TERCER CORTE GENETICA CLASE I (1H) Vamos a entender que una celulita tiene bsicamente unas estructuras, se debe

notar lo que se llaman las macromolculas q dentro funcionan para desempear una de las caractersticas ms importantes de los seres vivos que se llama el metabolismo. Ustedes ya vieron que dentro de la disposicin de lo que es metabolismo existen bsicamente dos grandes grupos que es que los alimentos ingresan a nuestro nosotros mediante un mecanismo llamado de heterotropa porque nosotros no somos fabricantes de los productos iniciales que vamos a degradar y por lo tanto hay que ingerirlos por la va externa; pero tambin debieron haber visto que en algunos casos uno puede no necesariamente surtirse de lo que viene de afuera, sino eventualmente puede producir molculas de manera interna, entonces vamos a mirar que cada uno de los grupos tiene un comportamiento diferente. Despus de que ingresan a nosotros, necesariamente por haber venido de una va exgena, el primero de los dos mecanismos metablicos que se da es el del catabolismo, que significara la degradacin de esos alimentos para poder hacer el proceso llamado especficamente de recoger la energa que genera la degradacin de un analito y finalmente esa energa

acoplarla de alguna manera a una molcula que me garantice tener una reserva para cuando la necesite. Cmo se llama esa molcula que en general hace ese proceso de guardar energa en nuestro organismo? Ojo con lo que dije yo: se consume un alimento, ste en el proceso digestivo se degrada, ingresa en el organismo como una molcula ms pequea y al ingresar como una molcula ms pequea, finalmente es dividida y separada hasta llevarla a su mnima expresin; su mnima expresin se llama: agua + CO2. En ese proceso de degradacin que nosotros llamamos catabolismo se genera energa, porque los procesos catablicos o de disminucin en el tamao de una molcula siempre son exergnicos, recuerdan? Y entonces quien se queda con esa energa para luego usarla, hay varias molculas: la primera y ms importante: el ATP, as mismo algunas molculas que se consideran como coenzimas como por ejemplo el NAD y el FAD. Entonces para que ustedes tengan una idea de los libros ms importantes de consulta en este captulo: para mi la q es mas completa es la Lodish, pues explica al detalle; de los que mejor permiten revisar los temas: la Mathews, muy buena es la Strayer, pero la ultima edicin no es tan reciente, la McKee tambinen fin todos los libros q traten el tema se pueden utilizar

Bueno estamos tratando de abstraernos de aqu, estamos es un organismo completo y vamos a revisar molecularmente que es lo q hay ac, dentro de lo que hay ac ustedes ya han avanzado dos captulos grandes y yo me voy a concentrar en uno que hace referencia a las molculas que trabajan aqu en el ncleo y que trabajan en algunos organelos como por ejemplo las mitocondrias para lo que hay all dentro pueda fluir y desempearse en otro ambiente que tiene la clula que se llama el citoplasma. Ustedes debieron haber visto ya esto, que nosotros finalmente unas molculas que yo les llamara como los monmeros, que cada uno de ellos representa un grupo general de compuestos que estn divididos en cuatro grandes grupos bsicamente por la composicin que tienen, es decir, porque tiene unas caractersticas qumicas que permiten agruparlos dentro de un determinado campo. Especficamente los aminocidos son las bases para formar unos polmeros que se llaman las protenas cuyas caractersticas tienen que ver ms con una respuesta antignica, cuando son reconocidos como molculas extraas por otro tipo de organismos, tambin funcionan recuerden, la mayora de las enzimas estn en este grupo como molculas que participan en el proceso de permitir el acople de una reaccin para que se realice de una manera ms rpida, y muchas otras funciones que ustedes ya debieron ver.

La glucosa, no porque sea el nico sino porque es el representante mas importante porque es el que siempre escoge una clula y es fundamentalmente es la que mas se utiliza de este grupo de CH, cuyas funciones son muchas pero tal vez, la mas importante es la de servir de fuente de energa, pues es la que primero se va a degradar si esta disponible. Y vieron el tercer grupo que tiene una heterogeneidad tan grande que en realidad no es que se parezcan qumicamente para nada pero cumplen una funcin que s es similar en ellos, lo cual ha permitido juntarlos en un solo grupo, diciendo que los lpidos seran aquellos compuestos que bsicamente por sus caractersticas qumicas no son solubles en agua sino que son solubles en solventes orgnicos; y como ustedes recuerdan como nosotros estamos todos baados en agua , porque la composicin de la sangre en su mayor proporcin es agua pues habr unas molculas que por ser afines a ellas ms fcilmente se transportan en ese medio, que va a permitir el acceso a todas las clulas y en cambio a stas , el trabajo les cuesta un poquito porque por ser insolubles pues tienen que revestirse de algunas estructuras que les permitan facilitar ese desplazamiento, pero a su vez tiene una ventaja y es que esta composicin les da flexibilidad y por esa razn es que nosotros tenemos en esa membrana celular nuestra, esa capa bilipdica que permite que cree un aislamiento , pero no tan extremadamente firme como para que no pueda

haber intercambio. Eso lo vamos a ver cuando hablemos de la traduccin de seales. Ahora vamos a centrarnos aqu en este cuarto grupo de biomolculas que se llaman los nucletidos, esa es la estructura monomrica para formar unos polmeros de millones de unidades que se conocen con el nombre de cidos nucleicos y los vamos a trabajar en este captulo. Bueno y aqu hay algunos de los componentes que ustedes saben pueden trabajar para finalmente tener esta funciones, nosotros sabemos que un aminocido inicialmente se renen unas unidades y forman un pptido y que despus muchos de esos aminocidos forman una estructura mas larga que se pliega y adquiere conformaciones secundarias, terciarias y a veces cuaternarias, formamos protenas oligomricas y cumplimos funciones como stas, pueden ser receptores en la membrana, pueden transportar molcula en sangre como la albmina, pueden servir de canales inicos de comunicacin que a veces estn cerrados o estn abiertos, podemos tener monosacridos que formen molculas de alta energa, otra que no tanto, cuando se unen en dos y en general vienen as en los alimentos, vamos a tener los disacridos y de acuerdo con las ramificaciones y las estructuras que formemos vamos tener los distintos grupos de polisacridos. Y con respecto a las molculas relacionadas con los lpidos, recuerden que

siempre estarn encapsuladas en una estructura proteica interna que favorezca el proceso de transduccin de seales. Y aqu vamos a ver un poquito de esto combinado al final de este curso, porque vamos a mirar que las seales de las hormonas o la conversin de algunos de los lpidos en unidades como las prostaglandinas o como las lipoquinas van a permitir la sealizacin para que la clula lleve mensajes al exterior y permita que haya una respuesta desde el punto de vista metablico que genere cambios en la estructura cuando es necesario por algn motivo dentro de la clula. Bueno y entonces nos ubicamos en esto que es el resumen, qu es lo que tienen ustedes que salir sabiendo de aqu cuando termine este curso, Cmo se interrelacionen la molculas en lo que se llama la interrelacin del metabolismo; fjense que nosotros tenemos unos nutrientes que van a ser transportados al interior nuestro, mediante el proceso de digestin, despus de este proceso pueden entrar e ingresan generalmente en el intestino delgado, exactamente en la primera porcin, el duodeno es el que hace alrededor del 85% del proceso de absorcin de los alimentos y all van a finalmente llegar al sistema porta que desencadena en el hgado, entonces a partir de all vamos a empezar el proceso metablico; son muchas las cosas que podemos hacer,

si no tenemos energa pues utilizar las molculas que llegaron, si tenemos energa pero estamos comiendo en exceso, ir a guardarlo a los puntos de reserva, y dependiendo de la composicin habr unos que se pueden guardar y otros que no, ejemplo una cosa que hay que tener muy muy clara es que las protenas no tienen capacidad de almacenamiento, solo tenemos aquellas que realmente podemos usar, mientras cmo es el mecanismo de almacenamiento para los CH? finito o infinito?... finito!!? Hasta cuando? (habla una estudiante, pero no se oye bien) , la profe responde: Pero yo podra tener una inflamacin y absorber ms liquido y en ese orden de ideas tendra mayor capacidad de almacenar CH; siendo verdad eso que usted est diciendo, de todas maneras existe un lmite, en el interior de la clula que no es dependiente del agua, cul es? Cules son los puntos de reserva de los CH? Tenemos dos puntos: Hgado y Musculo, qu pasa cuando saturamos los puntos de depsito en esos dos lugares? Para llegar a lo que usted dice, hace rato que hemos pasado la capacidad de almacenamiento, porque tenemos un numero finito de hepatocitos y de miocitos, entonces la reserva de los CH es limitada bsicamente porque como va a ser dentro de unas clulas, y solo unas clulas especficas, cuando el numero de esas clulas acabe, ese nmero ya no puede seguir adelante en el proceso de almacenamiento, por eso una de las caractersticas

que se da cuando el paciente es obeso, es que en realidad la masa del hgado se crece, y se crece porque se da una hipertrofia del hgado para guardar mayor cantidad de glucgeno que nosotros tendramos que formar en al medida en que mucha mas cantidad de CH estemos ingiriendo. Y entonces se lleg al lmite ah, y el resto de CH, ya no son utilizables? Nosotros con los CH podemos formar colesterol y cidos grasos? Todos estn de acuerdo? Como yo no estoy de acuerdo, por favor le hechan una revisadita a eso, ojo: podemos formar colesterol y cidos grasos a partir de los Ch que nos sobren?? Esa es la siguiente pregunta. Esa respuesta de que s, es parcialmente verdadera, entonces algo de ah es cierto y al final del cuento lo que termina resultando es que parte de la glucosa, cuando se acaba de saturar los sistemas de almacenamiento, puede convertirse en otro tipo de molcula y esa molcula si no tiene un finito en su capacidad de almacenamiento; entonces cuando hay esa conversin lo que vamos a tener en realidad es un incremento en la formacin de adipocitos y vamos a obtener como resultado de ellos un incremento no hacia arriba sino hacia los lados, de la masa corporal, y ese incremento qu lmite tiene? No tiene lmite de almacenamiento.

Si nosotros llegamos aqu, si ustedes miran nosotros en el metabolismo vamos a poder apropiarnos de muchos de los componentes que hay dentro de las clulas, y entonces los aminocidos los CH y los lpidos van a llegar por esa fuente llamada nutrientes, qu particularidad vamos a tener aqu? Recuerden que habrn algunos aminocidos que se llamarn esenciales porque solo pueden ser provedos por esa va exgena mientras que habrn otros que nosotros pudisemos entrar a formar, lgicamente a partir de al misma base de lo que ingerimos. Pero en este grupo no estn ubicados los nucletidos que sera el cuarto grupo, porque vamos a ver que de lo que nosotros consumimos, estos tres grupos son provistos all y son utilizados por la clula, pero estos nucletidos que ingresan, no son usados por nuestra clula, entonces claro que vienen porque como hago para separarle a un alimento si viene n una clula los cidos nucleicos que vienen en el ncleo (q redundancia) es difcil por no decir que imposible a no ser que tuviramos una dieta fraccionada de algo que viene artificialmente, pero si son los alimentos naturales ese cuarto tipo de biomolculas viene en el alimento pero vamos a ver que no es aprovechable. Entonces aqu tienen que todos estos componentes van a permitir formar, por ejemplo los aminocidos nuevas protenas, ellas van a estar formando parte estructural de clulas, tejidos y de rganos , pero tambin pueden trabajar en funciones de regulacin y

de sealizacin, hay muchas de las hormonas que son de naturaleza proteica ustedes saben, pero tambin podran estar trabajando a partir de lo que vamos a ver nosotros q son los cidos nucleicos, permitiendo determinar la estructura de las protenas o tambin podran trabajar formando parte de las enzimas, haciendo parte de los factores de coagulacin, o uno de los grupos que es el de las gamma globulinas, funciona como protena inmunognica porque son las que permiten responder a las sustancias extraas que llegan al organismo, y tambin podramos tener combinaciones de protenas con otros componentes, a eso es lo que se le llama conjugados o protenas complejas, pueden haber glucoproteinas, lipoprotenas y as sucesivamente protenas combinadas con otros componentes. Dnde vieron ejemplos de glucoprotenas que se utilizan en una clula? Por ejemplo el glucocliz, que es la capita que solo las clulas animales tienen en la que se expresan ms componentes antignicos, es una combinacin de una protena de membrana que tiene una parte vital componentes o radicales de tipo carbohidrato que pueden ir desde monosacridos hasta oligosacridos bien grandes y esa complejidad determina la conformacin del cido silico, del neuroamnico y de muchos otros que son en realidad una combinacion de protenas con CH.

Y dnde vieron ejemplos de lipoprotenas? En todas las formas de transporte de los lpidos porque bsicamente por ser insolubles la manera como ellos se van a transportar para llegar a su sitio de trabajo, es a partir de unidades externa proteicas que recogen o que permiten guardar la porcin lipidica en su interior y de esa manera facilitar el transporte. Entonces aqui ven como los hidratos de carbono y los lpidos van a estar conjugados para cumplir una funcin que es el papel energtico teniendo presente que quien de los dos tiene mejor funcin energtica, los lpidos, pero porque no son entonces los que mas usamos? En parte por la solubilidad, y adems por las caractersticas de los sistemas enzimticos que se desatan en el interior de la clula y que el control hace que se inactiven otras formas distintas que tienen como primera opcin la degradacin de los monosacridos, y aqu ven ustedes tambin que a partir de los lpidos podemos generar tambin molculas de sealizacin, ejemplo las hormonas derivadas de los lpidos, para ser ms exacta del colesterol que son todas las hormonas esteroideas y esas entonces tendran una naturaleza lipdica, pero tambin mencioan aqu que por ejemplo, vamos a ver como segundos mensajeros el caso del inositol trifosfato, que realmente l no seria el lpido sino su segundo componente que seria el diailglicerol, que cuando se parte de la unidad interna, pues lo que

hace es estimular la produccin de calcio y finalmente inducir a la clula a producir una respuesta diferente. Y ustedes saben que tambin lo lpidos sencillos unidos al fosfato van a formar los llamados fosfolpidos que va estar implicados aqu en la formacin de la estructura de membrana que es la capa bilpidica y habrn otros lpidos ms complejos, pero bsicamente, de la composicin de dos cidos grasos unidos a la molcula polar, es como la estructura bsica de una membrana celular. De lo que yo dije aqu haba algo que nos supieran???? *-* Entonces por favor esa es la intencin de la biociencias, mezclar, involucrar y finalmente encadenar los componentes de las biomolculas porque todas trabajan en conjunto y ninguna hace nada asilado, aun cuando lo que hablamos de funciones preferenciales dependiendo de las fortalezas de la biomolcula. Yo me voy a centrar a hablar de estas que son las que se denominan nucletidos. Esos nucletidos las vamos a ver trabajando en dos grandes partes unas como estructuras aisladas, es decir como nucletidos libres, que ustedes ya los han visto pero no los relacionan en este momento con ellos, y otras como molculas polimricas las cuales las vamos a ver formando parte de este componente que se llama los cidos nucleicos llamados as, sencillamente por dos razones: Estn en el ncleo y segundo, tienen una naturaleza general de ser cidos, y eso se lo da bsicamente la composicin

fuertemente polar que tienen las estructuras que acompaan a los nucletidos, llamadas fosfatos, y vamos a ver ahorita como se componen. Bueno y entonces porqu nosotros estamos hablando de los cidos nucleicos, aqu en este curso, porque bsicamente sta es una segunda funcin, de una clula viva, la primera que yo mencion era el metabolismo y por eso integramos todas la biomolculas, y la segunda es en este caso, la reproduccin, la nombro de segunda porque es la que compete a los cidos nucleicos pero en realidad se sabe hoy da que evolutivamente, la primera funcin que un ser vivo gano fue la capacidad de reproduccin, es decir cuando se logr que se replicara el material gentico es cuando apareci la posibilidad de rodearlo de una estructura proteica y que aparecieran los primeros organismo que llamaramos vivos insipientes, es decir sta sera la caracterstica que va a derivarse de la utilizacin de los nucletidos dentro de una clula, la capacidad de reproducirse y sta va con una propiedad similar que se denomina : la capacidad de transmitir los caracteres de generacin en generacin y entonces a partir de all aparece esa funcin importante llamada la herencia( creo, es q no se le entendi ). Cmo se dio el proceso en realidad solamente para resumir, este pedacito de cmo saltamos de molculas aisladas a formar una estructura llamada organismo vivo.

Primero que todo se dio la capacidad de replicar un material gentico, despus de que el material gentico se replic apareci la reproduccin y luego apareci este mecanismo que es el responsable de la aparicin de todas las dems especies a partir de una primer en centrar, que se denomina la variabilidad. Esta variabilidad aparece por dos caractersticas que vamos a revisar aqu: La primera por el proceso de mutacin natural, que es que pueden haber en la replicacin, cambios, los cuales se preocupa mucho la clula por evitarlos, pero muchas veces pueden quedar, entonces el mecanismo de mutacin es un mecanismo totalmente natural y cuando queda, cuando permanece en la clula hablamos de que aparece una variacin. Y el segundo componente que genera esta variabilidad es que una vez que nosotros tenemos cambios, entonces aparecern diferencias entre los organismos y esas diferencias generan este otro componente que se llama: la competicin , entonces ustedes debieron haber escuchado que existe una caracterstica determinada por Darwin como seleccin natural, eso qu es? Dice en resumen que el que mejor se adapte es el que se queda cierto? Entonces en el proceso de competicin cuando nosotros estamos hablando de cuatro clulas distintas y son distintas, porque ya ha aparecido la variabilidad a partir de la mutacin, entonces de que depender cunatas clulas siguen, depender bsicamente de su capacidad de adaptarse al medio; entonces ustedes

han visto muchas especies que han desaparecido bsicamente porque el proceso de adaptacin no ha sido posible, y en ese orden de ideas quien no se adapte pues desaparece. As como vamos a ver que el mecanismo de mutacin que genera una desventaja en el caso nuestro como lo vamos a ver en gentica humana, para un individuo que no es selectivamente el mejor, un ejemplo una modificacin en el numero cromosmico que origina una neuploida??? (no entend, revisen en apuntes) como por ejemplo, una trisoma, un sndrome de Turner, etc. , esos individuos tienen una particularidad es que tienen una dificultad por no decir que una imposibilidad de replicarse y no se van a reproducir, bsicamente por eso, porque no tienen las mejores condiciones para que esa especie avance por all, y entonces en ese caso en resumen, estamos en esa disyuntiva en este momento histrico del mundo , que nadie quiere tener hijos , y entonces en dnde va a quedar la reproduccin de la especie humana, de donde vamos a sacar los ejemplares para que sigan adelante con la especie, si no hay reproduccin usted no dej descendencia y por lo tanto desde el punto de vista evolutivo usted desapareci, porque ustedes se acordaran de su generacin, pero despus,,,? Entonces ese es el proceso que determina la continuidad de una especie en una ambiente. Y entonces cual es la mnima especie de organismo vivo que tiene la capacidad de reproducirse y que se

considera que tiene material gentico en su composicin, los VIRUS, pero no olviden que los virus siempre han estado en el limbo entre vivos y no vivos bsicamente por un caracterstica: no se pueden replicar solos, porque nicamente tienen un tipo de cido nuclico, entonces segunda cosa para revisar hoy: cualquier organismo vivo necesita y tiene en el proceso evolutivo dos tipos de material gentico el ADN y el ARN, qu pasa con los virus, que ellos solo tiene un tipo de cido nuclico y entonces por no tener el segundo no son autosuficientes y all aparece la caracterstica de ser parsitos o dependientes o de necesitar invadir una clula para poder sobrevivir, porque la clula que van a infectar es la que le va a proveer el segundo cido nuclico que l tiene, entonces la pregunta sera: tenemos entonces virus ADN y ARN? A quien le toca mas fcil la tarea, a los de ADN y entonces ac tenemos Hepatitis B, como un virus que es de naturaleza ADN y que fcilmente puede infectar a su clula, mientras que todos los que procedan de la lnea de virus que tiene como acido nucleico, ARN, tienen una particularidad y es que necesariamente para poder infectar a su clula tienen que momentneamente interconvertirse en la forma de ADN, por qu se tienen que interconvertir, porque el ADN es el que permite la integracin del material del virus al material de la clula viva y como todas las dems especies vivientes tenemos como cido nucleico principal ubicado dentro del nucleo de la celual al ADN, pues por esa razn el ARN de un

retrovirus, tiene que convertirse en ADN para poder infectar la clula. Y para poder convertirse a la forma de ADN, qu tienen? Necesariamente va ligado su proceso a una enzima que se llama transcriptasa inversa o retrotranscriptasa que bsicamente es la que permite la formacin de ADN a partir de ARN. Y solo por chisme, si tenemos un ARN que caractersticamente es de una sola cadena y le tengo que interconvertir en un ADN, entonces cmo se hace el proceso de la retrotranscriptasa? De una hebra nosotros formamos una nueva, conservando dos principios: 1. Siempre de manera antiparalela, es decir siempre siguiendo dos posiciones distintas una hebra junto a la otra. 2. Siempre siguiendo el principio de la complementariedad, que es donde haya un nucletido de un tipo, siempre tenemos otro que ya podemos predecir, al frente, que no es el mismo, es complementario. En ese orden de ideas la primera hebra de ARN del virus, permite la sntesis de la primera hebra del ADN que ser entonces complementaria del ARN del virus y luego esa primera hebra de ADN va a permitir la sntesis de la segunda hebra de ADN que ser complementaria de la primera. Si? Es decir, en

realidad el ARN solo sirve de molde para la primera formacin de la molcula de ADN y con esa primera formamos la segunda y cuando se haya formado la primera inmediatamente se degrada el ARN porque ahora nuestro molde va a ser la hebra de ADNsi??? Tenemos momentneamente una doble hlice que ser la que da la posibilidad de que se integren materiales a la clula que estamos infectando y cuanod ya se formen los vibriones y todo lo que va ser propiamente nuevos virus pues entonces rpidamente se forma a partir de ese ADN de doble cadena, cadenas de ARN sencillas que vuelven a empacarse dentro de los vibriones y salen de all. Bueno , y cuando hablamos del primer ser vivo por toda su capacidad y como organismo completo, pues entonces es la bacteria, y ustedes saben que ahora hay una nueva clasificacin para los reinos, todo lo que nosotros llambamos antes procariontes, ya no se llama reino procariota sino Reino Bacteriae, que significa que todos los procariotes estn en el grupo de las bacterias. Qu caracterstica particular tienen: 1. Que ya son organismos totalmente vivos, porque tienen los dos tipos de cido nuclico 2. Que a partir de ellos, de los dos cidos nucleicos, el que comanda la vida de la clula es el ADN y que entonces con ese material la bacteria forma un nico cromosoma que se caracteriza por ser circular, o sea por ser ADN

cerrado y de doble cadena y que como se llaman bacterias y se denominan como procariotas, en realidad su caracterstica est en que no tienen una divisin, entre lo que llamaramos un ncleo y un citoplasma sino que el material gentico nada dentro del protoplasma de la estructura, y entonces en ltimas tenemos acceso a todos los dems organelos directamente a partir de la estructura central o interna de la bacteria. Cules organelos tiene una bacteria?? Por ejemplo ribosomas, que mas? Mitocondrias ? el tamao de una bacteria es el tamao de una mitocondria, entonces como le metemos mitocondrias a la bacteria? De hecho la Teora Simbitica dice que nuestras mitocondrias aparecieron de la invaginacin de bacterias a partir de la clula insipiente eucariota, entonces, es cuestin de espacio, no podemos tener mitocondrias porque la mitocondria es tan grande como toda la bacteria Que mas hay en la bacteria?? Lisosomas, claro que los hay! Por que cul es el mecanismo para eliminar los desechos que tiene la bacteria! Las vacuolas es un tercer organelo que algunas bacterias pueden tener, porque ellas pueden ser de tamao distinto y por ejemplo, a partir de ellas forman las esporas que les permiten mantener muchsima integridad en las condiciones mas adversas posibles y

hay entonces muchos, sobre todo, bacilos gram positivos que tienen muchas esporas, que son muy esporulados y a partir de ellos pueden someterse a condiciones muy adversas sin que vayan a ser destruidos. Entonces hay algunos organelos que pueden eventualmente las bacterias tener, pero como estamos diciendo pues sern los mas insipientes. De aqu de la bacteria vamos a recordar por ah dentro de quince das, un detalle importante: El material gentico ms importante de la bacteria es el cromosoma, porque all est la informacin que ella va a pasar a sus descendientes, es decir los mecanismos generados van a estar concentrados dentro del cromosoma. Pero las bacterias tienen un segundo tipo de material que es totalmente independiente del cormosoma, que est ubicado lgicamente en el mismo protoplasma, pero que es aislado , es suelto, y esa estructura que tiene ADN y que es independiente, que se llama Plsmido, es la que ha permitido el desarrollo de toda la gentica en el campo de la ingeniera como mecanismo de manipulacin del material; entonces se plsmido en realidad existe de manera general en las bacterias para cumplir una funcin muy importante que es : generar variabilidad gentica. Por esa razn los plsmidos son responsables de que las bacterias desarrollen mecanismos de resistencia contra los

antibiticos, porque cada vez que una droga tiene intencin de destruir un grupo de bacterias, ellas mutan, cambian, varan en ese plsmido, hasta que al azar encuentran una combinacin que las hace resistentes al antibitico. CLASE II (2H) Entonces de forma natural, esta estructura, pequeita redonda, muchsimo mas chiquita, menos de la dcima parte de lo que es el tamao del cromosoma, la tiene la bacteria como mecanismo de defensa y adems la puede utilizar para un segundo mecanismo que es la recombinacin mediante la conjugacin de las bacterias. Esas seran como las funciones naturales, pero nosotros lo vamos a revisar aqu, lo vamos a ver con un tercer mecanismo que no tiene nada que ver la bacteria en l, ni se lo invent, ni saban que lo iban a usar para eso, que es el de manipular esos segmentos para inducir cambios e introducir protenas especificas en lo que se llama la tecnologa del ADN recombinante. Entonces es ingeniera gentica desarrollada por la manipulacin del material, arranc y sigue siendo muy importante a partir de la manipulacin de los plsmidos en las bacterias. Y entonces maana seguimos hablando de qu tenemos como material gentico, dentro de la clula ahora si, eucariota. Vamos a hablar de los nucletidos, cuando trabajan de manera independiente, estn como molcula suelta o acoplada cuando es lineal y cuando trabaja como polmero formando miles de unidades que es cuando se denominan cidos nucledos. El nucletido bsicamente est conformada por tres estructuras: base nitrogenada Un azcar una pentosa (cinco carbonos ) y es la responsable de darle el nombre al acido nucledo dependiendo si es ribosa o es desoxirribosa. grupo fosfato. Este grupo fosfato como tiene 4 cargas negativas porque es fsforo y oxigeno a la -4 es el responsable de la que la molcula quede cargada negativamente y una caracterstica de la estructura polimrica es que por tener tantas unidades de fosfato se comporta como si fuera una molcula que migra hacia el polo positivo sea una molcula anionica y tiene carga por lo tanto negativa.

Las bases son las que portan las caracterstica de un individuo, las que llevan la herencia, porque ellas varan en los diferentes nucletidos que tiene un acido nucledo, el resto el azcar y el fosfato son solo estructuras que ayudan a darle en la espacialidad una forma secundaria a los cidos nucledos pero en realidad las bases son las que pueden variar. Dentro de la clula animal se tiene material de tipo acido nucledo principalmente en el ncleo de la clula eucariota que es el que llamamos ADN genmico para decir que es el responsable de transmitir la mayora de los caracteres heredados pero que tambin tenemos material gentico fuera del ncleo principalmente en las mitocondrias por lo tanto tendremos tambin el ADN mitocondrial. Como se sabe con anterioridad las mitocondrias aparecieron de una invaginacin de bacterias dentro de la clula procariota incipiente , entonces ese ADN en vez de ser lineal y estar organizado en cromosomas, como est dentro del ncleo tenemos un ADN que es circular es cerrado, y tienen caracterstica muy parecidas en tamao y en estructura al ADN de las bacterias, por ejemplo solo tienen un ?para la codificacin de ciertas protenas y no tienen segmentos no codificantes como si lo hay en el material que est dentro del ncleo. El ADN mitocondrial y las estructuras que trabajan en la mitocondria son parte de muchos de los complejos proteicos que forman parte en el complejo de la respiracin salen de los genes que especficamente

tenemos all y otros provienen del ncleo, es decir la funcin que hace la mitocondria en la respiracin podramos decir que es una tripleta de algunas protenas lineales y algunas producidas por la misma mitocondria, se pueden intercambiar se pueden expresar algunas y otras no, se necesitan de ambas partes porque son distintas y tienen funciones distintas por lo tanto el ADN mitocondrial no se divide con la misma tasa que lo hace el del ncleo no tienen los mismos genes que hay dentro del ncleo y lo nico que comparten es que la composicin de los nucletidos es igual pero la secuencia varia. Con respecto a los ARN se conocen muchos ms a los que tradicionalmente se manejaban como el ARNm que es el que llevaba la seal del ncleo al citoplasma el ARNt que ubica los aminocidos, el ribosomal que da la estructura y el soporte a los ribosomas para la sntesis de protenas, el heteronuclear que es la copia recin hecha de un gen antes de que sufra proceso de splicing y se convierta en mensajero, el RNA nuclear pequeo que forma los EDMUN? Que son los que participan en el proceso de splicing para eliminar exones y acoplar intrones en el momento de crear la formacin del RNAm estos son los RNA responsables de esto y los RNA catalticos que son los que tienen la capacidad de funcionar como una enzima En la clula vegetal la diferencia que se encuentra con respecto a la animal es que aqu vamos a tener el ADN del ncleo, el ADN de las mitocondrias y AND de los plastidios, que se denominan cloroplastos cuando

hablamos de plantas verdes, pero si tienen otro tipos de pigmentos y en general todo el grupo que trabaja en la formacin de los distintos nutrientes que luego vamos a ingerir (plastidios) tambin tienen material gentico que ser distinto en tasa, funcin etc. Vamos a mirar dentro de los nucletidos las caractersticas que nos van a permitir identificar cada uno de los individuos cuando nos referimos a la variabilidad gentica. Tenemos la estructura bsica, el azcar en realidad es ribosa o desoxirribosa. La ribosa puede perder en la posicin 2 del azcar el oxigeno y por eso se forma la nueva azcar que va a tener la caracterstica de perder el oxigeno en la posicin 2 y se denomina 2desoxirribosa porque se forma a partir del proceso de reduccin de una ribosa a una desoxirribosa, el OH que est en la posicin 5 y el que est en la posicin 3 no se pueden perder porque el fosfato est en la capacidad de unirse o a la posicin 5 o la 3 del azcar entonces por eso el monmero crece a partir de una sola molcula y gana nueva todas incorporndose aqu en la parte inferior de la posicin 3 del nucletido a seguir y eso es lo que le da la direccionalidad a los cidos nucleicos , uno generalmente habla de que tiene una hebra que va de 5 a 3 la posicin final del fosfato . Existen dos grandes grupos de bases nitrogenadas, se denominan as porque tienen a tener comportamiento bsico al pH fisiolgico y por los constituyentes que

tienen, adems son nitrogenadas porque su composicin est dada por carbono, nitrgeno, oxigeno y por hidrogeno. La estructura bsica es el anillo doble con dobles enlaces alternados , y las pirimidinas en cambio un nico anillo cerrado. Los diferentes tipos o subtipos de esas familias van a depender de cuales sean los adornos o grupos funcionales que por cualquiera de estos puntos puedan venir a ubicarse. Purinas Las que se encuentran dentro del material gentico son la Adenina y la Guanina. La adenina es una seis amino purina es decir el anillo bsico doble de la purina que gana en la posicin seis un grupo amino por eso tambin se puede llamar qumicamente la sex-amino-purina. La guanina tiene dos estructuras reemplazadas , y en la misma posicin seis en donde la adenina tiene un grupo amino aqu hay un grupo ceto, y en la posicin dos en este carbono vamos a tener un grupo amino, entonces se dira que es una seis-ceto-dos amino purina pero comnmente se conoce como guanina. Cuando menciono que hay un grupo ceto, es decir un oxigeno unido a un doble enlace a la estructura bsica del anillo. Qu pasara si esta base estuviese muy rodeada de cualquier acido? Al encontrarse muchos hidrgenos en el medio, el oxigeno en vez de tener un doble enlace al carbono, liberara uno de sus dos enlaces y lo unira a un hidrogeno por consiguiente pasara de ser un grupo ceto a ser un alcohol. Esta es

una de las propiedades ms importantes de las bases nitrogenadas ya que ello determina la capacidad de formar o no el doble enlace, es decir la capacidad de formar dos hebras de ADN en el modelo que tenemos en la clula, es una caracterstica derivada de la posibilidad de interactuar entre las bases de las dos hebras y esa se la da el que estemos en la forma ceto o en la forma alcohlica. Solo depender de la composicin de la base y est en realidad puede variar dependiendo de las condiciones de pH Pirimidinas Presentan un nico anillo y pueden tener en la posicin 2 un grupo ceto y en al posicin 4 otro grupo ceto , esto sera un Uracilo, qumicamente hablando seria 2,4 dioxi-pirimidina. La forma de enumerar los tomos que forman el anillo arranca por el extremo izquierdo y sigue el sentido contrario a las manecillas del reloj para el caso de las purinas. En las pirimidinas la forma qumica de enumerarlas arranca por el extremo inferior llevando el sentido de las manecillas del reloj por eso aqu la posicion izquierda es dos y la posicion superior es cuatro. Si tenemos dos grupos ceto nos referimos al Uracilo, si tenemos dos grupos ceto y adems en la posicion 5 un grupo metilo nos referimos a la Timina, si se tiene una pirimidina con un grupo ceto en la posicion 2 y en la 4 un grupo amino seria la citosina . Los cidos nucledos no tiene de las 5 representantes, es decir, las dos purinas y las 3 pirimidinas si no que

un acido nucledo, cualquiera de los dos, tiene las mismas dos purinas pero las pirimidinas seleccionan de a 2 de tal manera, que tan ADN como ARN tiene citosina, pero el ADN solo tiene timina y no uracilo; y lo contrario el ARN tiene uracilo y no timina. Respuesta a una pregunta de un estudiante: Cuando hablemos de metabolismo de esas bases como se sintetizan y como se forma, q hay una especificidad enzimtica para que la desoxirribosa solo se le solamente la timina, no sele una el uracilo y cuando se tiene que unir el uracilo momentneamente, para poder forma a partir de la timina siempre se forma de una nica forma monofostada para que no pueda ser incorporado entre el material. Lgicamente cuando hablemos de las mutaciones vamos a ver que el material gentico puede mutar, entonces podra pasar esto, fjense, que pasa si yo tengo esta timina y eventualmente ocurre un proceso de desmetilacion?, entonces se convirti en uracilo, entonces fjense que eventualmente puedo generar un uracilo dentro del ADN, pero no de manera natural, si no por un proceso de prdida de alguno de los grupos funcionales, y entonces un ejemplo como el que pongo seria que una timina que si esta en el ADN pierda su grupo metilo, se desmetile, y al perder su grupo metilo quede convertido en un uracilo. Lgicamente como eso sera una mutacin y eso tendra un error nefasto para el material lo que en realidad ocurre es que en el proceso de revisin de las enzimas separadoras, ellas

van a captar que eso es un uracilo y van a extinguir ese nucletido para corregir. Eventualmente puede aparecer un uracilo en el ADN pero como un proceso errado en la formacin de las bases normales. Les dije yo que nombramos esas 5 bases porque son de las que ms vamos a hablar en detalle, pero vamos a mirar una purina, supongamos que yo tengo el anillo de purina, este anillo de purina podra tener esta particularidad que en la posicin uno tuviera un gripo metilo, que en la posicin 3 tuviera un grupo metilo y que en la posicin 7 tuviera otro grupo metilo, es decir que tuviera 3 grupos metilos, en la posicin 1,3 y 7 y si en la posicin 6 tuviera un grupo ceto entonces se llamara hiposantil y si tuviera a dems en la posicin 8 otro grupo ceto se llamara santil, son precursoras de la formacin de acido urico, entonces si yo tengo una santina a la cual en la posicin 1,3 y 7 se le han unido grupos funcionales metil, es decir una trimetil santil, eso es lo que se llama comnmente la cafena, y esta es el principio activo que trae una planta, en un vegetal que es el caf. Entonces fjense que las bases nitrogenadas no solo estn haciendo parte del ADN. Entonces el caf tiene como principio activo a la cafena, y la cafena es una base nitrogenada de tipo purina, especficamente una santina que tiene 3 grupos metil. Podramos tener ese mismo compuesto, pero ya no es trimetilado si dimetilado, sea dimetil santil y dependiendo de donde est ubicado el grupo metilo puede ser la teofilina que es principio activo del t, o

podra ser la teobromina que es l principio activo del cacao. Entonces fjense que por esa razn es la cafena es un estimulante del sistema nervioso central, porque es un inhibidor de una fosfodiesterasa, entonces impide de la disolucin de un segundo mensajero y por eso produce ese estado de alerta, ejerce una funcin estimulante. Lo mismo hace la teofilina y la teorrimina, y por eso sin que uno se d cuenta el chocolate genera una dependencia porque tiene principios activos que funcionan como estimulantes del sistema nervioso. Propiedades y caractersticas de las bases: - Su composicin qumica es de una estructura planar, a diferencia de una protena que gana una espacialidad tridimensional, las bases solo tiene un largo por un ancho pero no tiene profundidad. Debido a su estructura plana, cuando forman los distintos polmeros van a tener una disposicin en el espacio particular, que en ese caso vamos a ver una disposicin acostada como si fueran una especie de peldaos, y en cambio las otras dos estructuras de los polmeros van a ir de manera vertical. Entonces aqu tendramos horizontalidad de la base porque ellas se ubican de esta manera debido a que tiene una estructura plana.

Tactomerismo que no es exclusivo de ellas, el tactomerismo es la capacidad que tiene una sustancia de interconvertirse desde la forma ceto hacia la forma de alcohol o viceversa. (explicacin en diapositiva)

Que particularidad tiene el hecho de que la base pueda sufrir ese tactomerismo, cuando tenemos mucha disponibilidad de hidrgenos en el medio, la misma base que est en forma ceto puede ceder uno de sus enlaces para recibir a un hidrogeno y esa es la interconvercion, pasar de la forma ceto a la forma alcohlica cuando tenemos un pH acido, y que pasara si el pH empieza a cambiar y se vuelve alcalino?, entonces no hay disponibilidad de hidrgenos en el medio y lo que ocurrira es que volviera a la forma ceto, entonces esa capacidad no la tendr solo las bases la tendr cualquier compuesto que pueda tener grupos funcionales ceto, se interconvertira en la forma alcohlica o enolica, o puede pasar a la forma ceto. En condiciones normales, en pH fisiolgico, cul de las dos formas de la base se favorecera? 7.4 es un pH ligeramente bsico, nosotros podemos tener para una misma base nitrogenada ambos tipos simultneamente, sea podramos tener un poco de base con la forma ceto, y otra parte de las bases con la forma alcohlica, y tendemos a tener ms de la forma ceto, amino o lactato a pH fisiolgico, y muy poca cantidad de forma alcohlica. Esto es importante

en el metabolismo, porque si no tuviramos la base en la forma ceto no se puede generar un tipo de enlace, el puente de hidrogeno, requiere que tengamos forma ceto en la base para poder formarlo, y el puente de hidrogeno es necesario para formar las uniones entre cadenas. Entonces si tenemos un pH ms bajo y las bases estuvieran en la forma alcohlica no tendramos ADN de doble cadena, porque no podramos formar entre una base y la de enfrente un puente de hidrogeno, es decir, el enlace puente de hidrogeno es dependiente de las condiciones del medio. Cuando uno tiene una cadena lineal de aminocidos, la estructura primaria de la protena, ella forma plegamientos, pero estos plegamientos van a depender de las condiciones del medio, de la composicin para saber si se pueden formar puentes disulfuro o se puente formar puentes de hidrogeno, y entonces en el ADN de la misma manera las dos cadenas se asocian si, y solo si tenemos en las bases la forma ceto, es decir, aquellas poquitas bases que sigan de la forma alcohlica no sern las que estn formando parte del ADN porque no lo podran hacer puesto que no formaran puentes. Son estructuras dobles, cerradas en anillos, con dobles enlaces alternados, es decir, no hay doble enlace, si hay doble enlace, no hay doble enlace. Entonces cuando le hacemos un espectro de absorcin a las bases nitrogenadas,

lo que vemos es lo siguiente, empezamos a incidir luz y empieza a aumentar la capacitad de absorbancia y encontramos un pico Max a una longitud de onda de 260 nm, es decir lo que llamaramos la longitud de onda ideal de esta estructura, estara ubicadas para las bases nitrogenadas en 260nm. Entonces en cual espectro absorbera? En el ultravioleta, porque todo lo que va porque debajo de 400nm est en el rango ultravioleta, entonces las bases se absorben luz en el rango ultravioleta y ese rango para ser ms especficos en 260 nm. Si absorben en el ultravioleta, entonces son coloreados? No, las bases son transparente para nuestro ojo, pero claro que pueden absorber luz porque la caracterstica de la absorcin es derivada precisamente de la composicin qumica, los dobles enlaces que ella tiene empiezan a girar en el interior de la estructura cerrada y eso es lo que permite la absorcin de luz a los 260 nm, como todas las base son anillos cerrados con dobles enlaces alternados, tanto las purinas como las pirimidinas, entonces todas las cinco base absorben luz a 260 nm, es decir, yo no puede diferenciar entre base, porque cualquiera de las cinco absorbe a esa longitud de onda.

Esto me sirve ya que en el laboratorio, la forma inicial de saber si lo que yo tengo en un tubo de ensayo es material gentico es colocar el tubito a 260nm y mirar si se registra absorcin de luz, si hay absorcin de los es porque hay base, si no hay absorcin de luz es porque no tenemos ese material. Esto puede ser importante en forense. Otra caracterstica de las base, cuando estn en contacto con un pH que sea ligeramente alcalino, ellas van a poder formar puente de hidrogeno entre ellas, pero lo hacen de una manera especifica: Adenina se aparea con la tinina Guanina se aparea a la citosina La adenina es una purina, tiene dos anillos y la timina en cambio es una pirimidina tiene un solo anillo. Las uniones son as de especficas bsicamente porque: a) Uno es grande y el otro es pequeito, generando un ancho en la estructura que es simtrico, no la unin de dos bases de dos anillos, o dos bases de un solo anillo, entonces tendramos una estructura que tendera a ser inestable y por esa razn ellas se asocian de esa manera.

b) Por ejemplo porque no se una la guanina con la adenina, y porque si con la citosina, por el numero de estructuras remplazadas que tiene que son las que le permite formar eso puentes de hidrogeno. La guanina tiene dos grupos funcionales remplazados en la posicin 6 un grupo ceto y en la posicin 2 un grupo amino, entonces por esa razn el grupo ceto, el grupo amino y el carbno que tiene en el centro tiene disponibles hidrgenos para poder formar 3 puentes, si en cambio se asociara a una molcula que tambin siendo pequea no tiene si no dos puntos, tendra un sitio de donde no se uniria y esto generara inestabilidad. La especificad de la unin tiene que ver con que las dos molculas al momento de asociarse de alguna manera se estabilice. La adenina solo tena un grupo funcional, un grupo amino, en la posicin 6, entonces solo puede formar nicamente 2 puentes. Enlace puente de hidrogeno: - Se pueden formar entre molculas que tengan una carga, es decir entre molculas que sean polares.

Se llama as porque quien est metido en el medio es el hidrogeno, pero se estable nicamente entre dos tipos de tomos, oxigeno con oxigeno, oxigeno con nitrgeno o dos nitrgenos entre si y obviamente de en medio de ellos este metido un hidrogeno. Entonces el tipo de enlace que se forma siempre se representa con tres punto, porque es un enlace que caractersticamente es un enlace de tipo no covalente, es decir, en realidad las dos molculas no estn compartiendo los electrones y por esa razn son enlaces o fuerzas dbiles, pero entre las fuerzas dbiles los puentes de hidrogeno son las ms fortalecidas porque son muchas unidades seguidas, y al ser tantas aumenta la estabilidad de la molcula.

El hidrogeno tiene un dueo y lo podemos saberlo, porque estar unidos a ese tomo de forma covalente y ese ser el tomo donador, que es el que va a exponer o a dejar en el ambiente o en el medio un poco fuera de su molcula para que atraiga al otro tomo que no es el dueo, y se llama tomo aceptor. Si la

misma base tiene un grupo ceto, o si tiene un grupo OH, forma o no forma un puente de hidrogeno, el puente se puede formar (diapositiva) porque este nitrgeno que tiene al hidrogeno como dueo, va a hacer que, a pesar que los electrones del hidrogeno estn involucrados aqu para formar este enlace, porque un nitrgeno trabaja con una valencia de 3 o 5, entonces tendr los otros enlaces comprometidos con otros tomos pero uno de los suyos est comprometido con este hidrogeno. Entonces el hidrogeno no tiene carga porque ya quedo saturada en este punto, pero sigue conservando su electropositividad porque funciona con +1, y que pasa con el oxigeno, tiene un enlace covalente que est unido aqu en ultimas a la otra base, y aqu imagnense que tengo una base, entonces esta de aqu que tiene este grupo amino se est aproximando a esta de aqu que tiene este oxigeno. Este oxigeno tiene sus dos grupos unidos aqu a una molcula, pero conserva su electronegatividad, entonces la atraccin que se da es en realidad por esta electronegatividad y esta electropositividad y esto es lo que genera que se puedan acercar y formen el puente de hidrogeno, como es un

acercamiento por atraccin de cargas, no es un enlace real y por eso mucho ms fcil se rompera que si quisiramos romper un enlace covalente, pero ahora pensemos, que pasara si este oxigeno que est unido por un grupo ceto, sea doblemente aqu a un carbono, si pasara si acepta un hidrogeno porque est en un medio acido? Donde se ubicara el hidrogeno? El hidrogeno se ubicara aqu y entonces tendramos un enlace del oxigeno aqu a este hidrogeno, un enlace de ese oxigeno que sigue ligado al carbono y que pasara con un hidrogeno aqu con otro hidrogeno cerca de aqu? Entonces seria dos electropositividades y ningn puente de hidrogeno porque se van a separar o repeler y por eso una forma se separar la doble hlice de ADN podra ser modificar drsticamente el pH, puede ser por la forma acida o por la forma alcalina de manera drstica y fuerte, porque cualquiera de los dos tendra el mismo efecto que sera cargar aqu estas molculas y al cargarlas impedir que las dos se puedan atraer. Despus de las bases viene el segundo campamento de los nucletidos que es el azcar, entonces el azcar

se une por aqu por la posicin en este caso es una purina a la base. Esta posicin es el nitrgeno 9 y como al azcar le voy numerar sus tomos con nmeros arbigos pero primos para diferenciar. Entonces siempre el enlace que une a la base nitrogenada con el azcar es un enlace entre la posicin 9 del nitrgeno de purina y la posicin 1 prima del azcar. Como se llama el enlace que por arriba del plano? BETA: une la base por la parte superior entonces se llama un enlace beta 1-9 que es especficamente un enlace beta N glucosidico as lo van a encontrar en los libros, porque es eso un enlace entre la posicin del nitrgeno 9 con un azcar. que pasa si lo que tenemos como base no es una purina sino una pirimidina? Entonces se unen por la posicin mas inferior en la pirimidinas, el nitrgeno seria el numero 1, entonces seria enlace beta N glucosidico; pero en el nitrgeno 1 de la pirimidinas y el carbono 1 prima del azcar. Entre los azucares entonces podemos tener ribosa o desoxirribosa. En la diapositiva se ve una 2 prima de desoxirribosa porque se perdi el oxigeno de la posicin 2 prima, tendramos una estructura que esta dando origen a los nucletidos que van hay en el ADN, porque de hacho se estn uniendo a la desoxirribosa.

Cmo se llama la estructura que apenas tiene 2 componentes, solo tiene una base, un azcar y no tiene fosfato? Nucleocido, para diferenciarlo del final que en vez de S1 termina en T1 en vez de nucleoxido se llama nucletido. Ese nucletido puede organizarse de dos maneras, suponga que esta es la base y yo soy una pirimidina y me estoy uniendo a un azcar mediante un enlace beta N glucosidico, entonces al tener estas dos estructuras puedo tener dos formas espaciales. Ismeros: tiene la misma configuracin qumica pero espacialmente son diferentes. Dos posibilidades de la base y el azcar o que el enlace rotara y que el azcar y la base quedaran del mismo lado girando 180 grados. Ismeros anti y si Los dos pueden existir espacialmente? Si, yo puedo tener dentro de la clula la forma si y la forma anti. Influye en algo la forma isomerica? Nosotros tenemos L aminocidos y D aminocidos, no usamos igual los dos el detalle tiene que ver con las enzimas, solo pueden reconocer la forma L. Rta pregunta : Entonces el uno trata de sacar la patica por asi decirlo y genera mayor espacio entonces gasta mayor rea para poderse ubicar y eso por ejemplo influye en la fluidez de la membrana. Entonces sera un ejemplo de funcionabilidad. Hay un ejemplo muy importante dentro de la clula, donde la forma isomerica es clave nosotros tenemos L aminocidos y

d aminocidos . Usamos igual los dos? No porque el detalle tiene que ver con la enzima, las enzimas reconocen la forma L y no reconocen las formas D entonces podramos tener muchas formas D pero en trminos reales desde el punto de vista nutritivo no funcionaria porque las enzimas solo actan con la forma L entonces todo eso para decirles que independiente que yo pueda tener esta forma que sera la forma anti porque dije que sera en la posicion o esta forma que es que giro la estructura y se ubico al mismo lado y entonces tendramos la forma asi cualquiera de las dos pueden estar en la clula, pero para poder formar el ADN de doble cadena solo me sirve una de las dos. La forma anti es la que me sirve porque si nosotros tuviramos el azcar que dije yo que el azcar y los fosfatos van a dar la estructura y las bases se van a ubicar en el centro, si las bases estuvieran ubicadas en el mismo lado y no en la posicion pues entonces fijensen que los grupos funcionales reemplazados en vez de quedar mirando para la posibilidad de otra hebra aqu que por lo tanto se formara en los enlaces quedaran los grupos funcionales mirando para afuera de la cadena , y entonces como con cual cadena se deberan asociar? No habra posibilidad de asociarse porque es necesario que los grupos funcionales que son los que en realidad van a poder formar los puentes este mirando hacia adentro de la estructura para poderse asociar con las de ac, y entonces de ah se deriva la siguiente caracterstica que tiene el material gentico,

y es que pasara si yo tengo una cadena asi con estos grupos funcionales mirando a la derecha y la otra cadena con los grupos funcionales tambin mirando a la derecha, como cuando se encuentran? Entonces por esa razn es que la segundo cadena en vez de ir de la misma forma viene parada de cabeza porque al venir al revs lo que hace es que los grupos funcionales de la forma anti?? los pone aqu adentro y ahora si estos que van derechos quedaron adentro y estos que vienen al revs quedaron adentro entonces ahora si pueden formar los puentes de hidrogeno y por esa razn las dos cadenas son anti paralelas para poder afrontar? Los grupos funcionales y formar los puentes de hidrogeno, entonces las dos formas las hay pero la que se necesita que se presente para poder formar la cadena de ADN seria la forma anti. Finalmente pasamos al tercer componente que sera el grupo fosfato, este se puede unir a dos posibles lugares en el azcar, uno de estos lugares es al carbono de la posicion 5 , otro de los posibles puntos es el carbn de la posicion 3 cualquiera de los dos puede ser blanco del grupo fosfato pero para poder formar un polmero se necesita que la forma que se haya dado es la de un nucletido con el grupo fosfato en la posicion 5 porque los dems nucletidos que vayan a unirse todos los que quieran solo se van a poder unir pegando el siguiente nucletido aqu a la posicion 3 entonces si se tiene saturada la posicion 3 es decir puso hay ya un fosfato no puede unir un

siguiente nucletido porque el fosfato bloquea el punto de acceso. Entonces van a ver cuando revisen artculos y miren las tcnicas trabajo con ADN que por ejemplo una secuenciacin es alguna estrategia, colocar nucletidos di fosfatados nucletidos que significan que tienen grupo fosfato aqu y grupo fosfato aqu. Entonces cuando ese nucletido se incorpora por la posicion 5 a la anterior que tena su grupo 3 libre, llega y se le pega aqu, ahora este se le debera venir a pegar por aqu el siguiente pero como tiene un grupo fosfato ah se sintetiza la hebra y bloquea el proceso de sntesis porque no puede seguir adelante. Entonces que quede claro que la posicion puede ser cualquiera de las dos pero que si quiero formar un polmero necesariamente los nucletidos tienen que ser de la forma 5 porque la 3 la necesitamos despejada para poder unir los siguientes nucletidos y formar un polmero. Y otra cosa es que esto es lo que origina la direccionalidad del polmero, por eso el primer nucletido cualquiera que sea, siempre tendr en la posicion 5 un grupo fosfato y el ultimo que vaya aqui que puede ser despues de 2000 nucletidos siempre tendra como punto libre para permitir que llegue uno Nuevo en la posicion 3 y entonces por eso en los libros solo se ve una hebra que arriba dice 5 y abajo dice 3 porque es una forma sencilla de presentar la molecula completa diciendo que el primer nucleotido siempre parte por tener un fosfato en la

posicion 5 y el ultimo siempre lleva disponible su posicin 3 para mirar al siguiente nucletido La ADN polimerasa tiene dos limitantes primero solo coloca nucletidos por la posicin 3 prima nunca por la 5 prima esa es la razn de la direccionalidad de la elise. 2 como es ADN polimerasa reconoce nicamente el modelo de doble hebra, es decir coloco el nucletido aqu pero necesito que halla una cadena al frente para que le diga por complementariedad cual debe ir. 3. Reconocer la doble cadena en la que hace que el momento de replicacin tengamos un primer o cebador o poquitos nucletidos para hacer que la encima tenga un proceso de continuacin. Entonces nucleotido completo, base nitrogenada, azcar que puede ser ribosa o desoxirribosa y grupo fosfato. Y aqu tienen todos los posibles nucletidos teniendo presente que en cada acido nucleico solo vamos a tener de cuatro tipos. Si tenemos un ARN el azcar ser una ribosa por eso ven aqu un OH y las bases sern Adenina Guanina Citocina y Uracilo, y si tenemos en cambio nucletidos de desoxirribosa entonces aqu no tendramos un OH si no tendramos solo Hidrogeno y las bases serian la Adenina la Guanina la Citocina y la Timina remplazando al Uracilo. Entonces vamos a mirar cuales son ahora que conocemos la estructura sus funciones. Primero los vamos a ver como nucletidos libres o sueltos por eso se denominan monmeros. Donde se ha visto monmeros que cumplan esas funciones traductores

de energa, traduciendo seales en el interior y en el exterior de la clula . Por ejemplo el ampc, el GTP, ATP el NAD el FAD, todas estas son moleculas de tipo nucleotido y su funcin bsicamente esta desempeada en tener el puente de enlace entre las dos grandes funciones del proceso metablico nosotros cogemos nutrientes, los catabolizamos para finalmente degradarlos hasta Co2 mas agua y que a partir de all bamos a liberar energa. Esa energa la podamos tener guardada en forma de atp o la podemos tener guardada en moleculas como el NADP o el NAD solo o en GTP y bsicamente cuando la necesitramos usar entonces si bamos a volver a la forma oxidada e bamos a liberar la energa para que se viera el otro proceso que seria el de sntesis que seria el proceso anablico. Y este proceso anablico es el que permite que se formen nuevas clulas , los tejidos crezcan y el organismo se mantenga sea porque repone o si esta en crecimiento porque forma nuevas clulas. Entonces los voy adicionar diferencindolos por la base que tiene el nucleotido. Derivados de la Adenosina. La adenosina es el nucleotido que tiene como base nitrogenada a la adenina . El derivado mas abundante y el mas importante es el ATP que se puede interconvertir en ADP y luego cuando necesitemos volverse otra vez ATP, es decir es una molcula traductora de energa que bsicamente va a captar tres grupos fosfatos cuando requiere guardar energa y esa energa la guarda en los enlaces que unen a los

fosfatos y cuando necesitamos energa hidroliza el fosfato libera la energa entonces pasa de llamarse ATP a llamarse ADP . El ATP es Adenosina Trifosfatada y el ADP Adenosina Di fosfatada porque el fosfato que se perdi fue el que permiti la liberacin de la molcula. Esta molcula es la mas abundante de todos los cinco nucletidos que puede formar una clula por la forma prefeverencial de almacenamiento de energa de una clula es en forma de ATP. Tambin lo podemos guardar como GTP, tambin podemos guardar el NAD para finalmente formar atp pero la forma mas comn de guardar la energa es el ATP . Aqu esta la molcula desglosada, esta la Adenina el azcar que en este caso seria la ribosa y si tenemos solo un grupo fosfato unido a la posicion 5 seria adenosina monofosfatada o AMP, si le pegamos un segundo grupo fosfato seria adenosina di fosfatada o ADP y si une un tercer grupo fosfato se llamara adenosina Trifosfatada o ATP . Aparte de clase: Estos puntos rojos que aparecen y que van a permitir la hidrlisis posteriormente esos enlaces son los que guardan la energa y cuando se hidrolizan los que a su vez la liberan . En cada enlace de estos se guarda mas o menos 7.3 kilocaloras por cada mol de atp en cada uno de los enlaces; de tal manera que si yo rompiera el tercero y luego el segundo le dara 7.3 por dos . Existe alguna reaccin en donde por la ruptura no pasemos de ATP a ADP si no de una se pase a AMP ?

Por ejemplo cuando se esta dando la direccionalidad de la glucosa para que se de sntesis de glucgeno. Para decir que la ribosa 5p en vez de ir a la va de las pentosas vaya para la va de sntesis de las bases tambin formamos el fosforibosinpirofosfato y tambin tenemos una reaccin exergonica que bsicamente lo que pretende es tener mucha mas disponibilidad de energa porque la reaccin requiere mas energa entonces utiliza una hidrlisis de dos moleculas. Como se vera en la sntesis del AMPc que necesariamente hace un proceso altamente exergonico. Entonces el ATP es un nucleotido cuya caracterstica es que pega ese grupo fosfato dependiendo si se queda con dos o si se queda con tres hace el jueguito de guardar o liberar energa , por eso es un Traductor de energa . Donde mas esta un derivado sencillo o monmero de la adenosina funcionando para formar un segundo mensajero que se llama el AMPc que bsicamente se forma a partir de la hidrolisis del ATP ? Entonces aqu tambin es un ejemplo que el ATP tenia tres fosfatos y en una nica reaccin pierde dos para quedarse nicamente con un fosfato por eso se convierte en AMP que significa Adenosina Monofosfatada y ese nico fosfato con el que se queda lo liga tanto por la posicion 5 que es lo que normalmente tenamos como por la posicion 3 entonces cierra por asi decirlo el fosfato para que quede unido por los dos carbonos del azcar y por eso

a esa estructura se le llama cclica por eso se dice que seria un 3 5 monofosfato de Adenosina . Donde funciona como segundo mensajero ? bsicamente en las hormonas que por ser de naturaleza proteica no pueden atravesar la membrana o la capa bilipidica y necesitan que alguien lleve la seal al interior de la clula entonces hay mecanismos como el de la activacin de la protena G o la activacin del diacilglicerol o del inositol trifosfato y otra serie de mecanismos en los cuales este puede ser el mediador que lleve la seal finalmente hasta el ncleo. Que caractersticas tiene el AMPc, ? Bsicamente que su origen esta dado a partir del ATP , segundo que la hidrlisis implica la perdida en un nico momento de los dos grupos fosfatos y ese proceso lo hace una enzima que se llama ADENILATO CICLASA, esa enzima permite que la estructura forme un anillo cerrado con el fosfato y es esta estructura en anillo que gira la que en realidad produce toda la respuesta metablica que uno llama de segundo mensajero. La estructura cerrada se forma en general hasta que cese la activacin de la hormona en el receptor que ella esta reconociendo, cuando esa hormona se retira entonces la seal disminuye al disminuir la seal la adenilato ciclasa se inactiva por lo tanto no forma mas AMPc y entonces ese que estaba formado se hidroliza. La hidrlisis consiste simplemente en soltar el fosfato de la posicion 3 entonces se rompe y ese proceso lo hace una enzima que se llama FOSFODIESTERASA

porque eso es lo que hace es una enzima que rompe el enlace ester del grupo fosfato. Despus de hidrolizar al AMPc simplemente me queda AMP porque eso es lo que queda sin estar cerrado aqu por esta posicion que era lo que le daba la estructura cclica y a su vez la capacidad de poder hacer la activacin de la seal hormonal. Donde mas hay derivados de la Adenosina? En las famosas coenzimas que colaboran con la xidos reductasas especficamente para decirlo en detalle en el NAD en NADp y en el FAD . El NAD es niacin Adenin dinucleotido osea dos nucletidos de Adenosina unidos a una molcula de niacina que era una vitamina porque las coenzimas tiene doble componente son nucletidos y son vitaminas y el FAD en cambio es el mismo dinucleotido de Adenosina unido a la flavina entonces estas que serian coenzimas en realidad trabajan siendo aceptoras o dadoras de los hidrgenos para permitir el proceso de oxidacin o de reduccin de un sustrato ayudando a la enzima que se llama oxido reductasa como la ayuda? Pues simplemente ellos en realidad son los que ponen los hidrgenos o los que los captan, y por esa razn uno habla de NAD+ cuando la tiene oxidado y de NADH mas un hidrogeno libre cuando tiene la estructura reducida y a su vez el sustrato sobre el que se actu o se redujo o se oxido , entonces colabora en el proceso de oxido reduccin (ejemplo de tema que se va a ver mas adelante )

Podramos tener una arginina que se desmetilara y entonces se convirtiera en uracilo y que eso seria una mutacin y que necesitamos que alguien reconozca esta estructura para modificarla y volverla a corregir entonces por ejemplo all interviene otro derivado de la Adenosina que es la F adenosin metionina? Que es pues bsicamente una Adenosina que se une a un aminocido metionina por la posicion final donde esta el grupo sulfhidrilo y tiene la particularidad de convertirse en un sistema donador de grupos metilo o aceptor de grupos metilo ; entonces cuando yo necesito metilar una molcula ese adenosin metionina regala el grupo metilo o por el contrario, necesito retirar el grupo metilo entonces ese adenosin metionina se carga con el grupo metilo y lo quito . En donde podra trabajar esta molcula? si eventualmente de manera espontanea se ha perdido el grupo metilo de una Timina y por lo tanto se ha vuelto Uracilo, para volver a restablecer la Timina la adenosin se acerca al ADN y le dona el grupo metilo y asi vuelve y repone a la Timina. Hay otros derivados de la adenosin pero estos son como los mas abundantes en la clula y los que mas se utilizan desde el punto de vista metablico. Derivados de la guanosina Ya no tiene a la Adenina como base si no a la guanina como base; existe un traductor de energa anlogo al atp que se llama el GTP entonces en este caso seria la GUANOSINA TRIFOSFATASA que puede eventualmente perder un grupo fosfato y convertirse en GDP y

cuando libere ese grupo fosfato pues libera energa y en cambio cuando necesitamos guardar energa porque el proceso es un proceso exergonico entonces la guardamos volviendo a formar a partir de GDP nuevamente GTP Entonces tambin es un traductor de energa , no utilizamos indistintamente ATP o GTP en realidad cada uno de ellos esta asociado con la interaccin de un proceso metablico especifico; en el ciclo de krebs hay un paso donde especficamente se sintetiza una molcula GTP y vamos a ver (si alcanza el tiempo si no revisar) en la sntesis de proteinas por ejemplo la molcula que da energa para ir ligando Los distintos aminocidos y formar la cadena polipeptidica es el GTP all no interviene el ATP Entonces este GTP es un regulador alosterico del AMPc. Cuando la hormona llega a la clula blanco reconoce un receptor de membrana y se pega all ,por lo tanto activa a la protena G, y la protena G es dependiente de un GTP , se remplaza en una de las moleculas y se hidroliza en GTP para que la protena G pueda ir a activar a la adenilato ciclasa y luego esta permita la sntesis del AMPc. Por esa razn se dice que es un regulador alosterico del AMPc, porque su disponibilidad en el interior de la clula es lo que permite en realidad que se active o no la adenilato ciclasa y si no hay adenilato ciclasa activada simplemente no se forma AMPc, entonces ambos van a ser dependientes . y asi como tenemos de segundo mensajero al AMPc tambin esta el GMPc con la particularidad de que en general los dos segundos

mensajeros van realmente a intervenir en reacciones contrarias dentro de la estructura, un ejemplo si la dilatacin de la pupila es activada por el AMPc entonces la contraccin de la pupila es activada por el GMPc , si la musculatura se contrae por el AMPc entonces el GMPc seria el responsable de que la fibra se relajara entonces asi sucesivamente las funciones de los dos son antagnicas cuando estamos hablando de que activan el mismo tejido porque eventualmente pueden no necesariamente hacerlo asi . El GMPc se forma por la hidrlisis del GTP tambin se liberan dos grupos fosfatos y el que queda forma un estructura cclica entre la ribosa en la posicion 5 y el carbono de la posicion 3 y estando cerrado pues se mantiene activado entonces se mantiene la funcin del segundo mensajero del GMPc . Esta estructura es formada por una enzima que acta sobre GTP y se llama guanilato ciclasa ,osea tiene una enzima especifica para formar asi como el AMPc era formada por la adenilato ciclasa, pero en cambio la hidrlisis de la molcula, osea la ruptura de ese anillo cerrado lo hace la misma enzima una fosfodiesterasa igualita puede hidrolizar AMPc o al GMPc en ese sentido esta enzima va a ser una enzima que acta tanto sobre el segundo mensajero AMPc como al segundo mensajero GMPc y en muchos tejidos la accin de los dos mensajeros es antagnica. En donde debemos dejar independiente los derivados del Uracilo esta molcula esta en la sntesis de glucgeno, para que la glucosa pueda ser reconocida

como una molcula que se va a almacenar necesita unirse a un UDP entonces los derivados del Uracilo en general funcionan como sombreros y son nucletidos activadores de moleculas de naturaleza carbohidrata para la sntesis, para el almacenamiento de esa molcula entonces por eso un UDP estara un uracilo bifosfatado o una uridina bifosfatada para decir que el nucleotido completo va a unirse a la molcula de glucosa y forma lo que se conoce como la UDP glucosa Esta es la que interviene en el proceso de epimerizacion o mejor dicho de formacin de polmeros de carbohidratos como por ejemplo un glucgeno para el almacenamiento de la estructura, si no se une al UDP esa molcula no es reconocida como una molcula que se puede almacenar o que se puede polimerizar entonces su funcin seria como de servir de capuchn de reconocimiento para el carbohidrato para la sntesis o almacenamiento. Y lo vamos a ver aqu que hay otro degrado de los carbohidratos al cual se le puede unir un UDP que se llama el acido glucoronico, este es derivado de la glucosa que se forma en el interior del hepatocito en el hgado y que permite el transporte de una molcula que se forma en nuestro organismo que se llama la BILIRRUBINA . Esta se une a la molcula del acido glucoronico solo si este esta pegado a un UDP entonces para poder unir al UDP esa molcula de bilirrubina se forma este dmero UDP-acido glucoronico y de esta manera queda el acido glucoronico activado para poder unir a la bilirrubina. Cuando la bilirrubina se une al acido se

conoce como bilirrubina conjugada o bilirrubina hidrosoluble o bilirrubina directa. Significa que esa molcula de bilirrubina que es altamente insoluble acaba de volverse soluble gracias a la unin al acido. Estas moleculas activadoras de UDP no quedan incorporadas en el polmero cuando intervienen solo sirven para activar a la molcula y permitir el reconocimiento y cuando se forma el polmero se retiran y son eliminadas para cargar nuevas moleculas de glucosa o de acido glucoronico. Algo anlogo a eso hacen los derivados de la histidina entonces cuando tenemos seis nucletidos de Citocina ellos hacen un proceso similar para ayudar a reconocer en este caso los derivados del grupo de los lpidos. Para hacer la biosntesis de lpidos, para sintetizar triglicridos y acumularlos en el tejido adiposo las moleculas de acilglicerol osea los cidos grasos se unen a unidades de CDp Citocina bifosfatada para que de esta manera sean reconocidos para la formacin de los polmeros de los cidos grasos que en general son triglicridos porque unidos a una molcula de glicerol tienen tres posibles puntos de unin de los cidos grasos. Lo mismo lo hacen con la colina que esta haciendo parte de un lpido combinado que es la esfingomielina y lo mismo hacen con la sntesis de los fosfogliceridos, ellos van a intervenir como moleculas que hacen el mismo papel que el UDP en los carbohidratos haran ellos como activadores pero en la sntesis de derivados de los

lpidos, mas especficamente lpidos compuestos o de cidos grasos, son los que eventualmente se van a almacenar . Y algo anlogo a eso hacen los derivados de la citidina entonces cuando tenemos 6 nucletidos de citocina, ellos hacen un proceso similar para ayudar a reconocer en este caso no los derivados de los carbohidratos si no de los grupos de los lpidos, entonces para hacer la biosntesis delos lpidos, para hacer mas especifico para sintetizar triglicridos y acumularlos en el tejido adiposo las molculas de triacilglicerol osea los cidos grasos se unen a unidades de UDP (citocina bifosfatada) para que de esta manera sean reconocidos para la formacin de los polmeros de los cidos grasos que en general son triglicridos porque recuerden que unidos a una molcula de glicerol pues tienen tres posibles tres posibles tres puntos de unin de los cidos grasos, lo mismo hacen con la colina que esta haciendo parte delos lpidos combinados que es la esfingomielina y mismo hacen con la sntesis de los fosfogliceridos entonces ellos van a intervenir como molculas que hacen el mismo papel UDP , en los CH ellos hacan como activadores pero en este caso de la sntesis de derivados de los lpidos mas especficamente lpidos compuestos o de cidos grasos que son los que normalmente se van a almacenar. Queda claro que estas molculas pueden funcionar de manera independiente como monmeros y ya los

haban conocido ustedes en todas esas seccionales que yo presente, fjense que el UDP es un nucletido Ahora vamos a centrarnos en mirarlos ya no como monmeros sino como polmeros es decir no tengo un nico nucletido sino tengo miles o millones de nucletidos formando una cadena entonces tenemos en este caso tenemos lo primero es como incorporo si me quitan la estructura, entonces la estructura forma varias unidades de nucletidos gracias a que ellos van mediante el fosfato, entonces la polimerizacin es mediante enlace fosfodiester, Porque fosfodiester? Porque el grupo fosfato que estaba en la posicin 5 de este nucletido viene y reconoce la posicin 3 prima de la anterior , entonces el fosfato queda por aqu unido por un enlace ester y por aqu unido por otro enlace ester, por esta razn en un enlace fosfodiester , porque pega este nucletido y ese nucletido mediante la unin con el grupo fosfato, y el siguiente llegar de la misma manera y el siguiente llegara de la misma manera e incorpora estos dos unidos entonces a travs de los carbonos 5 prima y 3 prima delos dos nucletidos adyacentes. Cuando nosotros los nucletidos sueltos y vamos en forma de ADN o ARN necesitamos que se forme ese enlace fosfodiester para que se pegue. unir estos nucletidos para formar una cadena ser un proceso de anabolismo o de catabolismo? Anablico porque estamos formando con unos monmeros un polmero, es un proceso endergonico estamos sintetizando gastando o consumiendo

energa. Y de donde sale eta energa? Como saben una clula que va a sintetizar una hebra nueva a partir de una viejita recuerdan es un proceso semiconservativo. La clula no sabe en que orden van los nucletidos, alista muchas unidades de todos tipos por que no sabe si necesitara mas de uno que de otro, entonces como no sabe hay muchos y esos que llegan tienen una particularidad que es la que les va a permitir generar la energa . cual ser cuando queden aqu incorporados? Por ejemplo miren este primero tiene una purina o pirimidinas? Pirimidina Cual? Adenina porque solo tiene el grupo amino. Ser una adenosina o desoxiadenosina? La posicin ds prima es la que esta a la derecha de la tres prima, no se ve un OH entonces es desoxirribosa, adems fjense que se ve una timina, ni modo que sea ADN. Entonces lleva una adenina una desoxirribosa y cuantos fosfatos ven? Uno. En resumen la llamaramos desoxiadenosinamonofosfatada (DAMP), un nucletido de adenina unido a una desoxirribosa y solo tiene un grupo fosfato, por aqu es por donde viene la energa. Esta DAMP podra ser totalmente DMP o ATP.? Si, entonces la energa que se necesita para la sntesis del polmero viene dada por los mismos nucletidos, por los 4 nucletidos ; no llegan monofosfatados, llegan trifosfatados siempre, entonces llegara desoxiATP, desoxi TPP? (no entiendo bien que dice) desoxiGTP y desoxi PTP ( que seria timidina

trifosfatada) y la hidrlisis de los dos fosfatos que le van sobrando, la quitada de los dos fosfatos es la que libera la energa necesaria para formar el enlace fosfodiester, entonces si tuviramos nucletidos que no vinieran difosfatados no tendramos la capacidad de hacer la sntesis porque el proceso es endergonico, requiere energa y si no me la donan, entonces no tengo la manera de formarlo. Condiciones necesarias para sntesis: que los nucletidos lleguen trifosfatados y su hidrlisis es la que libera energa para la sntesis de la molcula. En realidad los polmeros que se forman solo se van a diferenciar por ese detalle llamado, hace o hacen solo en la posicin dos prima y las bases van a variar solo el uracilo y la timina dependiendo del nucletido. funciones de los polmeros en el caso del ADN el mas importante de todos, la transmisin de los caracteres heredados, determina las caractersticas de la especie por eso los conejos dan conejos, gatos a gatos. Porque la especificidad de especie esta dada por la transmisin de los caracteres heredados y esa transmisin a su vez va ir ligada con un numero cromosmico y con una secuencia de las bases, eso es lo que determina en ultimas la especificidad. Y otra de las caractersticas que tendra el material es por lo tanto generar la diversidad, en una misma especie todos no somos iguales y donde radica la diferencia en algunos sutiles de algunos nucletidos dentro de nuestra estructura, y vamos a ver que esa variabilidad ni siquiera llega al

0,1 %. Entonces de los 10 a la 9 pares de bases que tiene un genoma haploide nuestro, variamos en un 0,1% y eso es lo que nos hace que todos seamos humanos, pero ese 0,1% determina que uno tenga ojos claros, marrn, pelo rizado, liso caractersticas ya sutiles dentro de la especie. Pero que pasa si los cambios son ms grandes, si los nucletidos no varian en un 0,1 % sino varan en un 1 % o 2 % entonces empezamos a crear lneas distintas y aparecen especies unas a partir de otras, por eso todos los seres vivos presumimos que vinimos de un mismo ancestro, y a partir del desarrollo de este individuo ancestral la diferenciacin se dio por ganancia de cada vez mayores cambios en el materia y por lo tanto en las caractersticas que generan diversidad. Una especie puede dar origen a otra cuando adquiere grandes cambios como para que las dos especies sean distintas. Cuales son las funciones del otro tipo de material gentico En el inicio de la vida e el ARN fue el primer acido nucletido y a partir de el se creo todo lo dems, pero a lo largo del desarrollo de los individuos el ADN empez a comandar la celula y genero una dependencia del ARN, de tal manera que nosotros tenemos ARN por que se puede sintetizar a partir de ADN, el ADN se ubico en un sitio cerrado llamado nucleo y la funcin de entrar y salir de este la empez a cumplir el ARN volvindose asi dependiente del material gentico que esta en el ADN.

Cual es el papel funcional del ARN dentro de la celula Primero es un intermediario para que fluya la informacin desde el ADN hasta la protena y ese proceso de sintetizar una protena va tener dos pasos especficos que son primero copar a partir del ADN que tiene la informacin del gen, un primer RNA que se llamara mensajero, este proceso se llama transcripcin, depues el RNA mensajero en el citoplasma se acopla a los ribosomas y los ARN de transferencia para formar una protena, este segundo proceso se llama traduccin. El ultimo ARN que nosotros utilizamos determina las secuencias de los aminocidos dentro de una protena y por lo tanto si los nucletidos de un ARN cambian, cambia tambin la secuencia de los aminocidos, que puede generar un cambio en la funcionalidad de la protena. Si es catastrfico el cambio se vuelve incompatible con la vida, el impacto de una modificacin depende del lugar dentro de la protena y de la funcin que la protena ejerza en la clula. El proyecto del genoma humano fue presentado hace 4 aos y esta hablando de cosas particulares 1. La variabilidad de los seres vivos, somos supremamente comunes dentro del material gentico, las variaciones entre los seres humanos es mas o menos un nucletido cada mil pares de bases.

2. Nosotros diferenciamos de nuestro ancestro ms cercano, el chimpanc solo en un 2% del contenido de nuestro nucletidos. 3. Pensbamos que tenamos alrededor de trente mil pares de bases, es decir treinta mil posibilidades de generar protenas, ni siquiera llegamos a los diez mil. Vamos a definir cuantos genes son en total cuando se definan todos los sitios promotores que hay dentro del genoma y de esa manera determinar cuantos genes hay. A partir del genoma humano aparecen dos preguntas 1. Si nosotros funcionalmente manejamos mas de diez mil protenas y solo tendramos diez mil genes quiere que una de las dos o varios genes se asocian para formar una protena o el mismo gen tiene la capacidad de formar protenas distintas, este es un ejemplo de fenmenos epistaticos o fenmenos de cambios en la expresin proteica que van a estar derivados de cual es la funcin del acido nucleico dentro del ncleo de nuestra clula. 2. La variabilidad cuando tratamos de identificar a un individuo, hay que buscar donde cada diez

mil nucletidos hay un cambio, por que estamos claros que en las regiones donde hallan genes, en los segmentos codificantes para protenas, es improbable los cambios, dentro de una misma especie. Las secuencias de exonatina son en general las que ms se copian con fidelidad, y las que menos se cambian. Los segmentos donde nosotros vamos a buscar nuestra diferencias estaran dados en las regiones no codificantes. Cuando lleguemos a la parte prctica nos vamos a suscribir a este segmento que sern los puntos donde vamos a encontrar diferencias entre nosotros porque no van a tener un impacto sobre el genotipo, no nos van a cambiar las protenas y por lo tanto no nos van a cambiar la funcionalidad.

CLASE III (1H) CARACTERISTICAS DEL ADN Repaso de la clase anterior Hablamos que la forma de organizar polmeros corresponde a que los nucletidos mediante la

formacin de enlaces fosfodiester que me van a permitir crear una direccionalidad primero que todo y que la forma antes de la estructura tenemos una cadena paralela y la otra al contrario vamos a poder afrontar los distintos enlaces, o estructuras remplazadas que tiene las bases y con base en ellos generar los puentes de hidrogeno para crear, por ejemplo en el ADN una estructura que sea de doble cadena,. Hablamos de que el ARN por el contrario es de cadena sencilla, pero si eventualmente dentro de la propia cadena existen base bases complementarias ellas se pueden plagar sobre si y formar los puentes de tal manera que generaran a la estructura, lo que llamaramos nosotros una estructura secundaria o un modelo de plegamiento , que bsicamente permitira adquirir una estructura espacial que facilitara el proceso, como es el caso de los RNA de transferencia para reconocer el anticodon y para reconocer el sitio por el cual se va a unir el aminocido que se van a llevar hacia el punto en donde est el RNA mensajero, unido al polmero. (En la diapositiva) Aqu ven una estructura sencilla, en la que estamos viendo que hay cuatro nucletidos unidos y en el que observamos los enlaces de fosfato, con respecto a la posicin 3 y 5, por eso son fofodiester, porque cada uno de ellos es una unin de tipo ester, y como ven uds cuando se forma un polmero obtenemos un esqueleto en la parte externa

que es siempre igual, porque ser siempre la desoxiribosa y los fosfatos, y en realidad lo que puede cambiar es la parte interna de la estructura, es decir, el orden de las bases nitrogenadas, entonces ellas en realidad son las que portaran la herencia, determinar la secuencia de bases es determinar que est sucediendo en esa secuencia del material. Dijimos que cuando tenemos de azcar a la ribosa, estamos hablando del ARN, cuando tenemos a la desoxiribosa en la posicin 2, tenemos el acido de tipo ADN. Una de las particularidades de ese material es que vara, el material gentico vara de manera natural y espontanea, entonces el concepto que la mutacin es una cosa demetera para un sistema gentico es un falso total, porque realmente, gracias a que los organismos mutan, adquieren combinaciones que los hacen selectivamente mejores, o adquieren combinaciones que hacen que resistan especficamente a una situacin adversa, o pueden generar tantos cambios, que aparezca una especia a partir de otro anterior, entonces el mecanismo de mutacin puede generar en realidad, dos captulos distintos, uno que sera la variabilidad y llevado de la variabilidad el concepto de polimorfismo, que es la capacidad que puede tener un gen de tener ms de 3 alelos distintos en la poblacin, y con ello entonces incremente el nmero de efecto de posibles combinaciones, y por lo tanto las diferencias entre los individuos, y otro concepto que seria la mutacin vista como un cambio que puede llegar a generar una

modificacin en la normalidad del comportamiento del sistema gentico, que lo llamaremos enfermedad gentica, y que va a tener 3 grandes captulos, uno que es la gran cantidad de cambios como para que la modificacin sea visible a nivel cromosmico, entonces se llamara enfermedad gentica de tipo cromosmico. Si el cambio es tan pequeo, tan molecular y simple, que nicamente cambiemos un nucletido, entonces esa diferencia si eventualmente ocurre sobre una regin codificante para una protena, pues nos va a cambia la protena, y el impacto puede variar, puede ir desde simplemente tener una nueva variante que no pasa de tener un cambio en el genotipo, hasta llegar a tener un efecto catastrfico, como que no se transporte el oxigeno por parte de la hemoglobina. Entonces los cambios van a ser distintos, pero en ese caso van a agrupar a un segundo tipo de enfermedad gentica que se llama, enfermedad de tipo gnico o mendeliano, porque se puede predecir cul es su mecanismo de herencias, o tambin se puede llamar como monogenica para decir que depende de una solo gen. (En la diapositiva) Aqu tienen, por ejemplo, una chiquita albina en la que el defecto es especficamente un cambio en una enzima de que no permite la produccin de manera correcta de la melanina, entonces eso se refleja como una despigmentacin. Vamos a hablar de un tercer tipo de patologas, que se denominan las enfermedades genticas complejas o multifactoriales o poligenicas, porque bsicamente

hay una combinacin de factores genticos, acompaados de factores ambientales, que se necesitan que se cumplan en un mismo individuo para que la patologa se manifieste. Entonces para poder entrar a hablar de lo anterior, vamos a ver lo siguiente: 1. El material gentico, y especficamente en esta forma que dijimos que era polimerica, vamos a tener una secuencia de nucletidos que correspondera, como lo que llambamos en protenas la secuencia primaria de a.a, y cuando nosotros colocamos eso nucletidos en un medio como el del ncleo de la clula, ellos adquiere una conformacin espacial, entonces esa estructura que se forma se denomina la forma secundaria o lo que llamaramos sistema de conformacin espacial y la estructura que es en forma de hlice que se gana. Entonces esa estructura secundaria puede eventualmente variar, y vamos a ver que los factores de que tiene alrededor son los responsables de cmo varia. Nosotros podemos tener modelos de esos polmeros de forma lineal, y es el caso de nuestro material gentico, tiene un inicio tiene un final, entonces cada molcula de ADN nuestro corresponde a un cromosoma de nosotros, entonces estn separadas las

molculas de los cromosomas 1, 2,3. En cambio existen otros organismos vivos en donde su modelo es una estructura completamente cerrada, formando una especie de crculo en el que la doble hlice est sellada para ambas cadenas, entonces esa estructura tendr un modelo de replicacin, o un modelo de generacin distinto, de forma lineal. Podramos tener cualquiera de los dos, y la diferencia se encuentra en el organismo; los procariotas y algunos virus, tienen el modelo de ADN circular, tambin en el ADN mitocondrial, y en cambio el ADN nuestro, que tenemos en el ncleo es lineal. Alguna vez podramos concebir el ADN nuestro como una nica tira completa que reuniera todos los cromosomas?, existe as, por ejemplo como cuando esta relajado en un ncleo interfasico? El material gentico nuestro nunca forma una sola hebra porque eso sera un gasto energtico grandsimo para la clula, para que va pegando fragmentos y luego cuando se va a dividir le va a tocar formar solo cromosomas y partirse, y luego otra vez a unirse para volverse a separar. Entonces hay hebras de ADN cada una tan larga como el cromosoma que forma, entonces si tenemos cromosomas acrocentricos, pues habr un ADN mas cortico, y si tenemos, por ejemplo,

un metacntrico grande, pues tendremos una hebra muchsimo ms larga, pero cada cromosomas, es decir los dos homlogos, tiene dos tiras por aparte y cada uno de ellos tendr su segmentos. En otra palabras tenemos 46 fragmentos de ADN separados, ubicados dentro de ncleo, y adems dentro del ncleo tienen una posicin especifica, y se ha visto que ella guarda relacin con muchas cosas, como por ejemplo, la capacidad de seleccionar el homologo para que cuando tengamos eventos de recombinacin no se vaya a combinar un 5 con un 8, si no que fsicamente siempre se encuentran cerca los dos homlogos, y adheridos en general a la membrana nuclear, para favorecer el proceso de reconocimiento cuando lo vamos nosotros a realizar. La estructura tridimensional del ADN fue descrita en el 53 por Watson y Crick, y bsicamente tiene las siguientes caractersticas generales: 1. Demostraron a travs de la difraccin de rayos x, y luego la proyeccin para observar cmo era la estructura, que las dos hebras de ADN eran antiparalelas 2. En la estructura helicoidal las hebras estaban girando de una manera simtrica, como si existiera una estructura recta en el centro, como si hubiese un eje, y alrededor de ese eje se organizaran las hebras, por eso ese modelo semeja una escalera en caracol, porque en

realidad toda va enrollada alrededor de un eje central imaginario. 3. Siempre vamos a encontrar a las base ubicadas en la parte central, y recuerdan que cuando vimos la estructura planar dijimos que acostadas, formando como especies de peldaos, mientras que el azcar y los fosfatos van a estar dndole estructura o soporte a la parte externa de la doble hlice, y a partir de all, entonces podramos saber, que si nosotros conocemos como es una hebra, conocemos que por complementariedad, sabiendo siempre se aparean de manera exacta, vamos a poder predecir como son las secuencias de la hebra de enfrente, porque siempre una adenina aparea con tinina , y guanina con citocina. 4. Las bases son las que pueden llegar a cambiar en el modelo, necesariamente son ellas las que van a aportar la herencia, entonces cuando se forma la doble hlice de dos cadenas que inicialmente estaban sueltas, despus se relacionan entre si, porque forman los puentes, y luego giran, y forman la estructura secundaria o forma helicoidal del materia gentico, lo primero que hay que decir es que, fjense que

las flechitas de giro de aparecen en la estructura (en la diapositiva), aparecen para que la estructura gire hacia la derecha, entonces el modelo de ADN que tenemos nosotros en nuestras clulas se dice que es destrogeno, porque en realidad as giran las bases para poder formar las estructura helicoidal. Para que se forme la hlice una gira a la derecha y la otra gira a la izquierda y eso le da el giro de torsin. Entonces cuando la estructura gira, aparece dentro de ella un surco, que van a formar se de manera que un surco mayor, esta seguido de un surco menor, luego uno mayor y as seguidamente. La importancia de estos surcos, es que son los sitios de reconocimiento de los llamados factores de transcripcin, que es el nombra general que se da a las protenas que ejercen funcin reguladora de la transcripcin. Entonces nosotros vamos a tener presente, que cuando hablamos que un organismo tiene un proceso de diferenciacin celular, que si recuerdan arrancan alrededor de la semana nmero 4 del embarazo, y vamos hacer que las clulas torcipotentes se empiezan a dividir en las tres grandes lneas que van a formar los

rganos posteriores, pues en realidad cada celulita tiene el mismo material gentico, entonces Por qu se expresan genes distintos en cada una de ellas? Hay muchos mecanismos que van a generar esa diferenciacin celular, pero el mas importante es la no expresin de algunos genes, debido a que estn bloqueados o cubiertos o tapados por protenas que funcionan como protenas reguladoras de la transcripcin, entonces la disposicin de esas protenas, obedecen a varios modelos, entre otros uno que se llama a los dedos de zinc, porque realmente hace eso, se ubica como si fueran estructura de dedo tapando un buen segmento dentro de las regiones, dentro del ADN, entonces es uno de los mecanismos para regular negativamente, y en otras oportunidades se puede hacer positivamente, los distintos genes y con eso buscar que en ciertas clulas se expresen algunas caractersticas y en otras clulas otras caractersticas diferentes, entonces siempre vamos a tener presente que todas nuestra clulas TIENE EL MISMO MATERIAL GENETICO, LA MISMA CANTIDAD, LOS MISMO GENES, PERO LA DIFERENCIACION ESTA DADA BASICAMENTE

POR LA EXPRESION DE EXPRESION DE OTROS.

UNOS

LA

NO

Cmo hacemos, por ejemplo, para que nosotros tengamos siempre protenas a nivel de la clulas, como las que estn ubicadas dentro de la membrana celular? Sern sintetizadas por genes que estn tambin en el ncleo? Probablemente si, y si todas las clulas deben tener esas protenas, como hacemos con la regulacin de esos genes? No se suprimen, en todas las clulas existe un mnimo de protenas que siempre se van a expresar, y a su vez, eso quiere decir que existirn unos genes que siempre estn activos, que son los que corresponde a protenas bsicas que necesariamente tiene que estar presentes en todas las clulas y son bsicas porque ellas determinan la integralidad de la estructura cerrada, sea como la definicin del entorno de la clula. Entonces eso genes se conocen con el nombre de genes caseros o House keeping, que significan genes de expresin permanente en todas la clulas porque las protenas que se derivan de ellos con bsicas para el funcionamiento de cualquier estructura, y ya los dems entraran en juego bsicamente de que es lo que se est dando dentro de la estructura celular, entonces habrn clulas como los hepatocitos que se especializan en una cosa, y otras como las fibras cardiacas que se especializan bsicamente en el movimiento de contraccin.

Un cono o un bastn de ojo, eventualmente podra llegar a producir albumina como lo hace un hepatocito? En condiciones normales NO, pero si se le quita la regulacin podra llegar a hacerlo. Esto es lo que ocurre en el cncer, por eso el inicio de la malignidad de la clula cancergena es esto, la perdida de la regulacin de los genes que estaban apagados en la clula y entonces cuando una clula se maligniza, se des diferencia, empieza a expresar protenas como oncognicas inciales embrionarias, antgeno carcino embrionario, alfa-protena, CA-ceto 25, sea protenas que bsicamente estaban en la clula antes de que ellas se diferenciaran a ese organismo, y parte de eso es precisamente a que el cncer es una enfermedad de origen gentico que tiene como primer punto de partida la perdida de la regulacin del ciclo celular y por ende , a partir de all, la perdida de la diferenciacin con base en que los genes que estaban regulados se desregulan y empiezan una clula a producir otras cosas que normalmente no debera producir, porque ya no obedece a un mecanismo de control de diferenciacin celular. Los surcos y su importancia en la regulacin de la transcripcin, porque vamos a ver muchos otros puntos donde la clula puede regular el mecanismo de diferenciacin, pero el ms importante y el ms usado es a nivel del que se llama la transcripcin. El modelo que presentaron Watson y Crick es el que realidad existe en las clulas nuestras vivas y hoy se

conoce como la forma B, que significa que es la forma natural como el ADN esta dentro de la clula. Ese modelo natural tiene una caracterstica: - Su dimetro est definido, el dimetro es totalmente homogneo por la caracterstica de asociar una base grande con una pequea, de tal manera que siempre se conservaba el dimetro y es alrededor de 2.4nm. La vuelta completa que da un giro para forma la estructura helicoidal, es de 3.4 nm y deben caber en ese espacio alrededor de 10 bases nitrogenadas, 10 nucletidos son los empleados para formar una estructura en forma de estructura en forma de hlice. Esto es muy importante bsicamente porque esta distancia a la que estn ellas es exactamente la misma, la distribucin es muy homognea, y esto es importante para las enzimas, especficamente a las enzimas que hace proceso de reparacin cuando encontramos un nucletido incorrecto, o a la polimerasa que es al que tiene que poner secuencia cuando esta replicando. Esta homogeneidad podra perderse cuando se ponen ms o menos secuencias, y esto puede ocurrir cuando algunas estructuras con funciones mutagenicas, como los agentes intercalantes, se

meten dentro del material gentico, y se meten como si fueran un sndwiches entre las bases, y para que este agente intercalante quepa necesariamente va hacer separacin de las bases, y al separarlas pues al realizar la replicacin del segmento, empieza al enzima a colocar las bases, y al captar ese espacio anormal, la enzima pone bases nitrogenadas inventadas, y dependiendo de qu tan grande sea el espacio del agente intercalante ser el numero de bases nitrogenadas que ponga, porque lo que tiene que entrar al enzima a conservar es la dimensin que normalmente hay, entonces en realidad ese tipo de mecanismo mutagenico lo que induce es a que el agente intercalante genere la posibilidad de que las enzimas de tipo polimerasa ubique mas nucletidos en los segmentos en donde ellos estaban puestos, para conservar la distancia entra base nitrogenada y base nitrogenada, entonces esa es la razn por la cual la distancia debe ser tan exacta entre cada una de ellas. Si dijimos que la vuelta tiene 3.4nm y que caben 10 pares, quiere decir que cada par esta alrededor de 0.34nm entre pareja y pareja.

Pregunta de Jorge: Metabolitos de medicamentos pueden ser agentes intercalante? No, los medicamentos que tiene efecto teratogenicos son por otras razones, pueden formar puentes intracadena, inducir la inhibicin de sntesis de protenas, peor que se metan dentro del material no. Si pueden causar oxidaciones o modificaciones de los radicales que llegan, la timina se puede volver un uracilo si perda su estructura metilada, pero cambiar la distancia entre las bases no. El naranja de acridina funciona de esa manera, y el bromuro de etilo que nos permite visualizar el material. Esta forma de estructura que tienen las 10 bases, que tiene ese dimetro de 2.7, que forma un surca mayor y menor alternado en la estructura y que finalmente gira hacia la derecha que es lo que se conoce como la forma B del ADN. (En la diapositiva) aqu se ve como estn organizadas las bases acostadas y los azucares de pie, las cadenas son contrarias, antiparalelas. Aqu se ve como la cinta va formndose como si tuviese un eje, que no existe en la realidad, pero por eso se dice un eje central imaginario alrededor del cual esa cinta esta girando. Las caractersticas que le dan al ADN ese modelo que presentaron Watson y Crick, que es el que tiene la clula: 1- Esa estructura permitira que cualquier orden de bases existiera, es decir, es una estructura compatible con cualquier tipo de nucletido y

eso es lo que hace que existan tantas especies y que eventualmente un mismo gen pueda tener distintas diferencias, o diferentes nucletidos uno que otro dentro de un mismo grupo de personas de una misma especie, porque el modelo sera compatible con cualquiera. 2- Si yo conozco una de las dos hebras, inmediatamente puedo predecir la de enfrente, porque el modelo siempre conservara el hecho que es semi conservativo, anti paralelo y es complementario. Hace 15 aos se descubrieron otros modelos de ADN, uno de ellos obtenido en el laboratorio. El B es el modelo que est en la clula, la forma A es como si fuera el modelo B que de alguna manera se estuviera espichando, como si se hubiera contrado, entonces bsicamente se vuelve ms ancho y la distancia entra las bases disminuye y este es un modelo obtenido netamente en el laboratorio que es que se observa a la forma B, cuando est en un medio con mucha concentracin de sales y por ende deshidratado, sea con una disminucin de agua. Entonces la forma A se consigue si las condiciones son estas desde el punto de vista de pH, y esto no se puede dar en una clula vivas porque para que se de esos cambios drsticos ya se estara comprometiendo la vida de la clula, pero el modelo simplemente muestra que en el

laboratorio la estructura espacial puede cambiar y podra cambiar en base a las condiciones en la que la estructura estuviera. En cambio el modelo Z si se puede encontrar dentro de la clula viva, entonces ya mencione un mecanismo de regulacin que es el de las protenas que se llama factores de transcripcin y un segundo mecanismo es este de formar el ADN Z, si uds miran la forma A es el mismo modelo B en un medio de concentracin elevada de sal, entonces es un modelo que tambin es destrogino, es un modelo en que el surco mayor es poco ms profundo, se profundiza porque el modelo se recoge y caben ms bases por cada vuelta completa. En cambio el modelo Z, es un modelo el cual el ADN en vez de girar a la derecha gira a la izquierda, entonces eso significa que es un modelo levogino, y esto puede ocurrir porque se a encontrado que: - En la regiones codificantes existen muchas mas dupletas de guanina y citosina, que adenina tinina, esa es una particularidad que se ve dentro del material y por eso significara que en las regiones no codificantes o en lo que vamos a ver como el ADN mediana y altamente repetido hay muchas mas adeninascon timinas. En ese orden de ideas cuando tenemos varias dupletas en un pedazo de ADN que sean por ejemplo, guanina citocina guanina citosina guanina

citocina, esas regiones pueden eventualmente in vivo girar y colocarse en forma levogina, y en forma levogina forman una nueva estructura, porque cuando la molcula gira, lo que hace es que afronta los fosfatos de dos nulceotidos seguidos, y en ese punto con las carga PO4 negativo con 8 valencias negativas, la repulsin es muy grande entonces la estructura ya no es as como helicoidal laxa, si no que forma un estructura drstica porque los fosfatos tienden a distanciar lo mas que pueda los unos de los otros, entonces forman la estructura en forma de Z, y al formar esa estructura, los surcos mayores y menores tienden a desaparecer hacindose muchos mas pequeos, y adems la estructura se alarga, sea se disminuye el dimetro que tenemos bsicamente por la repulsin de los fosfatos.

Para que una clula que tiene el ADN en forma B, eventualmente en unos segmentos va a intercambiar a la forma Z? Lo que est muy claro es que la forma Z no se puede formar en cualquier segmento del ADN, y mucho menos comprometer toda la hebra de un cromosoma, hay algunos segmentos en los que eso ocurre y mientras tanto el resto esta de la forma B.

Entonces imagnense uds (en la diapositiva) que yo tengo aqu un segmento de ADN B, aqu giro a la izquierda y es de forma Z y el resto sigue siendo B. Ese fragmento que giro a la izquierda lo hace como un mecanismo de regulacin porque si all en ese segmento hay un sitio promotor de la DNA polimerasa, la cual ubica promotores para saber donde hay un gen para transcribir, entonces el ADN al girar a la izquierda lo que hace es que esconde los nucletidos de ese sitio promotor y cuando la enzima pasa revisando no detecta que aqu halla un gen y por lo tanto no hace transcripcin de ese gen, pero no la har mientras los nucletidos estn en la forma Z , cuando el gen se necesita la forma Z vuelve y se interconvierte en forma B, vuelve a quedar la estructura normal y entonces ahora si va a poder transcribir el gen. Entonces sera un mecanismo de regulacin no para anular de manera permanente un gen, como si sera el de los factores de transcripcin que eventualmente pueden hacer que un gen nunca se transcriban, si no que es un modelo que ahce que a veces si y a veces no pues ser una caracterstica derivada de la condicin especifica de ese momento de la clula. Si tengo mucho de un determinado analito y necesito a la enzima que lo degrada pues voy a especificar esa degradacin, pero si no tengo el analito para que quiero producir la enzima, entonces se regula negativamente la expresin de ella y una forma es pasarlo a ADN Z. Esto es una caracterstica propia del material, no necesita la ayuda de enzimas porque si

las enzimas ya las reconociera estaramos asumiendo que ellas estaran controlando la formacin de la estructura. Es al azar en el sentido que disponibilidad de sustrato en el medio la que funciona como mecanismo inhibidor o no.

La mutacin tambin puede generar cambios sobre la expresin, pero cuando estemos hablando de la mutacin estamos hablando de un modelo en el que algo se perdi con la regulacin normal y esto no es una regulacin normal, es un incremento de la expresin para una clula especfica y la sobre expresin la tiene probablemente un factor de transcripcin que incrementa la tasa de produccin de RNA. Caractersticas de los modelos: - El modelo B, es el propuesto por Watson y Crick est girando a la derecha al igual que el A y el Z gira a la izquierda. El dimetro de la hlice es de 3.4 nm en el modelo B, un poco ms ancho en el modelo A y mas flaquito en el modelo Z, porque al tener los fosfato en posicin en zigzag, pues hace que la estructura se disminuya. Los surcos mayores y menores son ms profundos en el modelo A, y en el modelo Z prcticamente nada. Vamos a tener Diez nucletidos por cada vuelta en el modelo B, en el A en cambio caben ahora once y en el Z caben ahora dos, y aqu tenemos cuantas bases quedaran por cada uno de los

Tengamos presente que la forma Z si la encontramos en la clula viva, que es una forma inter convertible, y no es una estructura que se forme en cualquier parte del ADN, si no que tiene como requisito dupletas o triplitas de guanina citocina en ese segmento donde se puede formar. No es un modelo de mutacin porque no cambiamos nada, solo es un cambio espacial, tridimensionalmente en la que la forma B que sera la estructura secundaria, pasa a la forma Z y pasa solo en los segmentos en los que se favorece su formacin.

espacios de la rotacin y eso pues ser del grado de cuantas a su vez caben dentro del modelo que nosotros estamos revisando. RTa a pregunta: Porqu caben ms? Porque la misma estructura que est haciendo que los dos nucletidos se separen por los fosfatos hace que esto se alargue, por eso es que queda mas delgadito y al alargarlo la vuelta en realidad gasta un espacio ms grande y van a caber mas nucletidos. Que otra propiedad tiene el material gentico que sea para nosotros importante en lo que vamos a revisar por ejemplo en el laboratorio? Pues funciona as como lo vieron en las protenas, si tiene una estructura tridimensional que en este caso es nada mas la forma B que bsicamente es secundaria no es terciaria porque luego no es que la doble hlice se pliegue y forme una estructura como una protena, no, se mantiene solo en lnea, solo que est girando alrededor de una hlice, esa estructura secundaria se puede perder. Y como se podra perder? Pues simplemente porque los nucletidos que estn afrontados en la parte central a travs de las bases pues pierden sus puentes de hidrogeno, entonces ese evento se llama como en las protenas una denaturacion, a diferencia de las protenas que en la gran mayora de ocasiones el modelo de denaturacion proteico es irreversible, en el modelo del ADN es totalmente reversible y entonces esta es otra cosa importante de tener siempre clara, Porque el ADN

siempre se devuelve a su origen? Porque como ser perder el ADN? que impacto puede tener para la clula que el ADN se le desfosforile? Bueno entonces tengan presente que el ADN como sea se recupera, y entonces solo existe un mecanismo en la existencia que lo puede destruir, la radiacin lo ataca pero se defiende, el pH lo ataca pero se defiende. La incineracin es el nico mecanismo que podramos tener para destruir el material , y porque lo destruira, si recuerdan por mas ceniza significa romper todos los tomos de una molcula , sea acaba con los carbonos , oxgenos etc. y pues de ah no queda nada, Entonces solo la incineracin y adems la incineracin total puede destruir el material, lo aclaro porque a veces en los procesos de cremacin quedan astillas o pedacitos del hueso, porque claro el gran conjunto pues se destruye pero pueden quedar pedacitos o fragmentos y esos pedacitos todava conservaran ADN que nosotros miraramos si eventualmente podramos recuperar , en realidad solo la incineracin total destruye el material . Lo dems no afecta? Claro que si no voy a decir que se re de la vida que se est quemando y no le paso nada, o como dijo su compaero le llego unas enzimas y le hicieron unas rupturas porque son exonucleasas pues claro que lo destruyen en el sentido de que lo parten , pero el vuelve y se reorganiza y claro que va a tener cambios y eso lo vamos a ver como uno de los mecanismos de reparacin, el ultimo que se activa cuando la clula ha

tenido muchos bombardeos , muchas mutaciones, pero siempre buscara volverse a organizar . RTa pregunta: toda la vida, y es la misma razn por la cual por ejemplo las bacterias que tienen esporas, esas bacterias que van por ejemplo en el esputo de una persona que llega y bota una secrecin en la calle y esta secrecin le puede dar el sol le puede dar el agua todo lo quieran y ah est nuestro microorganismo esporulado por aos. Cuando vuelve y aparece? Estas son las llamadas enfermedades re emergentes, porque lo nico que estn esperando es un organismo con una inmunodeficiencia para volver a infectar, el material ah est, y es la misma razn de que porque se deben baar las manos, para el virus ese que est ahora, por lo mismo, porque los microorganismos estn en el ambiente y van a resistir las condiciones adversas de este porque ellos tienen que sobrevivir, entonces no importa el tiempo ni los aos Tampoco hay que quedarse con la idea de que vamos a recuperar un material perfectamente lindo de una momia de hace 5000 aos comparado con sacarles a ustedes hoy , obvio que no, pero hay muchos marcadores genticos que estudiamos nosotros hoy en da que comprenden regiones pequeitas que va a dar tiempo, Un ejemplo : en los fragmentos de las torres gemelas los mecanismos normales que usamos para identificacin humana sirvieron para el 55% y el resto no, los otros 45% salieron con un mecanismo nuevo desarrollado que simplemente mide 20 pares

de bases 15 pares de datos y eso lo vamos a encontrar en lo que quiera, asi este muy destruido y por eso el otro 45% de los restos encontrados fueron identificados Hay prcticamente la posibilidad para encontrar todo. Rta A ESTUDIANTE : Pero en el proceso de autodestruccin vamos a ver que ella rpidamente los nucletidos que esta degradando para acabarse los puede volver a reutilizar y esa la vamos a ver como la va de rescate y salvamento y es la que en realidad ms se utiliza en la clula; que tal la clula rompiendo los nucletidos para ahora volver a crear una nueva clula , lo mismo que esta degradando vuelve a reutilizarlo y vuelva a usarlo, de tal manera que la tasa de destruccin real es mucho ms baja que lo que es la muerte celular porque vuelven y se reutilizan otra vez los nucletidos . Bueno queda claro que si tenemos las dos hebras, tenemos la estructura normal que conocemos, si obtenemos hebras separadas, hablamos de que el ADN se esta denaturando y estas dos hebras dije yo como toda la vida se reconocern y se quieren mucho, otra vez al ms mnimo intento aparecer nuevamente la estructura y esto es lo que se llamara renaturacion que significa volver al modelo inicial que tenamos. Cuales serian los mecanismos que haran que las dos hebras se separen? Uno ya lo habamos visto los cambios bruscos de PH tanto para alcalinidad como para acidez cualquiera de los dos funciona como un

mecanismo de denaturacion, porque la forma ceto de las bases pasaran a recibir hidrgenos y entonces los hidrgenos parados en el medio asociados con un hidrogeno de otra base se van a repeler y eso generara la denaturacion. Otro mecanismo podra ser por accin de enzimas pero eso no lo hacemos en el laboratorio porque es muy costoso. El otro aplicar una temperatura que pase de ms o menos 56 grados para arriba desestabiliza la estructura y hace que las bases se separen. Y entonces una temperatura de 70 de 80 o 90 va a generar denaturacion. Otra molculas qumicas podran ayudar a denaturar, pero tendran que tener condiciones tales como que pudieran llegar a reaccionar con las estructuras que estn formando los puentes , ese es el caso por ejemplo de la urea que tiene ese papel denaturante porque bsicamente se asocia a las bases , este papel tambin lo tiene la espermina que es un compuesto qumico que ayuda a separar porque se une a los radicales, tambin tenemos un detergente que se usa en laboratorio el SDS ( sodio doditin sulfato) que tambin ejerce la funcin de desnaturar las bases , hay muchos es decir compuestos qumicos que eventualmente compitan por los puntos de unin que tienen las bases formando los enlaces y por lo tanto si la base se asocia con ese compuesto pues ya no puede formar puentes . Una vez que esas condiciones vuelvan y desaparezcan otra vez vamos a tener la

doble hlice, entonces lo puse a 90 grados desnaturado, lo baje a 37 otra vez las hebras se unieron, lo lleve a pH de 4 desnaturado volv a ponerlo a pH de 7.4 otra vez las hebras unidas es decir no existe ninguna denaturacion en el ADN que sea irreversible, todas cuando las condiciones vuelvan a las inciales van a volver a permitir la formacin de la estructura.

de la RNA polimerasa para que no se produzca el proceso de transcripcin por que una vez se transcriba una regin, pues el proceso sigue adelante con la traduccin y la formacin finalmente de una protena. CLASE IV (1H) PROPIEDADES DEL ADN II existen varias formas como la materia se puede organizar un seres vivos y en el mismo caso como estrategia general de organizacin de la clula, pero en otro caso como estrategia para hacer uno de los mecanismos de regulacin de gentica, que hace que algunos genes se expresen y otros no, tiene que ver con la posibilidad de intercambiar la forma B en la forma Z, y esta asociado no con cualquier regin del ADN sino con regiones que tienen la particularidad de ser ricas en guanina y citosina (dupletas y tripletas), por esa razn se sabe que en realidad, a pesar que en el material gentico se tiene guanina, adenina, citosina y timina, hay muchas mas secciones de guanina y citosina concentradas en los sitios que llamamos genes, que en los sitios no codificantes, entonces esa particularidad hace que cuando hacemos regulacin para formar ADN Z, estamos hablando de que se va a organizar la estructura que necesita proteger un segmento de ADN, necesita protegerlo por que corresponde a una regin que codifica para formar una protena, y bsicamente proteger es en realidad no permitir el reconocimiento Entonces entre las caractersticas que nombramos, dijimos que el uno era un poco ms alargado y por lo tanto ms angosto, otros eran ms anchos, y que unos giraban a la derecha, corresponden al modelo dextrgiro. Mientras que el ADN cerca giraba a la izquierda y por eso adquira la forma zig-zag y por que se acercaban los fosfatos y esos fosfatos al tener cargas altamente negativas se iban a repeler y entonces ese modelo se considera de tipo levgiro. Este material gentico esta de doble hebra y puede formar los puentes, y mencionbamos inicialmente debido a que: 1. corresponden a formas ANTI. 2. las cadenas son antiparalelas, entonces exponan en la parte central las bases. 3. por que la propiedad tautolemica hacia que se favoreciera, en pH fisiolgico la estructura en la forma ceto, y eso hacia que tuviramos un tomo con una electropositividad, que seria el hidrogeno y uno con electronegatividad como es el oxigeno y eso era lo que atrae para formar un puente, que si bien es dbil, pero como son miles de ellos, permite que se la estructura se vuelva primero simtrica y segundo muy exacta.

Entonces as como tenemos doble hebra, puede pasar que la doble hebra se desaparezca y hay que recordar que existen mecanismos que permiten que las dos hebras se separaran.

DENATURACION

el pH, que puede ser o bien por arriba o bien por abajo, por que realmente va a modificar la forma ceto de las bases y las va a cargar en la forma alcohlica y esto hace que los dobles enlaces se rompan. La temperatura, entre mas uniones guaninacitosina, mas temperaturas necesitamos, entonces la denaturacin por temperatura va a variar tanto por el tamao como por el numero de repeticiones guanina-citosina del material, pero en general se espera que a unos 90 C cualquier tipo de material gentico de cualquier ser viviente, haya separado sus dos hebras. Enzimas como las helicasas, que estn dedicadas a romper los puentes, a nivel fisiolgico solamente, pueden hacer el efecto de denaturar. Otros tipos de agentes denaturantes como: la Urea, espermina, detergentes naturales como la SDS (sodio dodenin sulfato), la formamida, por que bsicamente son agentes enlazantes, es decir se unen a algunos de los radicales de las bases entonces las van a separar y desprender de las bases del frente. Entonces una vez que el material se denatura, a diferencia de las protenas que es difcil volver a recuperar, en el caso del material gentico SIEMPRE se puede volver a recuperar, pero la nica condicin y excepcin es la INCINERACION, por que implica que el material desaparezca, osea implica que la estructura

Recordando algunos material gentico:

agentes

denaturantes

del

de una cadena se vaya y queden unidades de carbonos solamente, entonces las cenizas no permiten recuperar ni el ADN ni nada. En este caso cualquier modificacin que haya sido la denaturacin para volver a las condiciones iniciales implica volver las condiciones normales, es decir volver a temperatura de 37C, temperatura ambiente, otra vez volver a quitar los elementos enlazantes, nuevamente poner el pH inicial hace que se recupere la estructura. RENATURACION En el proceso de recuperacin que se conoce como renaturar se ha podido observar algunas caractersticas importantes una de ellas es que se conserva un modelo, como el que se observa en la grafica, que corresponde al registro del incremento de la temperatura vs. El aumento de la absorbancia (a 260 nm) (se utiliza el eje de las Y a esa longitud de onda, a luz ultravioleta, se utiliza por que es una propiedad de las bases, todas absorben la luz a 260 nm), entonces si uno quiere registrar si tiene o no material gentico dentro, por ejemplo de un tubo de ensayo, se pone a 260 nm y si aparece absorcin es por que hay presencia de bases nitrogenadas all. Entonces la pregunta seria, fjense que teniendo temperatura ambiente hay registro de absorcin, que esta a 1.08, pero a medida que incrementamos la temperatura llega un momento en que la absorcin se eleva muchsimo mas, a 1.40 - 1.44, es decir se incrementa la posibilidad de absorber luz, esa primera

caracterstica, se conoce como EFECTO HIPERCROMICO, que es la capacidad de incrementar la absorcin de luz cuando las bases nitrogenadas estn en cadenas sencillas que cuando estn en cadena doble. La segunda caracterstica, es que esto implica que a medida que incrementamos la temperatura vamos a pasar de tener una hebra doble de ADN, a tener ADN de cadena sencilla, por eso se incrementa la absorcin de luz. Pero que significara que se describa una lnea recta que luego se volver una lnea totalmente perpendicular? Como se interpretara que la temperatura va aumentando y la lnea recta continua? Bueno, ya en el punto final, cuando lleguemos all ya no hay nada para hacer por que significa que las dos hebras estn denaturadas y separadas, lo que indica que ya no se puede aumentar ms el efecto hipercrmico. Pero esta continuidad, para poner un ejemplo aqu hay una lnea de color azul, una lnea de color rojo y una lnea punteada de color verde, que diferencia implicara esta lnea verde con esta de color rojo o esta de color azul? RTA estudiante: el ADN es cooperativo, lo que es cierto. De acuerdo con ello, si nosotros tenemos una lnea continua significa que a pesar de que se incremente la temperatura, nada que se aumenta la absorcin, indicando que el ADN esta aun de doble cadena, y si nosotros mirramos este modelo (grafica de denaturacion en la que se mide la absorbancia vs. Temperatura y se presentan tres rectas: de cadenas dobles de ADN nativo (azul y de

comportamiento cooperativo), denaturado (se va desnaturando poco a poco) y renaturado para observar su comportamiento) diramos que a medida que aumentamos la temperatura, parte del ADN se va denaturando y por esto esta incrementando la absorcin. Pero en cambio aqu tenemos una lnea continua y solo en algn momento dado ganamos una absorcin muchsimo mas alta pero prcticamente por diferencia de 0.5 o 1 C nada mas, lo que indica que la estructura es muy COOPERATIVA, por que a pesar que la temperatura o un cambio drstico de pH le va a generar la denaturacin, lo que realmente se observa es que el material se mantiene de doble cadena hasta el ultimo momento, es decir, hasta que se desestabilizan todos los distintos nucletidos que estn unidos, y estamos hablando de millones de nucletidos, que serian los que habran en un cromosoma por ejemplo, y entonces en un momento dado cuando no se resiste o no se puede mantener la temperatura para mantenerlos unidos pues las cadenas se sueltan simultneamente todas, es decir, no hay cabida a un modelo que podramos llamar de cremallera, que es que se fuesen denaturando unas, despus las otras, luego las otras, NO, todas se mantienen unidas, lgicamente las molculas estn vibrando debido a que la temperatura esta aumentando pero cuando no se pueden mantener, se sueltan simultneamente. Ha eso hace referencia el modelo cooperativo y eso es lo que muestra esta grafica: mantenerse unidos en doble cadena hasta el

mximo momento que ya no se pueda, y por eso se gana el mximo de absorcin como un indicativo de que se separaron completamente las cadenas. TEMPERATURA DE FUSION

Esta grafica es importante por que en realidad (aunque se puede variar la situacin en un mismo grado y pasar de cadena doble a cadena sencilla) se obtiene en el punto medio de la grafica lo que se llama como TEMPERATURA DE FUSION o temperatura de mesin en ingles o Tm en los libros. Habla de la

temperatura a la cual el 50% de las molculas de ADN se encuentran de doble cadena y el 50% de las molculas estn completamente denaturadas (de cadena sencilla), esto sirve para mirar en el laboratorio las FRs y como se disean los primer para poder definir segmentos de ADN para criticar, necesariamente tenemos que conocer la Tm, por que de ello depender que los primer alineen completamente puedan anillar en otro sitio a pesar de tener otros errores y si eso ocurre lo que vamos a tener amplificaciones inespecficas de segmentos que no necesitamos y por lo tanto un error en lo que vamos a concluir sobre lo que estamos analizando. Entonces fjense que aqu les muestro una cosa que se deriva de all mismo, si decimos que el Tm es esta, que ser la temperatura media a la cual tendremos 50% y 50% de molculas de ADN. La otra pregunta es: como va a cambiar la temperatura a la cual se da especficamente esa denaturacin de acuerdo a la cantidad de uniones guanina-citocina. Si Uds. se acuerdan la guanina siempre aparea con citosina y lo hacen mediante tres puentes de hidrogeno, en cambio la adenina y la timina solo dos. Esto por obvias razones cuando se va a denaturar tiene un efecto distinto y es que adenina y timina con menor temperatura se denaturan, que si tenemos guanina y citosina, por esta razn, aqu aparece esta lnea recta diciendo que? Cuando los

porcentajes de guanina y citosina son bajos, nosotros vamos a obtener que a los 70 ya hemos obtenido la denaturacin, pero a medida que incremente el numero de porcentajes de esas uniones, cada vez podemos requerir mas temperatura y ser todo lo contrario con la adenina y la timina, por que un ADN pobre en guanina y citosina, es rico en adenina-timina y por lo tanto requiere menores temperaturas para denaturar que lo contrario.

Lgicamente ese es un factor para modificar la temperatura de denaturacin, cuantas uniones guanina-citosina tenemos, pero tambin el tamao del material gentico, por que todas las especies no tenemos la misma cantidad, por supuesto denaturar un ADN bacteriano que tiene apenas miles de pares de bases, es mucho mas fcil obtener la temperatura que necesita, que para denaturar un ADN humano. Algo que no he dicho pero que es cierto, es que no necesariamente la cantidad de material gentico va de la mano con el desarrollo filogentico de los individuos, es decir, nosotros los seres humanos por tener mas desarrollo a nivel intelectual, o por estar mucho mas avanzados en la escala filogentico, nosotros los seres humanos no somos los que tenemos mayor cantidad de ADN, mucha mas cantidad de ADN tiene el trigo, un caballo, una estrella de mar, osea no hay una relacin directa entre ganancia de tamao de material gentico y el desarrollo filogentico, lo que si se observa es cuantas de las bases que estn en el material en realidad codifican para protenas, y si se ha visto que eso si ha sido una ganancia filogentica, que permiten determinar como la diferencia que hay entre las especies, pero cantidad de material no.

PREGUNTA DE ESTUDAINTE: profe es que en la diapositiva habia una lnea verdeque era? RESPUESTA: esa lnea verde, esta que dice denaturar?... fjese que nosotros estamos aqu haciendo que el proceso de volver a unir la lnea, si?, este seria un ADN nativo que por primera vez estamos denaturando, entonces que es lo que esta mostrando esoque cuando nosotros vamos a denaturar un ADN que ya por primera vez se halla denaturado, como deca su compaera ahorita y como les voy a mostrar mas adelante, el proceso de renaturacin no se da en la misma simultaneidad como se solt, sino que vamos a observar materia que mas rpido se acopla y otro mas demorado, pero eso tiene una razn de ser, y es la constitucin del material que es lo que vamos a mirar.

Entonces Tm, temperatura de fusin, la temperatura a la cual el 50% ,OJO, DE LAS MOLECULAS (yo siempre aclaro eso por que hay confusin sobre que significa ese 50%), si dijimos que es una estructura cooperativa, que esta toda unida y cuando se suelta, se suelta a la vez, no puede ser que 50% signifique que si tenemos 10 molculas de ADN entonces la mitad de ellas estn denaturadas y la otra mitad estn unidas, no por que estaramos hablando de lo contrario que decamos ahorita que es la cooperacin. Que es ese 50%? Que nos imaginemos 10 molculas doble de ADN y de ellas 5 molculas ya estn totalmente denaturadas y 5 ya estn totalmente de doble cadena, si me entienden, osea, no mitad y mitad dentro de una misma estructura, sino la estructura completa o denaturada o de doble cadena. Entonces por eso se dice 50% de las molculas de ADN estn ya de cadenas sencillas o denaturadas y el otro 50% continua de doble cadena. Como la temperatura a la cual eso se va a conseguir varia en tan poquita cantidad por eso siempre hay que hacer matemticamente la grafica por que prcticamente la Tm hay que calcularla es por unas dcimas de grados y no es mas fcil hacerlo por observacin de un experimento, por que cuando uno lo ve de repente todo se denatura RENATURACION

Bueno, lo que me preguntaba su compaero, cuando el proceso se hace al revs, donde no voy a separar sino ahora voy a volver a unir, yo dije que, si la temperatura se va bajando paulatinamente, ellas van a volver a reorganizarse; el pH si lo tenia en 4 y se va a comenzar a subir para llegar a 7.4, ellas van a volver a renaturarse, pero se observo que la velocidad de renaturacin no es igual para todos los cromosomas, ni es igual para todas las regiones dentro del cromosoma, sino que haban unas regiones que mas rpidamente se iban a renaturar, otras que demoraban un poco mas de tiempo, y otras que definitivamente duraban horas para volverse a renaturar. Entonces por que la renaturacin no es la figura exactamente igual a como se da la denaturacin. Bsicamente, por que cuando nosotros vamos a volver a renaturar pues cada una de las cadenas tiene que encontrar complementario, o sino no podra renaturarse y cuando el ADN se analiza se observa que hay regiones que no tiene sino un nico complementario, que serian los genes, mientras que hay otras regiones que tienen miles de lugares de posibles complementarios, entonces esa es la razn por la cual la velocidad de renaturacin si va a variar. Lo que tiene muchas copias en el genoma, pues va a tener de una manera mas sencilla un complemento encontrar a otro complemento del frente, por que tiene mucha disponibilidad de complementos que les sirva, mientras que las regiones de copia nica, solo tienen un nico complemento por cromosoma y como

somos organismos diploides, pues podramos decir que en realidad tenemos dos copias. Para cada cromosoma habr una copia para un determinado gen, recuerdan? Que nosotros tenemos dos copias de cada gen, por que cada uno de ellos es aportado por un progenitor.

REGIONES DEL ADN

Entonces a partir de esa diferencia en la renaturacin se pudo demostrar que dentro del ADN hay por lo menos 3 regiones completamente diferenciados:

1. unas que van a CODIFICAR, que van a ser aquellas que mas pasivamente se van a renaturar, que se denominan REGIONES DE COPIA UNICA, y all es donde vamos a tener eso que Uds. aprendieron que se llaman los GENES, que serian como las unidades de transcripcin, los lugares de ADN que donde se guarde informacin para la sntesis de una protena. 2. habrn otras regiones que tienen, no dos copias como estos de los genes, sino que tienen alrededor de cientos de copias y entonces se denominan por eso REGIONES MEDIANAMENTE REPETIDAS. Que hay dentro del ADN de esas regiones medianamente repetidas? Bsicamente dos tipos de cosas: a. una, los segmentos de ADN que codifican para los RNA ribosoma les, de transferencia, nucleares pequeos, es decir todos los RNA que participan en el proceso de traduccin estn codificados all. Por que son medianamente repetidos? Por que, que tal si yo tuviera solo una copia de RNA de transferencia que codifica al triptfano y voy a sintetizar una protena que requiere 40 veces al triptfano, y mientras va y viene al ncleo para traer el RNAt el triptfano, seria muy ineficiente el proceso. Entonces lo que pasa en realidad, es que cuando hay una traduccin, se va a sintetizar una protena,

hay cientos de RNAt de cada aminocido ah en ese lugar del citoplasma para proveer rpidamente los a.a que corresponden, como no sabemos cuantas veces se va a necesitar, pues hay suficiente cantidad de ellos. Entonces all estn esos RNAt, RNAr, RNAnp, estn todos ubicados aqu. Los que se llaman ribositas o RNAcataliticos, tambin estn all. b. Hay unas familias llamadas familias Alu, familias line y otras recientemente descubiertas, que bsicamente funcionan como los famosos segmentos llamados transposones, se caracterizan por que son los elementos transponibles, son segmentos que inicialmente se descubrieron en el maz que se demostr que pueden viajar o cambiarse de ubicacin dentro del genoma, son las nicas porciones que pueden cambiar su ubicacin, de hecho uno de los mecanismos de mutacin es que un transposoma este cambiando de ubicacin, por que puede estar dentro de un gen y cambiando su secuencia. Entonces los elementos transponibles, que ancestralmente, se creen que fueron llegando a nuestro genoma a partir de los virus que infectaba a la especie humana,

esos segmentos van a estar ubicados all, dentro de los segmentos o regiones medianamente repetidos. 3. Por ultimo, estn las regiones que tienen muuchas mas copias dentro del genoma y que uno casi las llama las regiones de relleno, por que no sirven para mucho y que constituyen el porcentaje mas alto casi el 50% o en algunos casos hasta el 60% del genoma que es de SECUENCIAS ALTAMENTE REPETIDAS, que bsicamente lo que van a hacer es a tener regiones que mltiples veces estn repetidas una detrs de otra, por eso se llaman secuencias en TANDEM y tienen la particularidad de estar alternadas entre las regiones medianamente repetidas y los genes. Entonces si nos imaginramos as un cromosoma podramos decir que aqu hay un gen (regiones mas claras) y en medio de ellos regiones medianamente y altamente repetidas (mas oscuritas). Estos dos conceptos van relacionados con la EUCROMATINA y la HETEROCROMATINA, entonces la eucromatina eran las regiones codificantes, y por lo tanto, lo que llamamos eucromatina ser especficamente estas regiones de copia nica; lo que se llama como regiones de heterocromatina sern estas otras dos, las medianamente repetidas y las altamente repetidas, por que bsicamente ellas no se van a transcribir nunca, y no se transcriben por que

all no existen genes, osea, no hay regiones que codifiquen para protenas, entonces no se van a transcribir. Por tanto si hiciramos un balance aproximado casi del 70 al 80% del ADN nuestro es regiones medianamente y altamente codificantes, y un porcentaje pequeito, que cada vez se dilucida que es cada vez menor, con los estudios que hacemos con el genoma humano, es alrededor del 15 a 20% nada mas lo que tendramos como ADN codificante. Entonces la pregunta es, bueno, y esto para que sirve? fjense que all en las regiones altamente repetidas existen bsicamente dos tipos de componentes: Unos que se llaman los minisatlites y otros que se llaman los microsatlites. La palabra satlite para referirse a un cromosoma, se refiere en los cromosomas acrocentricos, en sus brazos pequeitos, esos brazos P, en realidad eran satlites, como dos colitas pequeas. Esto quiere decir que obviamente las regiones altamente repetidas, estn ubicadas, adems de la regin de heterocromatina que veamos all, pues estn ubicadas en los satlites de los cromosomas acrocntricos, o en la regin Centroamrica, pues all realmente no existen genes sino se ubican las regiones no codificantes. Estos dos hasta hace 10 aos, no se sabia para que servia, y ltimamente se utilizan muy activamente en una caracterstica muy particular y es que, si nosotros miramos, estas regiones si no codifican para protenas, tendr un impacto el hecho de que estas

regiones sufran mutaciones, y cambien un nucletido o una regin, tendr un impacto a nivel de mi fenotipo, se expresara algo? La respuesta es no, por que no codifican para protenas, entonces recuerden, por que uno dice que el dogma central de la gentica es lo que se expresa en el fenotipo, por que al final del cuento, todo lo que el ADN tiene se termina viendo en la expresin, y en este orden de ideas, si yo tengo regiones en el ADN que no se expresan, pues los cambios que ocurren en estas regiones, no tienen ningn impacto sobre la funcionalidad del individuo, y esto es lo que ha hecho que las mltiples mutaciones que se generan en estas regiones altamente repetidas no funcionan para cambiarme a mi fenotipicamente, pero si me introducen cambios en el material gentico mio, y tantos cambios que hace 10 aos, se pudo demostrar que la mejor manera de identificar a alguien era buscarle las diferencias en estas regiones altamente repetidas, pues aunque no me cambia fenotipicamente, si lo hace genticamente, entonces cuando Uds. en el laboratorio vayan a hacer identificacin humana, vamos a ir a los VNTRs o a los STRs, es decir a las regiones no codificantes, por que all todos hemos acumulado mutaciones que son muy valiosas para diferenciar e identificar a cada uno de nosotros y que hacen que nadie sea igual a nadie, as sea mi papa, mi primo, mi hermano, etc. Si somos muy cercanos, claro que nos parecemos, pero siempre somos diferentes. nica excepcin a la regla, la que conocemos, como separamos genticamente a dos

individuos nacidos de una nica fecundacin? Eso no lo podemos hacer a menos que ellos ganaran una mutacin nueva somtica despus de formarse, pero de resto, pues han de ser idnticos, por que los gemelos que son monocigticos, pues en realidad provienen de un solo ovulo y un solo espermatozoide y luego se dividi e hizo in Vitro una clonacin, por que eso fue lo que ocurri ah, pero obviamente si los analizramos a los dos, son idnticos en la composicin gentica, de resto, sea hermano, to, primo, los vamos a diferenciar por la composicin gentica en esas regiones alta y medianamente repetidas. Por el contrario, es muy probable que no encontremos diferencias entre nosotros en las regiones de copia nica, y por que? Por que lo que tenemos que preservar, y lo que la clula mas se demora y mas cuida para que no cambie son las regiones donde estn los genes y la razn es por que cualquier modificacin puede tener un impacto totalmente nocivo para la funcionabilidad de esta protena y poder perfectamente poder comprometer la vida del individuo. Entonces obviamente las regiones que mas se conservan, que en el momento de la replicacin y en todas las divisiones celulares, se presta mas atencin y se cuida mas son las regiones de copia nica, para que all no vayan a haber mutaciones. Vamos a mirar que esas regiones las vamos a ver distintas dependiendo del momento de vida de la

clula, cuando lo veamos, entonces aqu tienen expresados los cromosomas, pero si Uds. recuerdan como tal la figura que estamos viendo nicamente se ven durante la divisin celular, de resto estn all en el ncleo pero no se logran percibir, por que vamos a ver que se relajan y forman otro tipo de organizacin. Estos cromosomas que hay all estn bandeados, y esto significa poner el cromosoma a la accin de las enzimas, que lo vamos a hacer en el semestre entrante, para observar como se forman las diferentes bandas dentro de un cromosoma y la diferencia bsica de la heterocromatina y la eucromatina, es en realidad cuantas protenas estn rodeando al material gentico. Lo que se sabe es que las regiones de eucromatina, tienen mucha menos cantidad de protenas, histonas como no histonas, alrededor de los segmentos de ADN, por que muy rpidamente se desespiralizan, se dejan transcribir y rpidamente vuelven y se organizan, entonces las regiones de heterocromatina estn mas compactas, mas rodeadas de protenas y por eso se ven mas coloreadas como en este ejemplo, por que en realidad a este bandeo se le coloca el colorante gimmca, por ello se le llama bandeo G, entonces el Gimmca se une a las protenas y si se encuentran muchas protenas pues tenemos mas coloracin y si hay pocas protenas, pues la regin aparece mas clara, y eso nos ayuda a indirectamente a diferenciar regiones claras, aquellas que tienen genes o eucromatina, regiones oscuras

aquellas que tienen heterocromatina y que no se transcriben.

En cualquier modelo de cromosoma que uno mira, esas secuencias estn alternadas, pero por supuesto son distintas, por eso uno mirando un cromosoma puede saber que cromosoma es, por que cada uno tiene un bandeamiento especifico y la razn es que el espacio fsico que cada gen ocupa no se puede cambiar, no es que unas veces este en un cromosoma y otras veces en otro, no, siempre estn en el mismo lugar. Por tanto, la base o la organizacin estructural

de un cromosoma situaciones.

es

la

misma

en

todas

las

CICLO CELULAR Entonces cuando vemos el material gentico como un cromosoma? Especficamente en esta parte pequeita del ciclo celular que se llama la divisin celular, y que va ser M de mitosis o de meiosis, dependiendo de la clula; en una clula somtica vamos a obtener dos clulas hijas iguales y hacemos mitosis; en una clula germinal vamos a formar cuatro clulas independientes, o por lo menos esa es la intencin que tenemos con los vulos solo que al final vamos a obtener uno maduro, pero hay las dos divisiones sucesivas y haramos entonce una meiosis. Este pedacito pequeito (divisin celular), cuando termina da origen a las clulas hijas y entonces las clulas hijas vuelven a hacer todo este ciclo y por esto la estructura se muestra de manera circular.

Que pasos hay adicionalmente durante el ciclo? Pues la mas grande de todas que se llama la fase G1, que es la fase en la cual la clula vive normalmente, desarrolla sus funciones, produce las protenas que necesita, de acuerdo al tejido al cual pertenece, y llega un momento en que recibe una seal, antes de que se inicie la segunda fase, que es por la produccin de unas protenas que se llaman las ciclinas, que le van a decir que efectivamente vamos a pasar a la divisin celular. Si la clula recibe el estimulo de las ciclinas, sigue adelante con estas fases, pero puede suceder que no reciba este estimulo, entonces ocurre, lo que Uds. ven aqu como una montaita lateral, que significa que algunas clulas no hacen divisiones cada vez que tenemos un periodo de tiempo transcurrido,

sino que pueden quedarse en una fase, casi eterna, de G1, eso no se llama G1, por que estaramos hablando de que esa clula normalmente se dividira y sufrira numerosos procesos de divisin, en realidad pasa a llamarse fase G0, para decir que la clula queda como en un stop o como en una etapa de quiescencia en la que no se va a dividir, y por ejemplo ese seria el caso de las celulitas que estn por ejemplo en el cerebro, las neuronas funcionan as con una tasa de divisin muy baja y es bsicamente por que se quedan en una etapa G0 sin avanzar hacia la divisin. Cual es la condicin necesaria para que una clula no pase a hacer una divisin? Obligatoriamente que no produzca ciclinas, por que si se producen ciclinas, se activa la fosforilacin proteica que activa las fofokinasas y ya las clulas no se puede devolver, entonces el chiste es lograr que la clula se quede aqu en la primera parte y necesariamente sin produccin de ciclinas. Cuando ellas se producen impajaritablemente seguimos con la siguiente fase que es la fase S, o la fase de sntesis del ADN, que va a ocurrir all? El proceso de replicacin, en el que vamos a obtener el doble del material gentico, para que cuando llegue la divisin, las clulas hijas tengan la misma cantidad de ADN que tenia la clula progenitora, entonces en esta fase de replicacin de ADN, nosotros cambiaramos de tener una tasa de genoma de 2n, por ser diploides, a comportarse como si tuviramos 4n, por que ahora vamos a tener el

doble del material gentico, y esta fase, de la que no es que conozcamos mucho, pero algunas cosas se saben, es la fase G2 bsicamente la usa la clula para revisar, para mirar si lo que replico le queda idntico a lo que era antes, para estar segura de que no hay mutaciones, de comprobar que efectivamente la correspondencia de una hebra es totalmente complementaria de la otra, y si llega a haber algn error, pues inmediatamente entrar a corregirlo, eso es lo importante de G2. Tenemos maquinaria de enzimas especficamente dedicadas a revisor los errores que hayan podido quedar de la replicacin, ese complejo enzimtica que involucra a mas de dos enzimas, actan como especie de polimerasas, que si Uds. recuerdan las ADNpolimerasas tienen una doble funcin: pueden polimerizar de 5` a 3`, pero luego de 3` a 5` se devuelven revisando y tienen funcin de exonucleasas en el sentido contrario de 3` a 5` para que, si de pronto encuentran que dos bases no concuerdan, rpidamente poner la correcta. En este caso en la parte G2 se activan mltiples sistemas de enzimas tipo polimerasas con accin exonucleasas, que en conjunto se pueden encontrar en los libros como sistema RER que significa reparadores de los errores de la replicacin, es decir estn nicamente concentradas y trabajan en cada divisin celular especficamente corrigiendo los errores que pudieron haber quedado de la replicacin. Por que tanto cuidado y tanta atencin? Por que cualquier cambio que haya quedado durante la replicacin, si no lo logro

detectar se quedo, y si se quedo a eso se le llama una mutacin y esa mutacin como puede que no le pase nada a la clula, pueda que logre comprometer las funciones de esta, entonces por esto es tanto tiempo dedicado a al revisin de la replicacin en esta etapa G2. Se supone que cuando estos sistemas dan luz verde, y dicen que ya efectivamente revisaron y todo esta correcto, pues llegamos a aqu (al final de la etapa G2) y en este momento se activa un segundo mecanismo de protenas ciclinas, que son las que dan como la luz para permitir que la clula pase a la ultima fase que es la divisin celular. Entonces si ya llegamos aqu y no hay mas correcciones, ya lo que quedo, quedo dentro de la clula, por que ya no vamos a tener nadie mas que diga esto no esta correcto, sino que la situacin queda ya de una vez. Entonces de acuerdo con este ciclo celular uno puede hablar de dos formas como el material gentico se puede ver: 1. la primera es aqu en la divisin, como un cromosoma. 2. pero como se le llama a todo el tiempo que comprende estas tres fases: G1, S y G2? Si la clula no se esta dividiendo, se dice de manera comn que la clula esta en interfase, que es igual a decir que no hay divisin celular, entonces el material gentico se observa en interfase como CROMATINA, que es el mismo material gentico de un cromosoma pero no tan

supremamente comprimido, es el mismo material gentico pero expresado de una forma laxa, totalmente distribuido dentro del ncleo sin estar completamente pegado. Bsicamente va a tener unas particularidades que no se observan cuando estamos en la divisin celular. La interfase, que es la clula sin dividir seria la sumatoria de G1, S y G2, donde, histolgicamente en el ncleo no se puede observar nada, solo una estructura homognea, y es bsicamente por que el material esta totalmente relajado, en cambio cuando se encuentra en la divisin celular, ese mismo material se logra pegar tanto y recoger tanto, que deja ver la estructura del cromosoma.

PREGUNTA DE ESTUDIANTE: una pregunta que no es ma sino de Argumedo, dice que si hay alguna posibilidad de crear estimulantes para ciclinas para personas que hayan tenido algn accidente cerebrovascular o algn trauma craneal?

RESPUESTA: lo que pasa es uno podra eventualmente ponerles, el problema es cuanto tiempo acten, por que por eso precisamente se llaman ciclinas por que son protenas cclicas, que bsicamente se producen durante unos segundos y rpidamente su mecanismo de accin desaparece entonces el problema es lograr que la duracin se diera hasta que las clulas se lograran dividir, pero si uno se pudiese, y de hecho in Vitro se hace, tener una clula aislada y ponerle una estimulacin, claro! Por que la ciclina es la que determina que se pueda pasar de una fase a la siguiente. PREGUNTA DE ESTUDIANTE: profe pero Ud. deca que despus de que se le daba la ciclina, despus de que terminaba la fase G0, continuaba de all en adelante sola. REPSUESTA: es que una cosa es que uno diga que la fase G1 se pueda convertir en G0 cuando la clula se va a demorar muchsimo en esa parte, osea el G0 esta circunscrito solo para ciertos tipos de clulas, todas las clulas no entran en G0, por que recuerden que es como una desviacin del mecanismo normal del ciclo celular, en general todas las clulas hacen G1, S, G2 y la divisin. Si? G0 es una etapa aparte, y esta etapa aparte era como por ponerle un nombre a aquellas clulas que no pasan de G1 a S, sino que se quedan mucho tiempo de una manera estable dentro de G1, entonces para eso se les llama G0, y si la ciclina logro estimular, claro que la clula sigue adelante, no hay

ningn problema, el problema es ese: como hacer que una protena que acta solo por segundos se logre llevar hasta el punto especifico a donde yo la quiero llevar? Algo as como lo que hablbamos en el tratamiento en el cncer es lograr atinarle especficamente a la celulita que yo quiero, osea mecanismo de transporte, por que si no, tendra que colocarle muchsimas unidades de una protena que difcilmente se logra producir in Vitro, si se pudiera producir pues seria como mas fcil, si fuera algo as como la insulina, pero hasta ahora todava no, pero si la ponemos all en el sitio que debe ser y a la clula que a de ser, claro! La clula entra en divisin, como lo contrario, seria lograr devolverse, que una clula que esta en fase G0 pase a G1, que fue el experimento que hizo Doli, que mas adelante lo vamos a revisar. ORGANIZACIN DEL MATERIAL GENETICO Si nosotros estamos en la interfase celular, vamos a ver al material gentico como la cromatina, y si estamos en divisin celular, vamos a ver al material gentico como el cromosoma.

Que diferencia tienen, en realidad, en la composicin? Realmente ninguna, ambos son lo mismo, lo nico que hay de diferencia all es el nivel de enrrollamiento, osea el superempaquetamiento del material, pero la composicin es exactamente lo mismo. De que esta formada, pues bsicamente de ADN, pero recuerden que el DNA siempre esta expuesto a que unas enzimas llamadas ADN-asa, que nosotros mismo tenemos en nuestra composicin, lo rompan, y lo hacen de manera transversal por que lo que ellas hacen es funcin de exonucleasas, son enzimas que cortan la doble hebra de ADN o algunas cortan es la

sencilla, pero lo importante es saber que el material esta expuesto a la accin de esas enzimas. Como hacemos para que esas enzimas no lo destruyan? Pues bsicamente el material se rodea, por eso, de protenas, y de all es de donde nacen las HISTONAS, por que ellas son las encargadas de rodear al ADN para protegerlo, pero estas histonas las vamos a ver ahorita, estn formando parte de un ovillo, que en conjunto rodeado entre el ADN y ellas se denomina NUCLEOSOMAS; pero vamos a tener unos segmentos de ADN internucleosomas que van a estar desprotegidos, esas regiones son cubiertas o cuidadas por otras protenas que de manera original se llaman NO HISTONAS, por que no se parecen a sus composiciones y por que estn circunscritas a lo que se llama el ADN espaciador y tambin dentro de la cromatina hay pequeas cantidades de ARN formando parte. Entonces la cromatina cuando una la ve en el microscopio, pues ve un ncleo homogneo, pero si lo pudiera ver en una microscopia electrnica, pues se

puede ver en realidad la composicin, parece un rosario por que tiene unas bolitas, espacio-bolitaespacio, siendo totalmente equidistantes una de las otras. En que consiste este modelo de formacin de la cromatina? En realidad es esto mismo visto mas grande, lo que vamos a tener es: una parte central formada por histonas, alrededor de la cual se va a enrollar segmentos de ADN de doble cadena y como les deca, hay una estructura redonda y la siguiente esta a cierta distancia, pues queda el ADN espaciador o ADN internucleosoma y entonces estas que se ven aqu verdes, son las llamadas protenas no histonas, que bsicamente se ubican all encima, para lo mismo, para evitar la ruptura del material gentico.

Entonces hay varia preguntas que a uno le pueden decir: 1. si el material gentico se tiene que rodear de protenas para evitar que las ADN-asas los rompa, para que una especie como la nuestra tiene ADN-asas, si en ltimas lo que podra

ocurrir es romperse el genoma. Cual ser la funcin que evolutivamente ha visto la clula para tener ADN-asas dentro de nuestra estructura? Las ADN-asas estn diseadas para sacar a todos los agentes externos que puedan llegar con material gentico a tratar de incorporarse en el mio, entonces estn creadas contra los de afuera, ejemplo: los virus, las bacterias, cualquier otro tipo de ADN que no sea el propio, y eso funciona no solo en animales sino tambin en todas las especies, por que de hechos las bacterias tienen lo mismo, para destruir a los virus que infectan bacterias que se llaman bacterifagos, esos son lo virus propios de las bacterias, ellas, para evitar que esos bacterifagos las infecten, pues tienen ADN-asas para romperlos. Esas ADN-asas son hoy en da muy famosas, pues son las que se utilizan en ingeniera gentica con el nombre de enzimas de restriccin, por que son extractos de las endonucleasas o ADN-asas de las bacterias que se purifican y se utilizan para romper el genoma, y de esa manera poder analizar segmentos pequeos de material gentico en el laboratorio. 2. Si nosotros tenemos el ADN cubiertos por este tipo de protenas histonas, que diferencia hay entre las que quedan adentro y las que quedan afuera? Por que unas histonas y otras no

histonas? Bsicamente el grado de afinidad por el material gentico, a. Vamos a ver que las histonas son bsicamente de 4 tipos: H1, H2, H3, H4; dentro de las del grupo H2 tenemos dos subtipos: las H2A y las H2B. que caractersticas tienen todas las cuatro? Que bsicamente son protenas constituidas por aminocidos bsicos como la lisina y la arginina, al ser protenas que tienen comportamiento bsico tienen una altsima afinidad por el ADN, recordando que finalmente el ADN tiene una carga acida y fuertemente negativa, producto de los fosfatos que tenia, entonces las histonas se unen mucho mas fuertemente al ADN que las no histonas, bsicamente por la afinidad que se genera por la configuracin de los aminocidos que tiene. Esa es la primera caracterstica. b. La segunda es que las protenas no histonas, que no son bsicas, y no son tan ricas en aminocidos bsicos como las histonas, pues se unen al ADN espaciador, pero se unen de una manera mucho menos fuerte y eso es una estrategia, que en realidad, la clula utiliza, para que de una manera mas fcil se pueda desproveer a las no histonas de las

regiones de intermediacin, para que en esos puntos donde se pegan las no histonas es que se desespiraliza el ADN para poder hacer procesos de transcripcin. A partir de esos puntos menos unidos, o de menor afinidad donde estn aquellas no histonas unidas, pues mas rpidamente podemos quitar esas protenas para hacer procesos como por ejemplo la transcripcin, luego cuando estemos en divisin celular tambin la replicacin.

uniendo el punto de inicio con el punto de salida. Para evitar que este material se desespiralice y se pierda, de esa manera se estabiliza la estructura. El conjunto de todo esto que tenemos aqu es a lo que se le llama nucleosoma, que ser como la estructura bsica de la cromatina, que va a estar organizada de tanto en tanto dentro del genoma. Una vez que nosotros tenemos los diferentes nucleosomas formados, cuando ya va finalizando la interfase y se va iniciar la divisin, estas molculas de nucleosomas se empiezan a aproximar y empiezan a formar unas estructuras ms organizadas que se llaman los SOLENOIDES. Como se organizan estos cuatro tipos de histonas dentro de la estructura? Tres de ellas van a ir internas dentro del nucleosoma que serian: dos histonas de tipo H2A, dos de tipo H2B, dos de tipo H3 y dos de tipo H4; es decir la porcin centrar por la cual se enrolla el ADN, es un octamero de histonas, especficamente dos de cada subtipo, entonces este octamero es el que recibe la doble hebra y el ultimo tipo de histonas que serian las H1 tienen como funcin sellar el inicio y el final del enrrollamiento del ADN, como lo muestra esta figura para evitar que se desenrolle. Entonces all esta las 8 molculas de las histonas, dos H2A, dos H2B, dos H3, dos H4, aqu el ADN de doble cadena enrollndose y una protena de tipo histona H1 Entonces aqu se muestra en una clula en interfase, la creatina, y luego cuando ellas se empiezan a pegar y formar apilamientos, en la macrofotografa se observa que se engrosa la estructura, pero bsicamente es por plegamiento y luego si este plegamiento vuelve a hacer otros superiores pues se va a observar la configuraron completa de lo que mas adelante vamos a ver como cromosoma, es decir, el cromosoma en su composicin tiene exactamente la misma cromatina, solo que la tiene muy plegada, que al mantenerse mas plegada, por eso aparece una estructura que mayor, en microscopia ptica, aparece como una estructura mas diferenciada. Fjense que el plegamiento de esa estructura, va haciendo que se forme cada uno de los brazos des cromosoma, y como

sabemos que esto que hay aqu es una doble hlice que permiti que se formara la del frente, por eso se dice que las dos cromatides de un mismo cromosoma son idnticas, por que cada una de ellas tiene un ADN de doble cadena que es idntico.

suponiendo que es una mitosis, volvemos a quedar valiendo 2n por que nos dividimos en dos clulas hijas, estos cromosomas que vemos nicamente durante la divisin celular, sus cromatides en trminos de n valen n 1n (por que cada clula hija tiene 2n luego 2n mas 2n son 4n, lo que indica que cada cromatide tiene un valor de 1n). Que caractersticas tiene el 2n que esta reuniendo la mitosis, que tiene la composicin de n de uno de los dos cromosomas originales y el n de otro de los cromosoma originales, como yo no los puedo ver organizados como cromosomas en el momento en que termina la divisin celular, siempre tengan muy presente eso: si yo pudiera una vez que termina la telofase, poder ver como es que terminan los cromosomas ah en realidad nunca veramos cromosomas, por que no me quedan dos cromatides, me queda una sola cromatide de cada una, cuando yo veo dos cromatides, es por que en realidad tengo 4n en el momento de la divisin celular, y al separar me van a quedar 2n en cada uno de los dos lados pero por que me regalo una cromatide cada cromosoma en condiciones normales. A diferencia de lo que pasa en la meiosis, por que en ella, la primera de las dos meiosis, se denomina una etapa redaccional, por que si tenemos dos cromosomas, los cromosomas 1, ya no ocurre, como en la mitosis, una divisin equitativa y longitudinal para las dos clulas hijas (una cromatide a una clula

DIVISION CELULAR Luego la pregunta es: en trminos de n cuanto valdra cada cromatide de un cromosoma, por que recuerden que cuando empezamos a hacer el ciclo celular valemos 2n, despus de la replicacin quedamos valiendo 4n, luego en la divisin celular,

hija y la otra a la de all), sino que tengo los dos cromosomas y todo un cromosoma completo se va para all y el otro completo se va para ac, al final tengo 2n, pero por que aqu hay dos cromatides de un solo cromosoma, por lo que estas dos cromatides son iguales entre si, osea me lleve la carga del padre y no me lleve la carga de la madre, es decir se separaron duplicando el material gentico en cada una de ellas, y conservando los genes pero perdiendo toda la informacin del otro homologo que no vino, por eso se llama redaccional, por que ahora lo que tiene como doble es el mismo material gentico y perd la informacin del otro cromosoma que se fue del otro lado, luego si cuando separo esas dos cromatide, hago la segunda divisin celular donde la meiosis II es exactamente como una mitosis, por que ahora si el cromosoma nico con que me quede se divide longitudinalmente y le regala a cada hija una cromatide y a las otras regala las otras, por esta razn los intercambios de los quiasmas, lo que se llama recombinacin se tiene que dar en MI, por que si se da en MII, despus no tengo nada que intercambiar sobre dos cromatides idnticas.

CLASE V (1H) Bueno, entonces ayer habamos terminado hablando de que nosotros cuando vamos a tener una divisin celular, distribuimos el material de una forma diferente, que de alguna manera hace que se reduzca a un rea ms pequea que su original y eso genera que la estructura se visualice en un microscopio de luz. Entonces en esa divisin celular, hay tal vez tres cosas importantes para tener en cuenta: La nmero uno, la mencionamos ayer, que entre la meiosis y la mitosis hay una diferencia que tiene que ver con el hecho de que la primera meiosis es una etapa de tipo reduccional mientras que en la segunda hacemos una mitosis comn y corriente. Segunda, en la primera de las partes de la meiosis uno ocurre un evento importante que genera la diferencia entre si una clula sea somtica y sea germinal que es la presentacin de intercambios entre el material que se denomina bsicamente mecanismos de entrecruzamiento, si? Y tercera cosa importante derivada de all, como yo tengo dos cromosomas, entonces, cmo es el mecanismo fsico real de entrecruzamiento? Mmmmm? Como ser entonces el

entrecruzamiento real??? Porque es que esto tiene que ver con una cosa muy importante, acurdense de Mendell, cuntos recombinantes pueden aparecer en una filial? Hasta cuntos? Mximo? Mmmm? Se acuerdan que era un recombinante?, tenamos una raza pura, otra raza pura, por decir algo, pequeo con redondo por grande con rugoso, hasta cuntos podan aparecer de la recombinacin de los dos? (Estudiantes: cuatro) Cuatro no pueden ser, porque cuatro es un nmero finito y si vamos a tener 20 descendientes, 80, 90? Entonces en porcentaje cunto sera? Hasta el 50%, por qu es hasta el 50%, eso tiene una razn de ser, por qu?, ni idea? no?.... Bsicamente por una razn, nosotros tenemos cuatro cromtides, dos hermanas aqu y dos hermanas aqu, se llaman hermanas porque son idnticas entre s, sin embargo entre estos dos, tienen cromosomas homlogos? No necesariamente, entonces estas dos con respecto a estas dos se llamaran cromtides homologas, y cuando se da el fenmeno de entrecruzamiento pues hay un acercamiento fsico real entre los dos cromosomas y siempre se van a recombinar solo dos cromtides, eso es lo que de pronto no tenemos presente y es importante siempre recordarlo porque quiere decir que la mxima capacidad de entrecruzamiento sera de esta con esta, y es probable que en otra meiosis

nueva la cosa sea de esta manera, pero nunca vamos a poder cruzar cuatro cromtides entre si, los entrecruzamientos solo se dan entre dos de ellas y eso que es lo que hace? Que la mitad, osea el 50% pueda estar recombinada, y como quedaran las otras dos cromtides? Idnticas a los parentales, entonces por esa razn el fenmeno de entrecruzamiento slo puede generar un 50% de cromtides distintas y esas seran las que corresponderan a las cromtides originadas por entrecruzamiento en el momento de lo que se llama la profase I, que seria la primera fase de la primera divisin meiotica. Bueno, esas eran las tres cosas importantes que debemos tener presentes ah. Ahora vamos a ver una segunda cosa importante y es que cuando tenemos el evento de la replicacin y cuando tenemos el evento de la transcripcin y la traduccin pueden ocurrir cambios que pueden originar las famosas: MUTACIONES. Entonces, vamos a tener que bsicamente podramos llamar mutacin al evento de cambio del material gentico, pero un cambio que tenga la particularidad de que es un cambio que permanece y se queda en la secuencia. Entonces, mientras haya por ejemplo, replicacin del material gentico y algo no corresponda, ayer mencionaba yo y recordmoslo porque lo vamos a ver muy especialmente el complejo de enzimas reparadoras de errores posteriores a la replicacin porque ellas van a

estar revisando, revisando, revisando, y cuando hablemos de una mutacin es que despus de las revisiones algo de todas maneras no quedo correcto, osea cuando acabo la divisin celular las clulas hijas incorporaron un nuevo nucletido o quitaron un nucletido o cambiaron un nucletido, entonces aparecen los conceptos de una delecin, de una insercin o de simplemente un cambio dentro del material, pero cualquiera que sea de ellos me origina lo que se llama una mutacin y entonces vamos a tener distintos tipos de mutacin: si el cambio es muy muy grande como para que afecte la unidad cromosmica aparecer por ejemplo: las aneploidias que son bsicamente las ganancias o las prdidas de un nmero cromosmico que no sea el juego completo aploide, entonces ganar un cromosoma de ms que origina una trisomia va a ser una aneploidia, perder un cromosoma que originaria una monosomia como por ejemplo el Turner que puede ser un x de menos, sera una aneploidia y entonces en esos casos el nivel de cambio sera a nivel cromosmico y por tanto el impacto sobre la mutacin pues es altsimo porque eso seria lo que ocurrira si nosotros ganamos o perdemos todos los genes que pueden estar involucrados dentro de una cantidad de ADN tan grande como para definir un cromosoma completo. Pero tambin puede ocurrir que el cambio sea muy sutil y a este es al que nos vamos a dedicar en las prximas clases, que es cuando la mutacin involucra algo pequeo, entonces es del orden gnico, y el

orden gnico estara hablando de bsicamente, uno, dos y hasta mximo alrededor de diez nucletidos que se modifiquen dentro de una cadena, casi siempre hay modificacin de solo uno pero pueden haber unos tantos en los que hayan dos o en los que hayan tres y entonces ese tipo de mutacin lo van a encontrar siempre denominado MUTACIN PUNTUAL, porque eso es lo que ocurre, de manera muy pequea, como si fuera un punto hay un cambio y esa mutacin puntual entonces va a originar (vamos a ver ahorita) distintos tipos de defectos dependiendo de en que lugar del material gentico ocurre. Bueno, tambin lgicamente, uno como se gana una mutacin? Vamos a ver que se las puede ganar de forma espontnea o de forma inducida, y cuando tenemos mutaciones inducidas significa que han sido producidas por el efecto de agentes externos del medio donde uno vive, eso quiere decir que probablemente la mutacin va a afectar las clulas somticas, osea las mas, las del individuo que esta vindose afectado por el agente mutante, pero no necesariamente va a ser una mutacin que se pueda heredar, por qu? Pues porque si no llega a mis clulas germinales pues los descendientes mos no han de heredar esa mutacin. Un ejemplo muy clsico es de la gente, las personas que trabajan como tcnicos de radiologa, como se estn exponiendo a la radiacin permanentemente, van a tener el inconveniente de que pueden eventualmente hacer muchas mutaciones por efecto de la radiacin y por

supuesto podran degenerar, como en realidad ocurre en muchos casos, con una leucemia o con un tipo de mieloma en el que lo que tienen es una proliferacin maligna de las clulas que ms se replican, porque vamos a ver que en cncer es as, los tumores son ms frecuentes en las clulas que tienen mucha mas divisin que en aquellas que se dividen poco y lgicamente esa persona ha ganado una mutacin, esa mutacin va a avanzar hasta convertirse en un proceso oncognico, pero va a tener hijos con leucemia?? Pues no porque la mutacin ha sido de sus clulas somticas y por lo tanto no es heredado. Cundo se puede volver heredable?? Pues vamos a tener muchos casos. Con respecto a la afeccin que significara agentes mutagenos ambientales podra ocurrir que eventualmente las clulas germinales tambin se expongan a la radiacin, entonces podramos tener espermatozoides u vulos mutados o tambin podramos tenerlos de manera natural como de hecho ocurre por ejemplo con la senectud. Entonces vamos a ver en el semestre entrante cuando hablemos de gentica que las enfermedades autosmicas dominantes la gran mayora son heredadas por mutaciones de novo a nivel de los espermatozoides paternos, por ejemplo la condroplastia, tiene este modelo de presentacin mas comn, padres de mucha edad que hacen mutacin de novo en los espermatozoides que se van a fecundar y aparece entonces la enfermedad como un nuevo patrn en un hijo y no es que se haya heredado

en realidad del padre sino que la mutacin la sufri en su clula germinal, si?. De ah para adelante es heredable??? Claro que si porque todas las celulitas del nio o la nia que sea condroplastico pues van a tener la mutacin y puede como ustedes saben con una probabilidad determinada que en el caso de una enfermedad autosmica dominante sera del 50%, heredar hijos que tengan nuevamente la mutacin. Y por ltimo, qu mecanismos van a estar induciendo la posibilidad de que las clulas muten, tercera cosa importante, estas son las que ocurren como su nombre lo dice de manera natural, de forma espontnea, entonces la mutacin existe evolutivamente como un mecanismo para generar variabilidad, no se si yo ya lo haba dicho aqu, porque a veces se me cruzan los cables pero si no lo he dicho entonces es para que quede muy claro, que en general uno se refiere a la mutacin como un evento adverso, como algo indeseable y no necesariamente. En general existe, como una forma en que una especie puede llegar a dar origen a otra o como una forma en que una determinada especie al exponerse ante un agente agresor termine subsistiendo en el ambiente adverso en el que esta, por eso el concepto de que la adaptacin y el proceso de seleccin natural escoja los que se logran quedar en un ambiente y los que no se adaptan a el pues simplemente desaparecen, entonces vamos a ver que existen por lo menos tres figuras dentro del material gentico en los que constantemente estn ocurriendo mutaciones

espontneas que no tienen nada que ver con el ambiente, que nos ocurren absolutamente a todos y que obviamente van a generar variacin. Yo les deca a ustedes ayer, de dnde aparece la posibilidad de que tengamos regiones altamente repetidas completamente diferentes entre uno y otro como para que las usemos en identificacin??? Pues aparece bsicamente de este tipo de mutaciones que se pueden dar de forma contraria y que hace que las personas cambien pero que si estn afectando regiones que no codifican pues no van a afectar en nada el genoma, si? Y por ltimo estaran estas que son las de moda en el sentido de que en los ltimos cien aos pues cada vez es un patrn mucho ms amplio que es el de las mutaciones inducidas que terminan generando en los pacientes la aparicin de cambios entre ms se expongan a ese tipo de agentes mutagnicos que vamos a ver que bsicamente viene clasificados en tres grandes grupos: Las mutaciones de orden fsico, por agentes fsicos. Las que se generan por agentes qumicos Y las que se originan por agentes biolgicos, porque tambin los virus y las bacterias pueden llegar a producir mutaciones.

Bueno, y entonces en que puntos, vamos a originar nosotros mutaciones de las llamadas mutaciones espontneas??? El primero de los puntos es cuando nosotros estamos hablando de la fase S del ciclo celular, qu ocurre ah? La replicacin del material gentico, entonces una de las grandes fuentes de aparicin de las mutaciones espontneas es la replicacin del ADN, por qu? Porque como vamos a tener que copiar regiones de nucletidos, pues obviamente puede ocurrir que alguno quede diferente y si no se corrige pues acaba de aparecer una mutacin en la clula. Y un segundo punto, va a ser cuando la clula est viviendo su vida normal que sera en G1, all la clula normalmente entre sus funciones va a estar la de producir protenas, y esas protenas que ustedes recuerdan que van a producir obedeciendo a una secuencia en la que a partir de lo que hay como informacin dentro del ADN, vamos a sintetizar una ARN, luego lo vamos a someter al proceso de splicing y ya maduro va a salir hacia el citoplasma para acoplarse a los ribosomas y formar una protena. Entonces en el proceso de transcripcin tambin puede haber errores en la copia y en el proceso de splicing tambin, si el empalme no es correcto y los exones no se reciben de manera adecuada, se

introduce algn nucletido de un intrn o por el contrario el empalme quita algn nucletido de un exn pues inmediatamente cambiamos y en ese caso cambiaramos para un tipo de mutacin que se llama: mutacin con corrimiento del marco de lectura qu significa eso? Pues que como la tripleta de lectura es un codn y se quita o se pone un nucletido ahora la tripleta es nueva y la tripleta nueva hace que se corra todo el marco de lectura que hay para adelante y que por lo tanto la protena nueva que se forma sea una protena completamente distinta a la debida. Entonces en el proceso de replicacin recuerden que nosotros vamos a tener una enzima que esta rompiendo, una que coloc un primer y empieza a avanzar en un sentido y otra que coloca el primer en la hebra contraria y avanza en el sentido contrario De aqu quienes estn interviniendo como las enzimas que van a poder entrar a corregir errores?? Entonces la que nosotros normalmente utilizamos para generar la polimerizacin es la que en las bacterias se llama de tipo III y en nosotros es la alfa y la que va a trabajar haciendo correccin siendo tambin una ADN polimerasa va a ser esta que se denomina tipo I en las bacterias y en nosotros corresponde a la beta, y entonces esta a pesar de ser una polimerasa va a

tomar funcin de exonucleasa, entonces vamos a tenerla presente porque en los mecanismos de reparacin y en los mecanismos de revisin de errores, las enzimas que estn trabajando son polimerasas de tipo I, es decir polimerasas beta en los eucariotas que hacen funcin de exonucleasa. Y en que sentido se hace la funcin de exonucleasa? Como se revisa??? Al contrario de cmo se sintetiza, entonces si vamos de cinco a tres para polimerizar (5---3), revisamos desde el final hacia atrs que querr decir de tres a cinco (3---5) y cuando encontramos algo que no coincide vamos a ver que se activa una va de reparacin que se llama: la (17:46) general, que bsicamente utiliza a este tipo de enzimas dentro del proceso. Bueno, y si el problema es a nivel de la transcripcin o de la traduccin pues vamos a tener mutaciones en las que la secuencia del gen que est ubicado dentro del ADN que va a empezar aqu y termina aqu, como en eucariotas tiene segmentos que hay que eliminar, pues all en el proceso de splicing tambin podemos tener errores. Esta diapositiva la traje para que recuerden una cosa, en trminos generales el material nuestro siempre est empaquetado en los nucleosomas que ayer vimos, pero yo necesito hacer la sntesis de una protena, cmo hago el proceso de transcripcin? Entonces, importante, imagnense que llegue y diera una orden, me voy inventar, mil nucletidos, que tal yo desespiralizando todos los mil nucletidos para

exponer todo el segmento y que la enzima RNA polimerasa copiara, que pasara con mil nucletidos de ADN expuestos, rapidito se cortaran, entonces cmo es la cintica real??, es como la que est pintadita aqu, nicamente vamos a desproteger mximo alrededor de 40 nucletidos y ellos van desenrollndose y luego a medida que se avanza, los que ya se transcribieron vuelven y se enrollan de tal manera que exponemos solo un pedacito de ADN de las histonas para que se de el proceso de transcripcin. Como la sola RNA polimerasa es tan grande que ocupa alrededor de 18 nucletidos ella puesta encima de la estructura pues obviamente eso dificulta que las enzimas de tipo endonucleasas puedan entrar a romper, entonces el segmento desprotegido es pequeito, tanto como para que la enzima se ubique, transcriba unos primeros y a medida que va avanzando y desenrollando lo que ya copio se va volviendo a enrollar, entonces en la cintica nunca queda ni mucho menos un fragmento muy grande expuesto porque eso hara que la integridad de la estructura pues se pudiera perder. Bueno, y entonces cuando se da la copia para sintetizar el ARN mensajero, pues este primero es al que nosotros habamos llamado RNA heteronucleasa, que significaba que tenia una secuencia exactamente igual a la del gen, pero que como tenemos organismos eucariotas necesariamente requiere del proceso de splicing y entonces la quitada de los segmentos que no corresponden para dejar solo aquellos que son

exones implica la formacin de bucles que es lo que en realidad es el splicing para formar un ARN mensajero maduro que siempre ser mas pequeito que lo que inicialmente formamos como ARN heteronucleasa. Quin quita y quin reconoce los puntos de terminacin e inicio en un intron, terminacin de exn y aqu y aqu y aqu, quin hace ese proceso de splicing???? Mmm? Quin???... un complejo combinado de protena nucleolar con ARN nuclear pequeo, si seor, que se llama esnur (no estoy segura si es as) la sumatoria de protenas ms ARN nuclear pequeo, ellos son los que reconocen los sitios de finalizacin de un intrn y que por lo tanto implica que ah empieza un exn y otro grupo se ubica en el otro extremo, enfrenta los dos, corta, empalma y hace que se escindan los sitios o los nucletidos que correspondan a un intrn y si ese punto de unin est equivocado pues ah tenemos otra posibilidad de generar un sitio de mutacin, bueno, y por qu un sitio de mutacin??? Porque entre las caractersticas que tiene el cdigo gentico que se lee en codones una de ellas dice que no es traslapado o que no es solapado, eso que quiere decir??? Ah? Entonces? Qu significa que el cdigo no es traslpado??? cinco caractersticas del cdigo gentico: (que van a buscar el por qu de cada una, porque hay que tenerlas claras) Es universal, qu quiere decir eso??

Es inequvoco Es degenerado Es no solapado (esta es la razn por la cual aparece la mutacin trans cis (?) Es no puntual Entonces, para que se puedan ir a la asamblea vamos a cerrar diciendo lo siguiente, en la mutacin de tipo gnico pueden pasar tres cosas: Nmero uno, que se inserte, osea se llama insercin que significara ganar nucletidos, un ejemplo que vamos a ver ms adelante, pero tnganlo ah presente para que lo encadenemos despus es lo que hacen agentes mutagenos qumicos como los denominados agentes intercalantes, se acuerdan que les cont del sndwich?, y les dije que el sndwich haca que la enzima entendiera que de aqu a aqu haba mucha distancia y entonces pusiera algo en el medio, entonces un mecanismo por ejemplo, de ganancia de inserciones es la posibilidad de que nosotros ganemos nucletidos por la accin de agentes intercalantes. Una segunda posibilidad, en vez de ganar que perdamos, entonces sera una delecin

 Y una tercera es que tengamos una sustitucin, que significara que cambiamos el nucletido pero ni ganamos ni perdemos en trminos de nmero de nucletidos es el mismo nmero Cules tienen peor efecto???

combinaciones (4 bases, cambindolas de 3 en 3), en este caso cualquier especie viva que utilice o tenga cualquiera de estas 3 tr1pletas, entonces tenemos que mRNA polipeptido GCU Ala UGU Cys UUA Leu CGA Arg AUU Ile

CLASE VI (2H) LECTURA EN TRIPLETAS LLAMADAS CODONES VASA Si ustedes recuerdan ayer les deje una tareta, cmo les fue? 1. Por qu es universal el cdigo gentico? Recuerden que estas tripletas son originadas a partir de solo 4 posibles nucletidos, quiere decir que uno solo puede tener 64

Las tres tripletas que son codn de parada funcionan en todas las especies como codn de parada y A eso se refiere la universalidad, a que si usted sabe cul es la tripleta que tiene en un momento dado inmediatamente puede saber que aminocido ira en la protena y es vlido para cualquier especie y para cualquier protena, obviamente hay pequeas excepciones que tienen que ver que en algunas especies o en ADN mitocondrial existen algunas tripletas que tienen unas pequeas variantes 2. A que hace referencia a que el cdigo sea no solapado? Eso quiere decir que como cada codn est formado por tres pares de base entonces cuando nosotros tengamos un modelo de mutacin como el que mencione de una adhesin sea insercin o de una eliminacin sea una delecion inmediatamente nos imaginamos supongamos que en Cys perdemos

la guanina entonces fjense, que como el cdigo no es solapado y significa que lee de tres en tres, donde termina una pues la siguiente tripleta no sera UGU sino COMO al no haber la G cogera UUU , Y CUAL SERA LA SIGUIENTE TRIPLETA SI NO ES SOLAPADO? UAC, a eso hace referencia el no solapado de tres en tres y las tres no pueden involucrarse en una nueva tripleta, exactamente donde termina una tripleta arranca la siguiente EN ESE ORDEN DE IDEAS si tenemos mutacin que impliquen deleciones o inserciones lo que en realidad tenemos es un corrimiento en el marco de lectura, por eso les mencionaba ayer que las mutaciones que se sucedan dentro de un gen y para ser mas exacta dentro de la regin codificante de un gen sea en los exones, si llegan a ser por insercin o delecion van a ser ms nefastos porque hacen corrimiento del marco (seria lo que llamamos una mutacin FRANK cHIP eso quiere decir que la protena de ah para adelante seria nueva) o algo que sera peor, yo podra tener la posibilidad de que al eliminar una base o insertar una base apareciera como codn uno de los tres codones de parada, por ejemplo el codn de parada y que sucede si aparece un codn de parada en una protena? Significa que hasta ah va la protena entonces, en muchas ocasiones en una mutacin Frank chip lo que puede generar es un codn de

parada puede generar un no producto proteico, porque un polipeptido pequeo simplemente no es una protena y se degrada y eso sera inviable porque tendramos un organismo que no producira esa protena, son mutaciones letales Sigue quedando pendiente a que hacen referencia las otras 3 caractersticas. MUTACIONES DEL ADN EFECTOS DE LAS MUTACIONES: la explicaremos con un ejemplo que es la hemoglobina, recuerden que todos las especies utilizan el oxigeno, como mecanismo transporte para llevar a los tejidos el oxigeno van a usar la hemoglobina como protena transportadora 1. No detectable : si la mutacin ocurre en una regin no codificante , suponiendo que estoy dentro de un gen es decir dentro de una regin codificante, cuando puedo hablar que estoy con un evento no detectable : hay la mutacin pero eventualmente el nuevo nucletido que se coloque va tener la particularidad que ocupaba la tercera posicin de una tripleta y no s si a ustedes les ensearon un concepto que se llama bamboleo ( cuando estamos hablando que tenemos 64 combinaciones posibles de codones de los cuales 61 codifican para aminocidos y 3

son codones de parada , PENSEMOS CUANTOS aminocidos distintos puede tener una protena? 20 , entonces si hay 61 combinaciones significara que a un aminocido le pueden corresponder ms de 1 tripleta , entonces el fenmeno del bamboleo hace referencia a eso , lo que quiere decir es que nosotros estamos hablando de que eventualmente un aminocido como la Ile le corresponden 6 codones , que diferencia tendramos? ACC ACU ACT ES DECIR SI LAS DOS PRIMERAS ac siempre la combinacin va dar leucina independiente de la ultima base . Entonces qu pasa si hay una combinacin que involucre al tercero de los componentes de un codn en este caso de la isoleucina, pues que no pasara nada porque aunque le cambiramos ese nucletido inmediatamente la tripleta volvera a poner el mismo aminocido, eso sera ejemplo de una mutacin no detectable porque en realidad el producto final que sera el aminocido de la protena sigue siendo el mismo, entonces no tiene efecto sobre la composicin de la protena. 2.Cul sera un sentido errneo? Pues como su nombre lo dice ya no vamos a poner el mismo aminocido, vamos a colocar uno distinto porque la modificacin de un nucletido si introdujo un codn que produce una a.a diferente, entonces

miren que como el aminocido cambia puede aparecer que haya un sentido errneo: 1. Mutacin errnea aceptable 2. Mutacin errnea parcialmente aceptable 3. Mutacin errnea inaceptable Aceptable: que significara que la persona no tiene una variacin de la funcin de la protena Parcialmente aceptable: que significa que la protena cambia funcionalmente pero no tanto como para que no puede ser utilizada Inaceptable: que el nuevo a.a produzca un cambio muy grave dentro de la protena y entonces se considera que es inaceptable. 3. APARICIN DE UN CODON SIN SENTIDO (PARADA, STOP) POR LO TANTO NO TENEMOS protena sino que se trunca entonces no sera u sentido errneo sino un sentido letal, entonces vamos a mirar cmo podemos tener sentido errneo aceptable, parcialmente aceptable y definitivamente inaceptable. Existen mltiples ejemplos pero traigo uno que es la hemoglobina que es uno de los modelos ms estudiados, si ustedes recuerdan cuando estamos hablando de un adulto (hemoglobina A) porque se llama de esa manera? Por tener dos cadenas alfa y dos cadenas beta

Las dos cadenas alfa van a tener casi que menos probabilidad de mutar entonces vamos a ver porque, mientras que las cadenas beta presentan ms mutaciones pero las alfa son ms agresivas entonces son situaciones inaceptables y no tenemos individuos vivos: Entonces vamos a ver que el sentido sea aceptable un ejemplo es que la hemoglobina que se llama hikari que va ser una que cualquiera de los que estamos aqu tuviese porque? Porque fenotpicamente no produce ningn cambio en la funcin, cmo se puede saber entonces que hay variantes de hemoglobina en un aminocido ? Sea hace secuenciacin de aminocidos o electroforesis y se vea que uno de ellos no corresponde a lo que ocurre normalmente en la cadena beta ; entonces detectable por revisin detallada de la composicin de la hemoglobina y observar lo siguiente :

En condiciones normales para poder colocar en la posicin 61 de la cadena beta en la hemoglobina aminocido lisina es porque la combinacin que hay en el codn del RNA m es una triple adenina Qu pasa si la triple adenina eventualmente cambia en la posicin 3 a un uracilo o tambin puede cambiar a una citosina entonces los nuevos codones serian AAU o AAC, cualquiera de estos dos codones ya no coloca a la lisina sino coloca al aminocido arginina hubo mutacin? Claro que s, porque ahora hay un nucletido distinto en la tercera posicin el codn Qu impacto tiene sobre la cadena beta de la hemoglobina? Recuerden que la posicin 61 esta interna dentro de la cadena beta, las protenas tiene plegamientos inicialmente en forma de alfa hlice y de hoja beta que es la estructura secundaria y luego forman una terciaria que es la forma globular , aqu hay una estructura tridimensional, entonces la posicin 61 esta interna, no est expuesta al entorno donde la hemoglobina va, que sera dentro del torrente sanguneo, en ese orden de ideas tener el aminocido lisina que es el normal al cambiarlo por el de arginina no produce ninguna diferencia dentro de la estructura terciaria entonces la funcin de la protena es idntica y en el fenotipo no va ver ningn cambio Ejemplo donde sentido sea parcialmente aceptable hay un efecto sobre la funcin, la Hb S es la que produce la anemia de clulas falciformes, que son

esas estructuras en forma de hoz que bsicamente caracterizan porque en la misma cadena beta, en el individuo adulto vamos a tener que en la posicin 6 normalmente hay un acido glutamico y se cambia por el aminocido valina (Pregunta suelta seria mutacin puntual o no? Puntual porque involucran menos de tres nucletidos en la mutacin serian por delecion, por sustitucin? por sustitucin porque le estamos cambiando un nucletido) Miremos la grafica: el glutamato es GAA o GAG miremos que se cambian las segundas posiciones GUA o GUG y estas combinaciones colocan es al aminocido valina , en realidad si comparamos con el caso anterior es exactamente lo mismo, la nica diferencia es que ahora el nucletido que se formo pone un aminocido que tiene una particularidad y es que el glutamato que es acido glutamico es hidrofilico, que se relaciona muy bien con el agua que es lo ms abundante dentro del torrente sanguneo en cambio la valina es totalmente hidrfobo y la posicin 6 va ser uno de los brazos externos de la cadena beta, entonces totalmente dirigido a la posicin exterior de la hemoglobina, la valina se va volver cncava , se va esconder porque es hidrfoba y cambia la estructura tridimensional Qu particularidad tiene? No significa que va morir la persona, lo que se genera es que cuando nosotros vamos en las porciones distales de los tejidos en los sinusoides recuerden que los

glbulos rojos tienen que deformarse para pasar , cuando tiene este tipo de hemoglobina lo que ocurre es que las molculas de hemoglobina se polarizan y al polarizarse forman hemoglobinas pegadas pasan pero la deformacin que gano no la pude volver a recuperar y por eso queda en forma de hoz, la distribucin de oxigeno es menor pero eso tampoco tendra mayor problema excepto que cuando lleguen al bazo inmediatamente los rompe y que pasara si el 80% de mis clulas son as? Uno de los tratamientos es la esplenectoma, entonces en el caso de la hemoglobina S lo que en realidad ocurre es que si acaba de ganarse en la cadena Beta una estructura espacial distinta y vemos el paciente con dficit de oxigeno por dos razones: por un lado por ser bicncavo el glbulo rojo y por que el bazo me estara descartando esos glbulos por su deformacin. Ejemplo que sea inaceptable: fijmonos que ya es para la cadena alfa de la hemoglobina y en este caso es cuando hablamos de la hemoglobina M, en la posicin 58 en vez de poner el aminocido histidina ponemos el aminocido tirosina miremos en el cuadro como cambia las tripletas fijemos que cuando cambia el primero la gravedad es mayor, no es regla general pero la mayora de situaciones si alguien se acuerda para qu sirve la posicin 58 de la cadena alfa? Recordemos la hemoglobina en ultima transporta oxigeno pero en realidad donde lo monta para llevarlo? Lo une al hierro y el hierro que tiene que

ver con la hemoglobina? El hierro a su vez esta unido a la hemoglobina a travs de una estructura que es una porfirina, el anillo tetrapirrolico recuerden y entonces la protoporfirina carga el hierro y esta se asocia con la hemoglobina por una unin covalente, mas adelante miraremos las porfirinas y veremos que el tetrapirrol se une a la cadena alfa y la cadena beta por unin covalente por que hay que sostener, a propsito cuantos hemos lleva una hemoglobina 4 xq? porque cadena asocia una grupo hemo , entonces el grupo hemo en realidad est conformado por dos componentes, la porfirina y el hierro y el hierro a su vez liga la molcula de oxigeno pero el hierro esta unido por cuatro de sus posiciones al tetrapirrol por otra posicin esta unido a la hemoglobina y por la ltima posicin se une al oxigeno , la pregunta es por qu el hierro tiene 6 valencias? Porque si fuera el frrico no tendramos la posibilidad de ligar el oxigeno, serian 5 puntos de unin y quiere decir 4 gastados en el tetrapirrol y uno unido a la globina y entonces por donde uno el oxigeno? Entonces la posicin 58 es la que hace que la histidina est asociada con el grupo hemo para poder ligarlo a la cadena peptidica Qu pasa si le cambio el aminocido? Pues que ya no liga y entonces la hemoglobina acepta la unin de hierro frrico en vez de hierro ferroso entonces es lo que llamamos metahemoglobina y no transportamos oxigeno por eso es un sentido inaceptable.

Los puntos calientes: sitios dentro de los genes que tienen ms tendencia a mutar, por eso podemos tener enfermedades como la fibrosis qustica donde hay ms de 700 mutaciones dentro del mismo gen bsicamente por eso porque la regin de ese gen es de alta mutabilidad (pregunta Marilyn que induce esos puntos calientes? No se sabe). Miremos el origen de los dos tipos de mutaciones que ayer les hable: unas naturales y otras inducidas Las naturales son las que se llaman espontaneas que son: a) Errores en la replicacin del ADN: que es la contribucin ms alta y por esa razn las clulas que se dividen mas son las clulas que ms pueden desencadenar eventos cancergenos, entonces los epitelios son los tejidos favorables para que se desarrollen procesos malignos, a propsito acaba de nacer una celulita, acabamos de formar un cigoto y empezamos a hacer la divisin, un proceso embrionario, vamos a tener un nio, va crecer, se volvi adulto hasta cuantas divisiones puede tener una celulita? Una cosa es la potencialidad que tengamos y otra cosa es que las usemos todas, eventualmente una neurona le va sobrar la posibilidad pero la que mas pudiera usa hasta cuando se podra dividir? Habl de arrugas rta el promedio son los 35 aos y de ah para

adelante empezaran algunos tejidos con una taza de divisin menor la max es 50(ese nmero no se ha dilucidado por qu) Una hiptesis es que entre ms nos vayamos dividiendo cada vez perdemos regiones y probablemente perdamos el gen de la programacin de las divisiones b) Lesiones fortuitas la clula no se est dividiendo esta en G1 pero eventualmente tiene lesiones dentro del material c) Transposones genes saltarines o regiones medianamente repetidas que alteran el tamao incluso de un gen ERRORES DE LA REPLICACIN Yo les dije que cuando tenamos una replicacin puntual en el ejemplo anterior de la hemoglobina todos eran ejemplo de sustitucin I. SUSTITUCION DE BASES TRANSICION T C G A Que una base cambie por otra base de su misma familia TRANSVERSION T A C G Cuando el cambio implica modificacin de una base pero por una base que no era de la misma familia.

En general los eventos mutacionales generan ms transicin que transversion recuerden que la estructura de la doble hlice es muy homognea, que pasara si eventualmente despus de la replicacin tenemos las enzimas reparadoras revisando, ella van a mirar que se conserve la simetra, la purina es el doble de grande que la pirimidina entonces hacer una transversion significa que el apareamiento de bases va cambiar el dimetro de la estructura y eso hace que sea ms detectable por una enzima; recuerden para que quede mutacin es que ya pasamos la revisin de G2 entramos a la divisin celular y no se detecto el error , imaginen una polimerasa poniendo cientos por segundo entonces es posible que se d el error en cualquier base de las que coloca II. DELECION III. INSERCION LESIONES FORTUITAS Ocurren ya no dentro del momento de la replicacin sea dentro de la fase S si no es G1 bsicamente son 2: DESAMINACION ejemplo C U GC AT UNA POSIBILIDAD QUE HABIAMOS dicho es que perdiera uno de sus radicales de sus grupos funcionales entonces se convirtiera en otra base,

tenemos el ejemplo que si una citocina que si ustedes recuerdan estaba formada por una sustitucin de un grupo amino y un grupo ceto se desamina pues entonces acaba de ganar dos grupos cetos y eso es un uracilo y en este caso fjese que la citocina normalmente debe aparear con la guanina y ahora cambio a ser un uracilo entonces en vez de que haya la dupleta citocina guanina que era lo normal ahora esta nueva base va emparejar como si fuera una adenina que sera la timina A se desamina y pasa a hipoxantina empareja conC se comporta como guanina y no aparea con timina que era lo normal DEPURINACION SEGUNDA HORA la citocina normalmente con quien se debe aparear? Con la guanina verdad ahora cambio a ser un uracilo, entonces en ves de que all la dupleta citocina guanina que era lo que normalmente haba, ahora esta nueva base va a emparejarse como si fuera una adenina y se aparea entonces con timina acaba de haber una cambio en las dos bases en las dos cadenas de tener una dupleta citocina guanina a tener una dupleta adenina timina, entonces ah ocurri una transicin tambin podamos tener que la adenina se desamine y se convierta en hiposantina y en ese caso ya va a aparearse con citocina ella se comporta como

si fuera una guanina y no aparea con timina que normalmente debera ser, cual es una citoicna normal? Esta un grupo ceto en la posicin dos y un grupo amino en la posicin cuatro, que es desaminar? Como su nombre lo dice es perder un grupo amino, entonces si este grupo amino en la posicin cuatro se pierde y se convierte en un grupo ceto, sea se oxida la base, va a quedar una citocina que se convirti en uracilo y si tenemos una adenina que se desamina va a oxidarse para formar a la hiposantina y como les digo estas dos nuevas figuras van a aparear ahora con otras bases distintas de las que venia apareando la adenina y la citocina, fjense que el uracilo sabemos que no debe estar dentro de una ADN pero usualmente por una desanimacin se puede formar obviamente como esta haciendo parte de un nucletido de ADN pues esta unido es a desoxiribosa y lgicamente que esto es un error pero lo menciono por que as puede ocurrir, pueden generarse uraciolos de una manera errnea en una desanimacin de la citocina en el ADN, lgicamente esto abra que entrar a cambiarlo y a corregirlo, pero esto seria una mutacin por que acaba de aparecer una base distinta a la que tenamos por un proceso de desanimacin. El otro evento que normalmente ocurre como lesin fortuita es la depurinacion que bsicamente como su nombre lo indica es perder las purinas cuando una de ellas esta haciendo parte de ADN, fjense que aqu tenemos todo el nucletido completo aqu esta la cadena aqu esta la guanina y de pronto ocurre una

perdida de la base y entonces queda el azcar, el grupo fosfato, la cadena queda ah la otra al frente pero la base que ah aqu no tiene con quien aparearse por que la base con la que se apareaba se perdi entonces la desaminacion seria que en los puntos donde ah adenina o guanina que son las purinas, de pronto la base solita se suelta y deja un hueco, obviamente ese hueco es una mutacin y tenemos que activar mecanismos de reparacin para restablecer la cadena. Cual seria la verdadera mutacin? Cuando se venga a reponer la base q se solt se coloque una que no corresponda, entonces aqu ganaramos el efecto de la mutacin por que estaramos cambiando la base, corregimos el error pero no lo corregimos de una manera correcta. Finalmente los elementos transponibles que son los mismos transposones son unidades que sabemos que en general van a estar haciendo parte de las regiones medianamente repetitivas y se organizan como familias entonces ah la familia line que son elementos dispersos largos y otras familias que tiene elementos dispersos pero cortos. Ellos pueden eventualmente cambiarse del lugar donde estn y llegar por ejemplo a regiones codificantes, aqu tiene el ejemplo a aqu tenemos una regin medianamente repetida aqu tenemos otra regin del ADN donde tenemos por ejemplo un gen pero que caractersticamente dentro de su estructura alguna secuencia que pueda ser reconocida por este transposon entonces el

transposon se quita y se corta por sus regiones IR del lugar donde estaba y viene y rompe las regiones aledaas del gen y se introduce en el medio completa las secuencia de los lados y fjense que este seria ahora el mismo gen con el agravante de que acaba de ganar cientos de nucletidos que venan dentro del transposon que se acaba de ubicar ah, el gen cambio totalmente por que acaba de tener la insercin de un elemento trasponible o lo contrario si un gena incorporado un elemento transponible y eventualmente sale de all para ir a otro lugar pues al volver a reorganizarse tendra una secuencia distinta a la que tenia antes de que ese segmento de nucletido se metiera ah. Estas seria de las mutaciones mas nefactas lgicamente por que no es uno ni dos nucletidos los que se cambian si no muchsimos nucletidos. Ahora vamos a ver cuales son las mutaciones que se pueden producir de manera inducida, es inducida por que en realidad lo que esta ocurriendo es que agentes externos van atacar el material gentico y al atacarlo lo van a poder cambiar y van a producir mutacin. Les mencionaba que hay bsicamente tres grandes grupos dependiendo del efecto que generan. Entonces como van actuar los agentes para producir mutacin, bsicamente lo hacen de estas tres maneras, la primera es que cambien las base que tenemos entonces ah un remplazo de una base, podramos decir que seria una sustitucin de base. Otra forma

como otros agentes sobre todo los qumicos podran llegar a actuar es que alteren una base, sea le pongan un adorno de mas o le quiten un adorno entonces cambian una base nitrogenada, va ocurrir lo que se llama un emparejamiento errneo y es apenas lgico por que si tenia una adenina que se apareaba con una timina, y cambie la adenina por que le puse otras estructuras pues ya no empareja como debera emparejas por que ahora tiene otras estructuras sustituyentes y por eso aparece un emparejamiento errneo cuando la base se altera. La tercera posibilidad es que se dae la base y cuando la base se daa ya no puede formar puentes de hidrogeno entonces no se forman uniones y al no formarse uniones estn la cadena una al frente de la otra pero esos puntos como no tiene unin tiende a desestabilizar la cadena y casi siempre producen rupturas en estos lugares y termina generando apoptosis en la clula como un mecanismo para que el ADN daado siga en la clula. Estos serian como lo tres modelos mas generales de lo que puede pasar con una clula cunado tiene el efecto de un agente mutageno externo. Vamos a mirar cual es el principal efecto que tiene lo agentes de tipo fsico dentro de estos estn todas las radiaciones que Uds. quiera, pero para agruparlas de una forma mas general podremos decir que son radiaciones de tipo ultravioleta, ah incluya rayos x,gama,beta etc todo lo que sea de menso de 400 nanmetros que sabemos

que es el espectro ultravioleta. Que es lo que en realidad hace la radiacin solar cuando uno se expone mucho a broncearse y termian generando cncer de piel, bsicamente esto es lo que pasa, se forman unas estructuras que se llaman foto productos, un foto producto es un dmero que bsicamente se forma entre pirimidinas, podrianser dos pirimidinas timinas seguidas o timina citocina seguidas, entonces que ocurre? En todos los lugares donde el ADN tenga dos pirimidinas seguidas dentro de las misma cadena en vez de que las bases nitrogenadas que ah aqu se apareen con la base del frente como debe ser, entonces con las radiacin UV se rompen los enlaces con la pareja del frente y se forman enlaces intracadenicos, por eso se llaman dmeros de pirimidinas por que son uniones entre dos pirimidinas seguidas en una misma cadena y obviamente si las pirimidinas se asocian entre si pues ya no se asocian con la cadena del frente, quedando los puntos del centro sin continuidad, esto termina desestabilizando la doble hlice del ADN y por ende tiene un efecto muy nefato. Ahora las uniones de este tipo las que estamos formando aqu se pueden hacer de dos formas supongamos que esta es una pirmidina y esta es otra podramos crear uniones verticales pero rectas paralelas entre si o podramos formas uniones atravesadas, cuando se forman esas estructuras atravesadas se denominan anillos de cilobutano y las uniones rectas se llaman anillos de cilobutilo, entonces si alas uniones son atravesadas o transversas no

tenemos mecanismos de reparacin, en cambio si las uniones son intra cadena pero de manera lateral y totalmente paralela esas si se pueden reparar, vamos a ver que tenemos una enzima que se llama fotoreactivasa y hace el favor de destruir esos dmeros, en general para la mayora de los dmeros tenemos reparacin, pero ah unos dmeros que si se forman de manera transversal no se pueden romper no tenemos los mecanismos que hagan esto, lo nico que habra para hacer seria que la clula hiciera apoptosis, entonces porque puede terminar generndose el cncer en una clula expuesta a mucha radiacin? Por que cada vez que nos exponemos a la radiacin UV esto ocurre en todos los lugares donde tenemos pirimidinas seguidas en la cadena de ADN vamos a formar los dmeros de pirimidina solo que las enzimas que trabajan reparando nuestros daos los corrigen, pero una de las dos, que pasa si aumenta la tasa de formacin de dmeros por que la exposicin es muy alta y es mayor que la tasa de reparacin de las enzimas pues llega un momento en el que vamos a superar y no vamos a poder corregir todos los distintos dmeros que se forman. Otra segunda posibilidad que pasa si tenemos un paciente que llega deficiente en las enzimas reparadoras de los dmeros pues esa personas si que no va poder corregir los errores, le van a quedar los dmeros formados en ultimas esto implica que la clula o se muera o que la clula se transforme, bsicamente por esto pueden aparecer focos de

cncer de piel en los sitios de mucha exposicin a la radiacin UV. Cual seria el mecanismo bsico de trabajo o de mutacin que genera una radiacin UV? Bsicamente la formacin de fotoproductos dmeros de pirimidinas, aqu otro ejemplo en el que se ven las dos cadenas apareadas como deben estar pero haban dos pirimidinas seguidas, viene el foto producto forma el dmero e impide la unin con la de al frente y en todos los puntos en el que esto ocurra vamos a tener que no hay estabilidad en la cadena del ADN , generando al discontinuidad de la doble hlice induciendo al apoptosis celular. Como actan lo agente qumicos? Como ah un espectro tan amplio de compuestos qumicos por eso es mas comn que conozcamos sus efectos muta gnicos sobre la clula pero en el caso de los agentes qumicos son muchas las acciones que ellos pueden producir: pueden existir y de hecho las ay, pero mejor lo dejamos para lo ultimo. Algunos de los qumicos que actan son los llamados agentes alquilantes acostumbran a donar grupos como los radicales etilo y los radicales metilo, entonces estos agentes alquilantes por ejemplo el etilmetanosulfonato es uno de los productos mas comunes de los motores de combustin por ende muy abundante en la ciudad, que es lo que hace este compuesto qumico? Adiciona grupos etilo, se los adiciona a las bases nitrogenadas, imagnense una guanina que el etilmetanosulfonato le regala un grupo etilo y se convierte en una

etilguanina, esta ya no se va a comportar como una guanina sino como una timina y aparece el cambio de la dupleta adenina timina a guanina citocina, acaba de ocurrir una transicin, como acta la nitrosogunilina? Es muy comn encontrarla en los derivados de acido ntrico que se usa para mantener los colores naturales en los productos crnicos, impide que la hemoglobina se oxide y al impide esto se mantiene el color del tono rosado. Otro agente alquilante es la hidroxilamina forma parte de las pinturas, induce transiciones especificas de guanina citocina a adenina timina y todos los derivados del oxido nitroso que desaminan a la citocina la convierten en uracilo entonces permiten transiciones por que cambian las bases y permites que se aparen de manera diferente. Entonces cualquiera de ellos puede adicionar grupos funcionales nuevos a la base y la mutacin se da por que se cambia la base con quien se aparea. Un ejemplo si la guanina era una purina y ahora se va a comportar como una timina fjense que va a ganar esa adenina y me van a quedar dos bases nitrogenadas de tipo purina y entonces tenemos una trnasvercion por que recuerden que si cambibamos una purina por una pirimidina o viceversa como son de familias distintas eso seria una transversion. Otros agentes qumicos que producen mutacin frecuentemente son los llamados agentes intercalantes, en el laboratorio vamos a trabajar con uno de ellos que es el mas utilizado para visualizar el ADN que es el bromuro de etilo pero otro agentes son intercalantes son la propabina, ICR191, bsicamente

son molculas que se ubican en la parte lateral o central del ADN introducindose como si fueran un sanduis para ubicarse all y generar la posibilidad de que aparezcan una nueva estructura, aqu viene la dupleta normal y de pronto ala molcula se le mete el agente intercalante y cual es su efecto? Pues aumenta la distancia entre cada dupleta y esto se interpreta como la perdida de un nucletido y la enzima en la siguiente replicacin va colocar un nucletido que antes no estaba involucrado, generalmente trabajan produciendo mutaciones de bases nitrogenadas en los puntos que estos compuestos se han intercalado , por que utilizamos agentes intercalantes en el laboratorio? Por que uno de estos agentes el bromuro de etilo se mete entre el ADN y como el ADN es transparente y no se ve nosotros lo podemos visualizar gracias a que el bromuro fluorece se lleva la molcula de ADN a un transiluminador e inmediatamente como el bromuro se meti en el ADN lo podemos ver, otro agente qumico que es muy mutagenico es la aflatoxina pero tiene su vinculo con los agentes biolgicos por que es una toxina bsicamente producida por un hongo silvestre que esta en el ambiente, no ofrece mayores problemas su particularidad es que eventualmente puede desarrollar esta toxina, este hongo es el que por ejemplo contamina el pan, naranjas que en el centro es de color verde y alrededor va quedando blanquito, la aflatoxina genera sitios apurinicos que es que en el sitio donde haya purinas se pierde la base y deja el hueco y el problema es que lo rellenemos

colocando una purina distinta a la que estaba, por esta razn puede producir transvercion, entonces lo que hace la aflatoxina es que viene se incorpora a al molcula, como la hace tan pesada ella se rompe y por eso se dice que se originan los sitios apurinicos. Tambin ay mutaciones cuando se introducen esto agentes qumicos que se llaman anlogos sinteticos y son producidos por el hombre en el laboratorio, son hechos bsicamente como una estrategia de tratamiento para efectivamente de matar algunas clulas, por ejemplo Uds. saben que un mecanismo mara tratar a los pacientes que tiene cncer es la quimioterapia, entonces cual es la estrategia de un anlogo sinttico? Bsicamente supongamos que tenemos de manera natural a la timina, se acuerdan que la timina tiene dos grupos cetos y en la posicin cinco tiene un grupo metilo, ese grupo metilo de la posicin cinco se cambia en el laboratorio para producir un anlogo de la timina que ay atener ahora la posicin cinco, puede ser un bromo o yodo o flor o cloro, como ya no es timina por que le quite el grupo metilo y le puse un bromo pasa a llamarse 5bromouracilo que es entonces un anlogo sinttico de la timina, que va a ocurrir? Cuando las bases nitrogenadas y los ac. Nucleicos ingresan por los alimentos no son tiles para la clula, se degradan en el organismo y dan la vuelta para finalmente ser eliminados a travs de la orina, la pregunta es como se hace para que las bases nitrogenadas que quiero

que se incorporen a la clula puedan llegaras hasta ellas sin ser previamente destruidas? Por esta razn la estrategia de la quimioterapia no se aplica por va oral si no de manera endovenosa, al colocarse de manera endovenosa lo que estamos haciendo es engaando a las clulas para que no se de cuenta que estos elementos llegaron por una va exgena, si no que parezca que han sido producidos por el mismo organismo, que caracterstica tendra que ellos se reciben en la clula se interpreta que este 5bromouracilo era una timina y se incorpora, ahora esa clula va a dividirse, cuando se vaya a dividir el ADN polimeriza empieza a revisar y se da cuenta que esa no es una timina e inmediatamente se para el proceso de divisin celular, no sigue y de esta manera es que se detiene la divisin sin parar de las clulas malignas o tambin es una situacin de tratamiento para las infecciones virales las cuales el anlogo al colocarse all frena la divisin deteniendo la proliferacin del virus, por esta razn cuando se estn utilizando para el tratamiento de un paciente que tiene una infeccin viral son importantes mientras estn en la clula, que pasa si suspendo el tratamiento, pues nuevamente la clula incorpora las bases nitrogenadas normales y todo sigue normal y vuelve el virus y comienza a replicarse, es decir son tratamientos que deben ser permanentes hasta que el individuo se muera por que lo que estoy haciendo es detener la multiplicacin del virus, por que yo no puedo matar el virus lo que hago es detener su tasa de multiplicacin, el problema en

los tratamientos de un cncer es que as como mata a las clulas malignas tambin mata a las clulas propias del organismo que producen unos efectos secundarios muy fuertes como la cada del cabello el vomito, diarrea etc, por que como no tiene una selectividad por el tejido daado si no van por circulacin pues obvio atacan a las clulas malignas y a las normales y este es el problema de los efectos secundarios que pueden descompensar al paciente y llevarlo a la muerte por que lgicamente es un tratamiento muy agresivo, en lo que se esta trabajando es en como llevar el medicamento o el tratamiento exclusivamente al tejido afectado, que es lo que se esta manejando ahora con la radioterapia que es manejar efectivamente los dmeros la clula se desestabilice y en ese orden de ideas se mueran las clulas malignas y no sigan proliferando , entonces el mecanismo de los anlogos es ser muy parecidos a una base pero que al incorporarse permitan que se detenga la divisin de la clula, como entran lo agentes muta gnicos al ncleo? Son capases de viajar solitos. Agentes muta gnicos biolgicos, totalmente demostrado que existen virus que tiene la capacidad de ------ (no se entiende) la clula por que bsicamente despus de incorporar su material terminan transformando alguno de los genes de la clula que van a controlar las divisiones celulares y entonces esta totalmente establecido que el virus del

papiloma produce cncer de cerviz, el herpes simple de tipo dos que es el que infecta a las vaginales, se considera un microorganismo de transmisin sexual y que produce tambin carcinoma de cerviz y la rubeola que sin ser uno de estos, Uds. saben que si llega en infectar una madre en los primeros meses de gestacin se ubica dentro de los tejidos que se estn desarrollando y produce cualquier cantidad de malformaciones, a partir de lo que el a utilizado como clulas para alimentarse y sobrevivir, estas mutaciones no solo mutan la clula sino que la malignizan y vamos a ver que una clula se transforma cuando a sufrido muchas mutaciones, entonces estos son los que tienen un efecto que es conocido como oncognico, no solo hacen mutaciones sino que hacen tantas mutaciones que terminan generando una clula transformada, que quede claro que ganar una mutacin no es de una vez ganar una cncer el problema es tener tantas mutaciones que podamos transformar la clula, ay una bacteria que es el nicoplasma produce multiplesmutaciones pero bsicamente por que hace rupturas totales de los cromosomas entonces tiene un factor altamente mutagenico por su capacidad de hacer ruptura de los cromosomas.

VII CLASE (2H) MECANISMOS BIOLOGICOS DE REPARACION

Habiamos hablado de que eran los mecanismos que generan de manera natural o de manera artificial, por no decir que apartir de agentes externos, cambios en el material gentico, mutaciones, recuerdan?. Entonces vamos a abordar ahora todos los mecanismos q permiten hacer la reparacin de esas mutaciones porq si uds se acuerdan nmbrenme 3 ejemplos q puedan causarme mutaciones en el adn: Agentes qumicos: agentes intercalantes , la radiacin, rayos solares y dems. Porq no revisan el cuaderno haber q dice: por ejemplo no podemos ester en contacto con agentes mutagenos cuando tenemos una patologa q nesesitemos mejorar y entonces hata q dar una quimioterapia, por ejemplo el paciente q tiene q someterse a una radioterapia no esta en presencia de un agente qumico, por ejemplo cuando nosotros tenemos un alimento q se puede contaminar, dijimos con sustancias q tengan toxinas como las aflatoxinas deribadas de las perjilus podran tener agentes mutagenicos, por ejemplo bacterias como la actinomisis o virus con los q estamos en contacto como el vih, el Hermes el hepatitis b, el papilomavirus, entonces la pregunta es si nosotros estamos en permanente contacto con agentes mutagenos porq es la realidad, cual es el mecanismo q desarrolla la celula para evitar esa mutacion, porq el recuerden q el concepto de mutacion esta circunscrito a q el cambio se de pero permanezca dentro del genoma, es decir, la mutacion aparece como un evento inicial por la agresin q causa el agente pero el

organismo tiene un mecanismo de reparacin y por lo tanto de las posibles entre comillas mutaciones q uno puede tener, q vamos a poner un ejemplo, pueden ser unas 20 por cada dia, pues de ellas realmente puede q ninguna sea una mutacion verdadera porq los mecanismos de reparacin va a actuar repidamente para mejorar, cual seria la posibilidad de q eso no se de? Una primera seria una sobre exposicin a un agente mutageno y q por lo tanto la celula no sea capaz de sea a basto de reponer ejemplo el tcnico de rayos x y q esta todo el tiempo en contacto con la radiacin porq esa es su funcion dentro del trabajo, por eso la recomendacin de un contador q q le vaya diciendo cuanta expocision tiene y por lo tanto para ese tipo de trabajos debe haber tiempo, o un periodo en el q la persona debe estar fuera de su lugar de trabajo, para q eventualmente el exeso de mutaciones no sea mayor q su capacidad de reparar y eso induza a q las clulas se transformen. Uds debieron haber visto q en el caso de la malignizasion de una celula el mecanismo es mucho mas comn en la celula q mas se divida por esta razn las clulas como los epitelios , clulas blancas y otros tegidos q tienen una taza de replicasion alta, pues son mas suceptibles a desarrollar un proceso maligno porq entre mas divisiones se tengan pues mas posibilidades de acumular mutaciones, en ese caso cual seria la fuente de la mutacion, si la divisin celular favorece q tengamos mas posibilidad de mutar?

Cuando las fuentes no eran externas, de donde podran venir las mutaciones. De fuentes naturales para producir mutaciones , la principal fuente natural es la replicacin del material gentico, entonces si una celula se divide mas, mas probabilidades de q al momento de hacer la sintes por el mecanismo semi conservativo de sus nuevas hebras vaya a poder incorporar nucletidos erredo y esas mutaciones finalmente puedan qdar en el organismo. En otras palabras: mas comn el cncer entejidos q se dividen mucho q de los q no, y por ultimo, porq a uno le termina dando cncer, o porq el cncer esta asocado con una edad mayor a 50 a;os : es porq a medida q pasa el tiempo las mutaciones se nos van acumulando, hasta q tantas mutaciones acumuladas ayudan o favorecen entre comillas q ciertos genes q ienen q ver especficamente con el proceso del ciclo celular se puedan alterar y entonces aparezca una celula transformada, y apartir de ella todas la dems q se deriben como en la teora clonal, q vamos a ver q es la gnesis mas aceptada de aparicin del proceso maligno, entonces cuando ese modelo no se conserva, cuando tenemos un nio y aparece con un cncer, entonces aqu vamos a decir bueno y aqu q paso con los mecanismos, de ah deriva la segunda teora y es q hay cierto tipo de malignidades q pueden tener adems un patrn heredado, es decir q no necesariamente se desarrollan de una manera adquirida y por lo tanto no obedecen a responder a q se presenten a una edad tardia q seria lo q

normalmente uno esperara a una expocision a muchos agentes. Hay mutaciones q estn directamente asociadas a la aparicin de un cncer y esas mutaciones estn ubicadas en ciertos genes, q si es un gen q sabemos q solo tenemos dos copias por persona para ese gen, entonces heredamos uno de los 2 alterados, es una premutacion, solo me qda la otra copia para q mute y cuando esta lo hace tengo los requisitos para q el cncer se de, o inclusive hay unos tipos de cncer q se ha visto, q conque uno de las dos copias este alterada se comporta en un patron q podramos decir dominante, por lo tanto con una sola copia danada tendramos la presentacin de la patologa. Habran como las dos gnesis y las dos gnesis las vamos a ver estarn variando con respecto a cuales genes van a alterarse y al tiempo de la presentacin de la patologa. Vamos a repasar lo q ya habamos visto, dijimos q la mutacion era un cambio en la secuancia de adn, pero un cambio q tenia q cumplir la caracterstica de q se qdara, fuera permanente, y podra tener estos efectos variados, uno q no se detectara, cuando afectictivamente no cambiara el tipo de aminocido, dejara la misma tripleta, o podra si cambiar un aminocido pero este no tener una funcin muy espacifica dentro de la protena y por lo tanto no cambiar su funcionabilidad, otra posibilidad era q si el aminocido nuevo produjera un sentido errneo y podramos tener desde q no pasara nada realmente, hasta que se notara algn cambio q no

fuera incompatible con la vida o alguno q definitivamente no fuera permitido para la celula y produjera PROBABLEMENTE UN PRODUCTO ABORTIVO, por ultimo podramos tener q la mutacion generara uno de los tres codones de terminacin, y en estecaso tendramos un truncamiento o una terminacin abrupta de la sintes de la protena con lo cual el producto podra ser no utilizable, y tendramos seria una ausencia de respuesta para ese tipo de protenas; por ejemplo: con respecto a la hemo globina, dijimos q un sentido aceptable seria la hemosglobina ikari, podramos tenerla perfectamente entre nosotros, porq solamente se detectara en un patrn electrofortico y en realidad la funcin proteica estara totalmente conservada, podramos tener un sentido parcialmente aceptable, siendo errneo, permitir la vida como es el caso de la anemia de las clulas falciformes, donde si el paciente mantiene una baja necesidad de o2, puede mantener un ritmo de vida acaptable, o podriams tener un sentido totalmente inaceptable como es el caso de tener en la cadena alfa de la hemoglobina A una mutacion en la posicin 58,q esla q permite la unin del hierro a el grupo hemos este alterada, entonces lo q ocurre es q esta hemoglobina va a fijar hierro ferrico en lugar de hieroo en estado ferroso y ello nos lleva a q no pueda llevar oxigeno, luego hace a esto incompatible con la vida. De donde podramos tener la fuente de la mutacion, la primera seria un evento expontaneo o natural va a darse sobre la celula en cualquiera de estos tre

momentos mas probablemente: en el momento de replicacin de la celula, q se cometan errores y estos no se corrijan, en una lesin fortuita de una celula q significa que puedan perderse algunos de los nucletidos porq se liberen de la celula o por ultimo cuendo tenamos este tipo de genes saltarines o elementos trasponibles q poeden cambier dentro del genoma y ps obiamente a donde lleguen pueden alterar una secuencia y lgicamente producir una mutacion. Entonces en los errores de la replicacin tenemos rpidamente tres posibilidades, una q lo q se cambie ni se gane ni se pierda, sino se sustituya, entonces seguimos conservando el numero de nucletidos, pero se cambio una guanina por una timina, si el cambio es poner una base nitrogenada de la misma familia es decir pirimidina por pirimidina, tenemos lo q se llama una transcision, en cambio si se cambia una pirimidina por una purina se llama una trasversion, en general tienen efecto mas nefasto las trasversiones q las transisiones. Tambin podramos tener las otras situaciones, no q cambiemos sin ganar ni perder sino q efectivamente perdamos o ganemos nucletidos, entonces estos son todava mas agresivas dentro del genoma porq van a producir las llamadas mutaciones pram-chi, en espaol mutaciones con corrimiento del marco de lectura entonces ahora todo los aminocidos q se ponen en ese gen especifico van a dar ahora secuencias distintas, vamos a tener ahora protenas con una nueva composicin, y obiamente aca tambin

correriamos el riesgo de q una de esas nuevas tripletas q se formen involucren alguna tripleta q sea de parada, y se genere entonces un codn stop, con lo cual parara la sintesis de la protena.Perder o ganar nucletidos, e las mutaciones, tiene un efecto mas efasto en la mayoria de las ocaciones que tener una sustitucin. Cuando tenemos el segundo tipo de mutaciones naturales? Las sesiones fortuitas, es decir, cuando eventualmente dentro del material gentico se desamina una base nitrogeneda, ejemplo, la citocina su grupo amino y se comporta como si fuera un uracilo, normalmente la citocina tiene en la posicin 4 el grupo amino, y si se pierde este grupo amino, tenemos la ganancia de dos grupos cetos y un uracilo, tambin puede ocurrirle a la adenina q se desamine y entonces se convirte en una hipoxantina, y porq es es una mutacion, porq esa base nueva q aparese se va a aparear con una nueva q no era la del frente, muchas veces la mutacion en si no es el cambio de la base sino q esa nueva base, cuando venga una nueva replicacin, no va a poner al frente lo q haba. Entonces lo q realmente hace q las desaminaciones y las lesiones fortuitas sean mutaciones es q no cambien puntualmente esa base sino q inducen a q lo q aparea al frente se una nueva base y en ese momento queda introducida la mutacion. Otro tipo de la lesin fortuita es la depurinacion, q significa q se pierde o se quita la base nitrogenada, una sola, en general las purinas, guanina y adenina,

se desprensen o se sueltan y dejan un hueco en la doble hlice, porq les estoy repasando esto, porq ahorita q miremos los mecanismos de reparacin cada uno de ajusta a cada uno de los tipos de errores. En el caso de la depurinacion conserva el azcar y conservo el fosfato y sigo unido ala cadena de al frente por los dems sitios pero esta base de aqu no tiene con quien unir y por que porque aqu no hay imagnense que se halla echo un hueco se halla sacado solo la base y me halla quedado el azcar con el grupo fosfato, eso es una depurinacion. Y finalmente dijimos que los transposones van ha poder hacer mutaciones porque eso es lo que ellos hacen son los nicos elementos o las nicas regiones de material gentico que pueden cambiar fsicamente de lugar porque ustedes debieron haber aprendido el concepto de que un gen esta ubicado en su misma posicin y esa misma posicin se denomina en singular su locus y se denomina en plural su loci entonces ahora estamos diciendo que hay segmentos de adn que si pueden cambiar de lugar, los transposones no son genes porque estn ubicados en las regiones medianamente repetidas y por lo tanto no obedecen a regiones que codifiquen para protenas pero como pueden viajar en el genoma ellos si pueden hacer algo; salir del sitio donde estaban en las regiones medianamente repetidas y vengan y se ubique donde hay un gen, entonces que pasara con un gen que gane una secuencia que no tenia pues al final

queda muchsimo mas largo y queda con una serie de nucletidos que no lo estaban formando y por lo tanto la protena que se forme a partir de el va a ser diferente. No es que esto ocurra todos los das ni que sea muy frecuente en el genoma pero puede suceder que los trasposomas vengan y cambien regiones de los genes estos trasposomas se cree que se ganaron a partir de segmentos de virus que se incorporaron en el genoma humano entonces ustedes han escuchado como los virus vienen e infectan a la clula y que no tienen toda la maquinaria para desarrollarse solos sino que tiene que ser parsitos de una clula husped ellos lo que van a hacer es que van a incorporar su genoma a la clula blanco y cuando llegan y salen dejan regiones de su composicin dentro de la clula por esa razn es por lo que cuando uno ha tenido una hepatitis le evalan para donar sangre es si uno a tenido hepatitis ya que se pueden conservar esos virus incorporado en su clula y que esas clulas cuando lleguen al nuevo individuo y si esa persona no se ha infectado nuevamente se podra desarrollar el proceso infeccioso lo mismo aplica para el virus bph, hiv y para todos los virus que ustedes quieran imaginar. Entonces ocurre que los fragmentos de los virus que han quedado en los seres humanos parece ser que es lo que ha quedado de esos genes saltarines o trasposones que no eran de nuestro genoma pero que se han ido incorporando a partir de las infecciones virales que han tenido nuestros antecesores. Y as como tenemos mutaciones que de

manera natural pueden producirse tambin tenemos mutaciones como respuesta a agentes que tenemos en el entorno por eso se llaman mutaciones inducidas y pues las hay de todas las tres familias; pueden haber agentes qumicos fsicos o biolgicos que produzcan mutacin. Dentro de los fsicos casi todos tienen que ver con las radiaciones que vienen del campo ultravioleta (rayos gamma, beta, delta, rayos csmicos, x) todo lo que tenga menos de 400nm hacia abajo es lo que se considera el rango de las radiaciones uv y todas ella actan mediante un mismo mecanismo que es el de producir o generar fotoproductos un foto producto es organizar todos los lugares donde el genoma tenga pirimidinas seguidas en una misma cadena formar puentes intracadena y por lo tanto evitar que la base se aparee con la de al frente. Eso lo que genera es muchos puntos de no unin entre las dos hebras y eso genera inestabilidad genmica y en general las clulas terminan haciendo proceso de apoptosis por ea inestabilidad o en su defecto hay que entrar a corregir esos dmeros y entonces tendremos un mecanismo de reparacin especifico para la formacin de los dmeros de pirimidina cuantos dmeros se pueden formar? Todas las que quieran porque eso depende de cuantas dupletas de pirimidinas halla en el adn y esa es una variante en la que se puede cambiar de persona a persona pues el genoma puede tener distinto nmero y diferente secuencia dependiendo del sitio que estemos analizando. Cuales son los efectos de los

qumicos, hay un amplio espectro de agentes muta gnicos pero aqu voy a mostrar los ejemplos mas comunes; dijimos que uno de ellos eran sustancias que jugaban como sustancias anlogas a las bases es decir qumicos producidos en el laboratorio con un pequeo cambio en las bases nitrogenadas con el nico inters de que se incorporen en un genoma y que impidan la replicacin de la clula, se utiliza en el caso en que una clula que esta infectada con un virus se multiplique pues entre mas se multiplique mas vamos a invadir a los tejidos con la infeccin viral un ejemplo tpico es la persona que se infecto con el virus HIV entonces como se mantiene ese paciente sin que desarrolle el SIDA, bsicamente manteniendo el virus en el mnimo de las posibilidades de replicacin y como hago para que no se replique y es dando estos anlogos pues una vez incorporados al ADN de las clulas infectadas cuando la polimerasa viene para tratar de hacer una replicacin de esa clula, reconoce que esa base tiene un detallito diferente al natural e inmediatamente para el proceso de replicacin. Son capaces estos mecanismos de destruir el virus? Pues no porque al virus no le estn haciendo nada solo estn parando la replicacin de la clula para dificultar la multiplicacin. Que pasa si se suspende el tratamiento pues inmediatamente se incorporan otra vez las bases normales, esa persona va a poder dividir sus clulas de manera normal y entonces el virus vuelve a comandar la replicacin del material y en una replicacin muy grande tenemos

que el paciente desarrolle el sndrome como tal del SIDA. Otra cosa, en esas quimioterapias les deca yo, que no tenemos todava la posibilidad de ser exageradamente selectivos como solamente para atacar a los LINFOCITOS T CD4+, pues el tratamiento al no ser selectivo va a traer algunos efectos secundarios no deseados. Otras sustancias bastante muta gnicas son los agentes alquilantes que les deca yo que generalmente se producen por de los motores de combustin. Cuando un motor esta funcionando genera muchos txicos, por eso es ms comn tener mutaciones en la ciudad que en el campo. Por ej. El metiletanosulfonato, esta bsicamente en lo que se esxpide en los motores de combustin, la nitroso guanidina la vamos a encontrar por ejemplo en algunos de los aditivos de los componentes de los alimentos que ayudan a mantener el color rozado como para los embutidos, y la hidroxilamina que la podemos utilizar en el laboratorio para coloracin y el acido nitroso que aparece de mltiples combinaciones o lugares donde el puede estar actuando. Los agentes alquilantes pegan o alquilan a las bases. En el caso de la guanina cambia este grupo ceto por un grupo metilo, entonces los agentes alquilantes pueden colocar agentes metilo o etilo entonces acaban de cambiar la base para cambiarla de guanina a una 6metil guanina la cual se va a comportar diferente. Tambin tenemos la accin de los agentes

intercalantes los cuales no van a cambiar ninguna base sino porque se introducen en el medio de un par de bases, aumentan la distancia entre dos bases entonces la polimerasa interpreta que se perdi una base e incorpora nuevos nucletidos al azar introduciendo con ello la mutacin. Ejemplos de agentes intercalantes son la profalavina, la naranja de aquirina, bromuro de tidio, el ITR 191 y muchos mas. Y esta que a pesar de estar en los grupos de los agentes qumicos realmente se genera a partir de los agentes biolgicos por que es una toxina, que es la alfatoxina que es producida por un hongo el cual para este funciona como un mecanismo de defensa pero cuyo mecanismo real es producir transversiones, que es mas grave que una transicin, entonces los agentes son mgatenos porque en realidad producen mutaciones, no son agentes cancergenos lo que en realidad ocurre es que se acumulan muchas mutaciones y lo que lleva a que la clula se convierta en una clula cancergena, entonces lo que quiero decir es que no hay un agente que por una exposicin o dos vaya a producir cncer. Y dentro de los virus que estn implicados que tienen implicacin de mutacin sobre una clula y dentro de las bacterias hasta ahora que se sepa esta el MICOPLASMA. COMO SE DEFIENDE LA CELULA Siempre comienza a defenderse por el mecanismo ms sencillo y mas tarde si es necesario va activar el

mecanismo mas sofisticado. La respuesta tambin se da al principio puntualmente al dao que sufri y segundo tan exagerada como se necesite. LO mas sencillo es este mecanismo que se llama la detoxificacion: Uno de los mecanismos mas frecuentes de mutacin es el echo de que la clula se oxide es decir la ganancia de los famosos radicales oxido y superoxido que la clula envejece y se muere, entonces cuando se producen estos radicales por el proceso metablico lo primero es que se active esta enzima que es la superoxido dismutasa que hace que los radicales oxido y superoxido no le vallan a oxidar sus estructuras de la clula entre la que se encuentran las bases nitrogenadas, porque en vez de tener un grupo amino se convierte en un grupo ceto y esto vamos a ver mas adelante cuando hablemos de metabolismo que cada vez que una estructura qumica se va oxidando es sinnimo de que se va a degradar , es decir que el proceso final metablico es hacia la oxidacin de los compuestos, y por lo tanto es un comn que estemos reuniendo radicales oxido y superoxido y lo que hace la clula es que active a la SOD y lo que hace esta es que cualquier molcula que halla recibido este radical viene y lo convierte rpidamente en perxido de hidrogeno y sobre este vienen y actan la catalasas que vienen y lo convierten en agua y oxigeno, entonces ese es el primer y mas sencillo que tiene la clula para salvarse. Que pasa cundo se presenta la situacin que se presenta de manera natural en la que se podan

generar lesiones fortuitas (desaminacion y depurinacion) vamos a ver como actan unos mecanismos para hacer la prevencin de esta lesin: Dijimos que las radiaciones UV iban a generar unos foto productos que se eliminan por la accin de la enzima fotoreactivante, es decir que es una enzima que nicamente trabaja en la presencia de la luz blanca y su funcin es romper las uniones intracadena para que se pueda volver a asociar con la cadena de al frente. Este arreglo se da si y solo si estas uniones se dan PARALELAS, pero podra ocurrir que el dmero se forme por uniones cruzadas, las cuales no tenemos enzimas para reparar ese tipo de mutacin lo que ocasiona que si se acumulan muchas causa la muerte celular. Que pasa cundo tenemos un proceso de alquilacion dado por ejemplo por el metiletanosulfonato, entonces existen enzimas llamadas transferasas que reconocen especficamente el grupo alquilo entonces lo que ellas hacen es venir a quitar el grupo alquilo que el agente puso y dejar la base como era. Tambin tenemos tranferasas para reconocer grupos etilo y metilo.

Pregunta: Existen dmeros de purina.

Respuesta: NO. Ya que lo que facilita que se de estos dmeros en las pes que estas tengan solo un anillo, mientras que las purinas como son dobles y estn apareadas frente con frente no tienen a formar dmeros. Como actan la transferasas? La 6-metil guanina produce una mutacin ya que impide la formacin de todos los ptes. De H que deberan formar, en donde quedan unidos solo por uno y no por tres como debera ser y esto desestabiliza la unin. La transferasa, que tiene radicales cistena los cuales se unen al grupo metilo, lo une y libera a la base nitrogenada de esa manera de ese metilo. Se acuerdan que habamos hablado de la s-metil cistena o s-metil metionina los cuales pueden remover los metilo y luego llevarlos a otras estructuras Vas de escisin general: Es la mas comn de las vas de activacin para los mecanismos de reparacin, porque tambin hay una va de escisin especifica entonces viene la ADN polimerasa y que ella ustedes saben que tiene funcin de extremo 5 a 3 la funcin de polimerasa pero cuando llega a el extremo 3 se devuelve y hace funcin de exonulceasa de 3a 5y si encuentra algo errado lo quita o escinde. Entonces esta es la va de occiso

general en la que la ADN polimerasa en cuando reconoce un error el cual lo puede reconocer de diferentes maneras: o cuando lo que esta apareado con lo de al frente no corresponde por ej. Cuando en vez de tener G-C tengo G-T en donde no hay una correspondencia de complementariedad, o la otra es cuando el emparejamiento esta por un solo puente y por los otros no lo cual puede ser porque algo esta errado en las bases en el emparejamiento. Entonces ella reconoce el error y siempre saca entre 10 y 11 nucletidos los escoge partiendo del centro en que esta el error y coge 5 hacia arriba y hacia abajo en donde se asegura de que se saque el error , una vez escinde los nucletidos acta en el sentido contrario polimeriza y coloca los nucletidos correctos y como ustedes saben que la ADN polimerasa no es capaz de colocar nucletidos por el extremo 5 eso es una limitante que tiene entonces pone el ultimo de los 10 o de los 11, pero hay queda en el aire con respecto al siguiente, entonces el ultimo punto ser que venga una ADN ligase y una o selle las dos bases nitrogenadas contiguas que quedaron que se acaban de poner.

Pregunta: Las vas de escisin general se utilizan para reparar errores que se dan despus de la replicacin, ya que recuerdan que un punto para ganar mutaciones era cundo se daba la replicacin, entonces este mecanismo se activa cada vez que se esta dando la replicacin y que tenemos que revisar para ver que todo este correcto. La pregunta es la siguiente, resulta que aqu hay una hebra y aqu hay otra hebra, cabe mostrar que la polimerasa abraza las dos hebras y tanto para polimerizar lo hace tanto para abajo como para arriba y resulta que encuentra dos que no cuadran entonces tiene que escindir solamente la cadena defectuosa, no va a escindir las dos cadenas, tenemos un plan que es por halla el plan z en que se van a quitar el pedazo de las dos cadenas, porque imagnese la gravedad de llevarse por halla las dos entonces que me queda de molde, yo como se que era lo que tenia que poner ah, entonces solo quito una cadena porque la otra me sirve de referencia si hay una T-G que yo se que esto no puede ser ya que guanina deba estar con citosina y t con a como hace esta encima para saber cual de las dos no es porque imagnese que vaya y quite la que era correcta y ayudo a hacer el favor de dejar la mutacin, entonces como sabe cual era la correcta y cual era la que deba quitar. Cual es el mecanismo de una clula

normal nuestra en el caso femenino cuando tiene mas de un cromosoma X? que hace con el otro? O los tiene activos los dos? CONTINUACION Resulta que aqu hay una hebra y aqu hay otra hebra, y nosotros tenemos por ejemplo aqu un error, mejor dicho por ejemplo, la clula esta revisando, cierto!!; la polimerasa en realidad se ha visto en modelo que abraza las 2 hebras y tanto para polimerizar lo hace para abajo como para revisar, y resulta que aqu encuentra 2 que no cuadran, aqu hay una guanina y aqu hay una timina. Entonces la pregunta es; pues claro que llega y escinde, pero ojo no escinde las 2 cadenas, no tenemos sino un solo mecanismo que lo vamos a ver por all al final que es como el plan Z, que puede quitar las 2 cadenas porque imagnese la gravedad de llevarme las 2 y entonces que me queda de molde; yo como se que era lo que tenia que poner ah. Entonces todos los mecanismos quitan y cambian una cadena, pero la otra no porque la otra le sirve de referencia. Entonces la pregunta es: si aqu hay una timina y aqu una guanina y yo se que eso no puede ser, porque guanina deba estar era con citosina y timina con adenina; como hace esta enzima para saber cual de las 2 es la que no es?... porque de hecho poda ser

timina con adenina entonces la que estaba mal era la guanina, o poda ser que era la guanina con citosina y la que no me sirve es la timina como resuelve ella ese problemita... Porque imagnese que tan viva de pronto quite la que era correcta y entonces le ayudo a hacer el favor de dejarle la mutacin, se llevo la guanina que era la que deba dejar y entonces le puso a la timina, la adenina en frente y ahora si que las embarro mas rpido. Entonces como sabe a cual le cree de las 2, cual era la correcta y cual debe quitar??... Cual es el mecanismo que utiliza una clula normal nuestra en el caso femenino cuando tiene mas de un cromosoma X; que hace con el otro o los tiene activos los 2?.. bueno si no se acordaron ubiqumonos en este escenario porque sino nos tocara desviarnos mucho. En realidad el otro cromosoma X se inactiva, pero les preguntaba por el, porque el mecanismo de inactivacin que opera all es el mismo que trabaja ac, y es que siempre la clula cuando termina de hacer toda la replicacin y de revisar; es decir, al final de G2 antes de entrar a la divisin celular, inmediatamente coge sus dos hebritas y las metila ambas. Para que las metila?.. para que la clula entienda que como quedo quedo, es decir, despus de que las metilo no hay vuelta atrs. Entonces cuando estamos en la divisin celular y tenemos un error, como sabemos cual fue el error y

cual es lo verdadero; porque la hebra, que se acuerdan que el patrn es semicoservativo, tiene una hebra antigua y una que se forma; entonces la hebra de la que se forma esta metilada y la nueva esta sin metilar; donde encuentre de las 2 la metilada ella sabe que la hebra que tiene que cambiar es la otra; podra ser la timina o podra ser la guanina, no lo sabemos; porque es la metilacion la que le dice, y una vez que corrija el error y haya terminado de hacer la revisin, al momento inmediato anterior de la divisin celular metila ambas y quedaron as las dos, y para prximas divisiones siempre ser el mecanismo de reconocimiento del molde original correcto y del que estaba apenas formndose que con sus errores podra haber apareado una base que no corresponda, entonces en esos casos para hacer el reconocimiento, nos valemos del mecanismo de la metilacion. Entonces aqu ven el ejemplo: esta pasando la polimerasa revisando y encuentra todo perfecto, pero aqu de pronto encontr una cosa que no cuadra; fjese incluido un dimero de pirimidina o podra ser simplemente un apareamiento errado entre esto y esto o un desapareamiento, porque podra ser que las dos bases en realidad eran las que correspondan pero que por alguna razn no estn bien apareadas. Entonces cuando encuentra una distorsin de la doble hlice; ella reconoce y rompe por aqu y por aqu, y escinde mas o menos de 10 a 12 nucletidos; los saca y viene y sintetiza todos los correctos que deberan

haber aqu y una vez que termina entonces sabemos que este punto de sello ella no lo puede hacer, porque no es capaz de polimerizar pegndole al extremo 5 por eso interviene la ligaza para unir el punto y acaba de quedar corregido el error. Esa es la va de escisin general y es la que la clula mas aplica o mas utiliza como mecanismo de reparacin. Aqu ven un ejemplo similar y la correccin. Resulta que para hacer ese mecanismo de correccin debemos utilizar las enzimas, que bsicamente hagan esa funcin de reparar; y por supuesto que las enzimas como la gran mayora son de naturaleza proteica, pues podramos tener histonas que tenga mutaciones en el gen que da lugar a la DNA polimerasa, por lo tanto el mecanismo de reparacin se va a ver comprometido. Porque lgicamente que pasa con una enzima que debera reparar y no repara porque esta alterada?... en ese caso todos los errores empiezan a quedar y entonces esa patologa en la que tenemos alterada la va de reparacin por escisin general produce una enfermedad que se llama xeroderma pigmentoso en el que bsicamente las personas empiezan a desarrollar en todos los puntos donde hay errores pequeos tumores o pequeos focos de clulas malignas; porque empiezan a reunirse mutaciones y estas no pueden ser corregidas porque su mecanismo de reparacin esta alterado.

Bsicamente cual para hablar de xeroderma pigmentosos, el de la DNApolimerasa que tiene funciones de exonucleasa, sea la que interviene como mecanismo de reparacin y por supuesto lo que va a ocurrir es que: 1ro si es una enfermedad con mutacin de un gen, pues es una enfermedad gentica. 2do el nio desde que nace, nace con la deficiencia. 3ro su mecanismo de presentacin va a ser a una edad temprana, lgicamente porque desde el principio tenemos el error. 4to entre mas nos expongamos a la radiacin, peor nos va a ir, porque mas primero se puede formar y solo tiene activo su mecanismo de enzima fosforreactivante para corregir rpidamente, pero el segundo mecanismo de la va de escisin general no le sirve y entonces van a formarse mltiples focos de muchas mutaciones que finalmente se van a malignizar, entonces el cncer mas comn para esos pacientes es el cncer de piel. Buenoy as como hay una va de reparacin general tambin hay una va de reparacin especifica, la cual va a corregir los errores fortuitos de los que hablamos: la desaminacin y la depurinacion. Como se corrigen las desaminaciones: entonces se activa un mecanismo que se llama de reparacin con glucosilasas; es decir hay enzimas encargadas

bsicamente de reparar esas desaminaciones y hay un segundo mecanismo que es cuando se generan sitios apurinicos, entonces se activan unas endonucleasas especificas de sitios apurinicos. Como actan entonces estos 2 mecanismos: La accin de las glucosilasas; que es lo que ocurre cuando hay una desaminacin?... aqu hay un ejm: esta guanina debera estar apareada aqu con una citosina, como la citosina se desamino se convirti en un uracilo, entonces por eso el uracilo no empareja con la guanina porque no corresponde. Cual es el mecanismo de reparacin de esa desaminacin?... entonces aqu aparecen unas enzimas que se llaman glucosilasas que viene y quitan a la base que se haba desaminado y sacan el uracilo; que pasa cuando queda este hueco aqu?.. se queda comportando esa glucosilasa que saco el uracilo y genera lo que se llama un ciclo apurinico porque fjense que esto era lo que ocurra con la depurinacion, se va solo la base y queda el azcar y los fosfatos, nicamente deja un hueco. Entonces lo que hace la glucosilasa es eso; reconocer todos los sitios desaminados y sacar solo la base para que la clula lo interprete como si fuera un sitio de depurinacion y entonces ahora el 2do mecanismo que se activa es el que se activara para los sitios apurinicos. Entonces se activara la endonucleasa para sitios apurinicos y encuentra que aqu esto es un hueco y al encontrarlo lo rompe y al romperlo quita los 2 elementos que

faltaban; el azucar y el fosfato y deja el hueco completo y ahora una DNApolimerasa viene y coloca el nucleotido correcto y finalmentela ligasa cierra. La estrategia de la glucosilasa es en realidad reconocer los sitios desaminados o las bases, para sacarlas, y al sacarlas originar un sitio apurinico y de all para adelante sea porque la glucosilasa me quito la base sea porque se callo de una manera natural; el sitio de las apurinaciones funciona con un reconocimiento de una endonucleasa que quita los 2 elementos que sobraban, azcar y fosfato, una polimerasa que pone el nucletido correcto y una ligaza que sella. Entonces que diferencia tiene con la va de reparacin general, pues que no se sacan 10 nucletidos, solo nos concentramos en el nucletido que tiene el error. Vuelve y explica de nuevo la imagen Este es el mismo mecanismo de la mitad para adelante porque es el que operaria si lo que se perdi fue una purina y entonces tenemos la depurinacion y como actan las endonucleasas que reconocen sitios apurinicos?.. haran bsicamente lo mismo. Tenemos de manera natural la perdida aqu de la base, luego la abertura por la endonucleasa para quitar el azcar y el fosfato, aqu la DNApolimerasa

colocando el nucletido correcto y luego la ligasa serrando y quedo corregido el error. Pero resulta que la clula se tiene que proteger hasta lo que mas pueda de una mutacin, porque es que introducir una mutacin es gravsimo para ella y obviamente para la integridad del ser donde esta ubicada la celulita, entonces a pesar de que halla activado todos estos mecanismos podra suceder que todava se le halla escapado una mutacin, entonces tiene nuevos mecanismos para volver a revisar y a corregir e impedir que le quede un error. Entonces estos mecanismos los activa cuando?... despus de que se ha dado la replicacin, ya activo todos los anteriores y le toco, en teora corrigi todo lo que estuviera mal, pero de todas maneras vuelve y se asegura; por eso la etapa G2 se demora tanto y por eso esta claro que en esa parte del ciclo celular la clula esta dedicada principalmente a corregir y a revisar para que no le vaya a quedar ningn error en ningn punto. Entonces que mecanismos se activan en ese momento posterior a la replicacin: bsicamente estos 2, el sistema de reparacin por emparejamientos errneos el segundo que es el sistema de reparacin por combinacin. Quienes trabajan para corregir emparejamientos errneos?.. unas enzimas que las van a encontrar en

todos los artculos como RER que se llaman sistemas o enzimas que forman los mecanismos de reparacin posteriores a la replicacin. Entonces son grupos o complejos de enzimas que actan haciendo esto, aqu los pueden ver. Entonces tenemos el ADN, en teora el ADN ya estaba perfectsimamente correcto y supuestamente en la replicacin se haba revisado y se haba corregido. Estamos en G2 vuelven estas enzimas a revisar y fjense que aqu les estn mostrando 2 cosas importantes: Numero 1 que ven de raro aqu como se cual es la nueva o cual es la vieja, de tanto en tanto aparece una metilacion; en general se metila una sola de las bases, porque para que vamos a metilar todas las bases y a gastar mas grupos metilo, NO, peridicamente se encuentra una determinada base y esa base se metila; por ejm se metila las citosinas o por ejm se metilan las timinas y no todas las bases. Entonces primera cosa que vemos aqu es que la hebra vieja de la nueva esta diferenciada gracias a la metilacion. 2do que vemos; por aqu todo perfectsimo, pero aqu que, aqu hay una cosa que no cuadra; entonces bsicamente este reconocimiento se hace por emparejamiento errneo, porque?.... porque se distorsiona la doble hlice, sea no me cuadra esto que llamaramos el dimetro, o esta mas chiquito o esta mas grande, o una base esta as en vez de estar as, entonces cualquier cambio sutil que se

detecte, de una vez se nota que ah hay algo que no es correcto. Entonces fjense que estas enzimas reparadoras posteriores a la replicacin no son solo una, ni son solamente de una subunidad, sino son grupos de enzimas que tienen varias subunidades cada una de ellas y que trabajan revisando, entonces ellas reconocen que aqu hay algo que no cuadra y como ya saben que a la que le tiene que creer es a la metilada pues por eso hacen la ruptura de la hebra del frente y corrigen el error. Como corrigen el error?... como son enzimas reparadoras posteriores a la replicacin, son tambin polimerasas, sea corrigen de manera similar a como lo haban hecho por la va de escisin general. Cual es la diferencia?... el momento en el que lo hacen, estas se activan despus de la replicacin en la fase G2, las otras estn ah trabajando en replicacin y de una vez de para abajo hacia arriba en revisin y encuentran el error y de una vez lo corrigen, estas no, estas solo se activan despus de terminar la replicacin. La diferencia entonces es el tiempo en el que se hace y la especificidad de enzimas, porque si bien estas tambin son polimerasas con fx de polimerasas y exonucleasas; son producidas por genes distintos que los que producen las polimerasas normalmente; sea esta no es la polimerasa que uno ve, estas son distintas que trabajan para corregir errores posteriores a la replicacin.

Cuando ya acaba G2 y esta segura de que todo quedo, es posible que haya una mutacin introducida pero que no se capto, luego que se mutilen ambas hay ya hablamos de mutacin real. Ojo con este mecanismo, ojo con estas enzimitas porque estas enzimas en los ltimos 10 aos se ha encontrado que obviamente al igual que cualquier otra protena, podra mutar, podra tener los genes alterados y por lo tanto la enzima podra no trabajar correctamente. Que pasara si un grupo de enzimas que tiene como funcin despus de la replicacin de revisar si hay errores y corregirlos, que pasara si no corrige?.. ser grave para la clula, si para el nio que tenia xeroderma pigmentoso, tener alteradas las que revisan normalmente en las condiciones generales, era casi sinnimo de desarrollar un cncer contra el tiempo, en este caso lo que se ha encontrado es que alrededor del 20% de los canceres espordicos y canceres heredados que tenemos, eso lo vamos a ver en detalle el semestre entrante en gentica, son producidos porque tenemos alteradas estas enzimas, antes solo se reconocan como va de produccin de cncer la de la alteracin de los oncogenes y los genes supresores de tumor, esa era la nica va conocida y se conoca como la va supresora. Ahora se sabe que un pequeo numero o porcentaje de canceres se pueden originar porque la persona tenga mutaciones en estas enzimas y entonces no corrija errores. Y porque esta podra ser una va de

origen de cncer.., pues porque seria obvio que si mis mecanismos de reparacin no actan, pues las mutaciones en realidad se queden y se pueden unir mas rpido tantas mutaciones como para que la clula se transforme. Y si despus de toda la activacin de estos mecanismos todava puede suceder que a la clula, le hayan llegado muchas mutaciones y las necesite reparar, su ultimo mecanismo y por eso se llama S.O.S es este mecanismo para reparacin, cuando activa este mecanismo, si y solo si, la agresin de las mutaciones que le llegaron fueron muchsimas y de manera simultanea. Un ejemplo: cayo la bomba atmica, entonces cual cuento que venga y le reparo de a una clula por una, si es que todas se le daaron completamente. Entonces cuando viene una presencia de agresin muy fuerte para la clula, tan grande como que por ejemplo se haya introducido rupturas en muchos lugares del ADN pues entonces puede pasar eso de que no es que tenemos aqu que una distorsin sutil o que de pronto esta base no cuadro con esta; es que me cortaron el pedazo del material gentico por una agresin muy fuerte, entonces en esos casos se activa este mecanismo porque en realidad su fx es sta. Fue tan fuerte la agresin que lo que voy a tratar es de que la clula no se muera; pero por seguridad que mutaciones van a quedar y van a quedar muchas; porque? Como ser que a mi me quede esto cortado y

esto cortado, pues cuando vayamos a tratar de reunir pedazos es posible que los pedazos no me queden en el orden en que me deberan quedar, porque yo no se el orden en que realmente estaban, no tengo moldes, no hay secuencias, hay pedazos sueltos, entonces lo que se busca es que la clula trate de recuperar sus cromosomas como eran pero es perfectamente posible que le queden algunos fragmentos en un orden distinto, que la distorsin efectivamente se de y que las mutaciones queden pero como les digo ah no hay mas escapatoria sino tratar de buscar que la clula no se muera y es entre morirse o tratar de continuar viviendo y con toda seguridad van a quedar mutaciones pero como les digo su accin es evitar que la clula muera. Entonces en esos casos se ha visto que estos genes se activan, aqu hay mucho proceso de investigacin en este momento porque estos son algunos reconocidos, pero se sabe que hay muchos genes mas; este gen el rec A y el umu C lo que van a hacer es quitar entre comillas la limitacin deque la polimerasa solo polimeriza si tiene un molde, por eso requeramos el primer para que siguiera adelante, aqu tenemos fragmentos cortados cual molde de que?, entonces estos genes lo que ayudan es a activar que las ligasas peguen y peguen fragmentos unos con otros que no pidan molde ni tanta cosa porque de eso no tenemos en este momento. Entonces simplemente favorecer uniones para reestablecer el material y la integridad celular, esto es lo que realmente ellas van a estar haciendo, sin que puedan obviamente evitar la

presencia de las mutaciones porque como no me va a quedar mutado si el pedazo 1 quedo ahora en el 4, el 2 en el tercero y el 3 se me perdi, pues claro que van a haber mutaciones pero la idea es evitar la muerte celular. Cuando se activa: solamente si ha sido tan fuerte la agresin que han producido mltiples rupturas y no tenemos molde para poder trabajar. Entonces en resumen cual seria una estrategia de reparacin que la clula utilizara y de que manera o en que orden la activara: 1. si tiene un error sutil sin distorsin, por ejemplo un sitio apurinico, que distorsin le va a quedar a la clula si la clula esta perfecto el ADN solo que hay un hueco donde se quito la purina, entonces en este caso, cuando hay un error que es sutil y no hay distorsin de la doble hlice las vas que van a arreglar esos errores son las vas de escisin especifica, las que vimos que era la activacin de la endonucleasa de sitios apurinicos y la glucosilasa. 2. cuando la doble hlice se distorsiona es porque lo que esta emparejado frente con frente no corresponde y entonces queda o mas ancho o mas flaquito y entonces ah ya se nota la distorsin y en este caso se activan entonces los sistemas de escisin general. 3. Si nosotros estamos haciendo una replicacin y resulta que hay errores que de manera natural

se pueden presentar en esa replicacin, entonces hay estn los sistemas de reparacin por emparejamiento errneo para que en G2 revisen y corrijan esos errores de la replicacin. 4. Si a pesar de corregir errores todava continua habiendo daos despus de que se haya dado el emparejamiento errneo, entonces se activan los sistemas de reparacin posteriores a la replicacin, especialmente el sistema de reparacin por recombinacin. 5. Si lo que ha habido es una agresin muy fuerte y yo lo que busco es que la clula no se muera, entonces claro me van a quedar mutaciones de las que estas podan haber arreglado pero es que aqu el cuento es que tengo demasiadas mutaciones y mucha ruptura entonces lo que trato es de evitar la muerte celular en ese caso se activara el sistema S.O.S, para evitar que la clula muera, o puede suceder que a pesar de que el sistema se active la clula muera, porque no podemos medir cuantas serian las agresiones, pero en realidad este seria mas o menos el orden en el que los mecanismos se activan y cada uno responde de acuerdo a lo que haya ocurrido y en el momento de la vida de la clula en que haya ocurrido.

VIII CLASE (1H) En la clase anterior mencionbamos que tenamos unas caractersticas morfolgicas durante lo que se denominaba la interface y unas caractersticas distintas sobre todo en el sper enrollamiento cuando finaliza la ltima de las etapas de la clula. Vamos a mirar unas preguntas: 1. cuntas y cules son las fases del ciclo celular? G1 (vida de la clula), S1 (sntesis de ADN), G1 (reparacin), I (divisin como tal).

enrolla sobre la exona) y H1 (que permite la adhesin). Las no exonas no forman parte del nucleosoma, hacen parte del segmento espaciador el cual protege la doble hebra que no est enrollado en el nucleosoma y que su funcin primordialmente es la de unir dos unidades de nucleosomas (no son de naturaleza alcalina lo que les confiere una unin poco fuerte diferente a la gran unin entre exonas y el ADN)

3. qu diferencias generales hay entre el proceso de divisin si se hace como mitosis o si se hace como meiosis? Meiosis tiene 2 fases y mitosis tiene 1 fase. Lo cual indica que hay diferencias en el nmero de informacin que tendrn las clulas hijas al finalizar el proceso, en la mitosis tenemos clulas hijas 2n y en la meiosis tenemos clulas hijas n. Otra diferencia es el producto final, en la mitosis tenemos 2 clulas y en la meiosis, por lo menos, en teora tenemos 4 clulas hijas pues en el caso de la ovognesis no es as, pero potencialmente podra generar 4. En la meiosis existe entrecruzamiento, sin embargo, hay que recordar que ya hay

2. Cmo se observa el material gentico cuando estamos en interface celular? Como la cromatina cuyas caractersticas son: Estructura laxa (no visible en un microscopio ptico corriente) Estructuras redondeadas que corresponden a sus unidades (nucleosomas) y unas reas que conectan con el nucleosoma (especie de rosario). El nucleosoma est formado de exonas: 8 en total, 2H2A 2H2B 2H3 2H4; EL ADN (que se

experimentos que demuestran que en la mitosis puede haber entrecruzamiento lo que pasa es que es una situacin no muy comn y muy especfica de algunos tejidos. As podramos decir que la mitosis no hace entrecruzamiento porque entrega dos hijas exactamente iguales y la meiosis, entonces, si lo hace. La meiosis tiene dos fases (meiosis I y II) que no demoran la misma cantidad de tiempo, debido a algunas caractersticas importantes, p.e. vamos a ver las etapas y nos daremos cuenta de ello:

a. Reduccional: Es similar a la mitosis. En este punto, la profase I es muy larga y por ende tiene sub-etapas que en realidad quiere mostrar ciertas cosas, p.e. como existe un acercamiento real y tpico para llevar a cabo el proceso de entrecruzamiento hay que recordar que esta etapa implica un rompimiento del material para cambiar entre los dos cromosomas las regiones homlogas que son compartibles; en este caso podemos crear mltiples puntos realizados al azar a no ser algunas caractersticas de puntos calientes que durante la recombinacin se ha observado, pueden ser ms frecuentes, pero en general el entrecruzamiento es al azar; por esa razn no siempre los productos de una meiosis son iguales. Lo importante es recordar que esta es una fase en la que despus del entrecruzamiento viene la meta-fase y

que es diferente a la meiosis normal pues en esta etapa si se juntan los cromosomas en la posicin central pero no se realiza una divisin longitudinal sino que se arranca un cromosoma completo para un lado y el otro cromosoma homlogo completo para el otro lado; al final del proceso nos damos cuenta que si es cierto que queda la misma carga que quedara en una mitosis pues me llev 2 cromtides pero eran de un mismo cromosoma; es decir lo que hice fue duplicar el contenido gentico procedente de un progenitor y perd toda la informacin del otro (por eso se denomina reduccional). No hace referencia al contenido gentico pues sigue siendo 2n, sino a la forma como se parte la estructura en cuanto a las caractersticas. Lo nico que estara variando entre las cromtides, es que como ya hubo entrecruzamiento, habr una pequea parte del cromosoma homlogo del cual se separ. Lo anterior es muy importante, el entrecruzamiento no se da entre las cromtides completamente porque no hay capacidad para hacer eso, solo hay entrecruzamiento entre las dos cromtides ms prximas que en este caso, seran aquellas que estn ms internas y por eso el concepto mendeliano indica que los descendientes de un par de progenitores pueden llegar hasta un 50% de diferencias con sus progenitores pero el otro 50% se conservar igual. Al final de la meiosis las 4 clulas hijas pueden quedar diferentes, con mayor o menor variabilidad, porque

todo lo mencionado es para un solo par de cromtides y debemos tener en cuenta que hay 23 pares que se recombinan. Mxima capacidad recombinante por cada divisin meitica 50%, este valor se toma en porcentaje porque hay muchas especies que tienen productos mltiples. As, si tengo 8 gatos, no puedo decir, 4 iguales y 4 diferentes, debo tener en cuenta el n final para decir que la mitad sera igual y la otra mitad distinta para las caractersticas de un cromosoma, y para las de todos los cromosomas combinados presentar mayor variabilidad. Teniendo esto presente vamos a mirar el siguiente captulo que tiene que ver con el origen de los nucletidos que vamos a utilizar en la sntesis de los distintos cidos nuclicos o para utilizarlos de forma independiente dentro de nuestras clulas. 1. Cundo vamos a utilizar en nuestro organismo una determinada biomolcula p.e. las protenas, de dnde nos proveemos para poderlas utilizar? En general, las fuentes vendran de dos puntos, una fuente endgena y una fuente exgena. 2. Por qu utilizamos fuentes exgenas? Este es un problema derivado de la adaptacin como seres hetertrofos, no tenemos la capacidad de producir constantemente todos nuestros nutrientes como lo hacen las plantas. Sin embargo, tambin podemos tener limitantes como en el caso de los

aminocidos pues no podemos fabricarlos de forma endgena todos, as que debemos proveernos de forma exgena. Otro punto en contra, es que no tenemos mecanismo de almacenamiento de reservas, pues la provisin necesita ser casi permanente para mantener niveles mnimos, en cambio, como vimos con los carbohidratos no se presenta ese problema pues se puede almacenar, sin embargo el almacenamiento es relativamente pobre y limitado pues con las 36 horas ya no habr reservas, pero si hablamos de lpidos, nos damos cuenta que la reserva es a largo plazo. As, los escenarios pueden ser distintos, y veremos que el de los cidos nuclicos presenta las dos vas, tanto endgena como exgena, pero con la diferencia que con la va exgena no utilizamos nada. Ingresa a nuestro organismo pero no se consumen, bsicamente es por procesos digestivos. Para ver ms en detalle, debemos recordar las unidades que forman los cidos nuclicos. Dijimos que tenamos dos tipos de purinas y mirndolas en detalle, nos damos cuenta que una tiene un solo grupo amino reemplazado en la posicin 6 y la otra tiene en esa misma posicin un grupo ceto y un grupo amino en la posicin 2. Pero en las pirimidinas tenamos 3 opciones, el grupo amino en la posicin 4, grupo ceto en la posicin 2; 2 grupos ceto en posicin 4 y 2; y 2 grupos ceto ms un grupo metilo. Cuando vamos a consumirlas, estarn formando una estructura completa que ser el nucletido con el azcar variable

si hablamos de ADN o ARN, pero en realidad de los dos consumimos, pues en cualquier dieta que tengamos vienen los dos tipos porque vienen clulas con su ncleo y en l podemos tenerlos. Entonces, el proceso se da de la siguiente forma: Suponiendo que vamos a consumir una clula que puede ser vegetal o animal (p.e. una hamburguesa); como todo lo que ingresa al tracto digestivo requiere de un procesamiento en la boca que rompe fsicamente las clulas el primer escenario es que all podemos encontrar la liberacin de los cidos nuclicos como tal pues ocurre ruptura de las membranas celulares y nucleares, especficamente por accin de proteasas que rompen de alrededor todo lo que encuentran. Tendramos inicialmente las nucleoprotenas que son rotas por las proteasas y al final quedan los cidos nuclicos como tal. De esta forma pasan al estmago que tiene un pH tan bajo y tenemos la posibilidad de que al interactuar con el medio se de la desnaturalizacin del ADN y ARN, quedando con cadenas sencillas que a continuacin pasan al intestino delgado y por accin de muchas enzimas activas se dan diferentes cambios, p.e.: Accin de las nucleasas: convierten los cidos nuclicos en oligo-nucletidos que seran unidades de 10 a 12 nucletidos pegaditos por enlaces fosfodiester. Accin de las fosfodiesterasas: rompen los enlaces fosfodiester y obtendramos nucletidos sencillos.

Estos nucletidos sencillos van a degradarse siempre en los mismo pasos, de las tres estructuras que eran la base, el azcar y el fosfato siempre se rompe de primero el fosfato (por accin de las nucleasas) y obtendramos los nuclesidos y por ltimo se rompera el enlace glucosdico para tener al final la base, el azcar y el fosfato por separado. Aqu vamos a seguir el mismo proceso, el nucletido completo va a sufrir la accin de enzimas como las nucleotidasas que liberan el grupo fosfato y dejan libres nuclesidos, esos nuclesidos haran parte del primero de los escenarios del proceso de absorcin de los cidos nuclicos que van por el sistema porta (como una base nitrogenada unida a su azcar que puede ser ribosa o desoxiribosa). Puede suceder que all mismo siga ocurriendo degradacin en el aparato digestivo y el siguiente paso sera que los nuclesidos pasaran a bases nitrogenadas solitas sufriendo la accin de las nucleosidasas que descomponen el enlace b-n-glucosdico, liberando bases solas; las cuales, de tipo pirimidina se degradan hasta estructuras lineales mientras que las purinas por la deficiencia enzimtica que tenemos de romper el anillo doble de la purina nunca logran ir ms all de 3 oxidaciones, ste sera el nmero mximo de oxidaciones que puede hacer una purina conocidas como cido rico, entonces, directamente en el tracto digestivo terminamos degradando hasta el mximo nivel de oxidacin que sera el cido rico y de esa

manera ingresamos la gran mayora del contenido de cidos nuclicos contenidos. Los cidos nuclicos, van por el sistema porta hacia el hgado, los nuclesidos se rompen durante ese viaje para volver a liberar las bases, la base libre se oxida hasta llegar a cido rico y al final lo que ocurre es que a partir del hgado se hace completo el ciclo del cido rico y su va de eliminacin ms comn sera la orina donde no necesariamente todo lo que se filtra no se elimina pero si un gran porcentaje vuelve y se reabsorbe y sale de nuevo por la orina, entonces, de lo que comimos en realidad lo que se pudo aprovechar fue Nada; en realidad lo que ocurre es que en dietas ricas en cidos nuclicos el efecto puede ser ms desagradable y la razn es que si consumimos muchas clulas que aporten mucho cido rico este se acumula en circulacin, por su alta insolubilidad en el agua, terminando en sales cristalizadas de tipo urato que se precipitan a nivel de las articulaciones generando la patologa muy conocida llamada GOTA (proceso agudo). As, en lugar de hacer un consumo exagerado de cidos nuclicos para aumentar los niveles en el organismo, lo que hacemos es aumentar los niveles de cido rico con el problema adyacente de su eliminacin. En los ltimos aos, se ha puesto de moda la fabricacin de alimentos transgnicos como el maz, arroz, tomate, cebada, sobre todo los cereales. La transgenia consiste en introducir una caracterstica

que de una ventaja selectiva a lo que estoy tratando, p.e. resistencia a una plaga, la produccin de uno de los distintos analitos en una concentracin ms alta que necesite, puede ser la disminucin en el tamao de las semillas que tenga en el tomate por unidad de fruto para obtener ms pulpa, el color, la durabilidad del producto, entre otras. Se llama transgenia al hecho de que como primera caracterstica se obtenga un gen nuevo que no era de ese objeto de trabajo y la segunda caracterstica es que todas las clulas de ese organismo viviente incorporen el gen. No es que se haga a una sola parte, debe ser a todo el organismo. La manipulacin en este caso es un mecanismo exgeno de lo que se llama Ingeniera gentica, que es la manipulacin de los genomas, vamos a tener la incorporacin de ese gen desde el momento de la formacin del cigoto para garantizar que todas sus clulas vayan a reproducir de la misma manera el gen. Una vez un organismo es transgnico, se puede destransgenizar? No, todos sus genes desde el momento de la inclusin a la primera clula, habrn incorporado el gen mutado por esa razn hay mucha especulacin a cerca de en dnde va a terminar ese tipo de organismos mutados entre otras acerca del futuro de estos organismos. Una pregunta particular de las personas es que es muy riesgoso consumir elementos transgnicos porque podra ocurrir que terminara incorporando los genes nuevos que tienen esos organismo en nuestro

cuerpo, lo cual no est comprobado, son muchos comentarios pero nada comprobado an. Cmo podra incorporarse un gen de otro organismo en el nuestro? Esto no es posible tericamente, porque todo lo que entra al cuerpo termina siendo degradado y llega hasta su mximo nivel de degradacin, y por lo tanto la probabilidad de que ingrese un segmento tan grande como de 1.000 pares de bases y adems que no haya sido cortado el gen para que pueda llegar a mis clulas despus de circular y se incorpore a mis clulas para que pueda hacer algo distinto, es algo no comprobado y an en discusin. Entonces podramos pensar que una persona que tenga dao en una de las enzimas que trabaja en la degradacin de los cidos nuclicos podra incorporar genes de los alimentos transgnicos, pero esto no se da as, porque hay que tener en cuenta que el proceso catablico ocurre antes que el anablico porque necesariamente el nivel de absorcin es para biomolculas, recuerden que si tenemos pptidos muy grandes ya no logran pasar y necesariamente se deben degradar; cuando no se puede llevar a cabo el proceso de degradacin, se dan las intolerancias, p.e. a la lactosa, a productos ctricos, huevo, etc. Y como signos y sntomas en el paciente se presentan fallas en la excrecin reflejados en las caractersticas de las heces fecales. Entonces ante una deficiencia de las enzimas para degradar cidos nuclicos, una opcin para disminuir

los signos y sntomas desagradables, sera la disminucin en la ingesta de esos alimentos o alimentos que los reemplacen p.e. la leche deslactosada en el caso de intolerancia a la lactosa. Cuando hablemos de agentes mutagnicos que pueden generar cambios e inducir la produccin de las mutaciones, uno de los frentes que los constituyen son los agentes anlogos de las bases que son como las mismas bases nitrogenadas que conocemos pero producidas en el laboratorio y que tienen cambios respecto a los originales. P.e. si tenemos una timina que tiene 2 grupos ceto en la posicin 4 y 1 grupo metilo en la posicin 5, en el laboratorio se hace la misma secuencia pero el grupo metilo se cambia p.e. por compuestos alogenados como el yodo, bromo, plomo, flor, etc. Entonces all aparece la estructura muy parecida a la original pero con ese pequeo cambio. Esos anlogos son los que se administran en la mayora de los compuestos conocidos en la Quimioterapia, cuya funcin es atacar clulas malignas o disminuir la funcin de virus como en el VIH y no termine haciendo SIDA. Cmo se da la administracin de la quimioterapia? No se da por va oral porque finalmente las bases nunca llegaran a ser como se las puse al paciente al inicio del tratamiento, se hace por va endovenosa para engaar a las clulas para que piensen que fueron producidas por el rgano que tiene esa funcin que sera el hgado; cumpliendo as su funcin.

Porqu eso anlogos sirven para este tipo de tratamientos? Porque los qumicos entran a la clula, pueden ser incorporados en su ncleo pero cuando llegan las divisiones del material gentico del ADN que incorporaron los nucletidos con el cambio sutil, las enzimas especficas para su sustrato reconocen que no son las bases que normalmente han incorporado y frenan el proceso de replicacin y si no se da este proceso no hay divisin, y si no hay divisin lo que consigo es disminuir de esa manera el crecimiento tumoral. En el caso viral detengo la multiplicacin del virus. Lo anterior nos hace pensar, que estos pacientes no pueden suspender el tratamiento pues si lo hicieran las clulas incorporan los nucletidos normales y los virus comandaran la divisin celular. Esto es complementario con la radioterapia para garantizar que los agentes anlogos se incorporen ms rpido y cumplan su funcin. Ahora hay medicamentos encapsulados pero con proteccin para evitar que la base no se degrade en el metabolismo de los cidos nuclicos. Finalizando, si podra utilizar fosfatos y azcares pero lo que realmente aporta la informacin gentica son las bases. Maana vamos a revisar la fuente endgena y hoy nos vamos con la idea de que la provisin de los nucletidos que vamos a utilizar es de va endgena, la cual tiene dos posibles escenarios tanto para las purinas como para las pirimidinas. Una primera va es

la sntesis de novo (formar de manera nueva toda la base) no es la va ms indicada porque requiere mucha energa pero es necesaria usarla porque si no de dnde los sacamos. Una segunda vas es la ms usada en los adultos que provee ms fcilmente los nucletidos que se denomina va de rescate o de salvamento, que consiste en recuperar una base nitrogenada y un nucletido que antes de ser degradado lo usamos pero veremos que debe cumplir requisitos: debe estar en forma de nucletido sin oxidaciones, porque si no la clula lo entender como un elemento de degradacin.

Sntesis de Novo, en la que nosotros fabricamos de manera NUEVA una base nitrogenada. Va de Reciclaje, en la que tratamos de reutilizar lo que estaba en uso; es decir, en el momento en que la clula va a morir, en lugar de eliminar esos sustratos podramos volver a retomarlos.

IX CLASE (1H) SINTESIS DE NOVO Habamos quedado hablando de que nuestra va de ingreso de los alimentos no es una provisin de nucletidos para las funciones que la clula debe desempear, por lo tanto debemos recurrir a las vas endgenas para poder obtener lo que necesitamos para el organismo. sta va endgena puede ser de dos tipos:

Hay que tener claro que existe un desbalance entre ambos procesos porque el requerimiento energtico de la primera opcin es tan alto que difcilmente se selecciona como primera opcin de vida; sin embargo el criterio de cul de los dos procesos es mejor tiene que ver con el estado de vida de la clula. Si hablamos de un organismo en crecimiento que est formando tejidos, y por lo tanto la tasa de muerte celular es mucho ms baja que la de formacin de clulas, va a tener que elegir sntesis de novo. A su vez los adultos, cuando ya tiene formadas sus clulas y hacen muerte celular programada pueden utilizar la va de reciclaje; sta va es ms til para las clulas en reposo y para los tejidos que ya han llegado por lo menos a su tamao normal y a partir de all se hace un recambio de tipo celular. SINTESIS DE NOVO Vamos a fabricarlas independientemente de que haya muchas otras bases nitrogenadas homlogas. PURINAS

Para el caso de las Purinas ellas pueden tener estructuras homlogas: Si oxidamos el grupo Amino y lo convertimos entonces en un grupo Ceto, se forma una base nitrogenada denominada HIPOXANTINA. Ms adelante veremos que ese grupo ceto lleg ah porque esa parte del anillo fue donado por el CO2 durante el proceso de sntesis.

Si tomamos la Guanina, que ya tiene un grupo ceto en posicin 6, y oxidamos su posicin 2, tendremos una base con dos grupos ceto que se llamar entonces XANTINA.

Si oxidamos la Xantina en la posicin 8 obtenemos el CIDO RICO.

ste cido rico no podemos degradarlo ms debido a las limitaciones de nuestras enzimas. En algunas especies puede degradarse hasta CO2 y en otras se convierte en rea, alantona, u otros compuestos. Un intermediario de las tres anteriores (hipoxantina, xantina y cido rico) es la xantina con grupos metilo, por ejemplo en las posiciones 1,3 y 7, lo que en ste caso se conocera como 1,3,7-TRIMETIL XANTINA o Cafena.

Si slo hubiera dos grupos metilo en las posiciones 1 y 3 tendramos a la 1,3-DIMETIL XANTINA o Teofilina (principio activo del t); pero si los dos grupos metilo estuvieran en las posiciones 1 y 7 tendramos a la 1,7-DIMETIL XANTINA o Teobromina (principio activo del chocolate). Puede existir adiccin al chocolate ya que ste compuesto estimula el sistema nervioso central e inhibe algunas enzimas que disminuyen la activacin de dicho sistema, manteniendo entonces el estado de alerta.

Los derivados de las bases nitrogenadas pueden producirse por la misma va pero no en tanta cantidad, porque se usa ms para incorporar bases a las clulas que se estn reproduciendo y necesitan replicar su material gentico a una tasa muy alta. ADENINA Vamos a ver que la ADENINA solo tiene un grupo funcional adicional en la posicin 6, que es el grupo amino en la posicin 6.

(son la misma pero en dos vistas diferentes, sin embargo la doctora explic basndose en la figura de la izquierda) Hay que tener claro la forma como se enumeran, dentro de la estructura, los tomos de los dos anillos. Siempre la posicin superior izquierda es el Nitrgeno 1 y se enumera en sentido contrario a las manecillas

del reloj para luego pasar hacia la derecha al segundo anillo. Recordemos que en el Nitrgeno de la posicin 9 la base nitrogenada se une al azcar, ya sea ribosa o desoxirribosa, por medio de un enlace -NGlucosdico. En ste ejemplo vemos la unin del azcar y la base por medio del nitrgeno de la posicin 9 de la base.

Formacin de IMP La sntesis de novo SOLO ocurre en el hgado y los productos van por va sangunea a los dems tejidos. El inicio de la va est mediado por dos cosas impajaritables para la va de novo: ATP (energa) y Ribosa 5 fosfato (iniciador) la cual proviene de parte de la va de las pentosas (ms adelante veremos que esa Ribosa tiene que activarse para poder actuar). sta sntesis ocurre en un principio para las dos purinas que se van a integrar al ARN (como vemos,

estn unidos a Ribosa) pero despus de que obtengamos esos nucletidos unidos a Ribosa, a partir de ello podemos formar los que estn unidos a Desoxirribosa. Hay que resaltar tambin que la va comienza con un azcar que ya est fosfatada y lo ltimo que hacemos es ubicar la base nitrogenada (ocurre al contrario de cmo sucede en la digestin donde primero separamos el fosfato de la pareja azcar-basa nitrogenada). El primer nucletido que formamos es el que tiene como base nitrogenada a la Hipoxantina (grupo ceto en posicin 6) y se denomina IMP o Inosina Mono Fosfato (Inosina = nucletido de hipoxantina) y a partir de ste sintetizamos los nucletidos de Guanina y Adenina. Los humanos tenemos, al igual que algunos invertebrados inferiores, algunas protenas que son un solo polipptido con varios sitios activos y cada uno de stos sitios cataliza una funcin enzimtica diferente. Para hacer los tres ltimos pasos de la va de novo de las purinas nosotros necesitamos una protena multifuncional para Sintetizar, Carboxilar y cerrar el anillo para formar IMP; recordemos que no es una enzima con tres funciones, sino tres sitios activos diferentes en la misma cadena polipeptdica que catalizan 3 reacciones consecutivas sobre un mismo sustrato que se est formando. Los tomos que necesitamos para formar IMP provienen de:

1. Aminocidos: (aspartato, glicina, glutamina) 2. CO2 3.Tetrahidrofolatos: stos vienen del cido flico. Compuestos que influyen con: Cierre del tubo neural: El suplemento de ste cido en personas de edad reproductiva es importante para impedir defectos del cierre del tubo neural que impiden o dificultan transmisin nerviosa bajo el punto donde se ubica la lesin. stos defectos ocurren porque la deficiencia de cido flico impide que ocurra divisin celular a la tasa que se necesita para que ocurra el cierre del tuno neural. Como el tubo neural se desarrolla de la semana 6 a la 8 de gestacin, cuando la mujer se da cuenta de su embarazo ya ha pasado el momento clave donde se necesita el suplemento de cido flico y para entonces ya no sirve de nada la administracin de suplementos. El suplemento con folatos solo

funciona cuando la persona no ha quedado an embarazada. Fragilidad cromosmica: Cuando una mujer presenta abortos espontneos por deficiencia de folatos y se le toma un cariotipo, presenta una exagerada fragilidad cromosmica con segmentos espiralados que al momento de replicarse durante la formacin de clulas germinales pueden romperse y perderse causando que la fecundacin con estas clulas genere productos abortivos. Tres meses despus de tratar estas pacientes administrando suplemento de cido flico se corrige la fragilidad cromosmica.

Podemos ver que el CO2 dona el tomo de la posicin 6. Debido a que el CO2 trae un tomo de oxgeno unido de manera doble con respecto al carbono, cuando terminamos la formacin de la estructura obtenemos una base que ya de entrada tiene un grupo ceto en la posicin 6 y por eso la primera base que se forma es la Hipoxantina. Paso 1. Sabemos que la va arranca con Ribosa 5 fosfato y ATP. Sin embargo la ribosa 5 fosfato es activa y puede inducir la sntesis slo cuando, mediante la hidrlisis del ATP, pega dos grupos fosfato en la posicin 1 de su estructura y los pega de manera alfa (los fosfatos quedan mirando hacia abajo). ste compuesto que se form es el regulador

de toda la va de sntesis de purinas y pirimidinas porque su disponibilidad es la que determina la posibilidad de hacer o no va de novo. ste compuesto se llama Fosforribosil pirofosfato, es como la forma activa de la Ribosa 5 fosfato. Como el ATP perdi de una dos fosfatos y se convirti en AMP, significa que la reaccin es fuertemente exergnica.

Paso 4. Ubicamos el carbono de la posicin 8 que es donado por el 10-formil tetrahidrofolato quien sale como tetrahidrofolato dejando su grupo formilo incorporado a la base que se est formando. Aqu no podemos todava cerrar el anillo de la derecha porque correramos el riesgo de que la estructura, quien entonces tendra fosfato, azcar y base, pudiera funcionar como nucletido y sera una estructura anmala que tendramos circulando, pues la base estara incompleta. Paso 5. Viene la Glutamina, regala el Nitrgeno de la posicin nmero 3 y sale como glutamato (o cido glutmico que es lo mismo). Gasto 1 ATP.

Paso 2. El Fosforribosil Pirofosfato va a permitir que arranque la sntesis de la base. Esa sntesis arranca desde el Nitrogeno de la posicin 1 donde la base se une al azcar. Ese Nitrgeno es donado por la Glutamina quien sale como cido glutmico mientras el Nitrgeno queda unido por enlace . Para pegar ese grupo amino se desplazan los dos fosfatos que se haban pegado al fosforribosil pirofosfato pues eso genera la energa necesaria para el proceso. Paso 3. A partir de ese grupo amino comenzamos a sintetizar el anillo de la derecha. Viene una glicina completa y se incorpora totalmente dentro de la estructura. Aqu gasto 1 ATP.

Paso 6. Cerramos el anillo de la derecha gastando 1 ATP. Podemos hacer esto porque ya empezamos a formar el otro anillo y entonces no corremos el riesgo de que se identifique el nucletido como funcional. Paso 7. Se incorpora el CO2 respiratorio para dar carbono y grupo ceto de la posicin 6. Paso 8. El aspartato regala el Nitrgeno de la posicin 1. ste no hidroliza su grupo amino para regalarlo, sino que se incorpora momentneamente a la estructura que se est formando y despus hace la hidrlisis para dejar el grupo amino y salir como Fumarato. Aqu acta el polipptido multifuncional.

Paso 9. Se incorpora el Carbono de la posicin nmero 2 que es donado por un 10-formil tetrahidrofolato que sale como tetrahidrofolato dejando su grupo formilo. Luego se sella el anillo. Aqu acta el poliptido multifuncional. Paso 10. Cierro el anillo para formar el IMP (Inosina monofosfato). Aqu acta el polipptido multifuncional. A partir de los nucletidos de ribosa vamos a formar los de desoxirribosa. Vemos que cada una de las incorporaciones de tomos requiere energa y por eso es que la va de novo no es la va de eleccin. La doctora recomienda revisar stos pasos en un libro. Qu hacemos con el IMP? Con ste vamos a formar AMP (adenosina monofosfato) y GMP (guanosina monofosfato). La formacin de stos derivados consume energa. Si teniendo Hipoxantina voy a formar Guanina requiero ATP, y ese ATP lo consigo si la va de la Adenina ya se ha dado. Si lo que necesito es formar Adenina requiero de GTP y ste se produce si la va de la Guanina est favorecida. En resumen, los productos de cada una de las vas son a su vez requisito para inducir la va contraria. sta regulacin cruzada positiva (porque favorece la sntesis por la va contraria) garantiza que

la clula no vaya a formar un solo nucletido de los dos, garantiza cantidades equimolares (iguales o muy parecidas) de ambos sustratos ya que ambos son necesarios para la sntesis del material gentico.

Para la Adenina. Falta que reemplacemos el grupo ceto de la posicin 6 de la IMP, por un grupo amino. El cido asprtico va a donar el grupo amino que necesitamos. Como ya sabemos, primero se incorpora de manera completa y

luego libera el grupo amino para salir como fumarato. Pasamos de tener una Hipoxantina, a tener una Adenina, quien como ya est unida a la ribosa fosfatada, queda de una vez como AMP (adenosina monofosfato). La energa que utilizo para esto proviene del GTP que se convierte en GDP. Para la Guanina. El grupo ceto que la IMP tiene en la posicin 6 de hecho nos sirve porque la Guanina tambin lo lleva; lo nico que nos falta es ponerle el grupo amino en la posicin 2. Para eso tenemos 2 reacciones porque no se puede incorporar directamente el grupo amino, sino que necesitamos primero oxidar esa base en la posicin 2 para que luego esa posicin oxidada reciba el grupo amino. 1. Oxidacin del carbono, Usamos NAD que sale como NADH+H En presencia de agua que dona el O, dejando el grupo ceto en la posicin 2. 2. Se libera el oxgeno de la posicin 2 y se incorpora un grupo amino proveniente de la Glutamina quien sale como cido glutmico. La energa viene del ATP quien se hidroliza a ADP + Pi. Adicin de fosfatos. Cuando vamos a sintetizar un cido nuclico cualquiera, sacamos la energa del mismo nucletido, porque todos los cuatro llegan trifosfatados. Para polimerizar o incorporar el nucletido en una cadena

de cido nuclico necesitamos que dicho nucletido est trifosfatado porque al unirse a la cadena se hidrolizan dos de esos fosfatos (se queda solamente uno y ese es el que forma el enlace fosfodiester) y la energa de esa ruptura es la que me permite incorporar el nucletido. Entonces los nucletidos que obtuvimos monofosfatados deben pasar a ADP y GDP respectivamente. Esos fosfatos provienen de la hidrlisis del mismo ATP por medio de cinasas de ATP. Ya estando difosfatado el nucletido tiene dos opciones: 1. Trifosfatarse y quedar dirigido a la sntesis de ARN 2. Desviarse a la formacin de desoxirribosa quedando dirigido a integrar ADN. Para esto es necesario que el nucletido est difosfatado. Recordemos que la diferencia entre Ribosa y Desoxirribosa es la prdida del Oxgeno de la posicin 2 prima, es decir, la ribosa se reduce. El proceso de reduccin de la posicin 2 de la ribosa implica que otra molcula se oxide para que la ribosa se reduzca. Para eso tenemos la Ribonucletido Reductasa, que saca el Oxgeno de la Ribosa para formar agua y, para llevarse los electrones, tiene una coenzima llamada Tiorredoxina quien entra reducida y sale oxidada. Para que sta coenzima pueda seguir convirtiendo ms nucletidos de Ribosa en nucletidos de Desoxirribosa hay que volver a reducir la Tiorredoxina que se oxid; esto se logra gracias al NADPH+H (reducido) que sale oxidado permitiendo

que los hidrogeniones pasen a la Tiorredoxina. Ese NADP (oxidado) debe volverse a reducir para que todo funcione. Hay medicamentos que trabajan precisamente buscando inhibir la Tiorredoxina reducida porque si la Tiorredoxina se queda oxidada la Ribonucletido reductazo no puede pasar nucletidos de Ribosa a Desoxirribosa y por lo tanto no habra sustrato para sintetizar ADN ni formar clulas. Esto se usa para disminuir los efectos de la gota. Recordemos que para formar nucletidos de Desoxirribosa necesitamos nucletidos de Ribosa que estn by fosfatados. Ahora los nucletidos de desoxirribosa deben ganar un tercer grupo fosfato que proviene del ATP para quedar trifosfatados y, por lo tanto, listos para sintetizar ADN.

Va de Rescate.

Es la que trabajamos de manera general en una clula en reposo de un organismo adulto. En el caso de las purinas podemos hacer sta va a partir tanto de nucletidos como de bases nitrogenadas libres. Cuando una clula hace apoptosis y se destruye se rompe la estructura de su membrana celular y nuclear, se liberan las protenas, el material gentico se rompe en oligonucletidos, luego en nucletidos solos y luego esos nucletidos: 1. Pierden el grupo fosfato. Entonces queda como nuclesido. sta sera la primera forma que se puede rescatar pues el ATP le regala el grupo fosfato que haba perdido y se convierte de nuevo en nucletido. Slo gasto un ATP. 2. pierden el enlace - N-glucosdico. Entonces queda como base nitrogenada libre la cual se puede rescatar slo si se trata de una purina. A sta base el Fosforribosil Pirofosfato le da el azcar y el fosfato. Vemos entonces que el fosforribosil pirofosfato no slo regula la va de sntesis sino que tambin participa en la va de rescate donando el resto de la estructura que se necesita para formar de nuevo el nucletido trifosfatado.

Tomemos en cuenta que si pensamos en un tiempo cero la clula debe hacer sntesis de novo para proveerse de todos los nucletidos; y ms adelante cuando se va a degradar la clula sus nucletidos (que alguna vez fueron de novo) se van a reutilizar. Recordemos que no podemos rescatar los nucletidos provenientes de los alimentos porque cuando stos pasan a circulacin ya estn totalmente oxidados. Las purinas que tenemos en nuestras clulas tambin pueden oxidarse hasta convertirse incluso en cido rico; pero la va de recuperacin es posible de realizar si tenemos Adenina y Guanina o incluso si solo se ha oxidado una vez la base y tenemos entonces una hipoxantina porque, como veremos

ms adelante, esa estructura de hipoxantina hace parte del metabolismo normal de la Adenina.

Si la base se ha oxidado hasta llegar hasta Xantina y cido rico (2 y 3 oxidaciones respectivamente) esas estructuras ya no se pueden rescatar y la clula entiende que deben degradarse. X CLASE (2H) 1. Cules son las vas que utiliza la clula para proveerse de nucletidos? En la clase anterior se hablo del metabolismo de nucletidos y decamos que hay 2 formas para la obtencin de nucletidos: Una forma endgena: sntesis de Novo Una exgena: a travs de los alimentos

La sntesis de Novo solo la puede hacer el hgado. Los dems tx. Usan la ruta de salvamento. 2. caractersticas de la sntesis de Novo en las purinas: La va de Novo utiliza 3 aminoacido precursores: acido aspartico, glutamina y glicina. La glicina dona el C de la posicin 4, el de la 5 y el nitrgeno de la posicin 7. La glutamina dona grupos amino de la posicin 3 y 9. El acido aspartico solo dona el N de la posicin 1. El CO2 dona el C. Los tetrahidrofolatos tienen combinacin de acido + base para formar una sal que se llama folato que viene del acido flico y dona C para la posicin 2 y 8.

Como ya se haba mencionado la sntesis de Novo se realiza en el hgado y se inicia con la ribosa 5 fosfato en presencia de ATP pues se necesita de energa para iniciar esta va (Es una via que gasta mucha energa, por esto no es la vida preferida de la cel.); El primer nucletido que se forma es la inosina monofosfato (IMP) que es un nucletido de hiposantinas unido a la ribosa 5-P, esto ocurre en el primer nivel de oxidacin de las bases nitrogenadas. A partir del IMP se puede formar monofosfato de adenosina (AMP) y guanina (GMP) con la caracterstica que hay una regulacin cruzada en la que los activadores de la via (los que dan la energia) son los productos de la va contraria.

Por otra parte, la va de Novo utiliza un complejo proteico o un polipeptico (enzima con tres sitios activo) multifuncional (5pr aminoimidazol sintetasa, 5 pr aminoimidazol carboxilasa, e IMP sintetasa) que es capaz de catalizar 3 reacciones simultaneas. 3. En qu consiste la regulacin cruzada? Consiste en la produccin y disposicin de energa para inicio y produccin de vas contrarias. Para poder sintetizar nucletidos de adenina es necesario que este presente el GTP y para poder sintetizar un nucletido de guanina es necesario el

Conclusin los donantes para la va de Novo son: 3 aminocidos, CO2 respiratorio y tetrahidrofolatos (conformantes del anillo del nucleotido).

ATP. Esto garantiza que al final del proceso haya cantidades iguales de ambos nucletidos. 4. La sntesis se da a partir de los nucletidos de ribosa, de qu manera puedo obtener los de desoxirribosa? Reduciendo el azcar de los derivados de ribosa. Para que esto suceda debo tener una condicin que es que deben estar glicofatados para que me lo reconozca la ribonucleotidoreductasa y despus de estos se le une otro grupo fosfato y ya quedan trifosfatado para poderlo utilizarlo en los procesos de sntesis de los cidos nucleicos. VAS DE LAS PIRIMIDINAS: Son de mas baja energa, pero ms sencillas pues solamente tenemos que sintetizar un solo anillo; tiene tres estructuras que me estn haciendo parte o conformando el anillo, dos de ellas estn presente en el ADN que es la citocina y la timina y dos en el ARN que es la citocina y el uracilo. La citocina es una pirimidina que tiene un nitrgeno en la posicin 1, en la posicin 2 un grupo ceto y en la posicin 4 amino. Si este grupo amino es reemplazado por un grupo ceto tendramos un doble grupo ceto en la estructura y esto sera un uracilo. Si al uracilo le adicionamos un tercer grupo funcional en la posicin 5 tendramos un dioxi que adems tenga un grupo metilo originara la timina. Recuerden que la especificidad guarda relacin con cul de los cidos nucleicos vamos a necesitar. Nota: al contrario que en las purinas la numeracin va en sentido horario y el nitrgeno de la posicin 1 es donado por la citocina mas no por el acido aspartico. Por otra parte, al igual que las purinas tenemos unas sntesis de Novo y una va de rescate. La va de Novo aun no es la principal pero es la surte inicialmente. La va de rescate seguir siendo la va mas fcil de usar. CARACTERSTICA DE LA VA DE NOVO EN LAS PIRIMIDINAS: Ocurre solamente en el hgado. Utiliza precursores comunes a la sntesis de purinas: PRPP (fosforibosinpirofosfato), acido aspartico, glutamina, CO2 y tetrahidrofolatos. (En esta va ya no aparece la glicina ya que

tenemos que formar una estructura de 6 carbonos) Los in iniciadores de la va son el bicarbonato la glutamina y el ATP. El primer nucletido formado es la uridina monofosfato (tiene como base al uracilo) La ribosa 5-P aparece al final de la sntesis. Aqu vemos que primero aparece la base y ya casi finalizada se le incorpora la azcar (ribosa) y el grupo fosfato. Por esto casi al final aparece la ribosa 5-p como elemento que viene donar azcar y grupo fosfato a partir de fosforibosil que es uno de los donantes de esa estructura. Aqu aparece nuevamente el fosforibosil como la molcula reguladora de la va. Tiene dos protenas multifuncionles: o CAD: posee tres actividades enzimticas Carbamoil-fosfato-sintetasa. Aspartato transcarbamilasa. Dihidroorotasa. (ayuda a formar el acido dihidro-orotico) Todas estas reacciones son en cadena y es un requisito para que el polipeptido pueda funcionar. o UMP sintetasa: Dos actividades enzimticas Orotato fosforribosil transferasa. (el fosforribosil transfiere al acido orotico el grupo fx ribosa + fosfato)

OMP descarboxilasa. (descarboxila el orotatomonofosfato para que me quede origine uracilo monofosfato) Habamos dicho que los iniciadores de la via de novo en las pirimidinas eran el CO2, glutamina y 2 molculas ATP. El ATP llega y unos de sus fosfatos queda incorporado mometaneamente dentro del primer compuesto y esta reaccin tiene la funcin de activar la sntesis de un compuesto (molculas activadoras). Una de las dos molculas de ATP se hidrolizan para formar ADP + fosfato La otra tambin se hidroliza pero uno de sus fosfatos lo incorpora momentanemente al primero de los intermediarios que se forma. Como se forma este primer intermediario? Recordemos que la glutamina puede donar su grupo amino y cuando lo dona queda como glutamato; ese grupo amino queda incorporado en el compuesto que vamos a formar; el bicarbonato deja el co2 y tambin se incorpora uno de los fosfato del ATP y as formamos el inicio de la base que se va a conocer con el nombre de carbamoilfosfato. El carbamoilfosfato tambin es producido en el ciclo de la urea que se da dentro de la mitocondria. En cambio su formacin en la via de novo de las purinas y pirimidinas se da a nivel citoplasmtico, por ende en el organismo hay dispuestos dos tipos de esta enzima

(carbamoilfosfato sintetasa) una a nivel del citoplasma y una a nivel de la mitocondria. Puede ocurrir que haya bloqueos de la enzima en cualquiera de estas rutas y esto me originaria un aumento de los sutratos de la via afectada y lo que va ocurrir que la carbamoilfosfato sintetasa que estaba al interior de la mitocondria puede salir a trabajar en el citoplasma y lo que me hace es inducir o favorecer la via de sntesis de la pirimidinas (via de novo afectada) y originando una deficiencia en la enzima del ciclo de la urea y al final lo que se puede observar en el paciente es un incremento de estas pirimidinas como respuesta a que la enzima se ha desviado a utilizase en la via de novo mas no en la del ciclo de la urea. A hora veamos la segunda reaccin. Aqu se hidroliza el carbamoilfosfato y deja libre el fosfato que le haba dado el ATP. Esta hidrlisis permite que el acido aspartico y toda su estructura queden incorporada (por esto no necesita de una doble reaccion). Asi obtenemos los 6 atamos que necesitamos para la formacin de la pirimidina, ahora falta cerrar el anillo y a partir del nitrgeno de la posicin 1 unir la ribosa y el grupo fosfato. Hasta este punto solo ha intervenido la glutamina el co2 y el acido aspartico. Mas tarde veremos que el tetrahidrofolato interviene especiaficamente en la sntesis de la timina. A partir del carbamoil aspartato que hemos formado vamos a cerrar el anillo y vamos a formar lo que se llama el acido dihidroorotico (se llama dihidro= por que no tiene doble enlace formado).

En una siguiente reaccin va ocurrir una oxidacin de la estructura donde la coenzima Q sale reducida y este proceso de oxidacin genera el doble enlace que conserva el uracilo entre las subunidades del carbono 5 y 6 aqu ya pasa llamarse acido orotico. En el siguiente paso llega fosforibosin y da 2 grupo fosfato y regala la ribosa y el grupo fosfato de la posicin 5 prima de la ribosa esto se le pega al acido orotico y pasa a llamarse orotidina monofosfato OMP. En muchos libro aparece que este es el primer nucleotido que se forma pero es considerado como un intermediario (por la profe adriana) porque es un nucleotido no funcional y solo aparece como estructura media o momentnea para dar lugar al primero de los nucletidos que sera el de uracilo (uridina monofosfato UMP). La ultima reaccin consiste en descarboxilar la OMP,en esta reaccin sale el grupo carbonilo de la posicin 6 y al perderlo formamos el uracilo que tiene unido la ribosa y tendr al grupo fosfato en la posicin 5 por que bsicamente estos dos fueron donados por el fosforibosin-pirofosfato formando el primer nucleotido que es la uridina monofosfato y a partir de l se van a formar los otros dos.

RESUMEN DE LA RUTA HASTA EL MOMENTO. Reacciones catalizadas por la CAD Reacciones catalizadas por UMP De las patologas ms frecuentes para el metabolismo de la pirimidinas se origina por deficiencia de la UMP sintetasa. El cuadro puede ser ms severo si la enzima no cataliza ninguna de las reacciones y menos severo si cataliza al menos una de las reacciones. La siguiente grafica es todo lo anterior pero un poco mas especifico: Apartir del UMP vamos a formar nucletidos de citocina y el de timina. De estos dos nucletidos el primero que se forma es el de citocina. Como se forma el nucleotido de citocina? La uridina monofosfato adquiere otro grupo fosfato el cual es donado por ATP (as el ATP se convierte en ADP) y asi se convierte en uridin difosfato (UDP), Es una sinasa la que hace este tipo de reaccin y permite formar la estructura glicofatada y como en la reaccin anterior cuando estamos en la posicin fosfatada que ahora seria difosfatada tenemos dos posibilidades: la primera es que pasemos a ganar un tercer grupo fosfato como sucede en la siguiente reaccin donde interviene nuevamente el ATP y as pasa a convertirse el UDP en UTP.

La otra posibilidad sera que este nucleotido difosfatado se fuera por una va adicional donde se pasa de ribosa a desoxirribosa y entonces tendramos el desoxi-UDP. Ojo desoxi-UDP por la precaucin que a partir de l tenemos que formar la timina (la timina solo se forma a partir de un sustrato que tenga desoxirribosa como azucar) Digamos que este nucleotido cogi la via de ganar otro grupo fosfato es decir el UDP se convirti en UTP. Apartir de este UTP podemos conseguir el nucletido de citocina el cual ya se encuentra trifosfatado(CTP) por tener origen en el UTP. Entonces cual es la diferencia entre un uracilo y una citocina? El uracilo tena dos grupos cetos en la posicin 2 y 4 y ahora la citocina tiene en la posicin 4 un grupo amino (que es regalado por el glutamato). Esta reaccin de UTP a CTP necesita incorporar el grupo amino donado por el glutamato por lo que se requiere que entre un ATP el cual va a hidrolizar y va a salir como ADP + fosfato. Nota: Cuando estamos formando muchos nucletidos cada uno actuar como inhibidor de su propia sntesis para no seguir la produccin de dicho nucletido (regulacin negativa o feedback) Por otra parte, me falta obtener los nucletidos de timina y tambin me falta tener a la citocina unida a la desoxirribosa. Para el siguiente paso hay que tener en cuenta que no vamos a encontrar al uracilo difosfatado o trifosfatado

unido con la desoxirribosa por lo que para la sntesis del nucleotido de timina tendremos que usar como sustrato a la citocina monofosfato. Si la citocina se formo a partir de uracilo trifosfatado quiere decir que lo primero que le toca hacer a la citocina es glicofatarse (por que estando trifosfatada la citocina estara lista para la sntesis de ARN) quedando de la forma difosfatada CDP; necesito de esta forma para que sea reducido por la ribonucletidoreductasa y de esta forma pasa de CDP a desoxi-CDP. A partir de aqu puede ocurrir: trifosfatarse y as tener la citocina trifosfatada unida a una desoxirribosa y este es mi sustrato para la sntesis de ADN. La otra opcin sera que la citocina trifosfatada siga perdiendo grupos fosfato y entonces pase a la forma monofosfatada que es mi precursor de los nucletidos de timina. Otra via para la formacin del nucleotido de timina seria la via del uracilo. Como hago esto? Si es el caso de la desoxicitocina-monofosfatada lo que voy hacer es perder el grupo amino (desaminacion) y vamos a formar un uracilo que en este caso estara unido a un solo grupo fosfato (UMP). Ahora podramos tener un uracilo difosfatado y se haba dicho que no lo podramos encontrar unido a desoxirribosa as que rpidamente tendra que trifosfatarse momentneamente para perder 2

grupos fosfato y converger a formar la uridina monofosfatada y asi poder unir la desoxi-rribosa formando (UMP); esta reaccin es muy rpida en la clula para evitar que el uracilofosfatado quede unido a la desoxirribosa y evitar que se pueda incorporar al ADN. Apartir del UMP se puede formar el nucleotido de timina. Qu diferencia hay entre un nucletido de timina y uno de uracilo? Ambos tiene dos grupos ceto en la misma posicin pero en la posicin 5 el nucleotido de timina gana un grupo metilo y este grupo es metilo es donado por los derivados del acido flico (tetrahidrofolatos). En este momento tengo la timina unida a la desoxirribosa y aun grupo fosfato entonces que me falta para que me sea activa? Pues que el ATP me done un segundo grupo fosfato (TDP) y luego otro ATP me done el tercer grupo fosfato y as poder quedar con la timina trifosfatada unida a la desoxirribosa (TTP) Los nucletidos de timina y citocina se encuentran unidos a la desoxirribosa y trifosfatado disponible para la sntesis de ADN. Cualquiera de los nucleotido (adenina, guanina, citocina y uracilo) con excepcin de la timina (por que se forma despus que desoxirribosa) puede estar como base, pueden estar

unidos a la ribosa por que se sintetizan en la via de novo y estn unidas a los fosfatos; estando difosfatados pueden pasar a la forma de desoxirribosa y la nica reaccin que tenemos es la perdida del Oxigeno con la reduccin de la posicin 2. Y que ribonucleotido-reductasa utiliza su coenzima para que entrando reducida salga oxidada y recuperando nuevamente su forma reducida vuelva a actuar y por ende inter-convertir mas nucletidos de ribosa a nucletidos de desoxirribosa y quien permite que la thioredoxina se vuelva a reducir NADP+ que llega reducido y sale oxidado NADPH y regalas sus H+ para que se vuelva a reducir la thioredoxina. Por eso un bloqueo posible es evitar que la thioredoxina se regenere por que de no estar ella presente en forma reducida no podemos pasar los nucletidos de ribosa a desoxirribosa. Vas de rescate de las pirimidinas. Es ms sencilla por aqu no existe dos sustratos para la va de rescate, existe uno solo que sera el nuclecido. Ejemplo: al estar la pirimidina unida al azcar y solo cuando ha perdido su grupo fosfato hay podra retomarla y el ATP le regala un fosfato formndome nuevamente el nucleotido completo y el resto sale como ADP. Si eventualmente llega haber la ruptura del enlace Beta-M-glucosidico y se libera solamente la base ya no hay via de rescate entonces solamente hacemos vas de rescate para la pirimidinas

cuando la degradacin del nucleotido va mximo hasta nucleosido.

Resumen de lo anteriormente visto: Lo que va de naranja con amarillo hace referencia a los nucletidos para ARN (ribosa)y lo que va de azul hace referencia a los de ADN (desoxirribosa.) En todos los casos el punto inferior arranca de color amarillo por que recuerden que las vas de Novo son sobre los nucletidos de ribosa y miren donde aparecen los de desoxirribosa mucho mas arriba en el

proceso de sntesis despus que se han formado losprimeros nucletidos en la via de novo. Entonces miremos primeros los de purina arrancan de un azcar de 5 carbono (ribosa 5-P)unida al ATP apartir de ellos se forma el uesto que es el fosforibosinpirofosfato (PRPP )y apartir de este terminamos en el primero de los nucleotido que es la inosina-pirofosfato (IMP) esta me puede formar GMP o AMP (recuerden que el producto de uno estimula la via del otro) despus que tenemos la estructura monofosfatada de los primeros precursores pasan a difosfatarse y esto lo realiza la hidrlisis del ATP; ya en la forma difosfatada tengo dos opciones la primera que es trifosfatarme para quedar listos para la sntesis de ARN y la segunda es pasar a ser nucletidos de desoxirribosa, entonces en la forma difosfatada vamos a tener el disoxi-GDP y el disoxi-ADP y en este punto solo me queda ganar el tercer grupo fosfato (donado por ATP)y as me quedan los dos nucletidos de purina listo para la sntesis de ADN. A hora vamos con las pirimidinas, estas van a salir prcticamente de la unin de la glutamina, el bicarbonato en presencia de ATP para producir el primer intermediario que es carbamoilfosfato a partir de l con unin del acido aspartico terminamos en el primer nucleotido que es el de uracilo (UMP) ahora este UMP pasa a ser difosfatado UDP y estando asi tiene dos opciones, la primera que es trifosfatarse y formar el nucleotido de citocina trifosfatado y asi

formo los dos sustrtos de las pirimidinas para la sntesis de ARN. La otra opcin seria irse con la forma difosfatada a convertirse en nucleosido de d-soxirribosa y a la citocina le queda la misma opcin pero no de manera directa ya que tiene que perder un grupo fosfato para quedar citocina difosfatada y de esta forma pasar a la forma glicofatada de d-soxirribosa. Estas formas glicofatadas van a tener dos opciones por ejemplo: Para la citocina tiene que ganar su grupo fosfato que lo dona el ATP y queda lista para la sntesis de ADN. La otra opcin es donde sufre un proceso de prdida de un grupo fosfato y una vez monofosfatada desaminarse y formar el uracilo-monofosfatado y este es el sustrato para la sntesis de timina que bsicamente va a llevar adicionalmente un grupo metilo regalado por el tetrahidrofolato y esta timina monofosfatada gana su segundo y tercer grupo fosfato provenientes del ATP y asi queda listo el segundo de los nucleotido listo para la sntesis de ADN. VA DE DEGRACION POR LAS PURINAS. Esta via termina para nosotros los humanos en la formacin del acido rico que sera la forma ms oxidada de purina que nosotros podemos producir. Supongamos que tenemos una celula en apoptosis y empieza a degradar sus nucletidos lo primero que va ocurrir es que vamos a tener adenocina monofosfatada y guanocina monofosfatada

incorporada dentro del ADN; lo primero que sucede es que se pierde un grupo fosfato (nucleosidasa hace que se pierda el grupo fosfato) entonces me queda el nucleocido (azcar + base nitrogenada), el siguiente paso es la razn de por que la hiposantina puede ser una via para rescatar por que antes de perder el azcar la adenina se oxida para convertirse en hiposantina y entonce esto hace que de la adenosina pasemos a inosina y este paso a inosina va implicar que la adenina pierda su grupo amino y pase a tener un grupo ceto en la posicin 6 y a esto se le llama inosina al nucleotido que tiene la hiposantina unido a la ribosa, esta reaccin es catalizada por la adenosina deaminasa cuya deficiencia va a producir uno de los cuadros que mas comnmente se encuentran como patologas por algn problema en la via enzimtica de degradacin. Seguimos con el proceso de degradacin. La hiposantina es una va para rescatar porque, antes de perder el azcar la adenina se oxida para convertirse en hiposantina y entonces esto hace que de la adenina pasemos a inosina , recuerden que el nucletido y el nucleosido de hiposantina se llama inosina, y entonces esta inosina va a indicar que la adenina pierda su grupo amino y obviamente pase a tener un grupo ceto en la posicin 6, y entonces a eso es a lo que llamamos INOSINA, al nucleosido que tiene a la hiposantina y aqu adems unido la ribosa: la

enzima que cataliza esta reaccin es la INOSINA DEAMINASA cuya deficiencia va a producir uno de los cuadros que mas comnmente dse encuentran como patologas por algn problema en la via enzimtica de degradacin. ENTONCES ESTA INOSINA PODRIA SER SUJETO DE RESCATE? RTA_ En este momento podramos entrar a rescatar. El siguiente paso es que se pierda el azcar y al perder al azcar nos queda la base sola, por esta razon habr una fosforilasa que va romper el enlace BETA- N Glucosidico; le pega un grupo fosfato en la posicin 1 a la ribosa, por eso sale como ribosa 1 fosfato, y me queda solo la base que como ya se oxido previamente pues es directamente la HIPOSANTINA. TODAVIA A PARTIR DE LA HIPOSANTINA PODRIAMOS HACER VIA DE RESCATE? RTA_ Si, todava se puede rescatar, cuando se pase esta lnea ya significa que no hay retorno para recuperar. A partir de la hiposantina vamos a ganar el segundo grupo ceto y formamos lo que se llama SANTINA y luego a partir de la santina ganamos un tercer grupo ceto y formaremos el ACIDO URICO, tanto la formacin de santina a partir de la hiposantina, como la formacin de acido urico a partir de santina, es catalizada por la enzima SANTINA OXIDASA, y

entonces por lo tanto cuando la santina oxidasa empieze a trabajar ya no hay via de recuperacin, ya las tendrn que eliminar. Aca ven a la santina que por supuesto tambin aterriza formada a partir de la guanina, porque traiamos a la guanosina formada vamos ahora a liberar la base solita, entonces la ribosa sale unida al grupo fosfato en la posicin 1( 1 prima) y me queda la sola base como guanina. PORQUE NOSOTROS ELIMINAMOS AIDO URICO COMO DEGRADACION DE LAS PURINAS? RTA_ Porque no tenemos enzimas para romper esos anillos que forman la purina por esa razon tenemos que eliminar ACIDO URICO y esa eliminacin de acido urico tiene problemas: 1. Cualquiera de las estructuras que forman anillo cuando van a salir a travs de la orina o cuando estn en circulacin, como el medio es qumico y en general como fabricamos orina de tipo acido, ellas van a precipitar formando cristales por la unin con molculas bsicas y van a formar sales que se llaman en general URATOS, esos son lo que forman los cristales que uno puede apreciar en el parcial de orina y son los responsables de esos cristales que se depositan y se precipitan en los riones y froman los clculos renales de acido urico, o que se

precipitan en las articulaciones y forman los depsitos que se denominan TOPOS QUIENES ELIMINAMOS ACIDO URICO COMO PRODUCTO FINAL DE LA DEGRADACION DE PURINAS? RTA_ Los primates que seriamos los ltimos mamferos, eliminamos acido rico como metabolismo final de las purinas, tambin eliminan acido rico las aves. Pero tienen una diferencia respecto a nosotros y es que ellas fabrican Acido rico como producto final del metabolismo de las purinas, pero tambin tienen otra fuente que es para eliminar el nitrgeno proteico en sangre. Al observar el acido rico en aves es mucho ms elevado y proviene de dos vas ya mencionadas. Los libros hacen una clasificacin de los animales: UREOTELICOS que eliminan UREA y URICOTELICOS que eliminan acido rico en eliminacin de nitrgeno proteico. Ahora tenemos el panorama de los invertebrados, de los peces que pueden ir mas adelante, los primates llegan a acido urico pero pueden existir otros mamferos inferiores que van a poder tener la enzima: URATO

OXIDADASA que bsicamente va a permitir la formacin de ALANTOINA. Qu ES LA ALANTOINA? RTA_ El mismo acido rico que puede romperse por uno de sus anillos el mas grande esto hace que la solubilidad mejore y no vamos a tener problemas de precipitacin dentro de la orina ni en la circulacin sangunea. Podramos tener otros animales, como algunos peces que fueran mas adelante en la degradacin y tuvieran una enzima que se denomina ALANTOINAZA y va a romper el segundo anillo y vamos a tener una estructura lineal y entonces esta molcula va a ser mucho mas soluble en el medio acuoso. Ahora los anfibios van mas adelante estos reducen todava ms la estructura y fabrican 2 moleculas de urea por molecula de acido urico. Y finalmente podemos tener invertebrados marinos que rompen la urea y liberan CO2 y NH3, esta es la minima expresin posible de excresion.

PATOLOGIAS ASOCIADAS AL METABOLISMO DE PURINAS: GOTA: Niveles elevados de acido urico a nivel sanguneo favorecen la precipitacin de URATOS, si se precipita en las articulaciones forma unos complejos que se denominan TOPOS esos topos van a estimular la respuesta inmune porque al ser reconocidos como cuerpos extraos, produce un efecto autoinmune( INFLAMACIN, DOLOR) Dependiendo de cuantos topos hallan y el numero de articulaciones con esta patologa se vera el cuadro mas o menos agudo.
1.

El gen de promocin de la enzima se encuentra ubicado en el cromosoma X, y adems es recesivo, por esta razn se va a heredar su deficiencia, y la patologa se ve mas en hombres que en mujeres. En gentica a este tipo de casos en los cuales el gen se genera en un cromosoma nico [(X) y] se denomina HEMICIGOCIDAD. Que caractersticas tiene el sndrome como lo vamos a ver el semestre entrante en gentica, las mutaciones van a tener diferentes impactos porque podramos tener desde que la enzima funcione en un 70 % en un 50% en un 40% hasta en menos del 5%, quienes en realidad tienen el sndrome como tal, los pacientes que tengan una depresin de la enzima mayor al 95% sea que la enzima les funciona casi con el 5% o mejor dicho no les funciona nada, entonces si tenemos esta misma deficiencia pero en un cuadro menos severo entonces lo que los pacientes van a tener es gotas y unas gotas crnicas que no mejoran con dieta o tratamiento porque es que el problema es de base, pero si ya no tienen prcticamente nada de foclon desarrollan el sndrome de la enzima, que es lo que bsicamente hacen van a empezar a acumular fosforibosin pirofosfato porque no tienen como gastarlo por la va de rescate porque ya dijimos que no van a rescatar, y entonces esa disponibilidad de fosforibosin que ba ha hacer? Dijimos que el iba ha ser regulador de la va de Novo porque si haba

Al disminuir los niveles de acido urico tambin elimino los topos de las articulaciones.

SINDROME DE LESCH- NYHA: Es producida por la deficiencia de la enzima HIPOSANTINGUANINFOSFORIBOSIL TRANSFERASA, esta la vemos en la via de rescate desde la guanina para pasarlo a inosina bifosfatada, la deficiencia de no me permite rescatar ni la guanina y tampoco la hiposantina.
2.

disponibilidad orientaba hacia haya a la sntesis entonces van a tener mucha via de novo, nada de via de rescate van a elevar la purina y por supuesto su producto que ser el acido urico, y esos paqueticos que por supuesto que tienen gota que tienen hiperglucemia hacen una .. paipitoxica porque ya empiezan a perder toda la flexibilidad de sus articulaciones debido al deposito de material y tienen que es lo mas grave trastorno neuropatologicos tan severos que en menos de tres aos los nios tienen un retardo mental total y ese retardo mental tan severo ba acompaado de agresividad y de un fenmeno de automutilacin en el que bsicamente se comen los dedos, la boca, los dientes, la lengua y entonces como es una situacin tan delicada lo que hay que tener es a los nios amarraditos y protegidos con gasas para evitar que se autodestruyan, los cuadros son dramaticos y la expectativa de vida no ba mas aya del los 1 aos, pero el problema es que todos los posibles hijos de una pareja asi tengan un 50% de probabilidades por azar de que presenten la patologa. Sndrome de inmunodeficiencia combinada: Otro de los sindromes que se produce por deficiencia enzimtica es el sndrome de inmunodeficiencia combinada, este sndrome recuerdan ustedes que les mencione que en el proceso en que la adenosina se convirtiera en inosina, que se desaminaba y la adenina se converta en hiposantina y que por estar unida a la ribosa entonces se llamara adenosina y

pasara a inosina, y como se llama la enzima que hace el proceso de desaminar la adenosina desaminasa, cuando tenemos deficiencia de esta enzima entonces lo que va a pasar es que nosotros poco vamos a drgradar las bases nitrogenadas que provienen de la adenina y entonces vamos a llevar a que bsicamente los paqueticos ban a tener una evolucin letal, lo que va a ocurrir y donde mas se manifiesta la deficiencia de la enzima es a nivel de las clulas del sistema inmunolgico, especficamente de los linfocitos B y en estos se disminuyan hasta en un 50% la produccin de anticuerpos, entonces el nio fenotpicamente se ve como un menor que tiene deficiencia en la produccin de las clulas inmunocompetentes entonces no responde a las infecciones o microorganismos por muy buenos que fueran le pueden producir la muerte. Por esto y sus siglas en ingles se parece SCIDS al AIDS y los nios con este sndrome son igualitos a un paciente con SIDA solo que la inmunodeficiencia le viene de origen apartir de la deficiencia de la enzima. Como un paciente con sida en realidad no se muere por la deficiencia de la enzima como tal si no por las infecciones que pueda ganar. Durante mucho tiempo el tratamiento fue mantener a los nios en casas estriles y entonces les llamaban nios burbuja entonces no se infectaban con nada pero a su ves no podan tener una relacin normal porque no podan salir de ese entorno y por esta razn se usaron otros tratamientos como el trasplante de medula osea que si bien resulto exitoso en muchos casos, tenia el

problema de que como en cualquier trasplante la persona poda responder contra los antgenos que no son propios y rechazarlos. De todas maneras los trasplantes mximo duran hasta los 12 aos debido a la respuesta inmunolgica. En los ltimos seis aos se ha venido trabajando en la terapia gnica para esta patologa en la que bsicamente se saca la medula osea del propio nio, trabajar sobre sus clulas madres incorporando el gen correcto, se vuelve a poner la medula osea y como es un autoingerto no lo rechaza, hay por lo menos 10 nios ya con xito total a partir de terapia gnica. Pero la desventaja tiene que ver con los costos que eso representa. Degradacin pirimidinas: Para terminar vamos a ver como se degradan los nucletidos de pirimidina, aqu la degradacin es mucho mas sencilla porque el anillo se rompe y si el anillo se rompe pues los productos son mas solubles y se eliminan mas fcilmente a travs de la orina y no causan tanto inconveniente como se puede dar con la precipitacion del acido urico. Entonces aqu tienen varios posibles escenarios desde los cuales partiramos, fjense que la timina tiene tres estructuras remplazadas dos grupos cetos y un grupo metilo, va a ir por una via y las otras dos que son la citocina y el uracilo ban a venir por otra via, estos dos ban a coberger en una misma via porque la citocina ba a tener un grupo ceto y un grupo amino (todos los

procesos de degradacin metabolica en el organismo finalmente llegan a la produccin de productos occidados) quiere decir que la citocina en algn momento de su degradacin ba a converirse en uracilo, porque lo que va ha hacer es a perder su grupo amino para volverse ceto y ahora con dos grupos ceto acaba de volverse uracilo, por lo cual ban por la misma via y tiene el mismo producto, en cambio la timina por tener ese grupo metilo tiene una via diferente y ba a generar tambin un acido, pero un acido con una pequea variante que es ese grupo metilo adicional. El proceso es exactamente el mismo, podramos partir de una cistidina es decir de un azcar de tipo ribosa unida a la citocina, podramos partir de la dos prima desoxicitidina osea de la citocina unida a un azcar que en este caso seria la desoxiribosa, o podramos partir del nucletido completo que seria la citocina unida a la ribosa y a un grupo fosfato y entonces ya no seria nucleostido sino seria nucletido y entonces a ese es al que le toca el camino mas largo, primer paso perder el grupo amino, entonces pasa a desoxiuridina monofosfatada, segundo paso perder su grupo fosfato y entonces va a convertirse en nucleosido en dos prima desoxiridina, tercer paso perder el azcar y se convierte entonces en uracilo. Para esta via, hasta donde podra hacer recuperacin por via de rescate? Podramos rescatar hasta despus de perder el fosfato, pero si ya perdemos el azcar y llegamos a uracilo, entonces ya no podemos rescatar, porque solo rescatamos el nucleosido. Y por esta via lo

mismo, esto antes debi cer una desoxicitidina monofosfatada y mas arriba ya perdi su grupo fosfato y se volvi entonces nucleosido y aqu lo podramos rescatar nuevamente o si llega y pasa a desoxiridina, todava lo puedo rescatar y si pasa ya a uracilo, ya no lo puedo rescatar. Que hacemos con el uracilo, entonces primer paso recuerdan que el uracilo tiene dos grupos ceto y al lado derecho entre el carbono 5 y el 6 tiene un doble enlace que fue el que hizo que en la sntesis de acido dihidroorotico pasara a orotico, entonces ahora aqu en el proceso de degradacin lo primero que ocurre es que el uracilo tiene que perder ese doble enlace por eso ben aqu que pasa a dihidro uracilo, para poder eliminar esa insaturacion implica que alguien le haga el favor de reducirlo por eso ben al NADPH que entra reducido regala los hidrogenos para que se quite el doble enlace y sale como NADP oxidado. Y para que le quito el doble enlace? Es porque por ese punto se va a romper el anillo para volverse una cadena lineal, entonces una ves quitada la isnaturacion y siendo dihidro uracilo ahora entra el agua, rompe por el carbomo 5 y 6 y me queda una cadena larga de seis atomos y a esa estructura se le llama acido ureico propion y este acido rpidamente sufre la accin de una nueva molecula de agua que lo parte en tres, conserva cuatro de los atomos para formar el aminocido beta alanina el quinto de los carbonos permite la formacin de una molecula de co2 y el otro de los seis atomos forma una molecula de amoniaco.

El co2 se elimina a travs de la respiracin, el amoniaco puede ser reutilizado como grupo amino o puede irse a formar urea para eliminar rapidamnte el nivel que este tiene de toxicidad dentro del organismo y en ultimas el producto final es la beta alanina que siendo un aminocido perfectamente puede ser reutilizado o podra bien degradarse utilizando la cadena carbonada, eliminando los grupos amino, los cuales salen como urea. Este es entonces el final tanto para la citocina como para el uracilo. El final para la timina es muy parecido, teniendo el nucletido como monofosfatado, entra el agua y retira el grupo fosfato y entonces se convierte en nucleosido que como esta unido a la desoxiribosa entonces se llama dos prima desoxiribulina, sabemos que a partir de esta estructura todava podemos rescatar porque seria el nucleosido, y si seguimos adelante vamos a perder a la desoxiribosa que sale con un grupo fosfato en la posicin uno y se convierte en timina y sabemos que asi ya no podra recuperarse, y la timina entonces ba a tener que hacer lo mismo entre el carbomo 5 y el 6 ba a tener que perder su insaturacion y se convierte en dihidrotimina, sabemos que para poder eliminar la insaturacion vamos a tener que reducir la molecula entonces por eso vamos a tener aca al NADPHH y sale como NADP y ahora esa estructura que redujo sus insaturaciones ba a romperse por accin del agua y ahora ya no tenemos seis carbonos si no una sptima estructura que era el grupo metilo, entonces por eso se forma el acido beta urico isobutirato y cuando

este acido momentneo que se forma es hidolizado por el agua me da el mismo amoniaco, el mismo co2 pero ahora lo que me quedo como molecula grande no es la alanina porque esta era de 4 atomos, aca tengo 5 atomos entonces este se llama el acido beta amino isobutirato y este es en realidad el producto final que se elimina por la orina de la degradacin de las pirimidinas, porque yo dije que la alanina la podamos reutilizar y en ultimas no era producto final, encambio este acido si no hay manera de reutilizarlo y como es lineal pues se elimina fcilmente de manera soluble atraves de la orina. Aciduria orotica: Entonces las patologas por deficiencia de las enzimas para la degradacin de las pirimidinas son muy poco frecuentes y no son tan drsticas como las que vimos en las purinas, aqu la mas delicada por asi decirlo es la aciduria urotica que bsicamente la puede haber de dos tipos, esto se debe a que hay dos complejos enzimticos que podan catalizar varias reacciones uno de los dos era la UMP sintetasa que catalizaba la transferencia de la fosforibosin pirofosfato al acido orotico de la ribosa y el grupo fosfato y la descarboxilacion del acido orotico para que se convirtiera en UMP. Entonces los dos tipos de patologas estn relacionados con cuanto del complejo enzimtico esta comprometido, si nosotros tenemos que la enzima esta comprometida de manera total

entonces tenemos aciduria orotica de tipo I porque ni hace la funcin de transferir el fosforibosin ni hace la funcin de descarboxilar al OMP entonces ambas reacciones estn bloqueadas, o la segunda opcin que seria la aciduria orotica de tipo II es mas benigna porque la enzima hace la primera reaccin pero no hace el ultimo paso, que es la sintetiza UMP a partir de OMP. Entonces recuerden siempre cuando una enzima se inhiba sea por competidores o motivos externos o gentica, lo que uno observa clnicamente son dos posibles cuadros, uno que seria por la deficiencia de los productos que a partir de all deberamos tener pues porque no se van a formar o una segunda posibilidad que es la que comnmente causa mas cuadro clnico es la acumulacin de los sustratos que no estn pudiendo pasar a producto, en este caso esa es la razn de la patologa, vamos a tener acumulacin de acido orotico porque no lo podemos pasar a UMP en cualquiera de los dos casos. En la tipo I que es mas drstica lo que los pacientes tienen es una anemia que bsicamente se observa debido a que hay defectos en la maduracin de los globulos rojos , vamos a tener una elevada cantidad de acido orotico eliminndose por orina y como siempre hemos dicho como es un acido puede precipitarse ah y formar cristales y obstruir el tracto a partir de la formacin de clculos renales, pero bsicamente por ser una patologa extraa, el cuadro no se produce mucho. Cuando tenemos la tipo II los pacientes pueden llevar una vida relativamente sana y les dan como terapia la

uridina que lo que hace es remplazar al UMP que no se esta pudiendo formar.

Recuento: Supongamos que nos comimos una hamburguesa, entonces ah venian los acidos nucleicos, lo primero que va a ocurrir es que vamos ha hacer con ellos degradacin porque el metabolismo inicial si somos

hetertrofos implica que nos proveamos de los elementos que no producimos a partir de la dieta, entonces estos acidos nucleicos que llegan a nuestro organismo van a sufrir la accin de endonucleasas que rompen al acido nucleico en segmentos de mximo 10 nucleotidos y a esto se les llaman oligonucletidos, con la fosfodiesterasa rompemos uno a uno y entonces formaremos nucletidos como tales, estos nucletidos si fueramos a la via de sntesis decamos que los vamos a bifosfatar primero, luego a trifosfatar y trifosfatados se utilizan para sntesis, pero podran entrar a degradarse, el primer nivel de degradacin siempre ser perder el grupo fosfato por accin de nucleotidasas y se convierte en un nucleosido, ese nucleosido tiene dos opciones q es seguir degradndose u otra que es la reutilizacin fosfatandolo de nuevo gracias al ATP. Si se sigue degradando se libera del azcar y se vuelve base solita y esa base en el caso de las purinas pueden volverse a recuperar y si se recuperan llegan otra es hasta nucletidos gracias al fosforibosil pirofosfato. Y si no se sigue degradando en el caso de las purinas a zantona o a acido urico y en el caso de las pirimidinas ser el acido beta amino isobutirato que se elimina por la orina. XI CLASE (1H)

CANCER Una mutacin puede tener distintos tipos de impacto, Mutaciones en las regiones no codificantes (las cuales no afectaran; son las que nos individualizan). Mutaciones en las regiones codificantes: Cambio de un aa que: *No afecte la funcin de la protena, no cambia su estructura conformacional. *La funcin proteica cambie de tal forma que se genere un producto no proteico (con un nmero de aa muy pequeo, oligoprotena no funcional). *Modificacin como en el caso de la hemoglobina L, que sera una metahemoglobina que no trasporta oxigeno, lo que compromete la vida de la persona. Cuando se tienen muchas mutaciones reunidas pueden afectar los genes que estn comprometidos en dos cosas, en favorecer el proceso de divisin celular y en controlar el ciclo celular. Al suceder esto, la clula se puede transformar, apareciendo lo que se conoce como CNCER. Se estudiara desde el punto de vista molecular que le pasa a la clula.

Agentes mutagnicos externos: aquellos que afectan la clula al inducir las mutaciones por eventos del exterior. Mutaciones espontneas: las que provienen de la va interna o la va propia, la clula las puede tener a nivel de la replicacin por una desaminacin o por una depurinacin por elementos transponibles. Hoy da se tiene una tasa ms alta de mutaciones, lo cual es causado bsicamente por un incremento en el nmero de agentes que pueden afectarnos e inducir la mutacin. Cncer mutaciones que se recogen o reinciden en mltiples presentaciones Mltiple presentacin, pueden haber dos modelos: 1. Que los agentes inductores de mutaciones, simultneamente produzcan una serie de efectos sobre un individuo. No es comn, pero se presenta por ejemplo, en personas con exposicin laboral, las cuales tienen un contacto permanente con agentes mutagnicos. Ejemplo, quienes trabajan con rayos X, al recibir de manera permanente dmeros de pirimidina, necesitan un periodo mnimo de 2 meses de no trabajo para permitir que sus clulas se

reorganicen. Esto es un modelo de mltiples mutaciones, que por estar presentes en un mismo momento y en condicin sucesiva, favorece la posibilidad de que stas mutaciones queden en el individuo. 2. Quienes viven en las ciudades, estamos sometidos a la accin de sustancias como la nitroso guanilina a partir de los embutidos y las comidas que se consumen, de la radiacin UV por el desgaste de la capa de ozono; lo que hace que se empiecen a reunir mltiples mutaciones en el organismo. La clula trasformada, causado por lo que denominaremos CNCER ADQUIRIDO, la posibilidad de desarrollar un cncer de manera espontnea ser producto de mltiples mutaciones recibidas. Por lo tanto la edad promedio de aparicin no es antes de los 50 aos, ya que se necesita tiempo para adquirir estas mutaciones. Los CNCERES HEREDADOS tienen la posibilidad de tener una copia alterada (que se hereda), que al mutar una segunda parte, hace que se presente el cncer ms temprano. La caracterstica comn a todos los tipos de cncer, es que es de origen gentico, porque implica una modificacin en el material que la clula tiene.

Esta patologa se va ha tener en dos grupos: Gnesis de la Va supresora: Modificacin o cambios de la clula a nivel macro, alterando el o los cromosomas. Va mutadora: Cambios sutiles que producen inicialmente modificacin de los genes que codifican para las protenas que reparan los errores posteriores a la replicacin. recordar enzimas que trabajan en G2 para revisar el material gnico, el complejo RER, quien revisa y repara, haciendo inicialmente un papel como exonucleasa de 3 a 5, y luego coloca los nucletidos correctos en la posicin 5 a 3 --Cuando los genes que producen estas protenas (las enzimas del complejo) se modifican, las enzimas no corrigen correctamente y empiezan a dejar errores en la replicacin. Al hacerse acumulacin de las mutaciones puede llevar finalmente a la modificacin del material gentico en la divisin celular y por lo tanto aparece la transformacin La transformacin es una perdida de la seal de la restriccin en la divisin celular. Una de las primeras caractersticas de la clula maligna, es

que no reconoce un mecanismo que detenga su divisin celular; por lo que se dice que se inmortaliza, se divide y divide y divide de manera indefinida :). Lnea celular (lo que se tiene en laboratorios) es aquella que se divide indefinidamente por no reconocer mecanismos que la frenen. sta se ha sacado de un carcinoma y se mantiene para estudios. Ojito: Al perderse la restriccin de la divisin, no se reconoce una serie de molculas que le sealan a la clula cuando debe salir de G1 y pasar a S (punto inicial de control), cuando la clula paso a S ya no hay vuelta o retorno. Desde el punto de vista de cmo se puede presentar, se tienen dos componentes: Heredado Adquirido Como ya se dijo, primera diferencia entre estos 2 es el tiempo de aparicin o presentacin del cuadro. Cuando es de tipo heredado la predisposicin est en presenta un tipo especifico de cncer. La especificidad no es para un nico tipo de cncer, existen algunos asociados y esta asociacin se observa en la metstasis.

Ejemplo, las personas que desarrollan cncer de clulas pequeas de pulmn, pueden tambin desarrollar cncer de vescula biliar, de colon o de recto. Una de las razones de esta asociacin tiene que ver con el origen embrionario de estas estructuras; la otra es que al desprenderse una clula de un carcinoma primario para viajar y crear un segundo o tercer foco (lo que se conoce como metstasis), tiene que ser reconocido por receptores de membrana, y estos receptores estn puntualmente en tejidos que corresponden a la misma naturaleza. Por esto no sucede que tenga cncer de pulmn y ste haga metstasis en hgado. En este sentido el cncer heredado: (ejemplo) una persona con antecedentes familiares de cncer de colon, puede nacer con la predisposicin a desarrollar este tipo de cncer; adems segn el protocolo vigente incluye tambin predisposicin a cncer biliar o de tero. Por esto se llaman familias o grupitos que dependen de los genes que se alteren. El de tipo adquirido nos puede dar a cualquiera de nosotros, volvindonos el nmero uno de la familia. El cual a partir de una exposicin generar un primer tipo de cncer.

Tumor: concepto utilizado para circunscribir la aparicin de una masa, es decir una divisin y multiplicacin celular que crea una estructura. Estos a su vez pueden ser de dos grupos: *Benigno: aquel que guarda la caracterstica de no invadir (estar cerrado) y adems se encapsula (ganando una estructura fibrosa), otras caractersticas son: Proliferacin controlada rea definida No invasiva Capa fibrosa Poco desarrollo de la angiognesis La angiognesis es el desarrollo de nuevas vas sanguneas para permitir tanto la oxigenacin como la nutricin de una manera ms rpida. *Maligno: es una proliferacin celular que guarda las siguientes caractersticas: Prolifera a otros tejidos No esta circunscrita a un rea No tiene capsula fibrosa Gran desarrollo de vasos sanguneos Peor estrategia es de sacarlo, porque permitira que las clulas se diseminen a tejido linftico y hematolgico (Fase IV o metstasis).

Otra caracterstica de un tumor es que va a depender o va a tener una prevalencia diferenciada en las distintas regiones del mundo. Esto se asocia con los hbitos alimenticios, la exposicin a agentes mutagnicos, las caractersticas genticas del individuo. Segn las estadsticas del Instituto Nacional de Cancerologa en 2005, Colombia tuvo una incidencia (casos nuevos en el ao) de 10.900.000. De ellos mas o menos 6.000.000 haban muerto por la patologa, lo que seala que la expectativa de vida despus de diagnosticada la enfermedad no es mayor a 3 aos; quienes superan los 5 aos ya prcticamente se va a curar del proceso, porque se evito la muerte. Prevalencia de canceres ms frecuentes en nosotros es: Hombre 1. Prstata 2. Estomago 3. Pulmn 4. Colon-rectal Mujer 1. Cuello del tero 2. Mama 3. Estomago 4. Colon-rectal

Cncer de Prstata es el ms comn en mayores de 60 aos, pero muy poco probable que el paciente se muera por este tipo de cncer, ya que es menos agresivo y ms fcil de controlar.

Cncer de estomago es muy agresivo, usualmente el paciente se muere 3 meses despus del diagnstico. Entonces hay unos cnceres muchsimo ms agresivos, esto esta relacionado segn lo invasivo que sea y segn el servicio o funcionalidad del rgano afectado. Factores o caractersticas que influyen en el desarrollo del proceso: 1. Tiene que ver con la composicin gentica de la persona, con la capacidad de metabolizar los carcingenos. Ahora se sabe que existe dentro de la farmacogentica una selectividad y una diferencia en nuestras enzimas para metabolizar los productos. Algunas personas son metabolizadotes lentos, otros medianos y otros rpidos. Por esto en un mismo escenario donde 3 personas se toman 1L de aguardiente uno queda borracho, otro como si no se hubiese tomado nada y el otro queda apenas prendido. Esto ejemplifica que tan fcil los individuos degraden el alcohol, las enzimas realizaran un metabolismo distinto y selectivo sobre ese analito. En el caso de los carcingenos, por ejemplo, se formaron dmeros de pirimidina, pero que tan bien acten nuestras enzimas fotoreactivantes o la va de escisin general determinara que tan rpido se

corrigen esos errores; el que no tenga esa posibilidad, dejar que esas mutaciones le queden y aumentar la probabilidad de desarrollar el cuadro. 2. El grupo de enzimas que reparan el ADN, funcionen de forma correcta. 3. Nosotros podemos responder diferente a estmulos, y eso es ha lo que se le llama una predisposicin Agentes o factores que favorecen de manera externa el desarrollo del proceso *Fumar = alta incidencia de presentar cncer de pulmn. La relacin de cncer de pulmn entre fumadores y quienes no lo hacen es de 105:1 *Rayos X = tienden a desarrollar leucemias, y sobre todos la de la lnea mieloide, que son la de los polimorfonucleares. *Rayos UV = aumenta posibilidad de desarrollo de cncer de piel (noticia de las cmaras bronceadoras). *Alimentacin = guarda gran relacin con cncer gstrico y colon-rectal. En estudios en el Cauca y Nario, donde hay una alta incidencia de este tipo de cncer, se ha observado que la cascarita del maz es bastante carcinognica. Otra sustancia es el jugo de la carne al asarse (la combinacin de hemoglobina con

otros componentes que se desprenden de la carne asa.). Naturaleza del cncer Teora Clonal Una primera clula normal sufre una alteracin transformacin en su material gentico (la cual consiste en que no reconoce cual es el momento de parar la divisin), y a partir de ella se originan las dems clulas a su alrededor alteradas. Por tanto las clulas hijas sern iguales a su progenitora (por esta razn es una teora de expansin clonal). A medida que se generan nuevas clulas, se tienen ms rearreglos y por tanto, ms cambios en el material gentico. Se presenta con mayor frecuencia en clulas que proliferan abundantemente. Ya que las clulas que se dividen mucho, tienen ms probabilidad de acumular mutaciones a lo largo de la vida Todas las clulas cancerosas van a mostrar mltiples lesiones genticas. La diferencia esta en el tamao de la lesin, si son tan grandes como para ser observadas a nivel cromosmico,

o sutiles que se detentaran inicialmente a nivel molecular. La incidencia aumenta con la edad, la razn esta dada por tener la posibilidad de reunir o acumular muchas mutaciones.

Etiologa Sager propuso: Cncer es un proceso gentico con mltiples estadios hasta que aparezca la transformacin, los cuales son: 1. Dao inicial del ADN, mutacin (puede ser por una exposicin). 2. Rupturas cromosmicas y rearreglos (al reconocerse sitios clave). Ejemplo: las leucemias (sobre todo las de tipo mieloide), se generan por rupturas entre cromosomas de 2 grupos especficos, por ejem se cortan los cromosomas 9 y 22, y hay un intercambio del material. Entonces, esa translocacin (cambio del material gentico de un cromosoma a otro que no es homologo), 9 22 es la responsable de que aparezca la leucemia mieloide de tipo crnico. Por tanto, en este segundo paso se observan cambios a nivel macro, visibles en los cromosomas.

3. Seleccin de clulas mutantes (aquellas que no involucionaron o que no murieron), susceptibles a crecer. sta cell mutante que ahora crece sin reconocer lmites, es la primera que va a introducir la modificacin, y a partir de ella la gnesis de las dems. 4. Aberraciones cromosmicas que generan nuevos patrones de expresin gnica. La caracterstica ms comn de una clula trasformada es que se desdiferencie, cambia su funcin en el tejido, primero empieza a expresar una serie de marcadores de clula embriognica (por tanto, en un paciente que se sospecha cncer, su busca la aparicin de la alfa feto protena, del antgeno carcinoembrionario, del CA 125). Dentro de las sustancias o molculas inductoras para poder producir de forma externa esas mutaciones hay agentes Fsicos Qumicos Biolgicos Caractersticas de la proceso carcinognico clula maligna y del

1. Cambios o modificaciones a nivel gentico que va ha tener la cell. Es un proceso que se desarrolla a largo plazo y progresa en 4 fases obligatorias: I. Fase de induccin (los 4 pasos propuestos por Sager, ver etiologa (exposicin a agentes mutagnicos dao material gentico rearreglos cromosmicos clula que se transforma)), se calcula que su duracin para un cncer de tipo espontneo o espordicos en alrededor de 20 aos. Por eso es que usualmente este tipo de cncer, los espordicos, se presentan en la quinta dcada de vida, ya que se requieren muchos aos de exposicin. II. Fase in situ (conocida como carcinoma in situ), es cuando la clula clonal se selecciona y empieza a desarrollar las clulas hijas. Entonces todo ese grupito de clulas que aparecen en la expansin clonal inicialmente estn circunscritas a la regin donde la primera cell se modific. La citologa vaginal es un ejemplo de una prueba poco invasiva y econmica, es til para disminuir la incidencia del carcinoma in situ. Cuando se detecta uno, nicamente con una prueba llamada La conizacin, que es quitar el segmento donde aparece el

carcinoma in situ, ya el pronstico es mejor. Si el carcinoma esta en una fase ms adelantada, el procedimiento es otro. Cuando las clulas avanzan, por aumentar su nmero, se le acaba el espacio a las clulas para poderse dividir. Entonces otra caracterstica que gana una cell maligna es que pierde la inhibicin por contacto (que es dada por el espacio que hay entre clulas, y entre ellas y la lamina basal). Lo que sucede es que la cell maligna no reconoce las estructuras laterales, entonces las cell se enrollan sobre si mismas para caber y de all es que aparecera la tumefaccin (el tumor). Por esto es un tumor bastante slido, duro, porque lo que tiene son cell dobladas unas sobre otras. Cuando se le acaba el espacio inicia su tercera fase. III. Fase Invasiva. Las clulas se multiplican e invaden tejidos profundos atravesando la membrana basal (ya que se le acab el espacio para dividirse) sin reconocer limites. En ese proceso y avance aparece la angiognesis (que va ha determinar a que tasa se divide y replique) la cual lo nutre.

IV. Fase de diseminacin. Con la angiognesis puede suceder que una cell maligna se desprenda y entre a circulacin, ingresando por uno de los vasos que la alimenta; al estar dentro del vaso viaja hasta llegar a tejidos que tengan receptores de reconocimiento (por esto se mencion de grupos de cncer que guardan relacin). Esto lleva a la metstasis, que es el desarrollo de un cncer a distancia del sitio de origen; pueden trascurrir entre 1 a 5 aos se demora en aparecer la metstasis si se cuenta desde el carcinoma in situ. La diferencia en el tiempo (1 a 5 aos), esta dada porque algunos cnceres son ms agresivos que otros, tambin algunos organismos responden y se defienden mejor que otros. Ejemplo del paciente con cncer de estomago, su promedio de vida es de 3 meses desde el momento en que se detecta. La deteccin del cncer en Colombia es critica antes de la fase III, es decir cuando nos va bien se detectan en la fase invasiva, y en ese momento ni el mdico ni el paciente sabe si ya hizo metstasis. Entonces el tratamiento puede ser exitoso en el cncer detectado originalmente, pero al pasar los aos reaparece un

proceso canceroso que puede ahora ser en otro rgano. Lo que se concluye es que cell malignas viajaron antes del tratamiento y ahora son causantes de la recidiva. Otro caso puede ser que se encuentre un foco secundario, el cual se trata y se elimina pero queda el foco primario, quien origino la metstasis y por tanto continuar el proceso metastsico. La herramienta diagnstica actual, esta apoyada en detectar el paciente en la fase I y de manera ideal en la trasformacin clonal. Desde este punto, el tipo de cncer que se genera por la va mutadora se podra detectar de forma rpida y satisfactoria por cambios en el patrn del seguimiento que se le hagan a los microsatlites. A partir de all sealar que la cell arranco a hacer una inestabilidad, que inicialmente ser genmica, y ms adelante cromosmica; con la ventaja de que slo cuando aparezca la cromosomica se generara la agresin maligna. Esta tcnica esta teniendo muy buen resultado para cncer de colon, rectal, de mama, siendo una opcin de diagnstico precoz.

La inmortalizacin celular es que desde que la cell tenga comida, existe sin algn inconveniente. 3. Desdiferenciacin celular. Es decir, la cell pierde todas las caractersticas especficas del tejido al que pertenece, y pasa a convertirse en un patrn ms general, produciendo sustancias propias de estadios embrionarios (como las alfa Beta protenas y antgenos carcinoembrionarios). Estas sustancias son las que se detectan en circulacin y sirven como seal de la aparicin de un proceso maligno en algn lugar. El punto desfavorable que tienen estas molculas embrionarias, es que pueden aparecer altas en mltiples tipos de cncer; entonces me ayudan a decir que hay cncer pero de donde NO. Por tanto no tienen una muy buena circunscripcin muy especfica, con respecto a un determinado cncer y por lo tanto no es muy til en el diagnstico. Existen otras sustancias que me sirven como sealadores ms selectivos, porque se expresan ms especficamente respecto al tejido; por ejemplo, el antgeno especfico de prstata. 4. Invade tejidos de alrededor. Genera lo que se llama la Etapa Invasivo. Los elementos (factores que influyen) que tiene la cell clonada, la que se

2. Cambios en la divisin celular. La clula pierde todas las restricciones en la divisin, y a esto se le conoce como inmortalizacin de la cell.

trasformo, para poder hacer el proceso invasivo son: a) Incremento de la motilidad de los receptores de membrana (de los que ya se dijo que haban cambiado). Esos receptores estimulan la posibilidad de reconocer la cell; por esto es una va utilizada para canalizar rpidamente donde quedarse cuando esta viajando en sangre y va a generar un proceso metastsico. b) Incremento en la presin. Es debido a lo que se dijo que las cells se enrollan para hacer su divisin celular; entonces, a partir de all aparece el dolor (es el primer sntoma de un paciente con cncer). c) Elaboracin de mltiples sustancias lticas. Las cuales ayudan en traspasar la membrana basal y a hacer invasin de otros tejidos; sino las tuviese esto no lo podra hacer. Este es uno de los mecanismos que utiliza, sobre todo generando proteasas para romper membranas que le permitan avanzar en el proceso de invasin d) Prdida de uniones intercelulares. Por ejemplo, un fibroblasto que es alargadito, con ncleo pequeo comparado con la cantidad de citoplasma, cuando se ve, la cell maligna es

redonda y 2/3 partes de su tamao son del ncleo, parecida a un linfocito B. En los epitelios, de cells cbicas, ya de eso no quedara nada, porque la cell se redondea, ya no se reconoce como cell de un tejido y desaparecen las uniones intercelulares, por lo que no crece una monocapa. Pregunta: La cell maligna se necrosa? De que su angiognesis se desarrolle desde luego que no, porque de la irrigacin que recibe saca todo lo que necesita (nutrientes, oxgeno), lo que genera es dolor por el crecimiento en el nmero de clulas (aumento del tamao). La necrosis es un proceso normal en una cell normal, pero en una maligna no. e) Prdida de inhibicin por contacto.

XII CLASE (2H) CANCER II Habamos terminado hablando de que a la clula le iban a ocurrir varias cosas, que la iban a diferenciar de una clula normal cuando se transformaba. 1. Una de las primeras era que iba a ganar la capacidad de dividirse de manera ilimitada lo que haca que el tumor creciera de forma muy rpida. 2. Otra caracterstica importante que ganaba es que estaba en capacidad de invadir las reas de alrededor, entonces perda la inhibicin por contacto y eso haca que pudiese autoenrollarse dentro de las mismas estructuras para que si no tenia un espacio fsico, ganar un rea mayor donde se pudiera multiplicar. 3. Su proliferacin iba a estar mediada por cunta cantidad de oxgeno y de alimento le llegara. 4. Amplio desarrollo angiogenico en esa zona para favorecer el desarrollo tumoral y que por supuesto bamos a tener una insuficiencia con respecto a las seales de crecimiento que iba de la mano con que no exista la limitacin en la regulacin del ciclo celular. 5. Iba a ver a su vez, una insensiblidad para las seales anticrecimiento, vamos a ver esto como

est mediado por ciertos tipos de genes que de manera normal actan inhibiendo el paso de G1 a S, para impedir con ello que de desencadene la divisin celular. 6. Si la clula se inmortaliza va a hacer una evasin de la apoptosis. Cada uno de otros grupos, caracterizados de particularidades que iban a determinar que la clula se transformara. Dijimos que iba a ver, primero que todo, unas alteraciones de tipo cromosmico, despus una transformacin y que esa transformacin llevaba a que se modificara la membrana celular; dijimos que hasta morfolgicamente: la estructura alargada, y la proporcin relacin ncleo-citoplasma se perda y apareca la expresin de sustancias o antgenos de protenas nuevos a nivel de la membrana y por suspuesto la prdida de aquellos que normalmente la clula tena; y finalmente una serie de cambios bioqumicos porque vamos a tener que la clula va a producir ciertas protenas que le ayudan en el proceso sobretodo de expansin y de lisis del entorno alrededor para permitir tener un rea mayor. Mencionamos que esos productos bioqumicos podran funcionar como molculas que nos permitan determinar por lo menos grupos de cnceres de acuerdo al genotipo de protenas de naturaleza

angiognica que se empezaban a expresar en ese tipo de tejidos de tal manera que nosotros podamos establecer diferencias que sirven mucho para orientar hacia cules tipos de cnceres se estn desarrollando hacia la clula, si tiene o no una transformacin y despus cuando se hacen los primeros abordajes en el paciente (recesin quirrgico, se da tratamiento de radio y quimioterapia), ayudan muchsimo en lo que se llama seguimiento porque obviamente si nosotros esperamos que todas las clulas malignas desaparezcan, pues no deberamos detectar marcadores tumorales en circulacin a niveles de estos pacientes. Y cuando se empiezan a encontrar y empezamos a tener niveles que van subiendo, nos habla de recidivas que en paciente quedaron y que por lo tanto pueden volver a generar un nuevo foco en ese paciente. En resumen: la alteracin de la clula se produce necesariamente como un resultado en la regulacin de su ciclo celular. Por qu se da esa alteracin de ciclos? Porque aparecen defectos que bsicamente desestabilizan su genoma entonces producen daos en el material gentico y esos defectos (que dijimos eran multiples mutaciones) pueden venir de manera endgena o exgena, dependiendo de si son problemas que llamamos de mutaciones espontneas o si son mutaciones que se conocen como inducidas.

Y por suspuesto nosotros vamos a tener estos factores de expresin, que es lo que vamos a ver ahorita, que se clasifican en dos grandes grupos: 1. Si las diferencias son stiles y pequeas y estn mas que todo a nivel molecular, vamos a hablar de lo que se llama la via mutadora 2. Si las diferencias son macro, grandes, son reareglos a nivel de los cromosomas, hablamos de lo que se llama la va supresora. Los cambios incluyen rearreglos genmicos que pueden llevar a nuevos patrones de expresin gnica y eso es lo que hace que aparezcan antgenos distintos a nivel de la superficie, produccin de molculas bioqumicas nuevas y aparece entonces un nuevo genotipo. Pueden en realidad pasar 3 cosas: 1. Que se alteren genes que se conocen con el nombre de protooncogenes que serian genes que en condiciones normales estn funcionando en la clula y que pueden , al mutar, convertirse en oncogenes, que seran estos mismos genes pero con una tasa de saturacin mayor. Aumentamos su expresin y esto genera un incremento en ltimas sobre todo de aquellos que funcionan como factores de crecimiento.

2. Los genes que normalmente estn trabajando en una clula, con el nombre de genes supresores de tumor, van a estar eventualmente mutados, entonces su papel normal que es el de frenar la replicacin de las clulas va a disminuirse y con ello se favorece entonces la posibilidad de que la clula incremente el nmero de divisiones. 3. Se generen mutaciones en algunos genes en el grupo de los genes reparadores de los errores posteriores a la replicacin y entonces a eso se le conoce como genes de estabilidad, que pueden alterarse y entonces cuando se alteran producen un patrn fenotpico caracterstico. Recuerden que dijimos que los puntos de controles ms importantes van a estar localizados al final de G1 y el otro punto es al final de G2 para inducir la divisin. Qu hay de particular en estos puntos para que caractersticamente favorezcan la divisin de las clulas? Bsicamente la produccin de cierto tipo de protenas que por su naturaleza de producirse lgicamente en ese momento, y despus no volverse a producir, se conocen con el nombre de CICLINAS. Esas ciclinas son particulares para final de G1 y G2, pero en general actan de la misma manera. Lo primero que va a ocurrir es que si el ciclo celular es una serie ordenada de acontecimientos para llevar a la divisin celular y que nosotros vamos a producir 2

clulas hijas, ( 4 dependiendo de donde estemos) entonces recuerden que para poder entrar a la fase S tiene que haber una estimulacin por parte de la produccin de ciertas protenas que seran las activadas. Vamos a mirar qu es lo que hacen esas protenas activadas Otra cosa importante es que cuando nosotros establecemos el control del ciclo celular, bsicamente es porque definimos en qu momento la clula se divida, inclusive hablamos de que podra haber clulas las cuales entraban en una etapa de quiescencia, G0, en la que G1 se volvia prcticamente la vida completa de la clula, que dura muchsimo tiempo sin dividirse; y esa situacin estaba mediada por la no produccin de esas protenas de tipo ciclinas. Los 2 eventos ms importantes dentro del ciclo celular son: la replicacin (pq implica que salimos de G1 para pasar a S, y dijimos que cuando eso ocurra ya no podemos devolvernos en el proceso de divisin celular) y la segunda es la reparticin de los cromosomas, porque de eso depender de que las clulas hijas en realidad sean correctas y no tengan alteraciones. Otra cosa importante es que las llamadas ciclinas, se consideran del grupo de unas protenas de tipo Protein-kinasa. Qu hacen? Fosforilar sustratos, esa es la principal funcin de las ciclinas; y caractersticamente son protenas heterodimricas porque seran de ese grupo que uds conocieron como

de clasificacin en el cuarto nivel que seran protenas oligomricas, que en realidad acomplan varias subunidades para cumplir su funcin. Entonces por una de las subunidades puede hacer la funcin de kinasa, por otra puede pegar especficamente el grupo fosfato y de esa manera activar a una protena. Entonces cualquier ciclina siempre tiene por lo menos 2 tipos de subunidades, puede tener ms pero las mnimas son esas dos: Una conocida como subunidad metiladora, que es la que en realidad funciona como ciclina Una segunda subunidad catalizadora, osea que hace funciones de enzima que es la que en realidad trabaja como una kinasa; pero esa kinasa es dependiente de la ciclina. Primero se producen los niveles de esta subunidad reguladora y cuando ya sea activa, viene y se pega en la subunidad catalizadora y empieza a trabajar como una protena fosforilada. Que hacen? Desencadenar una cascada de fosforilacion mediante la cual, regulan todas las protenas que estn implicadas tanto en la replicacin que seran el primer grupo por ciclinas que se activara, al terminar de G1. Como las que se van a activar al final de G2 que van a permitir la divisin celular.

Mediante fosforilacion van a regular en sitios especficos la actividad, haciendo que de esa manera se pueda establecer el paso a la divisin. Entonces cuales son las vas que vamos a revisar? Que son de descubrimiento reciente, pq en el 80 se saba ya que exista una caractersticas de definir que la neoplasia era bsicamente una alteracin de tipo gentico. Pero en realidad se conoca como una nica va, que haba una inestablidad gentica con repercusin en los cromosomas. Y partir del 93 se descubri que podan existir otras formas de inestabilidad, que ya no afectaran a los cromosomas sino que afectaran a algunos genes que especficamente producen enzimas y entonces podran llegar a generar malignidad. La caracterstica especial es que esta va como inicia de una manera ms sultil, primero nos permite observar los defectos de la clula a partir de secuencias normales que alteran su tamao. De esta forma podramos tratar de hacer un diagnstico precoz, entonces en estos tipos de cnceres se puede dar una herramienta a esas familias para poder revisar desde un inicio como esta la estabilidad de su genoma y a partir de all adelantarnos a hacer un diagnstico. Va supresora tambin encontrada como la va de inestabilidad cromosmica, y esta inestabilidad de tipo cromosmico tiene la particularidad que involucra a 2 de los 3 grupos de genes: los protoncogenes, los genes supresores del tumor.

Entonces los dos primeros son los que van a desestabilizar pero los que van a cambiar cuando tenemos esta primera via de aparicin de cncer. Y los genes que generan la estabilidad, que van a modificar a las distintas molculas productoras de la reparacin, van a ser los responsables de la va mutadora o va de la inestabilidad microsatlite. La forma como actan es distinta, y cualquiera de los 3 grupos de genes alterados influyen sobre el ciclo celular y bsicamente pq inicio del cncer implica que los genes alterados produzcan finalmente cambios en el ciclo celular. VIA SUPRESORA Entonces el primer punto va a ser cuando afectamos este proceso de paso de G1 hacia G2. Quines son los genes que normalmente trabajan aqu? Los que estn colaborando a las ciclinas quienes estn involucradas dentro de este grupo de genes. Entonces aqu trabajan los genes supresores de tumor y los protooncogenes Va supresora. Caractersticas. 1. Tambin llamada via de inestabilidad cromosmica 2. Deben haber varias mutaciones, y esas mutaciones pueden hacer cualquiera de las 2 cosas: inactivar a los genes supresores del tumor (cuando estos genes estn implicados en cncer lo

que estamos haciendo es apagndolos, impidiendo su expresin normal pq en condiciones normales su funcin es frenar al ciclo celular) y entonces es como si no existieran los genes con lo que se favorece la divisin celular y el crecimiento El segundo punto donde pueden llegar a actuar es que ahora se activen protooncogenes, entonces ahora la funcin aqu es al contrario, pq los protooncogenes se expresaban de una manera muy baja, cuando hay la mutacin, se dice que ya pasan de ser proto a expresarse como oncogenes y lo que van a hacer es incrementar la tasa de divisin. En todos los cnceres tanto los genes supresores de tumor como los protooncogenes terminan alterados, pero puede ser que primero arranque la mutacin a alterar los genes supresores y luego los protooncogenes o viceversa. Y como los dos estn trabajando para la estabilidad celular, se va a ver reflejado en que la celula pierda su regulacin. 3. Hay una marcada diferencias en el patrn carcterstico cromosmico, entonces va a encontrar mltiples rearreglos como por ejemplo,

anhiploidias, delecciones o inserciones; y adems va a ocurrir la prdida de la heterocigocidad, que es bsicamente que nosotros tenamos dos copias, una buena y una alterada y entonces cuando se altera la segunda copia, se pierde el ser heterocigtico aparece el fenotipo. Esto era la razn por la cual la segunda va nisiquiera se haba descubierto pq entre el 80-85% de todos los cnceres que tenemos se producen por esta va (supresora) y entonces ese pequeo grupo que es el mmino se produce por la va mutadora, hasta hace menos de 10 aos no se conoca como un grupo diferente de cncer. Vamos a ver que por ejemplo el cncer de coln es el que utilizaba esa otra va alterna. 4. Responde muy mal al tratamiento, entre otras cosas, se descubre muy tradamente y pues eso dificulta el pronstico en el paciente, entonces la expectativa de vida es bastante reducida.

PROTOONCOGENES Genes que de manera normal se estn expresando en una clula, ellos van a trabajar colaborando en la codificacin de qupara que se expresen protenas que trabajan a nivel nuclear, citoplasmtico, protenas que pueden expresarse como antgenos a nivel de la membrana y bsicamente todas guardan una relacin y es que intervienen en la Homestasis. Cuando nosotros tenemos los protooncogenes expresados ellos estn protegiendo por el crecimiento celular y simultneamente los genes supresores estn actuando para que ese crecimiento no se exacerbe y entonces entre ese tira y empuje de que uno favorece y el otro inhibiendo ah es donde se mantiene lo que llamaramos la regulacin para una clula sana. Por lo que podramos decir que de esa manera por eso su expresin a nivel celular va a estar estrictamente controlada. Algunos tienen algunos ejemplos de esos protooncogenes que nombramos, que se pueden estar estudiando. Los mas estudiados y que mas se alteran en cualquier tipo de cncer son stos: K-ras: molcula traductora de seales. Las ciclinas y la CD2 y 4 que son un tipo de ciclinas, pertenecen este grupo de protooncogenes, entonces si ellas alteran se favorece la divisin celular porque se inhibe su regulacin.

 C. MYC c-erbB. Otro prototipo de protooncogen. Cuando un protooncogen se convierte en un oncogen? Sera ese protooncogen que se convierte en un gen anormal pq se activa de una manera desenfrenada, aparece una sobreexpresin de gen. Caracteristicas: va a permitir que se exacerbe la presin hacia el lado del crecimiento celular y hace que la clula se transforme y se desarrolle un determinado tipo de cncer que depender de dnde est ubicado. Si vamos a definir como actu el oncogen: 1) aparece de la activacin exacerbada de un protooncogen y eso se debe a que haya una acumulacin de mutaciones en ellos y que me generen la inactivacin de la estructura normal y la activacin de la alterada. 2) La clula solo se maligniza cuando recibe la mutacin de muchos protooncogenes para convertirlos en oncogenes, no uno solo. Estos oncogenes que siempre estn alterados en esta va, no son los nicos que responden a que la clula se malignice pq otra de las caractersticas que se ha observado es que la rta inmune del paciente no participa, pq parte de las cell que van a ver uds dentro de los organismos son las llamadas natural Killer que deben trabajar reconociendo cell transformadas para destruirlas y generar fenmenos de apoptosis dentro de ellas; pero si nuestro sistema inmune no trabaja correctamente pues no va a ocurrir que se

Muchos de ellos funcionan como factores de transcripcin, reguladores y la expresin gnica y otros funcionan como traductores de seales y por esa razn la clula empieza a reconocer ms receptores de membrana y a alterarse de una manera adicional.

destruyan esas cell y por lo tanto los oncogenes que all se manifiestan van a permitir que el grupo crezca y a partir de lo que expresamos que era la teora clonal, se multiplique y genere nuevas cell. Entonces de qu manera el protooncogen se convierte en oncogen? Hay 3 modelos de cambios que pueden ocurrir: Mutaciones puntuales, que solo cambiemos un solo nucletido, pero presisamente en la regin codificante y eso va a hacer que ahora la protena sea muy activa mutaciones en los sitios promotores y regiones de control del gen. Entonces se tienen que regular de una manera permanente. Mecanismo de amplificacin gentica/gnica (al ser de nivel molecular), que quiere decir que tenamos una sola regin, un solo segmento para el protooncogen y l se multiplica a 2-3-4 tamaos, y si ahora tengo varias veces el mismo gen, pues si ese gen se expresa me va a dar muchas mas copias de esta regin. Translocaciones: especialmente en la leucemias. Si recuerdan las translocaciones tiene la particularidad de

que perdemos un segmento de un cromosoma para que se vaya a otro no pq se vaya a perder sino que cambia de ubicacin NO A UN CROMOSOMA HOMLOGO sino a un cromosoma de otro grupo y entonces puede ocurrir una translocacin no recproca o una recproca donde se intercambian los 2 segmentos pero como son cromosomas no homlogos producen anormalidad.

Entonces que ocurre que si por aqu aparece el pedazo que nosotros cortamos para translocarlo a otro lugar, y precisamente tena una regin promotor que aterriza donde haba una protena y va a funcionar como un mecanismo para la expresin de ese gen y la protena

se va a aumentar y por eso aparece ah que hay una sobreexpresin de la protena. Aqu esta expuesto el primer caso que seria una mutacion a nivel de una base nitrogenada (sustacion) en el AND de un gen especfico que va a producir un aminocido y que entonces va a provocar cambios a nivel de la estructura sintetizada por el gen y por lo tanto una mutacin. Aqu se ve el ADN cadena normal.

Cualquiera de esos eventos finalmente lleva a que se cambie algunos de los aminocidos de la protenas y que ese a.a fuese importante dentro de su funcin pq produzca cambios conformacionales entonces la protena empieza a trabajar de manera diferente. (Nuevamente explica el mecanismo de translocacion) Ej: leucemia mieloide crnica que es muy comn q se produzca por un translocacin entre el cromosoma 9 y el 22, que no tiene que ver con el tamao. La porcin distal del cromosoma 9 se rompe donde hay un gen llamado abl, y ese gen viene y se fusiona a un punto mediano del brazo largo del cromosoma 22 y entonces queda la fusin y entonces queda el bcr/abl. Logicamente la translocacion en realidad no es recproca pq mucha ms cantidad del 22 se le regala al 9 y el 9 regala ms poco al 22. Cromosoma 9 mucho mas largo del que yo tenia y uno 22 mas pequeollamado comnmente cromosoma Philadelphia, y es de buen pronstico para el paciente, para su tratamiento cuando se realiza mitosis en un paciente con leucemia y es de psimo pronstico que no se encuentre ya que significa que queda tan

Luego se ve una base cualquiera que estamos cambiando AC

Aqu el otro fenmeno que en vez de cambiar se rearregle insericn.

Y el otro que tendramos que es la supresin

pequeito el 22 y en sucesivas divisiones en esa leucemia, tiende a desaparecer, luego el paciente queda prcticamente sin un cromosoma 22. (Cromosoma Philadelphia negativo)

Por qu razn es q cuando se hace la translocacin a travs del cncer como tal, se activa la leucemia? Porque en el punto de ruptura, a donde vamos a llegar, el gen abl precisamente aterriza en el punto donde tenamos el bcr y funciona entonces como un activador lo que hace q finalmente aparezca una protena fusionada entre el abl y el bcr y esa protena se sobreexpresa e incrementa la lnea blanca. como actuan esos oncogenes que pasaron de proto a onco y por qu es que estn fallando?

Miren uno de los posibles puntos de accin: funcionen como factores de crecimiento la gran mayora, otros funcionan como receptores de los factores de crecimiento otros como pptidos de sealizacin intracelular (llevan seales al ncleo para que se active la expresin gnica) otros como protenas de tipo nuclear. Esos son bsicamente los 4 frentes en los cuales los oncogenes trabajan. GENES SUPRESORES DE TUMOR El segundo grupo de genes que funcionan en este tipo de cncer.

Gen que de manera normal, reduce la probabilidad de que una cell de un organismo se transforme en una clula maligna. Estos genes se encuentran en clulas normales y cuando nosotros tenemos que la cell se maligniz es pq en general, este gen se inhibe y no va a trabajar y va a permitir que los oncogenes se expresen en mayor cantidad. NOTA: Los oncogenes en general se van a heredar o van a producir cncer en un mecanismo dominante, es decir, con q uno de los dos protooncogenes mute a oncogen es suficiente para que la persona desarrolle el patrn de clula transformada. En el caso de los genes supresores de tumor, como ellos estan funcionando normalmente deteniendo la divisin y adems son muy importantes como guardianes de la cell, su mecanismo de activacin implica que unicamente cuando tenemos las 2 copias daadas de ese gen supresor, es cuando en realidad la cell no obedece seales y se va a transforma, mecanismo de herencia recesivo. Es caractersticos que cuando nosotros tenemos la mutacin o deleccion de ambos alelos para ese gen supresor de tumor, se aumenta la probabilidad de que vaya a producir el tumor, este va a perder su funcion y va a favorecer el crecimiento. CONTINUACION Uno de los genes supresores de tumores mas importante que tiene la clula es la llamada protena

Factor de Transcripcin. Que bsicamente es la que trabaja en todas las clulas para inflar la multiplicacin. Donde se codifica este gen? -En el cromosoma 17 especficamente en la banda 13 del brazo corto y sus funciones son: 1. FACTOR DE TRANSCRIPCION DE PROTEINAS NUCLEARES: es decir, produce o induce o al contrario inhibe la expresin de protenas celulares, porque regula por eso se llama Factor de Transcripcin, regula la expresin de ese tipo de protenas. 2. APOPTOSIS: la protena producto de este gen se encuentra que hay muchas desatenciones en la clula entonces en vez de permitir que se divida lo que hace es que haga fenmeno apoptosico para evitar que se pueda transformar. 3. DURANTE EL CICLO CELULAR: Especficamente si dijimos que era el de la va supresora aqu en el paso de G1 hacia S. Que pasa entonces cuando nosotros tenemos el gen defectuoso (cromosoma 17, banda 13 del brazo corto) porque ha tenido mutaciones? Pues entonces las clulas anormales pueden proliferar los protooncogenes pueden trabajar a sus anchas porque no tienen quien los deprima y de esa manera se produce la transformacin.

Otro gen supresor de tumor es el famoso GAPT y entonces vamos a mirar como se desencadena el cuadro dentro de una celulita. Entonces cuando l esta presente como es un gen supresor de tumor que va hacer? Va ha permitir la codificacin de una protena que emite seales de diferenciacin o de apoptosis dependiendo si la clula esta alterada. Donde lo hace? Aqu al final de G1 antes de que entre hacia la divisin que seria cuando entramos a la fase S. Y que pasa cuando l esta ausente? Y que significa ausente? Que no se expresa por mutaciones que se ganaron entonces aparece la expresin inapropiada de oncogenes como el cenic (?) y este funciona como un factor de transcripcin que induce la expresin de muchos genes que van a facilitar el paso desde G1 hacia la fase S. Que ocurre en trminos de la celulita cuando esto pasa? Entonces miren que inicialmente tenemos una multiplicacin que es benigna, que es un tumor precanceroso y que cuando viene y se activan los oncogenes como producto de la inactivacin de ATP pues entonces originan la aparicin con esa activacin oncognica de lo que seria ya el tumo maligno. Si una de estas clulas de un plipos que seria el caso que estamos mirando a nivel de una celulita que va inicialmente a formar un plipo que no es canceroso

por eso se dice que no es precanceroso sufre una mutacin entonces esta se considera activadora Por qu? Porque inhibe los genes supresores y entonces el encogen va ha trabajar y va ha dividirse de tal manera que todas las clulas descendientes van hacer que se multipliquen y el adenoma pasa a una estructura de adenoma mucho mas grande. Ese el caso por ejemplo de lo plipos que se encuentran a nivel del colon cuando las personas tienden a desarrollar las adenosinas polipoquematosa. Que pasa a continuacin? Ocurre mutacin de otro de los genes supresores de tumor como por ejemplo P53 entonces aparece una mayor polucin incontrolada de la clula ya la celulitas empiezan a invadir la lamina basal ya se desiminan y se generan muchos mas vasos sanguneos y por ultimo por esos vasos se van y aparecen la proliferacin en sitios distantes que seria que ahora este plipo creci, lo que veamos microscpicamente es como aumenta por la parte superior y adems por dentro para atravesar la membrana basal, como se empieza a desarrollar nuevos vasos y finalmente como las celulitas por diapdesis cae en el interior de los vasos y apartir de all se van a formar lo que dijimos q era la metstasis. Entonces para definir este seria el escenario: Tenemos una celulita normal, en equilibrio. Y esta en equilibrio porque a la vez estn jugando 2 factores

que se estn expresando los protooncogenes que estn empujando para estimular la divisin pero a su vez estn hay los genes supresores frenando la divisin. Entonces entre los dos cada uno tirando para su lado esta manteniendo el control. Respuesta a una pregunta de un estudiante: que uno puede trabajar sobre ellos para que se expresen ms? Siempre ser as con cualquier gen que tengamos. Porque recuerden que el problema era para el gen expresarse o no tiene que ver con reconocimiento o no del sitio promotor y lo que hacemos en condiciones normales para regular negativamente la expresin de un gen es tapar el sitio promotor o tener secuencia o protenas reguladoras que por eso funcionan como factores de transcripcin que impiden que sea reconocido el gen pero que pasa si yo lo desbloqueo? Se poda llamar que tenemos un mecanismo induccin. O eso que dijimos que era multiplicacin, que multiplico las copias o que tiene pegada la DNA polimerasa en el sitio promotor y siga y siga y siga ;) produciendo RNA con carencia de ese gen. Y de hecho eso es lo que determina que tengamos diferenciacin celular o no, porque en ltimas todas las clulas tienen el mismo genoma pero porque unas son una cosa y otras son otra cosa, porque ellos tienen que ver con varios genes que estn regulados negativamente. Bueno entonces aqu estamos en la situacin normal. Que pasa en una celulita normal? Pues que despus

de varias y proliferaciones lo que va ha producir es que hace apoptosis normal. Que pasa si ganamos una primera mutacin en este protooncogen? Fjense que pasara hacer un protooncogen mas activado y dijimos que en ese caso entonces que? Pasara a llamar oncogn y entonces el gen supresor esta frenando pero aqu la presin para aumentar el crecimiento es mayor y entonces aparecen lo que llamaramos un tumor. Que pasa si hay mutacin en el gen supresor? Lo mismo el que frena no esta y este no es que este trabajando mucho pero nadie lo esta parando entonces finalmente aparece un tumor. Y en la realidad que pasa, que hay mutaciones aqu y hay mutaciones aqu, porque recuerden que reunimos 10, 20 o mas mutaciones y pues al final del cuento muchos genes tanto genes supresores como oncogenes van a estar mutados y a producir el tumor. La predisposicin gentica que yo ya nazco con el 50% del camino ganado porque tengo ya una mutacin. Un tumor benigno es diferente a uno maligno. El tumor benigno esta encapsulado, tiene un control, tiene una proliferacin celular pero no descontarla, halla no hay activacin o inactivacion de estos genes, no soy ellos los responsables es mas responsable por ejemplo una necesidad de tejido por multiplicarse pero

como esta suscrita a un control y esta definida por una capsula no es un tumor maligno. Este es el modelo para el cncer que siempre ser tumor maligno. Y entonces lo mismo dicho con los propios genes como tal, tenemos un epitelio normal, mataran por ejemplo inicialmente APC beta cadenina quienes son ellos? APC de cual grupo? APC que es un Gen supresor de tumor y la beta cadenina no lo he dicho pero es protooncogen. Mutaron 2 que aparece visto al microscopio? Un adenoma temprano Ocurre una siguiente mutacin en ? Que era de cual grupo? De los protooncogenes y entonces aparece un adenoma intermedio. Muta ST gen supresor de tumor, y aparece un adenoma tardo. Y finalmente que aguantaba era P53 y entonces gen supresor de tumor aparece entonces la clula transformada y aparir de all todas las otras que se van a desencadenar. Tendramos 5 genes implicados de los cuales 3 serian genes supresores 2 protooncogenes y realmente desarrollamos el cuadro de la transformacin. Nosotros podemos ganar desde que nacemos el favor de que nos hallan pasado una mutacin heredada en un gen supresor de tumor o en dos o en tres eso si yo

no se, por que eso depender de los antecesores mos. Y entonces vamos a nacer con eso que se llama una predisposicin a desarrollar cierto tipos de canceres. Que particularidad le da a la persona con predisposicin a cncer? Ese tipo de evento? -La primera que no le falta sino ganar la mutacin del otro alelo para que aparezca el problemita. -La segunda que por lo tanto en trminos va hacer mucho mas rpido como nosotros podemos terminar ganando esa mutacin que si fuera lo que fuera el cncer espordico. Por eso el patrn de cncer heredado se presenta mucho ms temprano en edad que aquellos que son espordicos. Y una de las cosas importantes es que lgicamente eso implica una mutacin en la lnea germinal para que esta me llegue a mi y en cambio yo voy a ganar es una mutacin que se gana de forma somtica, y ud cuando por exposicin del sol u otro mecanismo hace la otra mutacin. Por eso no todos los que nacen con una predisposicin al final tienen que nacer con cncer porque unos puedan que ganen la segunda mutacin somtica y otros pueda que no. Van a ver muchos factores que van a influir hay. Aqu pueden ver ustedes tengan una copiar heredada mutada y la otra esta sana y despus de manera adquirida me gano la segunda mutacin.

En general los oncogenes con una sola funcionan ms bajo un modelo Dominante.

copia Que ocurre cuando la persona presente este tipo y aparece la transformacin? Hay prdida de la heteregocidad, esto que quiere decir? Ya tenia un no gen mejor dicho no tenia un gen o lo tenia alterado y ahora acabo de alterar el segundo entonces ya no soy heterocigoto para la condicin sino que acabo de quedar homocigoto y hay aparecera la mutacin real para ese tipo de evento. Y el retinoblastoma entonces como lo digo ac es un prototipo de enfermedad de vida a la mutacin en un gen supresor de tumor en un tumor no tan frecuente que se origina en la retina de los lactantes tiene una prevalencia no tan grande de uno en 20.000 en recin nacidos y como ven aqu el 40% de los casos va ha tener un patrn heredado porque ya heredamos uno de los dos alelos alterados. Fjense nacemos as con una copia daada en la otra correcta y hay una mutacin somtica especficamente que inactiva al que estaba correcto pasamos de ser heterocigotos a ser homocigotos y lo mas importante si la mutacin aparece a nivel de la retina entonces el nio desarrollo retinoblastoma que bsicamente es un tumor pues que lo va ha dejar ciego. Entonces, eso era todo lo que se conoca en realidad sobre cncer y oncognesis a partir de la gentica

Y un ejemplo de este tipo de carcinomas heredados es el que va ha permitir que el RNB que se llama gen productor de una protena que se llama el retinoblastoma que es un gen que funciona como una protena supresora de tumor, pues va poder permitir la aparicin de varios tipos de canceres cuando nosotros tenemos ese tipo de gen apagado o mutado. Que caracterstica va ha codificar el? De manera normal impide el crecimiento celular excesivo por inhibicin en la proliferacin de estigma celular. Este RNB en el caso de nosotros los humanos esta codificando para una protena que se llama protena del retinoblastoma y su gen esta ubicado aqu en el cromosoma 13 especficamente en el brazo largo en la banda Q de las sub-bandas 1 y 2. Y entonces aqu pueden observar en el modelito como ese cromosoma 13 puede eventualmente en este lugar que por tener un gen lo ven en blanco, porque hace referencia que son zonas de eucromatina y entonces se pierde y tenemos el gen con rayita negativa que quiere decir que no tengo hay el alelo en cambio aqu si tengo el alelo. Esto de paso me sirve que seria para decirles llamamos heteregocidad. El individuo tiene un gen o una alelo bueno en un cromosoma y en el otro lo tiene mutado.

hasta hace unos ms o menos (No se le escucha lo que dice). Despus se empez a ver por estudios que hizo el Dr. Ruiz que existan algunos canceres que no obedecan a ese mismo patrn; que cuando les buscaban las alteraciones a nivel de la clula transformada los genes en realidad no estaban todos alterados y no se haba llevado el proceso de la misma manera. Entonces apareci el anlisis o el estudio de que haban otras cosas que podan cambiar en otros tipos de cncer y esas cosas eran en realidad: las protenas que trabajaban haciendo la correccin de los errores de la replicacin aqu en la etapa G1 y que entonces ellas cuando estuvieran mutadas pues iban a trabajar a media marcha o no iban a trabajar, no iban a corregir los errores que de manera natural se haban producido durante la replicacin y que iba a tener una particularidad como esta; ojo con lo que digo: al final de todo, cuando terminamos tambin este modelo ha hecho la inactivacin de genes supresores y la activacin de oncogenes pero eso en este modelo llega de manera tarida porque en realidad lo primero que ocurre es que las protenas reparadoras no reparan o reparan a medias y si vamos a pensar que es lo que ellas tiene que reparar, resulta que de manera normal y es lo que se ha demostrado, dentro de un mismo cromosoma cuando se empieza a dar la transcripcin, la replicacin que es la sntesis de la nueva cadena la DNA polimerasa va un poco mas despacio, estoy hablando del numero de nucletidos por un segundo, pero supongamos que fueron 1000

nucletidos por segundo si no hay un gen; Primera razn: porque las zonas de eucromatina se cuidan mucho mas que las de heterocromatina y segunda razn porque en las areas de los genes las secuencias van a cambiar bastante una seguida de la otra entonces aqu hay guanina, luego citosina luego timina pero es ms lento el proceso pero mientras que en las regiones de ADN altamente repetidas yo les deca que tenemos este puente que tiene eventos repetidos entonces en esa zona la polimerasa primero va mas rpido y segundo fcilmente se equivoca. Entonces surge una caracterstica que se llama fenmeno de deslizamiento de la polimerasa en el que o pone ms o quita algunos porque tartamudea a la hora de hacer lo mismo, los mismo, lo mismo una y otra vez entonces de pronto se le van 51, se le van 52 o quedan 49. Y Quin es la que tiene que hacer el favor de decirle no mire eran 50 y se le fue una de mas o le faltaron?, las protenas que tiene que revisar en G2 que dijimos que para eso estaba G2, para revisar, revisar y volver a revisar. Pero qu pasa si una protena que revisa esta mutada?, pues lo que va a ocurrir es que van a empezar a quedar errores en esas regiones que bsicamente se van a notar primero que cambios en cualquier otro lugar porque son las regiones que mas probablemente primero mutaran y lo haran porque

en realidad no comprometen la vida de la clula y segundo, porque al ser altamente repetidas van a favorecer el hecho de que la DNA polimerasa se equivoque. Y entonces este modelo de aparicin de cncer tiene como caractersticas: 1. Que se llama va mutadora o va de inestabilidad de micro-satlites entonces aqu est implicado por eso deca yo, los genes de estabilidad de la clula. 2. Se alteran los genes que estn implicados especficamente en las protenas de tipo ADN polimerasa que cumplen el papel de reparacin de errores posteriores a la replicacin. Por eso se llaman protenas REM porque eso hacen reparar errores despus de que se ha dado la replicacin. Y como yo les deca que la va supresora responda entre el 80 y el 85% de los canceres pues los que quedan faltando estarn aqu: son responsables ms o menos del 15 o 20% de los canceres que se pueden producir. Y entonces pues estn mucho mas tipificados: tienen que ver mucho mas con cncer de colon, cncer de vejiga, cncer de vescula estos son los canceres que mas comnmente se pueden desarrollar por esta va. Y una cosa buena es que cuando esta es la va que ha permitido el desarrollo del cncer es una va menos

agresiva y por lo tanto de mejor respuesta al tratamiento y eso hace entonces que la sobrevida y que la probabilidad de que el paciente se cure del cncer sea mucho mejor o por lo menos mucho ms probable y entonces pues en ultimas si le da a uno el cncer ojala fuera por esta va y no por la otra. Bueno, entonces aqu ven el complejo de enzimas. Fjense que tenemos el ADN de doble cadena y aqu vemos a las protenas haciendo la funcin de revisar, despus de revisar cortan y vuelven y polimerizan lo que es correcto. Se acuerdan lo que les ensee, que en la va de reparacin haba un mecanismo de escisin general y que entonces las enzimas reparadoras posteriores a la replicacin actan como exonucleasas inicialmente porque encuentran el dao y lo cortan y luego como protenas polimerasas colocando lo que deban poner y luego la ligasa. Cules son los genes que van a permitir la sntesis de esas protenas?, aqu tienen algunos miren: el MUT-S, el MSH6, el MSH2, MSH1, el MNH1 y el PMS2 pero ya los vamos a ver all ahorita en un listadito. Aqu un ejemplo de cmo tenemos el ADN, de cmo esas enzimas revisadoras pasan revisando y encuentran algo que no cuadra, entonces vienen y escinden, despus de escindir colocan lo que es correcto aqu; corrigen el pedazo y para poderlo corregir sacan lo que no era, polimerizan todo y

finalmente la ligasa (no se le entiende bien) eso cuando lo estn haciendo?, lo estn haciendo en G2 porque es despus de que se ha replicado. Y qu pasa entonces si tenemos regiones donde tenemos un gen, pero se acuerdan que en su interior los genes tienen exones y otras regiones que no codifican que se llaman intrones?, pues en esos intrones tambin pueden haber estas regiones repetidas que comnmente se conocen como regiones microsatelites; que yo les haba dicho que se llamaban STR (short tndem repeat) Por qu pequeitas?, porque tienen entre 1 y 7 pares de bases y van a estar en regiones donde haya genes como en regiones intronicas de los genes. Como les dije que tienen una estructura repetitiva eso hace que se favorezca que la enzima cometa errores a la hora de polimerizar esas regiones y como las otras no estn corrigiendo pues ese sera el primer punto o primer probable sitio donde se empiezan a quedar las mutaciones; en esas regiones altamente repetidas. De ese 20% del cncer que se asocia con esta va a su produccin, ms o menos el 15% se produce para tumores espordicos y el 85% de los canceres que se producen por esta va son para canceres heredados sea, estaramos hablando del 17% de los casos. Y cules son entonces en el caso especifico de este que sera entonces el cncer de colon no poliposico

heredado que tambin de llama sndrome de Lynch en honor al Dr. Lynch que lo describi cuales son all especficamente los genes que se alteras?, miren estos 5 genes que son todos genes productores de enzimas reparadoras posteriores a la replicacin. Y entonces cuando uno de ellos o todos se alteran aparece el problema. Aqu tenemos un cromosoma, aqu tenemos el epitelio normal, ganamos mutaciones o perdidas de algunas regiones como la del cromosoma 5 en la regin Q y entonces aparece un epitelio que va a tener hipertrofia, despus hay hipometilacion (no se entiende bien esta palabra) de esa zona, se aparece un adenoma precoz despus aparecen fjense, mutaciones en garra (esta tampoco) y aparece el adenoma intermedio en DCC y puede aparecer el adenoma ms avanzado y perder 53 y aparece el carcinoma y gano el cncer. Entonces ojo al final del cuento tambin la desestabilizacin del genoma porque se dejan errores termina generando mutaciones en los oncogenes y en los genes supresores de tumor pero all seria al final de la va primero tenemos todo este periodo en el que los cambios se van a ver reflejados sobre todo en las secuencias microsatelites y que por lo tanto nos favorecen los diagnsticos precoces. Y entonces en el mismo modelo que miramos ahorita para el otro caso como seria la cosa?, entonces aqu

tenemos el epitelio normal, hay mutacin en ellos el MNH1, MNH2 y el PMS1 y PMS2, que son todos genes que producen enzimas (ADN polimerasas que trabajan en la reparacin de los errores de la replicacin). Entonces aparece el fenotipo impermutable que es que la celulita va a empezar a ganar mutaciones y se mutan luego otro tipo de genes que tambin trabajan precisamente en la correccin de errores posteriores a la replicacin y aparece lo que se llama el fenotipo con error posterior a la replicacin y aqu no se ha mencionado pero por ac aparecen mutaciones de oncogenes y de genes supresores y finalmente desencadenamos en el cncer. Y para que vean el ejemplito de cmo se da el cambio entonces aqu tenemos un gen que es el que codifica la protena polimerasa MSH2. Aqu ven toda la secuencia del gen y vean que por aqu hay una zonita que les est mostrando que tiene un sitio que seria una regin de un intron y tiene caractersticamente una secuencia de 26 adeninas porque dijimos que eran regiones que tenan una misma repeticin entre 1 y 7 nucletidos. Esta regin de 26 repeticiones se conoce con el nombre de balter rugel (o eso parece jajaja) y como este est ubicado dentro de este gen entonces fjense que aqu les dicen que es un STR de una nica repeticin que est ubicado en el brazo corto del cromosoma 2 y en realidad dentro del gen que es el de la enzima especficamente en su intron 5.

Qu va a pasar con esa regin?, uno la puede analizar en el laboratorio y lo que debera encontrar es que compara por ejemplo la muestra tomada de sangre corriente o de un raspado bucal y all cuenta el nmero de repeticiones que la persona tiene y luego va y las ubica en el tramo de la biopsia y cuenta cuantas repeticiones hay. Si los dos modelos no coinciden estamos hablando que algo le est pasando a la estabilidad de la clula de la biopsia. Si uno quiere para mayor seguridad toma varias muestras de los tejidos normales y puede concluir si eso en realidad es as o no. Qu caracterstica importante tiene este marcador?, miren que tan bueno para trabajar en el laboratorio, el 95% de especificidad. Qu quiere decir?, que cuando yo encuentro que las secuencias no son iguales en los dos tejidos puedo tener la seguridad que esa clula est haciendo inestabilidad y ah nos va a aparecer cncer. Y podra ocurrir si no necesariamente que eso est hablando es de la sensibilidad que todas las personas que vayan a tener cncer tengan el MAP-26 alterado; Eso s podra ser que no, pero lo que s podra yo estar segura es que cuando lo encuentre alterado es porque ah tenemos una inestabilidad. Y entonces aqu ven marcadores STRs especficos para detectar precisamente cambios en genes selectivos: aqu el primero que vimos el MAP-26 como es una secuencia solo de adeninas, est dentro de un intron

de este gen que codifica para una de las polimerasas y su tamao normal es de 116 repeticiones. Cuando analizamos P53, especficamente nos ubicamos en su gen, dentro de uno de los intrones tiene este STR C175261 es un di nucletido y su tamao normal es de 128, y as con otras regiones de los otros genes que codifican para las protenas, de STR especifico asociado a ellas, las secuencias que tienen y los tamaos que esperaramos. Entonces cuando encontremos en el tejido que esos tamaos variaron sea porque se aumentaron o se disminuyeron podemos saber que estamos delante de una inestabilidad. En realidad el protocolo que se maneja mas es el de analizar todos a la vez, sea me voy y analizo los cinco porque es que mejor quedar tranquilo que estamos analizando varias regiones del genoma y si ha habido inestabilidad al menos alguna de ellas la vamos a encontrar alterada y obviamente entre ms temprano haya aparecido la inestabilidad pues vamos posiblemente a encontrar alterados todos. Y entonces eso como se ve en el laboratorio?, se ve as: cuando el patrn es normal nosotros encontramos solo un pico o un punto de electroferograma con un tamao que dijimos que sera de 116 y cuando tenemos una clula tumoral, aqu lo ven, expresa unas celulitas con el patrn de 116 y aqu ven que

empiezan a aparecer clulas que tienen un patrn de 105 repeticiones indicando que se perdieron 11 repeticiones y que por lo tanto esta es una prueba positiva para MAP-26(o BAT-26) y el paciente por supuesto probablemente est haciendo una primera etapa. Este resultado que estoy mostrando es de pacienticos que ya tienen diagnostico de cncer porque pues para estandarizar la tcnica idealmente uno debe trabajar con pacientes que sepa que en realidad tienen el problema y esto, especficamente de un nio casi que puedo decir un campesinito de 14 aos de edad con cncer de colon pues heredado porque a los catorce aos para tener un cncer es que probablemente es de la lnea heredad y habamos dicho que dentro de la lnea heredad casi que el 90% estn originados por esta va y ah lo podemos ver expresado como su inestabilidad en un paciente que definitivamente seria de cncer heredado producido por la lnea de estas clulas. Aqu lo ven en otro paciente, que tiene ya prcticamente 50% clulas normales de clulas con inestabilidad; en este caso bajaron a 108 repeticiones; este si es una seora como de 58 aos que probablemente tiene esta la va la formacin del cncer pero ya cncer espordico no cncer heredado. Y aqu como se ven los geles; las modificaciones en los tamaos cuando hay inestabilidad aqu un molde 2S71

y en el tejido normal nicamente dos tamaos y miren en un tumor y en otro, por lo menos cuatro bandas de tamaos diferentes, aqu cinco. Cuntas bandas haya?, eso pueden ser muchas depender de cuantos errores tenga la polimerasa dentro de las clulas del paciente. Entonces, aparecern ms cantidades de tamaos variados porque es que el problema es que no estamos corrigiendo y entre mas se divida pues peor porque ms errores nos van a quedar. Y aqu pueden ver como se observa la diferencia entre la va supresora en la que miren: en el tumor hay muchas celulitas que ya no expresan el segundo alelo y a eso era lo que le llambamos la perdida de la heterocigocidad y como si la va es la mutadora lo que tenemos es en el tejido normal una sola banda y en el tumor mltiples bandas. Aqu lo ven tejido normal mximo con dos bandas y en el tumor miren cuantas bandas, ocho bandas en las regiones de los dinucleotidos. Bueno entonces para terminar, desde a final del ao 90 ya sabemos que no hay una sola va de produccin de cncer sino que hay dos. Esto trajo hasta el incremento de la utilizacin de herramientas sobre todo de biologa molecular que nos permiten ir especficamente a las regiones de los genes y mirar cmo funcionan. A esto se le ha sacado mucho jugo porque entonces ahora las pruebas moleculares

ayudan al diagnostico y sirven para el pronstico y para el monitoreo de muchos de los canceres. Importantsimo mirar cuan tas mutaciones mas pueden estar implicadas en la aparicin de este problema para ver si logramos detectar muy claramente patrones que se alteren en los cnceres heredados de aquellos que sean canceres adquiridos y en esa medida poder hablar de genes de susceptibilidad que nos permitan a futuro decir: mire cuando este gen se altere OJO porque va a aparecer el proceso maligno. Hasta ahora solo tenemos las secuencias microsatelites como primer avance para hablar de los canceres heredados pero si aparecen por la va mutadora mientras que si son por la va supresora que son la mayora de canceres todava no tenemos esa posibilidad de herramienta. Importantsimo de acuerdo con la va gentica que est implicada en el desarrollo del tumor pues ah patrones distintos porque dijimos que la va supresora era mucho ms agresiva y la mutadora de mejor pronostico entonces vamos a tener que el pronstico y la evolucin de la enfermedad va a cambiar y en realidad hasta cambia el abordaje del tratamiento porque dependiendo de ello se orienta ms hacia una va o hacia otra dependiendo precisamente de cul fue el origen de ese cncer. Y cuando tenemos cancere que han sido originados por la va mutadora entonces tenemos como caracterstica que hay una

predisposicin heredada porque en general vamos a ver que se pueden tener patrones de herencia en pacientes muy jvenes que vamos a tener un estadio tumoral bajo y que adems tenemos un pronstico bastante favorable para el paciente mientras que si la va es la supresora pues en general son mucho ms agresivos y por esta razn aqu es donde vendramos a apuntar esos marcadores que todava no los hay en el laboratorio para adelantarnos a la deteccin cuando el cncer ya esta prcticamente instalado. Entonces que quede claro que genticamente hablando tenemos tres posible tipos de genes implicados; dos de ellos van a permitir la produccin de la va supresora y un tipo va a producir la produccin de la va mutadora que el pronstico y lo que le va de ah en adelante al paciente es diferente dependiendo de cual va gentica haya originado. Pero que al final del cuento vamos a tener que de todas maneras los genes que llamamos protooncogenes y los genes supresores de tumor se terminan alterando y son ellos los que al regular el ciclo celular van a desregularlo y van a permitir la proliferacin sin parar.

rta a mltiples eventos como crecimiento, produccin de sustancias, degradacin carbohidratos, protenas, etc.. Las hormonas son producto de las glndulas, esas glndulas tiene diferentes clasificaciones dependiendo de la forma en como produce la hormona pero que bsicamente tiene la particularidad de que reconocen lo que se conoce como rganos blanco- sern aquellos que tenga receptores para ser reconocidos por ese tipo de hormonas-. La funcin hormonal se puede detectar de esta estructura externa que se conoce como membrana celular, se reconoce como la estructura formada por una capa bilipidica, pero esta formada por mltiples elementos: 1. Lpidos, en mltiples cantidades. 2. Lpidos complejos que se conjugan con otros componentes no lipidicos. 3. unir protenas a esa estructura y eso hace que mltiples puntos funciones como receptores

XIII CLASE (2H) TRANSDUCCION DE SEALES.

Posibles opciones que tiene la clula para captar las seales que le trae una molcula producida muchas veces a muchos kilmetros de distancia de su estructura como son las hormonas, otras veces hasta auto-producidas, otras veces producida por clulas muy cercanas. Este mecanismo de conoce como transduccin de seal por que prcticamente es una de las 4 funciones que una clula puede tener a partir de la disminucin de su membrana con respecto a la separacin de un entorno que es el medio exterior, la membrana puede eventualmente como su nombre lo dice transduccir una seal significa entender lo que a nivel de su estructura externa recibe para por la cara interna producir una serie de cambios que le vana permitir modificar bsicamente su metabolismo y su

Esto nos permite entender por que se pueden generar tantos segundos mensajeros para la

transduccin de la seal, esto tiene que ver con la composicin. En cuanto a las funciones de la membrana tenemos: Los componentes de la membrana celular son: 1. Una capa bilipidica, formada por fosfolipidos. 2. Protenas, la gran mayora estn ubicadas: *atravesando la membrana, que reciben el nombre de protenas transmembranales. *mirando la cara interna o externa que se llaman protenas perifricas. 3. Los carbohidratos que pueden ser molculas monomericas hasta oligosacaridos que vana determinar la complejidad de la membrana celular. 1. Asla el interior de la clula del resto, entonces le define su entorno. 2. Hace que todos los componentes que estn dentro puedan cumplir una funcin metablica, desarrollar unas funciones determinadas y de esa manera que se comporte como una clula que pertenece a una unidad ms grande que en ese orden de ideas seria primero el tejido. 3. Trae todas las seales del mundo exterior para permitir que la clula sufra procesos de estimulo y que modifique eventualmente como esta trabajando, dependiendo de lo que la seal le traiga.

En cuanto a la estructura mas la externa que se puede ver en si vienen siendo las partes polares de esos fosfolipidos, y en la cara interna estamos viendo los diacilgliceroles que son lo que vana a formar el resto de la estructura.

Por qu las estructuras que estn ubicadas en la membrana celular se mantiene unidas, como hacemos para que la membrana cumpla la doble funcin de mantener a la clula aislada del entorno y a la vez mantener la comunicacin con el mismo, por que unas molculas pasan y otras no?, pues tiene que ver con la siguientes cosas:

1. Con el tipo de enlace que se establece a nivel de la membrana: como es una capa bilipidica, las molculas estn prximas pero no unidas por enlaces covalentes, los enlaces que permiten esta comunicacin son de tipo no covalentes o enlaces dbiles: *enlaces tipo inico *Los presentes en el DNA: enlace puente d hidrogeno. *Las fuerzas de van der walls. Si quisiramos hacer una diferencia en cuanta es la energa que podemos concentrar en una de estos enlaces: (ver diapositiva)

En conclusin son enlaces dbiles pero permiten que la membrana sea semipermeable, y por lo tanto permita la comunicacin con el medio externo, pues tampoco membrana totalmente hermtica. nos servira una

Cuales son los componentes de las membranas de los eucariotas, son bsicamente 3: 1. Los lpidos polares- que se refiere a que estn combinados con una porciones que pueden ser hidrofilicas. 2. Unas protenas que pueden ser integrales o transmembranales y otras que pueden ser perifricas. 3. Solo circunscrito a las clulas eucariotas y es muy importante en la transduccin de seales, los derivados de los carbohidratos, tipo acido sialico acido neuraminico.

Enlace Covalente: 90Kcal para poder romperlo Enlace no covalente: en el agua *3Kcal los enlaces de tipo inico *1 Kcal los enlaces puente de hidrogeno. *0.1 Kcal los enlaces tipo fuerzas de van der walls.

1. Capa Fosfolipidica.

Es un fosfolipido que tiene una porcin de grupo fosfato que siempre mirara hacia afuera y dos unidades de ac. Grasos que miran hacia la parte interna.

unidad mas hidrfoba ser con respecto al agua. Al verlo como una estructura compacta tenemos que la cabeza es polar y la cola seria una estructura no polar. En cuanto los ac. Grasos que conforman la cola tiene la siguiente caracterstica: *una de las 2 es un ac. Graso saturado, lo que hace que la estructura sea lineal.

2. Las protenas Hay unas que atraviesan de manera total o parcial la membrana: P. integrales P. perifricas: que mediante interaccin con los lpidos, ya sea su ubicacin pr la cara externa o interna de la membrana, esta ubicacin depende de la funcin que vaya a ejercer. *El otro ac. Graso por lo menos tiene un enlace insaturado en posicin cis, este a su ves permite el plegamiento de la cola desde el enlace cis hacia delante, con este plegamiento lo que ocurre es que si viene una estructura alineada de manera paralela y viene otra que se mueve hacia otro lado, permite dejar un espacio cada vez que viene un fosfolipido, es esta caracterstica la que permite que la estructura no se congele, ni cristalice y mantenga ese movimiento hacia los lados que es lo que le permite ganar la semipermeabilidad y la fluidez de la membrana.

En cuanto los A los fosfolipidos tenemos:

*La estructura ms bsica que tenemos de los fosfolipidos, tiene un grupo fosfato y 2 cadenas de ac. Grasos, que ser antiptica-que por una de sus cara es polar e hidrofilica y por la otra es hidrfoba, pues entre mas unidades de carbono tengamos en una

Las 4 propiedades o caractersticas que le proveen los lpidos a la membrana celular son:

1. Empaquetamiento: por que si no fuera por el enlace cis, el empaquetamiento seria muy prximo, lo que hara a la membrana mas compacta. 2. Por el hecho de tener la estructuras separadas, puede tener un moviente en el plano lateral que le permite que las protenas tengan un movimiento de sorting para desplazarse dentro de la membrana, por que los ac.grasos al darle movimiento en el plano lateral a la estructura, permite que las protenas se puedan desplazar dentro de la misma. 3. Por ser hidrfobos, disminuyen la tensin superficial, haciendo que la estructura se separe ms de su entorno que es hidrofilico, y que disminuya la probabilidad de fusionarse a medida que la temperatura baje. 4. Como la tensin superficial esta disminuida, disminuye la probabilidad e congelamiento y por ende de cristalizacin, pues i esto pasa la estructura se puede partir, por lo que se necesita que esta barrera se mantenga para mantener la integridad celular.

Donde se encuentra el grupo fosfato, el mas pequeo que se encuentre es donde el grupo fosfato ya esta unido a un glicerol, entonces todos los fosfolipidos de la membrana tienen como base el glicerol-3-p, de esta molcula sus derivados recibieran el nombre de glicerofosfolipidos, este ser el lpido mas abundante de la membrana, pues a partir de por ejemplo empezar a modificar la estructura partir de los grupos alcohol del glicerol, vamos a pegar diferentes tipos de estructuras reemplazadas y de acuerdo con ella vamos a tener diferente lpidos complejos. Entonces: *1 grupo fosfatos y 2 posibles puntos de unin si tenemos al glicerol como alcohol. *En el caso de la esfingosina, tenemos otras estructuras reemplazadas y otros tipos de fosfolipidos.

A partir del glicerol-3-p-fosfolipido ms sencillo- voy a tener el acido fosfatidico - tengo el grupo fosfato y al glicerol que se han unidos 2 unidades de ac. Grasos que remplazan a los OH del glicerol-.

Porcin polar del fosfolipido:

A partir del ac. fosfatidico con sus grupo fosfato y 2 unidades de ac. Grasos voy a empezar a pegar sustituyente por la cabeza del grupo fosfato que en la membrana vana a quedar expuestas a la cara externa y por eso es que permiten los puntos de reconocimiento para la transduccin de la seal.

4. seria cardiolipina. 5. Podra darse que el fosfato ligue a un carbohidrato, el mas comunes el inocitol, que es una de los que se va a separar como 2 mensajero cundo se trae la seal hormonal.

1. Un posible sustituyente seria la etanolamina, que en conjunto seria la fosfatidiletanolamina que llamamos cefalina y se implica como uno de la 6 tipos mas importantes de fosfolipidos implicados en la enfermedades autoinmunes, ya que sus cambios conformacionales despiertan la rta por parte de paciente y genera la aparicin de anticuerpos que reconocen estructuras como estaos fosfolipidos.

Se ha comprobado que la serina, colina y etanolamina se comportan como molculas liberadoras por las fosfolipasas que pueden cumplir funcin de 2 mensajeros al igual que el fofatidilinocitolbifosfato.

Cuando mas compleja la estructura, podemos tener una estructura formada por 2 ac.fosfatidicos unidos por una porcin intermedia- el fosfato pega por el grupo central a un lado y une por el otro lado- es lo que se llama el difosfatidilglicerol llamado tambin cardiolipina

2. Otro derivado puede ser la colina- grupo fosfato y 2 unidades de ac. Grasos y como sustituyente por la cabeza del grupo fosfato la colina- llamada tambin lecitina. 3. otro sustituyente seria la serina, y se llamara fosfatidilserina.

Cuando tengo como alcohol a la ESFINGOSINA, puedo tener mltiples punto de unin por que tiene una cadena hidrocarbonada de 15 carbonos y con esos puntos de unin ligar diferentes derivados, estos son:

1. Ceramidas, es la cadena de 15c, que la 2 unidad va a ligar un ac. graso. Muy similar a la estructura del ac.fosfatidico solo que hay una cadena carbonada sola. En cuanto a tenderemos: los derivados de las ceramidas

1. que ahora se le agrega un sustituyente por el fosfato del C3 a la ceramida- cadena de 15C y con un ac.graso unido en la posicin C2-, este ser una colina se forma la unin fosfocolina, y todo en conjunto recibe le nombre de esfingomielina, comn en la clula nerviosa pues permite la conduccin nerviosa a travs del axn. 2. Una estructura mas compleja derivada de la seria una cerebrosido, tendra cadena de 15C, el ac.graso unido en el C2 y que reemplazara la colina en la misma posicin osea C3 por una molcula de galactosa o carbohidrato, que serian un tipo de fosfolipido complejo que teniendo a la esfingosina como alcohol pueden aadir como derivado inicialmente una molcula de 1 carbohidrato despus puedan ligar unidades de 7.8 y hasta 12 unidades sea oligosacaridos que le dan mas complejidad para formar finalmente el glucocaliz.

Los azucares que mas comnmente liguen estos cerebrosidos serian la galactosa y la glucosa, y a partir de ellas ligar molculas ms complejas, entonces inocitol, glucosa, galactosa, en general carbohidratos derivados de hexosas-6C-, derivados de estas unidades serian los gangliosidos, que serian los ms complejos de los fosfolipidos que se podran encontrar dentro de la membrana. Nota se unen directamente como estructura para ligar el oligosacarido y reemplazando al grupo fosfato

Un hecho importante de que ganemos por la parte distal del fosfolipido, mas unidades de azcar, es que esta al ser polares, hace que la cara externa de la membrana se comporte de manera mas hidrofilica, que se genere una polaridad diferente por la cara interna y externa de la membrana, favoreciendo reconocimiento de los distintos productos que van a venir como hormonas para estimular a la clula para producir una activacion. El tamaa del oligosacarido que se puede ligar vara de 3 a 20 unidades de azcar y en general todas son unidades iguales del azcar cuando forman el oligosacarido. A partir de esos oligosacaridos unidos se van a formar gangliosidos, lo que tienen a nivel de la

estructura del oligoscarido como sustituyente son los siguientes azucares: *N- acetil glucosamina: en la posc.2 prima una molc. De glucosa *Acido sialico, vinculado en la rta inmune y tambin acompaan a la toxinas bacterianas para ser reconocido por nuestras estructuras y as bloquear la activacin por unas seales tradas por las hormonas. *N- acetil glalactosamina.

mediana altura y otros a menor altura, lo que determinara cual es su funcin de reconociendo cuando llegue la hormona. Lo que es la unin de lpidos o protenas unidos a carbohidratos se conoce como glucocaliz, y es exclusiva de los mamferos, por que son los que le organizan en la cara externa estas estructuras de reconocimiento de manera organizada.

La funciones membrana:

de

los

glucolipidos

en

la

Nota: En el caso de la esfingosina puede llamarse fosforil-intermediario para pegar la ultima estructura- porque vincula a un grupo fosfato en el C3 para unir a la colina o al monosacarido, pero en el caso del oligosacarido no lo necesita por que se une directamente.

1. Protegen la membrana: por que funcionan como estructuras de reconocimiento que el en caso de autoinmunidad como se encuentre la disposicin de molcula propias o extraas para los derivados del ac.fosfatidico (arriba estn los 5). 2. Funcin de molculas aislantes: as disminuir la comunicacin interna con la externa. 3. Esos azucares que pueden ser reconocidos por ejemplo por las protenas que producen algunos mocroorganismo que funcionan como toxinas: tetano y clera.

Entonces en la membrana tendramos: derivados sencillos como los del acido fosfatidico, unidades en mayor cantidad 3-20 unidades de azucares-los oligosacaridos. En cuanto a su ubicacin podemos ver que hay unos que estarn mas arriba, otros a

Otro componente de la membrana seria el colesterol:

evita la deformacin de la membrana, pues mantiene su cohesin, no se explaye y en dado caos no se vaya a romper. 2. Impermeabilidad a ciertas molculas, que por ser pequeas u solubles en agua pueden eventualmente querer atravesar la membrana pues aunque esta sea semipermeable, la facilidad de las partculas pequeas de atravesarla es controlada por el colesterol. 3. Los cidos grasos con ayuda del colesterol evitan la cristalizacin delas cadenas carbonadas de los ac. grasos, y as evitaran que la membrana se partiera literalmente. Nota el colesterol aumenta la fluidez por que permite movimientos hacia arriba y abajo, evita la deformacin por que aumenta la cohesin entre cidos grasos y disminuye la permeabilidad de molculas pequeas.

Se organiza de una manera longitudinal, se pone a lo largo semejando a una cadena de ac. Graso dentro de la membrana. El grupo alcohol es el que se posiciona hacia la cara externa y toda la cadena de anillos y unidades e carbonos van al interior de la membrana. El colesterol al no estar unido a ningn componente tiene la libertad de moverse ya arriba o abajo, con esto contribuye a la fluidez de la membrana, que seria su funcin.

La proporcin de colesterol seria 1:1 con la de fosfolipidos, en la membrana celular, aunque este vara en la membrana de cada uno de los organelos. Sus funciones son:

Protenas en la membrana.

1. Protenas integrales o transmembranales. 1. Inmovilizar los grupos hidrocarbonado que tiene los fosfolipido pues se ubica entre estos, y as Se llaman as por que atraviesan la membrana, penetran la capa bilipidica, tener dominios que

atraviesen la capa bilipidica varias veces o una sola vez, o ni siquiera que la atraviesen si que tenga un domino externo que se ancle en la cara interna. Esto depende de la funcin de las mismas. Los dominios de califican como: *externos /intramembranales/internos Caractersticas: A. Son anfipaticas: pues los a.a que conforman los dominios externos son hidrofilicos, y los que forman los dominios intramembranales sern a.a hidrfobos, ya que as pueden penetrar a la membrana y son afn con el medio en el que se encuentran, y en el dominio interno encontramos a.a hidrofilicos, B. Al establecer este tipo de dominios diferencial, va a tener una organizacin en el espacio similar a los componentes de la membrana para poder atravesar esta estructura. C. Pueden dar una o mas vueltas atravesde la membrana de esta manera se clasifican en: *single pass: dominio membrana una sola vez externo y solo pasa la

*multi pass: dominio externo-atraviesa-dominio interno-atraviesa-dom.externo-etc.., un ejemplo es la proteinaG- tiene 7 dominio que atraviesan-

2. Protenas perifricas. Ubicadas por fuera o dentro de la capa, esta depender de la funcin que tengan. En cuanto a la forma en que se anclan y se mantiene si no estn vinculadas a la membrana, establece enlaces no covalente con algunas estructuras eje: parte polar de los fosfolipidos, o enlaces covalente con lpidos que estn en la membrana, y que de esta manera ella se encuentre o no anclada a la membrana, y esto depender de la funcin que cumpla, tambin pueden ligar residuos de carbohidratos. Caractersticas: A. La protena que esta en la cara externa, por un grupo fosfato reconoce vario tipos de carbohidrato, luego ese carbohidrato se pega al grupo fosfato del fosfolipido de membrana, generan puntos de contacto a partir de un carbohidrato que por una cara tiene la unin al grupo fosfato y por la otra el grupo fosfato del fosfolipido de membrana -caso de protena

perifrica para anclarse- y as sostenerse para nos ser eliminadas. B. Pueden llegara unirse directamente al ac. graso y desplazan la molcula polar, para permitir anclase a ellas, estos seria con a.a. hidrofilicos que pudieran unirse con esa porcin inicial del ac. graso y funcionaran como el mismo fosfolipido que tenamos, pero reemplazando el grupo fosfato y anclndose directamente al ac. graso.

5. Barreras selectivas que pueden reaccionar contra el ambiente. 6. Las protenas y fosfolipidos de membrana van a formar receptores especficos que responden a seales que emiten otras clulas de tipo glandular.

En general son: 1. Que puedan cumplir con la interaccin clula clula se generacin de uniones tipo celulares: desmosoma, formacin lamina basal, intercambio, etc.. 2. Transporte de sustancias de desde dentro hacia afuera o viceversa. 3. Transduccin de seales 4. Mantener el entorno de la clulas

FUNCIONES DE LA MEMBRANA: 1. Barrera de permeabilidad selectividad entre el interior y el exterior. 2. El citoplasma va a cumplir funciones especficas y mantener las condiciones homeostticas para que la clula funcione. 3. Permeabilidad selectiva mediada por las protenas que vana formar canales para el paso de elemento dependiendo de si estn cerrados o abiertos, selectividad paso de las molculas. 4. Formar estructuras tipo bomba que permite que contra concentracin entren o salgan molculas del interior de la clula.

Transduccin de seales.

Qu seale son las que transduce las clula?

Prcticamente las tradas por hormonales, pero estos se clasifican:

los

sistemas

su funcin prostaglandina, facto de crecimiento hormonal, epidrmico, crecimiento de colonias, crecimiento. Dependiendo de la naturaleza de la estructura:

* Hormonas reales 1. Hormonas peptidicas: son de naturaleza polares, mnimo 50 a.a- insulina(mas pequea), glucagon, latinizante, TRH, crecimientoProviene de una protena y por tanto son hidrosolubles 2. Hormonas aminoacidicas: derivan de a.a y son ms pequeas, son de naturaleza polar, aquellas que son hidrosolubles son derivadas de un a.a directo- A, NA, T3-T4, derivadas de las hormonas tiroideas. 3. Hormonas esteroideas: derivadas del colesterol, aunque tienen parte hidrofilica, su mayor constitucin en hidrfoba, mecanismo de accin interno es diferente a las 2 anterioresgluco y mineralicorticoides, lnea sexual: estrgenos, testosterona, progesterona, andrgenos.

*el tipo de transduccin que hacen las neuronas a travs de los neurotransmisores. Las hormonas van a ser producidas por 3 tipos de glndulas dependiendo del punto final en donde acten: 1. endocrinas: su hormona la secreta a la sangre para que llegue a su rgano blanco-donde va a actuar- insulina, glucagon, gonadotropinas, ACTH, NA,A 2. Paracrina: muy prxima la clula blanco para la que estn produciendo la hormona, no viaje por la sangre sino por el espacio extracelular -somatostatina, clula nerviosa-en el impulso nervioso-GABA, acetilcolina 3. Autocrina: produce su propias hormonas en la misma clula-produce-saca de la clula- sus propios receptores la reconocen y la vuelven a tomar, se auto regula para aumentar disminuir

Las hormonas peptidicas y aminoacidicas, usan como mecanismo la generacin de un cascada al interior de la clula que van a estimular.

1. viene hormona-primer mensajero. 2. reconoce en la cara externa de la membrana, un receptor especifico, induciendo un cambio conformacional en el.

funcionan como factor de transcripcin interior nucleo, eje: tirosin quinasa

al

CONTINUACION 3. estimula protenas en la cara interna, que finalmente desencadenan la produccin de AMPc, GMPc, Diacilglicerol, inocitoltrifosfato, etanolamina, colina, que son los 2 mensajeros. 4. Estos activan a unas protein cinasas que fosforilan residuos, amplifican la seal 5. finaliza en la activacin de factores de transcripcin a nivel del nucleo, para que se active o inhiba la produccin de RNAm Posibles opciones que hay para la activacin de la seal si estamos con hormonas de tipo proteico, es decir, cuando se habla de estructuras hidrosolubles; lo primero a tener en cuenta y lo ms importante es que debe haber un receptor de membrana porque su naturaleza no polar, hace que no puedan atravesar la membrana y que por lo tanto tengan que reconocer una estructura all en la membrana. Este receptor es sper especifico porque acta a manera ligandoreceptor y entonces (dibujo) la estructura que se acopla perfectamente al receptor puede ser reconocido por el. Una misma hormona puede reconocer diversos tipos de receptores y eso hace que en distintos rganos puedan cumplir funciones diferentes generando diversas seales. Caractersticas del receptor para que funcione como punto de ligando de la hormona: 1. Especifica por su ligando.

Las hormonas liposolubles: 1. no necesitan reconocimiento de receptores por su naturaleza hidrofobica. 2. Ingreso directo. 3. Receptor se encuentra en el interior ya sea en el citoplasma o en el nucleo, producir cambio en la estructura, y solo el complejo hormona-receptor

2. Capacidad de unin Saturablepor mucha hormona que haya no quiere decir que hay una amplificacin de seal, mas all de la que implique la unin de la hormona al mximo de receptores posibles que tiene la clula porque si ya lo satur no se puede incrementar la seal. 3. Una hormona puede reconocer muchos receptores produciendo seales diferentes 4. Puede tener respuestas diferentes en cada uno de los tejidos blanco 5. Si no penetra el receptor traduce la seal hacia el interior y se vale de un segundo mensajero 6. Los receptores de la membrana mecanismo sometido a regulacin son un

rea que posiblemente pudiese recibir seales. La saturacin de receptores y la cantidad de unidades no se modifica por el incremento y la hipertrofia para que reciba la seal de activacin de la insulina. A esto se le llama Resistencia, porque la cantidad no se modifica. Para mostrar como una horma puede tener diversos efectos se puede ejemplificar el caso con la Adrenalina, que tiene receptores: A1: Iris, intestino, glndula salivatoria A2 : Estmago, Clulas B pancreticas, plaquetas, adipocitos B1 : corazn, adipocitos, intestinos B2 : pulmn, hgado, intestino - En el Corazn aumenta la capacidad de que el bombee, disminuye la contraccin, aumenta fuerza. Adipocitos incrementa la liplisis Intestino disminuye la motilidad

Esto se ejemplifica muy bien en la Diabetes tipo II, porque genera resistencia a la insulina y el numero de receptores disminuye por unidad y porque disminuye porque imagnese un clula de manera normal y por culpa de la obesidad y la ingesta indebida de carbohidratos, el aumento de la grasa hace que la clula se hipertrofie, y si tenamos 6 receptores de membrana a 3 cm, la clula entonces se vuelve mayor y cada receptor queda a una distancia 10 cm, es decir, menor cantidad de receptores por unidad de

Cada uno de los puntos depende del receptor utilizado y del tipo de tejido blanco Es decir, determinar en los tejidos segn el receptor, que cosa va a ocurrir, ejemplo en el ojo a1 significa contraccin. Es importante considerar que la adrenalina es la que mas puede actuar primero sobre

ms clulas, segundo ms receptores y se puede mirar como la misma hormona cumple diversos papeles. Funcionamiento : La hormona reconoce a un solo receptor pero la unin a ese, hace que se estimulen las enzimas proteinquinasas y fosoforilen a otras y estas a su vez a un tercer tipo de protenas, la funcin se amplifica en cascada adentro de la estructura. La seal hormonal tiene un mecanismo de retroalimentacin, es decir los productos de la respuesta elevada son los que inhiben la unin del receptor con la hormona, porque producen un cambio conformacional sobre el receptor y eso hace que se disminuya la afinidad con la hormona y la suelte y pase la seal que se tenia. En estos puntos es donde actan las toxinas impidiendo que se pierda la seal hormonal y manteniendo activada la funcin de los segundos mensajeros. Receptores de superficie : Hay molculas que por tamao pequeo no necesitan receptor como por ejemplo el NO, de resto todas necesitan as sean hidroflicas. Hay cuatro tipos de receptores en la superficie para hormonas de naturaleza hidroflica: 1. Canales inicos

2. Acople a protena G 3. Actividad enzimtica intrnseca, es decir, no necesitan activar protena porque sus propios dominios hacen la activacin como los Tirosin Kinasa. Explicacin de menos a ms: No necesito receptor: NO, activa la formacin de GMPc , y especficamente va a tener como funcin final por ejemplo en la clula cardiaca la relacin de la fibra lisa. OJO es el nico que no necesita la presencia de receptor, utilizando GMPc y produciendo relajacin de la fibra cardiaca lisa. Los que si necesitan: 1. Los mas sencillos son los que necesitan receptores para la apertura o cierre de los canales inicos. Las Molculas cuando no estn unidas al canal este se mantiene cerrado, cuando se unen a la cara externa del canal abre la estructura permitiendo el flujo : Ca, Cl, Na, etc 2. Necesita de la presencia de protena G en la membrana, esta en la cara interna pero prxima al receptor: lo que ocurre es que el ligando se une al receptor produce un cambio

conformacional en la estructura y entonces el receptor activa a la protena G, permitiendo la fosforilacin de las subunidades de esta que dependiendo va a activar a diferentes tipos de molculas. La misma protena G puede tener diversos efectores para que trabajen como segundos mensajeros. Aqu se ve como la acetil colina funciona unindose a la parte externa de una canal inico haciendo que se pliegue y en cambio as cuando al estructura se une haga esto y al abrirse a la cara interna se logre el paso de los iones a travs de ella y cuando los iones abandonan la estructura y vuelven y se cierran, y se desensibilizan nuevamente. La protena G es una protena trasnmenbranal con 7 dominios que atraviesan con ligandos en la parte externa que son activados mediante unin al receptor y entonces cuando se da la activacin se tienen los siete ligandos que en la cara interna van a reconocer las subunidades alfa, beta y gama para producir la migracin hacia la bsqueda de la activacin del segundo mensajero. La protena G se activa gracias a que las subunidades forman un trmero que se rompe y activan al GTP que enva la seal que inicia determinada cascada. Este mecanismo puede activar a estos cuatros 1. Activa adenilato ciclasa para que se forme AMPc

2. GMPc mediado por guanilato ciclasa) 3. Activa fosfolipasa C

fosfodiesterasa

(en

la

4. Efectores que funcionen como canales inicos Protena G caractersticas: - Mas de sus Dominios expuestos en la externa -

cara

Dependiente de los nucletidos de guanina porque siempre que el GTP se forma es que sus dominios pueden trasladarse para activar al efector Efectores en la cara citoplasmtica y posicin fisca cerca de la protena g.

Activacin de los cuatro Mecanismos: 1. Adenilato Ciclasa - AMPc: Se forma partir de ATP que se hidroliza pierde dos p p y el que le queda forma la estructura cclica con la unin del fosfato entre la posicin 5 y la 3. La enzima es la adenilato ciclasa regulada por el GTP porque es la formacin de GTP la que activa a la enzima; la funcin pasa cuando el AMPc se rompe y se convierte

en AMP, cuando no haya mas adenilato ciclasa cuando no haya mas GTP unido a las subunidades de la protena G, esta proteina G no estar ms activa cuando pase la unin de la hormona con el receptor. Aqu vemos el mecanismo en la siguiente imagen Nosotros tenemos en condiciones de reposo muy cerca en la membrana celular fsicamente tenemos el receptor que mira a la cara externa y de la protena G, que realmente es un trmero, est en la parte interna y que sus unidades subunidades son: alfa, beta y gamma, y la subunidad alfa es la que se puede activa, y en condiciones de reposo la subunidad alfa se encuentra inactiva porque est unida a un GDP, y es por eso que se dice que est regulada por los nucletidos de guanina; y tambin tenemos entonces a la adenilato ciclasa a la derecha o izquierda que en reposo se encuentra inactiva y esta mirando hacia la cara interna de la membrana celular. Entonces llega a la hormona y tiene una estructura especifica para poder unirse y ser reconocida por el receptor entonces aqui vemos como al unirse al la hormona al receptor, este cambia de una forma cuadrada a una redonda, y entonces realmente el producto del cambio de conformacin de la protena es que la subunidad alfa que esta unidad a un GDP, sea intercambiada o reciba una nueva unidad de fosfato y se convierta en GTP. Cuando esto se pasa, entonces la subunidad alfa cambia conformacionalmente y se suelta de las otras subunidades, es la forma activa de la protena G, para

desplazarse en busca de la adenilato ciclasa para activarla, cuando esta activa la adenilato ciclasa, ella convierte un ATP en un AMPc y para lograr esto obviamente salen dos fosfatos, y por lo tanto, esto se mantendr mientras la subunidad alfa de la protena G se encuentra unida con el GTP (activa). Bueno ahora mas adelante vamos hablar que pasa con el AMPc, y por ahora continuamos con esto, diciendo que si la subunidad alfa se inactiva por hidrlisis del GTP mediada por la fosfodiesterasa, obteniendo un grupo fosfato libre y el GDP unido a la protena (subunidad alfa) que por lo tanto cambia entonces de forma redonda a cuadrada y regresa para unirse con las otra subunidades de la protena G, al separarse de la adenilato ciclasa la inactiva. Y pues entonces que ocurre con el AMPC formado? Pues que al suceder la inactivacin de la adenilato no se forma ms y el que tenamos formado, viene una fosfodiesterasa lo rompe y forma AMP (pasa la seal). Bueno, pero entonces que pasa con el AMPc que se forma y pues con el que se sigue formando? (adenilato ciclasa activa), pues que el AMPc va a activar proteinkinasas, y pues que al estar inactivas y al pasar a ser activas por medio del AMPc, van a empezar a actuar fosforilando protenas y fomando una cascada; esa cascada de fosforilacin debe por lo menos realizar la fosforilacin de tres series de protenas, para finalmente llegar a la protenas de tipo CREBS, estas protenas son realmente uno de los mecanismos de regulacin gentica, son protenas

reguladoras genticas que se producen en plan (no muy entendido esa palabra) con respecto al gen que van a regular y que tienen la particularidad de ir a reconocer sitios especficos del gen, especficamente la partes reguladoras del gen por ejemplo sitios como stop (algo asi dice jejeje), o como el sitio operador, y entonces ellos se paran sobre estos lugares y bloquean la accin de la RNA polimerasa. Y en general, esas protenas crebs que vamos a ver el prximo semestre son dedos de zinc, pueden adems lados de oxina- miosina (algo asi) en modelo cierre de oxina, y bsicamente funcionan como protenas reguladoras y se conocen como factores de transcripcin. Por lo tanto, en conclusin esto da la fosforilacin de la protenas Crebs, que son reguladoras es decir factores de transcripcin, que se activan y van a entrar al nucleo, y se van a ubicar en los sitios especficos reguladores y van a realizar la funcin de factores de transcripicin y bsicamente, son puntos reguladores de genes especficos. Y entonces todas las hormonas que utilizan este mecanismo vienen a activar el mismo gen?, NO, lo que pasa es que reconocen de manera selectiva diferente tipos de crebs, osea a distintos factores de transcripcin, y de eso depender que la funcin sea activar la transcripcin o frenarla acerca del gen con el que se esta trabajando. Parte clave: los crebs son los selectivos y se fosforilan diferentes tipos de protenas dependiendo de la funcin deseada y todo este proceso esta inherente al metabolismo.

A continuacin un ejemplo de el mecanismo antes descripto de la protena G activando la adenilato ciclasa en las diapositivas. Entonces que hacen las toxinas en este mecanismo? Por ejemplo la del clera, hace que no se pueda separar la unin de la subunidad alfa con el GTP, y pues de alguna manera bloquea el regreso del sitio de unin la subunidad alfa con la otras de la protena G, y en ese orden de ideas lo que va a pasar es que la adenilato ciclasa siempre va a estar activa, y va a producir AMPc independiente de que la seal hormonal ya haya pasado (fin del efecto de la hormona logra el regreso de la subunidad alfa), en estos la enzimas que estn reguladas por la toxina van a impedir que la subunidad alfa vuelva a su lugar cuando esta inactivada ( mantiene unin con GTP), que la adenilato ciclasa no este inactiva y que se continue el efecto del AMPc por horas o por dias activo, y en el caso del clera lo que logra es que se mantegan los canales inicos abiertos , entonces sale sodio permanentemente y sale cloro y con ellos arrastra H2O, por eso la toxina perpetua la diarrea y con ello gener un proceso de deshidratacin. 2. Fosfolipasa C: Sigue el modelo de activacin por protena G, entonces la subunidad alfa activada (unida a GTP) se desplaza, reconoce y activa a la Fosfolipasa C, lo que hace la fosfolipasa C es desintegrar una estructura de

membrana (cara interna), es decir, va a romper un fosfolipidos con propiedades sealizadoras de la membrana , que es el fosfatidilinositol difosfatado. Entonces, el fosfatidilinositol difosfatado se encuentra en la capa interna de la membrana, donde la porcin hidroflica (los grupos fosfatos con el inositol y el gricerol) mira hacia el citoplasma y la parte de sus acidos grasos haciael centro de la capa bilipdica. Y entonces viene la enzima y rompe por el fosfato formando diacilgricerol (DAG) y inositol trifosfatado (IP3), y cada uno tiene funcin de segundo mensajero. Que hace cada uno? DAG: no se van de la membrana celular, se desplaza por ella, porque o si no estuviramos perdiendo estabilidad de la ella (membrana celular), entonces el DAG genera la activacin (por fosforilacin) de una Kinasa de tipo C, esta kinasa va a generar la hidrlisis de un ATP y con ello la fosforilacin de una protena, y por ende va a generar la cascada de fosforilacin de protenas. Pero para realizar este proceso, el DAG requiere la presencia de Ca, y el Ca sale del favor que va a hacer el otro segundo mensajero, el IP3. IP3: se encarga de la salida citoplasmtica de Ca, puesto que en el retculo endoplsmico existe un receptor para l, y al formarse

complejo receptor-segundo mensajero se abren lo canales inicos para la salida del Ca al citoplasma desde el RE. Entonces la salida de calcio tiene dos rutas, en la primera el calcio participa en la fosforilacinde protenas por medio de la activacin de kinasas por el DAG, y en la segunda, el calcio se une a la calmodulina, y el complejo calcio-calmodulina es el que permite que se active proteinkinasas,que estando activadas van a hacer que otras protenas se fosforilen, y al estar fosforiladas ciertas protenas especificas, van hacer que se genere una cadena que conlleve a la activacin de los factores de transcripcin a nivel nuclear. Nota: ya se ha visto que hay protenas que se activan y no van hacia la fosfolipasa para generar la cascada por medio de la hidrlisis del fosfatidilinositol difosfatado, sino que van directo a fosfolipidos de la membrana y los activa, estos fosfolipidos son los unidos a solo etanolamina, serina y colina, funcionando tambin como segundos mensajeros. Adems normalmente la toxinas actan sobre la subunidad alfa de la protena G. Activacin de diferentes proteinkinasas: depende de los segundos mensajeros que se formen

Las que son por Fosfolipasa C-DAG mas IP3: las kinasas tipo C (DAG) y kinasas dependientes de complejo Ca Calmodulina (IP3) Las que son por la adenilato ciclasa- AMPc: las kinasas tipo A (PKA) con dominio C Las que son por la Guanilato ciclasa- GMPc: kinasa tipo G; ejemplo de mecanismo que lo activa es el oxido ntrico y en el ojo la rodopsina. transduccin de seales por

Mecanismo de TIROSINKINASA:

Proceso no mediado por protena G y no necesita segundos mensajeros, porque la tirosinkinasa funciona tanto como receptor como mensajero. Ejemplos de receptores: receptor de insulina y receptores de factores de crecimiento para proliferacin epidrmico, derivado de plaquetas y parecidos a la insulina. Su estructura puede variar, se ha encontrado que pueden haber varios subtipos. Unos por ejemplo que funcionan como dmeros, entonces tienen unos dominios externos de reconocimiento y dos internos

de reconocimiento; otros que funcionan como monmeros pero los dominios de reconocimiento externo son en forma de fila, entonces reconocen las estructuras por las caras laterales y tienen un nico residuo de tirosinkinasa en la cara interna; otros que por el contrario tienen multiples dominios de reconocimiento en la cara externa y funcionan de manera similara como actan las inmunoglobulinas cuando reconocen las celulas blanco que tienen que destruir, y tienen dominios en serie de tipo tirosinkinasa en la cara interna. Que hacen, como funcionan??? Lo que va a ocurrir es que prcticamente sus dominios son como estructuras independientes, el dominio externo tienen varias subunidades que reconocen el ligando, que sera la protena, una vez que este dominio haya reconocido el ligando hay un cambio conformacional que se transmite al dominio interno, todos estos receptores tienen al final de su estructura una tirosina, un residuo del aminocido de tirosina, este residuo que va a cambiar de estar inactivo a activarse, porque cuando se activa se fosforila, entonces el dominio propio del receptor va a opcionar como una proteinkinasa (dice ella), porque el estando fosforilado va empezar a fosforilar protenas, y estas protena fosforilada en serie va al interior y fosforila otra, es decir, se desencadena el efecto cascada y al final tenemos tenemos la unin de los factores de transcripcin a la cara interna de la membrana nuclear, y la activacin o inactivacin de genes, en la

parte de las regiones moduladoras que estn en el ADN. Entonces, Diferencias: No dependiente de protena G No actua por medio de segundo mensajeros Y posee un residuo de tirosin kinasa, que se fosforila para su activacin e iniciar la cascada de fosforilacin de protenas, y que su fosforilacin (la del residuo) va a depender de el tipo de ligando que se una y si este provoca o no el cambio conformacional necesario para la activacin del residuo.el residuo activo fosforila toda protena que se acerque a el con el fin de iniciar la cascada. Ejemplo del mecanismo de tirosinkinasa: Activacin por .no se entiende de tipo Ras: (ver diapositiva para mayor seguridad) entonces llega la hormona al receptor de tipo tirosinkinasa, entonces el ultimo residuo que es de tirosina se fosforila, y este residuo fosforilado reconoce a una primera protena que se llama la protena Y y se va a fosforilar y su fosforilacin va a permitir que esta protena Ras pase de la forma inactiva a la forma activada. Esta protena

Ras funciona como una activacin en kinasa mediada por residuo serina-treonina,entonces ella ahora viene y activa a una segunda protena que se llama la macmackinasa (algo asi miren diapositivias), y que por estar doblemente fosforilada se llama la mackinasakinasa, y que ahora va a fosforilar a otra protena, que pierde una de sus acciones kinasas y se llama ahora mackinasakinasa, y esta a su vez fosforila a otra que pierde una fosorilacin y entonces se llama ahora solo mack kinasa, por lo tanto, es ahy donde entra al nucleo y produce una proliferacin celular, es decir, acta como mecanismo de factor de crecimiento. Entonces podemos decir que los dominios internos actan como proteinkinasas. Hay otros ejemplo no tan descriptivos, pero la idea principal es que al final van a activar factores de transcripcin que son protena reguladoras que se van a ubicar e identificar regiones de genes para promover su expresin o inhibirla, o pues de otra forma promover un crecimiento celular (proliferacin). AHORA COMO FUNCIONAN LAS LIPOSOLUBLES: Un mecanismo liposolubles. ms sencillo, para hormonas

Entonces prcticamente la hormona por la sangre llega a la celula atraviesa la membrana por difusin, y en el citoplasma o en el nucleo se une con el receptor de reconocimiento, entonces esta unin produce un cambio conformacional en el receptor y hace que se produzca la afinidad de la hormona por el receptor y entonces se desplaza la interior del nucleo o sino pues se estara formando la unin en nucleo, y solo cuando tenemos unin de ese complejo hormona-receptor es que actua como factor de transcripcin. Aqui no mediamos nada de segundos mensajeros ni fosforilaciones, el complejo actua directo y hace como protena reguladora de la transcripcin de genes en el ADN. Y entonces un bueno ejemplo es cuando este complejo se une a los surcos mayores, haciendo que aumente la afinidad por la RNApolimerasa para la transcripcin o por el contrario disminuya bloqueando el lugar de activacin.

Vamos a revisar el capitulo de inmunoquimica, que seria bsicamente como nosotros adaptamos algunas de las macromolculas que especficamente son de origen proteico, algunas de ellas combinadas con derivados carbohidratos: que son las glicoprotenas y de que manera estas glicoprotenas pueden trabajar en el reconocimiento de lo que es extrao de tal manera que lo puedan atacar y podemos pensar en que nosotros vamos a defendernos. SISTEMA INMUNOLOGICO Si uds se acuerdan nosotros tenemos un sistema inmune que bsicamente esta mediado por la presencia de unos componentes que favorecen el reconocimiento de lo propio y trabajan por lo tanto en que lo que sea desconocido se pueda atacar. Nosotros tenemos bsicamente un sistema de circulacin que se conoce como linfa que va a irse a conectar con algunos rganos: - Los ms pequeos, los menores, LOS GANGLIOS LINFTICOS que estn afectados por mltiples lugares. Y otros mas importantes como aquellos que son los productores bsicamente de lo que son las clulas primordiales o pluripotenciales o totipotenciales que trabajan en la formacin de las diferentes estructuras que van a sangre que son bsicamente la MEDULA OSEA de los huesos largos, EL TIMO que tiene que ver sobre todo con el reconocimiento de los linfocitos T y con la

XIV CLASE INMUNOQUIMICA

asignacin de marcadores antignicos a ese tipo de molculas y otro que es el BAZO que uds saben que funciona como la estructura que permite que circule lo que esta nuevo que funciona de manera correcta, que obedece a caractersticas morfolgicas adecuadas y permite que se retire todo aquello que no cumpla con estas condiciones. Entonces vamos a ver que el 99 % de los glbulos rojos se destruyen ah a nivel del bazo cuando a cumplido ya el tiempo de vida. Algunos de estas estructuras que mencione no funcionan toda la vida, involucionan y tienen un un periodo de vida mucho mas exacerbado en un momento y luego ya no funcionan de esta misma manera. De los que estn representados aqu cuales tendran una funcin limitada a un periodo de tiempo en la vida nuestra??? EL TIMO. Los linfocitos realmente se producen en la medula sea pero cuando salen a circulacin salen inmaduros y el timo cumple el papel de hacer la maduracin especficamente de los linfocitos T. La clula no es la que decide quien se puede quedar o no porque puede aprender a hacer algo o no, ella expresa ciertas caractersticas, el timo revisa y eso seria lo del reconocimiento de lo que es propio o no y en ese proceso de seleccin se quedaran con los clones que no reconozcan nada propio y lo que reconozca algo los elimina. De hecho una de las

teoras de la autoinmunidad dice que probablemente hubo una mala seleccin a nivel del timo y que estos grupitos de clones que quedaron pueden exacerbarse ante una respuesta inmunolgica grande y despertar una respuesta de reconocimiento de lo propio. Entonces de los rganos que forman el complejo inmune, el timo seria el que funciona hasta mas o menos alrededor de la pubertad, bsicamente porque se esperara que de todos los clones posibles que se vayan a seleccionar, a ese momento ya ha habido el reconocimiento completo de ellos y los que van a quedar circulando son esos a los que le hicimos una seleccin positiva a nivel del timo y esa seleccin positiva implica la marcacin a partir de la expresin de receptores de membrana. Entonces podramos decir que ese sistema inmunitario formado por todas esas estructuras que mostr ahorita (timo, medula osea de los huesos largos, bazo, vasos linfticos, amgdala palatina, apndice, adenoides) tiene como funcin bsica la de poder defenderme contra agentes que sean desconocidos y agentes desconocidos puede haber de tipo infeccioso y de tipo no infeccioso; entonces es posible que la respuesta inmune se de contra un agente no infeccioso, recuerda que dijimos que se pueden precipitar los cristales del acido rico y despertar una respuesta inflamatoria, eso es bsicamente porque la respuesta inmune que vamos a ver ahorita seria de tipo inespecfico.

Entonces contra todo aquello que sea desconocido, que ingrese a nuestro organismo es lo que llamamos ANTIGENO. Sin embargo no todos los antgenos despiertan una respuesta inmune, hay mejores antgenos unos que otros; por ejemplo molculas de tipo proteico son los mejores antgenos porque serian los que mas rta(respuesta) inmune despiertan y entonces cuando un antgeno despierta rta inmune ya

no se le llama antgeno sino IMNUNOGENO porque seria la molcula que activa la rta. En cambio los lpidos y los carbohidratos son psimos antgenos porque a pesar que pueden ser molculas usuales en el organismo no despiertan de la misma manera el estimulo de la rta inmune como lo hacen los anticuerpos. Cuando uno mira un antgeno o un potencial inmunolgico en realidad la rta inmune se desata contra componentes mas pequeos y particulares de esa estructura, un ejemplo, yo tengo una bacteria y esta tiene un interior, una membrana, tiene una pared, unos cilios o un flagelo, que quiere decir??, que cada uno de esos componentes puede despertar una rta y entonces efectivamente puede haber un desencadenamiento de la produccin de anticuerpos contra mltiples componentes de la misma bacteria, entonces contra cada punto o cada lugar especifico desde el punto de vista bioqumico contra el cual se haga un reconocimiento, esa porcin del antgeno que despierta la rta se llama EPITOPE ( secuencia bioqumica pequeita contra la cual se va a hacer un reconocimiento). Contra el inmunogeno se pueden producir 2 tipos de rta: - RTA HUMORAL: es la produccin de anticuerpos que seria protenas de tipo de las gama globulinas que van a poder entrar a reconocer esos epitopes a unirse a ellos, y bsicamente a inducir otro tipo

de rtas como por ejemplo la produccin de interleucinas, la activacin del complemento y otros sistemas que hacen que la estructura se rompa y finalmente se destruya. Entonces, primero vamos a clasificar la rta inmune desde 2 grandes perspectivas que son en realidad asi: - La que se llama RTA INMUNE INNATA. Esta es la que esta lista cuando yo nazco para poder responder. CARACTERISTICAS

Es inespecfica Mediada por un componente de tipo celular y humoral, el primero tiene que ver con las clulas NK y con los macrfagos. Todas las clulas inmunocompetentes que hay a nivel de la sangre se van a poder activar, entonces cual es la diferencia con la rta especifica??? . la rta que es inespecfica es igualita contra cualquier microorganismo que pretenda entrar, mientras que la que es especfica va dirigida puntualmente y de forma distinta para cada uno de los antgenos que nos encontrramos. Se desarrolla a travs de las barreras de proteccin natural, entonces estar a nivel de

las secreciones, de la piel , el moco, todo lo que se produce en las secreciones acidas, lo que es el sudor porque en ellos vamos a tener gran contenido de anticuerpos que van a estar listos de destruir un antgeno que todava no ha logrado ingresar al organismo. Se desenadena bsicamente con la activacin de todo el grupo de los globulos blancos y entonces aqu los polimorfosnucleares tienen un papel muy grande porque son los primeros que nos vamos a encontrar en esas barreras fisiolgicas. Y dentro de los mononucleares van a ser mas los monocitos que si uds recuerdan se van a llamar diferente si estn circulando o si estn circunscritos a un tejido y entonces ellos van a ser los otros que van a hacer reconocimiento y se van a activar. En cambio los linfocitos los vamos a ver masificados en la rta inmune especfica. Adems de tener este componente celular tiene como componentes humorales 3 tipos de cosas: la presencia de secreciones a nivel celular Por qu?, porque vamos a tener como producto de la venida y de la migracin de estas clulas lo que es la inflamacin, entonces el fenmeno de la inflamacin es una rta a lo que seria la entrada inicial o primera llegada de un antgeno que nosotros vamos a responder inicialmente con una rta de tipo inespecfica. Dentro de las producciones que se van a dar

all va a estar todo aquello que medie la inflamacin entonces va a estar todo el grupo de las citoquina que van a activarse, aquellas que tienen que ver con la quimiotaxis y la llegada de otro tipo de molculas, aquellas que tienen que ver con ser proinflamatorias porque reconocen a otras estructuras, aquellas que tienen que ver con las secretadas a partir de los mastocitos que van a ser como la serotonina y otras series de sustancias que van a proactivar la inflamacin y como segundo componente tiene la elevacin de la protena c reactiva que va ser un tipo de molcula de naturaleza proteica que nos va a permitir conocer el fenmeno inflamatorio y un tercer grupo de molculas que se denominan el complemento que son protenas que se activan en cascada de manera similar a como lo hace la coagulacin para producir huecos en la integridad del antgeno y de esta manera destruirlo Por ultimo el cuarto grupo de componentes de la rta humoral son la produccin de los derivados del ac araquidonico: los tromboxanos, leucotrienos y las prostaglandinas. Ellos 3 son los mediadores que van a finalizar la rta inflamatoria.

Pero como les digo todos estarn activados de la misma manera sin importar cual sea el antgeno por lo que es una rta inespecfica, segundo van a estar producidos a partir de que en las secreciones tengamos el primer contacto o a nivel de la piel con ese antgeno y tercero van a estar ayudados de la rta de tipo celular que esta mediada mas que todo por los polimorfonucleares y por los monocitos.

La RTA INMUNE ADQUIRIDA O ESPECFICA. Se desarrolla solo si nos encontramos con ese antgeno.

En esta respuesta los 2 componentes humorales que van a trabajar son bsicamente en el caso celular los linfocitos especialmente los T porque son los que van a mediar el reconocimiento especifico inicial del antgeno para producir una respuesta contra el y el segundo que seria el grupo de la respuesta humoral que bsicamente es la produccin de anticuerpos que esta mediada por los linfocitos B que cuando se activan para producir anticuerpos se van a transformar en una clula mas especializada que es el plasmocito.

Para comparar una rta inespecfica de una especifica, cuales serian las caractersticas de la rta especifica??? La primera: es que es selectiva ante un determinado antgeno.(Es decir que tiene especificidad) La segunda: es que tiene memoria. Nos va a quedar en circulacin algunas clulas de esos clones que de ah en adelante van a reconocer a ese antgeno.

Otra cosa seria por cual de las barreras se logro superar porque hay unas vas que son de mas fcil accesibilidad que otras Por la virulencia del microorganismo.

La rta especifica solo se va a desarrollar si logr pasar la piel, las secreciones, las mucosas y lleg a torrente circulatorio, es decir solo se logra activar si el antgeno pasa las barreras primarias cosa que no era necesaria para la rta inespecfica; por su puesto primero la inespecfica tratara de destruir y solo cuando no sea capaz y el antgeno logre ingresar al organismo pues vamos a despertar la especifica.

Cuando ya se esta adentro se va a desarrollar una rta, esta rta se puede despertar en ultimas a travs de 2 activaciones, una que es que los macrfagos inicialmente se puedan comer a la clula para presentarla, pero tambin tenemos linfocitos B que los vamos a clasificar en vrgenes y maduros, Qu papel tienen esos linfocitos B ah en ese momentico? Ac es donde ataca la selectividad porque es que yo produzco rta solo contra un antgeno? Porque de todo el set de todas las posibles combinaciones de anticuerpos que estn exhibidas en un linfocito B virgen se va a reconocer solo la combinacin que sirve para ese antgeno.

Por qu la rta innata no puede acabar con un antgeno? Puede ser por la cantidad de antgeno que llega porque si hay gran cantidad pues ser ms difcil entrar a destruirla.

El linfocito puede reconocer perfectamente una protena, la pregunta va: en que si hay ciertas combinaciones expresadas en la membrana de el linfocito?, y de hecho es as, como hacemos para que todas las posibles opciones opciones de antgeno puedan ser reconocidas por ellos? Bsicamente tiene que ver con que las combinaciones ; por ejemplo: si

habrn mil circulando y tenemos 100 millones de antigenos posibles entonces selecciona la combinacin mas acorde con el antgeno que se esta presentando, pero por eso en el momento del reconocimiento tiene que haber una segunda fase, que es la de afinar o apuntar para que la forma de interactuar sea 100% perfecta y eso implica una mutacin somtica que hacen que se pierdan las dems combinaciones adentro de los linfocitos y solo se quede con una combinacin que ahora va ser 100% perfecta para ese antgeno, entonces un ejemplo vamos a encontrar una combinacin que en un 90% coinciden o tal vez un 95%, el grado vara dependiendo del antgeno, que hacemos despus de que ya lo reconocimos? Ahora con un 100% de correspondencia. Bueno y como desarrollamos ese cambio de ese 90 al 100%?, mediante la modificacin de la estructura interna del material gentico, con esa clula que reconoci ese antgeno para que le pueda de ah en adelante afinarlo y reconocerlo con el 100% de posibilidad. Entonces dentro del grupo de los linfocitos tenemos dos grande grupos: el que va a responder por toda la inmunidad de tipo celular que es el linfocito T, pero este linfocito T a su vez se subdivide en varios grupos, de que depende esta subdivisin?, de los antgenos que expresa este linfocito T en su membrana, entonces si el antgeno que tiene una molcula que se llama CD4 se considera que forma preferencialmente lo que se llama el grupo de los

linfocitos T ayudadores, y van a derivar a partir de l, dos tipos de clulas: - Una (la mayora de ellas), clulas cooperadoras que se van a dividir en dos subtipos: las TH1 y las TH2 (en la diapositiva esta como se anti van y que hara cada una de ellas cada una de ellas) Un pequeo grupo puede funcionar como clulas supresoras.

Esto hasta hace menos de 10 aos no se consideraba, lo que se pensaba es que todos los CD4 eran directamente clulas ayudadoras, ahora se sabe que hay un pequeo grupo que puede pasar a ser clulas supresoras. El otro grupo de linfocitos T que expresan receptores en su membrana de tipo CD8 positivos para decir que estn presentes all, va a dividirse en dos grandes grupos, las que preferencialmente van a llevar el papel de clulas de tipo supresoras (que como dice en la diapositiva, van a inhibir la produccin de anticuerpos) y de clulas citotxicas que van a destruir las clulas blanco que estn infectadas por este tipo de antgenos. El otro grupo de clulas que nos quedan serian los linfocitos B que los vamos a ver bsicamente van a trabajar por un lado en reconocer antgenos de manera directa lo que pasa es que la respuesta inmune que reconoce el linfocito B directamente y no pasa por T no guarda la misma memoria que guarda la

RTA que paso por la va clsica de activacin y el otro papel pues el de producir las clulas plasmticas y los linfocitos de memoria una vez que se active la respuesta inmune de tipo especifico. Otra lnea de linfocitos que no tiene que ver ni con los T ni con los B son las famosas clulas NK (natural killer) que bsicamente trabajan destruyendo especialmente antgenos que acostumbran a vivir dentro de la clula que se conocen como antgenos intracelulares. Vamos a mirar el grupo de productos que generan los linfocitos B cuando se transforman a plasmocitos, porque se puede dar esto? Los linfocitos B se pueden activar por: una va que es a partir de la activacin por los linfocitos T, entonces puede ser que un linfocito T se activa y viene y activa a un linfocito B esa es una primera opcin, Dnde mas se podra activar un linfocito B para que se convirtiera en plasmocito? El antgeno puede activar un linfocito B? claro que s, eso es lo que estamos diciendo desde el principio, que si tenemos anticuerpos en membrana y hay un antgeno all presente, si el antgeno es reconocido por el anticuerpo que expresa el linfocito B, (claro que puede activar tambin al linfocito B, la nica diferencia con el caso anterior, es que de una vez se activa B sin necesidad de T). Entonces el linfocito que expresa en su membrana anticuerpos que clsicamente es Ig M (manomtrica) e Ig D; este linfocito no se ha encontrado todava ningn

antgeno despus de encuentra el antgeno sea porque el directamente se le una o sea porque el linfocito T venga y medie la activacin, el linfocito B va a hacer dos cosas: - La primera ser dividirse en una lnea que se va a multiplicar y entonces va a producir una respuesta de tipo exacerbada que es lo que se llama la clonacin en serie para generar todas las clulas de memoria que van a guardar cierta informacin de que se reconoci ese antgeno. La segunda que es producir unas lneas que se van a transformar a plasmocitos para que ahora entonces ellas produzcan anticuerpos.

Si ustedes recuerdan el plasmocito es ms grande que un linfocito, y tiene un gran citoplasma con unas areas muy blancas que bsicamente son las areas de retculo endoplasmico donde esta todo el tiempo producindose el tipo de anticuerpo que nosotros necesitamos producir y entre los anticuerpos bsicamente va a estar formados por esta estructura inicial que luego puede tener mltiples cambios pero que bsicamente todos convergen en lo mismo, lo primero: van a tener dos cadenas pesadas y dos cadenas livianas que estn unidas mediante la formacin de puentes disulfuro que le dan la forma y estructura en bisagra, lo que permite que haya un reconocimiento por la parte anterior donde la bisagra

puede abrirse o cerrarse para acoplarse ms especficamente al antgeno. Una cosa particular que tiene este segmento que reconoce al antgeno, es que se llama la porcin bad (no s si escribe as), la que est en la porcin efectora o en la porcin distante es la que se llama FCE. Por esta va vamos a activar bsicamente l complemento y otras seales de respuesta para la migracin de la respuesta inflamatoria y la respuesta inmune de tipo especifica. Y por este otro lado vamos a activar a la unin del antgeno. Entonces para que el antgeno pueda ser reconocido por las cadenas pesadas y las livianas tienen a su vez dos porciones: - Una porcin variable. Una porcin constante. Esta porcin especficamente de las cadenas pesadas es la que determina el tipo de Ig que tenemos. Entonces de cuantos tipos fabricamos nosotros? Fabricamos 5 bsicamente, y van a variar dependiendo de si es alfa, si es gama, si es delta, etc.

Y estas regiones distales de las cadenas livianas tambin van a ser constantes, de que son? Pueden ser de dos tipos: - Kappa Lambda.

Una particularidad y es que un anticuerpo que tenga cadena capa, van a ser ambas de la forma capa y si la tiene lambda, tendr ambas lambda; sea no hay combinacin de los dos subtipos dentro de una misma estructura de una molcula de anticuerpo. Bueno como las cadenas van a ser selectivas dependiendo del tipo de Ig que nosotros tenemos, entonces esas porciones la miu, la delta , la exilon, que van a a estar ubicadas en lo que dijimos que era la regin FC, bsicamente las que van a llegar al extremo carboxilo terminal van a ser las que determinen tambin donde se ubique el anticuerpo, porque vamos a ver quien tiene esta selectividad sobre la forma y el punto donde acta cada tipo de anticuerpo. Y estas regiones superiores que son las variables bsicamente van a ser distintas en cada anticuerpo, entonces como hacemos para que varen de anticuerpo a anticuerpo, en qu consiste esta variabilidad de la porcin variable de una protena?, me da la especificidad, y cmo hacemos para darle esta especificidad? Acurdensen que estamos hablando bioqumicamente y es como hacemos para que el antgeno vea el anticuerpo distinto?. Como el anticuerpo esta hecho de protenas y pues en ltimas de aminocidos, lo que va a cambiar aqu en estas regiones variables es la secuencia de los aminocidos que vamos a tener puestos desde esta regin hasta llegar al extremo amino terminal; estos van a variar de anticuerpo en anticuerpo. Y como hacemos como clula plasmocitica para saber que aminocido le debemos poner ah?

especficamente para determinar la secuencia de aminocidos, que es lo que se hace? Vamos a tener tres grupos de genes que van a codificar para estas regiones variables del anticuerpo y dependiendo de cual segmento dentro de esos genes se seleccione vamos a tener toda la cantidad de infinitas combinaciones posibles para que el linfocito pueda ahora entonces producir anticuerpo, primero ms afinado, dijimos que en un 100% y segundo diferente dependiendo de cul sea el antgeno, entonces una particularidad que se da es que cuando ese cambio dentro del material gentico ocurra el linfocito B que llamamos virgen, lo dejo de ser para llamarse linfocito B maduro, y porque? Por un detalle pequeito que significa que como va a ser una prdida de todas sus dems combinaciones posibles de anticuerpo que podra reconocer (o de antgeno que su anticuerpo reconocera) pues el no puede devolverse a poder ir a reconocer nunca un antgeno distinto al que ahora selecciono, y entonces queda comprometido de por vida con ese tipo de antgeno porque las dems combinaciones en realidad las pierde y todos los clones que de ella se generan van a ser exactamente iguales y van a ser ya los linfocitos maduros, que unos se especializaran en plasmocitos y otros serian clulas de memoria. Entonces cuando nosotros hacemos la seleccin clonal tenemos mltiples combinaciones posibles y solo aquella a la que el antgeno se adapte de la mejor manera es la que va a estimular ese linfocito y a partir

del vamos a producir todos los clones que significan exactamente iguales y de ellos a su vez todos los anticuerpos que sern exactamente iguales. (En la diapositiva) entonces este es un linfocito B inmaduro con posibilidad de reconocer cualquier tipo de antgeno, este otro ya es un linfocito maduro que solo va a poder reconocer a este antgeno y que para poder hacerlo en realidad (una excepcin a la regla) no tiene el material gentico como todas las dems clulas nuestras, en la regin de los genes para la recombinacin de los segmentos variables tiene una prdida real de material para luego quedarse con la combinacin que nosotros necesitamos, y entonces cules son estos segmentos que van a funcionar all? Les deca que era bsicamente los segmentos que se llaman B, los que se llaman D y los que se llaman J. Este es un ejemplo que quiere mostrar que si tuviramos 5 combinaciones de la regin B, 5 de la D y 4 de la J, pues dependiendo di me quedo con la uno de aqu, la dos de aqu, la dos de aqu; hago una combinacin y si escojo la dos de ac, la 4 de ac y la 4 de ac, pues tengo otra combinacin y as sucesivamente, sea, se selecciona particularmente una pequea regin dentro de cada uno de estos tres segmentos, esa nica regin es la que va a quedar en el linfocito que est ahora reorganizado, por eso se llama elemento de la reconfiguracin y finalmente le vamos a adicionar una de las cinco cadenas que nosotros necesitemos para que tengamos lo que dijimos que era la definicin del subtipo de anticuerpo

que vamos a producir, lgicamente ustedes recuerdan que en general primero se hace lo que se llama el acople de lo que es la cadena miu, porque el anticuerpo de tipo Ig M es el que primero me va producir por respuesta a la piloereccin mas o menos durara en circulacin ms o menos de 5 mximo 7 das y despus se hace lo que se llama el schiss de cambio para que ya no tengamos ms Ig M, sino produzcamos Ig G, que es la que va a quedar guardada con esta misma combinacin de las regiones variables que no podemos modificar porque esto ya quedo como un gen desordenado, hagan de cuenta algo similar a lo que se ve en el splaicing RNAm que nos quedamos solamente con los intrones, ac es lo mismo, escogemos un solo segmento de las regiones B, D y de la J y formamos un segmentico mas pequeito. Que paso con todas las combinaciones que no se escogieron? Se rompen o se parten literalmente, se hace una funcin de hexonucleasa y se empalma para que el DNA solo quede con la combinacin seleccionada; y esta combinacin cual es? Aquella que va a permitir que el anticuerpo apunte con sus aminocidos variables que va a tener en esa regin de reconocimiento del antgeno haga una unin prefecta con respecto al antgeno que queremos reconocer. Y entonces dependiendo de cul sea la cadena que vaya en el segmento distal de las cadenas pesadas vamos a tener el tipo de anticuerpo, de todos los anticuerpos, cul es el ms abundante? El que funciona como anticuerpo de tipo Ig G. Cuando

nosotros estamos hablando de un anticuerpo o de una Ig nos estamos refiriendo exactamente a lo mismo. Entonces esta Ig G que es de las mas pequeitas, pesa 160 kilodalton y caractersticamente puede tener en la cadena pesada, sea en la cadena miu, en la cadena gama algunas pequeas variaciones en la secuencia de sus aminocidos que hace que se genere subtipos de la misma Ig, entonces vamos a ver que existen Ig G 1,2,3 y 4 dependiendo de estas diferencias de los aminocidos dentro de la regin constante. Esta Ig la vamos a tener en la sangre porque ella circula es en plasma. Las concentraciones son muy altas ms o menos del orden del 75% de las Ig que tenemos en un adulto son de naturaleza Ig G y la razn es porque su papel va ser bsicamente el de guardar memoria desde le punto de vista humoral porque una vez que nosotros nos hemos encontrado un antgeno vamos a tener circulando de por vida un poquito de ese tipo de Ig G para reconocimiento especifico de este tipo de antgenos. Cunto dura ms o menos el promedio la Ig G circulando en sangre? Alredor de 22 das y cuando se daa simplemente se produce un recambio, y de donde sacamos el nuevo anticuerpo? De las celulitas de memoria que han quedado guardadas tambin con el reconocimiento de ese mismo antgeno. Que caractersticas tiene esta Ig? Que como es monomerica solo tiene esta composicin, entonces es pequea y es capaz de atravesar y salir a las secreciones y por eso perfectamente puede ir en la

leche materna o puede atravesar la barrera placentaria y bsicamente es el mecanismo que utiliza la mam para hacer la proteccin del feto con respecto a los agentes externos, porque si usd recuerdan el nio , inclusive en el primer periodo de vida todava no tiene maduro ese sistema inmunolgico para producir su propia respuesta, entonces se a proteger bsicamente con la Ig G que a pasado la mam a travs de la placenta y por supuesto que ser una defensa a partir de los antgenos que la mam haya reconocido porque si no ,pues no se podra darse de esa manera porque ella no tendra ese tipo de combinaciones. La segunda Ig que vamos a ver es la Ig A, que bsicamente ya no es un monmero, sino que es un dmero. Y esta como dmero en el sitio donde mas abunda que es en las secreciones, en la sangre se puede encontrar como una estructura monomerica pero en secrecin siempre est formada por dos estructuras monomericas unidas por esto que siempre se llamara la cadena de unin o cadena corta. Esta cadena corta va estar unida gracias a que la cadena pesada alfa que tiene estos aminocidos en la regin distal , por el extremo carboxilo terminal, va a tener un poquito ms de tamao ya que tiene 18 aminocidos adicionales y por ese punto es por donde se puede unir la cadena corta para formar la estructura dimerica, que bsicamente va estar a nivel de las secreciones.

Entonces podemos encontrar mucha Ig A que no sea especifica sino que reconozca de manera general antgenos, bsicamente por la memoria que se trae, porque uno dice: bueno y cmo es eso de que hay respuesta de tipo innata? Pues es que esta viene de nuestros antecesores que han reconocido antgenos, entonces por eso nos preparan para tener un sed de reconocimiento inicial que bsicamente no s a ayudar a defendernos, a no ser que encontremos un antgeno con el que nunca ninguna especie humana se haya encontrado en ese caso con la respuesta, por lo que va a ser mas difcil y mas demorada. Caso por ejemplo HIV cuando por primera vez se infecta a un ser humano y pues nadie tiene combinaciones creadas para defendernos de ese tipo de antgeno. Entonces como esta Ig est en circulacin y caractersticamente va a estar en la regin partida de la regin bronquial y dela regin intestinal. Y aqu casi siempre se acompaa de unas molculas de tipo glicoprotena que se denominan componentes secretores que son bsicamente un polipptido que es producido por la mucosa y ayuda a que este anticuerpo no sea destruido bsicamente por proteasas, porque si es una estructura de naturaleza proteica puede ser finalmente degradado y nosotros necesitamos que permanezca all para que si encuentra un antgeno pues reaccione. Entonces este componente secretor que tiene mucha glicosoalacion va a permitir que no haga la digestin proteoltica del anticuerpo, y dure un poquito ms, cunto tiempo?

Tiene una sobrevida de alredor de 6 das y como ustedes lo ven aqu su papel est circunscrito bsicamente a la secrecin pues tiene un poco porcentaje, nada mas ente el 7-15% de las Ig que circulan en sangre son de tipo Ig A. como ya dije, van a estar comprometidos con la respuesta inmunolgica de tipo primario porque es donde primero nos vamos a encontrar un antgeno que seria bsicamente a nivel de las secreciones. La Ig M se produce ms que todo cuando tenemos ahora s una respuesta de tipo especifico, cuando vamos a contestar contra un antgeno que nos encontremos vamos a producir este tipo de Ig, que puede tener dos posible escenarios: - En uno que no est mediado por ningn encuentro con el antgeno, es el que permite la expresin de este tipo de Ig en el linfocito B, entonces cuando hablamos del linfocito B virgen y su exposicin de anticuerpo a travs de la membrana, la caracterstica bsica es que all vamos a tener el anticuerpo pero en forma monomerica, es este momento a reconocido algn antgeno? No todava no ha reconocido ningn antgeno, sino que trae de forma general muchas combinaciones de aminocidos distintos para las regiones variables sean diferentes y en ese orden de ideas pueden reconocer diferentes antgenos.

Pero cuando ya se ha producido la estimulacin de la respuesta inmune de tipo especifico es la primera que se va a producir, y entonces como es muy grande, como va salir a circulacin formando una estructura pentameriaca, y esta estructura va a estar unida mediante otra vez la formacin de una cadena corta, esta Ig va a tener un dominio adicional ac en la porcin distal, ya no tiene 4 como las dems sino que tiene 5, y ese 5 dominio es el que permite que de esta manera venga y se una la estructura de unin para permitir la formacin de de ella.

Entonces difcilmente una Ig M sale del torrente circulatorio porque no cabe por ninguno de los espacios, por eso no es la Ig que va responder en un feto, ni va a atravesar la barrera placentaria ni indistintamente va a ir a la secrecin, ni a la sangre como si lo hace la Ig G. sino que esta circunscrita al espacio intravascular. Esta Ig M no vive sino slo 5 das por esta razn las pruebas que se hacen en el laboratorio para detectar una primoinfeccin tienen que ser muy claves dentro del periodo de tiempo si uno quiere detectar la Ig M porque sino rpidamente va a desaparecer, y bueno en termino diagnsticos tendra la ventaja de que estaramos hablando de que probablemente entonces ya paso el momento de la infeccin pero si nosotros estamos es revisando, como es el caso de una rubiola que nos interesa que la primo infeccin sea en el

primer trimestre del embarazo para tener una connotacin de tipo patolgico, pues entonces es muy importante estar haciendo seguimiento por si no coincidimos con los 5 das, pues en este caso vamos a tener el inconveniente que aparentemente pasara por una prueba falsamente negativa. Y como lo dice ac es la Ig que primero se va a producir cuando nosotros nos exponemos a un antgeno por la va que dijimos que era de activacin especifica y despus del quinto da se hace el cambio de swchiss (NO SE SI SE ESCRIBE ASI) para colocar ahora como regin constante la de la cadena gama que sera la de ah en adelante el anticuerpo de tipo Ig G. Como tiene 5 estructuras (pentamerica) por supuesto es la que ms pesa porque bsicamente vamos a tener muchos aminocidos conformados. Hay otros dos tipos de Ig que algunos libros las llaman menores, y esto es para decir que son las Ig que hacen un mnimo aporte y aquellas que no estn tan elevadas en la sangre. La Ig D, desde el punto de vista inmunolgico a la fecha no se sabe cul es su papel, ni realmente para que sirve. Lo nico para lo que se ha podido encontrar que tiene importancia es porque funciona como receptor antignico de la superficie de los linfocitos B y entonces en ese orden de ideas pues permite reconocer al antgeno para despus afinar la respuesta como les deca. Otra caracterstica es que tiene bastantes carbohidratos unidos a su estructura, parte de ellos son los que le ayudan a anclarse a la

membrana, para que se quede expuesta all para presentarse al antgeno para poderlo reconocer. Su peso es de 150 kilodalton y como es tan bajita su circulacin porque estn circunscritas al linfocito, por eso el total que tendramos en sangre de ese tipo de anticuerpos es menor del o.5%. Porque en realidad su papel lo est desempeando a nivel del linfocito B virgen. La Ig E que tiene como cadena pesada la exilom, tiene un peso de 200 kilodalton, porque tambin en general no se activa una solita sino que se activan dos molculas cada vez que vamos a tener una activacin de esta va. De la forma podramos decir que es incorrecta, cuando la Ig E se activa significa que el reconocimiento del antgeno no fue el ms adecuado sino que el reconocimiento tuvo mediado por la activacin bsicamente de los mastocitos o de los basofilos, y porque se puede dar este proceso? Porque resulta que la regin constante de esta Ig tiene una alta afinidad por receptores que estn ubicados en estas clulas, entonces funciona la Ig como un puente: el antgeno se une a ella, el antgeno transmite la seal y con ello activa al mastocito para que bsicamente haga que primero haga un entrecruzamiento entre su receptor para que se genere la degranulacin y segundo para que abra las compuertas y se liberen las aminas basoactivas que son las que van a despertar toda la respuesta de tipo alrgico. Por esto es que esta Ig se relaciona bsicamente con la respuesta de tipo alrgeno, que es

la respuesta en la que vamos a tener una exacerbacin mayor cada vez o entre ms nos expongamos al mismo tipo de sustancia alergnica.

XV CLASE Habamos dicho entonces que la respuesta de tipo humoral comprenda produccin de inmunoglobulinas que eran secretadas por las clulas plasmticas, que esas clulas plasmticas a su vez eran una diferenciacin de los linfocitos B, que iban a subdividirse en dos lneas: Un grupo que iba a formar clulas de memoria, otro que iba a formar los plasmocitos, y que dependiendo de cual fuera su cadena pesada o su cadena H, pues tenemos las subdivisiones en 5 tipos de anticuerpos o inmunoglobulinas, de las cuales ya dijimos que la: Ig A: estara preferencialmente ubicada en los sitios donde tuvisemos secreciones de mucosas para servir como una barrera inicial y tratar de sacar al antgeno cuando este aun no ha invadido nuestro torrente circulatorio. Ig M: Que tenamos una Ig que por el contrario cuando nosotros tenamos una invasin del antgeno, porque las barreras primarias y las

respuestas de tipo inespecfico o innato no haba sido capaces de evitar que pudiesen causarnos dao, entonces bamos a activar la presentacin de un antgeno para generar la produccin de Ig M como primera lnea de defensa que nos permitira identificar cuando fue el primer encuentro con l y por lo tanto cuales serian los 5 das claves de inicio de la respuesta inmune contra un primer antgeno Rta. A estudiante: recuerden que esta Ig M, de la que yo estoy hablando es la que se secreta y que por lo tanto esta en torrente circulatorio o en los tejidos alrededor de la clulas, esa es la que generalmente sale como una estructura pentamerica y va a funcionar nicamente cuando hay una respuesta por la va clsica que finalmente lleva a un reconocimiento antignico, esa Ig me permite detectar mi primer contacto con un antgeno cuando este pasa barreras y llega al interior del organismo. Pero exista otra Ig M que es monomerica, y que se expresa en la membrana del mismo linfocito B virgen que ayer les mencionaba junto con la Ig D, cuando veamos los mecanismo de regulacin gentica el semestre entrante, uno es ese splicing que hace que algunas veces tengamos una cadena ms larga y a veces una ms corta, eso determina que la Ig pasa la membrana del linfocito B sale y forma la estructura pentamerica y entonces ser la Ig M para secretar. O si la Ig M es ms larga no atraviesa la membrana y se queda

anclada en forma monomerica. Esa no sera una Ig de especificidad, no estara respondiendo a un reconocimiento de respuesta inmune especfica sino que formara parte junto con la D de la respuesta inmune innata, la inespecfica que todava est esperando encontrar un antgeno para hacer un reconocimiento inicial. O sea es como un subtipo de Ig M que no funciona como la M pentamerica secretada, ni est reconociendo especficamente a ningn antgeno, todava est a la espera de encontrar algn antgeno. Entonces es esa monomerica la que se homologara a la D, alternada en el linfocito B esperando un reconocimiento inicial que sera un linfocito inmaduro que todava no ha hecho reconocimiento. En cambio esta (Ig M pentamerica) si se est secretando como una estructura pentamerica y en secrecin, es que ya hubo un reconocimiento antignico. Y cuando tenemos alrededor de 5-6 das de estimulo produciendo Ig M, se hace el cambio para que la porcin Fc ahora sea la que corresponde a Ig G y esa es la que va a permitir que se ataque directamente al antgeno y va generar la respuesta que consideraramos de memoria por la va humoral, porque ahora vamos a tener guardados permanentemente en circulacin, niveles bajitos s, pero habr anticuerpos de tipo Ig G esperando encontrarse el antgeno, y vamos a ver una gran diferencia entre la primo infeccin y las infecciones posteriores que es la velocidad de reaccin, porque la primera vez nos vamos a demorar y la segunda es

inmediata y va estar mediada bsicamente por este tipo de Ig. Ig D: a la fecha todava no se sabe que papel desempea dentro de la respuesta inmune, lo poco que se sabe es como funciona como receptor de linfocitos B inmaduros y que va a atrabajar reconociendo de manera general y burda el antgeno cuando se lo pueda encontrar un linfocito B que todava no ha sido estimulado por ningn antgeno. Ig E: que se produce como una respuesta errada a un antgeno que genera el desencadenamiento de la respuesta inmune pero por la va alrgica y que como ustedes saben, puede llegar a exacerbarse esta respuesta hasta comprometer la vida del paciente, como por ejemplo una contraccin prolongada y permanente desde los bronquios que puede causar una muerte por asfixia. Entonces que caractersticas tiene esa respuesta inmune de la que vamos hablar ahorita, porque ayer ya hablamos de la inespecfica-innata, pero que de verdad no tiene preferencia por ninguna antgeno en especial, sino que es general. Esta (la especifica) en cambio va a ser la respuesta que yo solo desencadeno OJO, esta respuesta adquirida solo se va a desencadenar si el antgeno supero las barreras inciales, o sea

si la respuesta inespecfica no fue capaz de destruirlo. Y cuando eso pasa entonces nos imaginamos el antgeno en la linfa, en la sangre o en algn tejido, o sea en un inoculo de esas estructuras y por lo tanto teniendo la posibilidad de que nos pueda pasar algo. Entonces la que se denomina respuesta inmune adquirida, porque de hecho solo es ma, porque yo soy la que me estoy encontrando con ese antgeno no mis antecesores, si no que de m para adelante va aquedar como respuesta innata para los descendientes mos. Esa tiene la caracterstica: 1. Es especfica por un determinado antgeno: tenemos respuesta inmune adquirida para cada antgeno que nos hayamos encontrado que haya superado las barreras. 2. Solo va actuar cuando no hayamos tenido xito con la respuesta no especfica o innata. 3. El antgeno funciona como una estructura individual porque vamos a producir una respuesta con base en el reconocimiento de receptores especficos nuestros por ese tipo de estructuras. Vamos a ver entonces que le receptor T y las molculas del complejo mayor____ (no entenda), van a poder favorecer que se pueda reconocer al antgeno aqu a nivel del inicio de la respuesta inmunolgica.

Y una cosa muy importante es que obviamente es primordial y bsico que podamos reconocer que es nuestro y que no, por eso si encontramos un antgeno es porque hay un reconocimiento como algo extrao y en ese orden de ideas hay que entrar a destruirlo, ese es el caso que se da cuando tenemos una autoinmunidad y de manera errada asumimos que algo propio es extrao. Y entonces a quien lo toca esa tarea de poder hacer el reconocimiento de lo propio y de lo que es ajeno, de quien es ese papel? El sistema ms polimrfico que tenemos de todos, el que nos da especificidad de persona, es el complejo mayor de histocompatibilidad, que en el caso de los humanos se llama HLA, es lo mismo solo que suscrito a nosotros los seres humanos, el complejo mayor cuando estamos hablando por ejemplo en el ratn se llama H2 y en nosotros es el HLA. Este es el que tiene a funcin de determinar que es y que no es de nosotros y por lo tanto por ah debe estar el error cuando nosotros hacemos reconocimientos inadecuados tambin de antgenos. Otra cosa muy importante es que inicialmente la respuesta es muy demorada y porque es demorada porque hay que hacer una seria de pasos: reconocer, comer el antgeno, presentarlo, estimular la clula T, ella ir a estimular al linfocito B, el B transformarse y finalmente producir un anticuerpo . Entonces va

a pasar por lo menos 15 das antes de que, de manera efectiva respondamos contra el antgeno, eso es lo que ustedes van a ver como una fase sper critica que se llama el periodo de ventana: es cuando alguien est infectado, pero como no ha hecho respuesta inmune, en general se interpreta cuando uno le hace pruebas de laboratorio como una persona que no ha respondido con produccin de anticuerpo, por lo tanto aparentemente no tiene infeccin y resulta que ms adelante si haba, lo que pasaba era que estbamos en ese periodo de tiempo en el que habiendo infeccin, aun no tenamos respuesta de tipo inmune, entonces el periodo de ventana es complicado a la hora de tratamientos y diagnsticos, porque nos puede dar falsos positivos. Pero en realidad es eso todava no hemos tenido un nivel suficiente de respuesta inmune debido a que es la primera infeccin y esa es un poco mas demorada de visualizarse por decirlo as. Y por ultimo otra cosa importante de la respuesta inmune, es que adems de ser especifica tiene como segundo componente que tiene memoria, y esa es la que permite que cuando haya la segunda, la tercera y la cuarta vez que me vuelva a encontrar con el antgeno, no me haga nada, porque ya lo va a reconocer y lo va destruir, salvo contadas excepciones, como por ej., un compromiso inmune pues no va a

responder igual. Pero Por qu me dan 20 gripas en la vida? Porque hay serotipos distintos del mismo virus que generan variantes diferentes y como ser de especifica la respuesta que el sistema inmune sabe que ese no es el mismo virus de antes, sino ligeramente diferente y esa es la misma estrategia que utilizan muchos virus para estar rpidamente mutando y aparecer con una nueva figura, por ej. El plasmodium hace eso todo el tiempo, por eso la inefectivdad para generar vacunas contra l se debe a que: 1. Tiene 4 etapas en la vida entonces se puede presentar de 4 formas antignicas diferentes. 2. Y luego cada una de esas 4 formas cada rato las est mutando, entonces todo el esfuerzo que se ha hecho por reconocerlo queda perdido una vez que el organismo muta. Qu caractersticas tiene esa respuesta inmune especfica? 1. Que entonces la activacin de la lnea de las clulas es especficamente para el grupo de linfocitos y vamos a ver que en realidad quien lleva la responsabilidad de la respuesta inmune es el linfocito T, todo lo dems se deriva de l, y entonces el al

producir el estimulo de los otros linfocitos va generar que se exacerbe y se amplifique esa respuesta en el momento de la activacin. 2. Si, por el lado celular tenemos estos linfocitos que van a reconocer especficamente un antgeno. Por el lado de lo que se llama humoral, tenemos los anticuerpos que son las mismas Ig y que como sabemos deriva de aqu, porque esto es una clula B que se convirti en plasmocito y el empez a producir anticuerpos. Cuales eran las lineas de inmunidad celular en la respuesta inespecfica? La inmunidad celular estaba mediada por los polimorfonucleares, neutrofilos, basfilos, eosinofilos, estos (linfocitos) tambin podran llegar a intervenir de manera general y tambin los monocitos que actuaban como macrfagos, en general toda la batera de los glbulos blancos, de manera inespecfica y general. Y desde el punto de vista humoral quienes actuaran? La produccin de sustancias secretadas por las clulas activadas, una de las cuales era el complemento, en ciertas ocasiones la respuesta de produccin de sustancias que van actuar estimulando molculas muy cercanas hara que este tipo de

estructuras funcionara como glndulas paracrinas, o que esas mismas molculas estimular a la misma clula como para generar la expansin clonal, y eso sera un mecanismo autocrino. Producir estimulo de lo mo y de lo que est alrededor para incrementar la respuesta. Bueno adems del complemento, estn los mediadores de la inflamacin como todas las citoquinas, que incluyen el grupo de Las linfoquinas, las quimioquinas que migran, los interferones alfa, gama y finalmente los derivados del acido araquidonico; las prostaglandinas y los leucotrienos. Esos son los responsables de la respuesta inmune humoral

Entonces como se da el reconocimiento cuando la forma de reconocer es la correcta: Lo primero que tenemos es q hay un antgeno q super las barreras y est en el interior. Lo primero es que el antgeno va a ser reconocido por las clulas presentadoras de antgenos, los ms comunes los macrfagos, y si estn ah en la sangre se llaman monocitos, algunas clulas que estando ubicadas dentro de los tejidos funcionan como clula estimulante, por ej. Las

clulas de Langerham que en realidad son macrfagos, las clulas dendrticas tambin pueden funcionar, las de Cooper, es decir todas aquellas que en un tejido funcionen como macrfagos, pero una q no sea macrfago? Los linfocitos B, porque recuerden que yo dije ayer que poda suceder que el antgeno estimulara directamente al linfocito B y lo poda hacer porque tena sus Ig de membrana que permitan el reconocimiento de manera burda, pero de todas maneras se estimulaban y producan una respuesta especfica y en ese caso el B le presentara al T. Entonces toda la lnea de los macrfagos mas la lnea de los linfocitos B pueden ser clulas presentadoras de antgeno. Por ser presentadoras de antgeno tienen una particularidad que no tienen las dems. Vamos a suponer que este es el antgeno, esta es la clula presentadora de antgeno (CPA) como un macrfago, y lo que va ocurrir es que esta fagocita y se come al antgeno y tenindolo dentro lo rompe en pedacitos para presentarlo al linfocito T, pero cual, porque hay subgrupos, se lo presenta al CD4+ (ayudadores), los CD8+ son los citotoxicos. Entonces para diferenciarlos, el linfocito T que en este caso recibe la razn por as decirlo de la CPA es el T CD4+ que tambin lo van a encontrar simultneamente con la palabra CD8 negativo. Muchas clulas llegan al timo con los dos marcadores expresados son CD4

yCD8 positivos y el timo decide a quien le deja CD4 y a cual CD8. Entonces la CPA para que le pueda presentar el antgeno al linfocito T necesita fijarlo en su membrana y hacer algo como esto: producir una estructura que le permita que el(antgeno) quede en el centro, para que pueda ser reconocido por el linfocito T que va a tener un receptor T de membrana y cuando se acerca fsicamente a la CPA vamos a tener un sndwich en el que en la mitad esta el antgeno, de un lado est la molcula que expresa la clula presentadora y de este lado est el receptor T. Entonces se pasa la seal desde la CPA al linfocito T. Pero de que es esta estructura que vemos aqu? Es del complejo encargado de reconocer lo propio y lo no propio, es decir son molculas del sistema HLA, del complejo mayor de histocompatibildad. Y dentro de este complejo tenemos bsicamente dos tipos de estructuras polimrficas: las de clase I y las de clase II. Tienen diferencias: la de clase I tienen 3 cadenas polipeptidicas unidas formando tres dominios y se asocia con una cadena que es la B2 microglobulina, que no es propia pero que se le asocia. Cuales clulas de nuestro organismo tienen expresado estas molculas de clase I: la CPA, entonces todas las clulas nuestras tienen molculas de clase I en su membrana porque son las que dan especificidad de persona, ej. Permiten que reaccione contra algo que no es mo. En cambio las molculas de clase II son expresadas nicamente por la CPA que son la tanda de macrfagos de todos los tejidos ms los de la

sangre y los linfocitos B. Entonces cuando decimos que hay que formar un sndwich el pedacito de antgeno que el macrfago se comi y que va a presentar al linfocito T, en realidad el que funciona como mecanismo de presentacin del antgeno es la molcula de clase II porque esa es la que es selectiva de la molcula presentadora de antgeno. Fjense que esa molcula est formada por 4 unidades: dos alfa y dos Beta, aqu si tenemos dos brazos y tenemos una estructura desde el punto de vista funcional muy parecida a la otra que est en el linfocito T y que sera el receptor T. Estas dos estructuras, las molculas de clase I y las de clase II van a ser codificadas por varios genes, no por uno solo, por qu por varios? Porque imagnese si yo necesito reconocer mil antgenos a lo largo de mi vida, bueno por ah 200 tengo que tener mltiples combinaciones de las regiones BDJ variables del anticuerpo para producir 200 anticuerpos distintos que reconozca cada uno a un antgeno, como ser ___ nueve mil millones de personas que hay en la tierra y q cada uno sea distinto, entonces las combinaciones que el complejo tiene que hacer para que yo no sea igual a alguien son muchsimas. Entonces en ese orden de idea, los 3 genes que codifican para las molculas de clase I son el: A, B y el C. En l A hay por lo menos descubiertas ms de 80 variables desde al A1-A8, en la B por lo menos 35, en el C por lo menos 25, entonces imagnese escoger uno de 35,

con uno de 25 para que las combinaciones puedan ser todas diferentes. Estos son los tres genes que van a producir las molculas de clase I. Las molculas de clase II involucran 3 genes que se llaman los genes DP, DQ, DR y cada uno de ellos con mucha variabilidad, pero no tanto como los de clase I, porque los de clase I van a estar en TODAS las clulas y me van a diferenciar de otro individuo, los de clase II en cambio funcionan mas como estructuras para presentar antgenos. Entonces de todos esos 6 genes que en ltimas quedan, la combinacin de las distintas variantes de cada uno de los subtipos que cada uno tiene es lo que originaria el complejo completo que da la especificidad a cada individuo. Por supuesto que ellos estn ubicados todos muy cerquita, estn en el brazo corto del cromosoma 6, entonces ustedes van aprender que, que pasa cuando unos genes estn muy cerquitas fsicamente en un cromosoma, que pasa cuando hay divisiones? Qu pasa con eso del fsicamente cerca? Es lo mimos tener unos genes cerca q alejados? Que pasa cuando estn cerca? Entonces como los fenmenos de entrecruzamiento son al azar es muy improbable q unas cosas todas muy cerquitas sean precisamente separadas por los entrecruzamientos al azar, y a eso es lo que se denomina genes ligados. Que significa que tienden a irse juntos, porque por estar muy prximos difcilmente los entrecruzamientos los van a separar y entonces se heredan en bloque y heredar en bloque es el concepto de haplotipo que significa cual es la

combinacin que tengo para esos 6 genes(los 3 de tipo I y los 3 de tipo II) y como esos todos en conjunto van a heredarse igualitos, porque difcilmente por no haber all recombinaciones se generara combinaciones distintas. Otra cosa importante es que cuando un gen tiene muchas formas posibles de ser, como se llama cada forma posible de un gen: alelo. Entonces cuando yo digo que el HLA es un gen de clase I que tiene por lo menos 55 variantes distintas, eso era cuando yo estudiaba, ahora deben haber 70. Entonces supongamos q tuviramos 55 combinaciones es decir que es un gen que tiene muchas formas de alelos, es decir tiene 55 formas distintas de ser, eso quiere decir que es un gen polimorfico: muchas posibles formas de ser. Y al ser polimrfico significara que a pesar de q yo tengo 55 formas distintas, cuantas de esas formas convergen en m? Yo cuantas puedo tener? DOS formas porque siempre recuerden el concepto de que nosotros somos diploides es decir tenemos dos de cada cromosoma, entonces tenemos, un 6 heredado del papa, un 6 heredado de la mama por lo cual cada uno de ellos me regala los 6 genes entonces a pesar de que hay 55 formas de HLA-A yo solo puedo tener un ejemplo el A9 y el A7, como quiera, pero por persona solo tenemos 2, y recordamos si son dos formas distintas se es heterocigoto, si ambos cromosomas tenan los mismos alelos son iguales, se es homocigoto. El polifmormiso se refiere a q tengo muchas opciones al igual que

todos en el mundo, pero para m solo van a quedar dos. Otra cosita, si esas protenas estan codificadas por genes y esos genes vienen en los cromosomas que me dan mis familiares yo podra hacer seguimiento de flia. Con base en el subtipo que se tiene, o no? Lo heredado no se puede rastrear? Claro que si ese es el concepto de herencia. Entonces ser que si mi papa tena el 55 y el 52 a mi me toca o el 55 o el 52?Si, si es mi papa, y si mama es 15 y 19, a mi me toca el 15 o el 19, si esa es mi mama. Entonces antes de que se descubrieran los STR lo que haciamos era tipificacin de HLA porque son los genes ms polimrficos que tenemos en el organismo son ellos. No me da un poder de discriminacin tan grande como las pruebas de ahorita pero tambin se pueden hacer a partir de all. Entonces tenemos claro que las CPA va a tener molculas de clase I y de clase II, pero OJO las molculas de clase II solo se expresan si tenemos un antgeno que se fagocito y que tenemos q expresar, entonces no se imaginen las molculas de clase II mostrndose, ellas solo se producen y sintetizan si hay antgeno para expresar. Entonces, eso que ven aqu en azulito es uno de los derivados de clase II de los antgenos HLA, que en esta caso es el nombre q se le da en los humanos al complejo mayor de histocompatibilidad. Vemos que el

receptor t se acerca y se une para traducir la seal a ese linfocito T, pero van a ver que para que la unin sea ms eficiente intervienen unas molculas de adhesin que ayudan a reforzar y mejorar el contacto entre las dos, entonces en el caso del receptor T, cuando l se aproxima a la CPA con su antgeno, cerquita de ese receptor siempre van a estar unas molculas de adhesin que son las CD3 acompaando al receptor T para mejorar, como el CAM1 y 3 a lado y lado de la clula para reforzar la unin y favorecer la estimulacin del linfocito T. entonces quedo el linfocito T estimulado, gracias a que el macrfago que se comi el antgeno, lo proceso , lo parti, fjense que aqu les est mostrando cmo e n el momento en el que se parte es q se produce el complejo de clase II, viene pegadito el antgeno con l, lo expresa en su membrana y viene el receptor T con sus molculas de adhesin al lado para favorecer la unin, y dijimos que el linfocito T que bamos activar era el CD4+. Como el va ayudar y favorecer que se expanda la respuesta inmune, por eso el linfocito T que tiene el CD4 se llama linfocito T ayudador, porque va estimular la respuesta inmune. Entonces una clula que se acaba de estimular por el reconocimiento de un antgeno, va hacer 3 cosas: 1. Va a producir sustancias propias para magnificar la respuesta inmune, como son producidas por linfocitos se llaman interleukinas(ik). Hay distintos CD4 dependiendo

del tipo de interleukina q produzcan, los que van a magnificar la respuesta por esta va correcta, van a producir ik de tipo 2, y esta ik funciona de forma paracrina, porque va hacer dos cosas: la # 1 va estimular al propio linfocito T pa q se divida y forme mltiples clones, y la otra cosa que va hacer es q va ir a estimular a los linfocitos B, que hasta aqu serian inmaduros y a partir de all se convertiran en dos lneas: una que seria clula de memoria, y otro que va a cambiar su morfologa para pasar a ser una nueva clula que es la plasmtica y que es la que va producir los anticuerpos. como este linfocito T ya reconoci un antgeno y hemos estimulado a un B que reorganiza sus genes para reconocer finamente al antgeno, estos ya sern anticuerpos sumamente especficos contra ese antgeno y van a ir a destruir. Como lo destruyen? Bsicamente porque reconocen por la porcin abierta al antgeno y donde se encuentren el antgeno y lo unan por ac, supngase que este era una celulita y ella estaba expresando parte de las opciones del antgeno en su membrana, entonces viene lo reconoce y se activa la porcin distal que es la Fc(efectora) y lo que hace es activar el complemente, ellas llegan y empiezan a formar poros en la membrana y rompen la integridad de la clula y la clula termina rompindose por los poros que se forman, por el complemento que

viene y rompe y este complemento ha llegado por la activacin de la porcin distal (Fc) del anticuerpo que a su vez al venirse a pegar al antgeno le est diciendo al complemento a q sitio debe llegar y donde debe actuar. Entonces esas molculas de complemento las van a ver como protenas inactivas cuando no hay antgeno y solo se van activar, es decir estbamos primero en una conformacin espacial y vamos a cambiar la estructura. Esta va q acabo de mostrar, es la va clsica de produccin de respuesta inmune, ella va a tener una variante q es relativamente reciente en su descubrimiento:

ahora van a producir ik de tipo 4, 5 o combinadas 3-4. Que caractersticas tiene que sea la va TH2, que miren que la tipo 4 es especifica por el linfocito B para que se transforme a clula plasmtica y produzca anticuerpos pero OJO Ig de tipo E, o sea q esta sera la activacin, pero para cuando se diera para los TH2 en realidad estamos desencadenado un fenmeno de tipo alrgico, porque liberamos Ig E. Y por eso ese mismo linfocito produce ik5 que va estimular a los eosinofilos y por eso en las alergias tenemos una exacerbacin de eosinofilos, porque se da un eosinofilia como respuesta al proceso inflamatorio. La Ik 3-4 estimula los mastocitos, que permitan que una Ig E se posara en sus paredes para dar la apertura de sus canales y la liberacin de los mediadores que la clula tenia como serotonina y la histamina.

Si tenemos la CPA y ella activa al linfocito T CD4+ el a su vez puede crear dos variantes diferentes: esta que sera la de los linfocitos TH1( linfocito T del subtipo H1) que va a producir preferencialmente ik de tipo 2 y va hacer que prolifere la T y las B y permite que el B pase a clula plasmtica y produzca anticuerpo. Qu tipo de anticuerpos, ya saben los primeros das la IgM y ms adelante la Ig G, ahora se sabe q es especficamente la Ig G2a. Este es la va clsica q conocemos, q explique anteriormente. Ahora se sabe que el linfocito Cd4 puede crear la variante TH2, son los mismos t pero

Bueno eso fue si el linfocito T estimulado fue el CD4+ o linfocito T ayudador. Pero cuando la CPA lo que recibi no fue una bacteria sino un virus, se va producir lo mismo que con la bacteria, se rompe en pedacitos, se expone con la clase II, pero OJO primera gran diferencia, se pueden expresar mediante clase II, pero la molcula que preferencialmente va estar aqu es la de CMH clase I, entonces esa es la seal de q la activacin no va a ser

para la CD4+ sino para la CD8+. Activan a un linfocito T que ahora tiene Cd8+ y CD4(negativo) y ese comnmente se le llama linfocito citotoxico as como el cd4 es ayudador. Entonces el citotxico que se estimula gracias a la CPA pero con el CMH clase I, lo primero q hace es que se activa y sabemos que la activacin es la produccin de mltiples clones de el mismo, y el que hace? Reconoce las clulas q estn infectas y en vez de esperar que se produzcan anticuerpos reconoce el antgeno que est en la membrana y rompe las clulas infectadas, por que las rompe?, porque muchos de estos modelos son estructuras que van a estar infectando en el interior de la clula, y si nunca sale lo que hacen los citotoxicos es tener claro q le toca acabar con la clula porque no la puede desinfectar, ya tiene el virus adentro y la clula est infectada. Cuando tenemos la fase lisogenica del virus pasa de agache, sin tomar el control de la celulita, entonces no la destruye ni nada, en todo ese periodo el va estar reproducindose a una tasa bajita, cuando ya toma la fase ltica q es q comanda la clula y produce mltiples viriones tanto q la estallan, ah si el reconocimiento es ms fcil, pero eso es ya cuando la infeccin pasa a enfermedad y pueden pasar aos sin q eso se d. Lo nico que quiero q tengan claro es: 1. Que la respuesta normal implica que se active una respuesta especifica solo si

hemos sido ineficaces por la va de la inespecfica. 2. Que la respuesta especifica va estar mediada por el reconocimiento del antgeno por una CPA, esa clula lo va a mostrar en pedacitos o segmentos al linfocito T y si el desencadena produccin de ik2 se clasifica en el subtipo TH1; va a producir una clonacin de sus clulas y una estimulacin del B haciendo q se convierta en plasmtica y produzca anticuerpos supremamente selectivos contra ese antgeno. De ah que la respuesta sea tan especfica y unificada por cada antgeno. Entonces los anticuerpos van a destruir y la clula tambin porque la idea es acabar lo ms rpido que se pueda el antgeno y circunscribirlo a un rea. Tambin podramos tener activacin del linfocito t por la va de las Th2 que desencadenan un fenmeno alrgico. O puede ser q no presente el antgeno por las CMH2 sino por las CMH1 y cuando eso es as el linfocito que se activa es el citotoxico o CD8+ que en vez de ir a estimular la produccin de anticuerpos, directamente se va matar clulas infectadas. Piensen que pueden estar pasando de ambas cosas al mismo tiempo, mientras que la clula citotxica est destruyendo las clulas infectadas, pues los linfocitos B estn produciendo anticuerpos, van a ver que existe

una estimulacin preferencial de una va o de otra dependiendo de cul sea el antgeno, se sabe q la estimulacin de las CD4 tiene q ver con las infecciones crnicas, adems de intracelulares, ej. tpico: la tuberculosis. Entonces la respuesta mediada por linfocitos CD4 -Th1 es muy buena para infecciones crnicas e intracelulares q pueden ser de bacterias, virus o parsitos. Cuando uno ve un linfocito ni idea q linfocito es, eso se ha logrado establecer por los receptores de membrana q se tienen, porque todos morfolgicamente son iguales, entonces hay q buscar mediante anticuerpos marcados, los subtipos de linfocitos, entonces si veo clulas q se iluminan con anticuerpos antiCD4+ ya s que ese es el grupo de las ayudadoras, si son CD8, las natural killer tiene al cd45, los B tienen el cd19, entonces cada uno tiene un cluster designer(CD) que hace q reconozcamos la subpoblacin y con base en eso diramos que el 50% es T, el 35% es B y el 15% son NK. Y ah tenemos el 100% de linfocitos con funciones distintas claro. Aqu vemos como se desencadena la respuesta alrgica cuando tenemos un reconocimiento q no es el ms adecuado, ac esta el mastocito, fjense las Ig de tipo E se fijan pero no exponiendo su porcin Fc, sino su porcin de reconocimiento del antgeno, como es un antgeno que va a desencadenar una respuesta

alrgica se llama alrgeno. Entonces miren como fija al alrgeno y traduce la seal de activacin de su porcin variable a su porcin Fc y eso quiere decir mastocito abra canales y libere las sustancias q tiene en su interior que pueden estimular por ejemplo a los eosinofilos y dems clulas polimorfonucleares y generen inflamacin y exacerbacin y eso es lo que se observa en un proceso alrgico.

RESUMEN: Nos ubicamos aqu, esto sera un antgeno que supongamos que estando afuera logro pasar la piel, las membranas y se col, y ahora se activara la respuesta de tipo especifica, que significa q primero lo va a ver este macrfago, se lo come y lo expresa en su membrana, entonces esos pedacitos acompaados de la CMH 2 al pasar por la circulacin se encuentran a un T q ser ayudador si tiene un receptor T q reconoce a estas estructuras, cuando eso se da lo primero es q el linfocito T va poder atacar a la celulita q est expresando ese antgeno. (Min 51). CONTINUACION Que pasa cuando la clula presentadora lo que recibi no fue una bacteria sino fue un virus?

Se va a producir lo mismo que con la bacteria y va a producir la clase dos y llega y se presenta, pero ojo, hay diferencias: 1. la molcula que est aqu en la activacin va a ser la molcula uno( complejo mayor de histocompatibilidad tipo I), no va a ser la dos esa va a ser la grande seal para la activacin de la clula CD8+ aqu esta el linfocito que tiene positivo el CD8+ y negativo el CD4-, y este linfocito T CD8+ comnmente se llama cito toxico as como el CD4+ se llama ayudador. Lo primero que se va a ser es activar y sabemos que la activacin es la formacin de mltiples clones de el mismo y el linfocito est en la capacidad de reconocer las clulas que estn infectadas y las rompe entonces en vez de producir anticuerpos lo que va a hacer es reventar la clula infectada y por que rompe clulas infectadas? Porque muchos de estos modelos son de estructuras que van a estar infectando en el interior de la clula.

que romperla para salir y en este momento el virus casi ni se multiplica, que se multiplique la clula. Cuando ya toma la fase ltica y es que comanda la celula y produce multiples vidriones, tanto que la estalla ah el reconocimiento es ms fcil. En la fase lisogenica el va a estar ah reproducindose pero a una tasa bajita, casi que ni se multiplica cuando ya toma la fase ltica y es que comanda la celula y ya llamamos infeccin y se va a desencadenar la enfermedad , y tiene que ver con el condicionamiento inmunolgico de la persona , si la persona logra controlar al virus lo puede tener ah pero en momentos cuando se exacerba la respuesta inmune pasa de la fase ltica a la fese lisogenica .

LO QUE QUIERO QUE QUEDE CLARO:

RESPUESTA A UN ESTUDIANTE: recuerden que el virus pasa por una fase lisogenica y despus por una fase ltica cuando se tiene la fase lisogenica lo que l hace es pasar de agache y nunca tomar el comando de la clula ni producir molculas propias y no tiene

1. Que la respuesta normal especifica se da solamente si nosotros no hemos sido capaces de acabar un antgeno con la respuesta inespecifica . 2. La respuesta especifica va a estar mediada por el reconocimiento al antgeno por una

celula presentadora, lo va a presentar a un linfocito T y si este va a desencadenar la produccin de interleucina 2 se clasifica en el subtipo TH1, va a producir una clonacin de su propia celula a producir una estimulacin del linfocito B va a ser que el linfocito B produzca celula plasmtica, y produzca anticuerpos supremamente selectivos contra ese antgeno de ah que la respuesta sea tan especifica y unificada por cada antgeno y los anticuerpos van a venir a destruir y la mismo la celula por que lo que se intenta es acabarlo antes que se pueda y dems circunscribir a un rea antes que haga una accin generalizada o tambin podramos tener activacin de ese linfocito T pero por las vas de a TH2 que en realidad desencadena en un fenmeno de tipo alrgico o puede ser que no presente en el contexto de las molculas de clase 2 sino en el de clase 1 y cuando es as el linfocito que se activa es el linfocito CD8+ o cito toxico que en vez de ir a estimular la produccin de anticuerpos se va a matar clulas infectadas y adems puede que ambas cosas estn pasando simultneamente ya que las clulas citotoxicas pueden estar destruyendo clulas infectadas y los linfocitos b pueden estar produciendo anticuerpos y van a ver qu preferencialmente va a existir la activacin de una va o la otra.

La activacin de la va CD4 tiene que ver con infecciones crnicas e intercelular ejemplo tpico la tuberculosis y el bacilo no se acaba es porque vive dentro de la celula y entonces muy difcilmente se reconoce y entonces la respuesta mediada por los linfocitos T ayudadores de tipo TH1 es muy buena y efectiva para infecciones crnicas y adems intracelular que pueden ser virus, parsitos que afectan en la parte interna.

Cuando uno ve un linfocito ni idea cual linfocito es si es CD4 si es CD8 si es de la clase 1 o clase2, esto se ha logrado establecer especficamente por los receptores de membrana que se tiene entonces cuando uno quiere subdividir las poblaciones de linfocitos hay que buscar mediante anticuerpos marcados los subtipos escoginedo anticuerpos selectivos por cada receptor, si yo veo clulas que se iluminan por florescencias con anticuerpos antiCD4 ya s que es del grupo de las ayudadoras citotoxicas el anti CD8 tambin , las NK tiene marcadores como el CD45 y los linfocitos B, el CD19. Mas o menos el 50% es linfocito T, el 35 % es linfocito B y alrededor del 15% son clulas NK.

Aqu se ve como se desencadena una respuesta alrgica, cuando el reconocimiento no es el ms adecuado, aparece el mastocito y fjense las inmunoglobulinas de tipo E se fijan pero ya no exponen su porcin FC sino lo que exponen es su porcin de reconocimiento del antgeno y como este desencadena una respuesta alrgica se llama alrgeno. Despus que se fija el alrgeno se traduce la seal de activacin de la region variable a su porcin FC y eso permite la des granulacin de los mastocitos y estos a su vez pueden estimular a los eosinofilos las dems clulas polimorfo nucleares generan inflamacin y eso es lo que se observa cuando tenemos un proceso de tipo alrgico

a poder ir a estimular a la celulita que esta expresando parte de ese antgeno y la empieza a atacar con las molculas que el produce, con las citoquinas y estas pueden estimular a los linfocitos T citotoxicos y el directamente viene y rompe las clulas infectadas o esa celula T va a poder clonar y formar multiples clulas igualitas que van a quedar como clulas de memoria o puede ir a estimular a la celula B y estas pueden ir a formar cel plasmtica o cel de memoria. Esta celula plasmtica va a producir anticuerpos muy especficos y asi se ven yendo a la celulita infectada, el antgeno puede estar en circulacin soluble o aqu lo ven en una celula y en este caso la va seria la de activacin de la porcin FC con atraccin de complemento para que se le forme multiples poros a esta celula la hinche y la estalle. Y vemos que nosotros con los linfocitos T podemos hacer que se proteja la celula ya que lo que hacemos es rpidamente destruir el foco de celulitas infectadas y evitar que la respuesta de la invasin del antgeno se magnifique y nos gane en la cantidad de respuesta inmune que nosotros tenemos, en realidad cuando una infeccion se va complicando mi respuesta inmune no fue suficiente para un inoculo de antgeno muy grande o que muy rpido se multiplico y fue ms eficiente que la tasa de destruccin por parte del sistema inmunolgico.

RESUMEN: Nos ubicamos aqu: supongamos que este es un antgeno que estando afuera logro pasar la piel, las mucosas, las membranas ahora se activara las respuestas de tipo especifica, entonces el macrfago empieza a presentar pedacitos de antgeno en la membrana y estos pedacitos que viene acompaados de las molculas de clase 2 cuando van por la circulacin se encuetran con un linfocito T que ser ayudador y tiene a un receptor T que reconoce a estas estructuras entonces cuando eso se da lo primero que va a pasar es que el linfocito T va

Los anticuerpos que se producen son especficos para el antgeno porque ya se ha producido la mutacin somtica con reorganizacin cuales son los dos posibles escenarios donde el anticuerpo se va encontrar al antgeno: 1. Que el antgeno este suelto circulando en la sangre, imagnese una bacteria que esta solita y se muestra el antgeno liberado en la sangre 2. El antgeno este en la parte interna de una celula y porciones de l se estn expresando en la membrana porque yo debo tener alguna forma de identificar la celula infectada y como el anticuerpo reconoce esto ya no va a venir solo a atacar a la bacteria en este caso viene y rompe la celula que esta infectada, por eso se dice que en las infecciones intracelulares tocas sacrificar a la celula.

RECORDAR: las clulas plasmticas se formar porque hubo una activacin de los linfocitos B, ellas no se encuentran ah como si nada.

AUTOINMUNIDAD

Si nosotros tenemos porciones de antgenos que van a ser mostrados en clase 1 lo que se va a activar son los linfocitos T supresores o la otra posibilidad es que la citoquina producida por los linfocito CD4 sean capaces de ir a estimular a los cito txicos entonces ellos vayan y funcionen. ESTO FUE UNA PREGUNTA SUELTA Y REALMENTE NO SE SI ESTE BN

Es desencadenar todo lo anteriormente comentado pero con una molcula que funciona como un antgeno porque la reconozco como extraa pero en realidad era ma, entonces van a ver muchas teoras de por qu una molcula ma se comporta como un antgeno. Una que ya no es teora sino que est demostrada es el mecanismo de DOMORFISMO MOLECULAR: un ejemplo como el del chagas, tenemos un parasito que puede infectarnos que est en las glndulas del PITO ese microorganismo entra en circulacin nuestra y tiene el desencadenamiento de la respuesta inmune, resulta que parte de la composion antignica de tripanosoma es idntica a la composicin antignica de las clulas estriadas del miocardio, entonces despus que mi respuesta fue muy buena para destruir el parasito, cuando me encuentre a la celula cardiaca, tambin va a ser muy buena respuesta para daar la cel cardiada y los

pacientes van a hacer una cardiomiopata chagasica, lo difcil es que despus que la respuesta inmune se d ya no hay manera de bloquearla y la inmunosupresin es antes que esta respuesta inmune se d.

Hay pacientes que desarrolla la cardiopata y otros no todava no se sabe si tiene que ver con la composicin gentica.

La opcin de tratamiento en esta enfermedad es la inmunosupresin y este puede ser afectado por agentes externos.

molecular. Otras teoras pueden decir que fue las de mis propias clulas de las que debi el timo haber quitado y estas eran de lo del reconocimiento de lo propio y van a atacarme sin que nunca hubiera habido una molcula que me generara la respuesta inmune ah lo que hubo fue una mala regulacin y una mala seleccin de clones y estos ya en la vida adulta por factores muy variados hace que la respuesta inmune se aumente y pues se aumente las reacciones y ahora empieza a reconocer lo propio, y juega otra serie de factores, por ejemplo el estrs es sper determinante, los paciente que desarrollan autoinmunidad en su gran mayora has sufrido un evento catastrfico se ha dado su respuesta inmune ha hecho que empiece a despejarse una va que no sera la correcta.

Los eventos que se observan en la cardiomiopata es el resultado de un desencadenamiento en serie o sea viene el antgeno hay una respuesta inmune contra este antgeno, despus esa respuesta inmune tambin empieza a daar la celula cardiaca y se da el evento de la enfermedad cardiaca. El evento de la autoinmunidad es posterior a la primera infeccin, porque la infeccin quien me la causo, el microorganismo. Eso en una de las posibilidades de autoinmunidad que se llama la del mimetismo

El tripanosoma que afecta en el chagas comparte sus protenas ms antignicas con la fibra muscular cardiaca

Lo que tiene que quedar claro es que cuando haya autoinmunidad hay una respuesta herrada de reconocimiento contra lo propio y lo que se desencadena como respuesta es igualito a que si tuviramos un antgeno externo.

La autoinmunidad es un fenmeno crnico que se mantiene a lo largo de la vida y los fenmenos alrgicos son ms agudos.

RECORDAR: LO QUE VIENE DE LOS GENES MATERNOS SE DEDICA A FORMAR Y A CRECER EL EMBRION Y LO QUE VIENE DE LOS GENES PATERNOS SE DEDICAN A LOS TEJIDOS EXTRAEMBRIONARIOS.

Cuando hacemos determinacin de protenas en un suero el fibringeno se ha consumido para formar el coagulo de fibrina entonces en suero realmente solo vamos a detectar albumina y globulina y para ser mas exacto en realidad detectamos protenas totales y albumina y querr decir que las protenas totales si les resto la albumina me da las globulinas, el grupo de los anticuerpos que est aqu dentro del grupo de las globulinas estn nicamente en la banda gamma por eso se llaman tambin gamma globulinas o inmunoglobulinas porque son globulinas que cuando se separan electroforticamente pues van a presentar un patrn ms alto que las de tipo gamma, entonces puede suceder que los diferentes linfocitos se transformaban en plasmocitos y vana formar inmunoglobulinas determinadas, si tenemos una respuesta Alrgica pues va a ver igm E pero de pronto reconocemos otro antgeno diferente entonces el produce igm G pero puede ocurrir que esos plasmocitos tenga una transformacin maligna y degeneren en cncer MIELOMA MULTIPLE: Proliferan de forma maligna las clulas plasmticas estas van a empezar a producir anticuerpos que no tiene alta especificidad en la porcin variable porque es q en realidad fue una proliferacin de una primera lnea celular y va a producir cncer, y en general el evento aparece despus de los 50 aos, aparece un

En el laboratorio uno puede medir los niveles de protenas totales o inmunoglobulinas especficamente. Cuando se ve en una electroforesis el patrn de las protenas, aqu se est haciendo en primer lugar por su cantidad y por su migracin cerca del polo positivo, estar la albumina, despus las alfa protenas despus las beta y despus las gamma y estas alfa, beta y gamma son la globulinas. En general las protenas plasmticas son tres las ms grandes en el orden de gramos, la albumina, la globulina y el fibringeno.

dolor muy fuerte en la columna, la escapula, calambres y lo que est en realidad pasando es que la proliferacin monoclonal de estas clulas est creando pequeos tumores de clulas plasmticas en sitios como a nivel de los huesos por la medula osea. Se puede generalizar la osteoporosis, los sntomas son debidos a la proliferacin celular. Ocurre que como se estn produciendo tantos anticuerpos las cadenas livianas son capaces de salir por la orina y pueden llagar a formar insuficiencia renal y la otra posibilidad es que las protenas que en plasma no se elevaron, las cadenas livianas de los anticuerpos se detecten en la orina y se conoce como protena de benter jones, ud ve la orina comn y corriente la calienta a 50 grados y la protena de benster jones se precipita y entonces la ve cmo se va al fondo y es una muy buena prueba diagnstica. Recuerden que las cadenas livianas pueden ser kappa o lambda. Estos pacientes van a tener anemia e hipercalcemia en general.