UNIVERSIDAD AUTNOMA DE QUERTARO F.C.N.

LICENCIATURA EN MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

LABORATORIO DE BROMATOLOGA

MANUAL DE LABORATORIO DE BROMATOLOGA

CUARTO SEMESTRE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

PROFESOR: M. en C. JOS GUADALUPE GMEZ SOTO

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NOMBRE: ELABORACIN DE REACTIVOS PRCTICA No. 1 No. Equipo:___ Fecha:_____

CALIFICACIN:____

INTRODUCCIN La calidad de un reactivo involucra estabilidad, pureza de los ingredientes y estar libre de interferencias que pueden causar impurezas. Un reactivo se degenera con el tiempo y es necesario preparar uno nuevo para cada lote de muestras. La variacin por reactivo entre lotes de muestras puede ser una fuente de error particular, si la concentracin y la estandarizacin no son ptimas. Se tiene que emplear la cantidad exacta de reactivo, ni exceso ni deficiencia, pues esto puede acarrear grandes errores. Los estndares analticos de pureza se encuentran en el cuadro 1. Cuadro 1. ESTNDARES ANALTICOS DE PUREZA Abreviacin Significado Pureza relativa AR* Analytical Reagent (Reactivo analtico) Grado alto CP* Pure Chemically (Qumicamente puro) Grado alto ACS* American Chemical Society Standard Grado alto (Estandar de la Sociedad Qumica Americana) USP* US Pharmacopoiea (pharmaceutical) Grado mediano (Farmacopea US - farmacutica) Tech* Technical grade (Grado tcnico) Pureza baja Prac* Practical grade (Grado prctico) Utilizable para la manufactura qumica * Abreviaciones en ingls Cuando se vaya a preparar una solucin o reactivo, se recomienda cerciorarse de que l o los reactivo(s) que se va(n) a emplear sean los correctos, verificando su frmula, densidad y pureza (Anexo B). Al hablar de la concentracin de una solucin, los trminos "concentrada" y "diluida" son relativos, ya que su significado vara considerablemente. Por esto son ms interesantes las expresiones cuantitativas, ya que en este caso las cantidades, tanto del solvente como del soluto, pueden medirse en peso, volumen o en nmero de moles. Debido a que las soluciones son de gran importancia dentro de la qumica, hay varias formas de describir su concentracin. 1. MOLARIDAD Una solucin molar se define como aquella que contiene un mol de soluto (sustancia que se disuelve) en cada litro de solucin. La palabra molar se abrevia con la letra M y cuando se habla de la molaridad de una solucin se est haciendo referencia a su concentracin. De manera general, la molaridad se expresa en moles de soluto / litro (l). M = PM / l Donde: PM = Peso molecular de una mol de soluto Una solucin molar se prepara disolviendo un mol de una sustancia en el disolvente apropiado (generalmente agua) y diluyendo hasta un volumen final de un litro. Cuando se desean cantidades pequeas o grandes de una solucin, se utilizan fracciones o mltiplos de la mol (segn sea el caso) que

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se disuelven y diluyen a la fraccin o mltiplo del litro. Adems es muy importante tomar en cuenta la pureza del reactivo. Con el siguiente ejemplo se puede ilustrar lo anteriormente dicho: Preparar una solucin de cido sulfrico (H2SO4) 1.9 M: PM = 98 g/ mol Densidad ()= 1.8364 g/ml Pureza = 96% Una solucin 1 M se prepara de la siguiente manera: 1 M = 98g cido sulfrico / 1 l Se pesan 98 g de cido sulfrico y se afora a 1 l con agua, pero para preparar una solucin 1.9 M: 1 M - 98 g cido sulfrico 1.9 M - X X = 186.2 g / l Se pesan 186.2 de H2SO4 y se afora a 1 l con agua, pero como el H2SO4 es lquido, se debe tomar en cuenta su densidad: Densidad = Masa / Volumen Despejando el volumen: Volumen = Masa / Densidad Volumen = 186.2 g / 1.8362 g/ml = 101.39 ml de H2SO4 / l Posteriormente se debe considerar la pureza del H2SO4:: 100 ml 96 ml cido sulfrico X 101.39 ml cido sulfrico

X = 105.61 ml cido sulfrico/l Por lo tanto, para preparar una solucin de cido sulfrico 1.9 M, tenemos que adicionar 105.61 ml del cido en un poco de agua, adicionndolo lentamente por las paredes del matraz aforado, posteriormente se afora a 1 l con agua destilada. Por otro lado, si solo se desea preparar 100 ml de la solucin, entonces necesitamos adicionar 10.561 ml del cido y aforarlo a 100 ml Para simplificar el proceso anterior, se puede aplicar la siguiente frmula: V x PM x M x 100 1000 x P x D Donde: V = Volumen deseado a preparar (ml) PM = Peso molecular del soluto M = Molaridad deseada a preparar P = Pureza del soluto o reactivo a preparar (%) D = Densidad del soluto o reactivo a preparar (g/ml). Este solamente se emplea cuando se trata de un reactivo lquido.
2. NORMALIDAD

Otra forma de expresar la concentracin de una solucin y que se emplea frecuentemente en el anlisis qumico es la Normalidad, palabra que se abrevia con la letra N. Una solucin normal es aquella que contiene el peso equivalente (p.eq.) de una sustancia en un l de solucin. Como puede verse, se ha introducido un nuevo trmino: peso equivalente, cuyo significado

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es necesario recordar. Una de las propiedades de combinacin ha recibido el nombre de valencia y est relacionada con el nmero de electrones combinables existentes en los tomos. Puede decirse que un equivalente expresa la capacidad de combinacin de una sustancia y por lo tanto es muy til en los clculos de las reacciones qumicas. Entonces, el peso equivalente de una sustancia ser su peso atmico o molecular dividido entre el nmero de unidades o equivalente (n.eq.) que reaccionan o entre su valencia. En otras palabras, para cidos y bases, las unidades que reaccionan se calculan dividiendo su PM entre el nmero de tomos de Hidrgeno (H) o de radicales Hidroxilo (OH) reemplazables que contenga la molcula segn sea el caso, por ejemplo: El cido sulfrico (H2SO4) tiene dos unidades que reaccionan, entonces, el p.eq. del cido se calcula dividiendo su PM entre 2: p.eq. H2SO4 = PM / 2 = 98.08 / 2 = 49.04 g El cido clorhdrico (HCl) solo tiene una unidad que reacciona, por lo tanto su peso equivalente ser: p.eq. HCl = PM / 1 = 36.5 / 1 = 36.5 g En ocasiones se considera que el equivalente es demasiado grande, sobre todo en Qumica Clnica, es entonces cuando se utiliza una unidad 1000 veces menor que es el mili equivalente cuyo smbolo es meq.Ahora s podemos aplicar el concepto de solucin normal: si el peso equivalente de cualquier sustancia se disuelve en agua o en otro solvente hasta completar 1 l, se habr preparado 1 l de solucin normal. 1 N = _PM_ = p.eq. /l N.eq. Ejemplo: Preparar una solucin de cido sulfrico 0.1 N: PM = 98 g/mol = 1.8364 g/ml Pureza = 96% Para preparar una solucin 1 N se requerir adicionar el p.eq. del cido sulfrico en 1 l de agua, o sea, el PM sobre el n.eq. del H2SO4: 98 g / 2 = 49 g de cido sulfrico en 1 l de agua Pero como la concentracin requerida es de 0.1 N, entonces: 1N 49 g 0.1 N X X = 4.9 g de cido sulfrico / l En este caso el cido se trata de un lquido, por lo que hay que transformarlo a volumen, mediante la densidad: = M/V Despejando el volumen: V = M/ V = 4.9 g / 1.8364 g/ml = 2.6683 ml de cido sulfrico/ l Pero adems hay que considerar la pureza del reactivo: 100 ml del reactivo 96 ml de H2SO4 X 2.6683 ml H2SO4 X = 2.78 ml cido sulfrico / l

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Por lo tanto, para preparar una solucin de cido sulfrico 0.1 N, se requerir adicionar 2.78 ml de cido y aforar a 1 l con agua destilada. Para simplificar, se puede hacer uso de las siguientes frmulas: V x p.eq. x N x 100 1000 x P x D V x PM x N x 100 1000 x n.eq. x P x D Donde: V = Volumen deseado a preparar (ml) p. eq. = Peso equivalente del soluto o reactivo a preparar PM = Peso molecular del soluto n.eq = Nmero equivalente del soluto N = Normalidad deseada (N) P = Pureza del soluto o reactivo (%) D = Densidad del soluto o reactivo a preparar (g/ml)
3. PORCENTUALIDAD

Una de las formas ms simples de expresar la concentracin est basada en la composicin porcentual o en tanto por ciento de una solucin. Dicho de otra manera, en las soluciones, el soluto (sustancia que se disuelve) se puede encontrar en diferentes proporciones en relacin con el solvente (lquido donde se disuelve), por lo que se emplean varios trminos que indican la cantidad del soluto en relacin al volumen total de la solucin. Una de las formas de expresar esta relacin es con las soluciones porcentuales. El porcentaje de estas soluciones se puede expresar como: peso en peso (p/p) volumen en volumen (v/v) peso en volumen (p/v) Peso en peso: Este porcentaje expresa la cantidad en gramos del soluto en 100 g de la solucin final. La preparacin de este tipo de soluciones no es muy frecuente en el laboratorio, sin embargo, es importante conocerlas porque muchos reactivos comerciales son envasados como soluciones p/p. Volumen en volumen: Este tipo de porcentaje se emplea generalmente en la preparacin de soluciones de lquidos. Frecuentemente, la composicin de las soluciones de alcohol se expresan en estos trminos. Para preparar una solucin porcentual de este tipo se considera que las sustancias que se van a disolver estn al 100%, o sea que estn formadas solo por soluto. Con fines prcticos se usan 100 ml como volumen final de la solucin y la cantidad del soluto (en este caso son ml) empleado se expresa en forma porcentual. Por ejemplo: en una solucin de alcohol al 96%, por cada 100 ml, 96 ml corresponden al soluto (alcohol qumicamente puro) y el resto (hasta completar al 100 ml) el agua o solvente empleado. Ej: Preparar una solucin de metanol al 80%: Medir 80 ml de metanol y completar a 100 ml con agua destilada. Peso en volumen: Este porcentaje expresa el nmero de gramos de soluto en 100 ml de la solucin final. Por ejemplo: para preparar una solucin al 10% de cloruro de sodio, se pesarn 10 g de ste y se disolvern en el solvente indicado hasta un volumen de 100 ml. Ej:

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Preparar una solucin alcohlica de rojo de metilo 0.05% (p/v) en metanol al 80%: Pesar 0.05 g de rojo de metilo y adicionar aproximadamente 50 ml de metanol al 80% para disolver el colorante. Ya disuelto completar a 100 ml con la misma solucin de metanol. Se debe insistir que los trminos porcentuales expresan una relacin, por lo que se pueden variar los volmenes o pesos, siempre y cuando no se pierda dicha relacin. Nota: Ya elaboradas las soluciones se pasan a frascos de vidrio limpios y se etiquetan, incluyendo nombre y frmula de la solucin, concentracin, nombre del usuario y fecha de elaboracin. 4. VALORACIN DE SOLUCIONES La determinacin de la concentracin de una solucin empleando otra solucin cuya concentracin es conocida se llama VALORACIN O TITILACIN Las titulaciones cido-base pueden llevarse a cabo de la siguiente forma: La solucin de concentracin conocida (C1) o SOLUCIN TIPO se coloca en una bureta (V1), la solucin cuya concentracin es desconocida (C2) o SOLUCIN PROBLEMA se coloca en un matraz (V2) y se le aaden unas gotas del indicador que corresponda al tipo de material y reactivo empleado en la operacin, el cual le dar un color caracterstico (Cuadro 2). En el momento en que ocurre un cambio en el color de la solucin al ir agregando lentamente la solucin tipo, se ha alcanzado el punto final de una valoracin o titulacin. La normalidad o concentracin de la solucin problema se puede calcular en base a: Equivalente cido = Equivalente base Empleando la siguiente frmula: C1V1 = C2V2 Se despeja C2: C2 = C1V1 V2 Donde: C1 = Concentracin de la solucin tipo (concentracin conocida) C2 = Concentracin de la solucin problema (concentracin desconocida) V1 = Volumen de la solucin tipo gastado en la valoracin (ml) V2 = Volumen de solucin problema adicionado al matraz Erlenmeyer (ml) Para estandarizar una solucin mediante la valoracin con carbonato de calcio (Ca 2CO3) anhidro, el procedimiento es el siguiente: Para una solucin desconocida se valora con carbonato de calcio previamente tratado a 250 C por 1 hora. Se pesa por triplicado de 0.1 0.13 g de carbonato de calcio en matraces Erlenmeyer de 125 ml. Se adicionan 10 ml de agua destilada para disolverlo y luego se afora a 50 ml. Se titula con anaranjado de metilo como indicador. 5. USO DE INDICADORES Las soluciones orgnicas llamadas INDICADORES son aquellas que cambian de color cuando cambia el pH de las soluciones en que se encuentran.

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Como la mayor parte de los cidos y bases empleados en el laboratorio son incoloros, el uso de indicadores ha sido de gran importancia al hacer posible que los cambios de pH sean observados con cambios en la coloracin de la solucin en que se encuentren. Estas sustancias son cidos y bases dbiles en los cuales su forma molecular tiene un color diferente al de su forma inica. Los intervalos de transicin de los indicadores ms comunes se muestran en el cuadro 2. Cuadro 2. INDICADORES pH 1a2 2a3 3 a 4.4 4.2 a 6.3 5a8 6 a 7.6 6.8 a 8 8.2 a 10 9.3 a 10.5 10.1 a 12.1

INDICADOR Amarillo de metanilo Naranja de bencilo Naranja de metilO Rojo de metilo Tornasol Azul de Bromotimol Rojo Neutro Fenoftalena Timolftalena Amarillo de Alizarina

COLORACIN Violeta-Gris Rojo-Amarillo Rojo-Amarillo naranja Rojo-Amarillo Rojo - Azul Amarillo-Azul Rojo-Naranja Incoloro-Rojo Incoloro-Azul Amarillo-Naranja obscuro

OBJETIVOS: El alumno aprender a preparar los reactivos empleados en la caracterizacin qumica de sus muestras problema durante el semestre. MATERIAL: Vasos de precipitado de 50 ml (3), 1 y 2 litros Pipetas de 2 y 10 ml Bureta Soporte Mortero con pistilo REACTIVOS: Hidrxido de sodio, NaOH Acido brico, (H3BO3) Sulfato de sodio anhdro, (Na2SO4) gua destilada Etanol

Propipeta Matraz aforado de 50 y 500 ml Gasa Parrilla con calentamiento y agitacin Frascos de 1l(3), 500ml y 250g

Acido sulfrico, H2SO4 Rojo de metilo Sulfato cprico pentahidratado, (CuSO4.5 H2O), Naranja de metilo

MTODO: Preparar las siguientes soluciones y mezclas: Solucin de hidrxido de sodio (NaOH) al 50%. Preparar 1 litro. Pesar 500 g de NaOH, pasarlos a un recipiente que contenga unos 700 ml de H2O destilada y disolver. Se debe de tener el recipiente en un bao de H2O fra, para evitar desprendimientos excesivos de calor, se enfra la solucin y se afora hasta 1 l con H2O destilada, posteriormente se filtra con una gasa para eliminar residuos contaminantes.

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Solucin de cido brico (H3BO3) al 2%. Preparar 1 litro. Pesar 20 g de H3BO3 y adicionar 600 ml de H2O destilada, calentar y agitar en una parrilla con agitacin hasta disolver, dejar enfriar y completar a 1 l. Solucin de cido sulfrico 0.1 N. Preparar 500 ml. En un poco de agua destilada, adicionar lentamente por las paredes del matraz volumtrico 1.4 ml de H2SO4 y completar a 500 ml con agua y luego valorar empleando naranja de metilo. Solucin de rojo de metilo: Preparar 50 ml. Disolver 0.05g de rojo de metilo en 60 ml de alcohol etlico (C2 H6 O) y aforar a 50 ml con agua destilada. Mezcla digestora: -100 g de sulfato de potasio (K2SO4) o sulfato de sodio anhdro (Na2SO4), R. A. -10 g de sulfato cprico pentahidratado (CuSO4.5 H2O), reactivo A. C. S. Moler el sulfato cprico hasta que el tamao de la partcula sea como talco, posteriormente hacer lo mismo con el sulfato de sodio y mezclarlos muy bien. Guardar la mezcla en un frasco bien tapado. Solucin neutro detergente (FDN). Mezclar los siguientes reactivos:

Agua destilada 1L Lauril sulfato de sodio, USP 30 g Acido etilndiaminotetraactico (EDTA), R.A. * 14.61 g Hidrxido de sodio (NaOH), R.A. * 4.0 g Tetraborato de sodio.10 H2O (Na2B4O7.10H2O), R.A. 6.81 g Fosfato disdico hidrogenado anhidro (Na2HPO4),R.A. 4.56 g Etilnglicol monoetil ter , grado purificado 10.00 ml *El EDTA y el NaOH pueden ser reemplazados por el equivalente molar (18.61 g) de la sal disdica de EDTA (Na2EDTA.2H2O) para preparar un l de solucin. Disolver el NaOH en 150 ml de agua y adicionar el EDTA y el borato de sodio. Separadamente disolver el fosfato disdico en 20 ml de agua con calentamiento. Adicionar los componentes disueltos en un recipiente. Mezclar la solucin con calor y agitacin. Disolver el lauril sulfato de sodio y adicionar al envase empleando un embudo con una manguera para que no se forme espuma. El etilnglicol monoetilter se adiciona como controlador de espuma. Adicionar el agua faltante y el etilnglicol monoetilter y mezclar bien. Al da siguiente, checar el pH de la solucin (6.9 - 7.1). Si es necesario ajustarlo adicionando NaOH o HCl segn sea el caso. La solucin no se debe almacenar arriba de 20 C, el detergente puede precipitar, pero puede ser disuelto con calentamiento. Notar que al adicionar el litro, el volumen total es ligeramente mayor. OBSERVACIONES: ___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________

BIBLIOGRAFA: Christian, G.D. 1981. Qumica Analtica. 2a. Ed. Editorial Limusa. Mxico.

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NOMBRE: ENSILADO Y ENSILAJE PRCTICA No. 2 No. Equipo:___

Fecha:_____

CALIFICACIN:____

INTRODUCCIN Ensilado, es el forraje verde almacenado, sin aire, en depsitos llamados silos, en los cuales es conservado y fermentado. Se caracteriza por su suculencia, olor agradable y color castao (de amarillento a atabacado).En los ltimos aos la tecnologa del ensilaje ha tenido muchos avances, se han empleado diversos tipos de maquinaria adems del silo embolsado en bolsas de polietileno. La calidad del ensilaje est influenciada por numerosos factores biolgicos y tecnolgicos; dentro cuales se tiene, el tipo de cultivo, su estado de madurez, su contenido de materia seca, protena y energa, tamao del picado, el tipo de silo, la tasa de llenado del silo, las condiciones climticas, niveles de compactacin extraccin de oxgeno y el uso de aditivos. Un ensilaje ideal debe contener carbohidratos disponibles para que sean transformados en cido lctico por las bacterias, lo cual ocasiona un descenso del pH y se conserva el ensilaje. La presencia de oxgeno convierte los carbohidratos en dixido de carbono y agua (respiracin), con lo cual se origina un aumento de calor y putrefaccin causando grandes mermas en el ensilaje. Los cambios que ocurren en el ensilaje deben ser considerados, ya que del control de la fermentacin depende la calidad del ensilado, dichos cambios son diferentes segn el material ensilado, variando la cantidad del cido lctico formado. Durante las primeras horas de fermentacin, el oxgeno se agota y entonces se empiezan a desarrollar rpidamente bacterias anaerobias, usando el azcar como fuente de energa. . Es conocido que las plantas continan respirando despus de ser cortadas y es difcil separar la actividad de los efectos de los dos sistemas de enzimas: la bacterial y la de la planta. Al final de 4 a 5 horas condiciones anaerbicas prevalecen, en las cuales ocurren fermentaciones lcticas. La accin de las bacterias en el cido lctico acta rpidamente sobre los carbohidratos aprovechables produciendo cidos orgnicos, agua, dixido de carbono y calor. Sus principales funciones son producir cido lctico y otros cidos orgnicos tales como actico, propinico, frmico y succnico. La produccin de cido lctico en los forrajes ensilados es una manera de regular el pH, las bacterias producen cido lctico y los iones de hidrgeno se forman cuando disminuye el valor de pH. Cuando el pH es bajo las bacterias son incapaces de seguir reproducindose, por lo cual el crecimiento de bacterias se detiene y el pH de los ensilajes se mantiene constante. Cuando el pH baja y se estabiliza en el ensilaje, la temperatura del ensilaje se mantiene y evita cambios que provoquen la muerte de las bacterias productoras de cido lctico y el silo se conserva por ms tiempo. Los valores de cido lctico pueden ser de 8 a 9% del material seco. El proceso del ensilaje est completo entre los 10 das y las dos semanas, el ensilado bien preservado posee un pH por debajo de 4,5. Durante los primeros das en el ensilaje hay una actividad microbiana considerable y formacin del cido lctico, sin embargo, cuando las condiciones no son las adecuadas para un rpido desarrollo de las bacterias lcticas, se genera la produccin de un grupo de microorganismos que causan un deterioro en la calidad del ensilaje. Inicialmente los clostridios utilizan el azcar y el cido lctico para proliferar, produciendo cido butrico, cido actico y dixido de carbono lo que incrementa el pH, estos clostridios tienen actividad proteoltica y disminuyen el contenido de MS del ensilaje, lo que ocasiona prdidas as como una fermentacin desviada a la produccin de cido actico y butrico.

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LABORATORIO DE BROMATOLOGA OBJETIVOS: El alumno aprender a ensilar considerando las variables que determinan un buen proceso de ensilaje y por lo tanto que se obtenga un ensilado de calidad. MATERIAL: Microensilados con tapas Palanganas Cuchillos Material a ensilar con alto contenido de humedad 3Kg REACTIVOS: Buffer pH 4

Frascos Tijeras Machacadores de madera Potencimetro

Buffer pH 7

MTODO: 1. El material a ensilar se pica para obtener un tamao de partcula de aproximadamente 1 cm. 2. En caso de que el material tenga un exceso de humedad (ms de 75%) se adicionar algn alimento absorbente de agua, como cereales o pajas molidas. 3. Si se va a hacer una mezcla de alimentos, tomar el peso de cada uno para tener la proporcin de cada uno de ellos. 4. Guardar un poco del material a ensilar en un frasco, etiquetar y congelar. 5. Colocar el material por capas y apisonar, hasta llenar el recipiente dejando unos 2 cm del borde. 6. Colocar la tapa superior y cerrar perfectamente. 7. En la vlvula Bunsen hacer un orificio con una aguja para dejar escapar los gases producidos durante el ensilaje. 8. Dejar los microsilos en un lugar fresco y supervisar que no se esponjen las tapas, seal de que no estn eliminndose los gases adecuadamente. 9. Abrir los silos a los 15 das de su elaboracin. 10. Al abrir observar si hay gases y que olor presentan, si hay hongos y en que cantidad se encuentran. Observar las propiedades fsicas y fisicoqumicas que se indican en el cuadro de resultados. Descongelar la muestra fresca antes de ensilar y observar lo mismo que en la muestra de ensilado. RESULTADOS: OBSERVACIN DEL MICROENSILAJE Observaciones / muestra Presencia de gas Presencia de hongos Olor Color Sabor Textura Consistencia Fisicoqumicas pH Muestra Fresca Fsicas Muestra ensilada

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LABORATORIO DE BROMATOLOGA DISCUSIONES: ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ CONCLUSIONES: ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ BIBLIOGRAFA: ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________

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NOMBRE: DETERMINACIN DE HUMEDAD (H) Y MATERIA SECA (MS).

DETERMINACIN DE HUMEDAD POR ESTUFA DE SECADO

PRCTICA No. 3

No. Equipo:___

Fecha:_____

CALIFICACIN:____

INTRODUCCIN: El contenido de humedad es indicio de estabilidad, calidad y medida indirecta de slidos totales; por lo que es importante su cuantificacin sobre todo cuando se va a almacenar un alimento dado y deba mantener una humedad aprox. del 10%, ya que mayores humedades pueden desestabilizar el material y propiciar el crecimiento de hongos productores de toxinas como las aflatoxinas. Por otro lado, es necesario conocer la cantidad de materia seca para poder realizar la conversin de los nutrimentos contenidos en los alimentos a base hmeda o base seca segn sea lo requerido. Esta determinacin es recomendable para la mayora de los alimentos, pero hay algunos que como es el caso del ensilaje por ejemplo, pueden perder cantidades considerables de material voltil. Se considera como humedad, a la prdida de masa que sufre un material al ser sometido a una temperatura cercana a la ebullicin del agua. Las muestras pueden ser secadas desde 60 hasta 105 C. La temperatura est en funcin del tipo de muestra y en base al tipo de anlisis que se vaya a aplicar a la muestra obtenida. Si solamente se determinar la humedad, se puede secar hasta 105 C, pero si se realizarn pruebas de digestibilidad se secar a 60-65 C, ya que a temperaturas altas, se puede llevar a cabo la reaccin de Maillard, la cual se produce cuando hay una unin irreversible de los grupos aldehdo de los azcares y los grupos amino libres. Esta reaccin ocasiona una reduccin en la digestibilidad tanto en rumen como en intestino delgado. Este procedimiento es el ms empleado dentro del Anlisis Qumico Proximal. MATERIAL: Charolas para humedad de diferentes tamaos Balanza analtica Pinzas para estufa

Estufa de secado Desecador

PROCEDIMIENTO: a) Pesar 2-3 g (la cantidad depende del contenido de humedad, tamao y densidad de la muestra) de muestra en material de vidrio, aluminio porcelana previamente puesto a peso constante a una temperatura de 65 a 110 C (dependiendo si se van o no a realizar posteriores anlisis). Si posteriormente se determinar disponibilidad de nutrimentos se recomienda secar a 65C. b) Secar la muestra hasta obtener su peso constante. c) Retirar de la estufa y colocarlas en un desecador (si se cuenta con l) durante 15 min. CALCULOS % Humedad = 100 Peso de la muestra seca x 100 Peso de la muestra inicial, g

% H = (A - B) x 100 M

%MS = 100 - % H

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Donde: A = Peso charola + muestra hmeda, g B = Peso charola + muestra seca, g M = Peso muestra inicial, g MS = Materia seca DETERMINACIN DE MATERIA SECA Y HUMEDAD POR SECADO Fecha Tipo de # W W W % % Media D.S. C.V. Muestra Charola Charola Muestra MS MS Hum

RESULTADOS (Con clculos, media, desviacin estndar y coeficiente de variacin): ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ DISCUSIN (incluyendo mnimo 3 citas bibliogrficas): ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ CONCLUSIONES: ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ BIBLIOGRAFA: - A.O.A.C. 1990. Official Methods of Analysis. Asociation of Official Agricultural Chemists. USA. ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________

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NOMBRE:

DETERMINACIN CARBOHIDRATOS DETERGENTE NEUTRA (FDN) Y CONTENIDO CELULAR

ESTRUCTURALES.

FIBRA

PRCTICA No. 4

No. Equipo:___

Fecha:_____

CALIFICACIN:____

INTRODUCCIN: La calidad de la fibra es un factor importante que influencia y mantiene el ambiente ruminal normal. La cantidad y la concentracin en la dieta, el tamao de partcula, las propiedades de superficie de contacto, tasa de fermentacin y grado de lignificacin son parmetros relevantes de calidad. Una fibra medianamente molida estimula la rumia, mientras que la composicin qumica y la cantidad dietaria no son afectadas. La molienda y el peletizado de alimentos fibrosos, decrece su capacidad potencial de adsorcin de agua e incrementa la densidad del alimento. Un factor que afecta la capacidad de hidratacin de la fibra es su intercambio catinico. Los grupos de las superficies como carboxilos, fenoles, aminas, hidroxilos, proporcionan caractersticas hidroflicas con la capacidad de formar enlaces con metales inicos. El intercambio catinico tambin es importante por su capacidad amortiguadora. Las paredes celulares de las leguminosas poseen mas capacidad amortiguadora que las paredes celulares de las gramneas y tambin son generalmente mas lignificadas. La combinacin de la lignificacin y la capacidad de intercambio, permite a la partcula de fibra, sobrevivir a la digestin y a servir continuamente como un banco con capacidad amortiguadora a travs del tracto digestivo; una propiedad no presentada por las sales de carbonato o bicarbonato que son comnmente empleados como suplementos y corrigen la acidez de dietas bajas en fibra. La FDN representa la matriz insoluble de la pared celular de la planta (Celulosa, hemicelulosa y lignina), son sustancias covalentemente unidas, o ntimamente asociadas mediante puentes de hidrgeno, cristalinidad u otras asociaciones intramoleculares que son resistentes a las soluciones con rango de concentracin fisiolgicas. OBJETIVOS: Que el alumno conozca y sepa utilizar el equipo de digestin de fibra para determinacin de FDN. Que el alumno conozca el fundamento de la determinacin de FDN en un alimento, as como de su interpretacin basndose en la bibliografa. MATERIAL Y EQUIPO: Aparato de digestin ANKOM Sellador de calor ANKOM Bolsas filtrantes ANKOM F57

Agua destilada Amilasa termoestable Balanza analtica Desecador

REACTIVOS Solucin neutro detergente (FDN). Mezclar los siguientes reactivos: Agua destilada 1L Lauril sulfato de sodio, USP 30 g 14.61 g Acido etilndiaminotetraactico (EDTA), R.A. * Hidrxido de sodio (NaOH), R.A. * 4.0 g Tetraborato de sodio.10 H2O (Na2B4O7.10H2O), R.A. 6.81 g Fosfato disdico hidrogenado anhidro (Na2HPO4),R.A. 4.56 g Etilnglicol monoetil ter , grado purificado 10.00 ml *El EDTA y el NaOH pueden ser reemplazados por el equivalente molar (18.61 g) de la sal disdica de EDTA (Na2EDTA.2H2O) para preparar un l de solucin.

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LABORATORIO DE BROMATOLOGA Disolver el NaOH en 150 ml de agua y adicionar el EDTA y el borato de sodio. Separadamente disolver el fosfato disdico en 20 ml de agua con calentamiento. Adicionar los componentes disueltos en un recipiente. Mezclar la solucin con calor y agitacin. Disolver el lauril sulfato de sodio y adicionar al envase empleando un embudo con una manguera para que no se forme espuma. El etilnglicol monoetilter se adiciona como controlador de espuma. Adicionar el agua faltante y el etilnglicol monoetilter y mezclar bien. Al da siguiente, checar el pH de la solucin (6.9 - 7.1). Si es necesario ajustarlo adicionando NaOH o HCl segn sea el caso. La solucin no se debe almacenar arriba de 20 C, el detergente puede precipitar, pero puede ser disuelto con calentamiento. Notar que al adicionar el litro, el volumen total es ligeramente mayor. Precauciones de Seguridad La acetona es altamente flamable. Use una campana extractora de humo cuando est manejando acetona y evitar la inhalacin o el contacto con la piel. El lauril sulfato de sodio irrita las membranas mucosas. Una mascarilla y guantes deben ser utilizados cuando se maneje este qumico.

PROCEDIMIENTO
a) Pesar una bolsa filtrante y registrar el peso (W1) y tarar la balanza. b) Pesar 0.5 g de la muestra (dentro de la bolsa) (W2). Pesar una bolsa vaca para que funcione como blanco, para determinar la correccin de la bolsa vaca (C 1). c) Sellar la bolsa dejando un centmetro de la apertura de la bolsa utilizando un sellador de calor. d) Extender la muestra uniformemente dentro de la bolsa filtrante. Esto debe ser hecho agitando o golpeando suavemente para eliminar lo slidos. f) Poner las bolsitas en la canastilla, colocando tres bolsitas por repisa. Estibar las repisas centradas con cada nivel rotado 120. La novena repisa queda vaca y acta como tapa de la octava repisa. El contrapeso de la canastilla se pone arriba de la novena repisa para mantenerla sumergida. g) Introducir la canastilla en el aparato de digestin ANKOM y agregar 2 lt de solucin FDN a temperatura ambiente. h) Agregar 10 ml de amilasa termoestable. i) Cerrar y ajustar bien la tapa del recipiente y colocar agitacin (agitate) y calor (heat) en ON, dejar digerir 1 hora. j) Despus de que pas una hora colocar agitacin y calor en OFF, abrir la vlvula y dejar salir la solucin caliente antes de abrir la tapa, ya que la solucin caliente dentro del contenedor est bajo presin. k) Despus de que la solucin ha sido purgada, cerrar la vlvula y abrir la tapa. Agregar 2 lt de agua caliente de enjuague. Cerrar la tapa pero no apretar. Colocar agitacin en ON y dejar calor en OFF y esperar 5 minutos. Repetir el enjuague dos veces ms (un total de tres enjuagues). l) Remover las bolsitas de la canastilla y presionar gentilmente para eliminar el exceso de agua. Colocar las bolsas en un vaso de precipitado y agregar acetona para cubrir las bolsas. Permitir que las bolsas se remojen en la acetona durante tres minutos y remover y apretar ligeramente para eliminar el exceso de acetona. m) Extender las bolsas y dejar que se sequen con el aire. Secar completamente en una estufa de secado a 100C por al menos 4 horas.

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CALCULOS % FDN = ( W3 (W1 X C1)) X 100 W2 % FDN (MS) = ( W3 (W1 X C1)) X 100 W2 X MS Donde: W1 = peso de la bolsa, g W2 = peso de la muestra, g W3 = peso de la bolsa + muestra despus de los procesos de extraccin, g C1 = Correccin de la bolsa blanco (peso despus del secado / peso inicial) MS = materia seca contenida en la muestra analizada DETERMINACIN DE FIBRA DETERGENTE NEUTRO Fecha Tipo de # W W W Muestra Bolsa Bolsa I Muestra Bolsa F

% Media D.S. C.V. FDN

CONTENIDO CELULAR El contenido celular contiene adems de carbohidratos no estructurales, protenas, vitaminas, lpidos, minerales, etc. Por lo que no puede tomarse como 100 % de carbohidratos. El contenido celular (CP) se calcula restando a 100 el % de FDN. % Contenido Celular = 100 - % Paredes Celulares

RESULTADOS (Con clculos, media, desviacin estndar y coeficiente de variacin): ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ DISCUSIN (incluyendo mnimo 3 citas bibliogrficas): ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ CONCLUSIONES: ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________

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LABORATORIO DE BROMATOLOGA ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ BIBLIOGRAFIA - A.O.A.C. 1990. Official Methods of Analysis. Asociation of Official Agricultural Chemists. USA. - Goering, H.K. and Van Soest, P.J. 1975. Forage Fiber Analyses. Agriculture Handbook No. 379. United States Department of Agriculture. - Tejada, I. 1992. Control de calidad y anlisis de alimentos para animales. Sistema de Educacin Contnua en Produccin Animal, A.C. Mxico. - Van Soest, P.J. and Robertson, J. 1985. Analysis of foreges and fibrous foods. Cornell University. - Van Soest, P.J. and Robertson, J. and Lewis, B.A. 1991. Methods for dietary fiber, neutral detergent fiber, and nonstarch poly sacharides in relation to animal nutrition. J. Dairy Sci., 74: 3583. ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________

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NOMBRE: DETERMINACIN DE EXTRACTO ETREO (E.E.) PRCTICA No. 5 No. Equipo:___ Fecha:_____ CALIFICACIN:____
INTRODUCCIN: Los lpidos son un grupo de sustancias que se encuentran en los tejidos de plantas y animales, insolubles en agua pero solubles en los disolventes orgnicos corrientes, como benzeno, ter o cloroformo. En el anlisis inmediato de los alimentos quedan incluidos en la fraccin del extracto etreo. La definicin de las grasas de acuerdo a la FDA es: el contenido total de cidos grasos, esto es, la suma de los cidos grasos provenientes de los mono, di, y triglicridos, cidos grasos libres, fosfolpidos y esteroides. El contenido total de grasas debe expresarse como la cantidad de triglicridos que proporcionara la cantidad analticamente medida del total de cidos grasos lipdicos en el alimento.
Clasificacin de los Lpidos Lpidos

Saponificables Saponificables

No

Simples

Compuestos

Glicolpidos Prostaglandinas

Fosfolpidos

Esfingolpidos

Esteroides Terpenos
Ceras Glucolpidos Galacto lpidos Lecitinas Cefalinas Esfingo mielinas Cerebrsidos

Los lpidos forman parte de un gran grupo de compuestos que son de importancia en la alimentacin animal. La fraccin lipdica se puede separar de otros componentes por medio de la extraccin con solventes tales como el ter etlico, ter de petrleo, benceno, cloroformo, etc. y se reporta como la fraccin soluble en ter o grasa cruda o bruta. Esta fraccin forma parte del Anlisis Qumico Proximal denominada Extracto etreo (E.E.). Esta fraccin contiene no solo la grasa verdadera, sino que adems incluye a las ceras, lpidos complejos como los fosfolpidos, compuestos derivados de los lpidos como los esteroles y varios pigmentos, hormonas y aceites voltiles. OBJETIVOS: Que el alumno conozca y sepa utilizar el equipo de extraccin de grasa Soxhlet para determinacin de protena cruda. Que el alumno conozca el fundamento de la determinacin de extracto etreo en un alimento, as como de su interpretacin basndose en la bibliografa. MATERIAL Y EQUIPO: Aparato de Soxhlet Cartuchos o papel filtro

Balanza analtica Desecador

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LABORATORIO DE BROMATOLOGA Estufa de secado a 100 C REACTIVOS Eter etlico anhidro (C2H5)2O Matraces bola de fondo plano

PROCEDIMIENTO
a) Poner a peso constante los matraces bola de fondo plano en una estufa de secado. b) Pesar de 2.5 a 5.0 g de muestra dentro del cartucho (cerrar el cartucho con un pedazo de algodn) o en papel filtro. c) Colocar el cartucho en la jarra de extraccin. d) Poner a calentamiento la parrilla y ABRIR LA LLAVE DEL AGUA, la que debe estar fra para condensar el ter. e) Poner en los matraces de 60 a 80 ml de ter etlico. f) Colocar el matraz en el aparato y montarlo. Abril la llave del agua. g) Dejar en extraccin aprox de 4 a 6 h (dependiendo del tipo de muestra). h) Pasado este tiempo, apagar las parrillas y desarmar el aparato protegiendo la parrilla para evitar que se produzca flama al tener contacto el ter con ellas. l) Dejar evaporar el ter, sin dejar que se evapore la totalidad colocando los vasos dentro de una campana de extraccin. n) Meterlos a la estufa a 60C durante 3 h, enfriar y pesar. CALCULOS: % EE = (A B) x 100 M Donde: A = peso del vaso con residuo lipdico, g B = peso constante del vaso, g M = Peso de la muestra, g DETERMINACIN DE EXTRACTO ETREO Fecha Tipo de # W Vaso W Muestra Vaso I Muestra W Vaso F % E.E. Media D.S. C.V.

RESULTADOS (Con clculos, media, desviacin estndar y coeficiente de variacin): ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ DISCUSIN (incluyendo mnimo 3 citas bibliogrficas): ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ CONCLUSIONES: ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ BIBLIOGRAFIA - A.O.A.C. 1990. Official Methods of Analysis. Asociation of Official Agricultural Chemists. USA.

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NOMBRE: DETERMINACIN DE MINERALES POR EL MTODO DE CALCINACIN PRCTICA No. 6 No. Equipo:___ Fecha:_____ CALIFICACIN:____
INTRODUCCIN: Las cenizas de los animales son ricas en calcio y fsforo, las de las plantas estn compuestas principalmente por potasio y slice. Las cenizas se determinan por combustin, el contenido de cenizas no representa en realidad, ni cuantitativamente ni cualitativamente el material inorgnico del alimento. Su cuantificacin es requerida cuando se necesita conocer el contenido de materia orgnica de ciertos alimentos. Esta determinacin puede sobreestimar el valor de cenizas ya que incluye sustancias contaminantes como polvo, tierra, arena, etc. Adems, otra desventaja es que no nos da idea de qu tipo de minerales se encuentran presentes en el alimento, sino solamente en forma global. Al ser incinerada la materia seca a 550 C, se eliminan los materiales carbonosos (orgnicos), quedando el residuo inorgnico o cenizas. Esta tcnica es la empleada en el Anlisis Qumico Proximal. Cuando se tienen partculas negras en las cenizas, indica que todava queda carbn, aunque tambin puede indicar la presencia de hierro ferroso en la forma de xido. Los carbonatos de silicn pueden tambin ser de color gris a negro y tambin pueden persistir. OBJETIVOS: Que el alumno conozca y sepa utilizar la mufla, equipo para determinacin de cenizas (minerales). Que el alumno conozca el fundamento de la determinacin de cenizas en un alimento, as como de su interpretacin basndose en la bibliografa. MATERIAL Y EQUIPO: Mufla a 550C Estufa de secado a 100 C Crisoles de porcelana

Balanza analtica Desecador Pinzas para mufla y estufa

PROCEDIMIENTO
a) Pesar 1-5g de muestra en un crisol de porcelana o vaso de precipitado previamente puesto a peso constante. b) Calcinar en la mufla a 550-600C, hasta tener cenizas blancas o grises sin partculas de carbn (en caso necesario se adicionan unas gotas de agua destilada y se vuelve a calcinar). Apagar la mufla y dejar enfriar, Los crisoles se sacan de la mufla y se colocan en una estufa de secado a 100-115C para enfriarlos durante unos 30min. c) Pasar a un desecador y registrar el peso. CALCULOS % Cenizas = Peso de la muestra calcinada*, g Peso de la muestra inicial, g *AB % Cenizas = ( A - B ) ___________ M % MO = 100 - % cenizas X 100
X

100

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LABORATORIO DE BROMATOLOGA Donde: A = Peso del crisol + cenizas, g B = Peso del crisol a peso constante, g M = Peso de la muestra inicial, g (w crisol + muestra w del crisol a w cte.) Nota: Convertir el % de cenizas en base a MS. DETERMINACIN DE CENIZAS POR CALCINACIN Fecha Tipo de # W W W % Media D.S. C.V. Muestra Crisol Crisol Muestra Cenizas Cenizas

RESULTADOS (Con clculos, media, desviacin estndar y coeficiente de variacin): ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ DISCUSIN (incluyendo mnimo 3 citas bibliogrficas): ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ CONCLUSIONES: ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ BIBLIOGRAFIA - A.O.A.C. 1990. Official Methods of Analysis. Asociation of Official Agricultural Chemists. USA. - Pearson, D. 1976. Tcnicas de laboratorio para el anlisis de alimentos. Ed. Acribia. ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ _______________________________________________________________________________

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NOMBRE:DETERMINACIN DE PROTENA CRUDA (PC) O BRUTA (NITRGENO

TOTAL) POR LA TCNICA DE KJELDAHL

PRCTICA No. 7

No. Equipo:___

Fecha:_____

CALIFICACIN:____

INTRODUCCIN: La mayor parte del nitrgeno que el animal necesita se emplea en la sntesis de protenas. Una gran proporcin del nitrgeno de los alimentos se encuentra tambin en forma protenica. Las protenas de un alimento pueden calcularse qumicamente a partir de su contenido de nitrgeno. Dentro de los mtodos ms empleados para la determinacin del nitrgeno total y que forma parte del Anlisis Qumico Proximal (A.Q.P.) se encuentra el descrito por Kjeldahl con las modificaciones de Gunning y Anrnold. Esta tcnica se basa en que las protenas y dems materia orgnica, son oxidados por el cido sulfrico, aadindose sulfato de sodio o potasio para elevar la temperatura de la mezcla y de esta manera acelerar la reaccin, fijndose el nitrgeno en forma de sulfato de amonio, (NH4)2SO4. Esta sal se hace reaccionar con una base fuerte desprendindose amoniaco (NH3), que se destila y se recibe en un volumen conocido de cido brico (H 3BO3); por titulacin del cido se calcula la cantidad de NH3, conocindose de esta manera la cantidad de nitrgeno contenido en la muestra, el cual multiplicado por el factor de conversin (Anexo C), (el 6.25 es el ms comnmente empleado), nos da la cantidad de protena cruda o bruta. OBJETIVOS: Que el alumno conozca y sepa utilizar el equipo de Kjeldahl para determinacin de protena cruda. Que el alumno conozca el fundamento de la determinacin de protena en un alimento, as como de su interpretacin basndose en la bibliografa. MATERIAL: Matraces Kjeldahl de 300 ml Bureta Balanza analtica Papel para pesar muestra

Aparato de Kjeldahl de digestin y destilacin

REACTIVOS: cido sulfrico concentrado (H2SO4) Solucin de hidrxido de sodio (NaOH) al 50%. Pesar 500 g de NaOH, pasarlos a un recipiente que contenga unos 700 ml de H2O destilada y disolver. Se debe de tener el recipiente en un bao de H2O fra, para evitar desprendimientos excesivos de calor, se enfra la solucin y se afora hasta 1 l con H2O destilada, posteriormente se filtra con una gasa para eliminar residuos contaminantes. Solucin de cido brico (H3BO3) al 2%. Pesar 20 g de H3BO3 y adicionar 600 ml de H2O destilada, calentar y agitar en una parrilla con agitacin hasta disolver, dejar enfriar y completar a 1 l. Solucin de cido sulfrico o cido clorhdrico 0.1 N. En un poco de agua destilada, adicionar lentamente por las paredes del matraz volumtrico 2.8 ml de H 2SO4 y completar a 1 l con agua y luego valorar empleando naranja de metilo (ver pg 7) Solucin de rojo de metilo: Disolver 0.1g de rojo de metilo en 60 ml de alcohol etlico (C 2 H6 O) y aforar a 100 ml con agua destilada. Tambin se puede emplear rojo de metilo-verde de

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LABORATORIO DE BROMATOLOGA bromocresol: Mezclar 1 parte de una solucin alcohlica de rojo de metilo al 0.2% con 5 partes de una solucin alcohlica de verde de bromocresol al 0.2%. Pastillas catalizadoras.

PROCEDIMIENTO: En general este mtodo consta de 3 pasos: I. Digestin: a) Pesar de 0.5 a 1 g de muestra en papel glacine, papel filtro o arroz, (si la muestra es hmeda envolviendo la muestra) y pasarla a un matraz Kjeldahl. (si la muestra es hmeda introducirla con todo y el papel cuantificando el peso del papel). b) Aadir 2 pastillas catalizadoras a cada tubo y 15 ml de cido sulfrico concentrado. Precalentar el digestor 10 minutos antes en posicin 10, colocar los tubos tapndolos con la chimenea de vidrio, manteniendo la digestin en posicin 8, hasta que las muestras contenidas dentro del tubo tomen un color verde esmeralda. Nota: Las reacciones que ocurren en esta etapa son: C,H,N,O,S + H2SO4 (NH4)2 SO4 + SO3 + H2O + CO2 a) Oxidacin de la materia orgnica CO2 b) Reduccin del H2SO4 SO3 o SO2 c) Oxidacin del nitrgeno NH4+ NH3 II. Destilacin: Posterior a la digestin sique la destilacin, una vez fros lo tubos despus de la digestin, estos se introducen en la unidad de destilacin la cual depura todo el nitrgeno contenido en la muestra y lo retiene en cido brico, por medio de ciertas reacciones con el hidrxido de sodio y este ltimo. Generalmente la unidad de destilacin adiciona 60 ml de cido brico al 2% a un matraz erlenmeyer colocado con anterioridad en la mquina, posteriormente la unidad de destilacin le adiciona al tubo con la muestra digerida 50 ml de agua y 70 ml de hidrxido de sodio al 50%. El destilador adems introduce vapor de agua para destilar el amoniaco. El tiempo de destilacin es de 5 minutos aproximadamente. Nota: Las reacciones que ocurren en esta etapa son: (NH 4)2 SO4 + NaOH NH3 + NH4OH + Na2SO4 NH3 + H2O

III. Titulacin: Se titula con H2SO4 al 0.05, 0.1 o al 0.5 normal dependiendo del contenido de nitrgeno de la muestra. La titulacin puede hacerse de varias formas, dependiendo de los aparataos con que se cuente: Titulacin con cambio de color (manual). Titulacin midiendo el pH (potencimetro y manual). Titulacin con el titulador con punto final; pH 4.65 (titulador automtico).

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LABORATORIO DE BROMATOLOGA Nota: Las reacciones que ocurren en esta etapa son: NH3 + H3BO3 (NH4)2 HBO3 Este se valora (NH4+)2 HBO3 + H+CL- NH4CL + H3BO3+ + CL- + HCL (NH4+)2 HBO3 + H2SO4 (NH4) 2 SO4 + H3BO3+ + HSO4- + H2SO4 Lo que se valora es el ion borato. CALCULOS:

Donde: A= ml de H2SO4 gastados de la muestra problema. C= miliequivalentes de nitrgeno (0.014). N= Normalidad del cido H2SO4. M= Peso de la muestra (g).

* Valor promedio del factor de correccin es 6.25 o se puede ver el cuadro anexo para ser ms especficos. Nota: Convertir el % de PC obtenido, en base a materia seca Fecha DETERMINACIN DE PROTENA CRUDA Tipo de # W N Ml % P.C. Media D.S. C.V. Muestra Tubo Muestra H2SO4 cido gastado

RESULTADOS (Con clculos, media, desviacin estndar y coeficiente de variacin): ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ DISCUSIN (incluyendo mnimo 3 citas bibliogrficas): ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________

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LABORATORIO DE BROMATOLOGA CONCLUSIONES: ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ BIBLIOGRAFIA - A.O.A.C. 1990. Official Methods of Analysis. Asociation of Official Agricultural Chemists. USA. - Bateman, J.V. 1970. Nutricin Animal. Manual de mtodos analticos. Herrero Hnos, Suscesores, S.A. Mxico. - Kiek, P.L. 1950. Kjeldahl method for total nitrogen. Anal. Chem., 22(2): 354-358. - Tejada, I. 1992. Control de calidad y anlisis de alimentos para animales. Sistema de Educacin Contnua en Produccin Animal, A.C. Mxico. ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ FACTORES DE CONVERSIN DE NITRGENO A PROTENA CRUDA
Muestra F = Factor de Conversin para Protena*

Semilla de algodn Leche Semilla de soya Semilla de girasol Semilla de ajonjol Harina de pescado, de carne Gluten Pasto (polvo) Grano molido Maz y sorgo grano Trigo Harina de Trigo Cebada, mijo, avena grano Arroz grano Protena de suero Substituto de leche

F = 5.30 F = 6,38 F = 5,71 F = 5,30 F = 5,30 F = 6,25 F = 6,25 F = 5,70 F = 5,70 F = 6,25 F = 5,70 F = 5,70 F = 5,83 F = 5,95 F = 6,38 F = 6,38