September | October 2011 Feature title: Sustitucin parcial de la artemia: Evaluacin de las dietas formuladas para las larvas

de camarones de ro, macrobrachium rosenbergii

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The International magazine for the aquaculture feed industry

F: larval diets F: larval diets

Sustitucin parcial de la artemia: Evaluacin de las dietas formuladas para las larvas de camarones de ro, macrobrachium rosenbergii
la larva de Macrobrachium, bajo diferentes regmenes alimentarios que sustituyen parcialmente a la Artemia como dieta principal en la cra del camarn de ro

F: Dietas para larvas

se increment el nivel del agua hasta 90cm a medida que crecan las larvas (ver Figura 1a). El rgimen de alimentacin utilizado es como se describe en la Tabla 2. Las larvas de camarn se alimentaron tres veces al da (09:30, 01.30 y 03:30 horas) a razn de 5-20g/tonelada (ver Figura 1b). Antes de alimentarlas, las dietas se molieron para obtener la medida deseada (250-1000), de modo que el tamao de las partculas de alimento fueron perfectamente aceptadas por las larvas. Los nauplios de Artemia vivos se alimentaron dos veces al da, a las 07:30 horas y a las 6:30, a razn de 1-5 individuos/ml de agua. Los anlisis bioqumicos realizados a las artemias recin eclosionadas y a las dietas formuladas (ver Tabla 3) se hicieron siguiendo los mtodos de la AOAC (1995). El sifoneo se realiz dariamente (al medioda) para eliminar las partculas de residuo. El volumen de agua del tanque se recicl en un 20-30 por ciento diariamente, con el fin de mantener un ambiente ptimo para el crecimiento de las larvas. El agua extrada se remplaz por agua bien mezclada, correctamente aireada y con un 12ppt de salinidad, a la misma temperatura que tena el tanque. La calidad del agua se monitore para observar los parmetros fsico-qumicos, la temperatura, el pH del Agua, el Oxgeno Disuelto (OD), la salinidad y alcalinidad, el Nitrito de nitrgeno (NO2- N) y el amonico (NH3) (ver Figura 1c). El ndice de supervivencia se midi a travs de la estimacin volumtrica de las larvas almacenadas en cada tanque (ver Figura 1d). El comportamiento de las larvas se verific visualmente dos veces al da (temprano en la maana y despus de las comidas) para determinar las condiciones de las larvas; es decir, el patrn de nado, la pigmentacin y la acumulacin en el fondo del tanque una vez detenida la aireacin. Adems, se tomaron muestras diarias de un gran nmero de larvas provenientes de cada tanque para observarlas microscpicamente, determinar la etapa media de la larva y diagnosticar algn tipo de enfermedad de acuerdo a los sntomas descritos por el manual de la FAO (New, 2002). El crecimiento se midi con un centmetro (desde la punta del rostro hasta el final del telsn). Luego se pesaron con una balanza elctrica.

Metodologa
Se formularon tres dietas con distintos ingredientes (ver Tabla 1). Los ingredientes se aadieron y se mezclaron en una mezcladora de cocina tradicional; luego se cocinaron a bao de mara durante 30 minutos, se enfriaron y se almacenaron a 4C. Para el experimento se utilizaron tres tanques de cemento rectangulares de 3m3 de capacidad (1.5mX2mX1m). Se decidi realizar tres tratamientos (T1, T2 y T3) con una rplica de cada tratamiento. Se obtuvieron 150 de salmuera de una extraccin de agua de mar cercana y se almacen. Par obtener un 12 de agua salina, se necesita mezclar la salmuera con agua dulce. En principio las larvas se almacenaron a 100inds/L con 45cm de UV tratados a 12 ppt de agua salina con el objetivo de mantener todos los parmetros fsico-qumicos, de acuerdo al manual de la FAO (New, 2002), y luego

por M Shah Nawaz Chowdhury del Instituto de Ciencia Marinas y Pesca de la Universidad de Chittagong, Chittagong 4000, Bangladesh. Email: snawaz11@yahoo.com

l camarn de ro gigante (Macrobrachium rosenbergii, de Man), localmente conocido como Golda juega un papel muy importante en la economa de Bangladesh ya que a travs de el se obtienen valiosas divisas extranjeras, genera empleo y aumenta la produccin de protenas para los alimentos (Chowdhury et al., 2010).

incubacin adecuado y de ciertas habilidades para la cra (New and Singholka, 1982). El xito de este sistema depende de su correcto funcionamiento y gestin. Es muy importante contar con un rgimen de buena alimentacin para la obtener una produccin ptima en condiciones de incubacin. La calidad del alimento juega un papel fundamental en la cra de larvas del camarn de agua dulce (o camarn de ro); su mala calidad puede afectar la supervivencia, el crecimiento, la salud y la calidad de las larvas. Un sobrealimentacin, o una pobre Por su gran tamao y ser un alimento alimentacin puede causar prdidas econrico en protenas, atrae cada vez ms la micas muy importantes, por lo que la clave atencin tanto de los cultivadores como de para la cra de larvas de Macrobrachium los consumidores. rosenbergii es una alimentacin apropiada El cultivo del camarn de agua dulce es con raciones adecuadas. ambientalmente sostenible ya que se pracEllo ayudara a crear una mxima eficientica en densidades de crecimiento ms bajas cia econmica, larvas ms saludables y resis(New, 1995). Los adultos se reproducen con tentes a enfermedades (PL) y un excelente mucha facilidad tanto durante la temporada producto acucola. Por lo tanto, la seleccin de lluvia de verano como en cautiverio; sin de mejores regmenes de alimentacin para embargo la larva se desarrolla en 11 etapas, las larvas de Macrobrachium rosenbergii lo cual requiere de un nivel de tecnologa de tienen que ser tenidos en cuenta para el xito final. Tabla 1: Composicin de las dieta La Artemia salina (cysts) importada se Dietas de Prueba emplea comunmente t1 t2 t3 en los criaderos de Ingredientes (%) (eC) (eFC) (FeSC) Bangladesh, pero es muy costosa y su dispoHuevos 50.00 50.00 31.00 nibilidad es incierta. La Leche en polvo descremada 29.50 total dependencia de la Artemia como alimenMsculos de camarn 26.50 to no solo encarece la Carne de Pescado 30.00 cra, sino que se hace Flor del maz 49.00 19.00 08.50 insostenible. Aceite de hgado de bacalao 02.00 Por lo tanto, se hace Agar en polvo 01.00 necesario la bsqueda de Vitamina C 00.20 alimentos alternativos aceptables para remplaOtras multivitaminas 00.50 zar a la Artemia y reducir Levadura 01.00 01.00 00.60 los costos de cra de las Manano-oligosacridos (MOS) 00.10 larvas. Betaglucano 00.10 En consecuencia,
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en este estudio se intent determinar el crecimiento, el ndice de supervivencia y el nivel de stress frente a enfermedades de Se formularon tres dietas para larvas de Macrobrachium rosenbergii y se evalu la sustitucin parcial de la Artemia. El trabajo de investigacin se realiz utilizando seis tanques de cemento rectangulares, con capacidad de 3m3 de capacidad (1.5mX2mX1m) cada uno. Se almacenaron 100 larvas en cada uno de los tanques experimentales con el objetivo de aplicarles los tratamientos T1,T2 y T3 respectivamente, los cuales fueron replicados. Las tres dietas de prueba que se prepararon fueron: flan de huevo (T1), flan de huevo de camarn (T2), y flan de huevo de camarn formulado (T3).A las larvas de langostinos se les aplicaron las dietas tres veces al da (09:30, 01.30 y 03:30 hrs) a razn de 5-20g/tonelada. La dieta de flan de huevo de camarn formulado (T3) mostr un rendimiento de supervivencia mayor que la de flan de huevo (T1) y flan de huevo de camarn (T2). En comparacin con las larvas alimentadas con la dieta T1 y T2, las larvas alimentadas con flan de huevo de camarn formulado (T3) desarrollaron una metamorfosis ms eficiente, debido a que les tom menos tiempo alcanzar la siguiente etapa. Las mediciones de longitud y peso fueron superiores en las larvas alimentadas con flan de huevo de camarn formulado (T3) ya que proporcionaron la nutricin necesaria para reducir el riesgo de la Enfermedad de la Trampa de la Exuvia (EED) Las diferentes dietas de prueba no afectaron la calidad del agua, la tempera, el pH, el oxgeno disuelto (OD), la salinidad, la alcalinidad, el nitrito-nitrgeno (NO2- N) ni el amoniaco.Adems se obtuvieron registros en rangos aceptables para la cra del camarn de agua dulce.

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Tabla 2: regmenes de alimentacin utilizados en los tratamientos t1, t2 y t3 Tratamientos Alimentos Tiempo de alimentacin 07.30 18.30 09.30 01.30 03.30 09.30 01.30 03.30 09.30 01.30 03.30 Etapa larval I II III IV V VI VII VIII IX X XI PL1

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La eficiencia de las dietas experimentales se evalu sobre la base del crecimiento post-larva, el tiempo que se requiri para la metamorfosis, y el porcentaje de supervivencia relacionado. Las larvas se observaron diariamente para registrar el progreso de la metamorfosis, es decir, la fase media de la larva (MLS por sus siglas en ingls) y el porcentaje de supervivencia relativa (see Figure 1e, and 1f). Se seleccionaron larvas de cada tanque para estudiar los caracteres morfolgicos, siguiendo las descripciones brindadas por Uno y Soo (1969). El desarrollo de la larva se determin calculando las frmulas MLS descritas por Lovett y Felder (1988): MLS = (Si*Ps), donde Si es el nmero de la fase (i=1,2,3,11) y Ps es la proporcin de la larva en esa fase. Todos los materiales utilizados por cada unidad experimental fueron separados y desinfectados con una solucin de yodo, para evitar una contaminacin cruzada. El experimento concluy cuando ms del 95 por ciento de las larvas de todos los tanques se haban transformado en post-larvas. Todas las post-larvas fueron recolectadas de cada tanque y contadas (ver Figura 1g). Se usaron dos anlisis de varianza y las pruebas de rangos mltiples de Duncan para evaluar las marcadas diferencias entre los tratamientos (Snedecor y Cochren 1968, Duncan 1955).

de OD registrados fueron de 5.8 mg/L, 5.8 mg/L, y 5.9 mg/L en los diferentes tratamientos T1, T2 and T3. Los valores medios de concentracin de NO2-N fueron de 0.19 mg/L, 0.18 mg/L, y 0.15 mg/L en los tratamientos T1, T2 y T3. Los valores promedio de concentracin de NH3 encontrados fueron de 0.29 mg/L, 0.26 mg/L, and 0.23mg para cada uno de los tratamientos; y la alcalinidad promedio fue de 145 mg/L, 147 mg/L, y 145 mg/L respectivamente.

ndice de crecimiento
El ndice de crecimiento en trminos de longitud del cuerpo fue de 0.127mm/ da, 0.135mm/da, y 0.168mm/da en T1, T2 y T3 respectivamente, mientras que en peso observado fue de 0.000115g/da, 0.000180g/da, y 0.000240g/da en cada uno de los tratamientos (ver Figura 2 y Figura 3). Desde el comienzo de la cra (fase I) hasta la fase VI no hubo marcadas diferencias en el ndice de crecimiento de las larvas (0.3mm/da) en cada uno de los tratamientos. En las fases VII y VIII se observ un crecimiento ms rpido, mientras que en las fases IX a la XI el crecimiento observado fue moderado. En general, el ndice de crecimiento de las larvas en el tratamiento T3 fue ms rpido que en el T1 y T2; resultado similar al observado en los ndices de metamorfosis.

Cuando tuvo lugar la fase post-larva fue ms fcil la identificacin debido al cambio que ocurre del nado a arrastrarse en el fondo o en las paredes del tanque. Sin embargo el 100 por ciento de las larvas (que sobrevivieron) realizaron la metamorfosis a los 41, 38 y 35 das en los tratamientos T1, T2 y T3 respectivamente. Al final del ciclo de cra, el ndice de supervivencia fue de 22.8 por ciento, 31.6 por ciento y 38.7 por ciento para cada uno de los tratamientos (T1,T2 y T3), por lo que el ndice de supervivencia fue comparativamente mayor en el tratamiento T3 que en el resto de los tratamientos.

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Enfermedades
Se pudo observar graves infecciones de Zoothanium en todos los tratamientos, las cuales infectaron los medios de cultivos y el esqueleto de las larvas. Esta infeccin fue la causante de una gran mortalidad en estos ensayos (ver Figura 5a, y 5b). Para mejorar esta situacin se debi mejorar la calidad del agua, por lo que se cambi un 30 por ciento de ella. La Enfermedad de la Trampa de la Exuvia (EED) se observ en la etapa final de la larva (X-PL1), y en las primeras etapas de la post-larva en el T1, donde tuvo lugar el mayor almacenaje inicial de larvas (ver figura 5c). Se desconoce la causa de EED, pero se piensa que la deficiencia nutricional puede ser el factor limitante. En los tanques donde se suministr el flan de huevo de camarn formulado (T3) con Artemia hubo un ndice de supervivencia de larvas ms alto (38.7%) que en los que se suministr el flan de huevo (T1) (22.8%), o el flan de huevo de camarn (T2) (31.6%). Las larvas alimentadas con el flan de huevo de camarn formulado (T3) les tom menos tiempo llegar a la siguiente fase que

Calidad del agua

Durante el perodo de estudio la temperatura del agua en los diferentes tanques oscil entre 28.5-30.5C en la maana, y entre 29.0-31.5C durante la tarde. Las temperaturas promedio de agua registradas fueron de 30.1C, 30.2C, y 30.1C en los tratamientos T1, T2 y T3 respectivamente. Los valores de pH fueron de (7.5-8.2) en la maana y de (7.8-8.2) en la noche; por su parte los valores promedios

ndice de supervivencia
La Figura 4 muestra que el alimento formulado (T3) aument el ndice de la metamorfosis. Las fases larvales promedios fueron dismiles entre T1, T2 y T3. Las primeras post-larvas se observaron despus de 26, 24, y 22 das de cra en los tratamientos T1, T2 y T3 respectivamente.

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F: Dietas para larvas

los alimentados con las dietas (T1) y (T2), lo que indica la eficiencia de la dieta (T3). En la dieta T3, se registr un mayor ndice de supervivencia, MLS, crecimiento y metamorfosis; probablemente todo ello es atribuido a la dieta en si, la cual contena diferentes ingredientes, que es de todos conocido contienen niveles altos de HUFA y las vitaminas necesarias. El aceite de hgado de bacalao contiene (especialmente en HUFA) dentro de las diferentes cepas (Murthy 1998). Durante el estudio la temperatura del agua vari en un rango de entre 28.5C a 31.5C . En 1985 New and Singholka reportaron que la temperatura ptima para la cra de larvas de camarn podran ir de 26-31C. La investigacin se dise para mantener un estndar de salinidad de 12 en todos los tratamientos hasta completar la metamorfosis; Tabla 3: Composicin aproximada de las dos dietas de prueba y los este aspecto nauplios de artemia (% de peso seco De) fue muy recoDietas Protena lpido Fresno mendado (New and Singholka, 1985; Ling, 1969; T1 (FH) 44.030.80 7.830.35 1.960.03 Fijimura, 1974). T2 (FHC) 47.110.89 8.210.27 2.790.05 El pH vari desde 7.5 a 8.2, T3 (FHCF) 51.030.80 9.010.21 2.920.01 mientras que otros Artemia 48.421.36 19.200.26 7.460.21 autores sugeran un rango de 7.0 a -3 HUFA, lo cual es muy importante para 8.5 para la cra de larvas de camarn (Ling el crecimiento y la supervivencia de las 1969, Aquacop 1983, and New, 1990). El larvas de camarn (Murthy, 1998). Las dienivel de oxgeno disuelto promedio vari tas formuladas que contenan diferentes de 5.8 to 5.9mg/l. Las larvas de camarn niveles de huevo de gallina, leche en polvo requieren de de ms de 4mg/l de oxgeno y msculo de camarn combinados con disuelto (Reddy, 1997). Artemia lograron un mejor crecimiento El NH3 es la principal fuente metaby supervivencia de las larvas de camarn lica de excrecin de los camarones, y se (Rao, 1997). considera una de las principales causas de Los nauplios de Artemia es el alimento muerte en los criaderos. vivo predominante para la cra de larvas En un sistema adecuadamente aconen los criaderos de camarones. dicionado, el proceso de nitrificacin Se han tenido reportes sobre la utilibacteriana convierte el NH3 en un zacin de la Artemia conjuntamente con NO3 relativamente no-txico, donde el otros alimentos preparados en la cra producto intermedio NO2 es altamente de larvas de camarn (Sick and Beaty txico para los vertebrados acuticos. 1975, Corbin et al. 1983), pero no se han La concentracin de NO2- N observada logrado verdaderos sustitutos para la vari en un rango de 0.1-0.3mg/l, donde Artemia en los criaderos de camarones las larvas de Macrobrachium pueden de agua dulce. Debido al alto costo de tolerar hasta 1.8mg/l (Amstrong et al., la Artemia salina (cysts), y su escasez 1976). En 1980 Malecha report que la ocasional, hay una excesiva dependencia supervivencia estaba cercana al 50 por de la Artemia, lo que se ha traducido en ciento en los criaderos y en menos de 1 una limitacin para la expansin de los por ciento en el medio natural. criaderos de Macrobrachium rosenbergii Bajo regmenes de alimentacin dife(New 1990). rentes en el estudio actual se lograron Estas son algunas de las desventajas de ndices de supervivencia de 21,9 por la Artemia, adems de su costo y factores ciento, 31,0 por ciento y 43,0 por ciento de disponibilidad. La degradacin bacteen los tratamientos T1, T2 y T3 respectiriana de las larvas exuvia y las cscaras vamente. Durante las ltimas fases larvade Artemia ensucian el agua y generan les la mortalidad puede ocurrir debido al residuos que conllevan a la mortalidad de canibalismo (Suharto et al., 1980). las larvas. Al igual que en ese informe, en nuestro Las Artemias salinas (Cysts) ingeridas estudio se observ el canibalismo cuando por las larvas no se pueden digerir y puelas larvas se transformaron en post-larvas den causar obstrucciones en el intestino, (metamorfosis), inmediatamente despus de entre otros efectos nocivos (Stults, 1974). la muda larval. La mortalidad causada por el Existe una variacin considerable en la canibalismo era alta cuando la poblacin de calidad nutritiva de las Artemias salinas larvas estaba dispersa, la nutricin no era suficiente, o ambas. Tambin se observ algn tipo de mortalidad cuando las larvas saltaban y quedaban varadas en las paredes del tanque, por encima de la superficie del agua. Las larvas comenzaron a saltar despus de la fase VIII, sobre todo despus de ser alimentadas con el alimento preparado. Para reducir este tipo de mortalidad se ajust la aireacin, logrndose mantener las paredes del tanque con agua, evitando que las larvas quedaran varadas. El caso ms grave de mortalidad lo causaron las enfermedades. A pesar de lograse identificar diferentes enfermedades como la infeccin por protozoarios y EED, el Zoothanium fue la que tuvo mayor incidencia y efectos severos en las larvas, pudindose observar en el agua y en el esqueleto de la larva. Esta enfermedad povoc muertes en los diferentes tratamientos y estuvo presente en todas las fases del desarrollo de la larva. La dieta T1 experiment una gran mortalidad debido a las enfermedades de EED y Zoothanium. En la investigacin se observ que el EED afecta las ltimas fases de las larvas y las ms tempranas de las post-larvas. La larva afectada era incapaz de liberarse de la exuvia en la cual quedaba atrapada. Otras larvas que lograron deshacerse de la exuvia, posean malformaciones en los apndices por lo que murieron despus de la muda. Esta informacin coincidi completamente con la brindada por Brock (1983, 1988). Otro hallazgo importante fue que el EDD ocurri en las dietas T1 y T2, no siendo as en las dieta T3, lo que revela que se puede prevenir el EED al proporcionar un alimento bien formulado (flan de huevo de camarn formulado), con un control ptimo del agua durante la cra.

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Conclusiones
Al incorporar en las dietas formuladas carne de camarn, huevos de gallina, leche en polvo descremada, flores de maz, polvo de agar, aceite de hgado de bacalao y otras vitaminas necesarias se logra un mayor crecimiento, una metamorfosis ms rpida y un ndice de supervivencia ms alto cuando se combinan con Artemia y no con dietas comunes, las cuales fueron ampliamente utilizadas en los criaderos de langostinos en Bangladesh. Esta dieta formulada podra ser utilizada con mucha eficacia para remplazar el uso parcial de la Artemia en la cra de langostinos o camarones de ro, ya que proporciona la nutricin necesaria para el crecimiento de las larvas y reduce los costos de produccin.

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