REVISIONES EN NEUROCIENCIA. EDITOR: J.V.

SÁNCHEZ-ANDRES

La matriz extracelular del sistema nervioso central:

los proteoglicanos del tipo condroitinsulfato y la reparación neural
D. Crespo-Santiago

THE EXTRACELLULAR MATRIX OF THE CENTRAL NERVOUS SYSTEM:

CHONDROITIN SULPHATE TYPE PROTEOGLYCANS AND NEURAL REPAIR
Summary. Aim. In this paper we present a review of the main features of the extracellular matrix (ECM) of the central
nervous system (CNS). Development. Proteoglycans (PG) are glycoproteins, a very common type of protein in the ECM.
Among the PG, the most abundant type is the hyalectan or lectican family. The PG is formed by two main components; a
protein and a sugar chain, which that is termed glycosaminoglycan (GAG). These GAGs are polymers of two simple sugars.
The hyalectan family has GAGs of the Chondroitin sulphate type (CS), and for this reason they are termed PG-CS. PG-CS are
linked to the hyaluronic acid (HA) and other molecules of the ECM in order to form a three-dimensional network. This
network has several important roles in the maintenance of the homeostasis of the CNS. Conclusions. Several hypotheses have
been proposed to elucidate the failure of the CNS regeneration after an injury or in several pathologies. It has been suggested
that PG-CS, which expression is up-regulated after CNS injury, may play some role in this process of inhibition of the CNS
regeneration. Furthermore, we present an approach to the therapeutic potential of the CNS regeneration after the inactivation
of the PG-CS up-regulation. [REV NEUROL 2004; 38: 843-51]
Key words. Central nervous system. Chondroitin sulphate. Chondroitinase. Extracellular matrix. Proteoglycans. Regeneration.

INTRODUCCIÓN tipo peptídico. El nombre de proteína eje se debe al hecho de

La neurociencia no sólo presta atención a las características fisi-
coquímicas y las funciones de los elementos formes del sistema
nervioso (SN) –neuronas, células gliales y vasos sanguíneos–,
sino que actualmente adquiere una gran importancia el análisis
de la matriz extracelular (MEC). La MEC se ha considerado
casi inexistente, hasta hace poco tiempo, en el sistema nervioso
central (SNC) y poco abundante en el periférico (SNP). Por su
ubicación, la MEC se relaciona directamente con los elementos
formes del SN y establece con ellos interacciones específicas;
además, sirve de vehículo a numerosas moléculas que difunden
por sus intersticios. La MEC está formada por diferentes tipos
de moléculas, de entre las cuales destaca la presencia de los pro-
teoglicanos (PG). Los PG son macromoléculas de elevado peso
molecular, muy abundantes en determinados tejidos esqueletó-
genos de nuestro organismo, fundamentalmente el cartílago de
tipo hialino; por ello, su presencia en el SNC se consideró, en
un principio, como algo extraño y difícil de explicar [1,2].
Los PG del SNC forman un grupo heterogéneo de glicopro-
teínas. Las glicoproteínas están formadas por dos componentes
básicos: la fracción proteica y los azúcares (hidratos de carbo-
no). La fracción proteica de los PG, la llamada proteína eje, está
formada para la sucesión de aminoácidos unidos por enlaces de
Recibido: 17.10.03. Aceptado tras revisión externa sin modificaciones: 07.04.04.
Departamento de Anatomía y Biología Celular. Facultad de Medicina. Uni-
versidad de Cantabria. Santander, Cantabria, España.
Correspondencia: Dr. Dámaso Crespo. Departamento de Anatomía y Bio-
logía Celular. Facultad de Medicina. Universidad de Cantabria. E-39011
Santander. Fax: +34 942 201 903. E-mail: crespod@unican.es
Agradecimientos. Al Prof. JW Fawcett, por el apoyo recibido durante la
estancia del autor en el Brain Repair Centre (BRC) de la Universidad de
Cambridge. A los Drs. K Rodhes y R Asher, por las enseñanzas recibidas.
Los gráficos los realizó Israel García-Collantes.
La estancia del autor en el BRC fue subvencionada con la ayuda PR2002-
0392 del MEC.
 2004, REVISTA DE NEUROLOGÍA
que sobre ella se anclan lateralmente las cadenas de azúcares.
Las cadenas de hidratos de carbono están formadas por la suce-
sión repetida de unidades básicas de disacáridos. Cada uno de
estos disacáridos (dímeros) está formado por la unión de dos
azúcares simples diferentes (heterodímeros). Estos heterodíme-
ros polimerizan, se unen por medio de enlaces glucosídicos
(unión covalente) y forman largas cadenas en algunos casos de
hasta dos centenares de dímeros. Estas cadenas de hidratos de
carbono forman los denominados glucosaminoglicanos (GAG).
Dadas, por una parte, la variabilidad en la longitud y tipos de
aminoácidos de la proteína eje, y, por otra, el número, caracte-
rísticas y longitud de las cadenas de GAG que se unen a ella,
entenderemos la variabilidad de PG que se pueden encontrar en
el organismo, aunque en cada tejido unos PG son más caracte-
rísticos que otros. En el caso del SN la mayoría de los PG con-
tienen cadenas de GAG de los tipos condroitinsulfato (CS) y/o
heparansulfato (HS).
De acuerdo con las características estructurales comentadas
en el apartado anterior, y con origen, modo de relacionarse con
las células del SN y sus interacciones con otras moléculas de la
MEC, los PG se han agrupado en cuatro familias. Los hialecta-
nos o lecticanos son moléculas que no anclan su proteína eje en
las membranas de las células del SN y, por lo tanto, una vez sin-
tetizados, se liberan a la MEC. Los glipicanos poseen una prote-
ína eje que se une, por un extremo, a la superficie celular por
medio de un anclaje tipo glicosilfosfatidilinositol (GPI), y, por el
otro, se proyecta al interior de la matriz. Los sindecanos forman
parte integral de la membrana celular por poseer su proteína eje
una porción que la atraviesa (dominio transmembrana), la cual,
por una parte, se internaliza en el citoplasma celular (dominio
citoplasmático) y, por la otra, se extienden en la MEC y forman
un dominio extracelular (ectodominio), por medio del cual esta-
blece relaciones con los elementos del espacio extracelular.
Finalmente, un grupo miscelánea formado por aquellos PG que
por sus peculiares características no pueden incluirse en ninguna
de las tres familias de PG anteriormente mencionadas [3].

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D. CRESPO-SANTIAGO

LOS HIALECTANOS: UN MODELO

DE PROTEOGLICANOS EN EL SNC
Dado que los hialectanos o lecticanos cons-
tituyen el grupo de PG más abundante en la
MEC del SNC, y probablemente el tipo más
estudiado y del que tenemos un mayor nú-
mero de datos, los utilizaremos como mode-
lo para poder explicar las características
generales de los PG. Este grupo comprende
aquellos PG que se caracterizan por ser gli-
coproteínas secretadas, es decir, aparecen
libres en la MEC, y es aquí donde se rela-
cionan con otras moléculas. Entre las molé-
culas matriciales con las cuales establecen
relaciones destaca el ácido hialurónico (AH);
de ahí el nombre de hialectanos.

La proteína eje
Las proteínas eje de los hialectanos (lectica-
nos) son largas cadenas de aminoácidos que Figura 1. Representación esquemática de los hialectanos (lecticanos). Los hialectanos se carac-
contienen lugares específicos para las in- terizan por ser glicoproteínas secretadas a la matriz extracelular (MEC) del sistema nervioso.
serciones laterales de los GAG (Fig. 1). La Estas glicoproteínas poseen azúcares del tipo glucosaminoglicano (GAG). Las cadenas de GAG
de los hialectanos son moléculas de condroitinsulfato (CS). El extremo carboxilo de la proteína
unión a la proteína eje se efectúa en el ami- se une a otras moléculas de la MEC (tenascinas, etc.), mientras que el extremo amino se relacio-
noácido serina, aunque no todas las serinas na con el ácido hialurónico (AH). Modificado de [3].
se relacionan con GAG [4]. Parece que, ade-
más de la presencia de este aminoácido, se necesita una confor- La porción central de la proteína posee una estructura muy line-
mación espacial específica de la proteína eje. La síntesis de pro- al sin plegamientos y generalmente es la de mayor longitud y
teínas para la exportación celular, como es el caso de los hialec- número de aminoácidos. Esta porción es el lugar de anclaje de
tanos, tiene lugar en los ribosomas del retículo endoplásmico los GAG y varía según el tipo de hialectano. Por su parte, la por-
rugoso y consiste en la unión de aminoácidos para formar cade- ción carboxiloterminal incluye repeticiones de aminoácidos se-
nas de menor (péptidos) o mayor longitud (proteínas). La unión mejantes al factor de crecimiento epidérmico (EGF) [6].
de los aminoácidos se efectúa por medio de un enlace de tipo En lo referente al genoma para la síntesis de las proteínas
‘peptídico’. Esta unión se forma cuando dos aminoácidos se eje de los hialectanos, se ha observado [7-9] que proceden de un
unen por medio del acoplamiento de sus extremos carboxilo gen ancestro común que ha podido ensamblarse, en otros genes,
(COOH) y amino (NH2). De esta forma, en cualquier cadena de por duplicación, a lo largo de la evolución. Esta apreciación se
aminoácidos siempre habrá dos extremos, uno que contiene un basa en la alta conservación de los límites entre intrones y exo-
aminoácido con el grupo amino libre (región aminoterminal) y nes en el ADN que la codifica [7]. El corte alternativo (splicing)
otro que contiene el grupo carboxilo libre (región carboxiloter- de los transcritos primarios (primera transcripción) del ADN
minal). La proteína eje, a medida que se sintetiza en los riboso- para la formación del ARNm añade una gran diversidad estruc-
mas unidos a las cisternas del retículo endoplásmico rugoso, se tural a estas proteínas y, en consecuencia, a los PG. Esto ha he-
internaliza en la luz de dichas cisternas. De allí se transfiere a cho que diferentes variedades (isoformas) de hialectanos se iden-
los complejos de Golgi por medio de las denominadas vesículas tifiquen para cada uno de sus subgrupos [8,9].
de transición. Es en los dictiosomas del Golgi donde la proteína
eje sufrirá transformaciones específicas, al unirse a ella las Las cadenas de glucosaminoglicanos
cadenas de azúcares que forman los GAG [5]. Las propiedades de los PG no se deben, exclusivamente, a las
En la proteína eje, y basados en su topografía, podemos con- anteriormente comentadas características de la proteína eje que lo
siderar tres segmentos fundamentales, que van ha poseer carac- forma, sino que también confiere a los PG sus peculiaridades
terísticas funcionales bien definidas: la porción central y los ex- morfofuncionales la presencia de las cadenas laterales de GAG.
tremos amino y carboxilo [6]. En aquellos PG que se secretan a En términos generales, podemos decir que los GAG están forma-
la MEC, como sucede en el caso de los hialectanos, las uniones dos por polímeros de hasta dos centenares de unidades de repeti-
de los mismos con otras moléculas de la MEC (tenascinas, AH, ción de disacáridos (heterodímeros). Estos polímeros se anclan a
etc.) tienen lugar en los extremos amino o carboxilo y, de esta la proteína central sobre el aminoácido serina por medio de un
manera, forman grandes estructuras de agregados tridimensiona- azúcar de unión típico (azúcar de anclaje), que está formada por
les. Si por el contrario, dicho PG no se libera a la MEC y perma- un tetrasacárido que contiene xilosa-galactosa-galactosa-ácido
nece unido a la membrana de la célula que lo sintetizó (neurona glucurónico [3,10]. La xilosa se une a la serina de la proteína eje y
o célula glial, según el tipo de PG), este anclaje en la membrana el ácido glucurónico se une al heterodímero específico del GAG.
se efectuará por el extremo carboxilo, y queda la porción amino Los GAG se han agrupado en diferentes familias según el
para relacionarse con las moléculas de la MEC. En los hialecta- disacárido que se repita (Fig. 2). Así, tenemos los grupos CS,
nos la región aminoterminal presenta una conformación espacial dermatansulfato (DS), HS y queratansulfato (QS). El CS, un
muy plegada (globular), de tipo inmunoglobulina, y se continúa disacárido de ácido glucurónico y galactosamina. El DS es áci-
con una sucesión de aminoácidos repetidos para la unión al AH. do idurónico unido a galactosamina. Por contener ambos GAG

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Figura 2. En este esquema se pueden apreciar los diferentes tipos de
azúcares simples que se asocian para formar los diversos tipos de cade-
nas de glucosaminoglicanos (GAG). Observemos que el ácido hialurónico
(AH) y el condroitinsulfato (CS) sólo se diferencian en un azúcar, lo cual
tiene importancia a la hora de efectuar tratamientos que impliquen la
rotura de dichas moléculas. Modificado de [3].
un azúcar común (galactosamina) se suelen agrupar en una mis-
ma familia, la CS-DS. El grupo HS-heparina es un grupo seme-
jante al CS-DS que contiene dos tipos de GAG. El HS lo for-
man un dímero de ácido glucurónico y glucosamina, mientras
que el dímero de la heparina es ácido idurónico y glucosamina.
Por último, el QS es un dímero de galactosa y glucosamina [3,
10]. Un tipo especial de GAG es el AH que posee un dímero
formado por glucosamina unida al ácido glucurónico. El AH
presenta ciertas particularidades, entre las que destacan el he-
cho de que sus azúcares no se sulfatan, no poseer proteína eje,
por lo cual no forma PG, y, finalmente, servir de lugar de ancla-
je a las proteínas eje de los PG (hialectanos) para formar gran-
des estructuras tridimensionales en la matriz [1,3,10].
Además del disacárido típico de cada GAG, éstos poseen una
segunda característica fundamental: la presencia de grupos sulfa-
to (SO3–) unidos a diversos niveles de su estructura de cada azúcar
simple. La familia CS-DS posee dos grupos SO3– en la galactosa-
mina y uno en el ácido glucurónico o el idurónico. El HS posee
tres SO3– en la glucosamina y uno en el ácido glucurónico o el
idurónico y el QS posee un SO3– en cada monosacárido (galatosa-
mina o glucosamina). La presencia de estos grupos sulfato, deter-
mina que los GAG, en particular, y los PG, en general, sean molé-
culas fuertemente polianiónicas, lo cual determina que tengan
gran apetencia por unirse a moléculas policatiónicas. Estas inter-
acciones químicas van a desempeñar un papel muy importante a
la hora de formar grandes agregados polimoleculares en la MEC.
A las proteínas eje, además de las largas cadenas de GAG,
se les pueden unir un segundo grupo de cadenas ramificadas de
hidratos de carbono formados por un reducido número de azú-
cares (oligosacáridos). Estos oligosacáridos, según el modo de
anclaje en la proteína eje, se llaman oligosacáridos unidos en
‘O’ o ‘N’ (O-unidos y N-unidos) a proteínas. Se denominan N-
unidos si el azúcar se une al átomo de nitrógeno del aminoácido
asparagina, mientras que son tipo O si el azúcar se ancla en el
átomo de oxígeno del aminoácido serina o treonina. Los hialec-
tanos poseen pocos oligosacáridos N-unidos, pero contienen un
gran número de oligosacáridos O-unidos. Los oligosacáridos de
los hialectanos contienen ácido siálico [11] que les proporciona
características funcionales muy importantes en el contexto de la
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PROTEOGLICANOS
MEC. Estas cadenas de oligosacáridos desempeñan un papel
importante en el mantenimiento de la estructura general de estas
moléculas. Se ha sugerido que la presencia de estos azúcares
cortos y ramificados es fundamental para conferir a la proteína
eje una estructura lo suficientemente rígida y elongada que per-
mita la unión de las cadenas laterales GAG a la misma [10,11].
Tipos de hialectanos
Entre los hialectanos, según sus características conformacionales,
encontramos los siguientes tipos [3]: el versicano, el agrecano, el
neurocano y el brevicano. Como hemos comentado anteriormen-
te, los hialectanos son moléculas secretadas, es decir que, una vez
sintetizadas por la maquinaria de síntesis proteica celular, se libe-
ran por exocitosis a la MEC. Una excepción a esta regla es el lla-
mado brevicano unido a GPI. Este particular hialectano se carac-
teriza por poseer una proteína eje que por su porción carboxilo-
terminal se ancla, al igual que el grupo de los glipicanos, en la
membrana celular por medio de su unión a una molécula de GPI
[7]. Seguidamente pasaremos a analizar las características funda-
mentales de los diversos tipos de hialectanos.
El versicano es muy abundante en la sustancia blanca del
SNC y dicha expresión se relaciona íntimamente con el proceso
de mielinización, ya que se sintetiza por los oligodendrocitos
[12]. Se identificó, en un principio, en el SNC adulto como un
tipo de proteína glial de unión al AH [13], y, posteriormente, se
comprobó que esta proteína se correspondía con la porción ami-
noterminal del versicano [14]. En los mamíferos, la porción cen-
tral de la proteína eje del versicano se codifica en dos exones dife-
rentes denominados GAG-α y β, que poseen la información de las
cadenas de aminoácidos para la unión, de 5-8 y entre 11 y 15 ca-
denas de GAG, respectivamente. El corte alternativo del trans-
crito primario puede originar diferentes variedades de ARNm
para la síntesis de la porción central de la proteína eje del versi-
cano. El versicano V0, la isoforma más larga, contiene ambos
lugares codificados (α y β). En las isoformas cortas (V1 y V2),
V1 sólo poseen el dominio β y V2 sólo el α [15]. La cuarta va-
riedad, V3, es la de menor longitud de las cuatro isoformas y
sólo posee las porciones globulares terminales NH2 y COOH,
por lo cual, al no poseer la región central (α y β), no puede unir
GAG y, por lo tanto, no se considera un PG [16]. Se cree que
este procesamiento de las diversas isoformas del versicano se
produce en el espacio extracelular y se ha sugerido la participa-
ción, en este proceso, de una o varias metaloproteínas que serí-
an las responsables del corte selectivo de la proteína eje para la
formación de las diversas variedades de versicano [17].
En el caso del agrecano y el brevicano –sintetizados por los
astrocitos–, los dominios de los exones centrales que codifican la
fracción proteica donde se unen los GAG, parecen no afectarse
por este tipo de corte alternativo del transcrito primario que se
origina para formar el ARNm. No obstante, la existencia de varia-
ciones en el corte del transcrito primario parece ser específico
para cada especie animal. En este sentido, el exón que codifica el
primer dominio tipo-EGF del agrecano se ha localizado solamen-
te en el genoma humano [18,19]. En el caso de brevicano, una
diferencia muy interesante entre las diversas variantes de corte
para la formación de la proteína eje se ha observado en la región
COOH-terminal de los dos tipos posibles de proteínas eje de este
hialectano. Así, por la finalización alternativa de la transcripción,
la configuración globular del extremo COOH-terminal puede re-
emplazarse por un corto péptido que lleva el anclaje-GPI (brevi-
naco-GPI) para unirlo a la membrana celular [20,21]. La estruc-
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D. CRESPO-SANTIAGO
tura de esta isoforma de brevicano unido a la membrana contras-
ta, como hemos visto, con las proteínas eje de otros miembros de
la familia de los hialectanos que no la poseen y, por lo tanto, no se
anclan en las membranas celulares y se liberan a la MEC.
El neurocano es un PG sintetizado fundamentalmente por los
astrocitos. Su proteína eje la forman 1.257 aminoácidos y tiene un
peso molecular de 136 kDa; en común con los otros miembros de
la familia de los hialectanos, tiene una estructura con multidomi-
nios [22]. La región aminoterminal, de morfología globular, está
formada, fundamentalmente, por dos dominios para unirse al AH
[23]. La porción central, no globular, de la molécula de neurocano
es muy diferente cuando se la compara con los otros hialectanos,
ya que posee una estructura tipo mucina [24]. El análisis de la
secuencia de aminoácidos en ratas ha revelado la presencia de sie-
te potenciales lugares de unión de otras tantas cadenas de CS.
Estos lugares son aquellos en los cuales encontramos los pares de
aminoácidos serina-glicina, precedida la serina de un aminoácido
de tipo ácido [25,26]. Sin embargo, el análisis del neurocano ais-
lado del cerebro de rata ha mostrado que la molécula intacta sólo
posee tres cadenas de CS ancladas a la proteína eje, lo cual con-
trasta con los mencionados siete posibles lugares de anclaje [27].
La región COOH-terminal esta compuesta de tres tipos de subuni-
dades estructurales con dos dominios tipo-EGF, seguidos de un
dominio lectina del tipo-C y en la región más próxima al COOH-
terminal hay una secuencia del tipo de la proteína reguladora del
complemento. El neurocano, además de unirse al AH, puede esta-
blecer relaciones con diferentes tipos de moléculas en la MEC
(L1, N-CAM, TAG-1/axonina y las tenascinas R y C) [22].
El procesamiento, posterior a su síntesis, de la cadena intacta
[27] de la proteína eje del neurocano da lugar a la posibilidad de
encontrar diferentes fragmentos en la MEC del SNC. Las formas
en las que podemos encontrar el neurocano en el SNC son básica-
mente las siguientes: una gran molécula que representa la proteí-
na eje intacta, un fragmento que contiene la región COOH-termi-
nal (neurocano-C), y otro la NH2-terminal (neurocano-N) [27].
Estas dos últimas isoformas se originan en el mismo proceso de
corte proteolítico de la proteína eje del neurocano intacto entre
los aminoácidos 638-639 [28]. El fragmento que contiene el gru-
po aminoterminal tiene un peso molecular de 130 kDa y puede
sufrir un nuevo procesamiento y originar una tercera molécula de
neurocano de bajo peso molecular (90 kDa) [29]. Se ha sugerido
que estos procesos de corte de la proteína eje tienen lugar en el
interior del astrocito [30]. La síntesis y procesamiento del neuro-
cano en sus diferentes formas se regula a lo largo del desarrollo.
Se ha visto que en la rata, las cantidades relativas de las formas
intactas y procesadas de neurocano cambian de forma considera-
ble a lo largo del desarrollo posnatal [31]. Así, en el nacimiento la
proteína eje de forma intacta es la que predomina. Sin embargo,
durante el desarrollo subsiguiente se incrementa la presencia de
las formas procesadas. Al final del desarrollo posnatal casi todo el
neurocano presente en el SNC se encuentra en alguna de las for-
mas procesadas [29]. En la actualidad se sabe que estos fragmen-
tos son el resultado del procesamiento proteolítico de la molécula
intacta y no de su corte alternativo, por el hecho de que el análi-
sis, por medio de la técnica de Northern blot, del ARNm de cere-
bros de ratas de cuatro días de vida posnatal y adultas ha mostra-
do que contienen, respectiva y principalmente, la proteína intacta
y las fracciones más pequeñas resultantes del procesamiento [31].
Los conocimientos expuestos hasta este punto sobre el proce-
samiento de estas moléculas se basan en investigaciones realiza-
das fundamentalmente in vitro. También se ha observado la exis-
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tencia de un procesamiento proteolítico de los hialectanos in vivo.
Este procesamiento, al igual que lo comentado in vitro, sugiere la
presencia de puntos de corte específicos para cada hialectano. Así,
para el agrecano y el brevicano los lugares de corte se han locali-
zado en los dominios de unión de los GAG [32]. Para ambos hia-
lectanos existe una secuencia común de aminoácidos [E(G/S)E >
(A/S)RG], en las cadenas que forman esta región de la proteína
eje y se ha sugerido que este es el lugar común de corte de ambas
proteínas [32]. Basados en esta similitud con respecto al punto de
corte, se ha propuesto la existencia de una posible enzima común
y específica (agrecanasa) para efectuar dicho corte [33].
LOS GLIPICANOS Y SINDECANOS
(EL GAG HEPARANSULFATO)
Los glipicanos, junto con los sindecanos, forman una de las dos
grandes familias de PG, en los cuales el GAG que se une a la pro-
teína eje es el HS. Los glipicanos se unen a la membrana celular
por medio de un anclaje GPI [34,35]. En mamíferos se han aisla-
do seis tipos diferentes de glipicanos, que se han numerado del 1
al 6 (p. ej., gliplicano 4). Las proteínas eje de los glipicanos, como
en los hialectanos, poseen tres zonas o dominios fundamentales,
pero al ser proteínas que permanecen ancladas en la superficie ce-
lular, presentan características específicas. Se sintetizan con una
secuencia secretora señal en el terminal NH2 y una porción hidro-
fóbica en la región COOH-terminal. La región aminoterminal se
proyecta hacia el espacio extracelular, y la porción carboxiloter-
minal se sustituye, al finalizar la síntesis de la proteína, por un
anclaje GPI para mantenerla unida a la membrana celular. La pro-
teína eje de los glipicanos posee un elevado número de aminoáci-
dos cisteína [34]. Estos aminoácidos forman puentes disulfuro en-
tre cisteínas consecutivas, lo cual determina que las proteínas eje
de los glipicanos posean una estructura muy plegada y compacta.
Los lugares de unión de las cadenas de HS están próximos a la
región COOH-terminal, es decir, cerca de la membrana celular.
Los sindecanos se caracterizan por poseer proteínas eje que
tienen dominios transmembrana formados por 34 aminoácidos y
que los GAG que se unen a ella son del tipo HS. En lo que se
refiere a tu topología, la proteína eje posee tres dominios: el
mencionado dominio transmembrana y los relacionados domi-
nios extracitoplasmáticos (ectodominio) e intracitoplasmáticos
[36]. En los dominios extracitoplasmáticos se anclan las cadenas
de HS [3,36,37]. Existe una gran variabilidad entre los ectodo-
minios de los diferentes tipos de sindecanos. Las proteínas eje de
los sindecanos son más cortas, en lo referente al número de ami-
noácidos que las componen, que las de los glipicanos. No obs-
tante, al ser pobres en cisteínas no forman puentes disulfuro y,
por lo tanto, se pueden extender a mayores distancias desde la
superficie celular que en el caso de los glipicanos. Los ectodomi-
nios de los glipicanos pueden aparecer, en algunas ocasiones, li-
bres en la MEC y se ha sugerido que la liberación de estas por-
ciones, por el corte proteolítico, pudiera desempeñar un papel
importante en la función de estos PG [36-38]. Los dominios
transmembrana de las proteínas eje poseen una gran semejanza
en los tipos de aminoácidos que los forman. Una característica
notable de las proteínas eje de los sindecanos es la presencia de
un corto dominio intracitoplasmático. Los primeros 10 aminoá-
cidos forman una secuencia que es constante para todos los tipos
de sindecanos, que se denomina C1 [39]. Este segmento se con-
tinúa con una región variable (V) para cada tipo de sindecano.
Por último, hay una secuencia final de cuatro aminoácidos (te-
REV NEUROL 2004; 38 (9): 843-851

trapéptido, EFYA) común para todos los sindecanos, que acaba
en el grupo carboxiloterminal [38-40]. Este dominio citoplasmá-
tico es el lugar de unión de diversas moléculas del citosol.
GRUPO MISCELÁNEA
Además de los mencionados hialectanos, glipicanos y sindeca-
nos, hay un grupo de PG que son de difícil integración en una
familia común debido a la gran variabilidad estructural que pre-
sentan, razón por la cual se incluyen en un cuarto grupo, misce-
lánea [3]. Esta variabilidad se basa en el hecho de que pueden
tener proteínas eje con unas características muy particulares; en
ocasiones permiten y en otras no la unión de GAG, pueden ser
de variados tipos, y permanecer unidas a la membrana celular o
liberarse al espacio extracelular [41].
Un PG de este grupo es el receptor proteína-tirosina fosfatasa,
RPTPβ (también llamado RPTPζ) [42,43]. De la transcripción
alternativa de los exones que codifican dicha proteína se pueden
obtener tres isoformas diferentes de RPTPβ [42]. Dos de estas
proteínas se comportan como ejes para el anclaje de cadenas de
CS, mientras la tercera carece de lugares de unión para los GAG
y, por esta razón, no es un PG. La molécula de mayor longitud de
RPTPβ es una proteína de membrana de la que su porción extra-
celular presenta semejanza con la anhidrasa carbónica y es en la
proximidad de esta región donde se localizan los anclajes para las
cadenas de GAG. Este dominio extracelular se continúa con el
dominio transmembrana, el cual se internaliza en el citoplasma
celular y forma dos secuencias de tirosina fosfatasa [42,43]. Una
segunda isoforma, más corta, de RPTPβ –le faltan 860 aminoáci-
dos de la porción extracelular con inclusión de los lugares para la
unión de GAG– se ancla en la membrana celular por medio de un
dominio transmembrana. El hecho de que no posea lugares para
la unión de CS hace que no pueda considerarse un PG [44].
La tercera variante de RPTPβ, llamada fosfacano, contiene
casi toda la secuencia de aminoácidos del dominio extracelular,
con inclusión de los lugares de unión para los GAG. A diferencia
de la forma larga, al fosfacano le falta la secuencia de aminoáci-
dos, que se correspondería con aquella que se continúa con el do-
minio transmembrana [41]. En consecuencia, el fosfacano, al no
poseer un dominio transmembrana, se secreta al espacio extrace-
lular. En el fosfacano, atendiendo a las características de los GAG
que se le unen, se pueden distinguir dos variedades. Una lleva ex-
clusivamente cadenas laterales de CS y la otra puede llevar cade-
nas de CS y QS; por esta razón, a esta última variedad también se
la denomina fosfacano QS [41]. También se le pueden unir algu-
nos oligosacáridos del tipo Lewis-X [45,46]. Recientemente, se
ha identificado una nueva proteína procedente del procesamiento
del RPTPβ que se denomina isoforma corta del fosfacano (PSI) y
se corresponde con la porción aminoterminal que contiene la
anhidrasa carbónica [47]. El fosfacano ha adquirido gran relevan-
cia al observarse que es una proteína muy característica del siste-
ma magnocelular neurosecretor del hipotálamo y que desempeña
un importante papel al permitir los cambios morfofuncionales que
acontecen en este sistema que se encarga de la síntesis, transporte
y liberación de las neurohormonas oxitocina y vasopresina [48].
El neuroglicano-2 (NG2), hasta el momento, es un único PG
con un dominio transmembrana que se ha identificado en la
superficie de los precursores de oligodendrocitos (CPO) durante
el desarrollo cerebral [49]. La proteína eje del NG2 está com-
puesta por una larga porción extracelular a la cual se unen tres
cadenas de CS. Este dominio extracelular se continúa con el do-
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PROTEOGLICANOS
minio transmembrana, el cual finalmente se internaliza en el cito-
plasma para formar un corto dominio citoplasmático [49,50].
Además de esta forma transmembrana, el NG2, por la pérdida del
dominio transmembrana, puede encontrarse de forma secretada
en la MEC. El reciente descubrimiento de la expresión de este PG
en determinadas leucemias ha hecho que su detección se emplee
como un criterio de análisis de la evolución de las mismas [51].
Algunas isoformas de la proteína precursora de amiloide (APP)
y su variante, la APLP2, cuya disfunción se relaciona con las le-
siones neuropatológicas extracelulares (placas seniles) observa-
das en la enfermedad de Alzheimer, se ha observado que pueden
llevar alguna cadena de CS asociada. En este caso, estas isofor-
mas de la APP se comportarían como la proteína eje de un PG
[52]. Sin embargo, en la actualidad poseemos poca información
sobre las modificaciones que operan en esta glicosilación y sus
posibles funciones, aunque se han sugerido acciones modulado-
ras en la adhesión celular y el crecimiento de las neuritas [53].
Las isoformas de estas proteínas que llevan CS se expresan en las
células gliales del SNC [54], lo que desde este punto de vista pa-
rece indicar un cierto origen glial de esta patología.
FUNCIONES DE LOS PG QUE CONTIENEN
CADENAS DE GAG DEL TIPO CS
La función fundamental de los PG-CS parece centrarse en los
procesos iniciales de formación del SNC, con inclusión de la mi-
gración celular a los lugares apropiados para su posterior desa-
rrollo morfofuncional, la formación de conexiones específicas y
su mantenimiento, además de actuar en el trofismo inicial de las
neuronas generadas y el establecimiento de relaciones con pobla-
ciones semejantes para la formación de determinadas zonas o
centros nerviosos [1,4,55]. En el período embrionario, momento
crítico en la formación de las conexiones de las vías nerviosas, la
expresión de los PG que contienen cadenas de GAG del tipo CS
(PG-CS) se ha visto que coincide, en el tiempo, con aquellas áre-
as neurales en las que se pierde la capacidad de regeneración de
las vías nerviosas. Esta correlación entre la expresión de este tipo
de PG y la pérdida de capacidad regenerativa indujo a proponer
que dicha expresión ejercía un papel protector en el manteni-
miento y consolidación de las conexiones neurales ya estableci-
das [55]. Algunas de las regiones del SNC en las que se ha obser-
vado esta estrecha relación son: el esclerótomo [56], la zona de
entrada a la médula espinal de las raíces dorsales [57], y la región
medial del tecto óptico [58]. En la vía óptica, donde la precisa
disposición topográfica de los axones de las células ganglionares
de la retina que forman el nervio óptico es fundamental para la
correcta proyección a los centros corticales, se ha observado que
los PG-CS desempeñan un papel fundamental en el estableci-
miento y mantenimiento de dicha topografía. Esta función se ha
confirmado por el tratamiento de la retina in vitro con condroiti-
nasa (C-ABC). Esta enzima corta las uniones covalentes de los
GAG y el AH y libera agregados de GAG; por lo tanto, altera las
características funcionales de los PG-CS. La adición de dicha
enzima al medio de cultivo produjo, en comparación con el gru-
po control, la alteración del patrón normal de los axones con un
crecimiento desorganizado de la vía visual [59].
Si, como hemos visto, los PG-CS desempeñan un papel im-
portante durante el desarrollo, adquiere una cierta importancia
analizar sus funciones en el adulto y tras las alteraciones del
SNC. En este último caso, las lesiones del SNC conducen a im-
portantes respuestas de diversos tipos de células –entre otras,
847
D. CRESPO-SANTIAGO
neuronas, astrocitos, oligodendrocitos, células precursoras de
oligodendrocitos, y microglia–. Tras las lesiones, estas células
pueden sufrir determinados tipos de reacciones, entre las que se
encuentra la activación funcional en respuesta a la lesión. Estas
reacciones frente a las alteraciones inducidas incluyen, entre
otras, un incremento en la síntesis de algunos de los componen-
tes de la MEC, entre los que se encuentran los hialectanos [59].
Así, la expresión de PG-CS se ha visto que se incrementa en el
SNC tras la lesión de la raíz dorsal medular, la sección del fór-
nix, lesiones del estriado, y la sección selectiva del córtex o tras
el aplastamiento medular [59-62]. Un PG-CS asociado a la mem-
brana, denominado proteoglicano de lesión de la membrana
(PLM) se expresa por los astrocitos reactivos tras la lesión neu-
rotóxica del hipocampo. Este PLM inhibe el crecimiento de las
neuritas in vitro, una propiedad que depende de las cadenas de
GAG asociadas a su proteína eje [63,64].
En otros experimentos también se ha demostrado la expre-
sión de PG-CS y el fallo en la regeneración axonal. En este sen-
tido, el implante de neuronas de ganglio dorsal en el cuerpo
calloso [65] produjo que las neuronas transplantadas extendieran
sus axones a largas distancias en este tracto de sustancia blanca.
En algunos casos se observó que las neuronas trasplantadas esta-
ban rodeadas por una región donde se había sobreexpresado PG-
CS y este era el punto en el cual el crecimiento de las neuritas se
detenía. Cuando las neuronas se trasplantaron a cierta distancia
de una zona previamente lesionada, de forma experimental, en la
columna dorsal de la médula espinal, se observó que los axones
eran capaces de extender sus neuritas por la sustancia blanca de
la médula espinal; pero dicha progresión se paraba en la región
rica en PG-CS alrededor del sitio de la zona lesionada [66].
En el caso particular del neurocano, un estudio in vitro [67]
mostró su actividad bloqueadora del crecimiento de neuritas. En
esta aproximación experimental se cultivaron neuronas de cere-
belo de ratas de 4 y 5 días de vida posnatal o neuronas de corteza
cerebral de animales recién nacidos. La siembra se realizó en
cubreobjetos, a los cuales se les habían añadido bandas que con-
tenían laminina o neurocano. Las neuritas crecieron siguiendo
los surcos de laminina, pero no entraron en las bandas de neuro-
cano. Se ha sugerido que el neurocano ejerce también esta misma
acción inhibitoria in vivo, que se basa en la desorganización de
las interacciones entre las moléculas de adhesión celular sobre el
cono de crecimiento y el sustrato, ya que el neurocano se une a
L1 y N-CAM, y esta unión implica las cadenas laterales de CS de
los PG [68]. Además de esta acción sobre las CAM, el neurocano
puede también ejercer una acción directa sobre las neuronas. En
este sentido, el crecimiento de las neuritas de células PC12D se
ha visto que se inhibe por sustratos de neurocano [69,70]. Res-
pecto al comportamiento de este PG-CS tras la lesión del SNC,
se ha observado su sobreexpresión en diversos experimentos
[71]. Estos autores hicieron cortes selectivos de cuchilla en el
córtex cerebral y observaron la sobreexpresión del neurocano
entre los días 7-14 tras la lesión. En el cerebro no lesionado los
niveles de neurocano se detectan poco, pero a los siete días pos-
lesión se produce un incremento de dicha expresión [71]. Un
resultado semejante es el obtenido por nosotros tras la lesión del
tracto negroestriado (observación personal). Otro modelo experi-
mental que consiste en la implantación de filtros de nitrocelulosa
en el lugar de lesión [72] ha demostrado, por medio de la técnica
de Western blot, en los extractos preparados de estos filtros tras
los 14 días poslesión, una clara sobrerregulación del neurocano.
Posteriormente, técnicas inmunocitoquímicas y de hibridación in
848
situ han confirmado la sobreexpresión de neurocano por los as-
trocitos que habían colonizado los filtros implantados.
También se ha observado la sobreexpresión de neurocano en
otro modelo experimental que consiste en la denervación del
giro dentado tras la lesión del hipocampo [73]; aquí también se
produce un incremento del neurocano. Un aspecto importante
es el hecho de que la expresión de neurocano tiene un cierto
patrón temporal. Se ha observado que dicha sobreexpresión tie-
ne lugar entre la primera y segunda semana poslesión y pasados
estos tiempos los niveles de neurocano vuelven a ser los mis-
mos que en los casos control. Una serie de factores se han aso-
ciado a esta respuesta de tipo temporal. Así, determinadas cito-
cinas, TGFβ y α, entre otras moléculas, se sobreexpresan tras la
lesión del SNC [74,75]. La infusión de anticuerpos frente a
TGFβ condujo a la atenuación de la respuesta astrocítica y a la
reducción del depósito de diversos componentes de la MEC con
inclusión del neurocano [76]. Al igual que los astrocitos, las
células precursoras de oligodendrocitos también expresan neu-
rocano in vitro [71] y el incrementado número de células que
hay alrededor de la lesión puede también contribuir al aumento
general de la expresión de neurocano. Sin embargo, la expre-
sión de neurocano por estas células no se afecta significativa-
mente por las citocinas, como el TGFβ y α.
LA MATRIZ EXTRACELULAR Y LA REPARACIÓN
NEURAL: APROXIMACIONES TERAPÉUTICAS
Como hemos visto en los apartados anteriores, la MEC del SNC
desempeña un importante papel en el proceso de inhibición de
la actividad regeneradora del SNC. Partiendo de esta premisa,
diferentes grupos de investigación han iniciado aproximaciones
terapéuticas con el objetivo de promover dicha regeneración.
Entre dichas aproximaciones, destacan aquellas dirigidas a:
– Inhibir la reacción local de las células gliales para disminuir
los efectos de la formación de la escara glial reactiva en la
zona la lesión.
– Inhibir la síntesis de los componentes de la MEC, funda-
mentalmente los PG-CS.
– Ejercer un efecto antiagregante sobre los diversos componen-
tes de la MEC, para que no se forme dicha red tridimensional.
Diversos estudios han mostrado que tras la lesión del SNC, indu-
cida por traumatismos o cortes selectivos en la corteza cerebral,
se producía un notable incremento en la síntesis y liberación a la
MEC de PG-CS. Concomitantemente, tras la formación de la
escara glial como consecuencia de la lesión, diversos tipos de
células gliales proliferan (astrocitos, CPO) o migran (microglia)
hacia dicha zona. La mayoría de estas células, como ya hemos
comentado, sintetizan y liberan PG-CS, que se ha observado que
tienen un efecto inhibidor sobre la regeneración axonal. Esta
observación llevó a un grupo de investigadores [77] a efectuar
una nueva aproximación al proceso de regeneración del SNC
tras las lesiones. Este grupo se planteó como hipótesis de trabajo
el hecho de que si tras una lesión se producía un incremento en
la expresión de PG-CS, probablemente, si de alguna manera se
inhibía esta expresión y la consiguiente agregación en la MEC
de estas moléculas, se podría de alguna manera facilitar el creci-
miento de los axones de una vía nerviosa que se hubiera dañado
previamente. Con este objetivo, efectuaron lesiones selectivas de
la vía negroestriada y la infusión de condroitinasa ABC (C-ABC)
en el lugar de lesión. El efecto biológico de la C-ABC es romper
REV NEUROL 2004; 38 (9): 843-851

los enlaces glucosídicos entre los monosacáridos de los GAG del
tipo CS con inclusión del AH, que posee un 50% se similitud
con dichas moléculas (Fig. 1). Así, tras la sección quirúrgica de
esta vía, se procedió a inyectar C-ABC en días sucesivos para, de
esta manera, inhibir la agregación de los PG-CS en la MEC. Los
resultados mostraron que este procedimiento permitía el creci-
miento de los axones seccionados y la reformación, parcial, de la
proyección negroestriatal [77].
En otra aproximación experimental al proceso de regenera-
ción neural [78] se procedió, tras la lesión del mencionado trac-
to a inyectar anticuerpos frente a dos isoformas del factor de
transformación del crecimiento (TGFβ 1 y 2). Tras la lesión, en
este caso, se administró una combinación de anticuerpos frente
a ambos factores durante 10 días consecutivos. El estudio inmu-
nocitoquímico de la zona de lesión mostró que la administra-
ción de estos anticuerpos atenuó la respuesta de los astrocitos,
medida por la expresión de la proteína fibrilar glial ácida
(GFAP) y el NG2, pero no tuvo acción sobre la actividad de la
microglia y los macrófagos. Los autores sugirieron que la admi-
nistración de estos anticuerpos determina una reducción en la
actividad de la escara glial, pero no produce regeneración del
tracto negroestriado [79], como se había observado tras la infu-
sión del enzima condroitinasa.
También se procedió a analizar el papel regenerador de la
inhibición de la agregación de PG-CS en la médula espinal de
los mamíferos adultos [80]. Como ya sabemos, las lesiones a
este nivel pueden conducir a una parálisis permanente. En los
lugares de lesión, al igual que en el cerebro, se desarrolla una
escara glial que contiene moléculas de la MEC con inclusión de
PG-CS. Estas moléculas inhiben el crecimiento de los axones in
vitro y la regeneración de los axones se para en las regiones
ricas en PG-CS in vivo. Con el objetivo de analizar los efectos
funcionales de la degradación de los GAG tipo CS sobre la
regeneración tras la lesión de la médula espinal, se procedió a
inyectar C-ABC en las zonas lesionadas de ratas adultas [81].
Estos autores demostraron que la infusión intratecal de C-ABC
degradaba los PG-CS en el lugar de lesión, y promovía la rege-
neración axonal tanto de las vías ascendentes como descenden-
tes de los tractos espinales. Además de esta regeneración morfo-
lógica, la administración de C-ABC también restauró la activi-
dad posináptica inducida por la activación eléctrica tras la esti-
mulación de las neuronas corticoespinales. También el trata-
miento con C-ABC promovió la recuperación funcional de la
locomoción y el comportamiento propioceptivo en los animales
tratados [80]. Así, se demostró, nuevamente, que los PG-CS son
moléculas inhibidoras in vivo de la regeneración neural, lo que
sugiere, nuevamente, que la manipulación de estas moléculas,
inhibiendo su síntesis o induciendo su degradación, pudiera ser
un tratamiento efectivo en las lesiones medulares humanas [81].
En un paso posterior se estudió el efecto que la degradación
del AH pudiera tener sobre la regeneración del tracto negroes-
triado. Así, se analizó si la degradación del AH por medio de
hialuronidasa podía liberar esta función inhibidora de los PG-
CS de la MEC y, en consecuencia, incrementar la regeneración
de los axones negroestriados previamente seccionados. Las
lesiones se efectuaron en ratas y se procedió a la infusión repe-
tida desde el momento de la lesión por medio de una cánula que
contenía suero salino o salino conteniendo hialuronidasa, una
vez al día durante 10 días poslesión. El día 11 se estudiaron los
cerebros por técnicas inmunocitoquímicas frente a los PG-CS y
se observó que la infusión del enzima ejercía efectos sobre la
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PROTEOGLICANOS
regeneración, ya que disminuía la expresión de los PG-CS en el
área alrededor de la lesión. En el mismo experimento se proce-
dió a analizar la posible regeneración de la vía negroestriada,
para lo cual se efectuó un estudio inmunocitoquímico frente a la
enzima tiroxina hidroxilasa (TH). Los resultados mostraron que
los cerebros inyectados con salino presentaban un ligero recre-
cimiento de los axones lesionados en las áreas en las cuales no
había actividad glial de astrocitos ni expresión de neurocano o
versicano. Sin embargo, los axones no regeneraron alrededor de
la zona de lesión que contenía astrocitos y abundante neurocano
o versicano. El tratamiento con hialuronidasa produjo un signi-
ficativo incremento en el número de axones seccionados, que
crecieron más allá de la lesión. Sin embargo, estos axones no
crecieron en el interior del tejido que estaba entorno a la lesión
y que contiene abundante neurocano y versicano. Estos resulta-
dos muestran que la parcial degradación del AH y la depleción
de los CS unidos a las proteínas eje incrementa el crecimiento
de los axones lesionados, pero no permite la regeneración a lar-
gas distancias en regiones que contienen PG-CS que no se han
eliminado. Los resultados de este estudio muestran que el AH,
los PG-CS y los propios CS contribuyen al fallo de la regenera-
ción espontánea en el SNC lesionado de los mamíferos [82].
En un intento por disminuir los efectos de la escara glial
sobre la regeneración del SNC, se procedió a eliminar la proli-
feración de oligodendrocitos en el sitio de lesión [78]. Para ello,
ratas adultas recibieron una infusión continua de citosina-D-
arabinofuranosida (ara-C) o salino durante 7 días en el lugar de
lesión, tras la sección unilateral del haz medial del cerebro ante-
rior. Además, se utilizaron, para la comparación de resultados,
grupos adicionales de ratas que recibieron infusiones antes de la
lesión y ratas lesionadas que no recibieron dicho tratamiento.
Los animales se estudiaron a 4, 7, 12 y 18 días poslesión. Se
analizó la expresión de la TH y la respuesta de las células glia-
les. La casi completa eliminación de los oligodendrocitos que
producen NG2 se observó tras 7 días de infusión de ara-C. Tam-
bién se apreció la disminución de la microglia reactiva, pero no
se observó ningún efecto en la respuesta de la GFAP de los
astrocitos. El estudio cuantitativo mostró una diferencia signifi-
cativa en el número de axones marcados distalmente a la lesión
en los animales tratados con ara-C, pero estos valores ya no fue-
ron diferentes, respecto a los grupos control, en el día 18 tras la
lesión [78]. Estos resultados sugieren que la eliminación de la
capacidad proliferativa de las CPO desempeña un papel impor-
tante en los procesos de regeneración, pero esta inhibición pro-
liferativa debe mantenerse en el tiempo.
Finalmente, debemos comentar que la MEC está sujeta a un
constante proceso de remodelado, el cual implica la destrucción
de moléculas existentes y la síntesis y liberación de otras nuevas
a la MEC. Se han identificado diversos tipos de enzimas prote-
olíticos sobre las proteínas de la matriz. Las metaloproteinasas
de la matriz forman un grupo de enzimas con una actividad fun-
damental a este nivel. Estas enzimas tienen efectos líticos sobre
los componentes proteicos de la MEC y desempeñan un papel
fundamental en diversos procesos fisiológicos [80]. El incre-
mento de la acción de estas enzimas se ha visto que desempeña
un papel importante en la ‘fluidificación’ de la MEC y permite
el crecimiento de los axones por las zonas lesionadas. Esta
aproximación ofrece, asimismo, un amplio campo abierto a fu-
turas investigaciones en el área de la regeneración neural.
Como hemos podido observar, los estudios reseñados abren
una puerta esperanzadora en los procesos de reparación de
849
D. CRESPO-SANTIAGO
lesiones del SNC, donde sabemos que la capacidad regenerativa
de dicho tejido se inhibe mucho. Además, estos estudios abren
un campo para posibles terapias reparadoras, ya no sólo en las
comentadas lesiones traumáticas del SNC, sino en aquellas pro-
BIBLIOGRAFÍA
1. Perides G, Rahemtulla F, Lane WS, Asher RA, Bignami A. Isolation of
a large aggregating proteoglycan from human brain. J Biol Chem
1992; 267: 23883-7.
2. Asher RA, Scheibe RJ, Keiser HD, Bignami A. On the existence of a
cartilage-like proteoglycan and link proteins in the central nervous sys-
tem. Glia 1995; 13: 294-308.
3. Bandtlow CE, Zimmermann DR. Proteoglycans in the developing brain:
new conceptual insights for old proteins. Physiol Rev 2000; 80: 1267-90.
4. Savolainen H. Isolation and separation of proteoglycans. J Chromatogr
B Biomed Sci Appl 1999; 722: 255-62.
5. Sundblad G, Holojda S, Roux L, Varki A, Freeze HH. Sulfated N-
linked oligosaccharides in mammalian cells. II. Identification of gly-
cosaminoglycan-like chains attached to complex-type glycans. J Biol
Chem 1988; 263: 8890-6.
6. Krusius T, Ruoslahti E. Primary structure of an extracellular matrix
proteoglycan core protein deduced from cloned cDNA. Proc Natl Acad
Sci USA 1986; 83: 7683-7.
7. Iozzo RV. Matrix proteoglycans: from molecular design to cellular
function. Annu Rev Biochem 1998; 67: 609-52.
8. Ghiselli G, Iozzo RV. Proteoglycan gene targeting in somatic cells.
Methods Mol Biol 2001; 171: 239-50.
9. Murdoch AD, Iozzo RV. Prokaryotic expression of proteoglycans.
Methods Mol Biol 2001; 171: 231-8.
10. Kjellen L, Lindahl U. Proteoglycans: structures and interactions. Annu
Rev Biochem 1991; 60: 443-75.
11. Iozzo RV, Murdoch AD. Proteoglycans of the extracellular environ-
ment: clues from the gene and protein side offer novel perspectives in
molecular diversity and function. FASEB J 1996; 10: 598-614.
12. Asher RA, Morgenstern DA, Shearer MC, Adcock KH, Pesheva P,
Fawcett JW. Versican is upregulated in CNS injury and is a product of
oligodendrocyte lineage cells. J Neurosci 2002; 22: 2225-36.
13. Perides G, Lane WS, Andrews D, Dahl D, Bignami A. Isolation and
partial characterization of a glial hyaluronate-binding protein. J Biol
Chem 1989; 264: 5981-7.
14. Zimmermann DR, Ruoslahti E. Multiple domains of the large fibrob-
last proteoglycan, versican. MBO J 1989; 8: 2975-81.
15. Bode-Lesniewska B, Dours-Zimmermann MT, Odermatt BF, Briner J,
Heitz PU, Zimmermann DR. Distribution of the large aggregating pro-
teoglycan versican in adult human tissues. J Histochem Cytochem
1996; 44: 303-12.
16. Ito K, Shinomura T, Zako M, Ujita M, Kimata K. Multiple forms of
mouse PG-M, a large chondroitin sulfate proteoglycan generated by
alternative splicing. J Biol Chem 1995; 270: 958-65.
17. Perides G, Asher RA, Lark MW, Lane WS, Robinson RA, Bignami A.
Glial hyaluronate-binding protein: a product of metalloproteinase
digestion of versican? Biochem J 1995; 312: 377-84.
18. Doege KJ, Sasaki M, Kimura T, Yamada Y. Complete coding sequence
and deduced primary structure of the human cartilage large aggregat-
ing proteoglycan, aggrecan. Human-specific repeats, and additional
alternatively spliced forms. J Biol Chem 1991; 266: 894-902.
19. Walcz E, Deak F, Erhardt P, Coulter SN, Fulop C, Horvath P, et al.
Complete coding sequence, deduced primary structure, chromosomal
localization, and structural analysis of murine aggrecan. Genomics
1994; 22: 364-71.
20. Margolis RU, Margolis RK. Aggrecan-versican-neurocan family pro-
teoglycans. Methods Enzymol 1994; 245: 105-26.
21. Yamada H, Fredette B, Shitara K, Hagihara K, Miura R, Ranscht B, et
al. The brain chondroitin sulfate proteoglycan brevican associates with
astrocytes ensheathing cerebellar glomeruli and inhibits neurite out-
growth from granule neurons. J Neurosci 1997; 17: 7784-95.
22. Retzler C, Gohring W, Rauch U. Analysis of neurocan structures inter-
acting with the neural cell adhesion molecule N-CAM. J Biol Chem
1996; 271: 27304-10.
23. Rauch U, Feng K, Zhou XH. Neurocan: a brain chondroitin sulfate
proteoglycan. Cell Mol Life Sci 2001; 58: 1842-56.
24. Yamaguchi Y. Lecticans: organizers of the brain extracellular matrix.
Cell Mol Life Sci 2000; 57: 276-89.
25. Bourdon MA, Krusius T, Campbell S, Schwartz NB, Ruoslahti E. Iden-
tification and synthesis of a recognition signal for the attachment of gly-
cosaminoglycans to proteins. Proc Natl Acad Sci USA 1987; 84: 3194-8.
26. Krueger RC Jr, Fields TA, Hildreth J IV, Schwartz NB. Chick cartilage
850
ducidas por otro tipo de alteraciones, como la esclerosis lateral
amiotrófica, el Parkinson, o la enfermedad de Alzheimer, donde
el incremento de la capacidad reparadora del tejido neural sería
un factor fundamental a la hora de inducir dicha regeneración.
chondroitin sulfate proteoglycan core protein. I. Generation and char-
acterization of peptides and specificity for glycosaminoglycan attach-
ment. J Biol Chem 1990; 265: 12075-87.
27. Margolis RK, Rauch U, Maurel P, Margolis RU. Neurocan and phos-
phacan: two major nervous tissue-specific chondroitin sulfate proteo-
glycans. Perspect Dev Neurobiol 1996; 3: 273-90.
28. Rauch U, Clement A, Retzler C, Frohlich L, Fassler R, Gohring W, et
al. Mapping of a defined neurocan binding site to distinct domains of
tenascin-C. J Biol Chem 1997; 272: 26905-12.
29. Meyer-Puttlitz B, Milev P, Junker E, Zimmer I, Margolis RU, Margolis
RK. Chondroitin sulfate and chondroitin/keratan sulfate proteoglycans
of nervous tissue: developmental changes of neurocan and phospha-
can. J Neurochem 1995; 65: 2327-37.
30. Asher RA, Morgenstern DA, Fidler PS, Adcock KH, Oohira A, Brais-
tead JE, et al. Neurocan is upregulated in injured brain and in cytokine-
treated astrocytes. J Neurosci 2000; 20: 2427-38.
31. Sandy JD, Boynton RE, Flannery CR. Analysis of the catabolism of
aggrecan in cartilage explants by quantitation of peptides from the
three globular domains. J Biol Chem 1991; 266: 8198-205.
32. Yamada H, Watanabe K, Shimonaka M, Yamaguchi Y. Molecular
cloning of brevican, a novel brain proteoglycan of the aggrecan/versi-
can family. J Biol Chem 1994; 269: 10119-26.
33. Little CB, Flannery CR, Hughes CE, Mort JS, Roughley PJ, Dent C, et
al. Aggrecanase versus matrix metalloproteinases in the catabolism of
the interglobular domain of aggrecan in vitro. Biochem J 1999; 344: 61-8.
34. Watanabe K, Yamada H, Yamaguchi Y. K-glypican: a novel GPI-
anchored heparan sulfate proteoglycan that is highly expressed in
developing brain and kidney. J Cell Biol 1995; 130: 1207-18.
35. Filmus J, Selleck SB. Glypicans: proteoglycans with a surprise. J Clin
Invest 2001; 108: 497-501.
36. Carey DJ. Syndecans: multifunctional cell-surface co-receptors.
Biochem J 1997; 327: 1-16.
37. Woods A, Oh ES, Couchman JR. Syndecan proteoglycans and cell
adhesion. Matrix Biol 1998; 17: 477-83.
38. Zimmermann P, David G. The syndecans, tuners of transmembrane
signaling. FASEB J 1999; 13 (Suppl): S91-100.
39. Rapraeger AC, Ott VL. Molecular interactions of the syndecan core
proteins. Curr Opin Cell Biol 1998; 10: 620-8.
40. Rapraeger AC. Molecular interactions of syndecans during develop-
ment. Semin Cell Dev Biol 2001; 12: 107-16.
41. Maurel P, Rauch U, Flad M, Margolis RK, Margolis RU. Phosphacan,
a chondroitin sulfate proteoglycan of brain that interacts with neurons
and neural cell-adhesion molecules, is an extracellular variant of a
receptor-type protein tyrosine phosphatase. Proc Natl Acad Sci USA
1994; 91: 2512-6.
42. Maeda N, Hamanaka H, Oohira A, Noda M. Purification, characteriza-
tion and developmental expression of a brain-specific chondroitin sul-
fate proteoglycan, 6B4 proteoglycan/phosphacan. Neuroscience 1995;
67: 23-35.
43. Canoll PD, Petanceska S, Schlessinger J, Musacchio JM. Three forms
of RPTP-beta are differentially expressed during gliogenesis in the
developing rat brain and during glial cell differentiation in culture. J
Neurosci Res 1996; 44: 199-215.
44. Oohira A, Matsui F, Tokita Y, Yamauchi S, Aono S. Molecular interac-
tions of neural chondroitin sulfate proteoglycans in the brain develop-
ment. Arch Biochem Biophys 2000; 374: 24-34.
45. Allendoerfer KL, Durairaj A, Matthews GA, Patterson PH. Morpho-
logical domains of Lewis-X/FORSE-1 immunolabeling in the embry-
onic neural tube are due to developmental regulation of cell surface
carbohydrate expression. Dev Biol 1999; 211: 208-19.
46. Zhang Y, Sinay P. Synthesis and characterization of a sulfated pentasac-
charide containing the Lewis-X motif. Carbohydr Res 2003; 338: 1793-5.
47. Garwood J, Heck N, Reichardt F, Faissner A. Phosphacan short isoform, a
novel non-proteoglycan variant of phosphacan/receptor protein tyrosine
phosphatase-beta, interacts with neuronal receptors and promotes neurite out-
growth. J Biol Chem 2003; 278: 24164-73.
48. Miyata S, Shinga I, Taguchi K, Nakashima T, Kiyohara T, Oohira A.
Chondroitin sulfate proteoglycan phosphacan/RPTPbeta in the hypo-
thalamic magnocellular nuclei. Brain Res 2002; 949: 112-21.
49. Nishiyama A. NG2 cells in the brain: a novel glial cell population.
Hum Cell 2001; 14: 77-82.
REV NEUROL 2004; 38 (9): 843-851

50. Nishiyama A, Chang A, Trapp BD. NG2+ glial cells: a novel glial cell po-
pulation in the adult brain. J Neuropathol Exp Neurol 1999; 58: 1113-24.
51. Schwartz S, Rieder H, Schlager B, Burmeister T, Fischer L, Thiel E.
Expression of the human homologue of rat NG2 in adult acute lym-
phoblastic leukemia: close association with MLL rearrangement and a
CD10(-)/CD24(-)/CD65s(+)/CD15(+) B-cell phenotype. Leukemia
2003; 17: 1589-95.
52. Salinero O, Moreno-Flores MT, Wandosell F. Increasing neurite out-
growth capacity of beta-amyloid precursor protein proteoglycan in
Alzheimer’s disease. J Neurosci Res 2000; 60: 87-97.
53. Beyreuther K, Multhaup G, Monning U, Sandbrink R, Beher D, Hesse
L, et al. Regulation of APP expression, biogenesis and metabolism by
extracellular matrix and cytokines. Ann NY Acad Sci 1996; 777: 74-6.
54. Sandbrink R, Monning U, Masters CL, Beyreuther K. Expression of
the APP gene family in brain cells, brain development and aging.
Gerontology 1997; 43: 119-31.
55. Morgenstern R, Asher RA, Fawcett JW. Chondroitin sulphate proteo-
glycans in the CNS injury response. Prog Brain Res 2002; 137: 313-32.
56. Oakley RA, Tosney KW. Peanut agglutinin and chondroitin-6-sulfate
are molecular markers for tissues that act as barrier to axon advance in
the avian embryo. Dev Biol 1991; 147: 187-206.
57. Pindzola RR, Doller C, Silver J. Putative inhibitory extracellular matrix
molecules at the dorsal root entry zone of the spinal cord during develop-
ment and after root and sciatic nerve lesions. Dev Biol. 1993; 156: 34-8.
58. Hoffman-Kim D, Lander AD, Jhaveri S. Patterns of chondroitin sulfate
immunoreactivity in the developing tectum reflect regional differences
in glycosaminoglycans biosynthesis. J Neurosci 1998; 18: 5881-90.
59. Brittis PA, Canning DR, Silver J. Chondroitin sulfate as a regulator of
neuronal patterning in the retina. Science 1992; 255: 733-6.
60. Lips K, Stichel CC, Muller HW. Restricted appearance of tenascin and
chondroitin sulphate proteoglycans after transection and sprouting of
adult rat postcommissural fornix. J Neurocytol 1995; 24: 449-64.
61. Gates MA, Fillmore H, Steindler DA. Chondroitin sulfate proteoglican
and tenascin in the wounded adult mouse neostriatum in vitro: do-
pamine neuron attachment and process outgrowth. J Neurosci 1996;
16: 8005-18.
62. Fitch MT, Silver J. Activated macrophages and the blood-brain barrier:
inflammation after CNS injury leads to increases in putative inhibitory
molecules. Exp Neurol 1997; 148: 587-03.
63. Bovolenta P, Wandosell F, Nieto-Sampedro M. Characterization of a
neurite outgrowth inhibitor expressed after CNS injury. Eur J Neurosci
1993; 5: 454-65.
64. Bovolenta P, Fernaud-Espinosa I, Méndez-Otero R, Nieto-Sampedro
LA MATRIZ EXTRACELULAR DEL SISTEMA NERVIOSO
CENTRAL: LOS PROTEOGLICANOS DEL TIPO
CONDROITINSULFATO Y LA REPARACIÓN NEURAL
Resumen. Objetivo. En este artículo realizamos un estudio de las
características de la matriz extracelular (MEC) del sistema nervio-
so central (SNC). Desarrollo. Los proteoglicanos (PG) son glico-
proteínas, un tipo de molécula muy abundante en la MEC. Dentro
de este grupo de PG destacan los hialectanos o lecticanos. Los hia-
lectanos se caracterizan por poseer dos componentes: la proteína
eje y la fracción glucídica, que está formada por los glucosamino-
glicanos (GAG). Los GAG están formados por la polimerización de
dímeros de azúcares sencillos. Los GAG de los hialectanos son del
tipo condroitinsulfato (CS). Por esta razón, estos PG se denominan
PG del tipo CS (PG-CS). Los PG-CS se unen al ácido hialurónico
y a otras moléculas de la MEC para formar una red tridimensional
de naturaleza proteica, que cumple funciones muy importantes en
la homeostasis del tejido nervioso. Conclusiones. Diversas hipóte-
sis se han planteado para tratar de explicar la falta de regenera-
ción del SNC tras la lesión neural o en ciertas patologías. Se ha
propuesto que los PG-CS, cuya expresión se incrementa tras las
lesiones del SNC, pudieran desempeñar algún papel en este proce-
so de inhibición de la capacidad regenerativa neural. En este senti-
do, realizamos finalmente un análisis de las aproximaciones tera-
péuticas, experimentales, que se realizan para tratar de inducir la
regeneración del SNC tras la actuación sobre los PG-CS de la MEC.
[REV NEUROL 2004; 38: 843-51]
Palabras clave. Condroitinasa. Condroitinsulfato. Matriz extracelu-
lar. Proteoglicanos. Regeneración. Sistema nervioso central.
REV NEUROL 2004; 38 (9): 843-851
PROTEOGLICANOS
M. Neurite outgrowth inhibitor of gliotic brain tissue. Mode of action
and cellular localization, studies with specific monoclonal antibodies.
Eur J Neurosci 1997; 9: 977-89.
65. Davies SJ, Fitch MT, Memberg SP, Raisman G, Silver J. Regeneration
of adult axons in white matter tracts of the central nervous system.
Nature 1997; 390: 680-3.
66. Davies SJ, Goucher DR, Doller C, Silver J. Robust regeneration of
adult sensory axons in degenerating white matter of the adult rat spinal
cord. J Neurosci 1999; 19: 5810-22.
67. Chen ZJ, Ughrin Y, Levine JM. Inhibition of axon growth by oligoden-
drocyte precursor cells. Mol Cell Neurosci 2002; 20: 125-39.
68. Oleszewski M, Gutwein P, Von der Lieth W, Rauch U, Altevogt P.
Characterization of the L1-neurocan-binding site. Implications for L1-
L1 homophilic binding. J Biol Chem 2000; 275: 34478-85.
69. Katoh-Semba R, Matsuda M, Kato K, Oohira A. Chondroitin sulphate
proteoglycans in the rat brain: candidates for axon barriers of sensory
neurons and the possible modification by laminin of their actions. Eur
J Neurosci 1995; 7: 613-21.
70. Katoh-Semba R, Matsuda M, Watanabe E, Maeda N, Oohira A. Two
types of brain chondroitin sulfate proteoglycan: their distribution and
possible functions in the rat embryo. Neurosci Res 1998; 31: 273-82.
71. Asher RA, Morgenstern DA, Fidler PS, Adcock KH, Oohira A, Brais-
tead JE, et al. Neurocan is upregulated in injured brain and in cytokine-
treated astrocytes. J Neurosci 2000; 20: 2427-38.
72. McKeon RJ, Jurynec MJ, Buck CR. The chondroitin sulfate proteogly-
cans neurocan and phosphacan are expressed by reactive astrocytes in
the chronic CNS glial scar. J Neurosci 1999; 19: 10778-88.
73. Haas CA, Rauch U, Thon N, Merten T, Deller T. Entorhinal cortex
lesion in adult rats induces the expression of the neuronal chondroitin
sulfate proteoglycan neurocan in reactive astrocytes. J Neurosci 1999;
19: 9953-63.
74. Rabchevsky AG, Degos JD, Dreyfus PA. Peripheral injections of Fre-
und’s adjuvant in mice provoke leakage of serum proteins through the
blood-brain barrier without inducing reactive gliosis. Brain Res 1999;
832: 84-96.
75. Rabchevsky AG, Weinitz JM, Coulpier M, Fages C, Tinel M, Junier
MP. A role for transforming growth factor alpha as an inducer of
astrogliosis. J Neurosci 1998; 18: 10541-52.
76. Kresse H, Schonherr E. Proteoglycans of the extracellular matrix and
growth control. Cell Physiol 2001; 189: 266-74.
78. Rhodes KE, Moon LD, Fawcett JW. Inhibiting cell proliferation during
formation of the glial scar: effects on axon regeneration in the CNS.
Neuroscience 2003; 120: 41-56.
A MATRIZ EXTRA-CELULAR DO SISTEMA NERVOSO
CENTRAL: OS PROTEOGLICANOS DO TIPO
CONDROITINOSULFATO E A REPARAÇÃO NEURAL
Resumo. Objectivo. Neste artigo realizamos um estudo das carac-
terísticas da matriz extra-celular (MEC) do sistema nervoso cen-
tral (SNC). Desenvolvimento. Os proteoglicanos (PG) são glico-
proteínas, um tipo de molécula muito abundante na MEC. Dentro
deste grupo de PG destacam-se os hialectanos ou lecticanos. Os
hialectanos caracterizam-se por possuirem dois componentes: a
proteína eixo e a fracção glucídica, que é formada pelos glucosa-
minoglicanos (GAG). Os GAG são formados pela polimerização
de dímeros de açúcares simples. Os GAG dos hialectanos são do
tipo condroitinosulfato (CS). Por esta razão, estes PG são denomi-
nados PG do tipo CS (PG-CS). Os PG-CS unem-se ao ácido hialu-
rónico e a outras moléculas da MEC para formarem uma rede tri-
dimensional de natureza proteica, que cumpre funções muito
importantes na homeostase do tecido nervoso. Conclusões. Consi-
deraram-se diversas hipóteses para tentar explicar a falta de rege-
neração do SNC após a lesão neural ou em certas patologias. Foi
proposto que os PG-CS, cuja expressão se incrementa após as
lesões do SNC, pudessem desempenhar algum papel neste proces-
so de inibição da capacidade regenerativa neural. Neste sentido,
realizámos finalmente uma análise das aproximações terapêuti-
cas, experimentais, que se realizam para tratar de induzir a rege-
neração do SNC após a actuação sobre os PG-CS da MEC. [REV
NEUROL 2004; 38: 843-51]
Palavras chave. Condroitinase. Condroitinosulfato. Matriz extra-ce-
lular. Proteoglicanos. Regeneração. Sistema nervoso central.
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