TERAPIA GNICA APLICADA A LA ODONTOLOGA

I. INTRODUCCIN:
La terapia gnica es un nuevo procedimiento para tratar, curar y prevenir la enfermedad cambiando los genes de un individuo. La investigacin en este campo est enfocada a conocer la forma por la cual los genes controlan la funcin celular para que cuando alguno de ellos falle, se puedan introducir al organismo nuevos genes que funcionen de manera normal. Las modificaciones pueden ser realizadas fuera de las clulas cultivadas y luego administradas al paciente mediante un vector (procedimientos ex vivo) o pueden ser involucradas como modificaciones en las clulas del individuo directamente (procedimientos in vivo).

Corregir un defecto gentico o para dotar a las clulas de una nueva funcin que les permita superar una alteracin. Con la ayuda de vectores adecuados, que son generalmente virus, se introduce el gen correcto y se integra en el ADN de la clula enferma mediante tcnicas de recombinacin gentica. La modificacin del genoma de las clulas diana para que sinteticen una protena de inters teraputico permite compensar una insuficiencia debida a la alteracin de un gen celular, estimular una mejor respuesta inmunitaria contra un tumor o conferir resistencia a la infeccin producida por un virus. En principio existen tres formas de tratar enfermedades con estas terapias: Sustituir genes alterados: Se pueden corregir mutaciones mediante terapia gnica, sustituyendo el gen defectuoso o reparando la secuencia mutada. Inhibir o contrarrestar efectos dainos: Se lleva a cabo mediante la inhibicin dirigida de la expresin gnica. Este proceso se desarrolla bloqueando promotores, interfiriendo con los mecanismos de expresin gnica mediante RNAs anti-sentido que son complementarios de mRNA y se unen a ellos bloquendolos, o, ms recientemente, mediante siRNA ("small interferents RNA", "RNAs

pequeos interferentes"), que bloquean secuencias especficas de RNA, por lo que pueden inhibir cualquier gen bloqueando sus mRNA . Insertar genes nuevos: Se realiza por supresin dirigida de clulas especficas. Se insertan genes suicidas que destruyen a la propia clula que los aloja o genes estimuladores de la respuesta inmune. Tambin se puede introducir una copia de un gen normal para sustituir la funcin de un gen mutante que no fabrica una protena correcta.

II.

OBJETIVOS:
y Conocer la aplicacin de este tipo de terapias en nuestro campo laboral.

III.

MARCO TERICO:

Aplicacin clnica de la terapia gnica en odontologa

Uno de los campos de la odontologa que puede beneficiarse directamente de este tipo de terapias lo constituye las alteraciones craneofaciales y dentales. El 5% de todos los nacidos en Estados unidos cada ao tiene algn defecto congnito y por lo menos 1/800 presenta una malformacin que afecta la cabeza, la cara o el cuello. De las cerca de 5.500 patologas heredadas que presentan malformaciones, cerca de 700 involucran la regin craneofacial y alrededor de 300 se manifiestan con labio y/o paladar fisurado. El odontopediatra y el ortodoncista frecuentemente deben prestar atencin a los pacientes que padecen este tipo de patologas. Algunas crneosinostosis como los sndromes de Appert, Pfeiffer y Crouzon, que afectan el crecimiento craneofacial normal, debido al cierre prematuro de las suturas, son producidos por una mutacin en el gen FGFRII

(receptor tipo II del factor de crecimiento fibroblstico). La investigacin actual en biologa de las suturas, est dirigida a conocer las funciones de los genes que se expresan en este tejido, los mecanismos de sealizacin celular, las actividades de los factores de transcripcin especficos y las interacciones celulares. Cuando se conozcan estos procesos ser posible prevenir o intervenir tempranamente mediante terapia gnica perinatal las patologas relacionadas con crneosinostosis o con otros sndromes que afectan el crecimiento craneofacial. Al respecto Kyrkanydes y Millar, vienen desarrollando una modalidad de terapia gnica para la transferencia de genes teraputicos a animales y pacientes utilizando un virus de pseudotipo de

inmunodeficencia felina (VSV-G) y han demostrado niveles de expresin gnica estable en varios rganos y estructuras examinadas. Otra rea de la odontologa que podra beneficiarse con la terapia gnica est relacionada con las enfermedades que afectan las glndulas salivares. Sin embargo la mayor limitacin para el uso de la terapia gnica en este campo, radica en la eleccin del vector utilizado para transferir los genes, ya que actualmente los vectores disponibles inducen reacciones inmunes y otros efectos indeseables que impiden establecer con seguridad este tipo de terapias. La terapia gnica puede ser utilizada tambin para el tratamiento del dolor crnico severo. Numerosos estudios han demostrado que los genes pueden ser transferidos a clulas del sistema nervioso central de los modelos animales. Por ejemplo la transferencia del gen b-endorfina produce analgesia efectiva en ratas. Este procedimiento podra ser de gran utilidad en un futuro para el tratamiento de la neuralgia del trigmino. La matriz extracelular en el hueso alveolar, periodonto y diente se relaciona con la localizacin de los morfgenos en la reparacin sea. En este proceso, los tejidos como el colgeno, son importantes en grandes defectos de hueso y mandbula; dndose procesos de osteo-conduccin. La literatura reporta que en defectos periodontales se pueden utilizar sistemas de osteoinduccin (membranas periodontales) y al tiempo osteoconduccin (terapia gnica). La combinacin de estas dos terapias en la utilizacin de las BMPs, permitira obtener mejores resultados. En un estudio reciente, se tomaron fibroblastos que codificaban para BMP7, y se transplantaron en ratas que tenan grandes defectos seos a nivel mandibular. Las lesiones tratadas con BMP7 demostraron condrognesis, osteogenesis, y cementognesis en la reparacin de defectos seos periodontales. BMP 4 recombinante codifica para heparan sulfato, heparina, colgeno tipo I y IV de la matriz extracelular. Los componentes de la matriz extracelular activan morfgenos para permitir funciones proteolticas. Las BMP4 en estado soluble, al entrar a ser componente de la matriz extracelular, se convierte en un estado slido, en el cual puede iniciar sus funciones. La interaccin entre la seal inducida por morfgenos y la respuesta celular es modulada por la matriz extracelular.

Las BMPs 2, 4, 7 pueden iniciar la cascada de osteognesis y por esta razn tienen posibilidades teraputicas en defectos craneofaciales, en trauma de cabeza y cuello y en defectos causados por neoplasias. Las BMPs 2 y 4, logran corregir defectos de 100 ug/g, mientras que las BMPs 7 corrigen defectos de 1.000 ug/g. La utilizacin de BMP junto con implantes metlicos pueden estimular el crecimiento seo alrededor de los implantes, para lograr una integracin optima del implante. Sin embargo se requieren altas concentraciones para inducir regeneracin tisular con BMP. La produccin de morfgenos en la transduccin de tejidos, aplicados directamente a la protena podra ser ms efectiva. Algunos estudios realizados en clulas mesenquimales de roedores y de humanos, utilizan el gen BMP 2 BMP 7 para formacin de hueso nuevo in vivo e in vitro. Los ligandos tambin han sido incorporados dentro de la superficie de los vectores virales para permitir procesos celulares especficos, los cuales son menos riesgosos que otros mtodos (inyeccin directa). La accesibilidad y observacin visual de la cavidad oral, hace que estos tejidos sean ms favorables para la transferencia de genes que los rganos y tejidos viscerales. Mtodos como la electroporacin o sonoporacin han sido usados para transferir el gen Gdf11 (que codifica para la protena BMP11) en la pulpa dental amputada, y estimula la formacin y reparacin de dentina. En estos mtodos se aslan las clulas madres de la pulpa dental con genes que codifican para las BMP, y luego se implantan las clulas dentro de la pulpa injuriada. Este procedimiento ex vivo para transferir genes, que podran estimular la reparacin y formacin de dentina ms rpidamente. Sin embargo uno de los mayores campos de accin de la terapia gnica en odontologa, lo constituyen las tcnicas usadas para la transferencia de genes en el tratamiento primario, o como terapia adjunta en los pacientes que presentan cncer de cabeza y cuello. Podhajcer report la inmunizacin de ratones contra distintos tipos de cncer (colon, mama y sarcoma) mediante terapia gnica. Este experimento abre un nuevo camino hacia una vacuna contra el cncer. Uno de los tratamientos para el cncer utilizados hoy en da, consiste en marcar genticamente a las clulas tumorales de un cncer para que el organismo las reconozca como extraas y pueda luchar contra ellas, estimulando la respuesta inmune. Otras estrategias que se siguen en la actualidad contra el cncer son: inactivar oncogenes,

introducir genes supresores de tumores, introducir genes suicidas, e introducir genes que aumenten la sensibilidad a los frmacos.

En un estudio reciente, Wang y col (2001), sugieren que la terapia gnica con IL-12 combinada con la inmunizacin de la mucosa oral, puede inducir inmunidad sistmica antitumoral. Por otra parte Fukui y col (2001), proponen que la sensibilizacin de las clulas tumorales con ganciclovir, utilizando como vector el virus asociado al adenovirus, podra ser utilizado con xito en la terapia gnica para el carcinoma oral escamo-celular.

Estos procedimientos permiten cambiar el gen defectuoso por un gen normal en etapas tempranas del desarrollo embrionario, o en otras etapas de la vida del individuo, impidiendo en esta forma que se desarrolle la enfermedad. Sin embargo este tipo de tratamientos al igual que todos los tratamientos generados a partir del proyecto genoma humano generan una serie de implicaciones de tipo tico y legal que no son objeto de estudio en esta revisin.

El siguiente cuadro resume la metodologa utilizada en la terapia gnica:

La siguiente tabla resume las posibilidades teraputicas futuras de la terapia gnica, la bioingeniera y el uso de las stem cell en odontologa:

FUTURO DE LA INVESTIGACIN EN ODONTOLOGA INVESTIGACIN BSICA TERAPIA GNICA Conocimiento de genes involucrados en el desarrollo de caries, enfermedad Perfil gentico. Prevencin periodontal, cncer, sndromes y desarrollo de la enfermedad. maloclusiones APLICACIN CLNICA

de

aparicin

Conocimiento de los genomas de los microorganismos involucrados en la Desarrollo de genes teraputicos mutados que etiologa de la caries y las destruyan los microorganismos patgenos periodontopatas Conocimiento de los genes involucrados Induccin de agenesia (ej.terceros molares) y de en el desarrollo dental formacin de nuevos dientes. Induccin de neoformacin de tejidos normales Conocimiento de los genes involucrados en enfermedades que generen dao o prdida de en el desarrollo de hueso, mucosa y estos tejidos. Manipulacin del crecimiento cartlago (inhibicin y promocin) en sndromes y maloclusiones esquelticas. TERAPIA CON STEM CELL y BIOINGENIERA Cultivo de clulas embrionarias para desarrollar Conocimiento de las molculas necesarias dientes que reemplacen el rgano dental para el desarrollo dental (agenesia, ausencia) Conocimiento de las molculas necesarias Cultivo de fibroblastos, ameloblastos, para el desarrollo de tejidos odontoblastos, cementoblastos. Reemplazo de dentales(esmalte, dentina, cemento, tejidos perdidos por caries o periodontopatas. pulpa y ligamento) Promover el crecimiento de tejidos seos y Conocimiento de las molculas necesarias dentales en: maloclusiones esquelticas, para el desarrollo de hueso, cartlago, periodontopatas, trauma. Reemplazo de tejidos mucosa, glndulas salivales en sndromes, trauma y enfermedades de ATM. Conocimiento de las molculas necesarias Reemplazo para el desarrollo de rganos completos salivares. de dientes, maxilares, glndulas

IV.

CONCLUSIONES:
y Despus de esta investigacin, pudimos conocer la aplicacin de este tipo de terapias en el campo de la odontologa lo cual nos servir en nuestra carrera.

V.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:
Nakashima M. et al. The application of bone morphogenetic proteins to dental y tissue engineering. Nature Biotechnology vol. 21 Nm. 9 Setp. 2003. www. public-cmaps.coginst.uwf.edu/ cmaps/Ingenieria. y Kaji E. Leiden J. Gene and Stem Cell Therpies. JAMA February 7, 2001; vol. y 285, N- 5

Simanca E.,Torres A.,Castro O.,Deaza C.,Ibarra S., Otero L. Terapia gnica.Univ. javeriana.wikijaveriana