Rev Cubana Hematol Inmunol Hemoter 1998;14(2):97-100

Instituto de Hematologa e Inmunologa Ciudad de La Habana

FENOTIPOS DBILES DEL ANTGENO A (SISTEMA ABO DE GRUPOS SANGUNEOS) EN DONANTES DE SANGRE
RESUMEN
El grupo sanguneo A se subdivide en los subgrupos A1 y A2, sobre la base del nmero de sitios antignicos A sobre la superficie del hemate. Adems se han descrito otros fenotipos dbiles de este antgeno. Para la determinacin de stos se utiliz la tcnica de hemaglutinacin con antisueros policlonales y en los casos de aglutinacin dbil, tarda o de discrepancias con el grupo reverso, se realiz sta con antisueros anti-A1 y anti-H. Se estudiaron 6 346 donantes de sangre del Banco Municipal "10 de Octubre" durante 5 meses del ao 1996: 48,79 % fueron del grupo O, 35,15 % del A, 12,20 % del B y 3,58 % del AB. Catorce donantes (0,22 %) resultaron A2B, 2 (0,03 %) A2BHw, 1 Ael (0,01 %) y 1 Aint (0,01 %). Las clulas con estos subgrupos se utilizaron en la confeccin de un panel para evaluar un anticuerpo monoclonal anti-A producido en el Instituto de Hematologa e Inmunologa. Descriptores DeCS: SISTEMA DEL GRUPO SANGUINEO ABO/diagnstico; GRUPOS SANGUINEOS.

Dra. Rene Gonzlez Sampedro, Lic. Antonio Bencomo Hernndez, Lic. Yalile Alfonso Valds, Lic. Marta Martnez Sols y Lic. Ren Rivero Jimnez

Los grupos sanguneos son antgenos presentes en un gran nmero en la superficie de los eritrocitos. Su extructura qumica consiste en carbohidratos de protenas y glicolpidos. 1 Los genes A y B codifican a las tranferasas A y B (glicosiltransferasas), las que transfieren N acetil-galactosa y galactosa, respectivamente al mismo sustrato, el antgeno H. El gen O es inactivo (debido posiblemente a un fallo estructural ms que a un fallo de la expresin de las transferasas A o B),por lo que este antgeno queda sin modificacin. El locus gentico para el

sistema ABO se identific en el cromosoma 9 (q34) por estudios familiares y de gentica celular. La transferasa A fue clonada. Se determin la secuencia de sus nucletidos y se identific como una protena que atraviesa la membrana con un segmento hidrofbico posiblemente transmembranoso y un dominio cataltico carboxilo terminal.2 El grupo sanguneo A presenta los subgrupos A 1 y A 2 . El subgrupo A 2 presenta una expresin antignica dbil y las personas con los fenotipos A2 y A2B pueden tener anticuerpos anti-A 1.1 Adems se han descrito subgrupos raros del antgeno A con caractersticas

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serolgicas especficas como el A3, A4, A5, Ax, Ao, Am, Aend, Abantu, Alae y el Ael. Tambin se conoce el tiempo intermedio del grupo sanguneo A (Aint), que es una variante del subgrupo A2 y que reacciona con las lectinas Ulex europeus y Dolichos biflorus.3 Entre los genes de las transferasas A1 y A 2 se identificaron 2 diferencias estructurales: sustitucin del aminocido (aa) prolina en A1 por leucina en A2 en el aa 156 y delecin de una base simple que se encuentra cercana al carboxilo terminal, uno de los 3 residuos C en los nucletidos 1959-1061, las cuales se han encontrado en todos los subtipos A 2 analizados. Los alelos A3 y Ax presentan sustituciones de un solo aa, pero en el gen A3 no aparece siempre, lo que indica heterogeneidad en los sugrupos al nivel molecular.2 En este trabajo se presenta la incidencia de fenotipos dbiles del grupo sanguneo A encontrados en donantes de sangre. MTODOS Se estudiaron todos los donantes (6 346) concurrentes al Banco de Sangre Municipal "10 de Octubre", a las unidades mviles y al centro de extraccin de Arroyo Naranjo, durante los meses de marzo a julio de 1996. A todos las muestras, obtenidas por venipuntura, se les realiz la tcnica de hemaglutinacin en lminas portaobjetos, segn las Buenas Prcticas de Laboratorio.4,5 Se emplearon reactivos hemoclasificadores policlonales humanos anti-A, anti-B y anti-AB (MediCuba, La Habana). En cada caso se realiz la prueba serolgica para identificar paralelamente los anticuerpos (isoaglutininas) presentes en el suero de la muestra, los cuales se corresponden con l o los antgenos ausentes.

En los casos en los que se observ aglutinacin dbil, tarda o discrepancias entre el anti-A y anti-AB o con la prueba serolgica, se aplic la tcnica de hemaglutinacin en tubo de ensayo y con los reactivos hemoclasificadores anti-A1 y anti-H, a veces nombrado anti-A2. Las clulas AB que aglutinan con el anti-H y no lo hacen con el anti-A1 son A2B. Cuando no aglutinan con el anti-A1 ni con el anti-H, las clulas son A2B con deficiencia de H (A2BHw).6 Todas las muestras discrepantes se verificaron y se caracterizaron en el Instituto de Hematologa e Inmunologa (IHI). El Ael y el Aint se determinaron segn Race y otros. 7 A la poblacin estudiada se le aplic el principio de Hardy y Weinberg. Se calcularon las frecuencias genotpicas esperadas a partir de las encontradas para los grupos ABO.8 RESULTADOS Los fenotipos encontrados se muestran en la tabla.
TABLA. Grupos sanguneos ABO y fenotipos dbiles del antgeno A en donantes de sangre Donantes: 6 346 3 096 2 231 774 227 14 2 1 1 Grupo sanguneo O A B AB A2B A2 BHw Ael Aint % 48,79 35,15 12,20 3,58 0,22 0,03 0,01 0,01

De todos los donantes de sangre AB (243), el 93,42 % fueron A1B, el 5,76 % A2B y el 0,82 % y A2BHW.

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De los donantes del grupo A ( 2 230), 1 (0,045 %) fue Ael y 1 (0,045 %) fue Aint. Adems se detect un A1 con un anticuerpo anti-M. Las frecuencias gnicas fueron: PA = 0,22, qB = 0,08 y r O = 0,70, lo que indica que esta poblacin se encuentra en equilibrio gentico. DISCUSIN Las frecuencias encontradas en los grupos sanguneos son similares a las observadas en otros estudios realizados en donantes de sangre de Cuba.9,10 Como en este trabajo no se enfrentaron todas las muestras a los reactivos hemoclasificadores anti-A1 y anti-H, no se pudo clasificar separadamente al antgeno A en A1 y A2, por lo tanto, se investigaron solamente los fenotipos ms dbiles. Debido a que la definicin de los fenotipos dbiles del antgeno A depende del reactivo hemoclasificador y la gran mayora de estos fenotipos se encuentran en el subgrupo A2B, stos se detectaron casi siempre al presentar una aglutinacin muy escasa o nula con el reactivo anti-A y la reaccin evidente con el anti-AB. Sin embargo, no necesariamente se reflej la frecuencia de este grupo en la muestra estudiada, ya que debido a la gran variacin del antgeno A en dicho fenotipo, algunos A2B tal vez no se discriminaron al no reaccionar dbilmente frente a los reactivos utilizados. A partir de este subgrupo, fue posible identificar los fenotipos con aglutinabilidad

ms dbil, pues no reaccionaron con el antiA y en el caso del Ael fue incluso necesario realizar el estudio familiar y en la saliva para poderlo clasificar.7 En el tipo Aint encontramos que en ocasiones se pareca al A1, pero con una reaccin mucho ms dbil frente al anti-A y con una reaccin fuerte con el reactivo antiH, aunque no tanto como la encontrada con las clulas A2. Se ha comunicado el cuidado que hay que observar cuando se trabaja con estos tipos, ya que la expresin de sus receptores puede fluctuar y aparecer como un A 1.3 Aunque se conoce que el subgrupo A2B y otros fenotipos dbiles del grupo sanguneo A son ms frecuentes en individuos de la raza negra, en este estudio no se consider este aspecto, debido a que no se utilizaron muestras seleccionadas y analizadas de acuerdo con los parmetros antropolgicos establecidos. La poblacin cubana est constituida por una mezcla gentica heterognea, la cual se observa an en los grupos extremos con caractersticas negroides o caucasoides bien definidas,11 por lo que no es posible establecer las etnias por el color de la piel sin cometer errores en la clasificacin. Todos los subgrupos hallados se incluyeron en un panel celular y se utilizaron en la evaluacin de un anticuerpo monoclonal anti-A generado en el IHI.12
AGRADECIMIENTOS Agradecemos la colaboracin del personal del Banco de Sangre Municipal "10 de Octubre" y del Departamento de Inmunohematologa del IHI.

SUMMARY
Blood group A is divided into subgroups A1 and A2 on the basis of the number of antigenic sites A on the surface of the erythrocyte. Other weak phenotypes of

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this antigen have also been described. To determine them it was used the hemoagglutination with polyclonocal antisera and in the cases of weak or late agglutination or of discrepancies with the reverse group anti-Al anti-H antisera were utilized. 6346 blood donors from the "10 de Octubre" Municipal Blood Bank were studied during 5 months in 1996; 48.79 % were from group O, 35.15 % from group A, 12.20 % from group B and 3.58 % from group AB.14 blood donors (0.22 %) proved to be A2B, 2 (0.03 %) A 2BH w, and 1 A el (0.01 %). The cells with these subgroups were used to make a panel in order to evaluate an anti-A monoclonal antibody produced at the Institute of Hematology and Immunology. Subject headings: ABO BLOOD-GROUP SYSTEM/diagnosis; BLOOD GROUPS.

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Recibido: 14 de febrero de 1997. Aprobado: 26 de septiembre de 1997. Dra. Rene Gonzlez Sampedro. Instituto de Hematologa e Inmunologa. Apartado 8070, CP 10800, Ciudad de La Habana, Cuba.

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