rea: caracterizacin gentica Caracterizacin gentica atreves de microsatellites de la raza bovina Mallorquina para su conservacin Utilizo de marcadores moleculares

por el estudio raza bovina Mallorquina Genetic characterization of Mallorquina cattle breed through microsatellites marker Landi V. 1, Martnez A. M. 1, Domnguez M. M. 1, Pons A. 2, Delgado J. V. 1. 1 Departamento de Gentica, Universidad de Crdoba. Edificio Gregor Mendel. Campus de Rabanales. Crdoba. Espaa. E-mail: landivincenzo@yahoo.it 2 Instituto de Biologia Animal de Baleares. Sa Resumen Los expertos en etnologa zootcnica dicen que este tipo de bovino deriva del bos primigenius, que lleg en el Mediterrneo occidental desde Egipto, esparciendo-posteriormente por todo el norte de frica y sur de la pennsula Ibrica gracias al comercio martimo entre los diferentes pases de la rea del Mediterraneo. Se ha realizado un estudio a travez de marcadores moleculares microsatellites con objeto de obtener informacin sobre la diversidad gentica de la Vaca Mallorquina y sobre sus posicin en el panorama bovino espaol. Palabras claves: differenciacion genetica, distancia, marcadores moleculares Abstract: Experts in zoo - technical ethnology say that this cattle breed derived from bos primigenius, which arrived in the western Mediterranean from Egypt, then by-spreading across northern Africa and south of the Iberian peninsula through maritime trade between the countries of the Mediterranean area. A study has been made through Microsatellites molecular to obtain information on genetic diversity of the Vaca Mallorquina, second values of genetic distance between this breed and other Spanish ones to frame the Mallorquina cow within Spanish cattle population. key word: genetic differenciation, distance, molecular markers Introduccion: Los expertos en etnologa zootcnica dicen que este tipo de bovino deriva del bos primigenius, que lleg en el Mediterrneo occidental desde Egipto, esparciendo-posteriormente por todo el norte de frica y sur de la pennsula Ibrica gracias al comercio martimo entre los diferentes pases de la rea del Mediterraneo, dentro del cual las islas Baleares eran una plataforma logstica ideal. s una raza muy rstica, de marcado tipo ambiental, fuerte, buena reproductora y con gran instinto maternal. Se ha realizado un estudio a travez de marcadores moleculares microsatellites y con diversos tratamientos estadsticos con objeto, en primer lugar, de obtener informacin sobre la diversidad gentica de la vaca Mallorquina, secundo los valores de distancia gentica entre esta raza y otras razas bovinas espaolas para encuadrar la vaca Mallorquina dentro del panorama bovino espaol. Se ha realizado un estudio a travez de marcadores moleculares microsatellites y con diversos tratamientos estadsticos con objeto de obtener informacin sobre la diversidad gentica de la Vaca Mallorquina., secundo los valores de distancia gentica entre esta raza y otras razas bovinas espaolas para encuadrar la vaca Mallorquina dentro del panorama bovino espaol. Material y Mtodos: Se han utilizado muestras de ADN obtenido de sangre de 58 individuos procedentes de varias ganaderas. Se han amplificado 28 microsatlites mediante la tcnica de PCR seguida de una electroforesis en un secuenciador automtico ABI 377XL. La tipificacin allica se ha realizado mediante los programas Genotyper 3.7. Se han calculado las heterocigosidades (observada y esperada) mediante el programa informtico Genetix v. 4.02 (http://www.genetix.univ-montp2.fr/genetix/.htm). Se ha realizado una prueba de equilibrio Hardy-Weinberg (HW) mediante el programa Genepop v. 4.(http://genepop.curtin.edu.au/). Se ha calculado una matriz de

distancia gentica DA (Nei, 1983) con el programa informtico Populations utilizandola para el calculo de un Neighbor Network atravez del programa Splitstree v. 4.1 (http://www.Splitstree.org). Se ha realizado un anlisis de la subestructura de la poblacin bovina Mallorquina utilizando un algoritmo bayesiano del programa de anlisis Structure v 2.2.3 . Diez differentes recorridos se han llevado a cabo con un valor de 60 5 iteraciones y 105 burning. Los diferentes recorridos se han permutado con el programa Clump v. 1.1 y representado grficamente con el programa DISTRUCT 1.1 (http://rosenberglab.bioinformatics.med.umich.edu) Resultados y discussin Todos los microsatlites utilizados han resultado polimrficos, encontrndose un mnimo de 2 alelos en los microsatlites INRA32 e ILSTS11 y un mximo de 9 alelos para el marcador TGLA227. La heterocigosidad esperada ms alta se encuentra para el marcador ILSTS6 con un valor de 0,738 y la ms baja para el INRA32 con un valor de 0,017. Los valores de Heterocigosidad observada oscilan entre un mximo de 0,804 para el marcador ETH3 y un mnimo de 0,017 para el INRA32. El nmero medio de alelos en la vaca Mallorquina indica en cierta manera la variabilidad gentica de la poblacin. Este valor (4,57) es menor al encontrado en otras poblaciones bovinas espaolas como por ejemplo la vaca Mostrenca (Martnez et al. 2005a; Martnez et al. 2005b) o la vaca Palmera e incluso en poblaciones tan amenazadas como la Negra Andaluza (Martnez et al. 2008). En total 4 marcadores se desvan significativamente del equilibrio Hardy-Weinberg: TGLA122, TGLA126, Hel9 y INRA35.En la figura 1 puede observarse el network donde puede observarse la gran distancia que existe entre la vaca Mallorquina y el resto de las poblaciones. Esto puede ser debido por una parte al efecto de la deriva gentica, acentuado por el hecho de que la raza habita en una isla y por otra parte a la consanguinidad de la raza.Se ha realizado un anlisis de la estructura de la poblacin con el programa Structure v. 2.1 (Pritchard et al. 2000). Se ha utilizado un algoritmo bayesiano del programa que calcula la distribucin a posteriori de cada coeficiente de mezcla de cada individuo (q). La media de esta distribucin representa una estimacin de la proporcin que el genoma de un individuo tiene de las poblaciones parentales. En la figura 2 se presenta grficamente la estructura poblacional utilizando el programa informtico Structure v 2.2.3 donde se puede ver cada individuo como una barra vertical y cada color representa la proporcin del cluster correspondiente (raza en este caso). En este caso se mostra la agrupacion en 3 cluster que claramente agrupan las razas peninsulares, canarias y la Mallorquina (Griz oscuro; 98% de asignacion corecta). La raza bovina Mallorquina es una poblacin homognea no mostrando subestructura ni mezcla con el resto de la poblaciones estudiadas.

Conclusiones Como resultado de este trabajo puede sacarse la conclusin general de que se trata de una raza bovina con una baja diversidad gentica. Este resultado constata el hecho de que la raza bovina Mallorquina es una de las ms profundamente amenazadas del territorio espaol debido a sus bajos censos y a su ubicacin en un contexto agrario desfavorable para su conservacin. Es urgente tomar las medidas oportunas para la conservacin y gestin de este recurso gentico. Es una poblacin homognea genticamente, es decir, los individuos que componen la poblacin son genticamente muy semejantes entre s.

Figura 1: Network costruito con la distancia Da (Nei, 1983) representante las razas estudiadas. Figure 2: Network built with DA (Nei, 1983) genetic distance representing studied breeds.

Literadura citada Martnez A.M., J. Caldern, E. Camacho, C. Rico, J.L. Vega-Pla & Delgado J.V. (2005a) Caracterizacin gentica de la raza bovina mostrenca con microsatlites. Archivos de Zootecnia 54, 357-61. Martnez M.A., Camacho M.E., Pelez,, Espaa F., Vallecillo A.F. & Delgado Bermejo J.V. (2008) Programa de conservacin y caracterizacin gentica de la raza bovina Negra Andaluza. In: III Congreso Nacional de Carne de Vacuno, vila. Martnez R.D., Fernndez E.N., Brccoli A.M., Martnez A. & Delgado J.V. (2005b) Variabilidad gentica en el ganado bovino criollo Argentino de origen Patagnico. Archivos de zootecnia 54, 415-21. Pritchard J.K., Stephens M. & Donnelly P. (2000) Inference of population structure using moltilocus genotype data. Genetics 155, 945-9.