FACULTAD DE MEDICINA HUMANA ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA

BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR CICLO: 2012-00

ACTIVIDAD AULA - CASA N 2

1. Seale cules de los siguientes enunciados son verdaderos (V) o falsos (F). Fundamente porqu, y en los enunciados falsos, cambiar la frase para hacerla cierta. a. Los ribosomas mitocondriales de las clulas musculares se parecen ms a los de las bacterias del intestino que a los del citosol de las mismas clulas musculares.( ) b. Las clulas procariontes carecen de membrana plasmtica ya que poseen una pared celular () c. El flagelo bacteriano y el de un espermatozoide estn constituidos por la protena tubulina. () d. La membrana plasmtica de una bacteria carece de colesterol pues contiene hopanoides( ) e. Algunas clulas procariotas son muy grandes como para ser observables a simple vista. ( ) f. La relacin rea/volumen es mayor en las clulas procariontes que en las eucariontes. ( ) g. La teora endosimbionte considera que el aparato de Golgi tiene un origen bacteriano( ) h. Dado que las procariotas no tienen mitocondrias, no llevan a cabo la sntesis de ATP( ) i. La mayora de las clulas eucariontes son ms grandes que las procariontes( ). j. El DNA cromosomal bacteriano le confiere resistencia a los antibiticos( ) Represente una clula procariota y una eucariota, seale todos sus componentes. En un cuadro comparativo establezca las semejanzas y las diferencias entre ellas. Indique si las siguientes afirmaciones sobre la membrana plasmtica son verdaderas o falsas. Si una afirmacin es falsa fundamente por qu. a. Aunque las molculas lipdicas son libres de difundir en el plano de la bicapa lipdica, ellas no pueden cruzar la bicapa (flip-flop) a menos que existan translocadores de fosfolpidos. b. Las membranas intracelulares dividen la clula en compartimientos funcionalmente diferentes, cada uno con lmites establecidos por membranas impermeables. * c. Tanto en trminos de rea como de masa, la membrana plasmtica es un componente membranoso minoritario en las clulas eucariticas. (F) d. La difusin facilitada de un catin siempre se realiza desde el compartimento en el que su concentracin es mayor, al de concentracin menor. e. El dixido de carbono y los aniones bicarbonato suelen desplazarse en el mismo sentido, a travs de la membrana plasmtica del eritrocito. f. Se llama potencial de membrana a la diferencia de potencial elctrico entre el interior y el exterior de la clula.(V) Los potenciales de membrana son cambios rpidos de polaridad

2. 3.

a ambos lados de la membrana que separa dos disoluciones de diferente concentracin, como la membrana celular que separa el interior y el exterior de una clula. Duran menos de 1 milisegundo. Cuando se habla de potenciales de membrana, se debera de hablar del "potencial de difusin" o "potencial de unin lquida". Dicha diferencia de potencial esta generada por una diferencia de concentracin inica a ambos lados de la membrana celular. Los potenciales de membrana son la base de la propagacin del impulso nervioso.
g. h. i. j. La membrana es muy permeable al in K+ porque la bomba de Na+ transporta tambin K+. Las protenas ancladas a la bicapa se unen a ella mediante interacciones hidrofbicas. (V) Los iones con carga positiva difunden muy bien en la bicapa lipdica de la membrana Los glucolpidos nunca se encuentran en la cara citoplsmica de las membranas.

4.

En la grfica adjunta se representa la variacin del volumen de una clula en funcin del tiempo. La clula fue colocada inicialmente en un medio con alta concentracin de sales y a los 10 minutos fue transferida a un medio con agua destilada. Proponga una explicacin razonada a los cambios de volumen que sufre la clula a lo largo del tiempo.

5. Complete el siguiente cuadro.

Difusin simple Difusin facilitada (canales) A favor Difusin facilitada (carriers) Transporte activo primario Transporte activo secundario

Direccin (a favor/en contra del gradiente) Requieren una protena de membrana ?

ayuda de una protena transporta dora

Tipo de sustancias transportan Especificidad Gasto de ATP

que
NO

6.

Si se inhibe la bomba de Na+:K+: a. Cambiarn las concentraciones intracelulares de K+ y Na+? Y las extracelulares?

Si no hay bomba de sodio y potasio, el sodio extra celular va a seguir ingresando mediante los canales de sodio presentes en la membrana adicionalmente en la parte exterior el potasio no podra ingresar por lo que hay un cambio de concentraciones es decir en el interior de la celula habra mas Na y afuera de la misma habra mas potasio
b. Cambiar el potencial de membrana?

ste cambio de concentraciones interfiere con el potencial de membrana xq al haber mayor o casi todo el sodio extra celular dentro de la celula, hace q este sea positivo entonces aumenta el potencial de membrana en reposo y esta proximo al umbral de descarga y tan solo pequeos estmulosse provoca el potencial de accion
c. Cambiar la concentracin de Cl- intracelular?

claro tmbn varia su concentracon intra celular xq este depende del sodio extra celular para poder salir de la celula hacia el espacio entercelular *x lo tanto se queda secuestrado en el interior de la celula
d. Se modificar el volumen celular?

Sin la existencia de la bomba, dado que los solutos orgnicos intracelulares, a pesar de contribuir en s mismos poco a la presin osmtica total, tienen una

gran cantidad de solutos inorgnicos asociados, la concentracin intracelular de estos (que generalmente son iones) es mayor que la extracelular. Por ello, se producira un proceso osmtico, consistente en el paso de agua a travs de la membrana plasmtica hacia el interior de la clula, que aumentara de volumen y diluira sus componentes. Las consecuencias seran catastrficas ya que la clula podra llegar a reventar (proceso conocido como lisis). el agua ingresa a la celula mediante poros q tiene la misma, ahora la regulacion del agua intra y extra celular (para q salga el agua de la celula), requiere de la presencia de sodio extracelular (cosa q no existe de no funcionar la bomba de sodio y potasio) con la finalidad de que el liquido extracelular tenga un mayor potencial electrico positivo lo cual atrera a los iones negativos como lo es el cloro, hacia fuera de la celula, entonces ambos Na+ y Cl- fuera de la celula hacen que el agua pueda salir desde la celula hacia el intersticio
7. Sabiendo que la glucosa ingresa a las clulas intestinales desde la luz del epitelio fundamentalmente cotransportada con Na+, cmo espera encontrar su transporte si: a. Se suprime el Na+ del lado luminal? b. Desaparece el gradiente de concentracin de glucosa entre el medio y la clula? c. Desaparece el gradiente de potencial elctrico transmembrana? d. Se agrega floridzina del lado luminal? e. Se anula la actividad de la Na+-K+ ATPasa? 8. Mencione ejemplos de sustancias que utilicen cada uno de los mecanismos de transporte previamente sealados. Grafique representando la bicapa lipdica, las protenas involucradas y las molculas que se transportan en cada caso. 9. Un nuevo medicamento (S) fue analizado para estudiar su paso a travs de una membrana y se pudo encontrar que sus concentraciones en el lado interior era una funcin del tiempo: S (mg/ml) tiempo (seg) 25 5 50 10 100 20 200 40 Explique como pasa S a travs de la membrana. 10. En el transporte antiport, dos sustancias pueden moverse en direcciones opuestas a travs de la membrana plasmtica. En la mayora de las clulas, los antiportes Na +/Ca2+ mantienen una concentracin baja de Ca en el citosol de las clulas. Cmo afecta el digital este transporte ?. 11. El jugo gstrico del estmago tiene un pH de 2,0. Esta acidez resulta de la secrecin de protones por las clulas epiteliales de la mucosa gstrica. a. Qu tipo de bomba se encuentra en la mucosa intestinal. Explique

El

mecanismo

de

transporte

secundario

Na+-glucosa

Otro sistema de transporte secundario usa la bomba de Sodio/Potasio en una primera etapa, genera as un fuerte gradiente de Sodio a travs de la membrana. Luego la protena "simport" para el sistema Sodio-Glucosa usa la energa del gradiente de Sodio para transportar Glucosa al interior de la clula.

Este sistema se usa de manera original en las clulas epiteliales del intestino. Estas clulas toman glucosa y sodio del intestino y lo transportan al torrente sanguneo utilizando la

accin concertada de los "simport" para Sodio/Glucosa, la glucosa permeasa ( una protena canal de difusin facilitada para la glucosa) y las bombas de Sodio/Potasio. Se debe hacer notar que las clulas del intestino se encuentran unidas entre s por "uniones oclusivas" que impiden que nada proveniente del intestino pase al torrente sanguneo sin ser primero filtradas por las clulas epiteliales.

Este mecanismo es la base de la formulacin de las "sales de rehidratacin oral" que contiene glucosa y electrolitos, utilizada para combatir los efectos de la diarrea provocada por el clera y otras bacterias patgenas. La cura implica no solamente el uso de antibiticos sino adems la reposicin del agua que se pierde por accin de las toxinas microbianas. La administracin oral de glucosa y sales, que se absorben coordinadamente a nivel del intestino delgado, genera un gradiente osmtico que arrastra el agua desde la luz del intestino hacia la sangre.

Las Protenas con transporte sodio-glucosa son protenas transmembranales situadas en el lado apical de la clula; son una familia de transportadores de glucosa que se encuentran en la mucosa intestinal del intestino delgado (SGLT1) as como en las clulas del tbulo proximal de las nefronas (SGLT1 y SGLT2). Su funcin es ingresar sodio y glucosa desde la luz tubular hacia el interior de las clulas peritubulares. La energa para atraer al ion sodio se obtiene del gradiente que genera una bomba sodio-potasio en la membrana basal de la clula, as se entiende que son secundariamente activos.

[editar] Tipos
Hay varios tipos, a nivel renal los mas importantes son SGLT1 y SGLT2. SGLT1 se encuentra principalmente en los sectores 1 y 2 del tbulo proximal, presenta alta afinidad por la glucosa y baja tasa de transporte; por lo tanto brinda una reabsorcin rpida. Por otro lado SGLT2 se encuentra principalmente en sector 3 del tbulo proximal, tiene afinidad intermedia por la glucosa y alta tasa de transporte, por lo que proporciona reabsorcin completa.
En la membrana basolateral se encuentran las enzimas del sistema ATPasa-Na-K, que dirigen la "bomba de sodio"

b. Que agentes actun inhibiendo esta bomba. Explique

12. Un hombre de 38 aos de edad con peso de 71 kg relata que su padecimiento actual es inanicin con anorexia, dolor abdominal y diarrea. Un da despus sigui con nausea intensa, vmito y diarrea muy abundante y lquida. Ingres al hospital con hipotensin postural y deshidratacin. Se pudo aislar Vibrio cholerae toxgeno de sus heces. El paciente mejor rpidamente al reponerle agua, electrolitos y administrarle tetraciclina por va bucal. a. Cmo acta la toxina colrica. Que procesos de la membrana plasmtica resultan afectados por Vibrio cholerae en un caso de clera ?

El clera mata por el severo desequilibrio hidroelectroltico que causa la diarrea profusa de varios litros. La toxina penetra parcialmente al enterocito y se fija a la ribosa del ADP de la subunidad alfa de la proten G estimuladora, esto inhibe la actividad GTPasa de la protena G, quedando esta activada permanentemente y provocando un aumento sostenido del AMPc que mantiene activo el canal de cloro, producindose una secrecin profusa de cloro a la luz, seguido por el sodio y el agua. Adems se inhibe el transporte sodio-cloro al interior, llevando ambos a prdidas cuantiosas de sodio, cloro y de agua.

La toxina del V. cholerae est compuesta por dos Subunidades 1. Subunidad A (porcin activa): Compuesta por Subunidad Al A2. 2. Subunidad B (porciones de unin): constituida por 5 subunidades (9,11). Cada subunidad B tiene la capacidad de unirse a una molcula demonosialoganglisidoGMlenla membrana de los enterocitos, esta unin produce un cambio

conformacional en la estructura de la toxina, haciendo que la subunidad A interactu con la membrana del enterocito (Fig.4), la subunidad A se separa en subunidad Al y A2, esta ltima activa la adenilciclasa, la cual incrementa el AMP ciclico que indcela activacin de las proteincinasas, stas fosforilan las protenas M de la membrana basolateral, produciendo cambios en el transporte inico (11,12) Fig.5: A nivel de las criptas hay aumento de secrecin de aniones como el Cl, HC03 y agua, y a nivel del extremo de las vellocidades, induce un bloqueo completo de la absorcin del NaCl no acoplado (9,11). Adems estimula la secrecin intestinal, aunque se desconoce el mecanismo Normalmente existe un flujo bidireccional de agua e iones, mantenindose un equilibrio entre la absorcin y secrecin, cuando se pierde este equilibrio ocurre la diarrea (8). Por una parte, la absorcin de agua depende del flujo de solutos, especialmente por la absorcin de sodio (Na) y cloro (Cl) (7,8). Esta absorcin de Na se realiza en dos fases: La primera fase consiste en la entrada de Na y solutos a la clula entrica, la segunda fase ocurre por el transporte activo de Na a travs de la membrana basolateral del enterocito hacia el espacio intercelular, proceso mediado por la bomba de Na-KATPasa (8). La primera fase de absorcin de Na ocurre por tres mecanismos: Un mecanismo consiste en la difucin electrognica de Na no acoplado, en la que el Na entra a la clula por gradientes elctricos y de concentracin, el agua se absorve por un proceso osmtico (8) Fig. 1. El segundo mecanismo consiste en el paso de Na acoplado con algunos nutrientes, el Ch se acopla con diversos solutos como glucosa y glicina y ambos se fijan a una proteina portadora de la microvellocidad. Este portador los transporta hacia el interior del enterocito (7) y por gradiente osmtico se absorve el agua. Este mecanismo no se v afectado en los procesos diarreicos y en l se basa la rehidratacin oral (7,8). Fig.2. Otro mecanismo consiste en la absorcin de Na por arrastre de solventes. El flujo de agua a travs de la mucosa por los gradientes de presin osmtica arrastra consigo iones de Na. Por otro lado, en los mecanismos de secrecin intestinal existen tres tipos de mensajeros: El calcio, sistema de prostaglandinas y nucletidos cclicos (tanto el AMP ciclco y GMP cclico) (8). Fisiopatologicamente hablando, el clera es una diarrea secretoria sin cambios inflamatorios de la mucosa intestinal, que se caracteriza por un ingreso neto de lquidos en el lumen intestinal, como resultado de alteraciones bioqumicas de las clulas de la mucosa del intestino delgado que supera la capacidad de absorcin del colon Un vez que se ingiere el microorganismo, su viabilidad es comprometida por un medio cido, con pH abajo de 6(1), es decir que la acidez gstrica es la primera lnea de defensa del husped contra el clera (10). Es por esto, que se necesitan 10<8) a 10(W) organismos para causar la

enfermedad, pero cuando es ingerido con alimentos se necesitan slo 10* a 10(3) (1). Una vez que logra pasar el estmago, tienen que sobrepasar las defensas especficas e inespecificas del husped, ellas son la peristalsis intestinal y la IgA secretoria (1). Posteriormente el Vibrio se multiplica, se adhiere a la mucosa intestinal y produce una enterotoxina (9), la cual despus de una exposicin nica y breve (inferior a 10 minutos), es capaz de producir la secrecin

b. Cmo se produce la rehidratacin ? Explique.

Cuando se produce una diarrea secretora con secrecin exagerada de cloro y prdidas simultneas de sodio y agua hay alteracin funcional de secrecin de cloro y del transporte sodio-cloro al interior del enterocito, pero los otros transportes estn intactos: cotrasporte de sodio-glucosa y bomba de sodio potasio. Al aportar por va oral sodio y glucosa con agua se estimula el cotransporte sodio-glucosa aumentando la absorcin de sodio y a esto le seguirn el cloro y el agua, restablecindose el equilibrio hidroelectroltico.

LOS CANALES INICOS: LA BIOLOGA Y PATOLOGA

El transporte de molculas polares como los azcares o aminocidos o a partculas cargadas como los iones hacia dentro y fuera de la clula o entre diferentes compartimentos intracelulares, se lleva a cabo por protenas de membrana como bombas, transportadores y canales inicos. Los canales inicos estn formados de una molcula proteica nica o de varias de ellas constituyendo complejos moleculares. Cuando el canal inico se abre, forma un poro acuoso que se extiende a travs del espesor de la membrana. En la ruta de conduccin se encuentra el filtro de selectividad inica que permite el flujo preferencial de un tipo especfico de ion, por ejemplo los canales de K+ permiten el flujo de iones K+ muy efectivamente pero no permiten que niveles apreciables de iones Na+ crucen la membrana. De esta manera tenemos canales de Na+, K+, Ca2+ y Cl- que forman varias familias de cada uno. Existe otro grupo de canales que transportan cationes (Na+ y K+) de manera simultnea, sin gran selectividad entre ellos pero que no permiten el paso de aniones (canales catinicos no selectivos). El flujo de iones se lleva a cabo a una gran velocidad de hasta 10 6 iones/segundo, considerndose el sistema de transporte inico ms eficiente. Esta eficiencia se da gracias a que los iones fluyen pasivamente en favor de su gradiente electroqumico, siendo esto una caracterstica muy importante para los procesos de las clulas excitables. Las probabilidades de cierre y apertura de los canales inicos son controladas por un sensor que puede ser elctrico, qumico o mecnico. En el caso de los canales activados por voltaje, el sensor incluye varios aminocidos cargados que se mueven en el campo elctrico de la membrana durante la apertura o cierre del canal. En el caso de los canales activados por ligando, el sensor es una regin de la protena canal que se encuentra expuesta ya sea al exterior o al interior de la membrana, que une con gran afinidad una molcula especfica que lleva a la apertura o cierre al canal. Los canales mecanosensibles, como los que se encuentran en los corpsculos de Pacini, se abren por el estiramiento que sufre la membrana celular ante la aplicacin de presin y/o tensin. El mecanismo sensor en esta ltima clase de canales no es claro an, sin embargo, se ha propuesto que participa el citoesqueleto que se encuentra inmediatamente por debajo del canal.

Las patologas de los canales inicos o canalopatas El concepto reciente de canalopata se refiere a los defectos en la funcin de los canales inicos que llevan a alteraciones fisiolgicas importantes en diversos tejidos. Las canalopatas pueden producirse por dos tipos de mecanismos: las alteraciones genticas y las enfermedades autoinmunes. Dentro de las alteraciones genticas se encuentran las mutaciones que se presentan en la regin codificante del gen para un canal inico. Frecuentemente estas mutaciones producen cadenas polipeptdicas que no son procesadas correctamente y no se incorporan a la membrana plasmtica o bien, al acoplarse las subunidades y formar los canales, stos no son funcionales. Otra posibilidad frecuente es que an siendo canales funcionales, presentan una cintica alterada. Cualquiera que sea el caso, llevan a la ganancia o prdida de la funcin del canal. Dentro de las alteraciones genticas es posible tambin que se presenten mutaciones en la regin promotora del gen que codifica para un canal inico. Esto puede causar subexpresin o sobrexpresin de la protena canal producindose cambios en el nmero de canales, es decir, tambin existira aumento o disminucin de la funcin. Como tercer tipo de alteracin gentica que determina la disfuncin, se encuentran las mutaciones en los genes que codifican para molculas reguladoras de los canales inicos ya sea por defectos en su estructura por s mismas, o por defectos en las rutas que llevan a su sntesis.

a. Con la ayuda de un diccionario mdico, defina cinco trminos que desconozca. b. Esquematice los tipos de canales y como ellos funcionan. c. Investigue sobre las canalopatas (describa brevemente cuatro de ellas).

Las canalopatas son varios trastornos de la excitabilidad de la membrana muscular asociadas con mutaciones en los canales de calcio, sodio o potasio y los receptores de acetilcolina. Este grupo de enfermedades ha sido denominado canalopatas. Las canalopatas muestran evidencia de convergencia fenotpica; en forma notable la ataxia episdica puede ser causada por mutaciones en los canales de calcio o en los canales de potasio. Las canalopatas neuronales tambin muestran divergencia fenotipica; por ejemplo mutaciones diferentes en el mismo gen del canal de calcio se asocia con migraa hemipljica familiar, ataxia episdica o progresiva, coma y epilepsia

Canalopatas del msculo esqueltico

Los primeros trastornos heredados de los canales inicos, que se identificaron en los humanos fueron aquellos que afectan al msculo esqueltico. La fidelidad y velocidad de la contraccin esqueltica depende en forma crtica de la excitabilidad elctrica de la fibra muscular. La aceticolina que es liberada en la terminal de la neurona motora se une al receptor de acetilcolina post-sinptico y produce una despolarizacin local, el potencial de la placa terminal. En el msculo sano este potencial sobrepasa el umbral para generar un potencial de accin.

Canalopatas del sistema nervioso central

Las canalopatas neuronales usualmente se manifiestan como disfuncin neurolgica transitoria: convulsiones, migraa hemipljica, ataxia episodica. Una excepcin notable es la ataxia espinocerebelosa lentamente progresiva, asociada con mutaciones en la subunidad alfa-1.

Canalopatas de sodio

El primer canal de sodio que se relaciono con la epilepsia humana fue la subunidad accesoria B1 que se codifica en el cromosoma 19.
d. Realice un esquema de la lectura.

http://translate.google.com.pe/translate?hl=es&langpair=en| es&u=http://textbookofbacteriology.net/cholera.html http://www.eccpn.aibarra.org/temario/seccion6/capitulo115/capitulo115.htm http://www.upch.edu.pe/facien/dcbf/fisiohum/practicas/PRACTICADIGESTIVOCIENCIAS.pdf http://translate.google.com.pe/translate?hl=es&langpair=en| es&u=http://www.ebi.ac.uk/interpro/potm/2005_9/Page2.htm http://pathmicro.med.sc.edu/spanish/chapter10.htm http://es.answers.yahoo.com/question/index?qid=20081109132602AAEUO4T http://www.mancia.org/foro/uba-microbiologia-plan-viejo/39549-vibrio-cholerae.html http://es.scribd.com/doc/56116297/TOXINA-COLERICA http://www.medigraphic.com/pdfs/patol/pt-1999/pt994i.pdf

Es a nivel de la mucosa donde se ubican los principales mecanismos que controlan la absorcin del agua y los electrlitos4 (fig. 1). http://bvs.sld.cu/revistas/ped/vol71_2_99/ped05299.pdf

12 http://www.saber.ula.ve/bitstream/123456789/32972/5/clase_11.pdf