QU ES Y CMO SE CALCULA LA DL50 EN INSECTICIDAS

Gonzalo Silva Aguayo

Ingeniero Agronomo Mg Sc
Eacultad de Agronomia
Universidad de Concepcion
INTRODUCCIN
Es muy normal escuchar o leer en los medios de comunicacion que los insecticidas son
sustancias altamente toxicas y que deberian estar prohibidas. En algunas ocasiones
quienes lo sealan tienen toda la razon, sin embargo en otros casos no es asi, ya que no
todos los insecticidas son igualmente toxicos y a veces incluso existen sustancias
naturales que son mucho mas toxicas o venenosas, que muchos insecticidas que se
comercializan en el mercado nacional y mundial.
Paracelso, el padre de la toxicologia, alrededor del 1500 dijo ' la diferencia entre lo que
cura y lo que mata es la dosis. Es decir, ningun compuesto es venenoso por naturaleza
sino que depende exclusivamente de la concentracion en que se encuentre. Un ejemplo
de esta aIirmacion es el caso que en la medicina popular chilena se recomiende para la
indigestion tomar un te de Boldo ( Peumus boldus Molina: Monimiaceae). Si se sigue
esta recomendacion lo mas seguro es que el malestar pase pero si se abusa de la inIusion
esta puede llegar a causar cancer gastrico, problemas con la presion arterial e incluso
sintomas de aborto en embarazadas. En bas e a esto es que surge la pregunta; cuando
podemos decir que un insecticida es mas o menos toxico?. Esta pregunta se debe
responder dependiendo de la Dosis (o Concentracion) Letal 50 ( DL50 o CL50), que
en el Iondo es lo que seala el grado de toxicidad de cualquier compuesto.
En el presente manuscrito se explicara en Iorma sencilla que es la DL50 y como se
puede calcular e interpretar con el objetivo de poder discriminar con una base tecnica
que insecticida es mas o menos toxico.
DEFINICIN DL50
La Dosis letal 50 (DL50) es aquella concentracion del insecticida, que al ser
administrada por cualquier via de ingreso (oral o dermal por ejemplo), en un periodo de
tiempo deIinido mata el 50 de la poblacion de insectos evaluada.
DOSIS VS DOSIFICACIN
Anteriormente haciamos una diIerenciacion entre Dosis Letal 50 (DL50) y
Concentracion Letal 50 (CL50) y aunque a veces se utilizan como sinonimos
conceptualmente constituyen dos cosas diIerentes. Cuando se realiza una
experimentacion para conocer la toxic idad de un insecticida sobre un determinado
insecto o acaro puede ocurrir que se use una metodologia directa o una indirecta. Por
ejemplo, si seleccionamos veinte individuos (moscas adultas por ejemplo) y con un
microaplicador a cada insecto se le aplica u na gota de un volumen conocido de una
solucion de concentracion conocida podemos decir que estamos utilizando una dosis
pues sabemos exactamente que cantidad de compuesto o solucion esta recibiendo cada
individuo. A su vez, si saturamos el medio como puede ser, por ejemplo, sumergir una
hoja de manzano en la misma solucion conocida y posteriormente se colocan en su
superIicie veinte insectos; no se sabra con certeza que cantidad de insecticida esta en
contacto con cada organismo por lo que debemos hablar de dosiIicacion. Cuando
utilizamos una dosis se debe hablar de DL50 y se expresa en g insecticida/ kg animal.
En cambio, en la dosiIicacion se debe hablar de CL50 y se expresa en la misma unidad
en que estaba la solucion evaluada (g/kg; cm
3
/ha, etc.).
CMO SE INTERPRETA?
La interpretacion de la DL50 o CL50, segun corresponda, no es compleja ya que
basicamente es una comparacion con otros valores similares. En el Cuadro 1 se
muestran algunos valores de DL50 de varios insecticidas, los cuales nos ayudaran a
comprender mejor el concepto.
Cuadro 1.- Dosis Letal 50 (DL50) oral para ratas de cinco insecticidas.
INSECTICIDA DL50
(mg/k)
Acrinatrina 5000
Aldicarb 0,9
DDT 87
Dimetoato 250
Lindano 76
Si observamos los valores del cuadro podemos ver que el insecticida mas toxico es
Aldicarb ya que es del que se necesita una menor concentracion para matar al 50 de la
poblacion. Visto del modo contrario el menos toxico es Acrinatrina ya que es del que se
necesita la mayor concentracion, o dosis, para matar a l 50 de los individuos
evaluados.
CMO SE CALCULA?
Lo primero que debemos sealar es que cualquier investigacion que tenga como
objetivo evaluar las propiedades de un compuesto en base a la respuesta que provoca en
un ser vivo se llama bioensayo. Deb ido a esto se dice que todo bioensayo tiene dos
componentes; el estimulo y la respuesta. Cuando se planea un bioensayo, como puede
ser la eIectividad de un insecticida, se debe tener en cuenta que no se puede evaluar una
sola dosis o concentracion sino que debe probarse un grupo de ellas en Iorma de
progresion aritmetica como podria ser, por ejemplo, 5, 10, 15, 30 y 60.
Einalmente los resultados obtenidos ( de mortalidad) deben transIormarse a logaritmo
ya que la Ley de Weber y Eechner seala que el cambi o en magnitud o intensidad de
una respuesta biologica es proporcional no al cambio aritmetico en el estimulo sino que
a su logaritmo.
Transformacin de una lnea sigmoide a una lnea recta
Si se graIica el estimulo contra la respuesta, se obtendra una linea sigmoide asimetrica
con la curvatura inIerior muy pequea cuyos valores son de muy diIicil interpretacion.
Al transIormar la dosis a la Iuncion Log dosis, la respuesta se vuelve una linea sigmoide
simetrica (Iigura 1). A pesar de ello, resulta compli cado analizar estadisticamente lineas
curvas; ademas, arriba del 95 de respuesta, no se sabe con certeza la direccion que
tomara dicha curva.
Para obtener una linea recta, ademas de realizar la transIormacion antes indicada, es
menester que la respuesta s e transIorme a unidades Probit, Anglit o Logit y estar en
posibilidades de realizar un analisis parametrico (Eigura 2).
Eigura 1.- Relacion Dosis respuesta
Eigura 2.- Relacion dosis respuesta con transIormacion Probit
Transformacin Probit
Probit es una palabra que viene de la contraccion de probability unit; a pesar de ello, no
son unidades de probabilidad, sino unidades de desviacion estandar incrementadas en
cinco con la Iinalidad de evitar el uso de numeros negativos.
Esta transIormaci on asume que la respuesta de los individuos se distribuye en Iorma
normal, correspondiendo la curva de respuesta a una sigmoidea o Iuncion de
distribucion normal acumulativa (Gil -Criado y Muiz, 1978). Esta curva normal solo se
diIerencia de la tradiciona lmente usada, en que tiene una media de 5 y no 0, valor que
corresponde a un umbral proporcional de respuesta del 50 (InIante y Calderon, 1994).
La transIormacion probit es, sin lugar a dudas, la mas utilizada.
Transformacin Logit
Algunos autores sosti enen que la respuesta no se distribuye en Iorma normal sino que de
Iorma sigmoide o logistica, por lo que sugieren que se utilice la siguiente ecuacion
(InIante y Calderon, 1994):
) 1 (
1
) ( bx a
e
P

Transformacin Anglit o Angular.

La transIormacion angular se usa principalmente cuando los valores obtenidos
experimentalmente se expresan en terminos de una proporcion (p), cuyo valor oscila entre
0 y 1. Esta transIormacion presenta el problema que puede sobrevalorar los datos
extremos de la evaluacion.
CUL TRANSFORMACIN USAR?
Segun Rustom et al.(1989), la decision sobre cual transIormacion utilizar debe estar
sustentada sobre condiciones teoricas y sobre el conocimiento previo del tipo de
distribucion que maniIiesta la respuesta biologica. A las distribuciones normales,
logisticas o binomiales, se les debe aplicar una transIormacion probit, logit o angular,
respectivamente. El problema se vuelve complicado cuando se desconoce la
distribucion de la respuesta. Einney en 1971 (citado por Gil -Criado y Muiz, 1978)
estudio la relacion entre las tres curvas de distribucion antes sealadas y demostro que
entre la distribucion normal y la logistica hay diIerencias minimas en el tramo
correspondiente entre el 1 y 99 de respuesta. La distribucion norm al con la angular
tiene inIimas diIerencias en el tramo entre el 5 y 95. Estos ultimos autores sealan
que la transIormacion a utilizar no reviste mayor importancia; pudiendose, inclusive,
usar mas de una a la vez y trabajar posteriormente con la que pre sente una menor
varianza.
E1EMPLO
Para comprender mejor como se calcula la DL50 (CL50) vamos a tomar el caso
hipotetico del cuadro 2 en que se evaluo un insecticida para el control de una plaga
determinada arrojando los valores de mortalidad que ahi se sealan.
Cuadro 2.- Valores de mortalidad obtenidos experimentalmente en la evaluacion del
insecticida A para el control de la plaga B.
CONCENTRACIN
(g/litro)
MORTALIDAD
()
0,5 7
1 23
2 58
4 79
8 95
16 99
Paso 1.- TransIormacion de las dosis a logaritmos y del porcentaje de mortalidad a
valores probit segun tablas de transIormacion.
Cuadro 3.- Datos transIormados
CONCENTRACIN
(gr/litro)
Logaritmo
Dosis`
MORTALIDAD
()
Probit
0,5 0.6989 7 3.5239
1 1.0000 23 4.2614
2 1.3010 58 5.2015
4 1.6020 79 5.8062
8 1.9030 95 6.6452
16 2.2041 99 7.3268
* Si los valores del logaritmo son negativos, se recomienda sumar una unidad (1) a
todos los valores, sean positivos o negativos, de modo de trabajar solamente con
valores positivos.
Paso 2.- Se hace una regresion lineal (Y abx) entre el logaritmo de la dosis (x) y los
valores probit (y).
Y 1,77 + 2,54X
Paso 3.- Se estima con el modelo calculado el valor para un 50 de mortalidad. En
unidades probit 50 corresponde a 5.
5 1,77+2,54X
5-1,77
X -------------
2,54
X 1,27
Paso 3.- Se resta la unidad sumada
X(1,27-1)
X 0,27
Paso 4.- Se aplica antilogaritmo
X 0,27/antilog
X 1,86
Paso 5.- En consecuencia
CL50 1,86 (gr/litro)
APLICACIN PRCTICA
Se han desarroll ado una serie de escalas en base a la DL50 de los insecticidas pero la
que se utiliza en el pais es la que se muestra en el Cuadro 4. El Servicio Agricola y
Ganadero (SAG) es quien controla el registro de todos los insecticidas que se
comercializan en Chil e y uno de los datos requeridos para permitir su uso en el pais es
la DL50 oral y dermal del insecticida en ratas. De acuerdo a este valor el insecticida se
clasiIica en uno de los cuatro grupos de toxicidad que se diIerencian por un numero
romano. En base a esta escala la etiqueta lleva una banda de color en la parte inIerior de
modo que el comprador pueda reconocer en Iorma rapida y sencilla el nivel de toxicidad
al que pertenece.
Cuadro 4.- DL50 aguda (ratas) mg/kg de plaguicida Iormulado
Va Oral Va Cutnea
Clasificacin Slido Lquido Slido Lquido
Color
Etiqueta
Ia
Sumamente
Peligroso
50 o menos 20 o menos 10 o menos 40 o menos
Rojo
Ib
Muy Peligroso
Mas de 5
Hasta 50
Mas de 20
Hasta 2000
Mas de 10
Hasta 100
Mas de 40
Hasta 400
Rojo
II
Moderadamente
Peligroso
Mas de 5
Hasta 500
Mas de 200
Hasta 2000
Mas de 10
Hasta 1000
Mas de 400
Hasta 4000
Amarillo
III
Poco Peligroso
Mas de 500
Hasta 2000
Mas de 2000
Hasta 3000
Mas de 1000 Mas de 4000
Azul
IV
Normalmente no
ofrece peligro.
Mas de 2000 Mas de 3000 - -
Verde
LITERATURA CONSULTADA
Busvine, R. J. 1971. A critical review oI the technique Ior testing insecticides.
Commonwealth Agricultural Bureaux. Slugh. UK. 345p.
Gil-Criado, A., y M. Muiz. 1978. Nuevas transIormaciones en experimentos
biologicos basados en la respuesta cuantal. Bol. Ser. Plagas 4:89 -229.
InIante, S y L. Calderon. 1994. Manual de analisis Probit. Centro de Estadistica y
Computo Aplicado. Colegio de Postgraduados. Montecillo. Texcoco . Mexico. 108p.
Lagunes, A y J. Villanueva. 1994. Toxicologia y manejo de insecticidas. Instituto de
Eitosanidad. Colegio de Postgraduados. Montecillo. Texcoco. Mexico. 108p
Lagunes, A y M. Vazquez. 1994. El Bioensayo en el manejo de insecticidas y
acaricidas. Instituto de Eitosanidad. Colegio de Postgraduados. Montecillo. Texcoco.
Mexico. 159p
Miller, T. 1999. Bioassay In: Insect Toxicology (ENT 128).
http://web.ucr.edu/web/schools/CNAS/entm/tmiller/1/modules/page20.html .
Department oI Entomology. University oI CaliIornia. Riverside.
Robertson, J, K. Smith, N. Savin y R. Lavigne. 1984. EIIects oI Dose selection and
sample size on the precision oI lethal dose estimates in dose-mortality regression. J.
Econ. Entomo.l 77:833-837.
Rustom, A., B. Latorre y M. Lolas. 1989. Metodo para una correcta comparacion de la
eIectividad de nuevos Iungicidas In: Latorre B. (Ed) Eungicidas y Nematicidas.
Avances y Aplicabilidad. p 149 -16.
Silva,G, R. Hepp. 2003. Bases para el Manejo Racional de Insecticidas. Universidad de
Concepcion/Eacultad de Agronomia. Eundacion para la Innovacion Agraria (EIA).
Chillan. Chile. 310p.