1.

Reacción de MolischLa presencia de carbohidratos en una muestra se pone de manifiesto por la reacción deMolisch, que a cierto punto es la
reacción universal para cualquier carbohidrato.Se basa en la acción hidrolizante y deshidratante del ácido sulfúrico sobre los hidratos de carbono.
En dicha reacción el ácido sulfúrico cataliza la hidrólisis de los enlaces glucosídicos dela muestra y la deshidratación a furfural (en las pentosas) o
hidroximetilfurfural (en las hexosas).Estos furfurales se condensan con el alfa naftol del reactivo de Molisch (reacción de Molisch)dando un
producto coloreado
2.Reacción de Benedict
Una de las reacciones más comunes en la identificación de carbohidratos es la reacciónde Benedict. Esta reacción es específica para azú
cares con grupo reductores libres (C=O). Todos los monosacáridos poseen un grupo reductor libre. Los disacáridos maltosa y lactosatienen
grupos reductores libres, pero la sacarosa no los posee, ya que se pierden los grupos reductores de sus componentes cuando ésta es formada.
Se basa en la capacidad del carbohidrato de reducir el Cu2+ en un medio alcalino. EsteCu1+ se oxida y precipita en forma de Cu2O,
lo que proporciona la coloración positiva de lareacción. La coloración dependerá de la concentración de óxido de cobre y ésta a su vez
de la reducción del cobre; va desde verde, amarillo, anaranjado o rojizo, dependiendo de la coloración
FUNDAMENTO TEORICO Los carbohidratos también llamados azúcares, osas o sacáridos, son polihidróxialdehidos o polihidroxi
cetonas o compuestos poliméricos que por hidrólisis producen polihidroxialdehidos y polihidroxicetonas. s egún el número de unidades de
azúcares sencillos que posean se clasifican en:
MONOSACÁRIDOS o azúcares sencillos, que a su vez pueden ser ALDOSAS cuando contienenel grupo aldehído o CETOSAS cuando contie
nen el grupocetona. Los monosacáridos naturalespertenecen a la serie D de los azúcares y pueden tener entre tres y hasta siete átomos de
carbono.
DISACÁRIDOS que están formados por dos monosacáridos unidos entre sí por enlaces glucosídicos.OLIGOSACÁRIDOS que tienen entre
tres y diez monosacáridos unidos también por enlacesglucosídicos.POLISACÁRIDOS que son polímeros naturales con varios miles de unida
des de azúcar sencillo
ligadas entre sí.De acuerdo con lo anterior, además de reconocer si un compuesto pertenece a la familia de los carbohidratos, es necesario
diferenciar si se trata de un monosacárido tipo aldosa o cetosa, si esfácilmente oxidable o no, es decir si es un AZÚCAR REDUCTOR o no lo es
, si es de cinco átomos de carbono (pentosa) o de seis átomos de carbono (hexosa), si es disacárido opolisacárido. .
Ensayo de Molisch: Este ensayo es un ensayo para reconocimiento general de carbohidratos enel que los polisacáridos y disacáridos se
hidrolizan con ácido sulfúrico concentrado hasta monosacáridos y se convierten en derivados del furfural o 5-hidroximetil furfural los cuales
reaccionan con α-naftol formando un color púrpura violeta.
Ensayo de Benedict: El ensayo de Benedict permite el reconocimiento de carbohidratosreductores, al igual que el reactivo de Felhing, el de
Benedict contiene
ion cúprico en medio alcalino que se reduce hasta óxido cuproso en presencia de azúcares con el hidroxilohemiacetálico libre.
Ensayo de Barfoed: Esta prueba permite diferenciar entre monosacáridos y disacáridosreductores, también contiene ion cúprico que se
reduce hasta óxido cuproso más rápidamente con los monosacáridos que con los disacáridos.
Ensayo con Lugol: El reactivo de Lugol que contiene una mezcla de yodo y yoduro, permitereconocer polisacáridos, particularmente el almidón
por la
formación de una coloración azúl-violeta intensa y el glicógeno y las dextrinas por formación de coloración roja.
Ensayo de Seliwanoff: Este ensayo es específico para cetosas y se basa en la conversión de lacetosa en 5-hidro-metil-furfural y su
posterior condensacióncon resorcinol formando asícomplejos coloreados.
Ensayo de Bial: El reactivo de Bial contiene orcinol en ácido clorhídrico, el cual forma complejosde coloración sólo con las pentosas. De otro lado
una propiedadimportante que permite identificar los carbohidratos, y determinar elgrado de pureza de los mismos, particularmente monosacários
es la rotación óptica ocasionadapor la presencia de centros asimétricos o quirales en la estructura molecular, los cuales desvíanel plano
de luz polarizada.
Esta propiedad no es exclusiva de los carbohidratos pues la presentan todas aquellas sustanciasdenominadas óptimamente activas, por tener
en su estructura centros quirales. Para la medición de la rotación óptica los factores importantes a tener en cuenta son: La longitud
de onda de luz polarizada, la cantidad de material óptimamente activo, y la naturaleza del solvente cuando se usa. Los cambios en la tempe
ratura ocasionan solo pequeñas variaciones enlas medidas de la rotación.Los datos de rotación óptica se representan como | α ] = rotación
específica o | M ] = Rotación molecular, donde:| α | = α α : Rotación observada en grados angulares LC
L : Longitud en decímetros del paso de luz polarizada a través de la muestra
C : Concentración en gramos por mililitro. M : Peso molecular. | M | = M x | α | 100
cuando el plano de luz polarizada se desvía en el sentido de las manecillas del reloj se antepone un signo positivo al número de grados que fue
rotado el plano de luz y la sustancia se denominacomo DEXTRO ROTATORIA, en el sentido contrario se antepone un signo negativo y se
denomina LEVO-ROTATORIA