Captulo 17: Citoesqueleto

Los microtbulos estn formados por sub-unidades de tubulina. Los filamentos de actina estn formados por sub-unidades de actina. Filamentos Intermedios: Tienen gran resistencia a la tensin. Permiten que las clulas soporten fuerzas mecnicas asociadas con el estiramiento. Dimetro de 10nm. Por lo general forman una red por todo el citoplasma, que rodea al ncleo y se extiende hacia la periferia celular. Suelen estar anclados al a membrana en el sitio de uniones intercelulares (ej. Desmosomas). Forman la lmina nuclear. Formacin de filamentos intermedios: Sus sub-unidades son protenas fibrosas alargadas, compuestas por una cabeza globular N-terminal, una cola globular C-terminal, y un dominio bastoniforme alargado central. Este dominio bastoniforme consiste en una regin a-helicoidal extendida que permite que pares de protenas de los filamentos intermedios formen dmeros estables al envolverse uno alrededor del otro en una disposicin en espiral. Despus se asocian 2 de estos dmeros en espiral mediante enlaces no covalentes formando un tetrmero. Por ltimo los tetrmeros se unen entre s en forma terminoterminal y laterolateral tambin mediante enlaces no covalentes formando el filamento intermedio cordiforme final. Las cabezas y las colas globulares que se encuentran expuestas en la superficie del filamento les permiten interactuar con otros componentes del citoplasma. Se pueden agrupar en 4 clases: Filamentos de queratina (la ms diversa), filamentos de vimentina y relacionados con vimentina, neurofilamentos, y lminas nucleares. Los filamentos de cada clase estn formados por polimerizacin de sus correspondientes sub-unidades proteicas. Muchos filamentos intermedios son estabilizados y reforzados aun ms por protenas accesorias (ej. Plectina), que forman uniones cruzadas entre los haces de filamentos formando una estructura resistente. Estas protenas unen los filamentos intermedios a los microtbulos, a los filamentos de actina y a estructuras adherentes de los desmosomas. Lmina nuclear: Los filamentos intermedios dentro de la lmina nuclear estn formados por una clase de protenas llamadas laminas (NO lamininas). Los filamentos de la lmina nuclear se desensamblan y se vuelven a formar en cada divisin celular. El desensamblaje y reensamblaje de la lmina nuclear son controlados por la fosforilacin y la desfosforilacin de las laminas proteincinasas. Microtbulos: Se originan en una estructura pequea denominada centrosoma, la cual est localizada cerca del centro de la clula. Los diferentes sistemas de microtbulos citoplasmticos constituyen la fraccin del citoesqueleto principalmente responsable de anclar los orgnulos delimitados por membranas dentro de la clula y guiar el transporte intracelular. Huso mittico: aporta la maquinaria que permitir la segregacin equitativa de los cromosomas en las dos clulas hijas inmediatamente antes de la divisin celular. La parte central de un cilio o flagelo eucarionte est constituido por un haz muy organizado y estable de microtbulos.

Los microtbulos estn formados por sub-unidades: molculas de tubulina las cuales cada una es un dmero compuesto por 2 protenas globulares muy semejantes denominadas -tubulina, y -tubulina, , estrechamente unidas por enlaces no covalentes. Los dmeros de tubulina se apilan, unidos tambin por enlaces no covalentes, formando la pared del microtbulo cilndrico huevo. Esta estructura tubular est compuesta por 13 protofilamentos paralelos, formado cada uno por una cadena lineal de dmeros de tubulina en la que alteran tubulinas y . Cada protofilamento tiene una polaridad estructural, y esta es la misma en todos los protofilamentos. El extremo correspondiente a la -tubulina se denomina el extremo +, y el correspondiente a la -tubulina se denomina extremo -. Si esta polaridad no existiera, no podran cumplir su funcin (ej. Definir una direccin en el transporte intracelular). Centrosoma: Suele estar cerca del ncleo cuando la clula no est en mitosis. Organiza la disposicin de microtbulos que irradian hacia fuera de ste a travs del citoplasma. Cada anillo de -tubulina es el punto de partida, o sitio de nucleacin, para el crecimiento del microtbulo. Los dmeros -tubulina se agregan al anillo de -tubulina con una orientacin especfica, lo que determina que el extremo de cada microtbulo quede incluido en el centrosoma y que el crecimiento tenga lugar slo en el extremo +. El centrosoma tambin contiene centriolos, estructuras peculiares constituidas por microtbulos cortos de disposicin cilndrica, y estos son similares a los cuerpos basales. Al suministrar centros organizadores que contienen sitios de nucleacin y mantener baja la concentracin de dmeros de -tubulina, las clulas pueden controlar dnde se forman los microtbulos. Inestabilidad dinmica: deriva de la capacidad intrnseca de las molculas de tubulina de hidrolizar GTP. Cada dmero de tubulina libre contiene una molcula de GTP (Guanosn trifosfato) estrechamente unida que es hidrolizada a GDP poco despus de la adicin de la subunidad a un microtbulo en crecimiento. El extremo de un microtbulo en crecimiento est compuesto ntegramente por sub-unidades de GTP-tubulina, que forman lo que se conoce como casquete de GTP. A veces la tubulina del extremo libre del microtbulo hidroliza su GTP antes de que se aada la siguiente tubulina, de manera que los extremos libres de los protofilamentos estn compuestos, ahora, por subunidades de GDP-tubulina. Esto inclina la balanza a favor del desensamblaje. Las molculas de tubulina que contienen GDP liberadas a medida que el microtbulo se despolimeriza se unen a las molculas de tubulina no polimerizadas ya pertenecientes al citosol. Estas molculas que se unen al depsito intercambian el GDP unido a ellas por GTP, lo que les permite volver a ser competentes y sumarse a otro microtbulo en fase de crecimiento. La inestabilidad relativa les permite presentar un remodelado rpido, lo cual es crucial para su funcin. Es posible evitar que un microtbulo que crece de un centrosoma se desensamble si su extremo ms es estabilizado de manera permanente por unin a otra molcula o estructura celular. Frmacos Si una clula en mitosis es expuesta al frmaco colchicina, que se une firmemente a la tubulina libre e impide su polimerizacin en microtbulos, el huso mittico desaparece con rapidez, y la clula se atasca en el medio de la mitosis, lo que impide que segregue sus cromosomas en 2 grupos. El frmaco taxol ejerce el efecto opuesto en el nivel molecular, a que se une estrechamente a

los microtbulos e impide que pierdan subunidades, por lo que los microtbulos pueden crecer, pero no pueden retraerse. La desactivacin del huso mittico destruye finalmente a las clulas en divisin. Organizacin interior de la clula: Cuando una clula se ha diferenciado en un tipo celular especializado y ha adoptado una estructura fija definida, la inestabilidad dinmica de sus microtbulos suele ser suprimida por protenas que se unen a sus extremos o a lo largo de ellos y los estabilizan evitando el desensamblaje. Los microtbulos estabilizados contribuyen a mantener la organizacin celular. La mayora de las clulas animales diferenciadas estn polarizadas; es decir, un extremo difiere estructural o funcionalmente del otro. La polaridad celular es un reflejo de los sistemas de microtbulos polarizados de su interior, que contribuyen a posicionar los orgnulos en la localizacin requerida y a guiar las corrientes de trfico entre una regin de la clula y la otra. Protenas motoras: Las mitocondrias, y los orgnulos rodeados de membrana de menor tamao y las vesculas se desplazan con movimientos espasmdicos rpidos; es decir, se mueven durante un breve lapso, se detienen y, despus comienzan otra vez. Este movimiento saltatorio es mucho ms direccional y sostenido que los pequeos movimientos brownianos continuos causados por la accin trmica aleatoria. Estos movimientos son generados por protenas motoras. Se han identificado docenas de estas, que se diferencian entre s por el tipo de filamento al que se unen, la direccin que siguen a lo largo del filamento y la carga que transportan. Las cinesinas que suelen desplazar hacia el extremo + de un microtbulo. Las dinenas suelen desplazar hacia el extremo de un microtbulo. Tanto las cinesinas como las dinenas son dmeros con 2 cabezas globulares que se unen a ATP y una sola cola. Por lo general, la cola de una protena motora se une en forma estable a algn componente celular, como una vescula o un orgnulo, y esta unin determina el tipo de carga que puede transportar la protena motora. A medida que la clula se desarrolla y el retculo endoplasmtico crece, las cinesinas unidas a la parte externa de la membrana del retculo endoplasmatico la traccionan hacia fuera a lo largo de los microtbulos y la tensan como una red. Las dinenas, unidas de manera similar a las membranas del complejo de Golgi, lo traccionan a lo largo de los microtbulos pero en la direccin opuesta, hacia el centro de la clula. Cilios y Flagelos: Los cilios son estructuras piliformes de alrededor de .25 m de dimetro, cubiertas de membrana plasmtica. Cada cilio contiene una porcin central formada por un haz de microtbulos estables que crecen a partir de un cuerpo basal localizado en el citoplasma; el cuerpo basal acta como centro organizador del cilio. Los cilios desplazan agua sobre la superficie de una clula o propulsan clulas aisladas a travs de un medio lquido. Los flagelos, por lo general, son mucho ms largos. Los microtbulos de los cilios y de los flagelos son ligeramente distintos de los microtbulos citoplasmticos. El corte transversal de un cilio revela nueve dobletes de microtbulos dispuestos en forma anular alrededor de un par de microtbulos simples, lo cual es caracterstica de casi todas las clases de cilios y flagelos eucariontes. El movimiento de un cilio o flagelo se produce por incurvacin de su parte central cuando los microtbulos se desplazan entre s. Los microtbulos se asocian a numerosas protenas. Algunas actan como uniones cruzadas que

mantienen unido el haz de microtbulos; otras generan la fuerza que causa la incurvacin del cilio. La ms importante de estas protenas accesorias es la protena motora dinena ciliar, que provoca el movimiento de incurvacin de la parte central. La dinena ciliar est unida por su cola a un microtbulo, mientras que su cabeza interacta con un microtbulo adyacente generando una fuerza deslizante entre ambos filamentos. Filamentos de Actina: se encuentran en todas las clulas eucariontes y son esenciales para muchos de sus movimientos. Muchos son inestables, pero pueden formar estructuras celulares estables. Se asocian con una cantidad abundante de protenas fijadoras de actina. Miden alrededor de 7nm de dimetro. Tienen una polaridad estructural con un extremo + y un extremo -. Son ms delgados, flexibles, y en general, ms cortos que los microtbulos. Los filamentos de actina pueden crecer por el agregado de monmeros de actina a uno u otro extremo del filamento, pero la velocidad de crecimiento es mayor en el extremo + que en el extremo -. Un filamento de actina desnudo es inherentemente inestable y se puede desensamblar desde cualquiera de sus extremos. Cada monmero de actina libre transporta un nucletido trifosfato estrechamente unido; el ATP se hidroliza en ADP poco tiempo despus de la incorporacin del monmero de actina al filamento. Las citosinas impiden la polimerizacin de la actina. La faloidina estabiliza los filamentos de actina y los protege de la despolimerizacin. Con frecuencia, los filamentos slo duran algunos minutos despus de su formacin. La timosina y la profilina, que se unen a los monmeros de actina del citosol, les impide agregarse a los extremos de los filamentos de actina. Al mantener como reserva los monmeros de actina hasta que son requeridos, estas protenas desempean un papel crucial en la regularizacin de la polimerizacin de la actina. La formina y las protenas relacionadas con actina (ARP) controlan el ensamblaje de la actina en el frente te avance de una clula que migra. Hay protenas que mantienen los filamentos de actina agrupados en haces paralelos en las microvellosidades; otras forman enlaces cruzados y mantienen los filamentos de actina en una red similar a un gel dentro de la corteza celular. Las protenas fragmentadoras de filamentos, como la gelsolina seccionan los filamentos de actina en segmentos ms cortos. Pueden asociarse protenas motoras y formar haces contrctiles. Forman carriles a lo largo de los cuales las protenas motoras transportan orgnulos En la corteza celular, los filamentos de actina estn unidos entre s por protenas fijadoras formando una red que sostiene la superficie externa de la clula y le confiere resistencia mecnica. Esta contiene espectrina y anquirina, pero adems alberga una densa red de filamentos de actina que se proyectan hacia el citoplasma, donde forman una red tridimensional mediante enlaces cruzados. La reorganizacin de los filamentos de actina en el interior de la corteza es la base molecular de las modificaciones de forma y locomocin de las clulas. Deslizamiento celular: Los mecanismos moleculares de stas y otras formas de deslizamiento celular implican cambios coordinados de numerosas molculas en distintas regiones de la clula. En trminos generales, se sabe que hay 3 mecanismos interrelacionados esenciales: (1) la clula emite protrusiones

en su frente o borde activo; (2) estas protrusiones se adhieren a la superficie sobre la cual la clula se desliza, y (3) el resto de la clula se arrastra hacia delante por traccin sobre estos puntos de apoyo. El primer paso, el empuje hacia delante de la superficie celular se produce por la polimerizacin de la actina. Lamelipodios delgados, laminares, que contienen una densa red de filamentos de actina orientados de manera que la mayora de ellos tienen sus extremos ms cerca de la membrana plasmtica. Filopodios proyecciones rgidas y delgadas, tanto en el borde activo como en otras zonas de su superficie. Estas proyecciones miden alrededor de .01 m de ancho por 5-10 m de largo, y cada una contiene un haz laxo de 10 a 20 filamentos de actina, que tambin estn orientados con sus extremos ms hacia fuera. Tanto los lamelipodios como los filopodios son estructuras de reconocimiento que se forman y se retraen a gran velocidad, y se mueven alrededor de 1 m por segundo. El filopodio depende de las forminas, que se unen a los extremos en crecimiento de los filamentos de actina y promueven el agregado de nuevos monmeros que forman filamentos rectos, no ramificados. Cuando los lamelipodios y los filopodios entran en contacto con una zona favorable de la superficie, se adhieren a ella. En la cara intracelular de la membrana de la clula deslizante, las integrinas capturan filamentos de actina, lo que crea un anclaje firme para el sistema de filamentos de actina en el interior de la clula deslizante. Contracciones internas tambin dependen de la actina, pero el mecanismo es diferente y se basa en la interaccin de los filamentos de actina con protenas motoras llamadas miosinas. Las protenas relacionadas con la actina, o ARP estimulan la formacin de una red de filamentos de actina ramificados. Estas protenas forman complejos que se unen a los filamentos de actina existentes y nuclean la formacin de nuevos filamentos, que crecen en ngulo generando ramas laterales. Estructuras contrctiles: Todas las protenas motoras dependientes de l actina pertenecen a la familia de la miosina. Estas protenas se unen al ATP y lo hidrolizan, lo que aporta la energa para su movimiento a lo largo de los filamentos de actina desde el extremo hacia el extremo +. Varios tipos de miosina, de los cuales predominan las subfamilias miosina I y miosina II. Las molculas de miosina I tienen slo una cabeza y una cola. El dominio de la cabeza interacta con filamentos de actina y presenta actividad motora dependiente de la hidrlisis del ATP que le permite desplazarse a lo largo del filamento en un ciclo de unin, separacin y reunin. La cola vara entre distintos tipos de miosina I y determina qu componentes celulares sern arrastrados por el motor. Disposicin de los filamentos de actina: En el citoesqueleto de actina, los reordenamientos estructurales son desencadenados por la activacin de una variedad de protenas receptoras incluidas en la membrana plasmtica. Estas seales parecen converger en el interior de la clula sobre un grupo de protenas de unin a GTP estrechamente relacionadas, denominadas familia de protenas Rho. La activacin de diferentes miembros de la familia Rho afecta la organizacin de los filamentos de actina de distintas maneras. La activacin de la propia Rho impulsa la formacin de haces de filamentos de actina con miosina II y la agrupacin de integrinas que promueve el deslizamiento celular.

Esta red recibe seales externas de nutrientes, factores de crecimiento y contactos con clulas vecinas, junto con informacin interna respecto del estado nutricional, el tamao y la preparacin para la divisin de la clula. Despus, la red Rho procesa estas aferencias y genera seales que remodelan el citoesqueleto de actina. Contraccin muscular: La miosina del msculo pertenece a la subfamilia de la miosina II, que tienen 2 cabezas con actividad de ATPasa y una cola larga bastoniforme. Cada molcula de miosina II es un dmero compuesto por un par de molculas de miosina idnticas unidas por sus colas. Uno de estos conjuntos se une a filamentos de actina en una orientacin y los moviliza en un sentido, mientras que el otro conjunto de cabezas se une a fiolamentos de actina de orientacin opuesta y los moviliza en la direccin contraria. Haces contrctiles: filamentos de actina y de miosina II se ensamblan transitoriamente en clulas no musculares. Anillo contrctil: separa en dos a las clulas en divisin al contraerse y traccionar hacia adentro la membrana plasmtica. Las miofibrillas son los elementos contrctiles de la clula muscular. Miden de 1 a 2 m de dimetro. Cada miofibrilla consiste en una cadena de pequeas unidades contrctiles idnticas, llamadas sarcmeros. La contraccin de la clula muscular es causada por el acortamiento simultneo de todos los sarcmeros que es provocado por el deslizamiento de los filamentos de actina sobre los filamentos de miosina, sin que se modifique la longitud de ninguno de ellos. Durante cada ciclo, una cabeza de miosina se une a una molcula de ATP y la hidroliza. Esto determina una serie de cambios conformacionales de la molcula de miosina que desplazan el extremo de la cabeza alrededor de 5 nm a lo largo del filamento de actina en la direccin del extremo ms. La excitacin elctrica se propaga en cuestin de miliegundos a lo largo de una serie de tubos membranosos, denominados tbulos transversos (o Tbulos T), que se extienden hacia el interior de la clula desde la membrana plasmtica alrededor de cada miofibrilla. Despus, la seal elctrica se transmite al retculo sarcoplasmtico, una vaina adyacente de vesculas aplanadas interconectadas que rodea a cada miofibrilla como una funda reticular. El retculo sarcoplasmtico contiene una concentracin elevada de Ca2+, y en respuesta a la excitacin elctrica aferente, gran parte de este Ca2+ es liberado al citosol a travs de canales inicos que se abren en la membrana del retculo sarcoplasmtico como consecuencia del cambio del voltaje a travs de la membrana plasmtica. El Ca2+ interacta con un interruptor molecular compuesto por protenas accesorias especializadas estrechamente asociadas con los filamentos de actina. Una de estas protenas es la tropomiosina, molcula rgida y bastoniforme que se une al surco de la hlice de actina superponindose a siete monmeros de actina, y que impide que las cabezas de miosina se asocien con el filamento de actina. La otra protenas es la troponina, complejo proteico que contiene una protena sensible al Ca2+, ste se une a la troponina e induce un cambio en su conformacin que determina, a su vez, que las molculas de tropomiosina modifiquen ligeramente su posicin, lo que permite que las cabezas de miosina se unan al filamento de actina y desencadenen la contraccin.

Tan pronto como la concentracin citoslica de Ca2+ retorna al nivel de reposo, las molculas de troponina y tropomiosina vuelven a sus posiciones originales, donde bloquean la unin de la miosina y, por lo tanto, finalizan la contraccin. El aumento del Ca2+ induce la fosforilacin de la miosina II, lo que modifica la conformacin de la molcula de miosina y le permite interactuar con la actina.