DEPARTAMENTO DE PATOLOGIA CLINICA Y BANCO DE SANGRE Servicio de Hematologa MANUAL DE TECNICAS Y PROCEDIMIENTOS ANALITICOS TEST CODIGO MUESTRA : : : ANTICUERPOS

ANTIPLAQUETARIOS 202.20.035 SUERO

MATERIALES : - Bao Mara - Tubos de Vidrio 12 x 75 - Gradillas - Micro pipeta de 200 uL y de 100 uL - Cloruro de Calcio 0,025 M - Calculadora cientfica - Cronmetro PROCEDIMIENTO : 1: Separar el suero del paciente y llevarlo a congelacin hasta el momento de realizar el anlisis. Junto con la muestra del paciente, se deben seleccionar un pool de sueros normales los que tambin sern guardados en las mismas condiciones que la(s) muestra(s) problema 2: El da del procedimiento analtico obtener una muestra de plasma rico en plaquetas y una muestra de plasma pobre en plaquetas, identificndolas en forma correspondiente Plasma rico en Plaquetas (PRP) : Plasma pobre en Plaquetas(PPP) : 3: Colocar a Bao Mara (37 grados C ) el Cloruro de Calcio

4: Colocar en una gradilla una cantidad de tubos equivalente al total de muestras del pool de controles normales, as como las muestras problema 5: Adicionar a cada tubo 100 uL de PRP ( tubos PRP)

5: Colocar en otra gradilla (gradilla B) una cantidad de tubos equivalente al total de muestras del pool de controles normales (mnimo 05, recomendable 8 a 10, ideal 20), as como las muestras problema 6: Adicionar a cada tubo 100 uL de PPP ( tubos PPP)

7: Adicionar a cada tubo que contiene PRP ,100 uL de cada suero control o problema

8: Incubar cada uno de estos tubos por 10 minutos a 37C. ( Ver nota 01) . Seguidamente coger 100 uL de cada uno de estos tubos y adicionarlo a cada tubo que contiene PPP ( tubos PPP), seguidamente llevar estos tubos a Bao Maria ( 37 C) cronometrando 30 segundos, luego adicionar 200 uL de Cloruro de Calcio, esperar 45 segundos para comenzar a detectar visualmente la formacin de cogulo. Registrar el tiempo requerido para la formacin del coagulo, en forma correspondiente para cada tubo problema y control. 9: Clculos: Se determina el rango de normalidad a partir de los resultados del pool de controles. Considerando Rango Normal a la media +/- 2 desviaciones Standard. Si el resultado del problema esta por debajo de el rango normal, se considera positivo

Nota 01: Para mantener una secuencia ordenada del procesamiento de todos los tubos, es necesario esperar un tiempo fijo( mnimo de 5 minutos) entre el inicio del procedimiento de cada tubo, descrito en el paso 7