisular observado en el asma crnica. Los niveles de IL-5 estn aumentados en el lquido de lavado broncoalveolar de pacientes con asma sintomtica. Las clulas T, los eosinfilos y los mastocitos expresan AR m IL-5 y secretan esta citoquina. Los eosinfilos son conocidos por expresar principalmente la MMP-9, pero la influencia de IL-5 en esta produccin an no se ha demostrado. En efecto, el cultivo de eosinfilos perifricos en sangre, en presencia de IL-5, no indujo la produccin de MMP-9 despus de 4 das. Sin embargo, la terapia anti-IL-5 reduce notablemente los eosinfilos en sangre perifrica y la remodelacin de las vas respiratorias (disminucin de la expresin de tenascina y procolgeno III, y la disminucin del espesor reticular de la membrana basal), pero no parece ser realmente eficaz sobre los sntomas en pacientes asmticos. Se piensa que la IL-13 interacta directamente con las MMPs y muchas TIMPs. En el pulmn,
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la IL-13 es considerada como un regulador central del asma alrgica por su contribucin a la regulacin de la inflamacin eosinoflica, fibrosis subepitelial, hipersecrecin de moco e hiperactividad de las vas respiratorias. La IL-13 es una citoquina pleiotrpicas que afecta directa o indirectamente a la funcin de mltiples tipos de clulas, incluidas las clulas T, eosinfilos,mastocitos, basfilos, clulas epiteliales, las clulas del msculo liso, fibroblastos y macrfagos en muchas condiciones patolgicas como las enfermedades inflamatorias del pulmn o el cncer. La produccin exagerada de IL-13 ha sido documentada en una variedad de enfermedades caracterizadas por inflamacin y remodelacin, incluyendo el asma. La IL-13 tiene un efecto directo sobre las clulas inmunes y es suficiente y necesario para la induccin y el mantenimiento de la activacin de clulas dendrticas inducidas por alrgenos. En un modelo murino de dao pulmonar inducido por tabaco, se ha descrito que la IL-13 induce la sobreexpresin de MMP-2, MMP-9, MMP-12, MMP-13, y la expresin de MMP-14. El bloqueo de las MMPs en este modelo llev a una disminucin significativa en el enfisema inducido por IL-13. Los efectos relacionados a IL-13, tales como la ampliacin alveolar en insuficiencia respiratoria son especialmente mediados por MMP-9 y vas MMP-12-dependiente. La MMP-9 inhibe la acumulacin de neutrfilos, mientras que la MMP-12 desempea un papel inhibitorio sobre la acumulacin de eosinfilos y macrfagos. En este contexto, la MMP-9 y la MMP-12 podran ser consideradas como mediadores aguas abajo y reguladores de la respuesta inflamatoria inducida por la IL-13. Se ha descrito que la IL-13 sola no tiene efecto sobre la expresin de TIMP-1. Sin embargo, en presencia de TGF- 1, la IL-13 aumenta sinrgicamente TIMP-1 mR A. El TGF- es una citoquina pro-fibrtica que participa en la remodelacin y, en particular en la formacin de fibrosis subepitelial y los niveles de TGF- se correlaciona con el espesor de la membrana basal. El TGF- es secretado por los macrfagos, los fibroblastos, clulas epiteliales, las clulas del msculo liso, pero tambin por clulas inflamatorias incluyendo eosinfilos, neutrfilos y clulas cebadas. En condiciones normales, el TGF- 1 est presente en las vas respiratorias inferiores y sobre todo en el epitelio bronquial. Los niveles del TGFmedidos en las biopsias bronquiales de los asmticos fueron elevados en comparacin con los sujetos control. Circuitos de control recproco existen entre el TGF- y las MMPs desde MMP-9 activadas latente de TGF- , esta ltima, una vez activada, actua directamente en la expresin de MMP-9 y desempea un papel crucial incrementando su produccin y secrecin en modelo de ratn de remodelacin. Otras citocinas tambin presentan ms o menos complejas interacciones con los miembros de la familia de las MMPs. La Protena 1 de los Monocitos Quimiotractantes (MCP-1) contribuye sin dudas a cambios de la matriz extracelular observados durante la remodelacin de las vas respiratorias por el aumento del AR m por la expresin de MMP-1 y TIMP-1 en clulas con secreciones bronquiales en asmticos. La IL-1 , una citoquina pro-inflamatoria, esta incrementada en los pulmones de los pacientes con asma y es convertida de su forma latente por diferentes proteasas, incluyendo la MMP-9. La produccin biolgicamente activa de IL-1 causa en ratones adultos inflamacion pulmonar caracterizada por infiltracin de neutrfilos y macrfagos. Se ha reportado que la IL-1 tambin contribuye a la fibrosis en las paredes de las vas areas aumentando el espesor de conductancia de las paredes de las vas respiratorias y aumento de la produccin de moco. Estos efectos de la IL-1 podran explicarse por su capacidad para aumentar la produccin de neutrfilos atrayentes de quimioquinas CXC, "neutrfilos quimiotrayentes inducidos por citoquinas" denominado "KC" (CXCL1) y la Protena 2 de Macrfago Inflamatorio (MIP-2) (CXCL2), y los niveles de metaloproteinasas de la matriz MMP-9 y MMP-12. La relacin entre la produccin de MMP-2 y los Factores de Crecimiento similares a la Insulina (IGF) fue discutido previamente. Otros factores de crecimiento como el Factor de Crecimiento de Fibroblastos (FGF), que se encuentran asociadas a la matriz extracelular, pueden tener un efecto directo sobre la produccin de MMP por los fibroblastos. De hecho el FGF-1, en , presencia de heparina, que refuerza su efecto, induce una regulacin marcada de la secrecin de MMP-1 en fibroblastos que no expresan la enzima a nivel basal. Por el contrario, la produccin constitutiva de TIMP-1 y TIMP-2 por los fibroblastos en el pulmn humano in vitro no es significativamente modulada por la estimulacin por el FGF solo o del FGF en combinacin con heparina. El Factor de Crecimiento Derivado de Plaquetas (PDGF) se libera de clulas muy diferentes incluyendo las clulas epiteliales de las vas respiratorias,
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fibroblastos, clulas endoteliales, macrfagos y clulas musculares lisas. La liberacin de PDGF por fibroblastos y por clulas endoteliales puede ser inducida por el T F- , TGF- , IL1 , la hipoxia y el FGF. El PDGF podra ser un actor clave del remodelado bronquial en el asma, ya que estimula la proliferacin de fibroblastos en los pulmones. El PDGF tambin estimula la quimiotaxis de los fibroblastos y la produccin de MMP-1 por la produccin de esas clulas. Esta estimulacin se incrementa mediante la combinacin de PDGF con IL-1 y T F- . La IL1- y el T F- muestran efectos inhibidores sobre la MMP-2 y la produccin de MMP-9. El PDGF, en combinacin con IL-1 y T F- , indujeron la actividad de la MMP-3 y MMP-9. Estos hallazgos sugieren que el PDGF regula diferencialmente la produccin de MMP en combinacin con citoquinas. 2.2. Nuevas perspectivas teraputicas en el asma Con base en la observacin de niveles elevados de MMPs en pacientes asmticos y teniendo en cuenta el riesgo potencial de los efectos secundarios de los Inhibidores de las Metaloproteinasas (TIMPSs) de amplio espectro que han llevado a la interrupcin de la mayora de los ensayos clnicos en el campo del cancer, la necesidad de estudiar funciones especficas que desempean las MMPs en el individuo parece evidente. Esto se llev a cabo en muchos casos utilizando ratones deficientes de MMP (MMP-2, -8, -9 y -12). Los resultados de la delecin del gen de la MMP-8 y 9 fueron discutidos anteriormente. La aplicacin de un modelo de asma alrgica en ratones MMP-2-deficiente, revel que la supresin de MMP-2 causa infiltracin de clulas inflamatorias de alvolos y una disminucin de las clulas inflamatorias obtenidos en despistaje de lavado broncoalveolar, a pesar de la acumulacin fuerte de clulas peribroncovasculares. Estas observaciones sugieren que la MMP juega un papel en el -2 aclaramiento luminal de las clulas inflamatorias. Los ratones Knock-Out MMP-12 tambin fueron investigados y los principales hallazgos fueron una disminucin, en su mayora, de las clulas inflamatorias despus de la exposicin al alrgeno, en comparacin con los ratones de tipo salvaje. El tratamiento con corticosteroides inhalados es la base del tratamiento del asma tan pronto como la enfermedad pasa de persistente leve a severa. Esta clase de medicamentos podran tener un efecto curativo en la remodelacin por reduccin de la deposicin de colgeno subepitelial, probablemente por la baja regulacin de la expresin de MMP-9 y regulacin aumentada de la expresin de TIMP-1. Esta observacin no fue, sin embargo, confirmada por otros autores. En clulas del esputo estudiadas ex vivo, los esteroides disminuyeron tanto la produccin de la MMP-9 y la produccin de TIMP-1. Las MMPs podran representar un interesante objetivo teraputico en el asma, ya que en algunos informes indican la validez de una terapia del asma enfocado en la inhibicin de MMP en modelos de animales. De hecho, la inflamacin y la hiperreactividad de las vas respiratorias demostraron ser reducida por la administracin del recombinante TIMP-2 en el rbol bronquial. El TIMP-2 parece ser eficaz en la prevencin de daos de la matriz extracelular, al menos en parte por la inhibicin de la MMP2 y la actividad proteoltica relacionada. El efecto de la doxiciclina (un inhibidor de MMP de amplio espectro) y otros inhibidores sintticos no-especficos sobre la inflamacin bronquial y la hiperreactividad de las vas respiratorias se evalu mediante el uso de un modelo murino en asma inducida por TDI. Despus de la administracin oral de doxiciclina, los ratones mostraron una disminucin de la inflamacin de las vas respiratorias, disminucin de la hiperreactividad de las vas respiratorias y una disminucin de la expresin de la MMP-9 AR m y niveles de protenas. Otros estudios in vitro sugieren que la inhibicin no especfica de las MMPs por GM6001 podran llevar a una disminucin de la hiperplasia celular, uno de los componentes de la remodelacin de las vas areas en el asma. Todos estos datos en conjunto, identifican a las MMPs como dianas teraputicas en el asma. Uno esperara que la inhibicin no-especfica de las MMPs dara lugar a algunos efectos adversos, la supresin de algunos de la familia de las MMPs agrava la inflamacin inducida por alrgenos, como consecuencia directa. Sin embargo, los pocos primeros ensayos in vitro e in vivo en modelos animales se realizaron con algunos inhibidores, conocidos por su efecto no-especfico en la actividad de MMP, y parecen controlar de forma adecuada la inflamacin inducida por alrgenos sin efectos
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secundarios evidentes. Debera ser seleccionado un inhibidor especfico de MMP, esto parece lgico, en vista que la actual literatura se dirige principalmente a la MMP-9. Tambin parece lgico evitar una inhibicin sistmica de colagenasas, responsable de la mayora de los efectos secundarios osteoarticulares. Fin parte David T.

3. LOS ROLES POTENCIALES DE LAS MMPS EN OTRAS ENFERMEDADES PULMONARES 3.1. Enfermedad pulmonar obstructiva crnica (EPOC) La incidencia de la enfermedad pulmonar obstructiva crnica (EPOC) est aumentando en todo el mundo y est clasificada como la cuarta causa ms comn de muerte en los Estados Unidos. La EPOC es causada por la exposicin a largo plazo al humo del cigarrillo, los gases txicos y partculas, lo que lleva a la limitacin del flujo de aire y la insuficiencia pulmonar. La enfermedad se caracteriza por un exceso de deposicin de matriz extracelular en las paredes bronquiales, tos crnica, produccin de esputo y la destruccin de los septos alveolares, lo que resulta en el parnquima pulmonar funcional reducido y la red uccin de las fuerzas de la inmovilizacin elstica que mantienen abiertas las vas respiratorias. Como el asma, la EPOC se caracteriza por la obstruccin de las vas de flujo y un proceso inflamatorio crnico persistente, pero estas enfermedades son muy diferentes en trminos de mecanismos celulares, la naturaleza de la inflamacin y la respuesta al tratamiento. Aproximadamente el 10% de los pacientes con EPOC tambin tiene asma y la EPOC se maneja a menudo en la prctica clnica tan mal asma sensible. El desarrollo de tejido amplia remodelacin en la EPOC provoca la destruccin de los bronquios pequeos y alvolos, lo que implica el enfisema y muchos miembros de la familia de MMP.

Las metaloproteinasas de la matriz se han sugerido desde los ltimos estudi como las os principales enzimas proteolticas que participan en la patogenia de la EPOC. El aumento en los niveles de MMP-1 y MMP-9 se ha detectado en el lavado broncoalveolar de los pacientes con enfisema. En comparacin con sujetos sanos, los pacientes con EPOC tienen un marcado incremento en expresin y actividad de MMP-2, MMP-9 y MT1-MMP en el parnquima pulmonar, y el aumento de la actividad gelatinol tica vinculados a la MMP-2 y MMP-9 en su esputo. En lquido de lavado broncoalveolar de los fumadores con enfisema, un aumento de la actividad colagenoltica, probablemente debido a elevados niveles de MMP se mide en -8, comparacin con los fumadores sin enfisema indica que el dao a la red de colgeno del pulmn es tambin una parte de la enfermedad. Cuando se estudia en vivo, los macrfagos alveolares de pacientes con enfisema expresan ms MMP y MMP-9 que los macrfagos de -1 sujetos sanos lo que sugiere que los macrfagos son la principal fuente celular de la MMP y -1 MMP-9 en la EPOC. Ya que tiene una potente actividad elastoltica, la MMP-12 se cree que juega un determinante papel en el desarrollo de la EPOC y el enfisema. Datos experimentes muestran que los ratones expuestos al humo del cigarrillo expresan ms MMP -12 AR m que los ratones no expuestos. La delecin del gen de MMP-12 en ratones protege contra el desarrollo de enfisema despus de la exposicin a largo plazo al humo del cigarrillo. Los macrfagos alveolares se consideraron ser la nica fuente de MMP -12 (macrfagos metalloelastase). Recientemente, fue demostrado que la MMP-12 tambin es expresada y es secretada en cultivos de clulas epiteliales bronquiales humanas normales. Estos hallazgos indican que el epitelio bronquial puede ser una fuente importante de la actividad elastoltico en la EPOC. En conjunto, estos elementos sugieren que la MMP -12 podra ser considerada seriamente como un blanco potencial para el tratamiento de la EPOC.
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De hecho, algunos informes establecen el posible inters enfocado en la inhibicin de MMPs en la EPOC, con base en los resultados obtenidos de modelos animales. Los Inhibbidores sinteticicos por va oral de las MMPs, mostraron disminuir la rapidez de la destruccin alveolar en modelos murino y de cerdo a la exposicin al humo de tabaco.

3.2. La fibrosis pulmonar La fibrosis pulmonar es una enfermedad grave crnica que se caracteriza por una prdida de las clulas epiteliales del pulmn, sustituido por miofibroblastos intersticial y la deposicin de protenas de matriz extracelular en el intersticio pulmonar que conduce a la remodelacin pulmonar estructural. La fibrosis pulmonar idioptica (FPI) es una enfermedad crnica, suele ser mortal, trastorno que se caracteriza por la degradacin excesiva de la matriz y la fibrosis intersticial e intraalveolar que conduce a la disnea, alteracin de la transferencia de oxgeno y el colapso alveolar. Los defectos en el epitelio alveolar y la membrana basal permite la migracin de las clulas mesenquimales del intersticio en el compartimiento de intraluminal. La fibrosis intraluminal es una de las principales caractersticas de la FPI y se asocia con el reclutamiento de clulas inflamatorias, sobre todo, los macrfagos, neutrfilos y linfocitos en las vas respiratorias que conducen a un desequilibrio entre la sntesis y la degradacin de molculas de la matriz extracelular en el entorno de pulmn.

En la fibrosis pulmonar, una diferencia temporal se observa en expresin y localizacin de MMP y TIMP (Swiderski et al, 1998;. Yaguchi et al, 1998).. En la primera etapa de esta enfermedad, la actividad gelatinol tica de MMP-9 parece predominante y probablemente contribuye a la interrupcin del epitelio alveolar membrana basal, y mejora la invasin de fibroblastos de espacios alveolares. MMP-9 y MMP-1 son liberados por infiltracin neutrfilos, macrfagos, bronquial y bronquiolar epiteliales clulas. In vivo, se demostr que la gelatinasa B (MMP-9) expresin es mayor en los cultivos de macrfagos alveolares y en lquido de lavado broncoalveolar de pacientes que sufren de La fibrosis pulmonar idioptica. In vitro, la expresin de MMP-9 en cultivadas macrfagos alveolares se reduce por un tratamiento con esteroides y frmacos inmunosupresores. En las ltimas etapas de la enfermedad, la MMP-2 (en forma latente y activa) puede convertirse en predominante. MMP-2 se localiza en las clulas estructurales como regenera las clulas epiteliales alveolares, epiteliales bronquiales y fibroblastos. En la fibrosis pulmonar, MMP-2 podra desempear un papel en la regeneracin de las clulas epiteliales alveolares. La expresin de los dos gelatinasas (MMP-2 y MMP-9) en las diferentes etapas de la fibrosis sugiere que la MMP-9 podra ser ms bien vinculados a la remodelacin del tejido inflamacin inducida, mientras que la MMP-2 pueden estar asociados con un deterioro del tejido remodelacin que lleva a la deposicin del colgeno y patolgicos la fibrosis intersticial. Adems de la implicacin de gelatinasas, MMP-7 se identifica como un objetivo potencial para la terapia de los pacientes con FPI como MMP-7 gen se detecta que se sobreexpresa el gen de microarreglos anlisis. De hecho, la deficiencia de MMP-7 (MMP-7 ratones KO) se muestra un obstculo para el grupo experimental la fibrosis pulmonar en un modelo de ratn. En lo que respecta como la acumulacin de colgeno es uno de los pilares de la fibrosis pulmonar, la regulacin a la baja de las colagenasas, que comparten la capacidad de adherirse a la hlice natural de colgeno fibrilar, tambin podra desempear un papel importante en la progresin de enfermedad. De hecho, una disminucin expresin de MMP-8 y MMP-13 se han descrito en una rata modelo de fibrosis pulmonar. De acuerdo con esta observacin, existe una sobreexpresin de TIMP que conduce a un desequilibrio entre las MMP y sus inhibidores que resulta en un microambiente desfavorable para la actividad colagenoltica. TIMP-1, TIMP-2 y TIMP-3 son producidos por las clulas diferentes y tienen distintas funciones en la regulacin de la actividad de MMP. TIMP-2 se localiza principalmente en el epitelio regenerado las clulas y en los fibroblastos. TIMP-1 se expresan principalmente en los macrfagos alveolares y clulas epiteliales clulas. Genes TIMP-2 y TIMP-3 se expresa constitutivamente mientras que la expresin de TIMP-1 gen est regulado en la fibrosis. TIMP-1 la expresin se correlaciona con las etapas de la enfermedad y puede

prevenir la progresin de la MMP-inducida extracelular degradacin de la matriz, y, en consecuencia, podrn participar en la acumulacin de matriz extracelular. La deteccin MMP podra proponerse como un factor pronstico en la fibrosis pulmonar como se describe de MMP-9. En la perspectiva del restablecimiento de proteasa / homeostasis antiproteasas, algunos enfoques diferentes se pueden plantear. En primer lugar, la terapia antiproteasa se ha propuesto en la fibrosis pulmonar con la esperanza de controlar extensin de enfermedad y tener un efecto preventivo. Corbel et al. demostr que la fibrosis pulmonar bleomycininduced fue impedido por la administracin del inhibidor de MMP-batimastat. Alternativamente, podra considerarse que una hipottica intervencin teraputica que permita actividad de MMP para controlar acumulacin de colgeno por una regulacin estricta de la actividad TIMP debe ser experimentado como un enfoque curativo de la enfermedad.

3.3. El papel de las MMP en cncer de pulmn Por su capacidad de alterar la matriz extracelular que permite la migracin celular y la liberacin de molculas bioactivas, MMP contribuyen a formacin de un microambiente complejo que promueve la transformacin maligna y la progresin del cncer. Las MMP participan en los procesos que conducen a la metstasis a sitios distantes. Muchos datos experimentales estn disponibles acerca expresin de MMP diferentes en el cncer y podemos citar aqu slo algunos de ellos. La MMP-9 y la TIMP-1 son elevadas en el suero de pacientes con cncer de pulmn de clulas pequeas (CPCP) y de clulas no pequeas de cncer de pulmn ( SCLC), en comparacin con sujetos sanos, la modificacin de relacin fisiolgica natural de MMP-9 y TIMP -1. En el CP M, la MMP-1 y gelatinasas, contribuyen a la invasin tumoral y metstasis y se han propuesto como factores pronsticos fiables. La sobreexpresin de la MMP-1 se asocia con un pronstico especialmente pobre en el carcinoma de pulmn como se describe para otros tipos de cncer. La destruccin de la membrana basal (colgeno tipo IV) o la expresin de MMP-2 se correlacionaron con el pronstico de los adenocarcinomas de pulmn invasiva. Los niveles elevados de MT1-MMP tambin estn vinculados a un mal pronstico. Expresin de MMP tambin puede variar en funcin de los subtipos de cncer. MMP-11, MMP-13, MMP-14, TIMP2 y TIMP-3 son en realidad ms frecuentemente expresadas de MMP-1 y MMP-9 y el papel desempeado por algunas de estas enzimas parece ser diferente en el CEP y en SCLC. Fuerte expresin de MMP-2 en los fibroblastos del estroma fue ms frecuente en el carcinoma de clulas escamosas que en el adenocarcinoma, dos diferentes tipos de CP M. MMP-2 podra desempear un papel en la angiognesis de tumores relacionados ya que los tumores con una fuerte expresin de MMP-2 en los fibroblastos del estroma mostr una densidad significativamente mayor microvasos intratumorales. Por otra parte, la sobreexpresin conjunta de VEGF y MMP-2 se asocia con un mal pronstico. Adems, el pronstico postoperatorio se relacion con estroma MMP-2. Expresin de MMP-2 por los fibroblastos del estroma del tumor por lo tanto podra considerarse como un factor de buen pronstico asociado con la angiognesis y la supervivencia en SCLC. Los niveles elevados de plasma MMP-9 se observaron en pacientes con CP M, pero el papel de la MMP-9 como un marcador del cncer de pulmn sigue siendo poco claro. En el CP M, la MMP-9 parece jugar un papel en el proceso que condujo al desarrollo de metstasis. Diseminacin metastsica se vio obstaculizada en ratones MMP-9-deficientes en comparacin con los ratones de control de tipo salvaje en un modelo de ratn de cncer de difusin. La expresin de TIMP (en particular, TIMP-1 y TIMP-2) se relacion con la etapa del cncer y sus niveles se han propuesto para ser utilizados como marcadores de pronstico de la progresin de adenocarcinoma de pulmn metastsico.
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3.4. Antiproteasa la terapia en el cncer La primera generacin de inhibidores de MMP, que se utiliza en el tratamiento de cncer , no tuvieron xito y fueron la mayor parte de los ensayos clnicos abortados en etapas tempranas. Esto es probablemente debido a compleja funcin de MMP y TIMP, estar involucrado en varios bucles de interaccin recproca en condiciones fisiolgicas y patol gicas (Folgueras y cols., 2004) y la toxicidad sistmica de Inhibicin de la MMP. Diferentes inhibidores de amplio espectro como MMP Batimastat (BB94) Prinomastat o no en la fase I y III del ensayos clnicos, respectivamente, y el desarrollo de varios otros Inhibidores de MMP se detuvo debido a su toxicidad sistmica y escasa eficacia. Como sntesis de MMP Los inhibidores son bastante txicos, se podra abordar el uso de TIMP. TIMP utilizados como inhibidores de MMP en enfermedades diferentes revel algunos efectos paradjicos. Por ejemplo, TIMP-4 regula al alza anti-apoptticos de la protena Bcl-X, estimulando as la gnesis tumoral mamaria. TIMP (e inhibidores sintticos) pueden tambin bloquear la actividad de MMP que no son necesariamente sobreexpresad os en el tumor o el juego de proteccin papeles contra el cncer, tales como MMP-8, por ejemplo. Estas observaciones subrayan la necesidad de desarrollar nuevas estrategias de inhibicin de MMP. Diferentes estrategias pueden ser investigadas. En primer lugar, la generacin de nuevos inhibidores de la sntesis de MMP que inhiben las MMPs individuales que permiten un control de determinadas procesos relacionados con la progresin del tumor. Sin embargo, esta enfoque sigue siendo hipottica, ya que comparten muchas MMP estructurales caractersticas con un sitio activo muy conservado entre los miembros de esta clase de proteasas. Otro enfoque sera una seleccin de beneficiarios, que permite la entrega inhibidor de MMP en sitio del tumor por lo tanto permitiendo el uso de altas concentraciones teraputicas locales y un disminucin de la toxicidad sistmica. Para el tratamiento de cncer pulmn, la administracin de aerosoles tambin podra ser considerado, ya que aumentara el ndice teraputico y permitir una mayor concentracin en rgano diana. Al mejor de nuestro conocimiento, no hay ensayos clnicos se han realizado hasta la fecha con esta estrategia.

4. Conclusin En conclusin, las MMP y sus inhibidores (TIMP) desempean mltiples funciones en los procesos fisiolgicos y de interactuar con muchos otros mediadores que regulan los procesos inflamatorios, el comportamiento celular y la angiognesis. Estos mediadores estn implicados en muchos lazos intrincados de las interacciones recprocas de representacin comprensin del papel de las MMP en los procesos de difcil regulacin. En muchas enfermedades, las MMP estn sobreexpresados o hipersecrecion que conduce a la desregulacin de los procesos homeostticos fisiolgicos y degradacin de la matriz extracelular y la desorganizacin.