Resistencia del Staphilococcus aureus a los antibiticos lactmicos dependiente de la zona geogrfica.

ASIGNATURA: PROCESOS CELULARES FUNDAMENTALES Mxico D.F. a 31 de marzo del 2003 Nos hallamos literalmente en una carrera contra reloj para reducir la incidencia de las enfermedades infecciosas en todo el mundo, antes de que sean las enfermedades las que neutralicen a los medicamentos. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Actualmente disponemos de medicamentos eficaces para curar casi todas las enfermedades infecciosas importantes Pero corremos el riesgo de perder esos valiosos medicamentos y la oportunidad de llegar a controlar muchas enfermedades infecciosas como consecuencia del aumento de la resistencia microbiana. Casi todas las enfermedades infecciosas ms importantes estn convirtindose lenta pero indudablemente en resistentes a los actuales medicamentos. En muchos casos, el uso mal planificado o peligroso de medicamentos ha hecho que el mundo los perdiera con la misma rapidez con que los cientficos los descubran. En todo el mundo, nada menos que un 60% de las infecciones nosocomiales son causadas por microbios farmacorresistentes. Las consecuencias econmicas de la resistencia a los antimicrobianos pueden ser impresionantes El mundo dispone quiz de uno o dos decenios tan solo para hacer un uso ptimo de muchos de los medicamentos que hoy pueden utilizarse para detener el progreso de las enfermedades infecciosas(Heymann). JUSTIFICACIN Seleccionamos al S.A. ya que es una bacteria muy importante y patgena para el ser humano; adems, de que la muestra que se utiliza para cultivarla es de fcil obtencin. Una de las familias de bactericidas ms comerciales y ampliados por las personas son los antibiticos betalactmicos y queremos trabajar con esa familia porque son antibiticos que no lesionan el ADN bacteriano pero si inducen la sntesis de la mutasa ADN polimerasa4.* Por otra parte, para realizar este trabajo se requiere la colaboracin de los alumnos del grupo BB17B turno mixto, de la UAMX a quienes se les tomaran exudados farngeos. *Scientific American, diciembre 2002 1

OBJETIVOS Determinar la prevalencia del S.aureus en el grupo BB17B. Encontrar en las muestras de recoleccin, estafilococos de diferentes zonas geogrficas para poder llevar a cabo la comparacin de la resistencia a los antibiticos. Comprobar si la resistencia del S. aureus es la misma en cualquier parte de la republica o depende de la zona geogrfica de su desarrollo. Determinar cual es la causa de frmaco resistencia del S.A. en los estados de, Puebla, Hidalgo, D.F., Edo. de Mxico, Morelos en base a la procedencia de los alumnos del grupo BB17B. INTRODUCCIN El Staphilococcus aureus es una bacteria Gram Positiva redondeada, que aparece como elemento aislado, formando parejas ttradas o agrupaciones irregulares arracimadas.

Pertenece a la familia Micrococaceae, dentro del gnero, se reconocen al menos 20 especies diferentes, siendo el SA la que con mas frecuencia produce infecciones en el hombre.

Este microorganismo coloniza con frecuencia la piel y membranas mucosas sin causar infeccin. No invade la piel sana, pero mnimas roturas de la barrera cutneomucosa le permiten penetrar en los tejidos y causar una gran variedad de infecciones y cuadros clnicos debidos a la produccin de toxinas . Consideramos a la resistencia microbiana como la prdida de la sensibilidad de un microorganismo a un antimicrobiano al que originalmente era susceptible. Este hecho involucra necesariamente la aparicin de un cambio permanente en el material gentico del microorganismo, que se transmite a sus descendientes, los que por este motivo resultan tambin insensibles al antimicrobiano en cuestin. La resistencia microbiana constituye un problema de grandes implicancias clnicas, pues obliga al desarrollo y utilizacin de nuevos agentes antimicrobianos, siempre ms costosos y muchas veces ms txicos que los empleados habitualmente en el tratamiento de las infecciones; adems ha obligado a abandonar y eliminar del arsenal teraputico a muchas drogas que inicialmente fueron muy tiles. CONTENIDO CAPITULO I GENERO STAPHILOCOCCUS Staphilococcus aureus Fisiologa Toxinas Composicin antignica Patologa

Patogenia Identificacin en el laboratorio Epidemiologa Prevencin Tratamiento Datos clnicos CAPITULO II Antecedentes histricos de los antibiticos. qu son los antibiticos? Tipos de antibiticos Beta lactmicos Resistencia bacteriana HIPTESIS RESULTADOS CONCLUSIN BIBLIOGRAFIA ESTAFILOCOCOS Los estafilococos estn entre las primeras bacterias que se reconocieron como patgenas, y se descubrieron por primera vez a principios de la dcada de1880. Se encuentran ampliamente distribuidos por la naturaleza, y a menudo forman parte de la flora bacteriana de la piel y el tracto respiratorio superior; muchas de las especies que se encuentran en el hombre son comensales. La especie predominante patgena prale hombre es el staphylococcus aureus, constituye la causa ms comn de las infecciones supurativas para el hombre. El gnero Staphilococcus se clasifica dentro de la familia Micrococcaceae, junto con Micrococcus y Planococcus. Los miembros de estos dos ltimos gneros no son patgenos para el hombre, pero Micrococcus tiene importancia para el microbilogo clnico, puesto que los micrococos son similares a los estafilococos. Durante varias dcadas la taxonoma del gnero Staphylococcus, fue controvertida, ya que los puntos de vista de los microbilogos clnicos y los que estudian la sistemtica bacteriana son divergentes. Se han registrado al menos trece especies. Su identificacin se basa en caracteres bioqumicos, en la composicin de la pared celular, en la homologa de protenas, en la relacin entre sus DNA y en cules son sus huspedes naturales. DESCRIPCION DEL GENERO Los estafilococos son clulas esfricas, gram positivas, cuyo dimetro vara de0.5 a 1.5 um; en frotis teidos 3

aparecen en grupos irregulares en forma de racimos. Crecen mejor en condiciones aerobias, pero son anaerobios facultativos; la temperatura de crecimiento es de 30 a 37 C; no son mviles y no forman esporas. Las especies Staphylococcus capitis, S.warneri, S: cohnii, S. xylosus y S: sciuri se encuentran como comensales en el hombre, pero rara vez son causa de una enfermedad. El resto de las especies slo se encuentra en animales. Los estafilococos exhiben una constancia notable en cuanto a la forma y tamao, tienen cerca de 1 um de dimetro y su forma es ms prxima a la de una esfera. Entre sus caractersticas morfolgicas tiene como tendencia a aparecer en forma de masas de clulas arracimadas, un agrupamiento celular que surge de la geometra en la divisin celular. Normalmente las clulas se dividen en tres planos perpendiculares, que producirn paquetes regulares, las clulas hijas son desplazadas por la accin de enzimas de separacin, para dar lugar a los grupos irregulares tpicos. En frotis normal tambin se encuentran clulas aisladas, en parejas y ttradas. Los estafilococos se tien fcilmente con colorantes bsicos y son fuertemente gram positivos. La mayora de las cepas no son capsuladas, el S. aureus forma cpsulas; morfolgicamente puede ser evidente, o bien detectarse mediante mtodos inmunolgicos. En medios de agar el crecimiento es abundante; las colonias son desde translcidas a opacas, con algunas variaciones en el perfil y en el margen de la colonia; estas variaciones son tiles para la diferenciacin. Algunos estafilococos producen pigmentos carotenoides, formando colonias de color amarillodorado, amarillolimn o cremoso. La pigmentacin se das ms a menudo en S. aureus, siendo ms o menos constante en los aislados primarios. Cuando se cultivan en placas de agar sangre , la mayora de las colonias de S. aureus y S. haemolyticus aparecen rodeadas por una zona de hemlisis; otras especies son tpicamente no hemolticas. FISIOLOGA Los estafilococos son relativamente mas resistentes al calor y a ciertos desinfectantes que las formas vegetativas de la mayora de las bacterias patgenas. Mientras que otras bacterias se destruyen en 30 minutos a 60 grados centgrados . los estafilococos necesitan temperaturas mas grandes y tiempos mas largos. La resistencia al calor esta acompaada por crecimiento mximo mas elevado, a diferencia de muchas bacterias crecen a 45 Grados. La resistencia a la desecacin tambin es notable; los estafilococos pueden permanecer infecciosos en el medio ambiente durante largos periodos. La mayora de las cepas crecen en presencia de un 10 % de CLNa , algunas crecen incluso en una concentracin del 15 %. Esto tiene que alguna importancia en la observacin de alimentos con sal, por que los estafilococos pueden crecer y formar enterotoxinas en alimentos que contienen cantidades de sal que en otras circunstancias serian suficientes para actuar como conservante. Frecuentemente la tolerancia a la sal proporciona la base para utilizar medios selectivos apropiado para esta bacteria. Una caracterstica comn en todas las bacterias gram positivas es que estas tambin son sensibles a la accin bacteriosttica de los colorantes trifenilmetano y son susceptibles a los antibiticos eficaces contra bacterias gram positivas , incluyendo la penicilina y muchos de los antibiticos del amplio espectro. Sin embargo son propensas a desarrollar cierta resistencia microbiana a las drogas . TOXINAS Desde hace mucho tiempo se sabia que los filtrados libres de clulas procedentes de cultivos de estafilococos 4

son txicos y se inoculan por va parenteral, y que las toxinas extracelulares se producen en cantidades considerables. Estos filtrados son necrotizantes y letales cuando se administran a animales de experimentacin. Estas toxicidad, definida por enfermedad, se ha sometido a investigacin, y se a han aislado y caracterizado muchos de los principios txicos. Entre los ms importantes estn las citotoxinas, incluyendo hemolisina y leucocidinas; las enterotoxinas; las exfoliatinas; las exotoxinas pirgenas; y las actividades enzimticas que son, entre otras, la coagulasa, la hialuronidasas y las quinasas. CITOTOXINAS Hemolisinas: el principio hemoltico es soluble y se hace presente en los filtrados de cultivo; est constituido por varias protenas diferentes denominadas hemolisinas o estafilolisinas. Casi todas las cepas de S. aureus producen hemolisinas. La produccin de hemolisinas correlaciona bien con la formacin de coagulasa, ya que solamente algunas de las cepas coagulasa negativas son hemolticas Leucocidina: aunque algunas de las estafilolisinas son toxicas para los leucocitos, solo una toxina estafilococica actua exclusivamente sobre los leucocitos: la leucocididna del PantonValentine. La leucocidina consta de dos componentes, F y S, los cuales se pueden separar por cromatografa de intercambio de iones y tienen un peso molecular de 32000 y 38000 respectivamente. Los leucocitos tratados con leucocidina sufren alteraciones en su permeabilidad a los cationes, lo que conduce a una gran variedad de efectos secundarios. La clula pierde motilidad y se hincha adoptando una forma esfrica, con grnulos distribuidos en torno a la periferia celular; con el tiempo, la clula se destruye. ENTEROTOXINAS Las enterotoxinas son protenas relativamente termoestables producidas casi exclusivamente por cepas coagulasa positiva de S. aureus, pero no por todas las cepas que pertenecen a este grupo; se estima que la mayora son capaces de sintetizar enterotoxinas. Hay cinco tipos inmunolgicos bien caracterizados, de A a E, cuyo peso molecular varia desde 28000 a 3500 daltons. Se a descrito un sexto tipo denominado enterotoxina F. La susceptibilidad a la enterotoxina ingerida se limita al hombre y a los monos. En el hombre, a las dos o tres oras ingeridas se produce angustia gastrointestinal aguda caracterizada por vmitos sbitos y diarrea; los sntomas cesan en pocas horas y no hay efectos secundarios. La dosis de toxina eficaz para el hombre parece ser de 1 a 4 g. EXFOLIATINAS Aunque la relacin entre los estafilococos y la dermatitis se conoce desde principios del siglo hasta 1971 no se identifico la toxina responsable; ahora se le conoce como exfoliatina o toxina exfoliativa. Las exfoliatinas se producen en caldos de cultivo con S. aureus, y pueden obtenerse a partir de los sobrenadantes libres de clulas. La toxina o cepas de staphilococos que los originan, provoca una exfoliacin generalizada de la epidermis cuando se inyecta en ratones recin nacidos; una tcnica que se emplea para analizar su actividad biolgica. Se conoce dos tipos de toxinas: A y B. En el hombre la exfoliatina ocasiona el sndrome de la piel escaldada, perturbando las fuerzas de adhesin que existen entre las clulas del estratum granulosum para dar origen a la bulla caracterstica EXOTOXINAS PIRGENAS

EN 1979 Schlievert y sus colegas descubrieron una toxina aislada de S. aureus que es similar en muchos aspectos a las exotoxinas pirgenas de los estreptococos. Esta toxina proteica es pirgena, mitognica para los linfocitos e incrementa la susceptibilidad a ciertos efectos de las endotoxinas, como shock letal y miocrdico y daos en el hgado. Posteriormente se descubrieron otras dos toxinas pirgenas y ahora estas toxinas se denominan exotoxinas pirgenas A, B y C estas producen un exantema escarlatiforme aumentando la hipersensibilidad. Se ha sugerido que las toxinas pueden estar relacionados con el sndrome escarlatiniforme provocado por los estafilococos, con la enfermedad de Kawasaki y con el sndrome del Shock txico. ENZIMAS ESTAFILOCOCICAS Los estafilococos sintetizan varios factores enzimticamente activos que actan sobre sustratos asociados al husped y a menudo producen efectos deletreos. Los factores mas importantes son las coagulasa, la hialuronidasa y la estafiloquinasa. Coagulasa: las coagulasas estafilococicas exhiben un alto grado de correlacin con la virulencia, ayudan en la proteccin contra la destruccin intra leucocitica inhibiendo la fagocitosis y antagonisan la actividad bactericida del suero normal. La coagulas estafilococica existe en dos formas: una libre y la otra unida a la clula. La coagulas libre, es una protena y se han identificado cuatro tipos antignicos. En la coagulacin del plasma, la coagulas reacciona con un factor de plasma similar a la protrombina para formar un complejo constituido por coagulasa y un factor que reacciona con ella; y el complejo representa una actividad enzimtica semejante a la de la trombina y desdobla al fibringeno produciendo de este modo un coagulo de fibrina. La coagulas unida a la clula, o factor aglutinante no se libera de la superficie celular de modo que cuando estas clulas se mezclan con el plasma lo agrupan o aglutinan en virtud de la precipitacin de fibrina en la superficie celular. La coagulas no es muy toxica si se inocula por va parenteral, pero en dosis suficientes origina una cada rpida en el fibringeno y una coagulacin extravascular extensa especialmente en los pulmones, para producir una muerte rpida en los animales de experimentacin. Hialuronidasa: el cido hialurnico, la sustancia fundamental de los tejidos, es despolimerizado por hialuronidasa una enzima producida por la mayora de las cepas de S. aureus. La hialuronidasa estafilococica es antignicamente homognea aunque se observan mltiples formas moleculares (isoenzimas) La hialuronidasa incrementa el poder de invasin de los estafilococos. Estafiloquinasa: un gran nmero de estafilococos son capaces de disolver cogulos de fibrina mediante una equinasa bacteriana. A diferencia de la estreptoquinasa, la quinasa estafiloccica acta en el plasma de animales, incluyendo perros cobayos y conejos. COMPOSIN ANTIGNICA La composicin antignica de Staphylococcus es compleja y heterognea. Los antgenos estafilococos incluyen una gran variedad de protenas, cidos teicoicos y polisacridos que pueden ponerse de manifiesto por aglutinacin, precipitacin o hemoaglutinacin pasiva. Las cepas que se han encontrado en el hombre, especialmente la del S. aureus, han sido estudiados intensamente y se han propuesto esquemas para la serotipificacin, pero las dificultades tcnicas han impedido su uso prctico. El cido teicoico de la pared celular, uno de los principales aglutingenos de los estafilococos, intensifica la activacin de complemento 6

por estos organismos, y tambin es responsable de la adherencia de S. aureus a las clulas epiteliales nasales. Se cree que una protena de la pared celular encontrada en casi todas las cepas de S. aureus y a la que se denomina protena A, juega un papel importante en la relacin huspedparsito. La protena A tiene la capacidad poco habitual de unirse a la regin Fc de la inmunoglobulina G, una reaccin que plantea muchas implicaciones en relacin con las defensas del husped. Puesto que la fagocitosis mediada por anticuerpos depende del receptor de Fc, se cree que la protena A impide la opsonizacion. adems esta protena inhibe la activacin de la va alternativa del complemento, probablemente cubriendo los sitios de la pared celular de peptidoglucano que activan el complemento: esto produce una disminucin de la fagocitosis de los estafilococos ricos en protena A.

Relativamente pocas cepas de S. aureus producen cpsulas de polisacridos. Estas son antignicas y pertenecen a varios tipos serologicos: asimismo, en la cpsula de una nica cepa puede haber mltiples antigenos. A veces la cpsula es visible microscpicamente, su presencia puede ponerse de manifiesto con mtodos serolgicos. Las cepas capsuladas se fagocitan mal y son ms virulentas. recientemente se han establecido los mecanismos de la inhibicin de la fagocitosis. Tanto las cepas capsuladas como las no capsuladas activan complemento mediante el peptidoglucano de la pared celular. El componente C3 resultante se asocia con la pared celular, pero el polisacrido de las bacterias capsuladas lo cubre y no esta al alcance de los receptores del leucocito, de este modo, estas bacterias no son fagocitadas de modo eficaz. PATOGENIA Los estafilococos dan lugar a inflamaciones, necrosis y formacin de abscesos con pus por la accin de sus componentes estructurales y la capacidad de producir toxinas y su severidad depende de las caractersticas del hospedero. El S. aureus normalmente est en contacto con el husped y slo produce enfermedad cuando existe un rompimiento del equilibrio en el hospedero o por la invasin de una cepa extraa. El S aureus produce dos tipos de enfermedades, la de choque toxico y la invasiva. La enfermedad invasiva tiene como caractersticas la formacin de abscesos superficiales purulentos; esto no se observa en personas con buena salud; se presenta en personas debilitadas por otra enfermedad como: desnutricin, procedimientos quirrgicos y diabetes. En las infecciones respiratorias agudas existe un problema importante que es el manejo inadecuado que se hace de ellas, especialmente por el uso indiscriminado de antibiticos prescritos por el personal de salud o por la autoprescripcin. En pacientes que presentan cuadros de faringitis estreptoccica, se ha planteado que bacterias aerobias y anaerobias productoras de beta lactamosas son las que evitan la radicacin del estreptococo. PATOLOGA El S. aureus provoca enfermedad a travs de las toxinas o por invasin y destruccin de los tejidos. Las manifestaciones clnicas se deben a las toxinas, mientras que otras enfermedades son consecuencia de la proliferacin del microorganismo con formacin de abscesos y destruccin hstica. Algunas veces, los estefilococos se diseminan por una lesin localizada y entran al torrente sanguneo desde un sitio infectado y se establecen en diferentes tejidos internos distantes , como riones, cerebro o pulmones. Secuencia de infeccin por S. aureus

SITIO DE INFECCIN LOCALIZADA INFECCIONES CONTIGUAS 1) Piel Carbuncos, abscesos subcu tneos, osteomelitis, artritis (lesin aguda de la piel). 2) Ojo Infecciones orbitales graves. 3) Nariz y garganta Puede extenderse Sinusitis, abscesos en amg por contigidad dalas o retrofarngeos otitis media (rara), mastoiditis, bronquitis, neumona estafi loccica primaria, parotiditis. 4) Gastrointestinal Enterocolitis 5) Uretra Puede progresar Cistitis, pielonefritis ascen a bacteriemia dentes (rara), prostatitis, abscesos prostticos. 6) Vagina Cervicitis, salpingitis, abscesos plvicos Fuente desconocida Bacterimia puede Continuacin por un cuerpo ser sintomtica o extrao asintomtica o causar la muerte Sitios infectados por Introduccin directa en la Metstasis corriente sangunea o sistema 1. Huesos y conexiones cardiovascular, por ejemplo. 2. Pulmonesneumona Pueden abarcar catter intravenoso, vlvulas Sec. Por S. aureus sitios metastsicos artificiales del corazn, inyeccin 3. Piel y musculosabscesos de narcticos contaminados

4. Corazn 5. Roonabscesos 6. S. coagulasa negativos abscesos Los sitios metastsicos pueden 7. Otros pasar a ser focos importantes para continuar la bacterimia. IDENTIFICACIN EN EL LABORATORIO El diagnstico de laboratorio consiste en el hallazgo en el material clnico de los cocos Grampositivos agrupados en racimos o en forma aislada; las muestras clnicas se inoculan sobre medios de cultivo, como agar sangre para observar la hemlisis, se puede aislar el S. aureus en medios selectivos que contienen concentraciones elevadas de cloruro de sodio como el agar S110 (que inhibe a la mayora de los restantes microorganismos), el agar sal manitol ( que es fermentado por S aureus, pero no por dems estafilococos). Los medios selectivos antes mencionados son muy tiles, pero se necesita hacer la prueba de la coagulasa para la identificacin confirmatoria la cual debe ser positiva. El aislamiento de S. aureus a partir del exudado farngeo no tiene importancia diagnstica, ya que se considera parte de la flora normal de la faringe y nasofaringe, por lo que no tiene significado clnico. La separacin de los tres gneros que parasitan al hombre se hace por medio de la sensibilidad o resistencia a la lisostafina, eritromicina, bacitracina y furazolidona. EPIDEMIOLOGIA Existen un gran nmero de portadores asintomticos de S. aureus que lo albergan en cavidad nasofarngea y cutnea y que constituyen un problema en la transmicin de la enfermedad. El S. aureus empieza colonizar al cuerpo en la etapa neonatal del hombre y lo acompaa durante toda su vida, formando parte de la flora normal del organismo. La colonizacin de los neonatos por el S. aureos empieza por el mun umbilical, superficie cutnea y rea perineal. La colonizacin en nios mayores y adultos es ms frecuente en la parte anterior de la nasofaringe, fosas nasales, membranas de las mucosas y ocasionalmente en el intestino. El S. aureus es muy resistente, sobre vive mucho tiempo en el aire y sobre objetos inanimados y superficies secas, pero la transmisin de persona a persona es la ms importante, sobre todo en los hospitales. El problema principal consiste en como separar un sitio colonizado, como las mucosas, de una infeccin sistmica. PREVENCIN El uso correcto de cubrebocas en intervenciones quirrgicas y curaciones, las medidas generales de asepsia y antisepsia y el manejo adecuado de algodones, gasas y vendas contaminadas, evita que se inicien focos de infeccin intrahospitalaria. En pacientes en riesgo debe evitarse el contacto con individuos que presenten lesiones abiertas. Son muy tiles las cortinas de luz ultravioleta en los sitios donde hay que poner un especial cuidado en evitar la contaminacin, como son las salas de operaciones, cuneros, sala de prematuros. 9

TRATAMIENTO Se duda en dar un tratamiento contra S: aureus a casos de infecciones respiratorias agudas cuando su aislamiento procede de las vas respiratorias altas. En las cepas sensibles a la penicilina, la oxacilina y la meticilina, son las drogas de eleccin; cuando los pacientes son alrgicos a la penicilina se utilizan derivados de las cefalosporinas, que pueden ser utilizadas combinndose con aminoglucsidos como la gentamicina. DATOS CLINICOS CASOS DE INFECCIONES RESPIRATORIAS AGUDAS POR GRUPO DE EDAD 2001 grupos de edad Estado 15 19 20 24 Distrito Federal 126958 162228 Hidalgo 38557 34501 Mxico 137909 163754 Morelos 27451 31443 Puebla 57511 57985 CASOS DE NEUMONAS Y BRONCO NEUMONAS POR GRUPO DE EDAD 2001 GRUPOS DE EDAD Estado Distrito Federal Hidalgo Mxico Morelos Puebla 15 19 298 93 223 96 275 20 24 79 79 241 99 240

ANTECEDENTES HISTRICOS DE LOS ANTIBITICOS. Algunos remedios contenian qumicos antimicrobianos y eran eficaces, en general su aplicacin se limitaba a algunas enfermedades. Es probable que el ms conocido de estos remedios sea la corteza de chinchona, que contena quinina y era masticada por las personas que sufran paludismo.

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La primera sustancia antibacteriana que se empleo en forma generalizada en las culturas occidentales fue el mercurio, cuya aplicacin era para la sfilis. No obstante el tratamiento con mercurio no siempre era eficaz, era un frmaco de espectro restringido, ya que solo resultaba til contra las bactrias que ocasionaban la sfilis y era txico tanto para las bacteria como para las personas. Alexander Fleming descubri la penicilina en 1929. Pero el principal descubrimiento importante en el desarrollo moderno de los antibiticos se produjo a comienzos del decenio de 1930, cundo Gerhard Domagk, descubri la primera sulfonamida, que llam pronfosil. En la actualidad se cuenta con una cantidad increble de antibiticos. Las compaas farmacuticas continan sus esfuerzos para crear antibiticos con mayor eficacia, espectro de actividad ms amplio y nivel de toxicidad ms bajo. La competencia da lugar no slo al descubrimiento de nuevos frmacos, sino tambin a la proliferacin de antibiticas duplicados. Qu son los Antibiticos?. Son sustancias qumicas producidas por ciertos microorganismos, que inhiben el crecimiento o matan otros microorganismos. Los antibiticos constituyen una clase especial de agentes quimioterapeuticos que se distinguen d e los anlogos de los factores de crecimiento porque son productos naturales. Los antibiticos constituyen una de las ms importantes clases de sustancias producidas en los procesos microbianos a gran escala. Algunos antibiticos pueden hacerse ms efectivos mediante modificaciones qumicas; son los llamados antibiticos semisintticos. Las bactrias Gram positivas son generalmente ms sensibles a los antibiticos que las bactrias Gram negativas. Un antibitico que acta tanto en bacterias Gram positivas como Gram negativas, se dice que es un antibitico de amplio espectro. Un antibitico de amplio espectro encuentra un uso mdico ms extenso que un antibitico de corto espectro, el cual slo acta sobre un nico grupo de microorganismos. Los antibiticos y otros agentes quimioteraputicos pueden agruparse basndose en su estructura qumica o en su modo de accin. TIPOS DE ANTIBITICOS. Un antibitico es bacteriosttico o bactericida segn la cantidad de frmaco que alcanza el sitio blanco. Un antibitico bactericida mata a la bacteria, ,mientras los bacteriostticos slo detienen su crecimiento y esto le sirve al sistema inmune para que le de tiempo y oportunidad para eliminar al agente infeccioso. Hay cuatro tipos principales de antibiticos y cada uno de ellos ataca un blanco distinto: 1)los que afectan la cubierta celular, 2)los que inhiben la sntesis proteica, 3)los que afectan la sntesis y la estructura de los cidos nucleicos y 4) los antimetabolitos. En general los que pertenecen a la primera y a la tercera categora son bactericidas y los de la sugunda son bacteriostticos o bactericidas, mientras que los de la cuarta categora son bacteriostticos. ANTIBIOTICOS QUE AFECTAN LA CUBIERTA CELULAR. Agentes que inhiben la sntesis de la pared celular. Beta Lactmicos: Penicilinas naturales 11

1) penicilina G 2) Penicilina V Penicilinas semisintticas y anlogos de las mismas. 1) Penicilinas resistentes a la penicilinasa (cloxacilina, dicloxacilina, meticilina, nafcilina y oxacilina). 2) Penicilinas de amplio espectro (andinocilina, amoxicilina, ampicilina y bacampicilina). 3) Penicilinas antiseudomnicas (azlocilina, carbenicilina, piperacilina, mezlocilina y ticarcilina). 4) Anlogos (cido clavulnico, sulbactam y tazobactam). Otros antibiticos similares a las penicilinas. 1) carbapenemas (imipenem y meropenem). 2) Monobactemas (aztreonam). Cefalosporinas, cefamicinas y antibiticos relacionados. 1) Cefalosporinas de primera generacin (cefadroxil, cefazolina, cefprocil, cefalexina, cefalotina, cefapirina y cefradina). 2) Cefalosporinas de segunda generacin (cefaclor, cefamandol, cefonicid, ceforanida y ceforoxima). 3) Cefalosporinas de tercera generacin (cefixcima, cefoperazona, cefotaxima, cefpodoxima, ceftazidima, ceftizoxima y ceftriaxona). 4 Cefalosporinas de cuarta generacin (cefepima y cefpiroma). 5 Cefamicinas (cefmetazol, cefotetan y cefoxitina). 6 (Antibiticos relacionados (loracarbef y moxalactama). Antibiticos glucopeptdicos.(teicoplanina y vancomicina). Bacitracina Cicloserina Agentes que perturban la integridad de la membrana celular. Polimixina B Polimixina E ANTIBITICOS QUE INHIBEN LA SNTESIS PROTEICA. Agentes que afectan el fragmento ribosmico 50s

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Cloranfenicol Macrlidos (acitromicina, claritromicina, diritromicina, eritromicina y troleandomicina). Lincosamidas (clindamicina y lincomicina). Agentes que afectan el fragmento ribosmico 30s. Aminoglucsidos (amikacina, gentamicina, kanamicina, netilmicina, espectinomicina, estreptomicina y tobramicina). Tetraciclinas (clortetraciclina, demeclociclina, doxociclina, minociclina, oxitetraciclina y tetraciclina). Otros agentes que inhiben la sntesis de protenas. Mupirocina y otras. ANTIBIOTICOS QUE AFECTAN LA SINTESIS Y ESTRUCTURA DE ACIDOS NUCLEICOS. Rifamicinas (rifabutina y rifampicina). Acido nalidxico. Fluoroquinolonas (ciprofloxacina, enoxacina, lomefloxacina, norfloxacina y ofloxacina). Novobiocina. Metronidazol Clofacimina. ANTIBIOTICOS ANTIMETABOLITOS. Sulfonamidas (sulfacitina, sulfadiacina, sulfameracina, sulfametacina, sulfametizol, sulfametoxazol, sulfasalacina y silfisoxazol). Trimetoprim. Aminosalicilato sdico. Dapsona. Isoniacida. Etionamida Etambutol. ANTIBIOTICOS BETALACTMICOS PENICILINAS

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Las penicilinas son los antibiticos ms antiguos, y siguen siendo los de primera eleccin en muchas infecciones. Actan rompiendo la pared bacteriana. Existen muchos tipos de penicilina: 1. Penicilina G. Se utiliza por va intravenosa (penicilina G sdica), intramuscular (penicilina G procana, penicilina G benzatina), u oral (penicilina V). Es de primera eleccin en infecciones como las causadas por estreptococos o en la sfilis. Muchas bacterias, sin embargo, la inactivan produciendo un enzima (betalactamasa). 2. Penicilinas resistentes a la betalactamasa (tipo cloxacilina). Pueden con algunas bacterias que producen betalactamasa, como el estafilococo. 3. Aminopenicilinas (Amoxicilina, ampicilina, etc). Tienen ms actividad frente a los microorganismos llamados `gramnegativos', y si se asocian con sustancias como el cido clavulnico o el sulbactam, tambin pueden con las bacterias que producen betalactamasa, como el estafilococo. 4. Penicilinas antipseudomona. (Tipo carbenicilina o piperacilina). Como su nombre indica, pueden actuar contra Pseudomona (una bacteria peligrosa que causa infecciones muy graves). CEFALOSPORINAS Son antibiticos en parte similares a las penicilinas, pero a diferencia de aqullas (que proceden parcial o totalmente del hongo Penicillium), las cefalosporinas son totalmente de sntesis qumica. Las cefalosporinas se clasifican en "generaciones", segn el tipo de bacterias que atacan: 1. Cefalosporinas de 1 generacin: cefadroxilo, cefalexina, cefalotina, cefazolina. 2. Cefalosporinas de 2 generacin: cefaclor, cefuroxima, cefonicid, cefamandol, ... 3. Cefalosporinas de 3 generacin: cefotaxima, ceftriaxona, ceftazidima, cefixima, ... OTROS ANTIBIOTICOS BETALACTAMICOS Imipenem y aztreonam son los prototipos de nuevos grupos antibiticos betalactmicos. El cido clavulnico o el sulbactam tienen muy poca actividad, pero inhiben la betalactamasa que producen muchas bacterias, por lo que se asocian con otras penicilinas para aumentar su actividad. RESISTENCIA BACTERIANA La sntesis de quimioterpicos artificiales y el descubrimiento y mejora de los antibiticos han supuesto en este siglo una autntica revolucin mdica en el tratamiento de enfermedades infecciosas. Sin embargo, la extrema versatilidad y adaptabilidad de los microorganismos ha impedido que la victoria humana sobre las bacterias patgenas haya sido total: muchas bacterias han ido desarrollando en los ltimos decenios mecanismos que las protegen frente a muchos frmacos. Ya el mismo Paul Ehrlich, al introducir por primera vez la quimioterapia en protozoos, se dio cuenta (1907) de que algunas cepas desarrollaban resistencia a la droga durante el curso del tratamiento. Tras el optimismo inicial que acompa a los xitos de la introduccin de las sulfamidas y penicilinas (aos 40 y 50), se constat igualmente un fenmeno de surgimiento de resistencias bacterianas a estas drogas. Si bien la quimioterapia ha doblegado las grandes epidemias bacterianas del pasado, las enfermedades infecciosas siguen con nosotros, constituyendo un serio problema.

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De hecho, desde la introduccin de la antibioterapia en todo el mundo, estamos realizando un gigantesco "experimento" de intervencin gentica en los seres vivos ms abundantes del planeta: las bacterias. Estamos "sufriendo" la verdad de la supervivencia darwiniana de los ms aptos, ya que la presin selectiva que representa la aplicacin a gran escala de los quimioterpicos ha permitido la diseminacin de cepas microbianas con mecanismos de resistencia que, en muchas ocasiones dificultan el adecuado tratamiento clnico. Al cabo de 6 aos de introducir la penicilina G, la frecuencia de cepas de Staphylococcus aureus resistentes en los hospitales ingleses pas de menos del 10% a un 60%. Actualmente el valor ronda el 90%. Con los nuevos lactmicos tambin han empezado a surgir cepas bacterianas resistentes, aunque an con frecuencia relativamente baja. Actualmente existen problemas de tratamiento con las enterobacterias, e incluso con el gonococo y el meningococo, que tradicionalmente haban sido muy sensibles a las penicilinas. Recientemente se ha dado la voz de alarma por la diseminacin de cepas de bacilo tuberculoso resistentes a los quimioterpicos de eleccin a los que eran sensibles. La capacidad de las bacterias de desarrollar resistencias constituye una seria amenaza al futuro uso de los antibiticos, y hace que se tengan que invertir grandes sumas de dinero y esfuerzos de investigacin adicionales para intentar hacer frente al problema. Algunos autores han comparado este problema con el episodio de Alicia en el Pas de las Maravillas en el que la Reina Roja tena que correr cada vez ms deprisa para quedarse en el mismo sitio. Sin embargo, algunos quimioterpicos de ltima generacin han vuelto a levantar esperanzas: las fluoroquinolonas estn manteniendo e incluso incrementando su efectividad. Por otro lado, hay que pensar en un dato de tipo evolutivo: la mayor parte de las especies bacterianas han sido seleccionadas de modo natural con fenotipos sensibles a antibiticos; los cambios genticos mutacionales que las convierten en resistentes puede que disminuyan su adaptacin a otros factores ecolgicos, de modo que probablemente la presin de los antibiticos en realidad conduzca en muchos casos a un equilibrio entre cepas sensibles y cepas resistentes. De hecho se ha comprobado un descenso en la frecuencia de cepas resistentes a los antibiticos que se introdujeron hace ms tiempo, lo que quiz indique que para ellos se est alcanzando dicho equilibrio. BASES GENTICAS DE LA RESISTENCIA Una de las aplicaciones prcticas ms interesantes de los avances realizados en las ltimas dcadas en el campo de la Gentica Bacteriana ha sido comprender los mecanismos genticomoleculares de la resistencia a antibiticos, lo que est permitiendo un "ataque" ms racional a este problema clnico. Una cepa bacteriana puede volverse resistente a un antibitico por dos tipos principales de mecanismos: mutacin en un gen cromosmico; introduccin de un plsmido R de resistencia. Este segundo mecanismo supone el problema ms serio, ya que: est muy extendido; puede conferir resistencia a varios antibiticos a la vez; a diferencia del mecanismo mutacional, no suele suponer una desventaja adaptativa (no disminuye la tasa de crecimiento de la bacteria ni le hace perder sus propiedades de virulencia).

SELECCION DE MUTANTES RESISTENTES Como veremos en la seccin de Gentica las mutaciones gnicas se dice que son espontneas cuando ocurren 15

sin intervencin de procedimientos mutagnicos experimentales. Las mutaciones bacterianas espontneas son aleatorias, y afectan a un gen cualquiera con frecuencias dentro del rango de 105 a 1010 por clula y divisin. En los aos 50 se observ el siguiente fenmeno: cuando un cultivo bacteriano de una cepa sensible a un antibitico se pone en contacto con ese antibitico, al cabo del tiempo se comprueba que todo el cultivo consta de bacterias resistentes. Acaso las bacterias son organismos "lamarckianos" en los que el antibitico provoca al cambio de carcter heredable? A travs de experimentos que veremos oportunamente qued demostrado que lo nico que hace el antibitico es seleccionar los mutantes resistentes espontneos que surgen en la poblacin independientemente de la presencia del agente selectivo. Esta es precisamente la base gentica del surgimiento de ciertas cepas patgenas resistentes a antibiticos: el frmaco inhibe o mata las bacterias silvestres sensibles, pero no afecta a los pocos individuos que por mutacin espontnea hayan adquirido un alelo resistente; estos individuos se multiplican, de modo que al final son los ms prevalentes. El conocimiento de la frecuencia de aparicin de mutacin a resistencia a un quimioterpico o antibitico en una determinada especie bacteriana, as como el sitio de accin de dicho frmaco, son factores importantes para una aproximacin racional a la quimioterapia. As por ejemplo, el bacilo tuberculoso produce frecuentemente lesiones en el pulmn, donde se concentran enormes cantidades de la bacteria. Aqu, la quimioterapia con un solo agente no da xito, ya que aunque ese agente mate a casi todos los individuos de esta especie bacteriana, no afectar a la pequea subpoblacin que posea el alelo resistente; estos pocos individuos sobreviviran a este tratamiento, y recolonizaran el resto del pulmn, por lo que la infeccin persistira. As pues, en este tipo de casos hay que tratar con varios quimioterpicos simultneamente (la probabilidad de resistencias mltiples basadas en mutaciones espontneas equivale al producto de las probabilidades individuales). RESISTENCIA POR INTERCAMBIO GENTICO La principal amenaza al xito de la quimioterapia est representada por la transmisin gentica de plsmidos de resistencia a antibiticos (plsmidos R). Veamos un poco de historia: en los aos 50, poco despus de la introduccin de los primeros antibiticos, se detect en Japn un espectacular aumento de pacientes de disentera bacilar resistentes al tratamiento con varios de estos antibiticos. Las cepas de Shigella dysenteriae aisladas de estos pacientes posean el fenotipo SuR, StrR, CmR, TetR. Se comprob que los genes correspondientes a esas resistencias formaban parte de un gran plsmido. Los plsmidos de este tipo se denominan plsmidos R. Pero an ms: los mismos pacientes tenan en sus intestinos cepas de Escherichia coli (que como sabemos ya, es un simple comensal que forma parte de nuestra flora endgena) que eran igualmente resistentes a esos antibiticos. Ello sugera que este tipo de plsmidos se poda transferir de unas especies a otras. La explicacin estribaba en un fenmeno de intercambio dependiente de contactos clulaclula, llamado conjugacin. En resumidas cuentas, se descubri que existen plsmidos R capaces de diseminarse por conjugacin no slo entre clulas de la misma especie, sino entre especies distintas, incluyendo bacterias patgenas. Al poco tiempo comenzaron a aparecer en Occidente cepas patgenas resistentes a uno o varios antibiticos. Actualmente las cepas con resistencias mltiples codificadas por plsmidos son muy abundantes en todo el mundo, lo que complica (y a veces desaconseja) la quimioterapia. Existen plsmidos R de distintos grupos de incompatibilidad. Son abundantes en Pseudomonas y en Enterobacterias, desde donde pueden ser transferidos a una amplia gama de bacterias Gramnegativas 16

(plsmidos promiscuos). Daremos detalles de cmo estn organizados y cmo se transmiten por conjugacin los plsmidos R. Aparte de los plsmidos R conjugativos existen otros no conjugativos, que sin embargo pueden ser transferidos entre distintas bacterias por otros medios: los plsmidos no conjugativos movilizables pueden ser transferidos por otro plsmido conjugativo compatible residente en la misma clula por transduccin por transformacin Ventajas adaptativas de los plsmidos R: Los plsmidos R han evolucionado en respuesta a presiones selectivas ambientales (antibiticos usados por los humanos o inhibidores presentes en los medios naturales de las bacterias). Son capaces de conferir varias resistencias simultneamente a las bacterias que los adquieran. Tienen capacidad de diseminarse epidmicamente de modo "horizontal" (es decir, entre clulas distintas de la misma especie o en el caso de los promiscuos distintas especies). Estn constituidos por "mdulos" mviles, de modo que tienen flexibilidad para aquirir nuevos mdulos a partir de otras especies. Economa: cuando no existe presin selectiva, pueden perderse de la mayor parte de las bacterias de una determinada poblacin (curacin espontnea), pero su modo de transmisin "epidmica" los capacita para diseminarse rpidamente a la mayora de la poblacin cuando la ocasin lo requiere (cuando vuelve la presin selectiva). No tienen apenas efectos negativos sobre los dems caracteres de la bacteria (incluyendo, en las patgenas, su poder virulento). Muchos de ellos responden a mayores concentraciones del antibitico aumentando su nmero de copias (amplificacin del nmero de copias en los plsmidos de control relajado: repasar. Otro ejemplo de esta facultad de diseminacin y evolucin lo tenemos en que los hospitales hacen uso frecuente de detergentes catinicos como desinfectantes ha crecido la proporcin de cepas de Staphylococcus resistentes a dichos agentes. Como se puede comprender, el estudio epidemiolgico de los plsmidos R reviste actualmente un gran inters de cara a la salud pblica. Este tipo de estudios recurre principalmente a dos tipos de enfoques: Por deteccin de grupos de incompatibilidad (algo complejo); Por anlisis de restriccin y comparacin de mapas fsicos (ms fcil y rpido). MECANISMOS BIOQUIMICOS IMPLICADOS EN LA RESISTENCIA A ANTIBIOTICOS Los principales mecanismos se pueden agrupar de la siguiente manera: Disminucin de la permeabilidad hacia el antibitico. Inactivacin enzimtica del antibitico Modificacin qumica de la diana sobre la que acta el antibitico Sntesis de una enzima resistente. DISMINUCION DE LA PERMEABILIDAD CELULAR HACIA EL ANTIBIOTICO 17

Modificacin de una barrera preexistente Como ya sabemos, la membrana externa de Gramnegativas supone una barrera natural que hace que muchas bacterias de este grupo sean insensibles a varios antibiticos (p. ej., la vancomicina y la bacitracina no pueden atravesar las porinas). No todas las bacterias Gramnegativas son igualmente impermeables a los mismos antibiticos: Entre las menos impermeables estn Haemophilus y Neisseria, que dejan pasar a numerosos lactmicos. Las Enterobacterias suelen ser intermedias. Las bacterias del gn. Pseudomonas son insensibles a la mayora de antibiticos lactmicos, porque no pueden pasar a travs de la membrana externa. Se han aislado mutantes que se han vuelto resistentes a los lactmicos de ltima generacin: el cambio ha afectado a una determinada porina que ahora no deja pasar a estos nuevos antibiticos. En otros casos, la resistencia se debe a alteraciones en la cpsula: algunos neumococos resistentes a estreptomicina y eritromicina dependen de este tipo de mecanismo. Mecanismo de extrusin activa del antibitico El ejemplo ms tpico estriba en la resistencia a las tetraciclinas desarrollada por muchas bacterias. Como sabemos, el efecto inhibidor de las tetraciclinas depende de la acumulacin activa de este tipo de antibiticos por parte de las bacterias. Pues bien, ciertos plsmidos R poseen transposones (como el Tn10 o el Tn1721) que codifican un sistema para "bombear" tetraciclina desde el interior bacteriano hacia el exterior, en contra del gradiente de concentracin. Igualmente se conocen resistencias a sulfamidas dependientes de un mecanismo especfico de impermeabilidad. Alteracin del mecanismo de transporte del antibitico Cuando el antibitico accede al interior bacteriano por algn mecanismo de transporte especfico, una mutacin que afecte a dicho sistema de transporte supondr una mayor resistencia al antibitico. Por ejemplo, en E. coli la cicloserina entra aprovechando el sistema de transporte de la valina o la glicocola. Determinados mutantes incapaces de transportar estos aminocidos son resistentes a la cicloserina. INACTIVACION ENZIMATICA DEL ANTIBIOTICO Este tipo de mecanismo depende en muchos casos de plsmidos R. Los ejemplos tpicos son las resistencias a lactmicos, la resistencia al cloranfenicol y las resistencias a aminoglucsidos. Resistencia a lactmicos por accin de lactamasas Como ya sabemos, ciertas bacterias producen penicilinasa (lactamasa), capaz de abrir el anillo lactmico de la penicilina para dar cido peniciloico, que carece de actividad antibacteriana. Lo mismo ocurre con las cefalosporinas, donde la lactamasa (cefalosporinasa) genera un producto inestable inactivo que se descompone rpidamente. Sin embargo, la naturaleza de la cadena lateral (grupo acilo, R) influye notablemente en la susceptibilidad de rotura del anillo lactmico por las lactamasas. lactamasas codificadas por cromosoma y de bajo nivel (lactamasas de tipo TEM). 18

Estn muy distribuidas entre bacterias Gramnegativas, y confieren resistencia a cefalosporinas y penicilinas. La base de la resistencia en muchos casos es la siguiente: cuando se expone la bacteria al lactmico durante mucho tiempo, pueden seleccionarse determinadas mutaciones en genes cromosmicos que codifican protenas parecidas de tipo PBP, de modo que adquieren un fuerte promotor que permite su expresin a alto nivel. Este tipo de lactamasa es excretada al medio, donde inactiva al antibitico. lactamasas de origen plasmdico. En la Grampositiva Staphylococcus aureus existen cuatro variantes, responsables del espectacular aumento de cepas resistentes de esta especie surgidas en los aos 50. Se trata de enzimas inducibles: el gen que codifica la lactamasa se induce por pequeas cantidades de penicilina o cefalosporina, y se producen enormes cantidades del antibitico, que se excreta, de modo que inactiva al lactmico en el entorno de la bacteria. El gen responsable es portado por plsmidos de tipo R (que llevan genes de resistencia para otros antibiticos). En las Gramnegativas se han descubierto unos 20 tipos de lactamasas de codificacin plasmdica. Suelen ser enzimas de sntesis constitutiva que se expresan a bajos niveles, y cuya localizacin es periplsmica; esta localizacin permite que el antibitico sea inactivado antes de que llegue a la membrana citoplsmica, donde se localizan las protenas diana de los lactmicos. Algunas de ellas vienen codificadas por genes plasmdicos que forman parte de transposones (p. ej., el Tn1 o el Tn4). Origen de las lactamasas Aunque la prevalencia de cepas (sobre todo patgenas) resistentes a lactmicos es un fenmeno que se "dispar" desde los aos 50 con el uso masivo de estos antibiticos, est claro que la resistencia deba de existir previamente al uso humano de los antibiticos. La aplicacin clnica a gran escala (incluyendo el abuso) de las penicilinas y cefalosporinas slo ha permitido que veamos en accin un caso "acelarado" de evolucin bacteriana, donde las cepas ms aptas han sobrevivido y se han multiplicado, y en el que, merced a los procesos de intercambio gentico y a la construccin "modular" (transposones) de muchos plsmidos R, las entidadess genticas responsbles se han diseminado de unas especies bacterianas a otras. Se supone que en la Naturaleza (p. ej., en los suelos), ciertas cepas bacterianas, antes de la aparicin de la Quimioterapia, posean ya mecanismos para destruir los lactmicos segregados por hongos con los que coexistan. Profundizando ms en el tema, parece que las propias lactamasas proceden evolutivamente (por mutaciones sucesivas) de alguno de los genes que originalmente codificaban algunas de las "autolisinas" (PBPs) que intervienen en la maduracin del peptidoglucano. Es decir, las lactamasas seran formas modificadas de las mismas dianas (p. ej., las transpeptidasas) sobre las que actan los lactmicos. Como sabemos, los lactmicos forman complejos covalentes estables con algunas de las PBPs (peniciloilPBPs), que hacen que estas autolisinas se inactiven. Pues bien, existen indicios de que las lactamasas seran unas "autolisinas" evolucionadas que en vez de formar complejos estables con los lactmicos, se habran especializado en cortar el anillo lactmico (dando peniciloico) a expensas de su actividad transpeptidasa original. Resistencia al cloranfenicol La resistencia al cloranfenicol suele deberse a una enzima inactivante de dicho antibitico, denominada cloranfenicolacetiltransferasa (CAT), que normalmente est codificada por genes plasmdicos. Uno de los genes de CAT de Gramnegativas ms estudiados forma parte del transposn Tn9. La CAT convierte el cloranfenicol en su derivado 3acetoxi, usando el acetilCoA; a continuacin una reaccin qumica (no catalizada por enzima) hace que el grupo acetoxi pase a la posicin 1; finalmente ocurre 19

una segunda acetilacin catalizada enzimticamente, que genera el producto final, 1,3diacetoxicloranfenicol. Los derivados mono o diacetilados del cloranfenicol son inactivos como antibiticos. Resistencia a ciertos aminoglucsidos Como ya vimos en el captulo anterior, los aminoglucsidos son un grupo amplio y abundante de antibiticos, por lo que no es sorprendente que las bacterias hayan evolucionado distintos mecanismos para inactivarlos; se pueden agrupar en tres tipos: Fosforilacin Adenilacin Acetilacin Las fosforilaciones y adenilaciones se dan sobre grupos OH susceptibles, mientras que las acetilaciones recaen sobre determinados grupos NH2. La modificacin enzimtica de los aminoglucsidos ocurre en el espacio periplsmico o en la membrana citoplsmica, y produce un doble efecto: el antibitico modificado covalentemente ya no puede usar el mecanismo de transporte facilitado a travs de la membrana; por lo tanto, accede en menor cantidad al citoplasma; el compuesto modificado ya no puede afectar al ribosoma, por lo que no ejecuta accin inhibitoria sobre el crecimiento de la bacteria. MODIFICACION QUIMICA DE LA DIANA DEL ANTIBIOTICO Resistencia a la estreptomicina Este mecanismo ya fue comentado en el: la mutacin cromosmica strA produce una protena ribosmica S12 alterada que impide la unin de la estreptomicina. Resistencia a la eritromicina Ciertos plsmidos de cepas de Staphylococcus aureus y de Streptococcus codifican una metilasa de ARN inducida por la presencia de eritromicina: esta enzima modifica por metilacin un determinado nucletido del ARNr 23S de la subunidad grande del ribosoma. Concretamente introduce dos metilos en el N de una determinada adenina, usando Sadenosilmetionina (SAM) como donador. Esto produce un cambio conformacional en el ribosoma que disminuye su afinidad hacia la eritromicina y hacia la lincomicina (resistencia cruzada a los dos antibiticos). El mecanismo gentico subyacente al carcter inducible de la metilasa es muy interesante; en lugar de un mecanismo a nivel transcripcional, como es habitual en las bacterias, se trata de un mecanismo de regulacin traduccional: en las bacterias en ausencia de eritromicina el ARNm de la enzima posee una estructura secundaria que evita su traduccin por los ribosomas, pero en presencia de eritromicina este ARNm cambia de conformacin y puede ser ledo, producindose la metilasa que inactivar la diana del antibitico. Resistencia a las rifamicinas

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Como ya sabemos por el cap. 20, las rifamicinas actan unindose a la subunidad de la ARN polimerasa eubacteriana. La resistencia a estos antibiticos depende de una mutacin cromosmica que altera dicha subunidad, hacindola insensible a estos inhibidores. Resistencia a las quinolonas, novobiocina y coumermicina Las mutaciones cromosmicas que interesan a la subunidad A de la ADNgirasa bacteriana producen resistencia al cido nalidxico. Sin embargo, las quinolonas de ltima generacin (fluoroquinolonas como el ciprofloxacino) no se ven afectadas, quiz debido a la enorme potencia de estos quimioterpicos. Las mutaciones cromosmicas que afectan a la subunidad B de la girasa rinden resistencia a la novobiocina y a la coumermicina SINTESIS DE UNA NUEVA ENZIMA RESISTENTE Resistencia a sulfamidas Determinados plsmidos R portan genes de resistencia a sulfamidas (SuR), que codifican una dihidropteroico sintetasa muy resistente a la accin de estos quimioterpicos, debido a que tienen una afinidad 10 000 veces menor que la enzima normal codificada por el cromosoma. Resistencia a trimetoprim Muchos plsmidos R llevan un gen que codifica una dihidrofolatorreductasa (DHFR) muy resistente al trimetoprim. Resistencia a meticilina En muchos hospitales medran cepas muy peligrosas de Staphylococcus aureus resistentes al lactmico meticilina. Estas cepas producen una forma especial de protena PBP2 (la llamada PBP2a) que posee una baja afinidad por los lactmicos, incluyendo la meticilina. Parece que el gen codificador correspondiente reside en un transposn. HIPTESIS La resistencia de los antibiticos beta lactmicos al Staphilococcus aureus depende de la zona geogrfica en donde habita el husped. RESULTADOS DE LABORATORIO MUESTRA 1 Hidalgo 2 Morelos 3 Edo. Mx 4 Puebla 5 Edo. Mx. 6 D. F. 7 D. F. 8 D. F. 9 D. F. GELOSA SANGRE Desarrollo bacteriano Desarrollo bacteriano Desarrollo bacteriano Desarrollo bacteriano Desarrollo moderado Desarrollo bacteriano Desarrollo bacteriano Desarrollo bacteriano Desarrollo bacteriano STA110* Desarrollo bacteriano Desarrollo bacteriano Desarrollo bacteriano Desarrollo bacteriano Desarrollo moderado Desarrollo bacteriano Desarrollo bacteriano Desarrollo bacteriano Desarrollo bacteriano COAGULASA 1 Positivo Positivo Negativo No se trabajo No se trabajo No se trabajo Positivo Positivo No se trabajo 21

10 Hidalgo 11 D. F. 12 Edo. Mx. 13 D. F. 14 D. F. 15 Hidalgo 16 D. F. 17 Edo. Mx. 18 D. F. 19 D. F. 20 Edo. Mx. 21 Edo. Mx. 22 D.F. 23 D. F.

Desarrollo bacteriano Desarrollo bacteriano Desarrollo bacteriano Desarrollo bacteriano Desarrollo bacteriano Sin desarrollo Desarrollo bacteriano Sin desarrollo Desarrollo bacteriano Sin desarrollo Sin desarrollo Sin desarrollo Desarrollo bacteriano Desarrollo bacteriano

Desarrollo bacteriano Desarrollo bacteriano Desarrollo bacteriano Desarrollo bacteriano Desarrollo bacteriano Sin desarrollo Desarrollo bacteriano Sin desarrollo Desarrollo bacteriano Sin desarrollo Sin desarrollo Sin desarrollo Desarrollo bacteriano Desarrollo bacteriano

No se trabajo Negativo Negativo Negativo No se trabajo No se trabajo Negativo No se trabajo No se trabajo No se trabajo No se trabajo No se trabajo Positivo No se trabajo

* desarrollo de colonias bacterianas de color grisamarillo dorado de 1 a 2 mm de dimetro de forma circular y superficie convexa y consistencia mantequillosa. Diferenciacin microscpica de las bacterias desarrolladas: cocos gram positivos agrupados en forma de agregados irregulares parecidos a racimos de uvas. 1se seleccionaron solo 11 colonias, debido al poco material proporcionado por el laboratorio escolar. El criterio para seleccionar estas colonias se baso en el desarrollo que tuvieron estas. ANTIBIOGRAMA REALIZADOS A DOS COLONIAS BACTERIANAS DE DISTINTO ESTADO. ANTIBITICOS Eritromicina Cefalotina Cefotaxima Pefloxacina Gentamicina Tetraciclina Dicloxacilina Ampicilina Trimetroprim con sulfametasol Cefuroxima Penicilina Ceftazidima Colonia 2 Morelos Sensible Sensible Sensible Sensible Sensible Sensible Sensible Resistente Resistente Resistente Resistente Resistente Colonia 8 Edo. Mex Resistente Sensible Resistente Sensible Sensible Sensible Sensible Resistente Resistente Sensible Resistente Sensible

* para el antibiograma se utiliz el medio de cultivo Mueller Hinton. CONCLUSION

En base a los resultados obtenidos en el laboratorio, concluimos que la resistencia microbiana es un fenmeno 22

biolgico natural, pero se ve amplificado muchas veces debido al mal uso que hace el hombre de los antimicrobianos y a la indiferencia demostrada a las consecuencias de ese hecho. El efecto de la resistencia microbiana es que medicamentos que en otro tiempo salvaban vidas pueden acabar teniendo el mismo poder curativo que un placebo cualquiera. . Por otra parte, Independientemente del origen de la farmacorresistencia, la globalizacin y el aumento del nmero de viajeros y de los intercambios comerciales hace inevitable el rpido desplazamiento de esas cepas de un lugar a otro. Mediante la nueva tecnologa de huellas de ADN. El aumento de la farmacorresistencia podra arrebatarnos la oportunidad de curar muchas enfermedades y poner freno a las epidemias.

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