Tecnicas de tincion del Sistema Nervioso

TCNICA DE NISSL: Es una tcnica de basofilia como una coloracin con hematoxilina. El fundamento de la tincin es el uso de un colorante bsico (azul de toluidina, azul de metileno, violeta de cresilo) que, en un medio cido (pH 3) reacciona con los grupos fosfatos de los cidos nucleicos. Resultado: Se tien los ncleos de todas las clulas (neuronas y clulas gliales) y la sustancia de Nissl (ribosomas libres y asociados a membranas de neuronas). No se tien los axones!!, por carecer de ARN en su interior. Es la tcnica utilizada para el estudio de detalles citolgicos y citoarquitectnicos. TCNICA DE GOLGI Esta tcnica fue la precursora de todas las tcnicas de impregnacin argntica. La impregnacin se realiza sobre el tejido fijado en bloque (o sea sin cortarlo previamente) en dicromato de potasio y posterior impregnacin con nitrato de plata. Luego se lo incluye en celoidina y se lo corta. Actualmente no est todava claro el fundamento de esta tcnica. Resultado: Se observan neuronas, gla y vasos de color negro sobre un fondo amarillo de especto semejante al acrlico. La coloracin es selectiva, impregnndose entre el 5 y el 20 % de las neuronas y clulas gliales; pero las que lo hacen, se impregnan completamente, con todas sus prolongaciones. Se utiliza para el estudio de campos dendrticos y colaterales axonales. No se observan detalles citolgicos. TCNICA DE CAJAL Tcnica de impregnacin argntica, la impregnacin se hace con nitrato de plata y la reduccin con solucin reductora de Cajal (hidroquinona, formol y acetona). Posteriormente se realiza un viraje con una solucin diluida de cloruros de oro. Resultado: Neurofilamentos y neurotbulos del soma, axones y dendritas, se observan formando un artificio llamado neurofibrillas, de color marrn. El ncleo es negativo, de un color amarillo plido. Las prolongaciones neuronales y gliales y algunos vasos aparecen impregnados de color marrn. Permite el estudio de prolongaciones neuronales, dando una imagen ms completa del tejido nervioso. No es posible observar detalles citolgicos ni el ncleo celular.Posibilita observar el neuropilo!! MTODO DE CAJAL CON ORO SUBLIMADO El sublimado de oro es una solucin mezcla de cloruro de mercurio y cloruro de oro que precipita sobre los gliofilamentos. Resultado: los astrocitos y sus prolongaciones aparecen impregnados de color negro. El fondo es habitualmente incoloro o marrn, algunas veces se observa de color prpura. MTODO DE DEL RO HORTEGA Empleado para astrocitos. Utiliza nitrato de plata y carbonato de litio, formando un precipitado de carbonato de plata; ste se reduce con formol y vira con cloruro de oro. Resultado: los astrocitos se observan de color negro y bien delimitados, con sus prolongaciones de color negro y fondo amarillo. Existen adems, variantes de esta tcnica para la demostracin de oligodendrogla y microgla (carbonato de plata dbil).

TCNICAS PARA MIELINA Colorean la mielina pero no el axn, el cual da una imagen negativa. MTODO DE WEIGERT: Utiliza la hematoxilina con el agregado de un mordiente y cloruro frrico. Resultado: se tien las lipoprotenas de la banda de mielina de color violceo o negro, sobre un fondo incoloro o amarillo plido. TCNICA DE KLUVER BARRERA: Utiliza dos colorantes: violeta de cresilo (bsico) y luxol fast blue (con afinidad por los lpidos de la vaina de mielina). Resultado: se tie la mielina de azul y los ncleos y la sustancia de Nissl de violeta. MTO DO DEL TETRXIDO DE OSMIO: El osmio reacciona con los lpidos a nivel de sus enlaces insaturados. Resultado: La vaina de mielina se tie de negro por su alto contenido de lpidos insaturados.