La sal de la vida Edith Taleisnik, IFFIVE-INTA, Crdoba Agradecimiento.

El trabajo de nuestro grupo ha sido financiado y apoyado por ANPCyT, Fundacin Antorchas, CONICET e INTA. Agradecemos tambin el apoyo e inters sostenidos de la empresa Oscar Pemn y Asociados, Jess Mara, Crdoba. A nivel global, existen aproximadamente 900x10 6 ha de suelos afectados por salinidad, que resultan marginales o no aptos para la agricultura, ya que la mayora de los cultivos extensivos son susceptibles a esta condic in. El rea salinizada crece constantemente en asociacin con la difusin de la agricultura irrigada (Flowers and Yeo 1995). Las estrategias para reducir el impacto sobre la productividad agrcola abarcan tanto acciones sobre los suelos en si, tendientes a reducir la salinidad o mitigar los efectos de la misma sobre su estructura, como esfuerzos para lograr variedades ms tolerantes, estrategia que se considera ms sustentable y que se ha encarado de diversas maneras. El mejoramiento convencional, basado fundamentalmente en la seleccin para caractersticas agronmicas, utilizando fuentes de variabilidad intra o extra-especficas, o bien generando variabilidad por mutagnesis ha dado mayores frutos (Ashraf and Harris 2004). La introduccin de halfitas a la agricultura, tal es el caso de Atriplex (http://www.plantstress.com/Articles/), es una estrategia iinteresante, pero menos difundida, por tratarse, en general, de materiales de inters local. La transformacin de especies con genes relacionados a caractersticas fisiolgicas involucradas en la tolerancia a la salinidad, ha centrado ltimamente el inters de los cientficos. El desarrollo de esta ltima estrategia se ha asociado a los avances logrados, desde los aos '70, en el conocimiento de las bases fisiolgicas de la tolerancia a la salinidad (Munns 1993) y al crecimiento explosivo del conocimiento en biologa molecular (Hasegawa et al. 2000). El trabajo de nuestro grupo, en este contexto, consiste en el estudio de caractersticas fisiolgicas relacionadas con la tolerancia a a salinidad. Las consecuencias negativas de la exposicin a salinidad en el sustrato se manifiestan como reducciones en el crecimiento y muerte de rganos, asociadas al ingreso de Na+, disminucin en la
+ concentracin interna de K y Ca++, restricciones al ingreso de agua y la expansin celular. Se habla de

tolerancia a esta condicin ya que las plantas asentadas en sustratos salinos conviven con la misma, en contraposicin al concepto de "resistencia" que implica evitar el desarrollo del agente estresante en la planta, tal como ocurre en los casos de resistencia a patgenos. Las bases fisiolgicas de la tolerancia a la salinidad en plantas se relacionan, primariamente, a la fisiologa de los flujos de iones y de agua, y, secundariamente, al impacto de esta condicin sobre diversas otras funciones.

Como les sucede normalmente a los doctorandos, llegu al tema porque Moshe Tal (Ben Gurion University, Israel), a quien haba elegido como director de tesis, trabajaba en tomate-salinidad. El tema se trabajaba mucho en Israel, que dispone de amplias reservas de aguas salobres, y de un clima privilegiado para exportar tomates a Europa en pleno invierno. Eso era antes de que Andaluca se cubriera de invernaderos. En esa poca se buscaban caractersticas determinadas en parientes silvestres pero interfrtiles con el tomate, como potenciales herramientas para el mejoramiento. Lycopersicon pennellii y L. peruvianum las tenan. La comparacin entre estas especies y el tomate cultivado fue mi tesis de doctorado. Tengo muchas ancdotas de esos tiempos. Los doctorandos dbamos los prcticos, y las evaluaciones que entregaban los alumnos estaban en hebreomanuscrito. Con Dany Teitel, un amigo candiense, tambien doctorando tomatero, las corregamos por palabras clave: buscbamos "xilema", "puntuacin", "estoma" y luego adivinbamos el contexto Al regresar a la Argentina, segu trabajando varios aos en tomate. Gracias a este cultivo logr mis primeros subsidios, becarios y un lugar el mundo (de la fisiologa): el de las respuestas de plantas a la salinidad. En la Universidad Catlica de Crdoba, interaccionando con la gente de forrajes y de produccin animal, tomamos conciencia de que en la Argentina, las amplias extensiones de suelos afectados naturalmente por salinidad, considerados marginales para la agricultura, y con potencialidad para ser explotadas para la ganadera, constituyen un desafo relevante. En el caso particular de la regin del Parque Chaqueo argentino, la salinidad de suelos es una de las principales limitaciones edficas a la produccin de plantas forrajeras, que deben combinar una adecuada tolerancia a la sequa y a la salinidad. Chloris gayana Kunth, gramnea originaria de frica y de probada tolerancia a la salinidad, es una importante fuente de forraje en la regin, asi como en zonas afectadas por salinidad en la provincia de Santa F. Sin embargo, y a pesar de su renombrada tolerancia, la salinidad incide negativamente en la productividad de esta especie (Prez et al. 1999). Cules eran las causas de tales restricciones? Existan oportunidades para superarla? En atencin a esta problemtica, nuestro grupo form parte de una red multidisciplinaria de investigacin, donde particip gente de CONICET, INTA (IFFIVE, EEA INTA Leales, Santiago del Estero y Castelar), y de las Universidades Nacionales de Tucumn y Ro Cuarto. Logramos uno de los 50 subsidios que otorg la ANPCyT en el primer llamado, cuando an no era Agencia... Fue un hito en nuestro trabajo, que requiri aprender a trabajar de otra manera, con otra mentalidad. Esa red, gestada en el ao 1994 para trabajar en Chloris gayana y salinidad, nos premiti generar un volumen de informacin relevante, y ciment amistades entraables de las que nos seguimos nutriendo. El rendimiento agronmico de gramneas forrajeras consiste primordialmente en lminas foliares, por ende, la tasa de expansin foliar y la duracin del rea foliar son caracte res determinantes de su productividad. Tambin en C. gayana, cultivada en salinidad, el rea foliar mostr una alta correlacin con

la acumulacin de materia seca (de Luca et al. 2001). En dos genotipos de esta especie, cercanos genticamente, pero de respuestas contrastantes a la salinidad, la disminucin en rendimiento pudo asociarse con la proporcin de hojas secas y la reduccin en el crecimiento foliar (de Luca et al. 2001). Qu causas fisiolgicas contribuan a estos efectos? La muerte de las lminas comienza, y en muchos casos se restringe, a la parte expandida de las lminas. Alli, la salinidad provoca disminuciones en la tasa de fijacin de carbono, efecto que se verific tambin en C. gayana (Luna et al. 2002). Como es de esperar, las lminas foliares de C. gayana acumulan sodio en condiciones de salinidad. Ambas condiciones, la acumulacin de Na+ y la disminucin en la tasa de fijacin de C en presencia de alta irradiacin, pueden generar especies activas de oxgeno (EAOs), dao oxidativo (Asada and Takahashi l987), y ste, a su vez, incidir en la muerte celular. En efecto, en condiciones de salinidad, la expresin del dao oxidativo, medido como presencia de malondialdehido, producto de la peroxidacin lipdica, fue menor en los genotipos ms tolerantes de C. gayana (Luna et al. 2002), y esto se propuso como una herramienta auxiliar para la identificacin de individuos tolerantes a la salinidad en esta especie (Luna et al. 2000). La zona de expansin foliar en gramneas est restringida a unos pocos centmetros ubicados en la base de las lminas. All, la salinidad comnmente induce el acortamiento y la disminucin de tasas de crecimiento, efec tos tambin observados en C gayana (Ortega and Taleisnik 2003). La expansin foliar est controlada por la capacidad de los tejidos de esta zona de captar agua y por las propiedades reolgicas de sus paredes celulares, y en C. gayana se observaron tanto incrementos en la rigidizacin de las paredes (Ortega et al. 2003) como mermas en la conductividad hidrulica (de Luca et al. 2001), atribuibles en parte a la reduccion del dimetro de los vasos xilemticos (Ortega, no publicado). La reduccin de la masa radicular en condiciones de alta salinidad (Crdoba et al. 2001) posiblemente tambin contribuya a los cambios en conductividad hidrulica. La salinidad modifica asimismo la naturaleza de las barreras apoplsticas de las races (Taleisnik, 1999) y, segn vimos en tomate, la actividad de acuaporinas (Peyrano et al., 1997). Pensando que la salinidad provocara incrementos en la presencia de EAOs tambin en la zona de expansin foliar (adems de los registrados en la parte expandida de la hoja), que contribuiran a la rigidizacin de paredes celulares, investigamos este aspecto, utilizando maz como herramienta experimental. Para nuestra sorpresa, vimos que haba una gran produccin de EAOs apoplsticas en esa zona, y verificamos que eran necesarias para que hubiera expansin celular (Rodrguez et al, 2002). Se sumaban evidencia sobre el papel "positivo" que juegan las EAOs apoplsticas, (generadas por la actividad del complejo NADPH oxidasa de plasmalema), en eventos de sealizacin que regulan la actividad de canales de iones y el crecimiento de clulas vegetales (Foreman et al., 2003). An ms sorprendente fue encontrar que en salinidad, la presencia de EAOs en la zona de expansin foliar se mitigaba, y que

restituyndolas, se estimulaba la expansin foliar (Rodrguez et al, 2004). Hoy sabemos que la actividad de la NADPH oxidasa de plasmalema, est afectada negativamente por la salinidad (Rodrguez et al, 2004b). Esperamos que la profundizacin de estos estudios nos lleve a dilucidar alguno de los mecanismos primarios responsables de la merma en expansin foliar en condiciones de salinidad. La tolerancia a la salinidad depende de la conjuncin de caractersticas fisiolgicas y morfolgicas que se expresan a diversos niveles de organizacin (Munns 1993). No obstante el carcter multignico de la tolerancia a la salinidad, existen experiencias donde la transferencia de un nico gen ha logrado incrementar fehacientemente el grado de tolerancia (ver, por ejemplo Zhang and Blumwald, 2001), pero, en general, son relativamente escasos los ejemplos de resultados exitosos utilizando ingeniera gentica (Flowers 2004). Eso es particularmente cierto en el caso de pasturas, donde el impacto de 20 aos de investigacin en biologa molecular ha sido considerado como marginal (Humphreys, 2001). El trabajo concertado de bilogos moleculares, fisilogos, genetistas y agrnomos de campo, seguramente podr modificar este panorama. Los esfuerzos de investigacin en red son los nicos que pueden reunir la masa crtica y aportar la perspectiva para lograrlo. A modo de sntesis, y adaptando libremente terminologa FODA, reflexiono que la salinidad sin duda es una amenaza para los cultivos, que ha dado a nuestro grupo la oportunidad de trabajar muchos aos... en los que crecimos y nos fortalecimos en la interaccin con otros equipos. Terminar con una 'frase clebre" de mi padre, que siempre ha predicado "do what you like, and like what you do...." Asi, en ingls lo dice, desafindonos a ser libres y felices con nuestro trabajo. Yo lo soy.

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