Las Enzimas en los Alimentos para Aves Elaborados con Maz, Sorgo y Soya: La Necesidad de Usar Proteasas

Publicado el: 01/01/1900 Calificacin: Autor: Robert Gauthier - Jefo Nutrition Inc., St-Hyacinthe, Quebec, Canad Las enzimas se utilizan ampliamente en los alimentos avcolas, tradicionalmente cuando contienen cereales que causan problemas de viscosidad intestinal. La gran mayora de los pollos y ponedoras en todo el mundo recibe dietas elaboradas bsicamente con maz, sorgo y pasta de soya. El uso de las enzimas en este tipo de formulaciones se ha extrapolado del empleo tradicional de las enzimas fibrolticas que trabajan sobre los polisacridos no amilceos, aun cuando el sustrato principal sea diferente con las dietas formuladas a base de maz, sorgo y soya. La necesidad de usar proteasa es ms obvia y en esta presentacin intentaremos demostrarlo. Las enzimas son catalizadores biolgicos que incrementan la velocidad de las reacciones qumicas sin sufrir ellas mismas cambios importantes. Requieren un cofactor para ser activas, con frecuencia un metal o una molcula orgnica. Son especficas de un sustrato y slo son efectivas bajo condiciones estrictas. Cuadro 1. Enzimas utilizadas en los aditivos alimenticios.

Adaptado de Acamovic, 2001. Cuadro 2. Composicin de los sustratos especficos en los ingredientes alimenticios.

Adaptado de varias fuentes. MS = Materia seca. El uso de enzimas es una prctica comn en las dietas avcolas elaboradas a base de trigo y cebada en todo el mundo; sin embargo, los fabricantes de enzimas han encontrado muchas dificultades para desarrollar productos eficaces y costeables para las dietas preparadas con maz y pasta de soya, o bien con sorgo y pasta de soya. .....................................................protena de origen vegetal, adems de harina de carne y hueso o harina de subproducto avcola como fuente de protena animal. En este contexto, el uso de una enzima que sea activa sobre los polisacridos no amilceos es sumamente cuestionable porque la mayora de las enzimas fungales que los atacan, no son activas sobre la fraccin insoluble. Slo la fraccin soluble es responsable de la elevada viscosidad intestinal (6, 31). Cuadro 3. Tipo y contenido (% de la MS) de los polisacridos no amilceos en los principales cereales y leguminosas.

Adaptado de Choct, 1997. NSP = Polisacridos no amilceos, por sus siglas en ingls. La importancia de una enzima capaz de aumentar la digestibilidad de las protenas es

crucial. Se ha publicado que del 20 al 25% de las protenas presentes en los ingredientes para uso animal no se digiere. El Cuadro 4 muestra la importancia de utilizar las enzimas especficas para sus sustratos meta, bajo condiciones de alimentacin prctica. Esta prueba con pollos de engorda machos alimentados con una dieta a base de maz y soya se realiz para demostrar la inutilidad del uso de una enzima sobre un sustrato no apropiado. El uso de alimentos en harina garantiz la presencia de las enzimas, debido al hecho de que tres de las que se utilizaron en la prueba no eran termoestables. E-1: Preparacin con una sola proteasa. E-2: Mezcla de enzimas que contena una proteasa. E-3: Enzima especfica para polisacridos no amilceos. E-4: Enzima especfica para polisacridos no amilceos. Cuadro 4.

Jefo Nutrition Inc., datos internos, julio de 2003. Algunas preparaciones enzimticas comerciales diseadas para dietas a base de maz, o sorgo y soya, de hecho son mezclas de actividades enzimticas, principalmente xilanasa y con actividad variable de -amilasa, -glucanasa y proteasa. Esta estrategia es arriesgada porque algunos autores sospechan que las preparaciones con alta actividad de proteasa tambin pueden tener un efecto negativo pues incrementan la digestin de las protenas, incluidas las enzimas agregadas (3). En lo personal, no estoy convencido de esa teora, pues la cantidad de sustrato que representa la protena de alimento es inmensamente superior a los pocos gramos de enzimas adicionadas. Esto puede depender del tipo de proteasa usada y de su especificidad o falta de ella hacia un sustrato protenico. Antes de incorporar enzimas a las raciones avcolas comerciales, es necesario contestar algunas preguntas (22): Cul es el sustrato a atacar? Qu actividad enzimtica se requiere? Cul es la estabilidad de la fuente de la enzima durante el procesamiento de la racin y

dentro del tracto digestivo? Es ms efectiva una combinacin que un solo tipo de enzima? Las diferentes preparaciones comerciales tienen la misma eficacia? Se deben agregar las enzimas mezclndolas en seco o aplicarlas como una aspersin lquida? Cules son los costos y los beneficios del uso de las enzimas? Cul es el sustrato a atacar? En una dieta elaborada a base de maz y soya los sustratos que las enzimas deben atacar son almidn, protena, grasa, y oligosacridos. Sabemos que la produccin endgena de enzimas en los pollos y pavipollos jvenes est presente al final de la incubacin o bien la desencadena el consumo de alimento (25, 28). Figura 1. Secrecin neta cotidiana al duodeno de tripsina, amilasa, lipasa, cidos biliares (BA), cidos grasos (FA) y nitrgeno (N) por gramo de alimento consumido de 4 a 14 das de vida. Los valores son medias con desviaciones estndar (28).

Muchos autores consideran que durante los primeros das de vida del pollo, la digestibilidad de los ingredientes y nutrimentos es menos problema que el proceso mismo de absorcin (27). Los pollos a los que se les ha extirpado el pncreas muestran una reduccin del 75% en la absorcin de protenas y grasas, mientras que la del almidn disminuye en un 25% (24). -amilasa. La buenaTodos los animales contienen abundante digestin del almidn se

relaciona ms con el rompimiento de los grnulos que los contiene mediante mecanismos fsicos (molienda, humedecimiento en el buche, trituracin en la molleja, etc.) (20, 31). El problema es realmente la protena porque su digestibilidad no es muy alta, adems de que existen amplias variaciones entre sus fuentes y dentro de una misma fuente. La presencia de factores antinutricionales y los problemas en el procesamiento de las fuentes de protena (falta o exceso del mismo) se suman a la variabilidad en la digestibilidad de las protenas. Cuadro 5. Contenido normal de protena bruta y su digestibilidad en los ingredientes de uso comn en avicultura.

Tomado del libro Nutrition of the Chicken de Scott, 4a. edicin, Lesson & Summers. La utilizacin de las grasas en los pollos muy jvenes es baja y est relacionada con la produccin de lipasa, la secrecin de bilis y la composicin de la grasa en s. La adicin de lipasa a las dietas rara vez resulta efectiva pues es la emulsificacin con las sales biliares el paso ms importante en la digestin de grasas y aceites (11). Segn han investigado muchos autores, la viscosidad del contenido intestinal puede desempear un papel de angr importancia en la digestin y la absorcin de las grasas, mediante la reduccin de la emulsificacin, de la actividad de la lipasa pancretica y de la formacin de micelios (8, 9, 19); no obstante, estas pruebas se realizaron usando dietas sumamente viscosas que contenan una gran cantidad de centeno.

El nivel de polisacridos no amilceos solubles en las dietas hechas con maz y sorgo es muy bajo (Cuadro 3) por lo que no tienen problemas de viscosidad pero en la pasta de soya dichos polisacridos son prncipalmente -galactsidos que no se degradan con la xilanasa ni la a -glucanasa que se usan comnmente. Se han obtenido resultados muy dismbolos en las evaluaciones del uso de la -galactosidas (17). Los oligosacridos de la pasta de soya carecen de efecto antinutricional (o bien ste es muy bajo), pero ni siquiera su eliminacin mejor el rendimiento ni la energa metabolizable verdadera (16). Qu actividad enzimtica se requiere? Por lo que hemos visto en los datos y cuadros que anteceden, es obvio que en una dieta soya-maz-sorgo la nica enzima til sea una proteasa. Numerosas publicaciones han demostrado que las proteasas incrementan la digestibilidad de la protena de la pasta de soya (10, 13, 18, 30) pero nos sorprende que muchos autores se concentren en la energa metabolizable aparente de las dietas preparadas con maz y soya, ms no en la protena. Ghazi demostr que las diferentes fuentes de proteasas ejercen efectos distintos sobre la digestibilidad y la retencin del nitrgeno. El mejoramiento en la digestibilidad de los aminocidos vara dependiendo de cul de ellos se trate. Se calcula que del 20 al 25% de la protena total de los ingredientes no se digiere (29). La protena fibrosa no se digiere por las proteasas con actividad similar a la de la tripsina y la quimiotripsina, como la subtilisina. Es obvio que se ha investigado muy poco el uso de una sola proteasa en las dietas formuladas con maz, sorgo y soya. Las mezclas o ccteles de enzimas podran estar indicadas (15) slo en teora, porque en la realidad cuando se considera a la protena como el sustrato principal, slo se debera considerar la proteasa. En nuestros experimentos hemos demostrado que dichas mezclas de enzimas que contienen proteasa suelen generar muy buena ganancia de peso en los pollos de engorda, pero con frecuencia la conversin alimenticia es mayor que en el grupo testigo negativo. Importancia de la estabilidad de las enzimas: Las proteasas presentes en muchos de los productos multienzimticos son muy sensibles al calor y al pH. En general, la termosensibilidad de las enzimas es un problema con slo algunas excepciones como las xilanasas bacterianas, una proteasa atpica y una fitasa especfica. Se ha demostrado que la proteasa subtilisina se desnaturaliza de manera irreversible cuando el pH es inferior a 5 (21). Tambin es importante el hecho de que la proteasa usada en los alimentos para animales

sea resistente a los factores antitripsina que se encuentran en la soya y la pasta de soya mal procesadas. Por otra parte, la lipasa es muy sensible al pH por lo que se degrada en un 35% con respecto a su valor original despus de 5 minutos de incubacin a pH 5.0 (12). La lipasa exgena no sobrevive ante el pH tan cido del proventrculo y la molleja. La posibilidad de adicionar las enzimas en forma seca o bien despus de la peletizacin se determina por su estabilidad ante el calor, as como por otros factores prcticos. Debemos recordar que las enzimas lquidas concentradas son mucho menos estables que sus contrapartes secas. Por otra parte, si dichas enzimas son termosensibles, las opciones son muy limitadas. Los sistemas de aplicacin lquida de buena calidad son muy caros y, adems, en muchas plantas de alimentos no se logra el grado necesario de precisin ni uniformidad. Diferencias en las preparaciones enzimticas comerciales para mezclar con los alimentos balanceados: Debido a que las enzimas que se utilizan en las preparaciones comerciales proceden de fuentes distintas (microorganismos), sus propiedades varan mucho. Desgraciadamente, muchas de las proteasas existentes en el mercado no se desarrollaron originalmente para administrarlas en las raciones de los animales sino para otras aplicaciones (como por ejemplo: detergentes para lavandera industrial), de tal manera que no poseen las propiedades que quisiramos para su uso en la alimentacin pecuaria. Es necesario evaluar cada producto comercial por sus propios mritos. Otro roblema con las enzimas en general es la estandarizacin de las unidades usadas, por lo que el simple hecho de leer la etiqueta para comparar diversas preparaciones enzimticas comerciales carece totalmente de significado. Anlisis de las enzimas: Existen varias publicaciones que describen los mtodos para analizar las enzimas (7, 23). Cuando vienen en su forma pura, el anlisis es relativamente sencillo; no obstante, el intentar recuperar las enzimas o determinar su actividad en los alimentos balanceados es extremadamente difcil, si no imposible (3, 4, 14). Esto es especialmente cierto para las proteasas, pues estn ya sea ligadas a su sustrato lo cual crea un problema de extraccin o existen interferencias espectrofotomtricas con otros ingredientes de la formulacin. Al contrario de las enzimas que atacan a los polisacridos no amilceos en cuyo caso podemos usar un mtodo indirecto como medir la viscosidad del contenido intestinal las proteasas en la racin se deben medir directamente. Esta situacin puede crear un problema de control de calidad en muchas plantas y la nica manera de resolverlo es realizar suficientes pruebas con pollos in vivo para determinar su eficacia (2). Existe ahora en el mercado una fuente nica de proteasa (N. del T: denominada por el autor como Single Protease, Sing. Prot.) que posee la mayora de las caractersticas de calidad que debe tener una enzima, a saber:

 Pureza (sin subactividades) Estar elaborada a partir de microorganismos no modificados genticamente Estabilidad al calor Resistencia a los factores antitripsina que se encuentran en las fuentes vegetales de protena Amplia actividad sobre protenas y pptidos Resultados constantes bajo las condiciones de campo Ser econmicamente benfica Esta proteasa termoestable, desarrollada especficamente para uso en raciones pecuarias, cuenta con tres fracciones activas procedentes del mismo proceso de fermentacin y tiene un exclusivo modo de accin. Cada fraccin tiene un tipo especfico de actividad, de alguna manera similar a la tripsina y la quimiotripsina, pero mucho ms amplio. El modo esperado de accin es clsico, incrementa la solubilidad y la digestibilidad de protenas, pptidos y aminocidos. Por otro lado, esta exclusiva enzima es activa sobre la mucosa intestinal misma, regulando y optimizando la viscosidad del moco en la superficie de las vellosidades y microvellosidades intestinales, mejorando as la absorcin de los nutrimentos. Beneficios de usar una proteasa: Cualquiera que sea la base terica, la nica razn de usar cualquier enzima incluida una proteasa es la ventaja econmica. Mejor rendimiento de los pollos, reduccin del costo de los alimentos, uso de fuentes menos digestibles de protena y aspectos ambientales, en el caso de la fitasa.

En los trabajos que versan sobre la investigacin y desarrollo de las enzimas con mucha frecuencia leemos la adicin de tal o cual enzima no tuvo efecto (P>0.10) sobre el crecimiento de los pollos pero aument significativamente la DE en el leon (P<0.01) (10). Por qu no respondieron los pollos a la mayor digestibilidad? Simplemente porque el alimento contena ya cantidades superiores al requerimiento de los pollos. Es mucho ms importante definir las necesidades verdaderas de nutrimentos de las aves como protena, aminocidos y energa, que definir una matriz que arroje nuevos valores a ingredientes aislados que, de todas maneras, son extremadamente variables. La formulacin del alimento con base digestible aumenta la falta de exactitud en el valor de un solo ingrediente. Hay dos maneras de usar las proteasas en las dietas para pollos elaboradas con maz, sorgo y soya: Cuando las dietas ya contienen niveles bajos o marginales de protena bruta y aminocidos en

comparacin con los requerimientos de las aves y cuando se utilizan fuentes que se sabe entien baja digestibilidad de protena, se puede agregar la proteasa. Cuando las dietas se formulan con especificaciones altas de protena bruta y aminocidos, es posible bajar en un determinado porcentaje las especificaciones totales de la racin. Como indic Rosen, el control del rendimiento de los pollos es significativo para determinar qu tipo de respuesta se puede esperar ante la adicin de una enzima. La cuestin es muy sencilla: con un cierto tipo de frmula y con una estirpe dada de pollos, es posible mejorar el rendimiento? Cuadro 6. Eficacia de una sola proteasa en un alimento estndar vs. una racin baja en protena y aminocidos para pollos de engorda machos.

Cuadro 7. Eficacia de una sola proteasa en un alimento bajo en protena y aminocidos vs. un alimento estndar.

Conclusin: El uso de una sola proteasa en los alimentos avcolas elaborados con maz, sorgo y soya est bien encarrilado aunque se requiere ms investigacin para comprender por qu es tan eficaz o incluso mejor que una mezcla de diferentes actividades enzimticas. Los proveedores de enzimas se deben resistir a la tentacin de incluir en sus productos todo tipo de propiedades, si es que stas no se pueden cuantificar. Mejorar el rendimiento y disminuir el costo de la racin deben ser siempre la clave para tomar la decisin de usar una proteasa, bebiendo obtenerse un sustancial retorno sobre la inversin.