rparat|on des so|ut|ons extract|on de |'adn a part|r

d'un fru|t banane

kLSUML DL LA kCCLDUkL
La procedure decrlLe cl apres explolLe le falL que la membrane exLerne des cellules eL de leur noyau
sonL composes de subsLances grasses qul peuvenL Lre brlsees en uLlllsanL un slmple deLergenL La
premlere operaLlon de ceLLe procedure esL de broyer le frulL ou de le mlxer de manlere ce que les
cellules solenL le plus separees posslble les unes des auLres de manlere les exposer au deLergenL
uans un deuxleme Lemps on a[ouLe le deLergenL la pulpe du frulL de manlere llberer l'Aun de les
membranes qul l'enfermenL uans un Lrolsleme Lemps ll esL necessalre de fllLrer la mlxLure pour
separer les acldes nuclelques du resLe des cellules llnalemenL l'Aun preclplLe dans l'alcool ou ll
devlenL vlslble L'Aun obLenu par ceLLe procedure peuL Lre observe avec un mlcroscope eL peuL Lre
uLlllse pour d'auLres experl ences comme l'elecLrophorese
mots c|s Aun exLracLlon proLelne d'Aun acldes amlne rlbosomes eL banane


INTRODUCTION
Ces dernieres annees, il n`est pas rare de lire des articles sur l`ADN dans des magazines tant
scientiIiques que populaires. L`ADN est regulierement cites dans les inIormations et on y Iait
souvent reIerence dans les Ieuilletons scientiIiques a la television. L`ADN, aussi connu sous
le nom d`Acide Desoxyribo Nucleque, est une longue molecule qui contient l`inIormation
genetique de tout tre vivant, qu`il soit vegetal, animal ou simplement un microorganisme. Il
est capable de se recopier pour synthetiser de l`Acide Ribo Nucleque (ARN). Dans les
Iormes de vie plus evoluees ou plus complexes, l`ADN est contenu dans le noyau des cellules.
Excepte dans les globules rouges des mammiIeres, qui sont depourvus de noyau, toutes les
cellules d`un tre vivant contiennent de l`ADN. Les cellules de l`organisme n`utilisent q`une
partie de la molecule d`ADN partie appelee gene pour produire les proteines dont elles ont
besoin pour Ionctionner. Pour une description plus detaillee de l`ADN incluant sa structure, sa
Ionction et les mecanismes de production des proteines les lecteurs pourront consulter la liste
de textes dans la partie bibliographie de ce document ces textes sont bien ecrits et
contiennent des illustrations interessantes. Dans cet article, je decris une experience simple
qui vous permettra d`extraire un peu d`ADN de banana, bien que vous puissiez l`utiliser
egalement avec d`autres Iruits et mme avec les legumes. C`est une experience qui peut aussi
bien se Iaire a la maison qu`a l`ecole.
!RE!RTION DELL SOLUTION D'EXTRCTION : Comme mentionne
precedemment, l`ADN est continu dans le noyau des cellules des Iruits sur lesquels nous
allons travailler. Pour liberer l`ADN, il va tre necessaire de briser les membranes des cellules
ainsi que celles des noyaux. Comme ces membranes sont Iaites de phospholipides, qui sont
des molecules riches en acides gras, nous allons les dissoudre en utilisant un simple detergent
menager. Nous utiliserons egalement un peu de sel de table, qui aide a eliminer les proteines,
appelees histones, dans lesquelles l`ADN est emballe.
MTERIEL:
- 100 mL d`eau distillee, mais de l`eau du robinet convient aussi;
- un systeme pour peser de Iaibles masses (si possible);
- 3 g de sel de table (une demi cuillere a caIe);
- 10 mL de detergent liquide;
- une seringue de 10 mL sans aiguille;
- un becher de 100 mL;
- une baguette en verre.
METHODE
- Mettez 3 g de sel et 80 mL d`eau distillee dans le becher de 100 mL;
- melangez jusqu`a ce que le sel soit completement dissout;
- avec la seringue, prenez 10 mL de detergent liquide et ajoutez le a la solution;
- ajoutez de l`eau distillee jusqu`a obtenir un volume total de 100 mL ;
- en evitant de produire des bulles, melangez pour homogeneiser la solution.
- la solution extractante est prte.


!RE!RTION DE L !UL!E :
Cette operation cherche a separer les cellules les unes des autres pour permettre une meilleure
action de la solution d`extraction.
MTERIELS
- 100 g de banane (ou: kiwi, poire, pomme, kaki, pois, oignon, etc.);
- balance;
- couteau;
- planche a decouper et une Iourchette;
- becher de 250 mL;
- cuillere a the.
METHODE
- Placez 100 g de banane (sans la peau) sur une planche a decouper et ecrasez la avec une
Iourchette jusqu`a obtenir une puree. Si vous utilisez un oignon, avec un couteau decoupez
des petits cubes de 5mm de cote au maximum. Vous pouvez aussi utiliser un mixer. Si c`est le
cas ne mixez pas la pulpe trop longtemps;
- placez le melange dans un becher de 250 ml

EXTRCTION DE L'DN :Le but de cette operation est de rompre la membrane des
cellules et de leur noyau pour liberer l`ADN. La pulpe doit tre chauIIee a 60C pour
accelerer le processus de rupture des membranes. ChauIIer la pulpe aide aussi a desactiver
certaines enzymes comme la DNase qui peut degrader l`ADN. Cependant, si la pulpe est
chauIIee a une temperature trop elevee et pendant un trop long moment l`ADN commence a
se Iragmenter en raison de son exposition a la chaleur. Pour cette raison, apres 15 minutes il
est judicieux de reIroidir la pulpe dans un bain d`eau reIrigere pendant 5 minutes.
MTERIEL
- Thermometre;
- recipient avec de l`eau a 60C;
- saladier avec de l`eau du robinet et des glaons.
METHODE
- Placez la solution d`extraction dans la pulpe;
- mettez le becher au bain marie dans le recipient contenant de l`eau a 60C;
- mixez le melange pour repartir la solution extractante et pour homogeneiser la temperature
du melange;
- apres 15 minutes, placez le becher au bain-marie dans l`eau avec les glaons;
- remuez le melange pour rendre la temperature uniIorme;
- apres 5 minutes sortez le becher de l`eau Iroide et preparez vous pour la Iiltration.

FILTRTION
Le procede de Iiltration est utilise pour recueillir le liquide riche en AND et pour le separer
des residus de cellules et des autres tissues qui composent le Iruit, qui sera laisse de cte.
MTERIEL
- Passoire avec un diametre de 12 cm environ;
- papier Iiltre pour caIe (le papier Iiltre de laboratoire est trop epais). Le papier essuie-tout de
cuisine peut aussi tre utilise, pourvu qu`il n`ait pas de trou visible;
- bol.
METHODE
- Placez la passoire sur un bol;
- prenez un papier Iiltre, pliez le, mouillez le et placez le dans la passoire;
- placez un peu de pulpe sur le Iiltre, en prenant soin pour qu`il reste sur le papier Iiltre;
- appuyez avec precaution pour aider a la Iiltration en evitant d`accrocher le papier Iiltre;
- le liquide Iiltre que vous obtenez est riche en ADN.





Rsultats :


CONCLUSION
Cette experience n`etait pas si diIIicile que a a realiser apres tout, n`est ce pas? Le but de
cette simple experience etait de vous initier aux procedures utilisees en biologie moleculaire.
Souvent les techniques utilisees en laboratoire de microbiologie moderne repose sur des
operations simples comme celle-ci. Dans d`autres cas la procedure peut tre assez complexe
et peut necessiter des manipulations et des equipements beaucoup plus sophistiques. Dans
tous les cas de grandes connaissances en biologie et en chimie sont necessaires pour
comprendre comment l`ADN est utilise dans les domaines de la biologie et de la medecine. Si
cette experience a suscite un intert dans la poursuite de vos explorations Iutures, souvenez
vous que les ressources disponibles sur Internet peuvent vous conduire a de nouveaux sujets
de curiosite. Si vous voulez en apprendre plus, reIerez vous au document |2| dans la section
bibliographie de cet article. L`extraction de l`ADN est la premiere etape de beaucoup d`autres
experiences Iascinantes.