Cuando Vann volvio a Johns Hopkins en 1981 como un miembro de facultad, solicit un subsidio de desarrollo de carrera NIH para

unirlo para ms educacin de investigacin. Esto no tuvo sentido econmicamente, como esto quiso decir una reduccin del 40 % del sueldo y la prdida de mi posicin de personal en los Laboratorios Wellcome y la posicin de facultad de adjunto en UNC. Consult con mi amigo John Parker que generosamente me tranquiliz que la oportunidad en el trabajo con Vann en Hopkins sera importante para m. Animado por Mara, vendimos nuestra casita de campo encantadora, recogi nuestro coche familiar y un camin de alquiler, y volvi a Baltimore en agosto de 1981. Reunimos a duras penas fondos y compramos una casa holandesa colonial de ladrillo al lado de la Escuela primaria Stoneleigh y un parque grande y el bosque. La posicin era afortunada; yo podra conmutar 6 millas a Hopkins cada da por la bicicleta. Para complementar nuestros recursos, tuve un segundo empleo como mdico de cuadriltero en combates de boxeo profesional. El Departamento de Biologa Celular en la Universidad Johns Hopkins fue fundada y dirigida por Tom Pollard, un cientfico de la participacin joven con notable energa y entusiasmo. Segu trabajando con Vann e inform una serie de estudios de las membranas de los glbulos rojos. Me hubiera gustado haber permanecido en el laboratorio de Vann, pero reconoci mi necesidad de un puesto en la facultad independiente. A principios de otoo de 1983, recib una oferta de profesores de la Divisin de Hematologa del Hospital Brigham y de Mujeres en la Harvard Medical School - un programa considerado como el mejor en el pas. Acept la oferta verbalmente, pero Mara estaba embarazada de nuestro tercer hijo, y mientras ella permaneca de apoyo, que es muy deseable para permanecer en Baltimore cerca de su familia. La Divisin de Hematologa en la Universidad Johns Hopkins en un modo de transicin y exhibe un mnimo inters en m. Sin embargo, Victor McKusick, el entonces Presidente del Departamento de Medicina de la Hopkins, intercedi y me ofrecieron una ctedra auxiliar, pero con un mucho ms pequeo paquete inicial. Esta oferta de Hopkins coincidi con el el perodo ms negro en nuestra vida de familia. En el 9o mes de su embarazo, Mara experiment una separacin prematura de la placenta. Despus la induccin de trabajo, nuestra hija Lydia fue nacida en la angustia severa. Aunque ella sobreviviera, nuestro beb nunca recuperado. Como sus hermanas, Lydia era un nio magnfico, pero sus movimientos espontneos eran pocos. Ella gimi suavemente siempre que ella fuera colocada de nuevo en su pesebre, pero ella siempre se relajaba cuando la sostuvimos. Devastado y espera una necesidad de la ayuda de profesin de enfermero permanente de casa, acept la oferta en Hopkins, ya que esto proporcionara la asistencia mdica suplemental seguro necesario para el cuidado de Lydia. Aunque Mara siempre expusiera la determinacin extrema de proporcionar la mejor vida posible para Lydia, dud mal y slo con la gran dificultad era yo capaz aceptar nuestra situacin. Otra vez fuimos aplastados cuando Lydia muri cuatro das antes de Navidad 1983. Tuvimos la ventaja de un amplio apoyo de familiares y amigos, pero tuvo problemas para salir adelante. Mara se qued en casa para cuidar de Sara y Claire, mientras establec un laboratorio pequeo en el viejo edificio de Blalock en el Hospital Johns Hopkins. Tuve la oportunidad de contratar a un tcnico, Andy Asimos, un joven de ojos brillantes de una familia griega que se aplican al trabajo durante dos aos antes de ir a la escuela de medicina. Andy y yo continuamos los estudios esferocitosis, estableciendo que el nivel de deficiencia de espectrina correlaciona con la severidad clnica de la enfermedad en los nuevos informes publicados en Nature y el New England Journal of Medicine. Nuestro hijo Clarke naci en 1985 - un nio adorable, con un hoyuelo en la mejilla izquierda. Mara y yo llevamos a Clarke con nosotros en un viaje de motor a travs de Irlanda el prximo ao, y nuestra vida familiar poco a poco volvi a la normalidad. Mara organiza los viajes al campo para que los parques nacionales en los EE.UU. y Canad cada verano y excursiones Apalaches y las visitas a las granjas de los fines de semana. La carpa sacudi mientras jugbamos mono pila, un juego en el que luch con los nios y le hizo cosquillas hasta que se rea sin palabras. Los nios les encant camping, y me invent historias locas de irse a la cama a un pirata llamado Cinco Grumpy y su hermano Buffalo Grumpy que montaba un caballo llamado Ajuste Pony. Sara y Clara asistieron Stoneleigh Primaria, jug en la liga de recreacin equipos de ftbol, y disfrut mucho el programa de natacin sincronizada en la piscina comunitaria. Mara siempre ha jugado el papel principal de los padres. Se organiz un programa de reciclaje de aluminio y de la escuela primaria y se ofreci para ensear ciencia a los nios en Stoneleigh. Se hizo amiga de la McKnights, una familia vecina y con tres hijos casi la misma edad a la nuestra. Me encontr con el padre, Steve, en una funcin de vecindad cuando Claire lo seal como "pap de Gracie." Steve haba hecho un trabajo pionero sobre los factores de transcripcin del ADN y ya se haba establecido como una figura importante en la biologa molecular. Me inspir a unirse a su laboratorio en el Instituto Carnegie de un trabajador para el ao sabtico 1988-1989 acadmica. Esto result ser enormemente productivo - Aprend la tecnologa del ADN y de hecho una valiosa contribucin a la comprensin de la transcripcin del ADN del factor de interaccin. Por coincidencia, otro nio naci a cada familia en 1989 Johnny McKnight y Anne Carlyle acuerdo (Carly). El descubrimiento de las acuaporinas y el crecimiento de nuestros hijos A su regreso a nuestro laboratorio, me pareci que deberamos explorar la protena de 28 kDa ms. Barb y el becario postdoctoral Brad Denker trabajado para desarrollar un mtodo sencillo para la purificacin de la protena de 28 kDa de las membranas de los glbulos rojos humanos en base a la insolubilidad relativa en la N-

lauroylsarcosine, un detergente que extraen las protenas de membrana. La protena de 28 kDa result ser increblemente abundante en las membranas de los glbulos rojos (aproximadamente 200.000 copias por clula) y se comporta fsicamente como un homotetrmero que atraviesa la membrana. Otros cientficos haban dejado de observar la protena, ya que no reaccionan con las manchas de protenas de costumbre. La protena de 28 kDa fue sorprendentemente abundante en los tbulos renales proximales y en las extremidades delgadas descendente del asa de Henle. Determinacin de la secuencia N-terminal de la protena purificada mostr estar relacionado con una serie de protenas a partir de diversas fuentes - lente de ojo de vaca, el cerebro de mosca de la fruta, las bacterias y las plantas. Estas pistas me ha intrigado. Me pregunt si la protena de 28 kDa podra ser algn tipo de canal. Me refer a la protena con numerosos cientficos que se quedaron perplejos como yo y que no pudo aportar ninguna idea. En abril de 1991, se detuvo en Chapel Hill cuando regresaba de un viaje de acampada a Florida - un compromiso de vacaciones durante el cual llev a los nios a la eleccin de su parque (Disney World) y de nuestra eleccin (los Everglades). Visit Vann, quien se haba unido a Duke como un investigador de Howard Hughes. Luego baj por la UNC para visitar a John Parker. A pesar de que era tarde por la tarde, y estaba visiblemente cansado despus de un largo da en la clnica, John se sent en silencio, como he descrito el misterioso 28 kDa. Despus de escuchar cuidadosamente, John se inclin hacia delante en su silla, y sugiri que la protena podra ser un canal para el agua - algo que l dijo que los fisilogos objeto de controversia, ya que nadie haba sido capaz de definir la identidad molecular de una protena. Idea de John dio el gran avance que abre un nuevo campo. Greg Preston, un becario postdoctoral con una fuerte experiencia en biologa molecular, clon el cDNA para la protena de 28 kDa. Tambin fuimos muy afortunados de tener a Bill Guggino, Hopkins Departamento de Fisiologa, como colaborador. Greg expresa la protena en los huevos de rana aislado de Xenopus laevis - un sistema de expresin til sabe que tiene baja permeabilidad al agua. Greg puesto a prueba nuestra hiptesis de 9 de octubre de 1991. A pesar de los ovocitos que expresan la protena 28 kDa y los ovocitos de control tena el mismo aspecto, cuando se les transfiere de una solucin isotnica de agua destilada, una increble diferencia era inmediatamente obvio - todos los ovocitos control de seis no se vieron afectados, mientras que los seis ovocitos 28 kDa inmediatamente explot como palomitas de maz . Greg corri a mi oficina casi sin habla, y que ambos celebraron con alegra. Supimos desde el primer experimento que la protena de 28 kDa confiere permeabilidad al agua y deben ser el canal de agua buscado por mucho tiempo. Realizacin profesional y diversiones casa frente al Nuestro laboratorio se ha abstenido siempre de mantener el secreto estudios. Nos compartir abiertamente la informacin de nuestros estudios con el controlador de Jos y su grupo en la Divisin de Nefrologa Hopkins. Joe considera esta innovacin un importante y nos felicit, sin embargo, me advirti de publicar la informacin tan pronto como sea posible. Era consciente de que otros cientficos con grandes grupos que trataban de aislar o clonar el canal de agua putativo. Se corri la voz rpidamente, y dentro de un mes los investigadores de laboratorios de alta potencia en los EE.UU., Japn y Europa pide nuestro plsmido y la informacin sobre nuestros estudios. Intensamente nervioso, Greg y yo hemos trabajado durante las fiestas de Navidad en sesiones maratnicas para llevar a cabo todos los controles posibles. Hemos presentado el documento el 4 de febrero de 1992, pero me despierto por las noches preocupante que mi franqueza nos har que se recogi. Mi presidentes departamentales Jack Stobo, Departamento de Medicina, y Tom Pollard, Departamento de Biologa Celular / Anatoma, me asegur que haba tomado el camino tico y no se le niega el crdito por el descubrimiento. Posteriormente supe que otros grupos se centraron de inmediato toda su atencin en la protena de 28 kDa despus de enterarse de nuestras observaciones no publicadas. Tuvimos xito en la consecucin de la prioridad que nuestro papel era aceptados para su publicacin en el 17 de abril de la revista Science. Greg fue seleccionado para presentar el estudio en su conferencia plenaria en la American Society of Clinical Investigation. Varios colegas se uni a nosotros para el almuerzo antes de hablar de Greg, y surgi el nombre de "acuaporina". Todos coincidimos en que era perfecto, y nuestro 28 kDa se convirti oficialmente designado como AQP1. Hemos iniciado una serie de colaboraciones con laboratorios externos de Hopkins, y los cientficos pronto se hicieron amigos ntimos de mi laboratorio y de la familia. La colaboracin dio un amplio conjunto de estudios que nos catapult a la prominencia en el campo de transporte de membrana. Marcar Knepper, en el Laboratorio de NIH para el metabolismo renal y electrolitos, nos present a su colega ms joven, Sren Nielsen, en la Universidad de Aarhus, y quien fuera su mentor, Arvid Maunsbach. Sren con la cabeza, hemos definido los sitios de expresin de AQP1 en riones, cerebro, vasos capilares y otros tejidos mediante microscopa ptica de alta resolucin y microscopa electrnica de inmunomarcaje. Utilizando AQP1 protena que Barb Smith purificada a homogeneidad, a nuestros colaboradores Marcos Zeidel en Harvard y Suresh Amubudkar a Hopkins se definieron las funciones biofsicas de AQP1 reconstituido en liposomas sintticos. Ueli Aebi, ex colega de Hopkins, nos present a Andreas Engel en el ME Mller-Instituto de la Biozentrum de la Universidad de Basilea en Suiza. Andreas y su estudiante de posgrado Tom cristales Walz preparado membrana que contiene nuestra altamente purificada AQP1 protenas y determin la estructura por microscopa de electrones negativos de tincin, microscopa de fuerza atmica, y la cristalografa de electrones. Los prximos dos aos (1992-94) result fundamental para mi desarrollo acadmico y de investigacin de nuestro laboratorio. Mi laboratorio haba residido temporalmente en el Departamento de Biologa Celular, pero cuando las limitaciones de espacio surgi, nos enfrentamos a la necesidad de reubicar. Esto no fue

inicialmente popular con nuestro equipo, y los signos blasonadas "Hell No - No vamos a entrar!" apareci en el laboratorio. Afortunadamente, Dan Lane, Presidente del Departamento de Qumica Biolgica, me ofreci el laboratorio una vez ocupado por el bioqumico de renombre, Albert Lehninger. Esto fue un regalo del cielo, y he mantenido una posicin de la facultad en el Departamento de Qumica Biolgica desde entonces. Promocin a profesor titular lleg en 1993. Tambin en este tiempo, me ayud Tom Pollard en el lanzamiento de un nuevo doctor programa de postgrado. Con fondos de la Fundacin Caritativa Markey, de la Johns Hopkins Programa de Graduados en Medicina Celular y Molecular (CMM) se inici para permitir a los estudiantes con talento en los laboratorios de los departamentos de ciencias clnicas y bsicas para lograr las habilidades fundamentales de investigacin y un conocimiento profundo de las enfermedades clnicas. Nuestros primeros alumnos matriculados en septiembre de 1994. Estos aos trajeron las realidades de la vida adulta. Mara fue siempre muy cerca de su padre, pero su salud se haba reducido y que muri a los 81 aos mientras estbamos en un campamento en California. En vez de volver a su funeral, nos unimos a los nios en un especial de Jamie-el recuerdo a nuestro campamento en Yosemite. John Parker fue atacado trgicamente con un cncer y muri poco despus a los 58 aos. Mi padre haba sido diagnosticado con cncer de prstata y falleci a los 82 aos. Mara y yo se convirti en la generacin de los mayores de nuestras familias. Afortunadamente, la hermana de Mara de Sally se movi cerca y aadi enormemente a nuestras vidas y las vidas de nuestros cuatro hijos. Sara y Clara se convirti en artistas y acadmicos en la escuela secundaria. Clarke se convirti en un Cub Scout. Carly disfrutaban de un estatus especial como el "beb de la familia" y nos mantuvo a todos entretenidos con su sentido del humor loco. A veces, sus hermanos Carly bromas demasiado. Los nios todos disfrutamos de nuestra perros de la familia especialmente cuando se portaban mal, pero Carly experiment un desplome emocional cuando Sara, una vez su mal informados que el conejo que nuestro perro haba matado era el Conejo de Pascua! Hacer correr la voz - un cientfico itinerante La dcada de 1994-2003 result emocionante pero agotador. Hemos continuado a un ritmo acelerado en nuestro propio laboratorio, y en colaboracin clave con destacados laboratorios en Europa, juntos generaron ms de 100 publicaciones. De estos, unos pocos se destacan en mi mente como un logro particularmente notable. Los estudios estructurales comenzado con el anlisis de recombinantes en nuestro laboratorio por Greg Preston y Jin Sup Jung llev a la proposicin del modelo de reloj de arena - una estructura nica con cuatro subunidades que contienen cada uno de los poros individuales acuosa formada a partir de dos hemi-canales orientados a 180 a cada otros que se superponen dentro de la bicapa. Los estudios de electrnica cristalogrfica con Andreas Engel se ampliaron para incluir Yoshinori Fujiyoshi y de su grupo en Kyoto. Estos estudios de los cristales de la membrana biolgicamente activas revel la densidad de electrones en el 3,8 , y la fusin con los estudios recombinante producido la estructura de la primera resolucin de alta de un canal de membrana humana. Cristalografa de rayos X y simulaciones de dinmica molecular por otros cientficos pronto avanz an ms la estructura. La identificacin de los seres humanos que carecen de la protena AQP1 el resultado de la co-localizacin de los genes estructurales con los antgenos del grupo sanguneo Co en el cromosoma 7 humano por Chulso Luna y la demostracin del polimorfismo Co por Barb Smith y Greg Preston. Co-nula individuos son extremadamente raras, y las mutaciones de octavos de final se identificaron en el gen que codifica AQP1 (por lo tanto, AQP1nulo). Aunque AQP1 nulo individuos son extremadamente raros, se sienten perfectamente bien. Sin embargo, los estudios definitivos de Landon Rey aclarado un defecto importante en la concentracin renal despus de sed y un marcado retraso en la permeabilidad vascular de agua. Clonacin del homlogo AQP4 en el cerebro de Jin Sup Jung llev a un captulo nuevo e importante en el reconocimiento de los transportadores de agua en la barrera hematoenceflica por Sren Nielsen y Ole Petter Ottersen. La base estructural de la localizacin AQP4 el resultado de una observacin fundamental por John Neely y han llevado al reconocimiento por Mahmood Amiry-Moghaddam que contribuye negativamente AQP4 a la aparicin de edema cerebral. AQP5, la acuaporina de las glndulas secretoras, fue clonado por Surabhi Raina y fue demostrado por Landon y Sren que tienen una distribucin nica en las glndulas y los neumocitos alveolares. Mientras que varias funciones clnicas se prev, la demostracin funcional de AQP5 de la sudoracin puede tener una profunda relevancia a la regulacin de la temperatura corporal. AQP6 fue demostrado por Masato Yasui ser nico entre las acuaporinas en el que libremente los transportes aniones dentro de las clulas secretoras de cido renal conductos colectores. Los experimentos realizados por Jen Carbrey y Gorelick Dan predicen que AQP9 es esencial para la conversin de glicerol en glucosa en el hgado durante el ayuno. Barry Rosen y su grupo de la Wayne State considerar que el transporte a travs de arsenito AQP9, lo que explica la hepatotoxicidad del compuesto. Mltiples estudios de Giuseppe Calamita, Bonhivers Melanie, Carbrey Jen, Kozono David, Mario Borgnia, y Beitz Eric han documentado los papeles fascinantes de acuaporinas en los microorganismos. El inters sorprendente en nuestro trabajo demostrado por los grupos en los EE.UU. y el extranjero proporcionan un medio directo de mostrar los esfuerzos de nuestros jvenes cientficos y colaboradores. Durante la dcada, que llev a cabo una extensa serie de viajes de conferencia, lo que hace ms de 250 presentaciones en universidades, institutos y reuniones cientficas en los cinco continentes. Si bien la

oportunidad de hablar directamente con los cientficos de todo el mundo era importante para establecer la visibilidad para el campo de las acuaporinas, la oportunidad de conocer y animar a cientos de estudiantes y becarios posdoctorales fue una experiencia maravillosa, ya que estos jvenes representan el futuro de la ciencia. Nuestra vida familiar acomodado mis ausencias prolongadas. Se realizaron viajes especiales de la familia acampada libre y cada hijo me acompa en algunos de los viajes internacionales. Sin embargo, la falta de cumpleaos, aniversarios, graduaciones y es algo que no estoy orgulloso. Sin embargo, todos los miembros de la familia han hecho bien. Sara se gradu de la Universidad de Colgate y es un administrador de la Universidad de Virginia en Charlottesville. Comprometida con Jason Watson, esperamos que su boda el prximo verano. Claire se gradu de la Universidad de Duke y ense la ciencia de 8 yearold los nios en Italia. Ella ahora est estudiando la arquitectura del paisaje en la Universidad de Harvard Graduate School of Design, en Cambridge. Clarke gan su premio Eagle Scout y recibi numerosos honores por el arte y la fotografa. l es un estudiante en el Hampshire College en Amherst MA. Carly veces expresa su consternacin por ser el hijo nico que queda en la casa, pero sus intereses en las aventuras de silvestre y estudio de las artes siguen los intereses de sus hermanos. Mara tom cursos de posgrado de la escuela en la educacin y se convirti en un maestro de preescolar. Cuando compartimos las observaciones, es claro que su hijo de 3 aos de edad, los alumnos se muerden ms a menudo que mis 25 aos de edad, estudiantes de postgrado lo hacen, pero la diferencia es cuantitativa y no absoluta. "Es increble" Antes de la fama como resultado de los estudios de las acuaporinas, mi mayor reconocimiento acadmico fue el Premio Joven Investigador 1991 en la seccin oriental de la Federacin Americana de Investigacin Clnica. La presentacin en una pequea reunin en la ciudad de Nueva York era una delicia. Mis hijos, sin embargo, lleg a la conclusin de que, a los 42 aos, debe ser "la ms antigua del mundo joven investigador". Aunque nunca me he considerado un psiclogo o un nefrlogo, los cientficos en los campos generosamente acogido nuestra estudios sobre las acuaporinas y colm nuestro laboratorio con distinciones como el Premio 1999 Homer Smith. El reconocimiento internacional de nuestro trabajo se hizo terriblemente real cuando recib la invitacin para presentar la acuaporina historia como parte del Simposio de Estocolmo Jubileo anterior al 100 aniversario de los Premios Nobel en diciembre de 2001. La posibilidad de que algn da yo podra realmente ganar un Nobel fue criado por mi padre durante su enfermedad terminal. Al no ser supersticioso, decid hacer caso omiso de la idea, pero agradable ensoacin Nobel de vez en cuando debe entrar en las mentes de muchos cientficos. Se convirti en una realidad viva cuando el telfono son a las 5:30 am el 8 de octubre de 2003. La Real Academia Sueca de las Ciencias y el Comit del Premio Nobel de Qumica me despert con la noticia extraordinaria. Una avalancha de periodistas descendi sobre la casa, y slo con dificultad se podr ponerse en contacto con Mara a mi madre para compartir la noticia. De acuerdo con su origen humilde agricultura escandinavos, ella respondi con calma: "Eso es muy bonito, pero decirle a Pedro que no se te suba a la cabeza." Cuando llegu al laboratorio, las celebraciones ya haban comenzado. El sistema de mensajes de telfono haba llenado, pero la voz emocionada de mi colega noruego era especial. "Peter, Peter, que acabamos de escuchar las noticias. Es increble!" Luego, tras una breve pausa, la voz volvi. "Quiero decir que es muy creble, pero es maravilloso!" Dentro de los prximos das, fui contactado por cientos de colegas cientficos, los familiares de los EE.UU. y los pases escandinavos, amigos desde la infancia, compaeros de clase de la escuela primaria a travs de la Facultad de Medicina - muchas a quien no haba visto en aos. Para m, la oportunidad de renovar esos lazos es quiz la mejor parte de ganar un Premio Nobel.