1 Introduo e Objetivos

Hidrocarbonetos policclicos aromticos (HPAs) so componentes do petrleo, formam-se na combusto incompleta de matria orgnica e podem tambm, ter origem biognica. Destacam-se por contriburem para a permanncia do leo no meio ambiente e por sua toxicidade (Meador et al.,1995; Varanasi et al., 1986; Neff, 1985). Vrios membros desta classe de contaminantes ambientais tm sido identificados como potenciais agentes carcinognicos e suas anlises tm sido incorporadas em programas de agncias ambientais (Stroomberg et al., 1999). O impacto ambiental gerado pelos diversos poluentes lanados na natureza tem resultado na necessidade de estudo sobre o efeito desses compostos na biota. Os hidrocarbonetos policclicos aromticos apresentam alta lipofilicidade, so absorvidos pelos seres vivos, e sua anlise pode revelar se provm de introduo direta de petrleo no ambiente (poluio, derramamentos) ou de processos de combusto (uso do petrleo como combustvel). Os HPAs so metabolizados pelos rgos internos dos seres vivos, transformados em compostos detectveis que, encontrados nos organismos, podem ser utilizados como biomarcadores da exposio ao petrleo e seus derivados. O comportamento do leo, no ambiente aqutico, aps um derrame depende de vrios fatores fsico-qumicos e biolgicos que incluem evaporao, dissoluo, biodegradao, fotooxidao e interao entre leo e sedimento. A combinao destes processos, denominada intemperismo, reduz a disponibilidade de HPAs em sedimento e gua e altera a composio qumica do leo derramado. As mudanas na composio qumica do leo tm profundos efeitos sobre sua toxicidade e sobre o impacto biolgico na regio afetada (Neff, 1979; Wang et al., 1999). As avaliaes convencionais de impactos ambientais envolvem as medidas das concentraes dos contaminantes em guas e sedimentos. Os HPAs apresentam baixa solubilidade e suas concentraes em gua so muito baixas (Watson et al., 1998). Conseqentemente, os compostos nesta matriz so difceis de serem detectados, necessitando de grande quantidade de amostras na execuo de suas anlises. Anlises de sedimento so igualmente laboriosas e consomem tempo em sua execuo, envolvendo etapas de extrao e clean up. Medidas

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baseadas nas anlises de gua e sedimento produzem poucas informaes sobre a ao e efeitos potenciais dos contaminantes sobre a biota local. Para avaliar a exposio a HPAs, nos organismos aquticos, com maior exatido, pertinente detectar estes compostos em tecidos ou fluidos biolgicos de organismos aquticos (Krahn et al., 1993; Fillmann et al., 2002; Watson et al., 2004). Compartimentos biolgicos, tais como fgado, hepatopncreas, msculos e guelras e fludos biolgicos (sangue, hemolinfa, bile e urina) tm sido analisados previamente para determinar as concentraes e tipos de HPAs que so assimilados pela biota. O desenvolvimento de tcnicas rpidas, buscando maior exatido e de custo mais baixo para medidas de metablitos de HPAs (e outros contaminantes) em vrias matrizes da biota aqutica teve um aumento relevante nos ltimos anos. Elas produzem informaes teis sobre a exposio e os efeitos dos contaminantes sobre as populaes in situ (Beyer et al., 1996; Wells et al.; 2001). Estas informaes podem ser usadas como uma varredura inicial para avaliar o estado de contaminao do ecossistema e potencial risco daqueles que consomem animais contaminados com HPAs. O manguezal representa um ecossistema costeiro, de transio entre os ambientes terrestres e marinhos, sujeito ao regime de mars. Ocorre em regies costeiras abrigadas e apresenta condies propcias para a alimentao, proteo e reproduo de muitas espcies de animais, sendo considerado importante transformador de nutrientes em matria orgnica e gerador de bens e servios. So reas de reproduo de muitas espcies terrestres e aquticas, sendo considerados verdadeiros berrios marinhos (Schaeffer-Novelli, 1995). Assim, muitas espcies passam toda, ou grande parte de suas vidas, no manguezal, utilizando esses diversos ambientes para alimentao, reproduo, desova, crescimento e proteo contra predadores. A tpica vegetao desempenha papel importante como "fixadora de terras", evitando o assoreamento de extensas reas litorneas, protegendo tambm as margens dos rios, lagoas e zonas costeiras da ao das ondas do mar, que poderiam desencadear processos erosivos. A reao do manguezal a um derramamento de leo depende da quantidade derramada, do tipo de leo, de sua toxicidade e do tempo de permanncia do leo no ambiente. O leo recobre as plantas e impede as trocas gasosas, asfixiando o bosque do mangue. H constituintes to txicos no petrleo que eliminam os micrbios do solo, essenciais para o ciclo de nutrientes dos manguezais. O
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petrleo se degrada muito lentamente sob o solo, em especial o dos mangues, e pode permanecer a por anos (Scherrer & Miller, 1989). Pesquisas indicam que a restaurao de um bosque atingido por leo pode levar de 10 a 50 anos (Getter et
al., 1984). Embora no se saiba bem como, o leo altera a ciclagem de nutrientes,

a fotossntese e a produo do manguezal. Isso afeta outros ambientes adjacentes, que dependem da fertilidade dos manguezais. Alm disto, as caractersticas e a dinmica de plantas jovens ou recm germinadas so afetadas, e so estas plantas novas que determinam o potencial de regenerao do ecossistema frente perturbao e tensores, como o prprio leo. O conceito de biomarcador foi desenvolvido para aperfeioar a estimativa de exposio e permitir uma avaliao mais exata dos impactos causada por exposies crnicas ou agudas aos poluentes (Peakall et al., 1992; Jrgensen et al., 1998). Os biomarcadores podem ser definidos como expresses biolgicas envolvendo variaes bioqumicas, histolgicas, fisiolgicas e comportamentais, que se d em resposta presena de substncias qumicas no ambiente (Depledge
et al., 1993). Os biomarcadores, portanto, podem desempenhar um importante

papel em avaliaes ecolgicas de risco. O monitoramento de ambientes baseado em biomarcadores requer de incio uma comparao entre as respostas obtidas nos locais alterados e aquelas obtidas nos locais onde no haja ocorrncia das fontes poluentes (Mc Carthy & Shugart, 1990; Walker et al., 1997). A tendncia atual do biomonitoramento alia a quantificao dos poluentes, por exemplo, dos HPAs nos tecidos animais, aplicao de tcnicas sensveis, baseadas nestes biomarcadores, para a avaliao dos efeitos dos poluentes nos organismos aquticos. A Baa de Guanabara um ambiente estuarino altamente urbanizado e industrializado. Vrios estudos reportam sua contaminao por poluentes orgnicos e inorgnicos (Rebello et al., 1986; JICA, 1994; Lima et al., 1996). Existem inmeras indstrias em seu entorno, portos comerciais, terminais marinhos de petrleo e uma das maiores refinarias de petrleo do Brasil, a REDUC (JICA, 1994). Alm da contaminao crnica por produtos petrognicos, a baa ainda sofre, ocasionalmente, efeitos provocados por derramamentos acidentais de leo, como o ocorrido em 2000, quando um vazamento acidental em uma das tubulaes de transferncia da Reduc, resultou no lanamento de 1300m3 de leo combustvel martimo do tipo MF380. Apesar deste quadro, ainda se sabe

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pouco sobre os efeitos toxicolgicos dos derramamentos e das liberaes crnicas de leo sobre os ecossistemas. Estudos recentes em amostras de sedimento (Meniconi et al., 2002) e em mexilhes Perna perna confirmam a contaminao da Baa de Guanabara por hidrocarbonetos, apresentando compostos altamente biodegradados de origem pirogncia e petrognica, tanto nas fraes aromticas, quanto nas alifticas (Azevedo et al., 2004; Francioni et al., 2005). Caranguejos so empregados em avaliaes de impactos ambientais, atravs do uso de tcnicas analticas e biolgicas variadas. As espcies presentes nos ambientes costeiros so osmorreguladoras e, portanto, capazes de tolerar grandes variaes de salinidade, permitindo o estudo em ambientes estuarinos (Bamber e Depledge, 1997). Esta caracterstica, aliada ao conhecimento dos processos fisiolgicos e da metabolizao de micropoluentes, tais como a dos HPAs (Miller e Holliday, 1982; Eickhoff e Law, 1995; Sundt e Goksoyr, 1998; Watson et al., 1998; Fillmann et al., 2002), fazem com que estes animais sejam considerados bons indicadores de contaminao em reas estuarinas. O gnero Carcinus um dos mais estudados, havendo diversos trabalhos com aplicao ambiental (Fossi et al., 2000). Neste estudo utilizaram-se caranguejos Ucides cordatus, como organismos bioindicadores, ou seja, organismos que sejam capazes de indicar a qualidade ambiental do ecossistema em que vivem. Esta espcie se mostra adequada a isso, uma vez que acumulam substncias txicas, como os HPAs em seu hepatopncreas. Os crustceos tm o hbito de se enterrarem e assim, levam o leo para debaixo do solo, alm de se exporem aos poluentes, o que resulta em risco para a alimentao humana. O caranguejo-u um dos maiores dos manguezais brasileiro e alcana, com as patas distendidas, 30 centmetros de envergadura. Sua comercializao muito comum, principalmente no litoral. A distribuio geogrfica estende-se, no Atlntico Ocidental, da Flrida at o Brasil, alm de ser uma espcie amplamente distribuda na costa brasileira e ter importncia econmica (Hattori e Pinheiro, 2003; Melo, 1996).

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Diante do quadro apresentado os objetivos, deste estudo, foram:

Geral: Investigar o caranguejo Ucides cordatus como biomonitor para contaminao por leo em manguezais, atravs de observaes na urina e hepatopncreas.

Especficos:

1. Desenvolver uma metodologia para estudar a expresso da concentrao de metablitos de HPAs em urina de caranguejos;

2. Adaptar uma metodologia analtica para avaliao de HPAs em hepatopncreas de caranguejos;

3. Usar caranguejos e sedimento de manguezais da Baa de Guanabara para investigar se a expresso da concentrao de HPAs no organismo reflete o ambiente a que esto expostos;

4. Validar o uso de biomarcadores de exposio (metablitos de HPAs em urina) e genotxicos (microncleos) no monitoramento da contaminao por leo em manguezais usando caranguejos Ucides cordatus.

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