RETORNO

XII Congreso Nacional de Biotecnologa y Bioingeniera

ESTABLECIMIENTO in vitro DE SEMILLAS DE Stanhopea tigrina BATEMAN (ORCHIDACEAE) EN DISTINTAS ETAPAS DE DESARROLLO
Chvez Mndez Vicente, Flores Morales Areli, Chvez vila Victor M. Instituto Tecnolgico del Altiplano de Tlaxcala, Mxico. Km. 7.5 Carretera Fed. Sn. Martn Texmelucan Tlax. Tel y fax: (01248) 4842819. floresafm@hotmail.com Palabras clave: orqudeas, micro propagacin, Stanhopea tigrina Introduccin. La familia Orchidaceae es la mas grande dentro de las monocotiledneas con una estimacin entre 20 000 y 30 000 especies, puesto que cada da se descubren nuevas especies. En Mxico se distribuyen ms de 1,200 especies distribuidas en 164 gneros los cuales son abundantes especialmente en los bosques de neblina (1), que es un ecosistema frgil y amenazado por la deforestacin; Stanhopea tigrina pertenece a este ambiente y es una especie endmica de Mxico distribuida en la Sierra Madre Oriental (2). Se encuentra amenazada segn la Norma Oficial Mexicana (3). La utilizacin de las tcnicas biotecnolgicas de cultivo de tejidos vegetales, han sido fundamentales para propagar orqudeas mexicanas con diferente estatus de alteracin, debido a su dificultad en los mtodos de propagacin por semilla o vegetativamente. Ambos procesos podran tomar varios aos para lograr la propagacin (4). Metodologa. Se realizaron dos procedimientos de desinfeccin: 1. Para frutos verdes cerrados (que no haban sufrido dehiscencia) y 2.Para semillas (frutos que han sufrido dehiscencia). Se utilizaron dos medios de cultivo MS (Murashige y skoog, 1962) al 50 y 100% y KC (Knudson C, 1946). Como explante se utilizaron semillas de S. tigrina de 4, 5, 6.5 y 7.5 meses de maduracin despus de la polinizacin. En condiciones aspticas se establecieron las semillas en cajas de petri, se colocaron en una cmara de incubacin con una temperatura de 25 2 C y fotoperiodo de 16 h luz y 8 h de oscuridad. Resultados y discusin. De acuerdo con (5) la germinacin de las semillas de S. tigrina se realiza despus de los 17 das. En esta investigacin este evento se observ despus de los 15 a 20 das en los tres tratamientos. En la primera siembra cuando las semillas tenan 4 meses y despus de 45 das de incubacin no se observ indicios de germinacin. En las segunda siembra con semillas de 5 meses, en el medio KC se observ el incremento de tamao de algunos cmulos de semillas formndose los protocormos en un porcentaje aproximado menor del 1%, y en el medio MS al 50 y al 100% solo se oscurecieron; esto ocurri en las semillas que se colocaron el oscuridad a una temperatura de 25 2 C, pero en las semillas que se colocaron en fotoperido solo se oscurecieron esto ocurri en los tres tratamientos. De las semillas de 6.5 meses de maduracin se efectu la germinacin a los 15 20 das con un porcentaje aproximado de 90% en los tres tratamientos. En la ltima siembra de 7.5 meses de maduracin se observ la germinacin igual que la anterior.
Germinacin de las semillas de S. Crecimiento de raz y planta tigrina
3.5 3
Crecimiento (cm.)

2.5 2 1.5 1 0.5 0 50% 100% Medio de cultivo KC

Raz Planta

Grfica 1. Se ilustra el comportamiento de las semillas de S. tigrina ante los medio de cultivo.

Conclusiones. Se estableci las condiciones in vitro para la germinacin de las semillas de la orqudea S. tigrina La germinacin se efectu despus de las 26 semanas a partir de la polinizacin. No se observ diferencias en la germinacin en los tres tratamientos. Para el crecimiento de la plntula y raz el mejor tratamiento fue MS 50%, seguido por el MS 100%, en el medio KC solo se observ crecimiento en las races, y lento en crecimiento de plntula. Bibliografa. (1) Hgsater, E., Soto-Arenas, M. A., Salazar-Chvez, G. A., Jimnez-Machorro, R., Lpez-Rosas, M. A. and Dressler, R. L. 2005. Las Orqudeas de Mxico. Instituto Chinon. Mxico. 304 p. (2) ICONES Orchidacearum 2002. 5-6. (3) NOM-059-ECOL-2001 (http://www.ine.gob.mx/ueajei/plantas10_13.html) (4) Martnez Palacios, Alejandro. 1991. Propagacin masiva in vitro y recuperacin de poblaciones de orqudeas de Mxico. Tesis profesional, Facultad de ciencias UNAM. Mx. D.F. (5) Arditti, J. 1992. Fundamentals of Orchid Biology. John Wiley, New York. 691 p.