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Proyecto Especfico:

(PNEG1412)
Proyecto Integrado PNEG1

Datos Bsicos del Proyecto

Coordinador: Claudio Panadero Pastrana Unidad Sede:321000 Duracin: Mes y Ao de comienzo: mbito de Intervencin: Palabras clave: Biodiesel, Jatropha, sostenibilidad, tecnologa.

Resumen Ejecutivo
La matriz energtica nacional depende en un 86% de energa fsil, no renovable. A su vez, el gasoil o diesel representa el 66% del consumo total de combustibles lquidos del pas, porcentaje destinado casi en su totalidad al sector agrcola (45%) y de transporte de cargas (48%) (www.sagpya.mecon.gov.ar, 2006). La urgente necesidad de obtener fuentes de energas renovables y alternativas est definitivamente instalada en la agenda de los principales lderes del mundo. En dicho contexto, los biocombustibles de primera generacin, obtenidos a partir del aprovechamiento de recursos vegetales cultivables, constituyen la primera lnea de intervencin en la obtencin de energas limpias renovables y disponibles en el corto plazo, hasta tanto la ciencia avance hacia fuentes de energa masiva ms eficientes. En la actualidad, las principales materias primas utilizadas para este tipo de tecnologas, la constituyen cultivos tales como la palma, soja, colza, girasol y crtamo; todas ellas especies comestibles. A nivel mundial, la creciente demanda de estos alimentos, motorizada principalmente por la economa asitica, ha observado un crecimiento sin precedentes, y que a su vez ha traccionado la cotizacin internacional de estas oleaginosas tradicionales. Estos factores entre otros, sumados al alza del petrleo, explican los actuales valores del mercado. Ante esta situacin, es evidente iniciar la bsqueda de nuevas y sostenibles fuentes de aceites y que su obtencin, adems, traiga aparejado consigo beneficios sociales, econmicos y ecolgicos. La bibliografa cita a la especie Jatropha curcas Linneo como especie vegetal que produce un aceite cuyo biodiesel satisface las normas internacionales de calidad, el cual es no comestible (txico para el consumo humano y animal), con un rendimiento cultural por hectrea potencialmente superior al de soja y capaz de ser cultivado en ambientes agroecolgicos desfavorables para la utilizacin de especies anuales como las presentes en nuestro pas (Heller, 1996). Esta especie, posiblemente originaria de Centroamrica, se encuentra asilvestrada en Argentina y an es posible encontrarla en el norte del pas (Lilloa Vol. IX, 1947; Font, 2003; Carrizo, 2007; 2008). Sin embargo, en el mundo el conocimiento tcnico sobre esta especie es muy limitado, y referido a condiciones agroecolgicas notoriamente diferentes a las amplias regiones potencialmente aprovechables para el cultivo de J. curcas que dispone nuestro pas. Por lo tanto, la necesidad de generar y transferir tecnologa para el aprovechamiento sostenible de especies energticas estratgicas, principalmente Jatropha curcas, demanda el abordaje integral e innovativo propio del

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INTA. Este Proyecto basa su estrategia de intervencin en tres campos sustantivos: 1. Investigacin: Generacin y ajuste de tecnologas mediante ensayos experimentales, evaluaciones, determinaciones a campo y laboratorio (estudios biolgicos, ecofisiolgicos y genticos que contribuyan a morigerar las limitantes de la produccin y as maximizar los resultados; determinaciones de calidad industrial; estudios para mecanizar la cosecha). A estos efectos se coordinar una red de investigacin bsica que sustente y aliente el desarrollo de tecnologa para el manejo cultural de estos nuevos potenciales cultivos; la misma estar conformada inicialmente por estaciones de INTA, tales como EEA Salta, EEA Cerro Azul, EECT Yuto, EEA El Colorado, EEA La Rioja, EEA Santiago del Estero, CER Leales, Instituto de Gentica(IGEAF) e Instituto de Ingeniera Rural(IIR); participan tambin las Universidades Nacionales de Salta, San Luis y Santiago del Estero. 2. Experimentacin adaptativa: Validacin experimental en campos demostrativos del INTA y de productores. 3. Transferencia y capacitacin: Intensificacin de la presencia Institucional en acciones de extensin, capacitacin de actores de cadenas y sistemas. Este Proyecto pretende generar herramientas tecnolgicas que apuntalen la sostenibilidad de la cadena de produccin de biodiesel e indirectamente, a fortalecer la matriz energtica nacional. En lo social, contribuir a la transformacin de reas rurales actualmente marginales de la economa nacional, en nuevos polos agroindustriales. En lo econmico, proveer materias primas que mejoren la estructura de costos industriales y as favorecer la adopcin del biodiesel por parte de los usuarios finales. En lo ecolgico, contribuir a la recuperacin de ambientes histricamente degradados por falta de manejo, y mejorar la calidad de los servicios ambientales que actualmente prestan dichos ecosistemas. En lo agronmico, contribuir al desarrollo de un nuevo y potencial cultivo para reas marginales del territorio nacional. En esta primera etapa, y en base al estudio que est desarrollando la EEA Salta, es aconsejable iniciar el trabajo de investigacin con Jatropha, y luego continuar con otras especies.

Unidades Participantes
INTA: E.E.A. Salta E.E.A. Yuto E.E.A. Cerro Azul E.E.A. El Colorado E.E.A. Leales E.E.A. Santiago Estero EEA La Rioja Inst. de Gentica Inst. de Microbiol.y Zoologa Agricola. AER Aguilares Inst. de Ingeniera Rural E.E.A. Marcos Jurez Extra-INTA:
Instituciones/Entidades Institutos Descripcin Consiglio Nazionale delle Ricerche (Italia) Instituto Politcnico Nacional (Mxico) Otros Sector Privado Sector Pblico Asociacin Cooperadora de INTA Salta Fundacin YPF Ministerio de Produccin de Jujuy Secretara de Produccin de Salta Secretara de Produccin de Santiago del Estero Universidades Aportes RRHH RRHH RRHH Servicios Monetario RRHH RRHH RRHH RRHH

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U.N. Salta Lab Micropropagacin U.N San Luis Fisiologa vegetal U.N de Santiago del Estero U.N. Salta Botnica Biologa Floral

Servicios RRHH Servicios RRHH RRHH

Equipo Tcnico
Coordinador del Proyecto
Nombre y Apellido % tiempo / ao Legajo DNI Unidad Especialidad e-mail 1 11. Gentica y Mejoramiento11.04 Gentica del comportamiento11.04.01 Interaccin de cppastrana@correo.inta.gov.ar 50 los componentes genticos y ambientales en la expresin y en la estabilidad. 2 3

Claudio Panadero 12174 Pastrana

8632725

321000

50

50

Participantes INTA
Nombre y Apellido % tiempo / ao 1 3. Produccin Vegetal-3.01 Modelos y sistemas productivos vegetales3.01.08 Oleaginosas. 3. Produccin Vegetal-3.01 Modelos y sistemas productivos vegetales3.01.08 Oleaginosas. 3. Produccin Vegetal-3.01 Modelos y sistemas productivos vegetales3.01.08 Oleaginosas. 11. Gentica y Mejoramiento11.06 Mejoramiento gentico vegetal -11.06.01 Gentica de oleaginosas. 3. Produccin Vegetal-3.01 Modelos y sistemas 2 3

Legajo

DNI

Unidad

Funcin

Especialidad

e-mail

Adolfo Carrizo

17606

26627725 321000

Responsable de Mdulo

acarrizo@correo.inta.gov.ar

60

60

60

Daniel Colque

17779

25136891 321000

Personal Auxiliar de campo

dcolque@correo.inta.gov.ar

30

30

30

Carlos Caba

29742030 321000

Personal Auxiliar de campo

30

30

30

Adrin de Luca

18897

22086590 421000

Responsable de Mdulo

genanuales@cerro.inta.gov.ar 30

30

30

11352 Carlos

12407596 323000

Investigador

caguirre@correo.inta.gov.ar

10

10

10

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Aguirre

productivos vegetales3.01.11 Frutales. 3. Produccin Vegetal-3.01 Modelos y sistemas productivos vegetales3.01.08 Oleaginosas. 3. Produccin Vegetal-3.01 Modelos y sistemas productivos vegetales3.01.08 Oleaginosas. 3. Produccin Vegetal-3.01 Modelos y sistemas productivos vegetales3.01.06 Dasonoma silvicultura. 3. Produccin Vegetal-3.01 Modelos y sistemas productivos vegetales3.01.04 Evaluacion de recursosdiversificacion productiva. 5. Produccin Animal-5.04 Bovinocultura5.04.09 Produccin de carne en sistemas silvopastoriles. 6. Produccin Animal-6.06 Forrajes y pasturas-6.06.02 Productividad, utilizacin, calidad y persistencia de las pasturas. 6. Produccin Animal-6.06 Forrajes y pasturas-6.06.02 Productividad, utilizacin, calidad y persistencia de las pasturas. 1. Proteccin Vegetal-1.01 Fitopatologa1.01.10 Manejo de enfermedades. 13. Recursos Naturales-13.02 Suelos-13.02.06

Eduardo Ocampo

7815

7656640

414000

Investigador

aocampo@correo.inta.gov.ar

15

15

15

Mario Mondino

17015

12074327 312000

Investigador

mmondino@intasgo.gov.ar

15

15

15

Marcelo Navall

18252

23758115 312000

Investigador

mnavall@intasgo.gov.ar

10

10

10

Fernando Biurrun

17691

10040551 332000

Investigador

fnbiurrun@yahoo.com.ar

20

20

20

Jos Nasca

18210

23518707 313000

Investigador

jnasca@correo.inta.gov.ar

20

20

20

Florencia Ortega

91695

28883180 313000

Investigador

20

20

20

Luciana Martnez

17486

26793014 313000

Investigador

20

20

20

Carolina Prez Brandn

17505

25662975 321000

Becario

cpbrandan@gmail.com

10

10

10

Toms Rodrguez

11370

8162191

321000

Personal de Apoyo

10

10

10

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fertilidad de suelos. 2. Proteccin Vegetal-2.05 Manejo integrado2.05.01 Sistemas mecnicos, qumicos, biolgicos, jgmonge@correo.inta.gov.ar culturales e integrados para el control y manejo de adversidades de la agricultura; procesos de erradicacin. 2. Proteccin Vegetal-2.04 Microbiologaaperticari@cnia.inta.gov.ar

Jos Luis Gimnez Monge

15689

5076079

321000

Investigador

10

10

10

Alejandro Perticari

13274

11981791 232000

Investigador

10

10

10

Ignacio Huerga

17750

28533040 222000

Becario

8. Calidad-8.03 Industrial-8.03.01 Preservacin, evaluacin y ihuerga@cnia.inta.gov.ar gestin de la calidad integral de productos especficos.

15

15

15

Nstor Ros

18228

8554386

311001

18. Desarrollo Rural - Extensin y Transferencia18.03 Extensin y Transferencia18.03.01 Extensionista vrima159@yahoo.com.ar Actividades diversas de demostracin y difusin de nuevas tecnologas. 11. Gentica y Mejoramiento11.06 Mejoramiento gentico vegetal -11.06.01 Gentica de oleaginosas. 11. Gentica y Mejoramiento11.06 Mejoramiento gentico vegetal -11.06.01 Gentica de oleaginosas. 11. Gentica y Mejoramiento11.06 Mejoramiento gentico vegetal -11.06.01 Gentica de oleaginosas. 11. Gentica y Mejoramiento11.06 Mejoramiento gentico vegetal -11.06.01 Gentica de oleaginosas. 10.

20

20

20

Ma. Elisa Maggio

16333

21768185 321000

Investigador

memaggio@correo.inta.gov.ar 25

25

25

Francisco lvarez

12823

13055115 321000

Personal Auxiliar de laboratorio

10

10

10

Silvina Fariza

22944158 421000

Investigador

silvinaf@cerro.inta.gov.ar

25

25

25

Jorge Blaszchik

27342188 421000

Personal Auxiliar de laboratorio

jorgeb05@hotmail.com

25

25

25

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Ma. Gabriela Pacheco

16472

17623400 231000

Investigador

Biotecnologa10.03 Gentica de avanzada10.03.01 Cartografa gentica y fsica. 10. Biotecnologa10.03 Gentica de avanzada10.03.02 Anlisis genmico. 10. Biotecnologa10.03 Gentica de avanzada10.03.02 Anlisis genmico. 10. Biotecnologa10.03 Gentica de avanzada10.03.02 Anlisis genmico. 10. Biotecnologa10.01 Herramientas de biocontrol10.01.08 Uso de marcadores moleculares. 16. Economa, Sociologa y Aministracin Rural-16.01 Microeconoma 16.01.03 Costos - Formulacin y Evaluacin de Proyectos.

mpacheco@cnia.inta.gov.ar

10

10

10

Daniel Diaz

10098

7774539

231000

Investigador

ddiaz@cnia.inta.gov.ar

10

10

10

Valeria Etchart

23469908 231000

Investigador

vetchart@cnia.inta.gov.ar

15

15

15

Alejandra Landau

17287

22549300 231000

Investigador

alandau@cnia.inta.gov.ar

15

15

15

Javier Gilli

16068

21405793 621000

Investigador

jgilli@mjuarez.inta.gov.ar

10

10

10

Hctor Bazn

10394

11038833 321000

Investigador

hbazan@correo.inta.gov.ar

10

10

10

Sandra Vzquez

17223

23353019 321000

Servicios 20. Otros-20.07 svazquez@correo.inta.gov.ar profesionales Comunicaciones-

10

10

10

Participante/Colaborador EXTRA-INTA
Nombre y Apellido % tiempo / ao 1 19. Estadstica19.01 Diseos Muestrales y Experimentales19.01.02 Bases experimentales de soporte a la investigacin. 2 3

DNI

Institucin

Funcin

Especialidad

e-mail

Carlos Lpez

8504418

U.N. Salta Lab Asesor Micropropagacin

carlos@unse.edu.ar

15

15

15

Ernesto Pozo

Ministerio de 17680607 Produccin de Jujuy

Extensin

18. Desarrollo Rural Extensin y Transferencia18.02 Capacitacin 18.02.01 isaacpozo@yahoo.com.ar Capacitacin de tcnicos, productores y personal de campo y de procesos agroindustriales.

10

10

10

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Wilfredo Bernal

Secretara de 14302725 Produccin de Salta

Consultor

17. Economa, Sociologa y Aministracin Rural-17 04 Sociologa Rural-17.04.05 Instituciones. 17. Economa, Sociologa y Aministracin Rural-17 04 Sociologa Rural-17.04.05 Instituciones. 4. Produccin Vegetal-4.04 Ecofisiologa4.05.01 Morfologa. 4. Produccin Vegetal-4.04 Ecofisiologa4.05.01 Morfologa. 4. Produccin Vegetal-4.04 Ecofisiologa4.05.01 Morfologa.

wbernal@gobiernosalta.gov.ar

Guillermo Brim

Secretara de Produccin de 14272856 Santiago del Estero

Consultor

Angela Etcheverry

U.N. Salta Lab 14865512 Investigador Micropropagacin

angelaetcheverry@salnet.com.ar 25

25

25

Trinidad Figueroa

U.N. Salta Lab 24875183 investigador Micropropagacin

25

25

25

Mercedes Aleman

U.N. Salta Lab 21086048 Investigador Micropropagacin

25

25

25

Maritza Vacca Molina

10. Biotecnologa10.01 U.N. Salta Lab REFERENTE 18735126 Herramientas Micropropagacin TECNICO de biocontrol10.01.01 Cultivo de tejidos. 10. Biotecnologa10.01 Herramientas de biocontrol10.01.01 Cultivo de tejidos. 10. Biotecnologa10.03 Gentica de avanzada10.03.01 Cartografa gentica y fsica. 10. Biotecnologa10.03 Gentica de avanzada10.03.02 Anlisis genmico.

plantamari@yahoo.com.ar

30

30

30

Ma. Cristina Bonomo

11943149

U.N. Salta Lab Investigador Micropropagacin

mbonomo@unsa.edu.ar

30

30

30

Mirella Ciacio

Consiglio 93283687 Nazionale delle Ricerche (Italia)

Investigador

ciacio@ibim.cnr.it

50

50

50

Jorge Martinez Herrera

Instituto Politcnico Nacional (Mxico)

Investigador

jmartin@ipn.mx

10

10

10

Hilda Pedranzani

13259537

U.N San Luis Fisiologa vegetal

4. Produccin Vegetal-4.04 EcofisiologaREFERENTE 4.04.07 TECNICO Respuesta al stress hdrico, salino, trmico, etc. 4. Produccin Vegetal-4.04 Ecofisiologa4.04.07 Respuesta al stress hdrico, salino, trmico,

hepedra@fices.unsl.edu.ar

30

30

30

Nancy Tavecchio

13024872

U.N San Luis Fisiologa vegetal

Investigador

nancytavecchio@speedy.com.ar

30

30

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etc.

Introduccin
Situacin Inicial El principal insumo en la cadena productiva de una planta de biodiesel con tecnologa de primera generacin es el aceite, responsable del 80 al 90% de los costos de produccin. Por lo tanto, la sostenibilidad de los emprendimientos industriales depende de la eleccin de la materia prima. En la actualidad, la produccin de biodiesel en Argentina utiliza como materia prima al aceite de soja, colza y girasol, por ser los de mayor disponibilidad en el mercado. Es de pblico conocimiento el alza registrada en dichos commodities durante el ltimo ao, y los especialistas en economa concuerdan que a futuro dicha tendencia se mantendr, traducindose esto en un mayor costo tanto para el industrial como para el usuario de biodiesel. La ley 26093 establece el corte obligatorio en un 5% de combustibles fsiles a partir del 2010. Por lo tanto, resulta imperioso disponer de fuentes oleaginosas alternativas a los aceites tradicionales y comestibles. A nivel mundial se observa un inters creciente por la especie Jatropha curcas Linneo, cuyo aceite es NO comestible y adems potencialmente capaz de ser implantado en reas marginales.Por lo tanto, su produccin queda fuera de las discusiones alimentos energa. Segn la bibliografa consultada (Heller, 1996) J. curcas podra ser cultivada en Argentina en reas agroecolgicas desfavorables para un cultivo anual tradicional como soja, girasol, colza y crtamo, potencialmente capaz de producir por ha el equivalente a la produccin de 3 ha de soja, y fundamentalmente permitira el desarrollo de enormes reas rurales ubicadas en ecosistemas degradados y marginales de la economa nacional, histricamente caracterizadas por la tala indiscriminada y el sobrepastoreo. Extrapolando datos provenientes del Brasil (Rosa e Abreu, 2006) para dar cumplimiento a la ley nacional N 26.093, Argentina requerira del cultivo de 280.000 ha de J. curcas si su aceite fuera extrado mediante solventes; de 462.000 ha si fuera extrado mediante proceso mecnico (Carrizo, 2006). Sin embargo, en el pas no existen antecedentes sobre su cultivo que permitan sostener dicha hiptesis, y en el mbito internacional el conocimiento es muy limitado y basado en regiones agroecolgicas distintas a las argentinas. Por lo tanto, no es tecnologa validada para el pas. Argentina cuenta con 24 millones de ha slo en su Chaco Semirido (INTA Pro.Re.NOA, 2006), regin que a priori rene los requerimientos agroclimticos de esta especie; sin embargo, debiera evaluarse el rea de implantacin potencial de la especie, y para esto, es evidente un trabajo de investigacin ms profundo. El disponer de un abanico de nuevos cultivos energticos emplazados en reas potencialmente aptas pero subutilizadas, se constituira en un elemento estratgico para obtener Biodiesel de manera sostenible; y en forma paralela, producira un efecto beneficioso para las economas marginales del interior del pas, al contribuir al desarrollo de industrias y tecnologas varias, generacin de mano de obra calificada, e inclusin social, entre otros. Antecedentes en el pas En Argentina no existen registros fidedignos sobre cultivos comerciales de alguna especie del gnero Jatropha. A semejanza de lo que ocurre en muchos otros pases que poseen condiciones agroclimticas potenciales para el cultivo de J. curcas, algunas de las voces ms entusiastas que fomentan su cultivo, son las mismas que venden semillas y plantines, a muy altos costos y de potencial gentico desconocido (Benge, 2006). Por lo tanto, no es conveniente extrapolar tal informacin ya que, entre las condiciones de cultivo que se dispondran en Argentina y el mximo rendimiento que se pudiera obtener en otras regiones del mundo, existen sustanciales diferencias como: condiciones agroclimticas, material gentico disponible y falta de tecnologa de cultivo. Adems, la realidad socioeconmica de nuestro pas es distinta a la de cualquier otro donde se hayan producidos experiencias previas, como Brasil, India, pases del frica, Centroamrica o del sudeste asitico. En el noroeste de Argentina es posible encontrar ejemplares de Jatropha curcas L., como los hallados por tcnicos de EEA Salta (Carrizo, 2006). Adems se encuentran en forma espontnea J. macrocarpa Griseb y J. hieronymi Kuntze (Lilloa vol IX, 1947; Fono, 2003; Carrizo, 2006), especies nativas cuyo biodiesel obtenido a partir del aceite de sus semillas, cumple con las normativas internacionales de calidad (Casotti, 2006). Se adjunta el documento elaborado por EEA Salta Situacin del estudio de Jatropha curcas L en Argentina, y que sirve de fundamento para este proyecto que se presenta. Beneficiarios (Poblacin Objetivo)

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Los beneficiarios del presente Proyecto son los distintos actores de la cadena de produccin de biodiesel: Productores agrcolas, ganaderos y mixtos de las ecoregiones Chaco, Cuyo y Mesopotamia; poblaciones rurales de las mismas; provincias y municipios de las regiones involucradas; PyMEs de la cadena industrial de biodiesel; Refineras de petrleo; usuarios de gasoil. Problemas y/u Oportunidades PROBLEMAS Es indiscutible que la perdurabilidad de las reservas de energa fsil, por su naturaleza no renovable, tiene un lmite. El petrleo se encuentra en su mayor valor histrico, y los analistas internacionales coinciden en que la tendencia oscilar a partir de ahora, entre mnimas fluctuaciones referidas al precio actual y una pendiente alcista. En nuestro pas, desde hace algunos aos y por distintos motivos, se evidencian problemas en el abastecimiento de gasoil que dificultan el normal desempeo de las labores agrcolas, muchas de las cuales tienen momentos crticos de realizacin y por ende, un alto costo de oportunidad. En la actualidad, las materias primas cultivables utilizadas en el pas para la produccin de biodiesel corresponden a especies como soja, colza y girasol, que registran una tendencia alcista respecto a sus valores histricos, y por ende los torna no competitivos en el mercado interno. Existe una vasta superficie del territorio nacional con severos problemas de degradacin ambiental y subutilizadas, cuya poblacin econmicamente activa (PEA) migra continuamente del campo a la ciudad por falta de reales oportunidades de trabajo y en bsqueda de mejoras en su calidad de vida. En el mundo no existe un paquete tecnolgico para el manejo de Jatropha curcas. An ms, las condiciones agroecolgicas y socio-econmicas que presentan los ecosistemas locales son muy diferentes a las de aquellas zonas que tienen mayor experiencia en el manejo de esta especie, de ciclo de vida perenne y cuyos rendimientos se estabilizaran luego de 4-5 aos. A semejanza de otras especies arbreas, los primeros aos presentan un flujo de caja negativo debido a los bajos niveles de produccin y al alto costo de implantacin. Por lo tanto, es muy peligroso extrapolar informacin extranjera sin una generacin de informacin y validacin locales. OPORTUNIDADES: Existe un contexto internacional favorable para la produccin de biocombustibles, en el cual la especie J. curcas es indiscutiblemente unas de las alternativas ms slidas y aceptadas. Esta especie est asilvestrada en Argentina y adems existen especies nativas como Jatropha macrocarpa Grisebach y J. hieronymi Kuntze cuyos biodiesel satisfacen los estndares de calidad internacional (Casotti, 2006) constituyndose adems en germoplasma base para el programa de mejoramiento gentico de J. curcas. El pas posee amplias superficies subutilizadas y potencialmente aprovechables para el cultivo de Jatropha; una cultura de tecnificacin destacada; refineras de petrleo con buen nivel de rendimiento en gasoil en las zonas de estudio e infraestructura de servicios (principalmente en Salta), que se traducen en ventajas competitivas. Argentina tiene en vigencia la Ley n 26093 que establece el corte obligatorio de naftas y gasoil a partir del 1 de enero de 2010, y a su vez otorga beneficios fiscales y financieros a quienes produzcan en el marco de su mbito de aplicacin. Si bien los tcnicos responsables del proyecto estiman que el desarrollo de tecnologa de manejo para J. curcas tendr dificultades propias de todo proceso de innovacin, es esa misma dificultad la que la convierte en oportunidad y trae a colacin el ejemplo del complejo agroindustrial argentino de la soja, considerado el ms eficiente del mundo. Supuestos Relevantes 1.- Cambios en la poltica agropecuaria en general. 2.- Insuficientes recursos humanos y financieros para abarcar la totalidad de las lneas propuestas. Es crtica la necesidad de disponer de RRHH y un vehculo adecuado acorde a las regiones en las cuales se desarrollar el proyecto. 3.- Cambio climtico. 4.- Condiciones no controlables por el Proyecto de tipo ambiental, econmico y social. 5.- No aparicin de enfermedades y plagas no manejables.

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Objetivos
Objetivo General: Generar y transferir tecnologas que permitan el abordaje integral y sostenible de la produccin de materias primas para la obtencin de biodiesel, inicialmente para Jatropha, en reas marginales del norte de Argentina. Objetivos Especficos: Creacin y evaluacin de una red de ensayos y de una coleccin de trabajo del gnero Jatropha de diversas procedencias geogrficas,y rplica en otras EEA de INTA. Generacin de tecnologas de manejo cultural, cosecha y poscosecha de Jatropha validada para distintos ambientes agroecolgicos del pas. Evaluacin del efecto del estrs abitico sobre la biomasa de plantas de Jatropha curcas y otras nativas para el desarrollo de posibles estrategias de manejo y mejoramiento gentico. Caracterizacin fenotpica y molecular de la Coleccin de Trabajo de Jatropha frente a estrs abitico. Identificacin de los progenitores para el programa de mejoramiento. Desarrollo de tecnologa para micropropagacin del gnero Jatropha. Evaluacin de la calidad industrial del material ensayado. Transferencia al medio.

Estrategia de intervencin
Metodologa del Proyecto El proyecto consta de cuatro mdulos bsicos, estrechamente vinculados entre s, segn se desprender de esta lectura: 1. Desarrollo de Tecnologa para Manejo Cultural de Jatropha. 2. Pre breeding y caracterizacin molecular de oleaginosas tropicales relacionadas con la produccin de biodiesel. 3. Ecofisiologa de Jatropha. 4. Desarrollo de Tecnologa para Micropropagacin de Jatropha. Justificacin para la incorporacin de un Mdulo de Desarrollo de Tecnologa para Manejo Cultural de Jatropha El Chaco Semirido representa una zona histricamente relegada de la geografa econmica del pas, y en consecuencia, socialmente marginal. La historia ensea que los cultivos han sido los verdaderos motores del desarrollo rural sostenido. En Argentina han habido, en pocas muy recientes, intentos de adoptar nuevos "super" cultivos (por ejemplo, la jojoba o las miles de hectreas improductivas de olivo) pensados como alternativa a esta problemtica socio-econmica. Sin embargo, los mismos no tuvieron un adecuado acompaamiento tecnolgico sumado a que el oportunismo fue quien lider dichas propuestas, y hoy representan resonantes fracasos. Es difcil imaginar otras alternativas productivas para el semirido, adems de la ganadera. Vale aclarar que este proyecto busca desarrollar un modelo productivo mixto: ganadero y agroindustrial. Existe un contexto internacional favorable y sin precedentes relacionado al desarrollo de los biocombustibles, en los que Argentina podra sentar una importante presencia en el mercado. En este escenario, el INTA podra aportar su capacidad tecnolgica para un doble propsito: contribuir al desarrollo de una verdadera alternativa productiva para una vasta regin y generar materia prima para biodiesel, tanto para el mercado interno como potencialmente, para el de exportacin. Por lo tanto, esta inmejorable oportunidad no debiera ser desperdiciada, a semejanza de lo que ocurre en los pases del mundo donde es posible cultivar esta especie, y donde Jatropha constituye el destino de sus principales inversiones en materia de desarrollo de biocombustibles de primera generacin.

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Sin tecnologa slo es posible esperar resultados marginales. Dentro de la estructura de costos, reciben especial atencin los gastos de coordinacin general para eficientizar el trabajo articulado del equipo, realizado fundamentalmente con reuniones semestrales. Un potencial submdulo de Calidad industrial se consider conveniente incluirlo recin en la segunda etapa del proyecto; es decir, a partir del cuarto ao. Justificacin para la incorporacin de un Mdulo de Pre breeding y Caracterizacin Molecular Queda en evidencia el gran potencial que tendra la produccin de Jatropha curcas sobre las economas regionales del norte argentino. Sin embargo, hasta el momento no hay informacin fidedigna sobre su adaptacin como cultivo comercial. A partir del estudio que desde el 2006 tcnicos de EEA Salta vienen realizando sobre esta especie, se sugiere que J. curcas podra tener problemas de adaptacin en el Chaco Semirido debido principalmente a la ocurrencia de heladas. Un argumento slido (y lgico) al respecto reside en que los ejemplares encontrados hasta la fecha estn presentes en zonas subtropicales con baja ocurrencia de heladas. Si se considera que se trata de una especie perenne y que por ende alcanzara su pico de produccin al cabo de 4 o 5 aos; y que el INTA debe brindar respuestas tecnolgicas en el corto plazo, es razonable pensar en iniciar trabajos con vistas al mejoramiento gentico simultneamente con la realizacin de tareas relacionadas a la domesticacin de la especie. La calidad de producto del material en proceso de prebreeding se evaluar mediante la metodologa que se desarrolle a partir de la tesis del Ing. Adolfo Carrizo, que casualmente se refiere a la evaluacin de la tolerancia al fro de Jatropha curcas. Lgicamente se contempla la caracterizacin industrial de sus respectivos aceites y FAME. Justificacin para la inclusin de un mdulo de Micropropagacin El rea potencial de implantacin de esta especie involucra una amplia y diversa regin del pas. La cantidad de semillas que se necesitara, interferira con su destino para industrializacin, al menos durante los primeros aos. Para avanzar en el desarrollo de cosecha mecanizada, se requiere disponer de plantaciones con la mayor homogeneidad posible. Al respecto, si bien desde el proyecto se contribuir a tal efecto, es imperioso disponer de clones. Es objetivo de este mdulo poner a punto tecnologa para micropropagacin, de modo que, una vez identificados los mejores genotipos para cada ambiente, contar con una herramienta tecnolgica que permita disponer de material gentico homogneo para implantar a gran escala. Esta tecnologa es la recomendada para producciones citrcolas y frutcolas intensivas y de alto rendimiento cultural y en calidad. Justificacin para la incorporacin de un mdulo de Ecofisiologa El conocimiento tcnico sobre esta especie es a nivel mundial, escaso. An ms, los pocos trabajos serios existentes han sido realizados en regiones con caractersticas agroclimticas muy distintas a las de nuestro Chaco Semirido. No es razonable realizar un desarrollo de tecnologa para una especie silvestre (domesticacin) sin contar con una base de conocimientos fisiolgicos y ecofisiolgicos que sustenten dicho desarrollo. Metodologa de los Mdulos: Ttulos de los Mdulos Desarrollo de Tecnologa para el manejo cultural de Jatropha Desarrollo de tecnologa para micropropagacin de Jatropha. Pre breeding y Caracterizacin Molecular de Oleaginosas subtropicales relacionadas con la produccin de biodiesel. Ecofisiologa de Jatropha. Metodologa del Mdulo:Desarrollo de Tecnologa para el manejo cultural de Jatropha

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Metodologa:SUPUESTOS RELEVANTES Es fundamental disponer de un vehculo cabina doble y traccin integral. Debe tenerse muy en cuenta que es un proyecto que busca aportar alternativas productivas para amplias regiones marginales del norte del pas, y por ende, con nula o poca infraestructura de caminos. En el caso de RRHH, es fundamental la contratacin de un profesional de apoyo para el mdulo. En el caso de RRFF, las actividades propuestas corresponden a aquellas que pueden realizarse con los montos presupuestados. DESCRIPCION DE LA METODOLOGIA Se establecer una red nacional de ensayos para evaluar el potencial de rendimiento cultural e industrial de distintas procedencias, tanto nacionales como del exterior, de Jatropha curcas L., J. macrocarpa y J. hieronymi, estas dos ltimas nativas de Argentina. Sin dudas, debe ampliarse la bsqueda de J. curcas asilvestradas en otras provincias argentinas, actividad avalada por la ubicacin de ejemplares en Salta y Jujuy. A los efectos 1) Se plantearn ensayos para evaluar respuestas a Marcos de plantacin, poda y conduccin; respuesta a dosis variables de riego y fertilizacin; comportamientos segn fechas y sistemas de plantacin; respuestas a manejo con sustancias reguladoras del crecimiento; intersiembra con pasturas subtropicales; Determinacin de costos de produccin. Se aclara que este mdulo presenta participantes INTA y extra INTA, cuyo presupuesto se incluye en Gastos de Coordinacin dado que son acciones del tipo asesoramiento, que no justifican su inclusin en un presupuesto anual ni una demanda constante de dedicacin al proyecto. 2) Se realizarn observaciones fenolgicas peridicas a la Coleccin de Trabajo. Debido a que an no existen descriptores del germoplasma disponible en el mundo, y a que este proyecto presenta un Mdulo de Mejoramiento Gentico, es incoherente basar una estrategia de mejoramiento sin tener una mnimo conocimiento in situ sobre el comportamiento de dichos materiales segn condiciones agroecolgicas imperantes, resultando infructuoso todo esfuerzo posterior en trminos de tiempo y recursos disponibles.

La red de ensayos poseer la suficiente flexibilidad como para permitir la incorporacin de nuevo germoplasma a evaluar. Adems, los ejemplares de esta red de ensayos constituirn simultneamente una Coleccin de Trabajo; es decir, fuente de germoplasma para el Mdulo de mejoramiento gentico. Hasta febrero del 2008 se han instalado ensayos similares entre s en localidades de Salta y Jujuy correspondientes a distintos ambientes agroecolgicos tales como Valles Templados (Cerrillos), Chaco Semirido (El Quebrachal, Hickman, Rivadavia Banda Sur y Palma Sola en Jujuy) y Umbral al Chaco con clima tropical subhmedo (Yuto y Chalicn, ambas en Jujuy). Estos ensayos pasarn a formar parte de la Red. Dada la gran demanda de informacin proveniente de otras provincias de Argentina, y para las cuales no sera vlida la informacin generada en Salta y Jujuy, se considera de vital importancia la instalacin de ensayos en otras provincias. Los mismos se realizarn con el soporte de EEA Salta, en virtud a la experiencia proveniente de los ensayos ya instalados. Simultneamente se coordinar una red de investigacin bsica que sustente y aliente el manejo tecnolgico de J. curcas; la misma estar conformada inicialmente por estaciones de INTA, tales como EEA Salta, EEA Cerro Azul, EECT Yuto, EEA El Colorado, EEA La Rioja, EEA Santiago del Estero, CER Leales, Inst. de Gentica e Inst. de Ingeniera Rural; participan las Universidades Nacionales de Salta, San Luis y Santiago del Estero. Se contar con la asesora del Dr. Carlos Lpez (U.N.Se) para el diseo y anlisis de experimentos, tanto en laboratorio como a campo y, dada su vasta experiencia en Mejoramiento Gentico Forestal, consultor del programa de Mejoramiento Gentico de este proyecto. Una vez realizadas las determinaciones que correspondieren sobre el material de ensayo proveniente de los distintos puntos de la red, en EEA Salta se obtendr el aceite del material de los ensayos y luego se remitirn al IIR (tesis Ing. Huerga) muestras de cada uno para determinar parmetros de calidad industrial y determinacin de propiedades del biodiesel obtenido a partir de los aceites de cada ensayo y de las distintas combinaciones de los mismos. Uno de los objetivos intrnsecos del proyecto, es lograr la mecanizacin integral de la cosecha del potencial cultivo de J. curcas. Para ello, se desarrollan desde el ao 1 acciones tendientes a tal fin. Dado que esta especie estabilizara su produccin a partir del cuarto o quinto ao, este objetivo se vera cumplido en una etapa siguiente del proyecto.

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Los resultados se presentarn en Material grfico y audiovisual de Divulgacin Tcnica; Jornadas, Das de campo y Seminarios; web EEA Salta e IIR Castelar.

Metodologa del Mdulo:Desarrollo de tecnologa para micropropagacin de Jatropha. Metodologa:METODOLOGIA PARA MICROPROPAGACION I. Material Vegetal: Semillas de Jatropha curcas L., se desinfectarn iniciando el proceso con un lavado profundo con una solucin de detergente (0.1%, v/v; 15 minutos), y realizando enjuagues con agua corriente. Posteriormente sern tratadas con un fungo bactericida sistmico y se completar el proceso de desinfeccin, en condiciones de asepsia, con soluciones de bicloruro de mercurio variando la concentracin y el tiempo de exposicin, siguiendo con 4 lavados con agua destilada estril. II. Introduccin in vitro del material vegetal y condiciones de crecimiento Germinacin Las semillas desinfectadas sern dispuestas en los medios de Murashige y Skoog (MS) y Woody Plant Medium (WPM), con macronutrientes reducidos al 50%, adicionando una fuente de carbohidratos (sacarosa) y se emplear agar- agar como agente gelificante, sin reguladores de crecimiento. Se registrar el porcentaje de contaminacin y germinacin de semillas. Seleccin de explantos: A partir de las semillas germinadas, se obtendrn tejidos foliares, ejes embrionarios y cotiledones, a diferentes tiempos. Se emplearn brotes apicales y axilares. Iniciacin de cultivos: Para la introduccin se emplear el medio de Murashige y Skoog (MS, 1962), suplementados con BAP(6bencylaminopurina) y KIN (Kinetina) en concentraciones entre 1-6 mg/l, solo o en combinacin con AIA (Acido indolactico) y sulfato de adenina. Los medios se gelificarn con agar al 0.8%, se emplear sacarosa al 3%.Todos los medios de cultivos sern ajustados a un pH 5.8 antes del autoclavado a 1.05 kg/cm2 , durante 20 minutos. Medios de crecimiento: Se emplear el medio de Murashige y Skoog (MS, 1962), al 50% del contenido de macronutrientes, suplementados con varias auxinas, AIA, IBA (Acido indolbutirico) o ANA (Acido naftalenactico), en concentraciones de 0.5 a 5 mg/l. Condiciones de crecimiento: Los tubos de cultivo sern incubados en oscuridad a 25 2C durante 7 das y posteriormente sern transferidos a condiciones lumnicas bajo una densidad de flujo fotosintticos de fotones (DFFF) de 80 *mol. m-2 s-1 , con un fotoperiodo de 16/8 h (luz/oscuridad). III. Aclimatacin de plntulas: Plntulas con buen desarrollo radicular sern transferidas a recipientes con sustratos apropiados, bajo condiciones controladas de humedad, hasta lograr la rusticacin y condiciones fisiolgicas acordes al traslado a invernadero. IV. Anlisis Estadstico: En todos los ensayos se trabajarn con cuatro rplicas por tratamiento y cada tratamiento se repetir tres veces, en un DCA. La diferencia entre medias de tratamiento sern comparadas por anlisis de variancia, a un nivel de significancia de P=0.05. Metodologa para enraizamiento de estacas

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Para lograr el enraizamiento de las estacas se seguirn los siguientes pasos: a- Seleccin de plantas madres, a partir de las que se extraern las estacas. b- Ensayo 1: Longitud de estacas y posicin en la planta: Se seleccionaran estacas apicales y basales con tres longitudes distintas: 15 cm.; 25 cm. y 35 cm. Ensayo 2: rea foliar remanente en estacas: Se determinar la influencia de distintas reas foliares para el enraizamiento de estacas. Se trabajarn con rea foliar de 100%, 50% y 0% cm2 . Ensayo 3: Concentracin de auxinas: A las estacas seleccionadas se les aplicar un tratamiento con cido Indol Butrico (IBA) en las siguientes concentraciones: 1000 mg/lt; 2500 mg/lt y 3000 mg/lt. Se compararn con un tratamiento testigo sin regulador de crecimiento. Ensayo 4: Sustrato: Se emplearan tres sustratos consistentes en arena, perlita y turba en distintas proporciones. Se asegurar un suministro adecuado de nutrientes, mediante fertilizaciones regulares. En todos los casos las estacas se mantendrn en invernadero, en cama caliente a 30C con pulsos de mist peridicos c- Anlisis cuantitativo de los datos: Se realizarn evaluaciones peridicas, desde el inicio de las experiencias. Se evaluaran las siguientes variables: porcentaje de estacas vivas, porcentaje de estacas enraizadas, numero de races por estaca y longitud mxima de races.

Metodologa del Mdulo:Pre breeding y Caracterizacin Molecular de Oleaginosas subtropicales relacionadas con la produccin de biodiesel. Metodologa:SUPUESTOS RELEVANTES Uno de los aspectos mas importantes para asegurar la ejecucin de este mdulo es la disponibilidad de recursos econmicos tanto para reactivos como para servicios. En el caso de la EEA Salta, es fundamental la contratacin de la Dra. Mirella Ciaccio, investigador senior en Biologa Molecular del Instituto di Biomedicina e Immunologia Molecolare "Alberto Monroy, dependiente del Consiglio Nazionale delle Ricerche con sede en Palermo (Italia), para la implementacin de las tcnicas de caracterizacin y mejoramiento gentico, y puesta a punto de los equipos, en EEA Salta. Al respecto, se est avanzando en la formalizacin de un Convenio de Vinculacin Tecnolgica entre INTA EEA Salta y el mencionado Instituto. Se considera factible encontrar variabilidad en la coleccin de trabajo. Se podr valorar su potencial para el mejoramiento gentico en general y para la bsqueda de resistencia/tolerancia a stress trmico en particular, apoyando el proceso de mejoramiento convencional con las tcnicas de marcadores moleculares. En el caso de recursos econmicos las actividades propuestas corresponden a aquellas que pueden realizarse con los montos presupuestados. METODOLOGIA DEL MODULO 1- Caracterizacin fenotpica. Durante el primer ao del proyecto, la caracterizacin se realizar sobre la coleccin de trabajo del gen. Jatropha implantada en la EEA Salta y en la EECT Yuto (Jujuy). En el segundo y tercer ao se ampliar a 3 localidades incorporando a la evaluacin los ensayos implantados en la EEA Cerro Azul (Misiones) y en la localidad de El Quebrachal (Salta). Se registrarn los siguientes caracteres: crecimiento en altura durante un ciclo agrcola. Incremento del dimetro del tallo principal durante un ciclo agrcola. nmero de inflorescencias totales. nmero, disposicin y longitud de ramificaciones en el tallo principal. nmeros de floraciones durante un ciclo agrcola.

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duracin del perodo de floracin. porcentaje de superposicin de las etapas reproductivas. duracin de la etapa de maduracin de frutos. nmero de semillas por fruto porcentaje en peso semilla/fruto Se observar el comportamiento frente a factores biticos y abiticos. En base a las observaciones del primer ao, este listado ser ajustado para el cultivo de Jatropha curcas L. 2- Caracterizacin molecular: A fin de detectar diferencias entre los materiales se utilizarn marcadores moleculares RAPDs; AFLPs e ISSRs. Durante el primer ao se ajustarn las tcnicas para esta especie: -Extraccin del ADN (prueba de distintos mtodos y Kits para la extraccin de ADN, valoracin de cada mtodo por su rendimiento y costo) -Ajuste de las condiciones de amplificacin, corrida de geles y observacin de bandas para los distintos marcadores. Se realizar adems una revisin sobre los marcadores moleculares disponibles para esta especie y otras de la misma familia botnica (Euphorbiaceae) tales como Ricinus communis L. y Manihot esculenta L. Durante el segundo y tercer ao se corrern los marcadores seleccionados a fin de obtener informacin que permita valorar las similitudes/diferencias entre los materiales (variabilidad gentica existente). 3- Caracterizacin molecular del germoplasma local e introducido de los cultivos de inters. El germoplasma de la Coleccin ser caracterizado, en primera instancia, mediante el uso de marcadores moleculares del tipo RAPDs; AFLPs y marcadores microsatlites (SSR), con el objeto de obtener informacin acerca de la variabilidad gentica de los materiales. Los SSRs sern seleccionados de aquellos disponibles en el dominio pblico para las especies en cuestin, as como de especies de la misma familia botnica (Euphorbiaceae) y oleaginosas ampliamente conocidas (Glycine max). En una primera etapa se proceder a: -el ajuste de las tcnicas para las especies en cuestin, esto implica: Extraccin del ADN (prueba de distintos mtodos y kits para la extraccin de ADN, valoracin de cada mtodo por su rendimiento y costo); ajuste de las condiciones de amplificacin, corrida de geles y observacin de bandas para los distintos marcadores. -la revisin de los marcadores vinculados con regiones del genoma vegetal relacionados con la tolerancia/resistencia a stress abitico y bitico. En la siguiente etapa se validaran y caracterizarn los materiales en base a los marcadores seleccionados. Los datos obtenidos de la caracterizacin molecular sern utilizados para la construccin de matrices, a partir de las cuales se obtendrn estimaciones de similitud gentica entre genotipos empleando el coeficiente de Jaccard. Asimismo se tratar de establecer correlaciones entre los caracteres fenotipicos y los patrones moleculares hallados. Las fuentes de variabilidad sern el punto de partida para el programa de mejora contemplado para la siguiente etapa del proyecto. La EEA Cerro Azul y EEA Salta cuentan con Laboratorios satlite de Biotecnologa prximos a ser inaugurados. El Instituto de Gentica E. A. Favret intervendr, en caso de ser requerido, en la validacin de patrones moleculares obtenidos en los laboratorios satlite, as como en la capacitacin de recursos humanos afianzando el trabajo en red. 4- Evaluacin de la variabilidad nucleotdica del gen de la curcina en diferentes materiales de Jatropha sp. Marcadores Moleculares: Se estima utilizar AFLP. Ecotilling: Se evaluarn materiales de Jatropha spp. respecto a su varibilidad en genes relacionados con la sntesis de la curcina. Se propone para ello aplicar la tcnica derivada de la metodologa del TILLING (Target Induced Local Lessions in Genomes) (McCallum et al., 2000; McCalum et al., 2000; Henikoff y Comai, 2003, Slade y Knauf, 2005; Till et al., 2007): el Ecotilling (Comai et al., 2004). El TILLING es una estrategia de gentica reversa de reciente desarrollo que permite detectar mutaciones en

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genes especficos. El TILLING ha sido desarrollado para analizar grandes cantidades de material portador de mutantes putativas. Su finalidad es identificar mutantes slidas para genes candidatos elegidos previamente. La estrategia fue diseada en principio para detectar mutantes pero tambin es posible, basndose en el mismo principio, identificar materiales que portan diferencias en la secuencia de un gen bajo estudio. Tcnicamente, esta metodologa de alta capacidad de procesamiento se basa en la deteccin de polimorfismos mediante el clivaje enzimtico de fragmentos de ADN doble cadena que contienen bases mal apareadas (mismatch). El clivaje se produce utilizando una enzima con actividad endonucleasa (Cel 1) que tiene como sitio de reconocimiento los extremos 3 del mismatch. Los fragmentos de ADN doble cadena conteniendo bases mal apareadas (heteroduplexos) se forman como consecuencia de la desnaturalizacin y renaturalizacin al azar de fragmentos de PCRs, producto de la amplificacin de un gen candidato. Estos fragmentos de PCR provendrn del ADN de dos individuos diferentes, uno utilizado como patrn (un individuo de Jatropha spp. elegido para tal fin) y el otro que ser uno de los miembros de la coleccin de Jatropha spp. Si las secuencias contuvieran un polimorfismo se producir el clivaje en el sitio variante. Luego se resolver la reaccin de PCR en una electroforesis en gel de poliacrilamida desnaturalizante. As podrn identificarse fragmentos del tamao total (homoduplexos) y, de contener la muestra individuos diferentes, dos fragmentos ms pequeos cuyos tamaos moleculares sumados alcanzan el tamao del fragmento normal, generados a causa del clivaje del fragmento en el mismatch. Desarrollo de la metodologa de EcoTILLING para Jatropha: A. Se realizar una bsqueda en bases de datos de las secuencias relacionadas con la sntesis de la curcina. B. Se disearn oligonucletidos especficos para cada gen, se pondr a punto la PCR y para la optimizacin se amplificarn muestras compuestas por cantidades equimolares de ADN patrn-ADN individuo de la coleccin. C. Se aplicarn al menos dos perfiles distintos de desnaturalizacin-renaturalizacin de los productos de la reaccin de PCR a fin de optimizar la generacin de heteroduplexos. Luego se someter la muestra a la accin de la enzima Cel 1. D. Se resolvern los patrones de EcoTILLING en geles de acrilamida/bisacrilamida 6% en TBE 1X, 6M urea, seguido de tincin con nitrato de plata. Este trabajo ser desarrollado en el Instituto de Gentica E. A. Favret y se fundamenta en la necesidad de obtener materiales atxicos que permitan la utilizacin de los subproductos del proceso de extraccin de aceite para el consumo animal. 5- Seleccin de progenitores para programa de mejora La seleccin ser llevada a cabo en las EEA Salta, Cerro Azul y EECT Yuto en base a un proceso de seleccin tradicional por rendimiento, adaptacin fenolgica, caractersticas agronmicas regionales, as como por la presencia de regiones gnicas de inters. Dichos materiales servirn como base gentica para la incorporacin de nuevos genes utilizando criterios moleculares y agronmicos, con el objetivo de originar a corto plazo poblaciones de mejoramiento mediante la combinacin de mtodos tradicionales y seleccin asistida por marcadores moleculares. Aquellos genotipos que combinen los caracteres deseados con un comportamiento agronmico aceptable, preferentemente con ausencia de toxicidad sern incluidos en la red de ensayos prevista en el Mdulo 1.

Metodologa del Mdulo:Ecofisiologa de Jatropha. Metodologa:Se estudiar simultneamente el comportamiento frente al estrs abitico tanto de Jatropha curcas como de las especies nativas J. macrocarpa y J. hieronymi, ambas de ocurrencia natural en el Chaco Semirido de Argentina. Estas dos ltimas poseen calidad industrial para la produccin de biodiesel (Casotti, 2006) pero carecen de potencial de rendimiento cultural que viabilice su produccin comercial, como as tambin la posibilidad de mecanizar su cosecha (Carrizo, 2006). Se espera cuantificar jasmonatos y ABA. MATERIAL BIOLOGICO: Se utilizarn semillas de la especie Jatropha curcas L. y con plntulas de 10 a 15 cm de longitud, en las que se realizarn los tratamientos con estreses abiticos. Se sembrarn las semillas, en terrinas conteniendo turba-vermiculita en una proporcin 1:3. Luego de un determinado tiempo de desarrollo se seleccionaran las plantas a tratar por uniformidad de tamao y se aplicarn los tratamientos de estrs. Efectuados dichos tratamientos se extraern muestras por triplicado para realizar los estudios anatmicos, hormonales, enzimticos y moleculares. Se considerar control a las plantas

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crecidas en condiciones standard sin tratamientos de estrs. 2. Imposicin de estrs Para el estudio del estrs salino se utilizaran soluciones con NaCl en concentraciones de 50, 100 y 150 mM . Para el estudio de estrs osmtico se utilizarn soluciones PEG 6000 en variadas concentraciones, de forma que se consigan presiones osmticas de 0,5MPa, -1 MPa, -1,5Mpa y -2Mpa, tanto para tratamiento de semillas en caja de Petri como en tratamientos de plantas de 30 das de edad crecidas en terrinas. Se utilizar el agua destilada como control. Para el estudio del estrs por fro se colocaran las plntulas de 30 das de edad, en cmara con temperatura de 4 a 10 C y a temperatura de 25 C las plantas control. Los tiempos mas utilizados para el estudio del estrs temprano en plantas sern de 6, 24, 48, 72 hs y 7 das. 3. Anlisis histolgico de rganos vegetativos Muestras de races y hojas se fijarn en FAA (etanol 95%, cido actico, formaldehdo 37-40%, agua destilada 50:5:10:35 v/v) por un perodo mnimo de 72 h. El material se deshidratar mediante serie de mezclas de alcohol etlico-xilol y posteriormente incluido en Histowax (parafina de alta pureza con agregado de cera y polmeros). De cada muestra se realizarn cortes longitudinales y transversales de 10-13 de espesor en micrtomo rotativo. Los cortes sern teidos usando la triple coloracin de HematoxilinaSafranina y FastGreen Johansen (1940). Para el montaje definitivo se utilizar DPX. Los preparados histolgicos se observarn en un microscopio Zeiss Standard 16 y se fotografiarn en un microscopio Zeiss Axiophot, con equipo de captura y digitalizacin de imagen AxioVision 4.3, con cmara AxioCam HRc. 4. Contenido endgeno de cido jasmnico y derivados a- Extraccin, purificacin y estimacin de jasmonatos Un g de PF de tejido se homogeneizar en mortero con nitrgeno lquido y 10 ml de MeOH. Se adicionarn a cada muestra: 100 ng de (2H6)JA; 100 ng de (2H5)OPDA; 100 ng de 12-(2H3)O Ac-JA y 100 ng de 11-(2H3)O Ac-JA, como estndares. Despus de una segunda homogeneizacin se filtrar para obtener el sobrenadante. Luego se evaporar a sequedad. b-Mini-columna DEAE- Sephadex A-25 El sobrenadante se purificar en DEAE-Sephadex A-25 (3 ml en 100% MeOH) previamente lavada con 5 ml de 1N AcOH en 100% MeOH, 10 ml de MeOH 100%; estas fracciones se descartaran. Luego se agregar la muestra a la columna, diluda en un volumen mximo de 10 ml de MeOH, y se eluir con 3 ml de MeOH, 3 ml de 0,1 N AcOH en 100% MeOH; estas fracciones se descartarn. Se agregar 5 ml de 1N AcOH en 100% MeOH; esta ltima fraccin, donde eluyen los compuestos cidos como el JA, se recolectar y llevar a sequedad en evaporador rotativo al vaco. c- Cromatografa lquida de alta presin (HPLC) Los extractos secos se disolvern en MeOH y analizarn por HPLC, utilizando una columna Eurospher 100,5 m. La elucin se realizar con una mezcla isocrtica de MeOH:H2O en 0,1% H3PO2 (60:40) a una velocidad de flujo de 1 ml min-1. UV: 200nm. Se recolectarn las fracciones correspondientes a los respectivos tiempos de retencin: 14 min, Rt de JA; 22.5 min, Rt de OPDA; 9.30 min, Rt de 11-OH-JA; 11 min, Rt de 12-OH-JA, las que se evaporarn a sequedad. d- Derivatizacin para JA, OPDA, 11-OH-JA y 12-OH-JA Los extractos se resuspendern en 200 l de CHCl3/N,N-di-isopropil-etilamina (1:1 v/v) y se derivatizarn con 10 l de pentafluorbencilbromuro a 20C durante una noche. Posteriormente se llevar a sequedad y resuspender con 7 ml de n-hexano y filtrar por columna de Silica gel (SiOH; 500mg) (Macherey-Nagel, Dren, Germany). Los pentafluorbencil steres se eluirn con una mezcla de 7 ml de n-hexano/dietilter (2:1 v/v). Se evaporarn a sequedad y el extracto se retomar con 100 l de acetonitrilo e inyectar en un GC-MS a fin de identificar y cuantificar los compuestos de inters. e- Identificacin y cuantificacin por cromatografa gaseosa-espectrometra de masa - monitoreo selectivo de iones (GC-MS-SIM) Se utilizar un espectrmetro de masa Hewlett Packard (modelo 5970 B) combinado con un cromatgrafo de gases HO 5890. Las temperaturas programadas son las siguientes: desde 60C (1 min) a 180C (30C min-1); desde 180C (1 min) a 200C (10C min-1), desde 200C (1 min) a 270C (5C min-1). El espectro de masa se obtendr a un voltaje de ionizacin de 70 eV.

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5. Contenido endgeno de cido abscsico Extraccin, purificacin y estimacin de ABA 200 mg de PF de material vegetal se homogeneizar con N2 lquido y 20 ml de solvente de extraccin, en presencia de BHT como antioxidante. Como estndar interno se agregar 50 ng de 2H6 -ABA (J.D. Chen, USDA-ARS of Beltsville, Marylan, USA). Se conservar toda la noche en heladera cubierto con papel aluminio. Se centrifugar durante 15 min a 5000 rpm, y se recolectar el sobrenadante procedindose luego a la evaporacin de la fase isopropanol, conservando la fase acuosa. Mini-columna Amino (NH2 ) La purificacin de la fase acuosa se realizar a travs de una columna conteniendo slica gel como soporte slido (BAKERBOND speTM Amino (NH2), previamente activada con MeOH 100%, agua deionizada y buffer imidazol 0.02 M. Luego se colocar la muestra en la columna y se eluir con 6 ml de hexano e iguales cantidades de acetato de etilo y acetonitrilo; estas fracciones se descartarn. Se retomar el ABA con una mezcla metanol-actico (95:5, v/v), y se llevar a sequedad en evaporador rotativo al vaco. Cromatografa lquida de alta presin (HPLC) Los extractos secos se resuspendern en 100 l del solvente de corrida (70% MeOH, 30% agua y 0.1% de cido actico) y se particionarn isocrticamente por HPLC en columna corta de C18 (Alltech 100,5 m 300 x 4 mm). La elucin se llevar a cabo con una mezcla isocrtica de MeOH:H2O:AcOH (70:30:0.1, v/v) como sistema de solventes, a una velocidad de flujo de 1 ml min-1. Las fracciones recolectadas (tiempo de retencin: 2.77- 5.00 min.) sern determinadas utilizando un detector UV a 262 nm. Dichas fracciones se evaporarn a sequedad. Derivatizacin Los extractos se retomarn con dos lavados sucesivos de 500 l de MeOH 100% y se llevarn a sequedad al vaco. Posteriormente se resuspendern con 100 l de la solucin de derivatizacin N,O-bis (trimethylsilyl) trifluoroacetamide (BSTFA). Las muestras sern colocadas en estufa a 70-90 durante 30 min. Finalmente se inyectar 1 l de BSTFA en GC-MS a fin de identificar y cuantificar ABA. Identificacin y cuantificacin por cromatografa gaseosa-espectrometra de masa-monitoreo selectivo de iones (GC-MS-SIM) Se utilizar un espectrmetro de masa Hewlett Packard (modelo 5972 A) acoplado a un cromatgrafo de gases (modelo 5890 Series II). Las corridas en GC se realizarn en una columna de slica de 3 m HP5 cross linked 5% PH, utilizando gas helio como carrier. La temperatura inicial de la interfase ser de 100C, continuando con un gradiente de 20C /min hasta 200C y 5C /min hasta 260C. La temperatura de inyeccin ser de 275C y la del detector de 280C. El valor endgeno de ABA se calcular mediante la frmula que relaciona el rea obtenida y su respectivo estndar deuterado.

Archivos Anexados:
Situacion del estudio de J. curcas en Argentina.pdf (341,1 KB)

Bibliografa Benge, M. (2006) Assesment on the potencial of Jatropha curcas. USAID ed. Carrizo, A. (2008) Situacin del estudio de J. curcas en Argentina. INTA EEA Salta (sin editar). Carrizo, A. (2006) "Red de evaluacin de oleaginosas tropicales para la produccin de biodiesel en el norte de Argentina" en Foro de Cultivos Energticos Alternativos. 10 de Octubre, Bs As. Argentina. Carrizo, A. (2008) "Experiencias de Manejo de Jatropha en el norte de Argentina" en I Seminario Internacional de Jatropha Chile 2008, Sgo. de Chile(sin editar). Casotti, W. (2006) Obtencin de biodiesel (metil/etil esteres) por medio del uso de aceites de las Euforbiceas Jatropha macrocarpa y Jatropha hieronymi en "Jornadas sobre Biocombustibles, Cultivos no Tradicionales y su Impacto en las Economas Regionales", 3 y 4 de Abril, Mendoza, Argentina. Font, F. (2003). Las Especies del Gnero Jatropha L. (Euphorbiaceae, Crotonoideae) en Argentina. Revista del Crculo de Coleccionistas de Cactus y Crasas de la Repblica Argentina, Vol.2, N 1. Heller, J.(1996) Physic nut. Jatropha curcas L. Promoting the conservation and use of underutilized and neglected crops. 1. Institute of Plant Genetics and Crop Plant Research, Gatersleben/ IPGRI, Rome.

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www.inta.gov.ar/prorenoa Rosa e Abreu, F. (2006) en "Foro sobre Cultivos energticos alternativos", 10 y 11 octubre, Bs.As. Argentina. Integracin de los Componentes Estratgicos. Investigacin y Desarrollo
Proyecto Aprovechamiento de recursos vegetales y animales para la produccin de biocombustibles. 1047-Intensificacion Sustentable de la Produccion de Cereales y Oleaginosas en el NOA 1033-Intensificacin de la produccin de carne bovina del noroeste argentino. 1088-Forrajeras cultivadas para el mejoramiento de la produccin. 225- Desarrollo Sustentable en Zonas Aridas y Semiridas de la Repblica Argentina para Prevenir y Controlar la Desertificacion Impacto de las relaciones cultivos/ microorganismos rizosfricos no-patognicos, sobre rendimiento, calidad y sustentabilidad, en sistemas de produccin de granos y forrajes en diferentes ambientes Desarrollo sustentable de los sistemas extensivos del Umbral al Chaco Apoyo al desarrollo territorial en las provincias de Salta y Jujuy

Vinculacin Tecnolgica
Convenio No existen registros

Cooperacin Institucional
Convenio Universidad de Chile Instituto Politcnico Nacional (Mxico) Consiglio Nazionale delle Ricerche (Italia) Gobierno de la Provincia de Salta Gobierno de la Provincia de Jujuy

Transferencia y Extensin
Articulacin Medios No existen registros

Plan de Accin
Plan de Accin 1 Ao

Actividad Cdigo - Descripcin 1a IA Organizacin e instalacin de una red nacional de 1a ensayos. 1b 1c

Producto Cdigo - Descripcin Red de ensayos instalada Proyecto difundido Metodologa para micropropagacin del gnero

1b EDDifusion del proyecto 1c IA EA Puesta a punto de la metodologa para la micropropagacin y enraizamiento de especies

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del gnero Jatropha. 1d IA Instalacin de viveros de adaptacin a fin de detectar variabilidad gentica. 1d

Jatropha, ajustada. Vivero de adaptacin instalado. Conocimiento aproximado sobre el comportamiento frente al estrs abitico de Jatropha en germinacin y etapas inciales de desarrollo.

1e IA

Estudio de la germinacin y crecimiento en etapa inicial de parte area y radicular del gnero 1e Jatropha bajo diferentes condiciones ambientales.

Plan de Accin 2 Ao

Actividad Cdigo - Descripcin 2a IA Primeras evaluaciones de la red de ensayos: Fechas de siembra; poda y conduccin; respuesta a dosis variable de riego y fertilizacin; 2a aplicacin de reguladores de crecimiento; condicin fitosanitaria; etc. 2b

Producto Cdigo - Descripcin Determinaciones fenopatomtricas efectuadas sobre los ensayos. Anlisis y cruzamiento de datos. Seminarios , das de campo, cartillas de divulgacin, etc. Germoplasma de potencial inters con tecnologa de micropropagacin y enraizamiento, ajustadas. Germoplasma evaluado fenolgica y molecularmente. Germoplasma evaluado en funcin del gen curcina. Conocimiento aproximado de la probable participacin de JA y ABA en la respuesta al estrs en especies del gnero Jatropha como insumo tecnolgico para los Mdulos de Manejo Cultural y Mejoramiento Gentico.

2b EDDifusin de resultados.

2c IA

Micropropagacin y enraizamiento de germoplasma de potencial inters. Caracterizacin fenolgica y molecular del germoplasma.

2c

2d IA 2e IA

2d

Evaluacin de la variabilidad nucleotdica del gen 2e curcina.

2f IA

Estudios hormonales: cuantificacin de JA (cido Jasmnico) y ABA (cido Abscsico) en hojas y 2f races de Jatropha sometidas a distintas condiciones de estrs.

Plan de Accin 3 Ao

Actividad Cdigo - Descripcin 3a IA Evaluaciones de la red de ensayos: fechas de siembra; marcos de plantacin; sistemas de poda y conduccin; respuesta a dosis variable de riego y fertilizacin; aplicacin de reguladores de crecimiento; condicin fitosanitaria, etc.

Producto Cdigo - Descripcin Generacin de tecnologa de manejo cultural (preliminar) basada en el cruzamiento de informacin provista por la red nacional de ensayos. Seminarios, das de campo, cartillas de divulgacin tcnica. Progenitores con tecnologa de micropropagacin y enraizamiento ajustada. Progenitores seleccionados. Conocimiento aproximado en laboratorio de la respuesta de plantines de Jatropha a la aplicacin de

3a

3b ED 3c IA

Difusin de resultados experimentales.Puesta a punto de la metodologa para micropropagacin y enraizamiento de estacas de especies del gnero Jatropha.

3b

3c 3d

3d IA Seleccin de progenitores. 3e IA Ensayos de laboratorio con sustancias antioxidantes (propias de su mecanismo natural de defensa) sobre plantines de Jatropha.-

3e

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sustancias antioxidantes.

Resultados Esperados
Resultados, metas e Indicadores
Productos 1a-Red de ensayos instalada Metas 3 Estaciones Experimentales con los ensayos instalados. Tres Gobiernos Provinciales informados. Lograr una metodologa para la micropropagacin del gnero Jatropha. 2 viveros de adaptacin instalados. Aspectos del crecimiento de parte area y radicular conocidos. Determinaciones fenopatomtricas sobre 4 ensayos de la red. Al menos 3 actividades de difusin. Al menos una metodologa lograda para la micropropagacin y enraizamiento ajustada. Al menos dos ensayos evaluados fenolgica y molecularmente. Al menos 4 entradas de todo el germoplasma a campo evaluado en funcin del gen curcina. Identificar y cuantificar la probable participacin de JA y ABA sobre 3 entradas. Indicadores Nmero de Estaciones Experimentales que conforman la red de ensayos. Nmero de reuniones con Gobiernos Proviciales. Obtencin de un protocolo de micropropagacin para las especies de inters. Nmero de viveros instalados.

1b-Proyecto difundido 1c-Metodologa para micropropagacin del gnero Jatropha, ajustada. 1d-Vivero de adaptacin instalado. 1e-Conocimiento aproximado sobre el comportamiento frente al estrs abitico de Jatropha en germinacin y etapas inciales de desarrollo. 2a-Determinaciones feno-patomtricas efectuadas sobre los ensayos. Anlisis y cruzamiento de datos. 2b-Seminarios , das de campo, cartillas de divulgacin, etc. 2c-Germoplasma de potencial inters con tecnologa de micropropagacin y enraizamiento, ajustadas.

Parmetros de produccin.

Nmero de registros obtenidos.

Nmero de actividades de difusin.

Protocolo metodolgico obtenido.

2d-Germoplasma evaluado fenolgica y molecularmente.

Nmero de entradas evaluadas fenolgica y molecularmente. Nmero total de entradas evaluadas en funcin del gen curcina.

2e-Germoplasma evaluado en funcin del gen curcina.

2f-Conocimiento aproximado de la probable participacin de JA y ABA en la respuesta al estrs en especies del gnero Jatropha como insumo tecnolgico para los Mdulos de Manejo Cultural y Mejoramiento Gentico. 3a-Generacin de tecnologa de manejo cultural (preliminar) basada en el cruzamiento de informacin provista por la red nacional de ensayos. 3b -Seminarios, das de campo, cartillas de divulgacin tcnica. 3c-Progenitores con tecnologa de micropropagacin y enraizamiento ajustada.

Nmero de especies evaluadas.

Al menos 2 prcticas de manejo cultural generadas. Al menos 3 actividades de difusin. Al menos 1 progenitor obtenido y evaluado. Al menos un progenitor seleccionado. Al menos 1 ensayo de laboratorio sobre dosis estimadas de sustancias antioxidantes.

Nmero de cruzamientos de informacin realizados. Nmero de actividades de difusin. Nmero de progenitores obtenidos y evaluados con tecnologa de micropropagacin y enraizamiento ajustada. Nmero de progenitores seleccionados.

3d-Progenitores seleccionados. 3e-Conocimiento aproximado en laboratorio de la respuesta de plantines de Jatropha a la aplicacin de sustancias antioxidantes.

Nmero de ensayos realizados.

reas de Impacto

Impacto

Indicadores

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Tabla de Indicadores
Valor del Indicador al inicio 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 Valor esperado del indicador al final 5 3 1 6 3 5 3 1 8 4 2 3 3 2 2 2

Cdigo Indicador

Forma de Observacin

Forma de Verificacin

I-P1-1 Nmero de Estaciones Experimentales que conforman la red de ensayos. I-P2-1 Nmero de reuniones con Gobiernos Proviciales. I-P3-1 Obtencin de un protocolo de micropropagacin para las especies de inters. I-P4-1 Nmero de viveros instalados. I-P5-1 Parmetros de produccin. I-P1-2 Nmero de registros obtenidos. I-P2-2 Nmero de actividades de difusin. I-P3-2 Protocolo metodolgico obtenido. I-P4-2 Nmero de entradas evaluadas fenolgica y molecularmente. I-P5-2 Nmero total de entradas evaluadas en funcin del gen curcina. I-P6-2 Nmero de especies evaluadas. I-P1-3 Nmero de cruzamientos de informacin realizados. I-P2-3 Nmero de actividades de difusin. I-P3-3 Nmero de progenitores obtenidos y evaluados con tecnologa de micropropagacin y enraizamiento ajus I-P4-3 Nmero de progenitores seleccionados. I-P5-3 Nmero de ensayos realizados.

Cuantitativa Cuantitativa Cuantitativa Cuantitativa Cuantitativa Cuantitativa Cuantitativa Cuantitativa Cuantitativa Cuantitativa Cuantitativa Cuantitativa Cuantitativa Cuantitativa Cuantitativa Cuantitativa

Informe de avance Numero de reuniones informe de avance Informe de avance informe de avance informe de avance cuantitativo informe de avance informe de avance informe de avance informe de avance Informe de avance Numero de actividades Informe de avance informe de avance Informe de avance

Propiedad Intelectual
Tipo de Registro Protocolos Otros Creaciones fitogenticas Descripcin Se espera obtener protocolos para micropropagacin de Jatropha. Se espera desarrollar tecnologa para mecanizacin de la cosecha de Jatropha curcas, inexistente hoy en da en el ambiente productivo internacional. Se espera dar inicio al proceso de inscripcin de creaciones fitogenticas (SELECCIN) de materiales genticos evaluados en la red de ensayos.

Presupuesto total (en Pesos)

Costo total del proyecto $ 1465900

Inciso 1 Presupuesto Extra INTA Ao 1 Total Presupuesto Extra INTA

Inciso 2

Inciso 3

Inciso 4

Inciso 5

Total

72000 0 72000 72000

160000 16000 176000 166000

162800 10000 172800 172800

189500 10000 199500 10000

0 0 0 0

584300 36000 620300 420800

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0
Ao 2 Total Presupuesto Extra INTA Ao 3 Total TOTAL INTA TOTAL EXTRAINTA TOTAL Gral.

0 166000 166000 0 166000 492000 16000 508000

0 172800 176800 0 176800 512400 10000 522400

0 10000 10000 0 10000 209500 10000 219500

0 0 0 0 0 0 0 0

0 420800 424800 0 424800 1429900 36000 1465900

72000 72000 0 72000 216000 0 216000

Participacin de las Unidades en la obtencin de los Productos (1 Ao)

Unidades Ejecutoras Producto Trimestre 1 Inc.2 E.E.A. Salta E.E.A. Cerro Azul Total por Inciso/Trimestre Inc.3

Presupuesto por Trimestre/Inciso Trimestre 2 Inc.2 Inc.3 Trimestre 3 Inc.2 Inc.3 Trimestre 4 Inc.2 Inc.3

Total por Unidad Inc. 2 y 3

32.250,00 31.200,00 32.250,00 31.200,00 32.250,00 31.200,00 32.250,00 31.200,00 253.800,00 11.000,00 12.750,00 11.000,00 12.750,00 11.000,00 12.750,00 11.000,00 12.750,00 95.000,00 43.250,00 43.950,00 43.250,00 43.950,00 43.250,00 43.950,00 43.250,00 43.950,00 348.800,00

Unidades Ejecutoras Producto E.E.A. Salta E.E.A. Cerro Azul Total por Inciso

Inciso 1 36.000,00 36.000,00 72.000,00 0 0

Inciso 4 0 0

Inciso 5

Extra INTA 36.000,00 0 36.000,00

0,00

0,00

Recursos Humanos Requeridos

Cantidad 1 1 Unidad E.E.A. Salta E.E.A. Salta Funcin Extensionista Investigador Especialidad 18.01.01... 10.03.01... % Tiempo 50 50 Total Monto $ 36.000,00 36.000,00 72.000,00

Inversiones
Clasificacin Equipo de transporte, traccin, elevacin Unidad 321000 Cantidad Detalle Camioneta doble cabina 1 y traccin doble Invernadero con seguridad perimetral e infraestructura para electricidad y riego. equipo de riego por goteo para 3 ha. Monto $ 110.000,00

Obras y Construcciones

321000

27.000,00

Maquinaria y equipo de produccin Maquinaria y equipo de produccin Maquinaria y equipo de produccin Maquinaria y equipo de produccin Equipo educacional Equipo para computacin Equipo sanitario y de laboratorio

321000 414000 332000 312000 332000 332000 421000

7.500,00 3.500,00 3.500,00 3.500,00 1.000,00 2.000,00 10.000,00

1 equipo de riego por goteo 1 equipo de riego por goteo 1 equipo de riego por goteo 1 cmara fotogrfica digital computadora de 1 escritorio 1 Cuba de electroforesis

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