SISTEME BIOLOGICE

Curs 1
 CONȚINUTUL DISCIPLINEI
⚫ CURSURI
− Organizarea generală a celulelor
− Structura și funcțiile acizilor nucleici
− Replicarea ADN
− Membrana plasmatică
− Semnalizarea celulară
− Sinteza proteinelor
− Organite celulare
− Diferențiere celulară
 CONȚINUTUL DISCIPLINEI
⚫ Aplicații practice
− Echipamente specifice de laborator
− Microscopie optică
− Noțiuni de microscopie electronică
− Metode de manipulare celulară
− Metode de analiză a acizilor nucleici
− Aplicații ale tehnicii PCR în biologie și medicină
 METODE DE EVALUARE

⚫ Activitate practică (30 %)- LP

− Se încurajează formarea grupelor de până la 3-4 studenți
− La final de LP se evaluează dobândirea abilităților practice

• Activitate individuală (20 %)- curs și LP

⚫ Examenul final (50 %)

⚫ Nota finală:
− total puncte alocate/activitate (maxim 100 puncte)
− Se împarte la 10
− Rotunjire la un număr întreg
 BIBLIOGRAFIE
⚫ Molecular Biology of the Cell. Fifth edition,
Alberts B., Johnson A., Lewis J., et al., 2002
⚫ Molecular Cell Biology. Lodish H. 2008
⚫ The Cell: A Molecular Approach. 2Nd edition.
Cooper GM. Sunderland (MA): Sinauer
Associates, 2000
⚫ https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/
NOȚIUNI INTRODUCTIVE
TEORIA CELULARĂ
⚫ Robert Hooke (1665)
⚫ CELULĂ, CELLA/CELLULA (CĂMARUȚĂ)

⚫ Teoria celulară

Matthias Jakob Schleiden şi Theodor Schwann

(1839)
- Celula reprezintă unitatea fundamentală,
structurală și funcțională a organismelor
⚫ Rudolf Virchow, (1858)

- celulele se formează din alte celule

https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Robert_Ho
oke,_Micrographia,_cork._Wellcome_M0010579.j
 PROCARIOTE EUCARIOTE
Spatiul periplasmatic
si peretele celular

Membrana Membrana Nucleoid

externa interna

Nucleoid
Anvelopa nucleara

Membrana plasmatica

Aparatul Golgi

Mitocondrie

Peroxizom

Lizozom
Membrana interna

Perete celular

Spatiul periplasmatic

Membrana externa Reticul

Vezica de
Endoplasmic
secretie
rugos

(Lodish, 2008)
 PROCARIOTE
Diametru 0.5 – 5 µm
ADN circular, liber in citoplasma
Ribosomi 70 S, ~20 nm
Nu prezinta RE
Putine organite celulare
EUCARIOTE
≥ 40 µm
ADN in nucleu delimitat de anvelopa
nucleara
ADN asociat cu proteine, formeaza
cromosomi
Ribosomi 80 S, ~25 nm
RE neted si rugos
Organite celulare:
- Delimitate de membrana (lizozomi,
aparat Golgi, vacuole)
- Delimitate de membrana dubla (nucleu,
mitocondrii, cloroplaste)
- Nedelimitate de membrana (ribosomi,
centrioli, microtubuli)
 Clasificarea lumii vii in 3 domenii (Hogg, 2005)

Woese a inceput in anii 70 studiul ARNr 16S si a evidentiat ca cianobacteriile sunt

asemanatoare cloroplastelor
Tipuri morfologice de bacterii.

Forma sferica (coc, coccus = samanta):

- Coc simplu
- Diplococ
- Streptococ (streptos = lant)
- Tetracoc (tetrada)
- Sarcina
- Stafilococ (staphylos = ciorchine)

Forma bacilara (cilindrice, bacillus = bastonas):

- Cocobacili
- Diplobacili
- Streptobacili
- Rozeta
- Palisada
Tipuri morfologice de bacterii.

Forma spiralata Bacterii patrate (Quadra)

https://en.wikipedia.org/wiki/Haloquadratum
Tipuri morfologice de bacterii.

Bacterii prostecate (prosteca = apendice, coada)

Hyphomicrobium
vulgare
https://en.wikipedia.org/wiki/Hyphomicrobium

Ridgway et al., 1981

Caulobacter
crescentus Imagine de microscopie electronica de
scanare (Gallionella sp.)

https://microbewiki.kenyon.edu/index.php/Caulobacter
Structura celulei bacteriene.
Perete celular - Bacterii Gram pozitive
Peretele celular la bacterii.
Mureina (peptidoglican, glicopeptid,
Bacterii Gram pozitive glucozaminopeptid)
• Componenta glucidica
• Dizaharid (N-acetil-D-
Legatura sensibila la lizozim
glucozamina si acid N-
acetilmuramic, legate β 1-4)
 Peretele celular la bacterii.
Bacterii Gram pozitive
Mureina
• Componenta
peptidica
(tetrapeptid)
- L-alanine
- Acid D-glutamic
- Acid
diaminopimelic
- D-alanine
Acidul N-acetilmuramic
si D-aminoacizi –
markeri biochimici ai
Eubacteriilor

Structura glicanului tetrapeptidic (E. coli)

 Peretele celular la bacterii.
Bacterii Gram pozitive

Partea glucidica formeaza un polimer

Tetrapeptidele conecteaza catenele pe
verticala iar lanturile de aminoacizi pe
orizontala
Puntile peptidice asigura rigiditatea
peptidoglicanului

Structura peptidoglicanului la bacteria E. coli

 Structura celulei bacteriene.

Perete celular - Bacterii Gram negative

 Peretele celular la bacterii.
Bacterii Gram negative
Membrana externa

• Lipoproteine
• Proteine (porinele - proteine formatoare de canale
membranare; E. coli - porina matrix (OmpF),
osmoporina (OmpC), fosfoporina (PhoE) si maltoporina
(LamB)
• LPS (lipopolizaharide – substanta pura, endotoxine -
amestec de LPS si proteine)
 Peretele celular la bacterii.
Bacterii Gram negative

Regiunea intermediara si interna prezinta o compozitie chimica apr. constanta la

diferite specii de bacterii gram negative
Regiunea polizaharidica externa are o compozitie chimica variabila
 Peretele celular la bacterii.
Bacterii Gram negative

Rolurile LPS:

• Structural (molecule hidrofile, cu masa moleculara mica)

• Conferă stabilitate celulei (multe grupari fosfat –
membrana externa cu sarcina globala negativa
• Protectie
• saruri biliare, lizozim, antibiotice lipofile, agenti
antibacterieni gazda
• Rol de adeziune – colonizeaza gazda
• Raspuns imun – activeaza macrofagele, interferon,
citokine
Nr. 1 Nr. 2

Indicati structurile din dreptul sagetilor si precizati caror tipuri de bacterii le sunt
caracteristice.
Flagelul
- Filament extracellular,
ondulat, lungime
variabila (5-70 µm)
- Bacterii peritrihe
(numerosi flageli
dispusi pe toata
circumferinta celulei),
monotrihe, lofotrihe
(flageli grupati)
- Organite de
locomotie, implicate si
in chemotaxie
(deplasarea orientata
de gradiente de
concentratie ale
substantelor chimice

Tipuri de flageli
 Mobilitatea si chimiotaxia

Mobilitatea este influentata de substante

chemiotactic positive (atractante) sau negative
(repelente)
Substantele atractante (aa, glucide, calciu,
magneziu) deplaseaza celulele spre zonele in
care concentratia lor este mai mare
Substantele repelente (acizii grasi, alcoolii, metale
grele) indeparteaza celulele din zonele cu
concentratii mari
 Mobilitatea si chimiotaxia

In mediu neutru bacteriile se deplaseaza liniar

apr. 1 secunda apoi se rostogolesc si revin la
miscarea liniara

O celula peritriha:
– sens antiorar – propulsie in linie dreapta
– sens orar – rostogoleste (reorienteaza celula
de la o directie gresita)
 Mobilitatea - semnificatie

Favorizeaza supravietuirea celulei

La bacteriile patogene:
- influenteaza patrunderea prin stratul de mucus
ce tapeteaza celulele epiteliale
- Faciliteaza aderenta (factor de virulenta)
Pilii si fimbriile

Imagine de microscopie
electronica la Salmonella
typhi

Pilul implicat in conjugare

de la Escherichia coli
 Pilii si fimbriile
Fimbriile
- Apendice filamentoase drepte si rigide, lungime
variabila (1-20 µm)
- Au o dispozitie pericelulara, polara sau bipolara
- Fimbrilina, asezate helical
- Structura tubulara
- Categoria adezinelor (interactiunea celula-
celula; celula-suport)
- Absorbtia nutrientilor
- Bacterii patogene: adera puternic la receptorii
celulelor epiteliale, la hematii
 Pilii si fimbriile

Pilii
- Apendice filamentoase neflagelare
- Codificati de gene plasmidiale
- Fosfoglicoproteina pilina
- Sensibili la temperatura, solutii acide, agitare
NOȚIUNI INTRODUCTIVE
TEORIA CELULARĂ

Lactococcus lactis Neuron

Purkinje

(Lodish, 2008)
~200 µm
Cultura primara de neuroni din ganglionii dorsali spinali de sobolan
Cultura primara de neuroni din ganglionii dorsali spinali de sobolan
Cultura primara de neuroni din ganglionii dorsali spinali de sobolan
Cultura primara de neuroni din ganglionii dorsali spinali de sobolan
mentinuti timp de 24 h in mediu de cultura cu 10 µM AraC
Cultura primara de neuroni din ganglionii dorsali spinali de sobolan
mentinuti timp de 24 h in mediu de cultura
Linia celulara de neuroblastom
Linia celulara de neuroblastom
(154) Inner Life Of A Cell - Full Version – YouTube