INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE INGENIERA CAMPUS GUANAJUATO

Manual de prcticas

Qumica Heterocclica

AUTORES: Dr. Joaqun Gonzlez Marrero M. en C. Mariana Macas Alonso Dr. Manuel Velzquez Ponce

PRLOGO La Qumica Orgnica Heterocclica es una subdisciplina de la Qumica Orgnica cuyo objeto de estudio son las molculas llamadas heterociclos. Los heterociclos son molculas orgnicas caracterizadas por la presencia de un anillo en cual al menos uno de sus eslabones es un heterotomo quien muy frecuentemente se trata de nitrgeno, oxgeno o azufre. En todas las universidades de prestigio del mundo donde se imparten las carreras farmacuticas se incluye esta materia, la cual se da en las modalidades terica y prctica. Para qu? Para alguien que haya tenido la curiosidad de investigar las estructuras de las molculas de los principios activos la respuesta es bastante simple, y es que un gran porcentaje de los frmacos usados en la teraputica tienen heterociclos en sus estructuras, incluso, en sus mecanismos de accin y en su interaccin con los receptores en el organismo tiene suma relevancia la presencia de este tipo de especies qumicas. Por supuesto, al igual que con otras ciencias experimentales, es esencial la instruccin en el laboratorio. De esta manera los estudiantes pueden verificar que la reactividad y la metodologa sinttica que se suelen ensear en el curso terico estn sustentadas por el trabajo experimental que miles de investigadores han llevado a cabo a lo largo de ms de cien aos. Y si bien el gusto por el conocimiento en algunos estudiantes pudiera representar la motivacin suficiente para emprender el camino hacia el estudio prctico de esta disciplina, ste tambin puede resultar en la adquisicin de ciertas competencias que pueden ser de suma utilidad desde el punto de vista laboral, por ejemplo, si el egresado de la carrera va a trabajar en la obtencin de principios activos, o bien la formulacin de formas farmacutica, en la investigacin de los mecanismos de accin de frmacos y en su diseo, etc.
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Adems el trabajo en el laboratorio, y en especial en los de las ciencias derivadas de la Qumica Orgnica, suele ser sumamente aleccionador en cuanto a la disciplina que se debe observar al estar interaccionando dentro de un lugar de este tipo y sobre todo en cuanto a la prevencin de accidentes y a la seguridad en general. La gran mayora de los heterociclos suelen obtenerse por sntesis, de all que sea esencial conocer la metodologa necesaria para la obtencin de esta clase de compuestos. Metodologas clsicas para generar anillos de tres, cuatro, cinco y seis miembros deben formar parte del respaldo de conocimientos tericos y prcticos del profesionista de las carreras de la farmacia. A ltimas fechas han surgido otro tipo de rutas para llegar a la generacin de heterociclos, sin embargo las tcnicas clsicas son cimiento de estas metodologas nuevas y su conocimiento puede derivar en despertar el inters por conocer esas nuevas metodologas lo que podra significar el origen de la inquietud por la especializacin en el rea. Algo similar a lo anterior se puede argumentar con respecto al conocimiento de la reactividad de los heterociclos, tan particular para cada tipo en especfico y que requiere un estudio constante y metodolgico. Los diversos heterociclos (en especial los aromticos) se comportan como nuclefilos o electrfilos dependiendo de si los electrones deslocalizados estn en un anillo de cinco o seis miembros. Adems las condiciones de reaccin suelen diferir de las usadas con los sistemas carbocclicos, lo que implica un entrenamiento continuo y metodolgico si se desea entender el por qu de cada una de las distintas condiciones de reaccin empleadas. Un tipo de molculas que ha venido a revolucionar el diseo de frmacos lo constituyen los compuestos de origen natural los cuales en un buen porcentaje tambin incluyen heterociclos en su estructura, baste recordar que tres aminocidos (el indol, la histidina y la prolina), las cuatro bases nitrogenadas del ADN (derivadas de pirimidina y purina) y las formas furanosa y piranosa de
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diversos monosacridos y sus formas dimricas y polimricas incluyen heterociclos en su estructura. Por otra parte muchos de los frmacos sintetizados en los ltimos aos estuvieron basados en un principio activo prototpico extrado de una planta u otra fuente natural, lo que nos hace recordar la importancia de la extraccin de molculas biolgicamente activas a partir de seres vivos y de las operaciones implicadas en esta extraccin. Cumarinas, algunos alcaloides, glicsidos, etc. implican la presencia de heterociclos en estas molculas encontradas en la naturaleza. La tecnologa farmacutica y la cosmtica tambin han hecho uso de los heterociclos y sus propiedades, como en el caso de la polivinilpirrolidona, tan utilizada en gran cantidad de formulaciones. Y si es verdad que este manual est dirigido a estudiantes de las carreras relacionadas con la farmacia y la qumica orgnica, es importante decir que los heterociclos tambin han incursionado en la revolucin de la industria de los materiales (como en el desarrollo de semi y superconductores), en la fabricacin de pesticidas y en la de los colorantes. Este Manual de Prcticas de Qumica Heterocclica incluye al menos un ejemplo experimental de cada uno de los temas que estn incluidos en el programa terico de la materia impartida en el Instituto Politcnico Nacional en las escuelas Unidad Profesional Interdisciplinaria e Ingeniera Campus Guanajuato (UPIIG) y Unidad Profesional Interdisciplinaria de Biotecnologa e Ingeniera (UPIBI) que imparten la carreara de Ingeniera Farmacutica. En su mayora trata sobre la sntesis de heterociclos aunque tambin se han incluido ejemplos de reactividad y de obtencin a partir de fuentes naturales. Se ha trabajado en su elaboracin de tal manera que se ha reducido al mnimo la cantidad de reactivos necesarios con miras a obtener la menor cantidad de residuos y desechos posibles y de esta manera tener una clase prctica ms amigable con el medio ambiente. As mismo se hacen las recomendaciones pertinentes de tal manera que se incremente al mximo la seguridad para los estudiantes y maestros, pero tambin haciendo
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patente que la qumica es una ciencia en la que frecuentemente hay que lidiar con condiciones que requieren de toda la seriedad y atencin en lo que se est realizando. Finalmente queremos expresar nuestros mejores deseos para los estudiantes y profesores que van a trabajar con este manual ya que nuestra intencin es brindar una herramienta que sea suficientemente sustanciosa y til para un curso prctico de la mencionada asignatura a nivel superior. Cualquier sugerencia, correccin o comentario ser bienvenido por sus servidores con el fin de que a lo largo del tiempo este manual mejore y se conserve actualizado. Los Autores.

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NDICE
No. de Prctica Prctica 1 Prctica 2 Prctica 3 Prctica 4 Prctica 5 Prctica 6 Prctica 7 Prctica 8 Prctica 9 Prctica 10

Descripcin. Epoxidacin del colesterol: 3-hidroxi-5,6epoxicolesterol Sntesis de 3-(1-azetidinil) propionato de etilo Sntesis de furfural Obtencin de la 1-fenil-3-metil-pirazolin-5-ona Preparacin del sistema indol Sntesis de 3,5-dietoxicarbonil-2,6-dimetil-4fenildihidropiridina y su aromatizacin a 3,5dietoxicarbonil-2,6-dimetil-4-fenilpiridina. (Dos sesiones) Sntesis de 4,5-dihidro-3,5-difenilisoxazol (Dos sesiones) Sntesis de 7-hidroxi-4-metilcumarina (4metilumbeliferona) Sntesis de 2-fenilimidazo[1,2-a]piridina y de su derivado 3-nitrosado Extraccin de los alcaloides de la Ua de gato

Pg. 7 12 18 26 31 36 41 48 53 59

PRCTICA 1 EPOXIDACIN DEL COLESTEROL: 3-HIDROXI-5,6EPOXICOLESTANO

1.1 OBJETIVOS a) Obtener a partir del colesterol, mediante una reaccin de epoxidacin, un compuesto heterociclo de 3-miembros y un heterotomo (oxirano). b) Que el alumno se familiarice con el uso de los percidos.

1.2 INTRODUCCIN La reaccin de epoxidacin es la formacin de un anillo de oxirano (epxido) a partir de un alqueno. Existen varios reactivos que pueden realizar esta transformacin, como puede ser el caso de la epoxidacin de Sharpless de alcoholes allicos, que usa cido tartrico para epoxidar de forma estereoselectiva. Los percidos son sustancias extremadamente tiles en la Qumica Orgnica, especialmente en la epoxidacin de alquenos. El principal inconveniente es que normalmente los percidos hay que prepararlos in situ mediante la reaccin del cido carboxlico correspondiente con perxido de hidrgeno. Uno de los reactivos ms empleado en esta transformacin es el cido meta-cloroperbenzico (mCPBA), debido a que es una sustancia cristalina, relativamente estable y fcil de manejar. Esta prctica ilustra el uso del m-CPBA para la epoxidacin del colesterol (3-hidroxicolestano) para dar el -epxido correspondiente. El colesterol es el esteroide ms abundante y se encuentra prcticamente en todos los tejidos animales, y recientemente ha adquirido notoriedad debido a su relacin con la salud humana. Niveles elevados de colesterol en sangre estn asociados generalmente con el endurecimiento de las arterias (arteriosclerosis). Algunos esteroides, tanto naturales como sintticos, tienen importantes efectos fisiolgicos. Progesterona y estrona son las hormonas sexuales femeninas, y la
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testosterona es la hormona sexual masculina; son responsables del desarrollo de los caracteres sexuales secundarios. Fluorocortisona se usa para el tratamiento de procesos inflamatorios como la artritis. El ergosterol al ser irradiado con luz ultravioleta se convierte en la vitamina D2.
O O OH

O Progesterona

HO Estrona

O Testosterona

O O OH h O F Fluorocortisona HO Ergosterol HO Vitamina D2

Figura 1.1 Ejemplos de algunos esteroides importantes.

1.3 REACCIN

m-CPBA / CH2Cl2 HO

HO

1.4 PARTE EXPERIMENTAL 1.4.1 MATERIAL Y EQUIPO Cantidad 2 1 1 1 2 1 1 1 1 1 1 1 3 1 1 1 1 Descripcin Pinzas de 3 dedos con su nuez Soporte universal Matraz de fondo redondo de 100 mL Refrigerante Recto Mangueras Bomba de agua Agitador magntico (Mosca) Parrilla Vaso de precipitados de 25 mL Vaso de precipitados de 100 mL embudo de separacin Aro metlico Matraz Erlenmeyer de 250 mL Esptula Varilla de vidrio Filtro de vidrio Vidrio de reloj

1.4.2 REACTIVOS Cantidad 1.93 g 1.6 g 10 mL 20 mL 5 mL 10 g 18 mL 7.5 mL 2.5 mL Colesterol cido meta-cloroperbenzico Bisulfito de sodio (Disolucin saturada) Bicarbonato de sodio (Disolucin saturada) Cloruro de sodio (Disolucin saturada) Sulfato de Sodio anhidro Acetona Hexano Acetato de etilo Descripcin

1.4.3 PROCEDIMIENTO Poner 1.93 g de colesterol (5.0 mmol) en un matraz redondo de 100 mL y aadir 20 mL de diclorometano (disolucin 1). Calentar si es preciso, y luego dejar enfriar. Colocar 1.1 equivalentes de m-CPBA (Nota 1) en un vaso de precipitados de 25 mL, aadir 4 mL de diclorometano y calentar suavemente hasta que se disuelva el cido (disolucin 2). Verter lentamente la disolucin 2 sobre la de colesterol, equipar el matraz redondo con un refrigerante recto, y poner la reaccin a reflujo durante 1 hora o hasta que la reaccin se haya completado (CCF). Despus de este periodo, dejar enfriar a temperatura ambiente y aadir 10 mL de una disolucin saturada de bisulfito de sodio. Transferir la mezcla a un embudo de separacin, y lavar la fase orgnica con una disolucin saturada de bicarbonato de sodio (2 x 10 mL), 2 x 5 mL de agua, y finalmente con 5 mL de una disolucin saturada de NaCl (Nota 2). Aadir sulfato de sodio anhidro a la disolucin, filtrar y eliminar el disolvente a vaco. Recristalizar el residuo en una mezcla acetona-agua (9:1). Filtra los cristales y calcula el rendimiento y el punto de fusin. Analiza una muestra de tu producto mediante cromatografa en capa delgada, comparndola con una muestra de colesterol, eluyendo la placa con la mezcla hexano: acetato de etilo 3:1. Revelar con iodo.
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Nota 1. Algunos percidos son explosivos; el reactivo usado en la presente prctica es particularmente estable y seguro de manejar. Nota 2. Frecuentemente se forman emulsiones durante la extraccin. El mejor procedimiento a seguir es el siguiente: se adiciona un poco de diclorometano y disolucin saturada de NaCl. Si despus de agitar no se separan las capas, adicionar un poco ms de disolucin saturada de NaCl.

1.5 CUESTIONARIO 1. Escriba un mecanismo de reaccin para la epoxidacin de un alqueno con un percido Cules son los posibles productos que se generan en la reaccin? 2. Por qu el -epxido es el producto mayoritario (o nico producto) formado en la epoxidacin del colesterol? 3. Cul es el papel del bisulfito de sodio que se aade al final de la reaccin? 4. Cul es la funcin del lavado con bicarbonato de sodio?

1.6 BIBLIOGRAFA a) Fieser, L. F., & Fieser, M., (1959) Steroids. New York: Reinhold Publishing Corporation. b) Harwood, L. M., Moody, C. J., & Percy, J. M., (1999). Experimental Organic Chemistry: Standard and Microscale. 2a Edition. London: Blackwell Science. c) Brougham, P., Cooper, M. S., Cummerson, D. A., Heaney, H., & Thompson, N., (1987). Oxidation Reactions Using Magnesium Monoperphthalate: A

Comparison with m-Chloroperoxybenzoic Acid. Synthesis, 1015-1017.

PRCTICA 2 SNTESIS DE 3-(1-AZETIDINIL)PROPIONATO DE ETILO

2.1 OBJETIVOS a) Sintetizar el 3-N-(3-hidroxipropil)iminodipropionato de dietilo. b) Sintetizar el 3-(1-azetidinil)propionato de etilo. 2.2 INTRODUCCIN Si bien los heterociclos de cuatro miembros no son precisamente las estrellas en el firmamento de las molculas heterocclicas existen algunos ejemplos de inters sinttico y de aplicacin farmacolgica que no hacen tan desdeable su estudio en cuanto a su reactividad y a su estabilidad en medios cidos y bsicos, y tambin con respecto a la metodologa sinttica que se puede seguir para conseguir este tipo de compuestos. Vayamos por partes. Los ejemplos ms sencillos de este tipo de molculas lo constituyen las azetidinas, los oxetanos y los tioetanos, donde los tres tipos de molculas tienen en comn el estar completamente saturados y poseer nicamente un heterotomo. Por otra parte tambin son dignas de mencionarse las molculas en las cuales existen dos heterotomos como los diazetidinas o bien con insaturaciones como el oxeto, el tieto y el 2,3-dihidroazeto. Volviendo nuevamente a los heterociclos con un solo heterotomo existen notables ejemplos de lactonas, tiolactonas y lactamas, que consisten en los mencionados anillos pero con uno de los carbonos (adyacentes al heterotomo) oxidado. El ejemplo ms notable de la utilizacin de heterociclos de cuatro miembros (y que precisamente forman parte de este ltimo grupo descrito) lo constituyen sin duda los compuestos betalactmicos que son parte de la estructura de una gran cantidad de antibiticos del tipo penicilina y cefalosporina.

La sntesis de los heterociclos de cuatro miembros suele implicar el uso de reacciones de cicloadicin [2+2]. Estas reacciones estn trmicamente prohibidas y fotoqumicamente permitidas, sin embargo cuando se implica una estructura de
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tipo cetena o similar entonces se habla de una [2+2+2], ya que otro doble enlace auxilia con la presencia de dos electrones de tal manera que puede entonces llevarse a cabo la reaccin en condiciones trmicas. 2.3 REACCIONES

HO(CH2)3NH2 + 2 H2C

CHCO2Et

HO(CH2)3N(CH2CH2CO2Et)2 Cl(CH2)3N(CH2CH2CO2Et)2 + HCl + SO2

HO(CH2)3N(CH2CH2CO2Et)2 + SOCl2

Cl(CH2)3N(CH2CH2CO2Et)2

Na2CO3

N(CH2)2CO2Et

H2C

CHCO2Et

2.4 MATERIAL, EQUIPO Y REACTIVOS 2.4.1 MATERIAL Y EQUIPO Cantidad 2 2 1 1 1 1 2 1 2 1 1 1 1 Descripcin Matraces esmerilados 14/23 de 20 mL Matraces Erlenmeyer de 100 mL Embudo de adicin de 10 mL con junta esmerilada 14/23 Placa de agitacin magntica Esptula flexible Recipiente de plstico tipo bowl Pinzas de tres dedos con nuez para refrigerante Soporte universal Pipetas graduadas de 10 mL Pipeta graduada de 1 mL Refrigerante recto 14/23 Barra de agitacin magntica Unin triple esmerilada 14/23

2.4.2 REACTIVOS

Por Equipo
Cantidad 1.5 g 5g 10 mL 0.1 mL 3.0 g 3.5 g 2g 0.5 g 10 g 0.5 Ml 20 g Descripcin 3-amino-1-propanol Acrilato de etilo Cloroformo N,N-dimetilformamida Cloruro de tionilo Bicarbonato de sodio Carbonato de sodio anhidro Pentaeritritol Sulfato de sodio anhidro Ftalato de dietilo Hielo

2.4.3 PROCEDIMIENTO Una solucin de 1.5 g de 3-amino-1-propanol en 5 g de acrilato de etilo es reflujada por 2 horas en un matraz redondo de 20 mL. Pasado este tiempo se utiliza el rotaevaporador con el fin de remover el exceso de acrilato de etilo. Este mtodo suele dar un rendimiento del 99% de 3-N-(3-

hidroxipropil)iminodipropionato de dietilo crudo. A continuacin se disuelve el crudo obtenido en 10 mL de cloroformo conteniendo previamente 0.1 mL de N,N-dimetilformamida. Despus de esto y con ayuda de un embudo de adicin de junta esmerilada se adicionan gota a gota 2.62 g de cloruro de tionilo. La temperatura de la reaccin es mantenida por debajo de los 40 grados Celsius mediante un bao de agua con hielo y procurando que la adicin sea cuidadosa (Nota 1). Una vez completada la adicin la mezcla de reaccin es agitada por 30 min. a temperatura ambiente y vertida lentamente en una suspensin de 3.4 g de bicarbonato de sodio en 10 mL de agua (Nota 2). La fase
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orgnica es separada (Nota 3) y secada con ayuda de sulfato de sodio anhidro, y el disolvente es retirado con ayuda del rotaevaporador temperatura del bao por debajo de los 50C, obtenindose aproximadamente cerca de un 97% de rendimiento de 3-N-(3-cloropropil)iminodipropionato de dietilo. Una mezcla de 1 g de este ltimo material crudo obtenido con 2 g de carbonato de sodio anhidro, y 0.1 g. de pentaeritritol (Nota 4) previamente disuelto en 0.2 mL de ftalato de dietilo es colocada dentro de un matraz redondo de 20 mL equipado una cabeza de destilacin a vaco y agitacin magntica. El sistema es evacuado a travs de una trampa con capacidad suficiente para contener 0.5 mL de lquido y entonces el producto es destilado a presin reducida (10-15 mm) a partir de la suspensin en agitacin con ayuda de una mantilla de calentamiento. La temperatura de destilacin debe ser mantenida por debajo de los 150C, esto es para minimizar la codestilacin de ftalato de dietilo. El destilado es colectado hasta que la temperatura en la cabeza de destilacin ya no se pueda mantener por debajo de los 150C. Una redestilacin del producto crudo resultante utilizando una columna Vigreux da como rendimiento aproximado entre 57% a 68% de 3-(1azetidinil)propionato de etilo, p. eb. 86C a 87C (12 mm).

Nota 1. Si la temperatura de reaccin no es controlada, se forma un subproducto con aspecto de alquitrn. Disolviendo el aminocloruro en ter de petrleo, la impureza es separada como un alquitrn insoluble. Nota 2. Durante la neutralizacin se produce la formacin de espuma, por lo que este proceso se realiza mejor en un vaso de precipitados de 50 mL con agitacin vigorosa. Nota 3. Cualquier exceso de sal insoluble debe ser filtrado de la mezcla de reaccin antes de que la fase clorofrmica sea separada. Nota 4. La presencia de compuestos hidroxlicos parece ser necesaria para asegurar la reproducibilidad de este paso, y se ha encontrado empricamente que el pentaeritritol es muy efectivo para este propsito.

2.5 CUESTIONARIO 1. En la introduccin se mencion que las cicloadiciones [2+2] estn prohibidas trmicamente pero permitidas desde el punto de vista fotoqumico. Explique a que se debe esto. 2. Investigue la estructura de un compuesto betalactmico tipo penicilina de administracin oral y otro betalactmico inhibidor de las betalactamasas y explique por qu su ingesta combinada genera un efecto sinrgico 3. Por qu razn los heterociclos de cuatro miembros anlogos al ciclobutadieno son sumamente inestables? Y por qu, aunque menos inestables, los compuestos heterocclicos de cuatro miembros con una insaturacin son ms inestables que sus anlogos completamente saturados? 4. La azetidina en presencia de cido clorhdrico acuoso se abre generando un compuesto lineal bifuncional, a qu se debe esto? Cul es el compuesto formado? 5. Plantea una metodologa para la obtencin de azetidina utilizando como materia prima el producto obtenido en esta prctica.

2.6 BIBLIOGRAFA a) Wadsworth, D. H., (1988). Azetidine. Organic Synthesis Collective, 6, 75. Versin en lnea: http://orgsyn.org/orgsyn/pdfs/CV6P0075.pdf b) Gilchrist, T. L., (1997). Heterocyclic Chemistry. 3a Edition. New York: Addison Wesley Longman Limited. c) Joule, J. A., & Mills, K., (2000). Heterocyclic Chemistry. 4a Edition. London: Blackwell Publishing Oxford.

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PRCTICA 3 OBTENCIN DE FURFURAL

3.1 OBJETIVOS a) Obtener a partir de diferentes productos naturales, por hidrlisis de los pentosanos seguido seguida de una deshidratacin de pentosas en medio cido, un compuesto heterociclo de 5-miembros y un heterotomo (furfural). b) Obtener un compuesto heterocclico de 5 miembros con un heterotomo (furfural), a partir de diferentes productos naturales a travs de la hidrlisis de pentosanos seguida de una deshidratacin de pentosas en medio cido. c) Identificar el producto obtenido mediante varias reacciones de identificacin. 3.2 INTRODUCCIN Los residuos slidos orgnicos producidos en la transformacin de vegetales constituyen una de las principales fuentes de obtencin de productos qumicos como aceites esenciales empleados en la industria de la perfumera, flavonoides, hesperidina y naringina empleados en la industria farmacetica y carotenoides como pigmentos naturales. En esta prctica se obtendr furfural, que es un aldehdo aromtico derivado de varios subproductos de la agricultura como maz, avena o trigo. El nombre furfural proviene de la palabra latina furfur, "salvado", en referencia a su fuente comn de obtencin. Los productos de hidrogenacin del furfural tienen diversos usos en la industria, por ejemplo el 2-metilfurano es extrado del crisantemo y es usado para la sntesis de pesticidas. El tetrahidrofurano es usado principalmente como material crudo para fibras expandibles y elastmeros de poliuretano y como disolvente. El alcohol furfurlico, es uno de los productos de reaccin ms importantes con diversas aplicaciones en la industria como un intermediario qumico en la manufactura de lisina, vitamina C, lubricantes, agentes dispersantes y plastificantes. (Esquema 1)

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O Furano O FFA CHO O FOL CH2OH

O THF

OH BL

O TFL

CH2OH

HO 1,5-PD

OH

O CH3 2-MF

O CH3 2-MHF

O PN

OH 2-POL

Esquema 3.1. Productos de hidrogenacin del furfural. FFA, furfural; THF, tetrahidrofurano; BL, n-butanol; FOL, furfuril alcohol; TFL, tetrahidrofurfuril alcohol; 1,5-PD, 1,5-pentanodiol; PN, 2-pentanona; 2-MHF, 2-metiltetrahidrofurano; 2-MF, 2-metilfuranp; 2-PL, 2-pentanol. Los nitrofuranos (derivados del 5-nitrofurfural) (Figura 3.1) son compuestos antimicrobianos efectivos frente a bacterias tanto Gram-positivas como Gramnegativas y frente a protozoarios como el trichomona y el giardia lamblia

responsables de las infecciones del tracto urinario e intestinales respectivamente. No se conoce su mecanismo exacto de accin, pero se piensa que inhiben una serie de sistemas enzimticos bacterianos daando el DNA. La actividad antibacterial de estos compuestos est relacionada con la presencia del grupo nitro y de un doble enlace C=C.
O O N O N N H Furazolidona O O N O S O N N H Nifuratel NO2 O O2N O NH H2N N H N Nifurzide O2N O S HN N O NO2 O O N O HN N H Nifuroxazida OH O

Nitrovin

Figura 3.1 Derivados del 5-nitrofurfural 12

3.3 ACTIVIDADES PREVIAS Revisar la reactividad de los dicarbonlicos.

1.- Buscar las propiedades fsicas (punto de fusin, ebullicin, aspecto y color) de los reactivos a utilizar y productos obtenidos. 2.- Investigar la toxicidad de los reactivos y productos. 3.4 REACCIN
H O H OH OH

H O

O H OH H H

H OH

OH H OH H H O H O H

O H OH H H

OH H H H O H

H+
O

OH

OH H O CHO

OH

PENTOSANO

OH O Pentosa

Furfural

3.5 PARTE EXPERIMENTAL 3.5.1 MATERIAL Y EQUIPO Cantidad 5g 1 1 1 1 3 5 Descripcin Cscara de cacahuate o de coco, olotes fresco, hojuelas de trigo, salvado, etc. Matraz de fondo redondo de 250 mL Probeta de 30 mL Equipo de destilacin Mechero (o placa calefactora con agitacin) Perlas de ebullicin (o agitador magntico) Tubos de ensayo

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3.5.2 REACTIVOS Cantidad 12 mL 30 mL Descripcin cido sulfrico concentrado Agua Disolucin 2,4-dinitrofenilhidrazina (Disolver 0.4 g de 2,40.5 mL dinitrofenilhidrazina en 2 mL de cido sulfrico concentrado y con precaucin agregar 3 mL de agua hasta que se disuelva y agregar 12 mL de etanol) 0.5 mL 0.5 mL Anilina Reactivo de Molisch (Disolver 0.5 g de -naftol en 10 mL de etanol 95%) Reactivo de Selivanoff (Disolver 0.05 g de resorcina en 100 mL de HCl 3M) Oleum (cido sulfrico/cido actico glacial/agua 8/32/160) Hexano/Acetato de etilo 7/3

0.5 mL

Revelado Cmara de elucin

3.5.3 OBTENCIN DE FURFURAL a) En un matraz redondo de 250 mL colocar 5 g de olote finamente molido y aadir una disolucin de 12 mL de cido sulfrico concentrado en 30 mL de agua. Cuidado! Al preparar el cido sulfrico diluido primero poner los 30 mL de agua y despus adicionar el cido sulfrico concentrado. b) Adaptar al matraz que contiene la mezcla de reaccin un equipo de destilacin. c) Calentar la mezcla a ebullicin suave. OJO: no llevar le destilacin a sequedad para evitar la carbonizacin. d) Colecte el destilado hasta obtener un volumen de 20 mL a 25 mL. e) Con el destilado efectu las pruebas que se indican a continuacin.

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Nota 1. El cido sulfrico es oxidante y corrosivo y puede ocasionar severas quemaduras por lo que es necesario emplear lentes de seguridad y guantes. Nota 2. Evitar la inhalacin directa del destilado, ya que presenta el olor irritante caracterstico del furfural.

3.5.4 ENSAYOS DE IDENTIFICACIN a) Cromatografa en capa delgada (CCD). En la base de una placa, aproximadamente a un centmetro de la base colocar, con ayuda de un capilar una pequea muestra del destilado obtenido en forma de mancha redonda no muy concentrada. Eluir la placa en una cmara cromatogrfica con la mezcla de disolventes hexano/acetato de etilo (7:3). Para ver los diferentes componentes en el soporte slido una vez separados, Observar bajo luz UV a 254 nm o revelar la placa adicionando oleum (mezcla de cido sulfrico, cido actico glacial y agua 8:32:160) y calentando en la estufa a 120C. De esta manera aparecern en la placa diferentes manchas segn la complejidad de la mezcla de partida. Se denomina Rf a la distancia recorrida por cada componente de la mezcla dividido por la distancia recorrida por el disolvente. b) Formacin de 2,4-dinitrofenilhidrazona. En un tubo de ensayo colocar 1 mL del destilado y adicionar una disolucin de 2,4-dinitrofenilhidrazina. c) Formacin de la imina. En un tubo de ensayo colocar 1 mL del destilado y adicionar 1 gota de anilina. d) Reaccin de Molish-Udransky. La prueba de Molish est basada en la condensacin de furfural con el alfa-naftol, dando un producto violeta. Colocar en el tubo de ensayo correspondiente 1 mL de la disolucin de furfural y agregar 2 gotas del reactivo de Molish.
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e) Reaccin de Seliwanoff. Est basada en la condensacin del furfural con el resorcinol dando un color desde rojo a rosa. Colocar en el tubo de ensayo 1 mL del destilado, agregar 0.5 mL del reactivo de Seliwanoff y mezclar. Calentar en bao mara a ebullicin por 2 min. Con los resultados obtenidos en las pruebas de identificacin del furfural, construya la siguiente tabla: Compuesto Reactivo CCD 2,4O O H

Observaciones Rf=

Producto obtenido

dinitrofenilhidrazina Piridina Reactivo de Molish Reactivo de Seliwanoff

furfural

3.6 DESECHOS Los residuos obtenidos en las pruebas de identificacin, as como el eluyente residual empleado en la cromatografa debern desecharse en los recipientes marcados como Residuos Orgnicos No Clorados. El furfural obtenido por todo el grupo deber almacenarse en un solo recipiente de vidrio mbar debidamente etiquetado. Los datos en la etiqueta deben incluir: Grupo, Seccin, Nombre del compuesto, Estructura, Peso molecular, Punto de ebullicin, Rf (sistema de elusin y revelador). 3.7 CUESTIONARIO a) Cul es la diferencia entre compuestos bacteriostticos y bactericidas? b) Proponga un mecanismo de reaccin que explique la formacin de furfural a partir de pentosas. c) Qu diferencia tiene el furano con el pirrol y el tiofeno?

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d) Por qu es el furano el menos aromtico? e) Con que sustancia se polimeriza el furano? 3.8 BIBLIOGRAFA a) Koutinas, A. A., Wang, R. H., & Webb, C., (2007). The biochemurgist Bioconversion of agricultural raw materials for chemical production. Biofuels, Bioproducts and Biorefining, 1, 2438. b) a) Rao, R. S., Baker, R. T. K., & Vannice, M. A., (1999). Furfural hydrogenation over carbon-supported copper. Catalysis Letters, 60, 5157; (b) Kijenski, J., Winiarek, P., Paryjczak, T., Lewicki, A., & Mikoajska, A. (2002). Platinum deposited on monolayer supports in selective hydrogenation of furfural to furfuryl alcohol. Applied Catalysis A: General, 233, 171182; (c) Baijun, L., Lianhai, L., Bingchun, W., Tianxi, C., & Iwatani, K. (1998). Liquid phase selective hydrogenation of furfural on Raney nickel modified by impregnation of salts of heteropolyacids. Applied Catalysis A: General, 171, 117-122. c) Vardanyan, R., & Hruby, V., (2006). Synthesis of Essential Drugs. 1a Edition. London: Elsevier. d) Para ver el mecanismo: a) Bonner, W. A., & Roth, M. R, (1959). The Conversion of D-Xylose-1-C14 into 2-Furaldehyde--C14. Journal of the American Chemical Society, 81, 5454-5456; b) Streitwieser, A. Jr. & Heathcock, C. H., (1979). Qumica Orgnica. Mxico: Interamericana; c) vila Zrraga, C., Garca Manrique, I., Cruz Gaviln Garca, F., Len Cedeo, J. M., Mndez Stivalet, G., Prez Cendejas, Ma. A., Rodrguaz Arguello, G., Salazar Vela, A. A., Snchez Mendoza, E., Santos Santos, R., & Soto Hernndez, M., (2001). Qumica Orgnica. Experimentos con enfoque ecolgico. 1a Primera edicin. Mxico: Direccin General de Publicaciones y Fomento Editorial. UNAM. e) Rappaport, Z., (1966). Handbook of Tables for Organic Compounds Identification. 3a Edition, pp. 147. (Derivados del Furfural) f) Gonnert, R., (1972). Arzniem.-Forsch, 22, 1563-1642. (Nitrofurtimox)
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PRCTICA 4 OBTENCIN DE LA 1-FENIL-3-METIL-PIRAZOLIN-5-ONA

4.1 OBJETIVOS a) Efectuar la formacin de un heterociclo de cinco miembros con nitrgenos en las posiciones 1,2. b) Obtener 1-fenil-3-metil-5-pirazolona a partir de acetoacetato de etilo y fenilhidrazina. c) Revisar el inters biolgico de las pirazolonas. 4.2 INTRODUCCIN Las pirazolonas son los derivados ms importantes del pirazol. Un ejemplo es la antipirina es uno de los frmacos ms antiguos, que se sigue usando en pequea cantidad aun en nuestros das, y cuyo nombre deriva de sus propiedades antipirticas. La butazolina es otra pirazolona tautmera que se usa como antiinflamatorio en padecimientos reumticos, pero tiene efectos secundarios peligrosos. Algunos colorantes de pirazolona, como la tetrazina que es un colorante amarillo para lana, han ganado importancia comercial en los ltimos aos. Un ejemplo es la 3-metil-1-fenilpirazolin-5-ona, intermediaria en la sntesis de antipirina, puede tener varias formulas tautmeras y produce un colorante verde-negrusco con 4nitroso-dimetelanilina o con 4- aminodimetilanilina y cloruro de plata en presencia de luz. Este tipo de proceso es de gran importancia.

N forma CH

HO

N forma OH

HO

NH forma NH

Figura 4.1 Formas tautomricas de la 1-fenil-3-metil-4,5-dihidropirazolin-5-ona.

Los mtodos de obtencin de pirazoles se basan en la adicin de una especie que contenga el enlace O-N o N-N con un electrfilo con el nivel de oxidacin deseado. El mtodo ms general, aplicable en la mayora de los casos, para la preparacin
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de derivados de pirazoles, consiste en la adicin de hidroxilamina, hidracina o una hidracina monosustituida, a un compuesto 1,3 dicarbonlico, o un precursor de dicha especie. La reaccin se efecta mediante un intermediario de cetoxima o hidrazona que subsecuentemente experimenta la ciclizacin. Cuando se hace reaccionar un compuesto dicarbonlico asimtrico con hidroxilamina o una hidrazina monosustituida se forman mezclas de productos regioisomricos. La formacin de estas mezclas suele ser la principal desventaja del mtodo; no obstante ste ha sido muy empleado por la facilidad con que se pueden llevar a cabo las reacciones. 4.3 ACTIVIDADES PREVIAS 1. Revisar la reactividad de los dicarbonlicos.

2.- Buscar las propiedades fsicas (punto de fusin, ebullicin, aspecto y color) de los reactivos a utilizar y productos obtenidos. 3.- Investigar la toxicidad de los reactivos y productos. 4.4 REACCIN

O + OEt NHNH2

NH

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4.5 MATERIALES Y REACTIVOS 4.5.1 MATERIAL Y EQUIPO Cantidad 1 1 2 1 1 2 1 1 1 1 1 1 2 1 1 1 1 Descripcin Matraz redondo de 100 mL con junta esmerilada 14/23 Refrigerante recto con mangueras con junta

esmerilada 14/23 Termmetro -10C a 400C Esptula Agitador de vidrio Pinzas de tres dedos con nuez Probeta de 10 mL Bao mara Parrilla de calentamiento Vidrio de reloj Pipeta de 5 mL Agitador magntico Vaso de precipitados de 100 mL Vaso de precipitados de 250 mL Embudo de vidrio de tallo corto Papel filtro Embudo Bchner con manguera

4.5.2 REACTIVOS Cantidad 50 mL 50 mL 3.1 mL 12.4 mL Reactivo ter etlico Etanol Acetoacetato de etilo Fenil hidracina

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4.5.3 PROCEDIMIENTO En un matraz redondo de 100 mL con junta esmerilada 14/23, coloque un agitador magntico, aada 3.2 g (3.1 mL) de acetoacetato de etilo y 2.7 g (2.4 mL) de fenilhidrazina, monte un sistema de reflujo y caliente la mezcla de reaccin a ebullicin durante 1 hora, con una parrilla de calentamiento provista de agitacin magntica. Una vez terminado el tiempo de reaccin desmonte su sistema y destile el etanol que se obtiene como subproducto a presin reducida utilizando un rotavapor. Enfre la mezcla de reaccin y virtala en 40 mL de ter etlico fro contenido en un vaso de precipitado de 100 mL, raspando las paredes del recipiente y agitando lentamente con la varilla de vidrio, hasta que el producto precipite por completo. Separe el slido por filtracin al vaco y lvelo con 10 mL de ter etlico frio, disuelva su producto de reaccin en 5 mL de etanol, caliente suavemente de ser necesario y adicione una pequea cantidad de carbn activado, filtre la solucin para retirar el carbn activado y enfri la solucin, adicione 5 mL de agua fra y agite suavemente raspando las paredes del recipiente, finalmente separe los slidos por filtracin. Determine el punto de fusin y el rendimiento. 4.6 CUESTIONARIO 1.- Es necesario destilar el etanol al final de la reaccin, cual es la razn? 2.- Qu producto se esperara si se realizara la reaccin entre acetilacetona y sulfato de hidracina? 3.- Qu pasara si no se utiliza carbn activado al realizar la cristalizacin? 4.7 BIBLIOGRAFA a) Acheson, R. M., (1976). An introduction to the Chemistry of heterocyclic Compounds. 3 Edition. London: John Wiley & Sons, Inc. b) Joule, J. A., & Mills, K., (2000). Heterocyclic Chemistry. 4 a Edition. London: Blackwell Publishing Oxford.

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c) vila Zrraga, C., Garca Manrique, I., Cruz Gaviln Garca, F., Len Cedeo, J. M., Mndez Stivalet, G., Prez Cendejas, Ma. A., Rodrguaz Arguello, G., Salazar Vela, A. A., Snchez Mendoza, E., Santos Santos, R., & Soto Hernndez, M., (2001). Qumica Orgnica. Experimentos con enfoque ecolgico. 1a Primera edicin. Mxico: Direccin General de Publicaciones y Fomento Editorial. UNAM.

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PRCTICA 5 PREPARACIN DEL SISTEMA INDOL

5.1 OBJETIVOS a) Ilustrar la sntesis del sistema ndoles segn el mtodo de Fischer. b) Realizar la sntesis de 1,2,3,4-tetrahidrocarbazol segn el mtodo de Fischer. c) Demostrar la formacin de un anillo de cinco miembros fusionado a benceno. d) Ejemplificar la preparacin de heterocclos por medio de un procedimiento que involucra una transposicin sigmatrpica. 5.2 INTRODUCCIN El sistema indol consiste en un compuesto aromtico formado por un grupo fenilo fusionado a un heterociclo de cinco miembros que presenta un nitrgeno. Se encuentra presente en una gran variedad de compuestos naturales con actividad biolgica, como la hormona melatonina y el triptfano; un aminocido esencial, precursor de la serotonina que se ha encontrado en fluidos y tejido de vertebrados e invertebrados, involucrado en varios procesos del sistema nervioso central y perifrico. El sistema indol tambin lo podemos encontrar en medicamentos como la indometacina; un derivado de indol y uno de los ms potentes agentes antiinflamatorios no esteroidales. La indometacina es utilizada en el tratamiento de artritis reumatoide y trastornos afines como osteoartritis. Otros agentes medicinales que presentan la estructura del indol son el sumatriptn utilizado en el tratamiento de migraa y la vinblastina un agente anticancergeno entre otros.
MeO OH O N O Cl Indometacina Sumatriptn O HN S O N H NMe2

Figura 5.1 Agentes medicinales con estructura de indol. 23

Debido a la importancia del sistema indol en productos naturales, en la bioqumica y farmacologa humana y agentes medicinales como la indometacina, su sntesis ha sido ampliamente desarrollada y existe gran variedad de mtodos reportados en la bibliografa cientfica. La indometacina se obtiene mediante la sntesis de Fischer, que es el mtodo ms general, usado frecuentemente para la sntesis de todo tipo de ndoles y por lo tanto el mejor conocido. Consiste en la ciclacin de una fenil hidrazona de aldehdo o cetona catalizada por cidos de Lewis o Brnsted.
R3 N N R1 R2 Acido de Lewis o Calor / H+ (solvente) R3 R2 N R1

Figura 5.2 Sntesis de ndoles mediante el mtodo de Fischer

Existen tres problemas principales Fischer:

asociados con la sntesis de ndoles de

a) Las fenilhidrazonas meta-sustituidas dan mezcla de productos sustituidos. b) Las aril hidrazonas de cetonas asimtricas dan mezclas de ismeros. c) Dificultad para preparar acertadamente 5.3 ACTIVIDADES PREVIAS 1.- Buscar las propiedades fsicas (punto de fusin, ebullicin, aspecto y color) de los reactivos a utilizar y productos a obtener. 2.- Investigar la toxicidad de los reactivos y productos. 3.- Repasar las caractersticas de los rearreglos sigmatrpicos. 5.4 REACCIN
O + NHNH3Cl CH3CO2H + N H

oxofenilhidrazonas

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5.5 MATERIAL Y REACTIVOS 5.5.1 MATERIAL Y EQUIPO Cantidad 1 2 2 1 1 2 1 1 1 1 1 1 2 1 1 1 1 5.5.2 REACTIVOS Cantidad 1.5 mL 1.9 g 18 mL 10 mL Descripcin Ciclohexanona Clorhidrato de fenilhidrazina Acido actico glacial Etanol Agitador de vidrio Pinzas para refrigerante Matraces Erlenmeyer de 100 mL Pipeta graduada de 5 mL Pipeta graduada de 1 mL Vasos de precipitado de 250 mL Tapn de hule Termmetro Parrilla de calentamiento Refrigerante recto con junta esmerilada 14/23 Embudo de filtracin Agitador magntico Papel filtro Placa cromatogrfica de slice gel F254 Esptula Matraz redondo de 100 mL con junta esmerilada14/23 Bomba de agua Descripcin

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5.5.3 PROCEDIMIENTO En un matraz redondo de 100 mL con junta esmerilada 14/23 coloque 1.9 g de clorhidrato de fenilhidracina y 15 mL de cido actico glacial (Nota 1). Instale un sistema en posicin de reflujo y caliente la mezcla de reaccin hasta que alcance el punto de ebullicin, apague el calentamiento (Nota 2). Por la parte superior del refrigerante agregue lentamente con una pipeta de 1.5 mL (Nota 3) y contine el reflujo por 1 hora. Apague nuevamente el calentamiento y agregue por la parte superior 3 mL de cido actico y caliente nuevamente hasta alcanzar el punto de ebullicin. Enseguida vierta la solucin en un matraz Erlenmeyer de 100 mL que contenga 15 mL de agua fra. (Nota 4) Finalmente lleve la mezcla a temperatura ambiente y filtre el precipitado formado. Lave el slido con una mezcla 1:2 de cido actico-agua (6 mL) y posteriormente con agua fra (5 mL). Recristalice el producto de ser necesario en una mezcla etanol/agua y determine p.f. y rendimiento en porcentaje. de ciclohexanona

Nota 1: Tener cuidado al manipular el clorhidrato de fenilhidrazina y el cido actico Nota 2: El calentamiento tiene que ser suave ya que la ciclohexanona tiene un punto de ebullicin (55C) mucho ms bajo que el cido actico. Nota 3: La reaccin con la ciclohexanona es exotrmica asegrese de que la parrilla est apagada. Nota 4: Realizar esta manipulacin en la campana debido a que de liberan vapores de cido actico.

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5.6 CUESTIONARIO 1. Qu ocurre durante el calentamiento de la fenilhidrazina con la ciclohexanona? 2. Qu funcin desempea el cido actico en esta reaccin? 4. Cules son los subproductos de esta reaccin si es que existen? 6.- Puede usarse fenilhidrazina en lugar de su clorhidrato? 7.- Cual es el producto principal en caso de adicionar mayor cantidad de ciclohexanona? 5.7 BIBLIOGRAFA a) Joule, J. A., & Mills, K., (2000). Heterocyclic Chemistry. 4a Edition. London: Blackwell Publishing Oxford. b) vila Zrraga, C., Garca Manrique, I., Cruz Gaviln Garca, F., Len Cedeo, J. M., Mndez Stivalet, G., Prez Cendejas, Ma. A., Rodrguaz Arguello, G., Salazar Vela, A. A., Snchez Mendoza, E., Santos Santos, R., & Soto Hernndez, M., (2001). Qumica Orgnica. Experimentos con enfoque ecolgico. 1a Edicin. Mxico: Direccin General de Publicaciones y Fomento Editorial. UNAM.

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PRCTICA 6 SNTESIS DE 3,5-DIETOXICARBONIL-2,6-DIMETIL-4FENILDIHIDROPIRIDINA Y SU AROMATIZACIN A 3,5-DIETOXICARBONIL-2,6DMETIL-4-FENILPIRIDINA (DOS SESIONES)

6.1 OBJETIVOS a) Llevar a cabo la sntesis en dos etapas de un heterociclo aromtico de seis miembros con un heterotomo. b) Ilustrar con un proceso de xido-reduccin la aromatizacin de un heterociclo. 6.2 INTRODUCCIN Uno de los grupos de frmacos que ms se investigaron en su momento son las dihidropiridinas, las cuales funcionan como bloqueadores de los canales del in calcio. Estos frmacos se utilizan en el tratamiento de trastornos cardiovasculares como la angina, la hipertensin o la arritmia. Las dihidropiridinas interactan con los dominios helicoidales del canal de Ca2+ que contienen determinados residuos de aminocidos polares y no polares, e incluso se ha estudiado la importancia conformacional, el efecto isomrico de los sustituyentes sobre el arilo y su contribucin electrnica en la efectividad de esta interaccin. Las dihidropiridinas pueden ser sintetizadas mediante el procedimiento introducido por Hantzsch. Dicha sntesis de Hantzsch implica la reaccin multicomponente entre una molcula de aldehdo, dos de un ster acetoactico y una fuente de amoniaco (Figura 6.1).

NO2 O O O H O MeOH/NH4OH O O

NO2 O

N H O NH3 O

Nifedipina

Figura 6.1 Sntesis de dihidropiridinas de Hantzsch.

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6.3 REACCIONES 6.3.1 Obtencin de la dihidropiridina

O O O H

O EtOH/NH4OH

O NH3

N H

6.3.2 Aromatizacin de la dihidropiridina

O HNO3

N H

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6.4 PARTE EXPERIMENTAL 6.4.1 MATERIAL Y EQUIPO Cantidad 1 2 1 1 1 2 1 1 1 1 1 1 1 1 Agitador de vidrio Pinzas para refrigerante Matraz Esfrico de 100 mL Matraz Erlenmeyer de 125 mL Probeta de 20 mL Vasos de precipitado de 150 mL Tapn de hule Termmetro Anillo de fierro Refrigerante 24/40 Embudo Parilla con agitacin magntica Papel filtro Placa cromatogrfica de slica gel F254 Descripcin

6.4.2 REACTIVOS Cantidad 5.2 mL 2.0 mL 3.0 mL 20.0 mL 20.0 mL 6.4.3 PROCEDIMIENTO 6.4.3.1 SNTESIS DE LA DIHIDROPIRIDINA En un matraz baln de 100 mL, mezclar 2 mL de benzaldehdo, 5.2 mL de acetoacetato de etilo, 5 mL de etanol y 3 mL de NH4OH concentrado.
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Descripcin Acetoacetato de etilo Benzaldehdo Hidrxido de amonio Etanol cido ntrico al 20%

Se pone la mezcla de reaccin a reflujo y con agitacin por espacio de 2 horas. Enfre la solucin y virtala en un vaso de precipitados al cual se han agregado previamente 40 g de hielo. El aceite obtenido cristaliza, se filtra al vaco el producto crudo y se recristaliza de una mezcla etanol-agua (1:4), obteniendo un producto amarillo. Determine su punto de fusin y el rendimiento.

Nota: El manejo del hidrxido de amonio hgalo en la campana de extraccin. Recuerde que esta sustancia causa asfixia por inhalacin.

6.4.3.2 AROMATIZACIN DE LA DIHIDROPIRIDINA En un matraz redondo de 100 mL se disuelve 1.0 g de 3,5-dietoxicarbonil-2,6dimetil-4-fenildihidropiridina en 19 mL de una disolucin acuosa al 20% de HNO3. A continuacin se monta un sistema de reflujo, y se calienta la mezcla a 100C durante 60 min. Una vez transcurrido ese tiempo se enfra la reaccin en una mezcla de agua y hielo, y se aade Na2CO3 slido, hasta obtener un pH bsico. Cuando esto se consigue se lleva a cabo una extraccin del producto tratando la mezcla tres veces con un volumen equivalente de ter dietlico. Se renen las fases etreas y se seca con ayuda de Na2SO4 anhidro y posteriormente se llevan a sequedad mediante vaco con ayuda de una bomba de vaco. El residuo es disuelto en la mnima cantidad de etanol, y despus se aade agua hasta que precipite el producto final, que es de color blanco y cristalino. 6.5 CUESTIONARIO 1. En la sntesis de la dihidropiridina de Hatszch se usa como disolvente etanol porque como reactivo se usa acetoacetato de etilo. As mismo si se usara acetoacetato de metilo el disolvente a usar debera ser MeOH. Por qu? 2. Qu otra fuente de amoniaco puede utilizarse en lugar de hidrxido de amonio para llevar a cabo la sntesis de Hantzsch?

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3. Con que objeto se lleva a cabo la recristalizacin del producto obtenido en la sntesis de Hantzsch? 4. Considerando que se sustrae una molcula de hidrgeno del sistema dihidropiridina, qu tipo de proceso est ocurriendo en la aromatizacin? 5. Por qu el primer producto no es aromtico y el segundo s? 6.6 BIBLIOGRAFA a) Nogrady, T., & Weaver, D. F., (2005). Medicinal Chemistry: A Molecular and Biochemical Approach. 3a Edition. New York: Oxford University Press. b) Gilchrist, T. L., (1997). Heterocyclic Chemistry. 3a edicin. Essex (England): Addison Wesley Longman.

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PRCTICA 7 SNTESIS DE LA OXIMA DE 2,6-DIFENIL-1-HIROXI-PIPERIDIN-4ONA (DOS SESIONES)

7.1 ANTECEDENTES Los estudiantes necesitan tener los conocimientos siguientes: 1. Obtencin de compuestos carbonlicos ,-insaturados a partir de

condensaciones aldlicas cruzadas. 2. Reaccin de Michael y sintones dinucleoflicos. 7.2 OBJETIVOS a) 3.1 Ilustrar la sntesis de un compuesto carbonlico , -insaturado a partir de una reaccin de una condensacin aldlica cruzada de Claisen-Schmidt b) 3.2 Ilustrar la sntesis de un heterociclo no aromtico derivado de la piperidina a partir de un aceptor de Michael y un sintn dinucleoflico 7.3 INTRODUCCIN El anillo de piperidina se encuentra frecuentemente formando parte de muchos compuestos naturales con propiedades biolgicas importantes (Figura 7.1). Entre ellos, se encuentra la anabasina, que es un alcaloide de la planta del tabaco, muy relacionado con la nicotina. La conina est presente en la planta de cicuta, la bispidina y sus derivados se usan para tratar diferentes enfermedades cardacas, y la tomatidina es un alcaloide esteroidal presente en el tomate.

HN
N H N
NH

N H

NH

O H HO H

Anabasina Insecticida

Conina Semillas de la cicuta

Bispidina Anti-arrtmico

Tomatidina Tomate

Figura 7.1 Algunos compuestos naturales con anillo de piperidina. 33

Los compuestos que poseen el ncleo de piperidina, son de gran inters tanto biolgico como mdico, por lo que existen numerosas sntesis de este tipo de compuestos. Este tipo de compuestos incluyen medicamentos con efectos neurotrficos tanto en el sistema central como perifrico (anestsicos locales, bloqueadores de receptores M colinrgicos, analgsicos, etc.), o agentes que actan sobre el sistema cardiovascular (dilatadores coronarios, antiarrtmicos, antiespasmolticos, diurticos, broncolticos, etc). La reaccin de Michael es una de las reacciones ms verstiles en Sntesis Orgnica. Una de sus aplicaciones ms importantes es la sntesis de -amino cidos y sus derivados, as como de -amino cetonas que son importantes productos de partida en la sntesis de varios compuestos biolgicamente activos que poseen nitrgeno, como antibiticos. La versatilidad de esta reaccin es que pueden emplearse diversos N-nuclefilos (aminas alifticas y aromticas, amidas, carbamatos y azidas) y diferentes aceptores de Michael (enonas, acrilatos, nitrilos insaturados, amidas, sulfonas, fosfonatos, nitroalquenos, etc.). Existen numerosas aproximaciones sintticas al anillo de piperidina. Se ha reportado la adicin tipo Michael de hidroxilamina a compuestos ,-insaturados, tanto carbonilos como carboxilos. En el caso de cetonas , y , bisinsaturados, el producto obtenido es la correspondiente N-hidroxipiperidina. Esta es la reaccin que emplearemos en nuestra aproximacin sinttica. 7.4 REACCIN 7.4.1 Sntesis de la dibenzalacetona

O H + H3C

O CH3 + H

O NaOH (aq.) / EtOH

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7.4.2 Sntesis del 4,5-dihidro-3,5-difenilisoxazol

Ph HO NH2 Ph O KOH / EtOH Reflujo Ph N HO Ph N OH

7.5 PARTE EXPERIMENTAL 7.5.1 MATERIAL Y EQUIPO Cantidad 1 2 1 3 1 2 1 1 1 1 1 2 1 1 1 1 1 1 1 1 Descripcin Agitador de vidrio Pinzas de tres dedos Matraz redondo de 100 mL Matraz Erlenmeyer de 100 mL Probeta de 20 mL Vasos de precipitado de 100 mL Termmetro Anillo de hierro Refrigerante recto Embudo de vidrio Parrilla Pipetas de 1 mL Esptula Bomba de agua Embudo de extraccin Papel filtro Agitador magntico Bao mara Soporte universal Placa cromatogrfica de slica gel

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7.5.2 REACTIVOS Cantidad 0.4 g 0.72 g 30 mL 0.3 mL 0.8 mL 0.20 g 30 mL 20 mL 1.0 g 10 mL 1 7.5.3 PROCEDIMIENTO 7.5.3.1 SNTESIS DE DIBENZALACETONA En un matraz redondo de 100 mL se colocan 0.4 g de hidrxido de sodio y se disuelven en 4 mL de una mezcla 1:1 de agua destilada-etanol. La disolucin se enfra a 0C sobre un bao de agua-hielo, y se adicionan 0.3 mL de acetona, y 0.8 mL de benzaldehdo. Despus de agitar la mezcla durante 30 min., tiempo en el cual se forma un slido amarillo que posteriormente se convierte en un precipitado floculento, se filtra, y se lava el slido resultante con agua fra. El producto se recristaliza en alcohol etlico. Filtrar, secar, determinar el punto de fusin y sacar el rendimiento de la reaccin. Nota: Si al recristalizar el producto presenta una coloracin rojiza, neutralizar el exceso de hidrxido de sodio con una solucin de cido clorhdrico al 50% hasta obtener un pH de 7-8. Descripcin Hidrxido de sodio Hidrxido de potasio Etanol Acetona Benzaldehdo Hidrocloruro de hidroxilamina Diclorometano Disolucin saturada de cloruro de sodio Sulfato de sodio anhidro Mezcla hexano:acetato de etilo 2:1 Cmara de Iodo para revelar

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7.5.3.2 SNTESIS DE LA OXIMA DE 2,6-DIFENIL-1-HIROXI-PIPERIDIN-4-ONA A una disolucin de 0.72 g de hidrxido de potasio en una 20 mL de una mezcla etanol agua 9:1, se adicionan 0.20 g de hidrocloruro de hidroxilamina y 0.16 g de la dibenzalacetona preparada previamente. Si es necesario, aadir ms etanol, hasta total solubilizacin de la dibenzalacetona. La mezcla se refluja durante 90 min., despus de lo cual, la disolucin se filtra y se elimina el disolvente a vaco. Se redisuelve el producto en 10 mL de diclorometano, y se aaden 25 mL de agua destilada. Se separa la capa orgnica, y la capa acuosa se extrae dos veces con diclorometano. Se combinan todas las fases orgnicas, se lavan con disolucin saturada de cloruro de sodio, se seca sobre sulfato de sodio anhidro y se elimina el disolvente al vaco. Analiza una muestra de tu producto mediante cromatografa en capa delgada, comparndola con una muestra del material de partida, eluyendo la placa con la mezcla hexano: acetato de etilo 2:1. Revelar con iodo. 7.6 CUESTIONARIO 1. Escribir un mecanismo de reaccin que explique el producto obtenido. 2. Cul es el papel de la disolucin de cloruro de sodio? 3. Por qu se usa destilacin a vaco? 4. Cul sera el producto final, si en lugar de dibenzalacetona se usase dibenzalciclohexanona? 7.7 BIBLIOGRAFA a) Pelletier, S. W., (1985). Alkaloids: Chemical and Biological Perspectives. Volumen 3. New York: John Wiley & Sons, Inc. b) Michael, J. P., (2001). Indolizidine and quinolizidine alkaloids. Nat. Prod. Rep., 18, 520-542. c) Rubiralta, M., Giralt, E., & Diez, A., (1991). Piperidine: Structure, Preparation and Synthetic Applications of Piperidine and its Derivatives. 1a Edicin. Amsterdam: Elsevier.

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d) Juaristi, E., Soloshonok, V. A., (2005). Enantioselective Synthesis of -Amino Acids. 2a. Edition. New York: Wiley-VCH. e) Doi, H., Sakai, T., Iguchi, M., Yamada, K. I., & Tomioka, K., (2003). Chiral Ligand-Controlled Asymmetric Conjugate Addition of Lithium Amides to Enoates. Journal of the American Chemical Society, 125, 2886-2887. f) Bargiggia, F., & Murray, W. V., (2006). Facile synthesis of , disubstituted Nhydroxypyrrolidines and N-hydroxypiperidines via double 1,4-addition of hydroxylamine. Tetrahedron Letters, 47, 31913193. g) Daz, E., Barrios, H., Portilla, F. R., Guzmn, A., Aguilera, J. L., Becerril, R., Jankowski C. K., & Reynolds, W. F., (2000).
13

C and 1H NMR of 2,6-diaryl-1-

hydroxy piperidin-4-one oximes; substituent effects on cis:trans ratio and conformational equilibria. Spectrochimica Acta Part A, 56, 21912201. h) Weintraub, P. M., Sabol, J. S., Kane, J. M., & Borcherding, D. R., (2003). Recent advances in the synthesis of piperidones and piperidines. Tetrahedron, 59, 29532989. i) Buffat, M. G. P., (2004). Synthesis of piperidines. Tetrahedron, 60, 17011729. j) Kurbat, N. M., Praliev, K. D., Salita, T. A., Yu, V. K., & Verina, E. L., (1992). Neuropharmacological activity of piperidine derivatives (A review).

Pharmaceutical Chemistry Journal, 25 (7), 450-462.

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PRCTICA 8 SNTESIS DE 7-HIDROXI-4-METILCUMARINA (4METILUMBELIFERONA)

8.1 OBJETIVOS a) Efectuar la sustitucin electroflica aromtica (SEA) entre un electrfilo poco activado (1,3-dicarbonlico) y un compuesto aromtico activado: resorcinol (3-hidroxifenol). b) Preparar 4-metilumbeliferona segn la reaccin de Pechmann-Duisberg. c) Ilustrar la formacin de un heterociclo de seis miembros benzofusionado. d) Revisar la importancia biolgica de las cumarinas. 8.2 INTRODUCCIN Las cumarinas comprenden un amplio grupo de sustancias benzo--pironas fenlicas (se han descrito ms de mil compuestos) ampliamente distribuidos en la naturaleza, que se originan biosintticamente mediante lactonizacin del cido cumarnico (2-hidroxi-Z-cinmico). Sobre esta estructura se disponen sustituyentes de distinta naturaleza qumica lo que da lugar a distintos tipos de cumarinas: sencillas y complejas. Se cree que su rol en las plantas es de defensa. As, por ejemplo, la ingesta de cumarinas de plantas como el trbol puede causar hemorragias internas en mamferos. Ello se debe a que las cumarinas inhiben la sntesis heptica de los factores esenciales para la coagulacin sangunea dependientes de la vitamina K. Este descubrimiento llev al desarrollo del raticida Warfarina y el uso de compuestos relacionados para tratar y prevenir la apopleja. Aunque algunas de ellas son txicas para los mamferos, las cumarinas simples son menos txicas y presentan un amplio rango de accin farmacolgica, como son:

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a) Disminuyen la permeabilidad capilar y aumentan la resistencia de las paredes capilares (protegen la fragilidad capilar y actan como tnico venoso). b) Las furocumarinas son fotosensibilizadores de la piel. c) Las piranocumarinas tienen accin antiespasmdica y vasodilatadora de coronarias. d) Algunas tienen propiedades sedantes, como la angelicina. e) Recientemente, se ha descubierto que la esculosida tiene actividad sobre la microcirculacin de la piel, y se ha convertido en un ingrediente de varias aplicaciones cosmticas, como anticelulticos y tratamientos para la prdida del cabello. f) Otras propiedades que se les atribuyen son: propiedades hipnticas, estrognicas, antiinflamatoria, antibacteriana, hipotrmica, analgsica.
O OH O Cumarina O O O HO O O OH OH OH Escuretina HO O O

Warfarina

Figura 8.1 Ejemplo de algunas cumarinas con actividad biolgica significativa.

8.3 REACCIN La reaccin de Pechmann-Duisberg permite la sntesis de cumarinas mediante la reaccin de fenoles con -ceto steres. La reaccin se realiza mediante la catlisis cida con un cido tipo Brnsted o un cido de Lewis.
O + HO OH O OEt

HCl HO O O

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8.4 PARTE EXPERIMENTAL 8.4.1 MATERIAL Y EQUIPO Cantidad 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 2 Descripcin Matraz de fondo redondo de 100 mL Probeta de 30 mL Placa calefactora con agitacin Agitador magntico Soporte Universal Aro metlico Agitador de vidrio Esptula Vaso de precipitado de 50 mL Vaso de precipitado de 250 mL Termmetro -10C a 300C Embudo de filtracin Pipeta de 5 mL Pipeta de 10 mL Papel de filtro

8.4.2 REACTIVOS Por Equipo Cantidad 16 mL 3.3 g 3.8 mL 10 mL Descripcin cido Clorhdrico concentrado Resorcinol Acetoacetato de etilo Etanol

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8.4.3 PROCEDIMIENTO En un matraz redondo de 100 mL se pesan 3.3 g de resorcinol, y se aaden 3.8 mL de acetoacetato de etilo. Una vez que se tiene una mezcla homognea, se adicionan lentamente 16 mL de cido clorhdrico concentrado. La mezcla de reaccin se caliente a 30C durante 30 min., y luego de este tiempo se vierte la mezcla en forma de chorro fino en 25 mL de una mezcla de agua-hielo, agitando constantemente, ya que de lo contrario se forma una pasta resinosa. Una vez obtenido el producto se recristaliza en la mnima cantidad posible de etanol. Determine el punto de fusin del producto, y el rendimiento.

8.5 CUESTIONARIO 1. Proponga un mecanismo de reaccin que explique la formacin de la 7-hidroxi4-metilcumarina. 2. De un ejemplo de una cumarina biolgicamente importante. 3. Qu resultados esperara en la sntesis efectuada, si sustituyera el resorcinol por catecol o por hidroquinona? 4. Qu sustancias se eliminan en el lavado acuoso? 5. Podra la cumarina formada reaccionar con otro equivalente de acetoacetato de etilo? Escriba la estructura del producto que se generara si se emplearan 2 equivalentes de acetoacetato de etilo y 1 equivalente de resorcinol. 6. Cree usted que la sntesis de la 7-hidroxi-4-metilcumarina operara tambin en medio bsico? 8.6 BIBLIOGRAFA a) Acheson, R. M., (1976). An Introduction to the Chemistry of Heterocyclic Compounds. 3a Edition. London: J. Wiley & Sons. b) Streitweiser, A. A. Jr., & Heathcook, C. H., (1979). Qumica Orgnica. Mxico: Interamericana. c) Vogel, A. I. (1978). Textbook of Practical Organic Chemistry. London: Longmans.

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d) Morris, E. T., (1984). Fragrance: The Story of Perfume from Cleopatra to Chanel. New Jersey: E.T. Morris and Co. e) Babhair, S. A., Tariq, M., Al-Badr, A. A., (1985). Warfarin. Anal. Profiles Drugs Subst., 14, 423-452. f) Tietze, L. F., Eicher, T., (1988). Reactions and Syntheses in the Organic Chemistry Laboratory. Mill Valley (CA, USA): University Science Books.

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PRCTICA 9 SNTESIS DE 2-FENILIMIDAZO[1,2-a]PIRIDINA Y SU DERIVADO 3NITROSADO

9.1 OBJETIVOS a) Efectuar mediante un procedimiento similar al empleado por Tchichibabin una azaindolizina b) Efectuar una reaccin de SEA con un electrfilo suave para poner de manifiesto la riqueza -electrnica del sistema sintetizado. 9.2 ANTECEDENTES 1. Sntesis de compuestos heterocclicos mediante el uso de compuestos halocarbonlicos. 2. Reactividad de heterociclos -excesivos ante electrfilos 9.3 INTRODUCCIN Una clase de heterociclos que han despertado la curiosidad de varios investigadores debido a la amplia gama de aplicaciones y caractersticas que ha exhibido son las azaindolizinas. Este tipo de compuestos con carcter aromtico se distinguen por poseer (al igual de la indolizina) un nitrgeno en la fusin que une a dos sistemas anulares (uno de seis y otro de cinco miembros); pero adems deben poseer por lo menos otro nitrgeno adicional en cualquiera de los dos ciclos. Exhiben por lo general una gran reactividad hacia los electrfilos ya que el anillo de cinco miembros suele comportarse como un sistema -excesivo. Una de las azaindolizinas que ms han sido estudiadas son las imidazo[1,2a]piridina y de hecho existen dos productos comerciales de uso teraputico basados en sus estructuras: el ansioltico Zolpidem y el antiulcerante Zolimidina. En el primer caso la estructura incluye la presencia de un anillo arlico unido a la posicin 2 del sistema fusionado. En el segundo caso, la molcula protonada bloquea la accin de la bomba de protones de las clulas de la mucosa gstrica, lo que se suele usar como tratamiento contra la dispepsia.

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Por otra parte, estudios de actividad biolgica de derivados de este sistema en cuestin han mostrado la versatilidad como farmacforo ya que ha sido reportadas cualidades bactericidas, antivirales, ligantes a protenas manifiestas en procesos de Alzheimer, etc. Tchichibabin propuso la sntesis del sistema imidazo[1,2-a]piridina en 1925 empleando una 2-aminopiridina y un compuesto -halocarbonlico. A partir de esa fecha han sido llevados a cabo varios perfeccionamientos que incluyen la presencia de bases dbiles y de diversos tipos de disolvente. 9.4 REACCIONES 9.4.1 Obtencin de la 2-fenilimidazo[1,2-a]piridina

Br

N
O

NH2

NaHCO3 EtOH,

9.4.2 Obtencin de la 2-fenil-3-nitrosoimidazo[1,2-a]piridina

NO

NaNO2, AcOH H2O, 5 C

N

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9.5 PARTE EXPERIMENTAL 9.5.1 MATERIAL Y EQUIPO Cantidad 1 2 1 1 1 2 1 1 1 1 1 1 1 1 9.5.2 REACTIVOS Cantidad 1.0 g 2.4 g 1.4 g 30 mL 0.6 g 2.0 mL Descripcin 2-Aminopiridina Bromuro de fenacilo Bicarbonato de sodio Etanol Nitrito de sodio cido actico glacial Descripcin Agitador de vidrio Pinzas de tres dedos Matraz redondo de 100 mL Matraz Erlenmeyer de 100 mL Probeta de 10 mL Vasos de precipitado de 250 mL Tapn de hule Termmetro Anillo de hierro Refrigerante con junta 24/40 Embudo Parrilla con agitacin magntica Papel filtro Placa cromatogrfica de slica gel

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9.5.3 PROCEDIMIENTO 9.5.3.1 Obtencin de la 2-fenilimidazo[1,2-a]piridina En un matraz esfrico de 100 mL equipado con agitacin magntica, calentamiento y reflujo, se coloca 1.0 g de 2-aminopiridina para disolverla en 8 mL de EtOH al 96%, 1.4 g de NaHCO3 y se enciende la agitacin para dispersar. A continuacin se agregan 2.4 g de bromuro de fenacilo, y se inicia el calentamiento a reflujo por 1 hora y media, tiempo durante el cual debe ser seguida la reaccin mediante CCF en un sistema Hexano-Acetato de Etilo 1:1, hasta consumo total de las materias primas. Entonces el disolvente se evapora a presin reducida y el residuo resultante es lavado con agua con el fin de retirar las sales inorgnicas. El slido residual puede ser recristalizado de una mezcla etanol-agua (80:20). Se obtiene un slido blanco que cristaliza en forma de agujas. Se debe obtener el punto de fusin del mismo.

Nota: El bromuro de fenacilo es una sustancia que por s misma libera continuamente una pequea cantidad de HBr y es extremadamente irritante de la piel y ojos. En su manipulacin, cuando la vaya a pesar y a verter al matraz esfrico, trabaje con guantes y bajo la supervisn de un profesor.

9.5.3.2 Obtencin de la 2-fenil-3-nitrosoimidazo[1,2-a]piridina En un matraz Erlenmeyer de 100 mL son disueltos 0.5 g de 2-fenilimidazo[1,2a]piridina en 2.0 mL de cido Actico Glacial, se coloca el matraz en un bao de hielo-agua equipado con agitacin hasta bajar la temperatura entre 0C a 5C y se enciende la agitacin. A continuacin son agregados 0.6 g de NaNO 2 disueltos previamente en la menor cantidad posible de agua. Inmediatamente se observa la formacin de una coloracin verde y se mantiene la agitacin por espacio de 15 min. Una vez transcurrido este tiempo se retira el bao frio y se agrega agua a la mezcla de reaccin para precipitar el slido formado, mismo que es recuperado por filtracin y lavado con tres porciones de agua de 10 mL cada una. El producto
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es un slido cristalino amorfo de color verde botella. Se debe obtener el punto de fusin del mismo. 9.6 CUESTIONARIO 1. Justifique por qu la imidazo[1,2-a]piridina reacciona como un sistema excesivo ante los electrfilos a pesar de tener en su constitucin un sistema deficiente como lo es la piridina. 2. Investigue las estructuras de la Zolimidina y el Zolpidem. 3. Por qu razn es necesario disolver en la mnima cantidad posible de agua el nitrito de sodio antes de verter a la solucin cida de 2-fenilimidazo[1,2-a]piridina y por qu razn no se puede evitar el uso del agua? 4. Cules la funcin del bicarbonato de sodio en la sntesis de imidazo[1,2a]piridina? 5. Por qu razn se lleva a cabo en fro la nitrosacin? 9.7 BIBLIOGRAFA Sobre la sntesis de imidazo[1,2-a]piridina por modificaciones al mtodo original de Tchichibabin a) Kaye, I. A., & Parris, C. L., Burlant, W. J., (1953). Use of 2-Aminopyridine in the Voigt Reaction. Journal of the American Chemical Society, 75, 746-748. b) Julian, P. L., Meyer, E. W., Magnani, A., Cole, W., (1945). Journal of the American Chemical Society, 67, 1203. c) Lombardino, J. G., (1965). Preparation and New Reactions of Imidazo[1,2a]pyridines. The Journal of Organic Chemistry, 30, 2403-2407. Acerca de la reactividad de la imidazo[1,2-a]piridina versus electrfilos d) Teulade, J. C., Escale, R., Grassy, G., Girard, J. P., & Chapat, J. P., (1979). Bulletin de la Societe Chimique de France, 9, 529-536. e) Chaouni-Benabdallah, A., Galtier, C., Allouchi, H., Kherbeche, A., Debouzy, J. C., Teulade, J. C., Chavignon, O., Witvruouw, M., Pannecouque, C., Balzarini,

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J., De Clerq, E., Enguehard, C., Gueiffier, A., (2001). Arch. Pharm. Med. Chem., 334, 224. Acerca del Zolpidem f) Hobbs, W. R., Rall, T. W., Verdoorn, T. A., (1996). Hipnticos y Sedantes: Etanol. En Goodman & Gilman (Eds), Las Bases Farmacolgicas de la Teraputica (Pp. 396). 9a Edicin. Mxico: Mc Graw-Hill Interamericana. g) Saunders, J., (2000). Top drugs, top synthetic routes. 1a Edition. Oxford: Oxford Science Publications. Actividades biolgicas h) Kercher, T., Rao, C., Bencsik, J. R., Josey, J. A., (2007). Diversification of the Three-Component Coupling of 2-Aminoheterocycles, Aldehydes, and Isonitriles: Efficient Parallel Synthesis of a Diverse and Druglike Library of Imidazo- and Tetrahydroimidazo[1,2-a] Heterocycles. Journal of Combinatorial Chemistry, 9, 1177- 1187. i) Strub, A., Ulrich, W. R., Hesslinger, C., Eltze, M., Fuch, T., Strassner, J., Strand, S., Lehner, M., Boer, R., (2006). The Novel Imidazopyridine 2-[2-(4-Methoxypyridin-2-yl)-ethyl]-3H-imidazo[4,5-b]pyridine (BYK191023) Is a Highly Selective Inhibitor of the Inducible Nitric-Oxide Synthase. Molecular Pharmacology, 69, 328-337. j) Simon,W. A., Hermann, M., Klein, T., Shin, J. M., Huber, R., Senn-Bilfinger, J., Postius, S., (2007). Soraprazan: Setting New Standards in Inhibition of Gastric Acid Secretion. Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics, 321, 866-874. k) Pick, C., Chernes, Y., Rigai, T., Rice, K., Schreiber, S, (2005). The antinociceptive effect of zolpidem and zopiclone in mice. Pharmacology Biochemistry and Behavior, 81(3), 417-423.

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PRCTICA 10 EXTRACCIN DE LOS ALCALOIDES DE LA UA DE GATO

10.1 OBJETIVOS a) Ilustrar la obtencin de una mezcla de alcaloides oxindlicos tetra- y pentacclicos por extraccin de un producto comercial. b) Ilustrar el uso de un producto natural en el tratamiento de diferentes males. 10.2 INTRODUCCIN Los alcaloides son compuestos que se caracterizan por la presencia de nitrgeno en su estructura, teniendo la propiedad de formar sales solubles en el agua con cidos orgnicos e inorgnicos, mientras que sus bases libres son solubles en los disolventes orgnicos. Esta propiedad es la base de los procesos generales de extraccin de los alcaloides. Poseen una actividad biolgica muy diversa, entre la que destaca la euforizante, debido a que actan sobre el sistema nervioso central. Ejemplos conocidos son la morfina, la atropina, la quinina o la cafena (Figura 10.1).
HO H3C N H O H HO H N CH3 O O H HO CH2OH H3CO N N N N H3C

CH3 N O N O CH3

Morfina

Atropina

Quinina

Cafeina

Figura 10.1 Ejemplo de algunos alcaloides naturales.

Uncaria tomentosa, comnmente conocida como ua de gato, se encuentra distribuida en centro y Sudamrica, y se ha usado ampliamente en la medicina tradicional para el tratamiento de enfermedades tales como gastritis, lcera gstrica, cncer, artritis, asma, estimulante del sistema inmunolgico y procesos inflamatorios.

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Su composicin fitoqumica se caracteriza por la presencia de alcaloides oxindlicos tetra- y pentacclicos, alcaloides indlicos, glicsidos triterpnicos, esteroles y flavonoides (Figura 10.2). Estudios tanto in vitro como in vivo han demostrado que son los alcaloides oxindlicos pentacclicos los causantes principales de la actividad inmunoestimulante y citotxica de esta planta, siendo considerados como biomarcadores de esta especie.
O H HN O H H3CO2CC HN N H O CH3 H H3CO2CC Miltrafilina H HN N H O CH3 H H3CO2CC O H N H O CH3

Especiofilina

Uncarina F

O HN H N H H H3CO2CC O CH3 H HN O H H3CO2CC N H O CH3 H HN O H H3CO2CC N H O CH3

Pteropodina

Isomitrafilina

Isopteropodina

Figura 10.2 Algunos alcaloides aislados de Ua de gato.

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10.3 PARTE EXPERIMENTAL 10.3.1 MATERIAL Y EQUIPO Cantidad 1 1 2 3 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 2 Descripcin Agitador de vidrio Esptula Pinzas universales Matraz Erlenmeyer de 100 mL Matraz redondo de 100 mL Parrilla Agitador magntico Soporte universal Pinza de tres dedos con nuez Probeta de 25 mL Vasos de precipitado de 100 mL Anillo de hierro Soporte universal Embudo de filtracin Embudo de separacin Papel filtro

10.3.2 REACTIVOS Cantidad 5g 1g 20 mL 2 mL 3 mL 1 mL 30 mL Descripcin Cpsulas de Una de Gato Carbonato de sodio Salmuera Acetato de etilo/hexano/etanol: 7/2/1 cido pcrico (solucin etanlica al 20%) Reactivo de Wagner ter etlico

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10.3.3 PARTE EXPERIMENTAL Hay que recordar que en su estado natural, los alcaloides se encuentran en forma de sales solubles en disoluciones acuosas o hidroalcohlicas. En este caso, el material vegetal es extrado con una disolucin hidroalcohlica acidulada, y una vez que se tenga el extracto de alcaloides en forma de sales, se alcaliniza para regenerar el alcaloide en forma de base libre y se extrae con un disolvente orgnico no miscible con el agua. Se prepara una mezcla de alcohol-cido mezclando 100 mL de agua destilada, 100 mL de etanol y 2.5 mL de cido clorhdrico. En un matraz redondo de 100 mL se pesan 5 g de material vegetal, extrado a partir de unas cpsulas de ua de gato. Adicione 10 mL de la disolucin alcoholcido y 10 mL de acetato de etilo. Se agita vigorosamente con la varilla de vidrio durante 15 min. para facilitar la extraccin de los productos, y se deja reposar durante 15 min. adicionales. Transcurrido este tiempo se filtra utilizando el embudo y papel filtro. Se Lava el residuo slido del embudo con 20 mL de agua y se junta con el filtrado. Se decanta cuidadosamente el extracto y lo pasamos a un embudo de extraccin, y se separa la fase acuosa. En este punto se realiza la prueba con el reactivo de Wagner y de Dragendorff a la fase acuosa (Nota 1). Posteriormente se aade a esta fase, poco a poco, Na 2CO3 hasta pH bsico (se observa un cambio de color). Se transfiere la disolucin a un embudo de extraccin, adicione salmuera y extraiga la fase acuosa con tres porciones de ter etlico (10 mL c/u). Las fases orgnicas se juntan, se secan con sulfato de sodio anhidro, se filtran a gravedad y se llevan a sequedad. En este punto realice un cromatograma (Nota 2). Despus que se ha eliminado el disolvente, aada 1 mL de agua y 2 mL de MeOH. Al filtrado aada poco a poco solucin saturada de cido pcrico en metanol (Nota 3) (1 mL a 2 mL).

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Nota 1. Reactivo de Wagner. Se disuelven 1,27 g de yodo y 2 g de yoduro de potasio en 20 mL de agua. La presencia de alcaloides se detecta al producirse una coloracin naranja-rojiza cuando el papel impregnado con este reactivo se pone en contacto con la disolucin cida de alcaloides. Reactivo de Dragendorff. Solubilizar 2.6 g de carbonato de bismuto y 7.0 g de yoduro de sodio en 25 mL de cido actico glacial, calentar por l0 min. a 40C para solubilizar el reactivo. Dejar reposar por 12 horas y posteriormente filtrar la solucin. 20 mL del filtrado (solucin rojo-caf) se mezclan con 8 mL de acetato de etilo, la solucin anterior guardarla en un frasco mbar (la cual es estable por 6 meses). Mezclar 10 mL de esta disolucin stock con 25 mL de cido actico glacial y 60 mL de acetato de etilo. Colocar 2 gotas de la fraccin, previamente solubilizada en metanol y agregar 2 gotas de HCl 1N ms 2 gotas del reactivo de Dragendorff (solucin reveladora). La aparicin de un precipitado color marrn indica positiva la reaccin. Nota 2. Preeluya una placa empleando trietilamina nicamente. Permita que la placa se seque y aplique su muestra. Eluya con una mezcla acetato de etilo/hexano/EtOH 7/2/1. Observe las manchas (productos) con ayuda de una lmpara de UV a 254 nm. Nota 3. cido Pcrico. Disolucin saturada de cido pcrico en metanol. Se formar un precipitado coloreado.

10.4 BIBLIOGRAFA a) Heitzman, M. E., Neto, C. C., Winiarz, E., Vaisberg, A. J., & Hammond, G. B., (2005). Ethnobotany, phytochemistry and pharmacology of Uncaria (Rubiaceae). Phytochemistry, 66, 5-29. b) Pereira, R. C. A., Valente, L. M. M., Pinto, J. E. B. P., Bertolucci, S. K. V., Bezerra, G. M., Alves, F. F. Dos Santos, P. F. P., Benevides, P. J. C., Siani, A. C., Rosario, S. L., Mazzei, J. L. DAvila, L. A., Gomes, L. N. F., De Aquino-Neto, F. R., Emmerick, I. C. M., & Carvalhaes, S. F., (2008). In Vitro Cultivated Uncaria tomentosa and Uncaria guianensis with Determination of
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the Pentacyclic Oxindole Alkaloid Contents and Profiles. Journal of the Brazilian Chemical Society, 19, 1193-1200. c) Snyder, C. H., (1998). The Extraordinary Chemistry of Ordinary Things. 3a Edition. New York: John Wiley & Sons. d) Gangoli, S. The Dictionary of Substances and theirs effects, (1999). 2a Edition. Gran Bretaa: Royal Society of Chemistry.

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