Perspectiva abordrilor moleculare n cercetrile fundamentale i de management al insectelor

Valentin BRUDEA

Introducere
Parcurgem o etap deosebit de prolific n dezvoltarea cercetrilor fundamentale i aplicative la nivel molecular. Tehnica dezvoltat n ultimele dou decenii, ne d alte dimensiuni asupra fenomenologiei care are loc la nivelul microcosmosului ultrastructurilor celulare, cromatografia, HPLC-ul i PCR ul, punnd n eviden nano-molecule, enzime, metabolii, dar i transcripia la nivelul genelor, prin tehnologia microarray. Ptrunderea n dimensiunea molecular, s-ar putea bine asemui cu descoperirea microscopului de Leeuwenhoek (1676), mijloc prin care s-a ptruns n structura celular a organismelor. Aceste mijloace moderne de investigare au creat o efervescen n lumea cercettorilor, trecndu-se de la experimentri care vizau activitile biologice la nivel macro, la ptrunderea n intimitatea fenomenelor vitale, aa nct planta s fie vzut ca un organism deosebit de complex, cu activiti foarte bine coordonate de diferii fitohormoni. Au aprut noi ramuri ale tiinei care se ocup de cercetrile moleculare, cu terminaia n omica cum ar fi genomica, proteonomica, metabolomica, transcriptomica, lipidonomica etc, preocupate de cercetare tuturor fenomenelor ce se petrec la nivel molecular, cu factorii coordonatori n declanarea acestor procese biologice. De aceste realizri n dezvoltarea diferitelor ramuri ale tiinelor au beneficiat i cercetrile din domeniul entomologic, cu caracter fundamental i de management al insectelor din diferite ecosisteme, n special cel agricol i silvic. Pentru a face fa la stresul biotic produs de atacul unor insecte fitofage i patogeni, s-au dezvoltat mecanisme (semnalizare molecular, cum ar fi fitohormonii jasmonai) care alerteaz toat planta, printr-o transmisie ionic, rapid, am putea spune neuronal, asemntoare sistemului nervos al organismelor animale, n vederea declanrii unor aprri defensive. Acestea pot fi constitutive sau induse, declanate n urma interaciuni complexe a multor fitohormoni i a transcripiei a numeroase gene sensibile la aceste semnale. n cele ce urmeaz prezentm cercetri realizate n ultimele decenii, care au revoluionat cunoaterea evoluiei mecanismelor de aprare a plantelor mpotriva speciilor erbivore, prin descoperirea rolului fitohormonilor jasmonai n aprarea plantelor (pregtirea plantelor, relaiile tritrofice plant-erbivor-entomofag, formarea inhibitorilor proteazici etc).

Evoluia cercetrilor privind jasmonaii n 1962, a fost izolat esterul metilic al acidului jasmonic (MeJA) din uleiurile volatile din Jasminum grandiflorum L. (Demole et al., 1962), apoi din Rosmarinus officinalis L. A existat o perioad lung de timp pn s-a stabilit c acidul jasmonic i jasmonatul de metil sunt omniprezeni, c sunt regulatori ai dezvoltrii plantelor superioare, reacionnd la stimulii externi prin expresia genelor. O etap benefic n caracterizarea rolului jasmonailor a fost folosirea mutantelor de Arabidopsis thaliana (Drosophilla regnului vegetal), ulterior de tomate i tutun, pentru studiul fazelor de biosintez a acidului jasmonic, de transducie a semnalelor de rnire, a cilor de semnalizare etc. prin utilizarea mutantele n superexpresie sau sileniere a unor seturi de gene dependente de JA. Vick i Zimmerman (1984) stabilesc c enzimele care converg 12-OPDA n acid jasmonic sunt prezente n multe plante indicnd ca aceasta poate fi o cale metabolic general n plante. Jasmonaii sunt oxilipine, molecule semnalizatoare derivate din acizi grai polinesaturai oxigenai i sunt larg rspndii n organismele vii. n 1990, Farmer i Ryan, constat c n urma activitii metiljasmonatului, n plantele de tomate, are loc acumularea de inhibitori proteazici (PIN2), care perturb digestia n stomacul insectelor. n lumea animal, eicosanoidele sunt similare jasmonailor i funcioneaz ca molecule semnalizatoare la vertebrate, nevertebrate i microbi eucariotici. n ultimii 20 de ani, acidul jasmonic (JA) i metaboliii si, cum ar fi esterul su metilic (MeJA) i acizii conjugai ai acidului jasmonic, au fost cuprini sub termenul de jasmonai, recunoscui ca primele semnale ale rnirii i aprrii mpotriva factorilor biotici. n urma atacurilor se produc rspunsuri de aprare inducerea rezistenei prin: sinteza de proteine, cum ar fi PIN, care sunt duntoare pentru hrnirea insectelor; sinteza de fitoalexine, cum ar fi nicotina sau ali alcaloizi; sinteza i lansarea de compui volatili (VOCs) care atrag parazitoizii i prdtorii (relaii tritrofice plant-fitofag-entomofag); formarea i lansarea de volatile verzi ale frunzei (GLVs); formarea de nectar extrafloral (EFN); strategii mecanice de cretere a pereilor celulari (Wasternack, 2006). De asemenea, prin lansarea de volatile are loc i pregtirea sau starea pregtit a organelor neatacate sau a plantelor nvecinate. n rspunsurile de aprare, cile constitutive ale acidului jasmonic constituie un mecanism conservat pentru promovarea rspunsurilor de aprare la multe artropode fitofage (Howe i Jander, 2008). Dei etilena, acidul salicilic i ali fitohormoni au un rol important n interaciunea plant-insect, contribuia acestor semnale n apariia rezistenei apare s fie minor n comparaie cu a acidului jasmonic (Koornneef i Pieterse, 2008; Zheng i Dicke, 2008). Multe experimentri scot n eviden c jasmonaii (JAs) sunt semnalele principale pentru reglarea rezistenei la insectele fitofage. Dup Browse i Howe (2008), jasmonaii (JAs) constituie arme noi i rspunsuri rapide mpotriva atacului produs de insecte.

Rolul jasmonailor n recunoaterea fitofagilor cu tipare asociate molecular

De-a lungul unor perioade lungi de coexisten, de aproximativ 350 milioane de ani, plantele i insectele au dezvoltat o varietate de interaciuni (Mithfer i Boland, 2008). Pentru o combatere cu succes a agresorilor, plantele s-au echipat cu un sistem sofisticat senzorial pentru perceperea rapid i eficient a semnalelor din mediu i pentru detectarea potenialilor inamici, prin traducerea i integrarea fiecrui semnal n rspunsuri biochimice i fiziologice. Astfel, sub atac sunt detectate o serie de reacii n celulele plantei, incluznd schimburi ionice, fosforilarea proteinelor, apariia unor forme de oxigen reactiv i oxilipin, de asemenea, iniierea unor variate reacii de aprare (Maffei et al., 2007). Se pun ntrebrile, cum pot plantele s recunoasc particularitile inamicilor, ce fel de semnale percep i cum activeaz mai departe sistemului de aprare. Perceperea semnalelor n celulele plantei const n prezena unor receptori pentru cele chimice sau recunoaterea, n general, a proceselor bazate pe daunele esuturilor. Hrnirea fitofagilor presupune dou procese, de rnire mecanic a esutului infestat i introducerea unor secreii orale produse de insect. Introducerea metaboliilor produi de fitofagi, reprezint semnalizatori, prin proteine legate specific. Se dezvolt evidena c provocatorii chimici din secreiile orale ale insectelor joac un rol important n forma rspunsurilor cantitative i calitative a plantelor (Howe i Jander, 2008; Mithfer i Boland, 2008). Provocatorii derivai din hrnirea erbivorelor constituie tipare moleculare asociate fitofagilor (HAMPs), compui semnalizatori, care pot declana aprrile gazdelor. Secreiile orale din hrnirea insectelor pot conine compui specifici cu proprieti de inductori. Aceti derivai pot fi desemnai tipare moleculare asociate fitofagilor. Acest termen acoper toi compuii semnalizatori produi de fitofagi, care intr n contact cu o anumit plant gazd i provoac reacii de aprare. Diferite proteine ca oxidaza glucoza i alcalin fosfataza acioneaz ca inductori, iar -glucosidaza din larvele de Pieris brassicae provoac lansarea de volatile din frunzele de varz (Brassica capitata). Cea mai proeminent i recunoscut clas de tipare moleculare este reprezentat de volicitin, pentru prima dat izolat din secreiile orale ale omizii Spodoptera exigua. n afar de acesta s-au izolat ali acizi grai aminoacizi conjugai din diferite larve de noctuide i geometride. Variaia genetic n interiorul populaiei i ntre populaii furnizeaz material brut pentru evoluia organismelor. Dei multe studii descriu variaia metaboliilor defensivi inter- i intraspecific, se cunoate puin despre diferenele ntre populaiile plantelor n cadrul rspunsurilor semnalizrilor timpurii provocate de erbivore sau de secreiile orale. Wu et al. (2008) descriu evenimentele semnalizrii n cascad, care conduc la creterea nivelelor defensive prin hrnirea erbivorului specializat Manduca sexta (fig. 1). Plantele de N. attenuata recunosc provocatorii din secreiile orale, aminoacizi grai conjugai (FACs), care activeaz rapid semnalizarea protein kinazelor activate mitogen (MAPK), ulterior acidul jasmonic i etilena mediatori ai rspunsurilor defensive.

Aceste evenimente includ: 1. o reconfigurare transcriptomic cu schimbri la nivelele de transcripie a genelor defensive i de cretere; 2. lansarea de compui organici volatili (VOCs) ce funcioneaz ca o aprare indirect;

Fig. 1. Evenimentele moleculare n Nicottiana attenuata dup atacul produs de M. sexta (Wu et al., 2008). Presupuii receptori din plant leag aminoacizi conjugai,
provocatori ai rnirii produi de erbivore prezeni n secreiile orale (FACs). SIPK i WIPK, dou protein kinaze activate mitogen (MAPKs) sunt activate imediat dup iniierea hrnirii. SIPK i WIPK regleaz nivelele de transcripie a unor factori, care mediaz nivelele de transcripie a genelor ce codeaz enzimele biosintezei fitohormonilor sau regleaz direct stabilitatea sau activitatea enzimelor prin fosforilare. Creterea nivelelor de fitohormoni conduc la schimbri n nivelele de transcripie a factorilor ce regleaz nivelele de transcripie a genelor implicate n biosinteza metaboliilor secundari.

3. acumularea de perturbatori ai erbivorelor sau de metabolii secundari duntori: nicotin, tripsin i inhibitorii proteazici (TPIs). Pentru investigarea distribuiei filogenetice a activitii provocatorilor la o

varietate de specii din angiosperme s-au testat trei clase de provocatori diferii, n timpul produciei de fitohormon legat de defensive, incluznd etilena, acidul jasmonic i acidul salicilic. Toate familiile studiate au rspuns la cel puin o clas de provocatori, cu creterea semnificativ a produciei de etilen i acid jasmonic, dup 1-2 ore de la tratament, activitatea provocatorilor fiind foarte nalt idiosincratic. Aminoacizii grai conjugai (volicitin), care se gsesc la porumb, soia i vinete au manifestat cea mai mare inducere de fitohormoni i volatile. Dei mecanismele rmn necunoscute, predictibilitatea naturii activitii provocatorului ntre speciile de plante, susine existena unui receptor specific legat de interaciunile ce mediaz recunoaterea. Recunoaterea fitofagilor la ovipozitare Un important aspect al interaciunilor plant - insect este recunoaterea depunerilor de ou. Oule depuse pe frunze constituie o ameninare viitoare datorit eclozrii larvelor. Prin folosirea tehnologiei microarray la genom, Little et al. (2007) au studiat expresia profilului n frunzele de Arabidopsis, dup depunerea oulor de Perris brassicae. Depozitarea oulor modific expresia a sute de gene, dup trei zile de la depunere, incluznd inducia genelor defensive i legate de stres. Semntura transcripiei dup ovipozitare a fost diferit fa de rspunsurile la hrnirea larvelor prin roadere. Depunerea oulor determin o localizare a celulelor moarte, acompaniat de acumularea de caloz, a produciei unor specii de oxigen reactiv i inducerea genelor de proteine (PR). Depunerea oulor poate influena relaiile tritrofice plant-erbivorentomofag (Hilkeri et al., 2008). Prin depunerea oulor de ctre viespea fitofag Diprion pini (Hymenoptera, Diprionidae) se induce local i sistemic emisia de volatile la Pinus sylvestris, ce atrage parazitoidul oofag Chrysonotomyia ruforum (Hymenoptera, Eulophidae), pentru a o distruge. Provocatorul care induce rspunsurile la pin este localizat n secreiile oviductului pe care femelele viespii le aplic oulor cnd sunt introduse cu terebra ntr-o crptur a acului. Acesta este activ numai cnd este transferat n crptura acului i nu pe acele nedunate crora nu le induce emisia de volatile.

Rolul volatilelor emise de plante n pregtire (priming) la atacul erbivorelor

Plantele au elaborat strategii variate pentru aprare mpotriva fitofagilor i patogenilor. Dei unele din aceste strategii sunt constitutive, prezente tot timpul, altele sunt induse de atacul fitofagilor (Frost et al., 2008). Aprrile induse trebuie s fie adaptative cnd sunt costisitoare de implementat i exist o variabilitate spaial i temporal a fitofagilor i patogenilor (aa c plantele nu au ntotdeauna experiena atacului), cu aprri difereniate mpotriva diferiilor inamici (aa c aprarea mpotriva unuia crete susceptibilitatea fa de altul). n compensarea acestei vulnerabiliti, la unele plante apare o prim pregtire specific n raport cu semnalele din mediu, care indic probabilitatea creterii atacului. n aprarea plantei pregtirea (priming) este un proces fiziologic ce face ca planta s rspund mai rapid sau agresiv la un viitor stres biotic sau abiotic.

Aceast pregtire dobndit se mai numete stare pregtit (primed state). Pregtirea poate fi iniiat ca un rspuns la semnale din mediu ce indic probabilitatea creterii unui stres biotic, dar starea pregtit poate persista datorit unui efect rezidual, care urmeaz dup o expunere iniial la stres. Un exemplu clasic, un duntor induce un rspuns hipersenzitiv, dar inducerea este cu mai mare eficien dac planta a mai experimentat un atac anterior. La arbori n care starea pregtit persist n mai multe sezoane, fenomenul se numete rezisten indus ntrziat, care poate accelera inducerea rezistenei n prezena atacurilor. Orice semnal care indic prezena fitofagilor poate constitui un nceput pentru inducerea pregtirii. Cele mai multe semnale utilizabile sunt volatilele plantei induse de fitofagi (HIPVS) i un subset de compui organici volatili (VOCs), emii ca rspuns. n cele din urm semnalele sunt transmise intern, prin sistemul vascular, sau extern prin volatilele plantei. n cazul unor rni n plante, informaiile sunt transmise, de molecule semnalizatoare transportate prin floem i xilem, din locul atacat, sistemic, la regiunile neatacate. Semnalele sistemice pot transmite efectiv informaii de la locul atacului (ran) la regiunile vulnerabile de atac. Semnalizarea sistemic intern se realizeaz cu acidul jasmonic (JA) i formele sale conjugate. n cele ce urmeaz prezentm experimentri, care clarific rolul volatilelor n pregtirea plantelor, activarea relaiilor tritrofice plant-erbivor-entomofag i seturilor de gene dependente de JA. Engelberth et al. (2007) menioneaz c volatilele regleaz cel puin trei gene ce deservesc platforma octadecanoid responsabil de acidul jasmonic. Plantele de porumb nedunat, expus volatilelor din rnile produse de Spodoptera littoralis, regleaz genele cu expresia aprrii, fiind activate pentru emisii de noi volatile. Prin hrnirea omizii pe porumbul pregtit, rata de cretere (RGR) a fost mai mic i viespea parazitoid Cotesia marginiventris a fost atras de abundena volatilelor lansate de plantele activate. Astfel, pregtirea poate influena dinamica fitofagilor prin medierea combinaiilor de aprare directe sau aprri indirecte, via interaciunilor tritrofice. Primele succese n manipularea emisiei de volatile pentru combaterea insectelor S-a demonstrat c se poate manipula emisia de semnale volatile de ctre rdcinile de porumb atacate de viermele vestic al rdcinilor Diabrotica virgifera, n atragerea nematodului prdtor Heterorhabditis megidis (Hiltpold i Turlings, 2008). Liniile de porumb ancestrale i cele din Europa sunt foarte atractive la acest nematod prin emiterea de (E)--cariofilen, dar varietile americane au pierdut acest semnal, nematodul fiind un agent de control al larvelor. Pentru restabilirea atraciei nematodului, liniile de porumb au fost transformate pentru emisia constitutiv de (E)-- cariofilen, reducndu-se semnificativ atacul. ntruct terpenoidele domin compoziia volatilelor HIPV, au constituit primele inte pentru manipulare Este evident c mrirea atractivitii culturilor de plante pentru inamicii naturali ai duntorilor solicit compui specifici pentru inte. Publicaii recente au artat c este posibil s manipulm producia de

atractani prin inginerie genetic. Kappers et al. (2005) au introdus gena de la cpuni FaNES1 (o gen a sintezei linalool/neriodol) n Arabidopsis thaliana pentru lansarea de (3S)-(E)-nerolidol n atragerea prdtorilor la acarieni. n alte studii, s-a introdus o gen a porumbului, TPS10 (sintaza terpenelor), n A.th., pentru emiterea de volatile sesquiterpene, lansate la atacul omizilor (Schnee et al., 2006). Plantele transformate au fost mai atractive la parazitoizii femele, care au folosit volatilele porumbului pentru gsirea gazdei, dar dup ce viespile au asociat volatilele cu planta gazd. A treia realizare notabil este introducerea n Arabidopsis a genei sintaza (E)-b-farnesen, emiterea sesquiterpenei producnd combaterea afidelor, avnd un rol repelent i de atragere a inamicilor (Pickett et al., 2006).

Inducerea inhibitorilor proteazici (PIs) de ctre acidul jasmonic

Acidul jasmonic, ca regulator al proteinelor, joac un rol important n aprrile plantelor, cu int pe canalul digestiv al insectelor, n perturbarea digestiei i a absorbiei (Felton, 2005). La rndul lor, erbivorele induc modificri ale proteinelor post-translaionale, inhibnd funciile lor defensive prin creterea stabilitii lor n stomac. Tehnologia microarray a scos n eviden paleta genelor ce codific aceste proteine reglate de erbivore. Inhibitorii proteazici (PIs) sau proteinele provocate de atacul artropodelor (AIPs) pot fi reglai de semnalizri hormonale multiple, incluznd acidul jasmonic, acidul salicilic i/sau etilena (Zhu et al., 2008). Numeroase cercetri confirm rolul jasmonailor n inducerea inhibitorilor proteazici la atacul erbivorelor sau de ctre volatilele emise de plantele nvecinate. Farmer i Ryan (1990) menioneaz comunicarea ntre plante cu ajutorul MeJA volatil ce induce sinteza inhibitorilor proteazici n frunze. Aceste rspunsuri defensive, locale sau sistemice erau atribuite, pn la acea dat, etilenei volatile. Metil jasmonatul aplicat pe suprafaa frunzelor de tomate a indus aprarea prin sinteza de inhibitori proteazici i la plantele nvecinate. Inducerea inhibitorilor proteazici (PIs) n rni, care duneaz proteazele digestive din stomacul insectelor, este cel mai bun exemplu de proteine defensive a cror sintez este strns legat de semnalizarea acidului jasmonic (Steppuhn i Baldwin, 2007). Alte proteine defensive dependente acidul jasmonic sunt polifenol oxidazele, treonin deaminazele, arginazele, i proteinele stocate vegetativ. Multe alte proteine cu aciune mpotriva insectelor au o stabilitate i activitate n proteazele sistemului digestiv. Toate aceste componente metabolice trebuie vzute nu ca entiti separate, ele acionnd ntr-un sistem defensiv cu aciuni sinergice. Performanele negative a PIs pe fitofagi sunt determinate de hiperproducia proteazelor digestive n stomacul insectelor, care epuizeaz aminoaciziii eseniali i reduc creterile. Reducerea creterii se poate datora i combinaiilor toxice, antinutritive sau efectelor antifeedant. De exemplu, introducerea n rni de polifenoloxidaze acioneaz ca PIs. Enzimele plantelor pot exercita efecte antinutriionale pe insectele fitofage prin perturbarea homeostaziei aminoacizilor din tractul digestiv, dar care poate fi extins i la alte clase de derivai nutritivi ai plantelor, incluznd lipide, carbohidraze i vitamine.

Dezvoltri practice n semnalizarea plantei aprri induse i constitutive

Studiul interaciunilor plant-insect, n special n sistemele multitrofice, ofer posibilitatea identificrii de semiochimicale, care pot induce rspunsuri de aprare n plante. n acest sens s-a identificat cis-jasmonatul cu efecte mari i persistente n reglarea expresiei genelor asociate cu aprrile plantei (Pickett, 2008). Cerealele au o varietate larg de inducere a nivelelor de rezisten produs de cis-jasmonat. Unele soiuri s-au dovedit rezistente la afide, identificndu-se un compus indus de cis-jasmonat, 6-metil-5-hepten-2-on, cu efecte de repelen, n acelai timp, de atracie a parazitoizilor. La gru, creterea produciei de acid hydroxamic (benzoxazinoid) contribuie la rezistena acestuia, acest lucru fiind exploatat de programele de ameliorare. Rezistena indus plantelor este activat de chimicale, patogeni i fitofagi i pregtesc plantele pentru o mai bun aprare, integrndu-se n bunele practici agricole. A fost testat utilitatea folosirii inducerii rezistenei n combaterea agenilor biotici i creterii productivitii plantelor prin tratamente cu BION R, OxyxomTM, MessengerR sau extrase de Reynoutria sachaliensis- MilsanaR i BTH. De asemenea, n inducerea rezistenei la atacul fitofagilor cis-jasmonatul aduce nivele de rezisten plantelor agricole.

Discuii i concluzii
Prin prezentarea sumar a mecanismelor de semnalizare i inducere a aprrilor la plante la nivel molecular se constat c jasmonaii, n calitate de coordonatori ai acestor mecanisme, joac un rol important n aceast direcie i adncirea acestor cercetri din punct de vedere fundamental vor rezolva i aspectele practice de management. Este nendoios faptul c abordarea acestor cercetri nu se pot realiza dect n echipe largi de cercettori, n care cercetrile moleculare la nivel genetic, biochimic, metabolic, proteonomic etc. vor scoate n eviden acurateea mecanismelor moleculare i posibilitatea de a le modifica n interesul pstrrii integritii plantelor. Cunoaterea fenomenelor moleculare nu se poate realiza fr folosirea unor tehnici adecvate de laborator, perfecionate n ultimele decenii, sprijinite de bioinformatic. Observaiile la nivel macro, evalurile biometrice, de greutate etc nu ne mai pot satisface. Abordri omice, genomice, proteonomice, lipidonomice, metabolomice, transcriptomice sunt necesare pentru cunoaterea fenomenelor biologice. Utilizarea plantelor cu genomurile secvenionate, ca Arabidopsis thaliana, tomate, tutun etc, prin mutante cu gene sileniate sau n superexpresie pot aduce clarificri n lanul semnalizrilor stresurilor biotice i msurile de pregtire i de inducere a aprrilor. Cercetrile prezente i viitoare au ca scop stabilirea cilor de semnalizare a factorilor biotici de mediu, de la proteinele receptoare a stimulilor, a factorilor de legtur, a nodurilor de interferen a diferiilor fitohormoni, pn la factorii de decizie n declanarea transcripiilor (de activare a seturilor de gene dependente de

fitohormoni, implicit de aprare a plantei) n producerea de metabolii secundari, cu rol n aprare. n pregtirea studenilor, n timpul licenei, dar mai ales prin masterate trebuie s creasc ponderea disciplinelor cu abordri moleculare la nivele genetice, biochimice, ecologice etc, pentru o cunoatere real a fenomenelor vieii i nu de suprafa. Rezult urmtoarele concluzii: - Ptrunderea n dimensiunea molecular este singura cale de dezvoltare a cercetrilor fundamentale i cu interes aplicativ de management al insectelor. - Jasmonaii (JAs) sunt principalele semnale pentru reglarea rezistenei la insectele fitofage, constituind arme noi i rspunsuri rapide mpotriva atacului produs de insecte. - Plantele pot recunoate provocatorii derivai din hrnirea erbivorelor, ce constituie tipare moleculare asociate fitofagilor (HAMPs), compui semnalizatori, care pot declana aprrile. Provocatorii chimici din secreiile orale ale insectelor joac un rol important n forma rspunsurilor cantitative i calitative a plantelor. - Receptorii semnalelor biotice prin factori de legtur sau de reglare mediaz genele de biosintez a fitohormonilor, iar creterea acestora mediaz transcripia biosintezei metaboliilor secundari. Aceste evenimente includ: o reconfigurare transcriptomic cu schimbri la nivelele de transcripie a genelor defensive i de cretere; lansarea de compui organici volatili (VOCs) ce funcioneaz ca o aprare indirect i acumularea de perturbatori ai erbivorelor sau de metabolii secundari duntori: nicotin, tripsin i inhibitorii proteazici (TPIs). - Secreiile orale a erbivorelor declaneaz relaii tritrofice plant-erbivorentomofagi, prin eliberarea de volatile din frunzele rnite, care atrag entomofagii. De asemenea, plantele pot recunoate depunerile de ponte declannd relaia tritrofic plant-depunere de ponte- entomofagi oofagi. Aplicaii practice de management se pot realiza prin intervenia n cadrul relaiilor tritrofice, introducerea unor gene care fabric anumite volatile ce mresc numrul speciilor de entomofagi etc. - Inducerea rezistenei n urma atacurilor includ aprri directe prin sinteza unor chimicale toxice sau fr gust i aprri indirecte prin producerea de volatile sau nectar extrafloral. Unele schimbri chimice n frunzele rnite joac rol de semnale ale rnirii n regiunile neatacate ale plantei sau plantele nvecinate. Recunoaterea acestor semnale iniiaz pregtirea, care cuprins schimbri la nivel molecular, care conduce la aa numita stare pregtit n frunzele neatacate. Frunzele n starea pregtit sunt capabile s rspund mult mai rapid i viguros la atacul erbivorelor. Inducerea rezistenei este mult mai costisitoare, din punct de vedere energetic, dect starea pregtit.a plantelor. - Jasmonaii joac un rol important n producerea inhibitorilor proteazici, ce determin hiperproducia proteazelor digestive n stomacul insectelor, care epuizeaz aminoaciziii eseniali i reduc creterile. Reducerea creterii se poate datora i combinaiilor toxice, antinutritive sau efectelor antifeedant.

Bibliografie
Alborn H.T., Stenhagen G., Loughrin J.H., Tumlinson J.H., 1997 An elicitor of plant volatiles from beet armyworm oral secretion. Science, 276, p. 945-949. Browse J., 2005. Jasmonate: an oxylipin signal with many roles in plants. Vitam. Horm., 72, p. 431-456. Demole E., Lederer E., Mercier D., 1962 Isolement et dtermination de la structure du jasmonate methyle, constituant odorant caractristique de l'essence de jasmin. Helv. Chim. Acta, 45, p. 675-685. Engelberth J., Seidl Adams, Schitz J.C., Tumlinson J.H., 2007. Insect elictors and exposure to green leafy volatiles differentially upregulate major octadecanoides and transcript of 12-oxophytodienoic acid reductases in Zea mays. Mol Plant Microbe Interact, 20, p. 707-716. Farmer E.E., Ryan C.A., 1990. Interplant communication: Airborne methyl jasmonate induces synthesis of proteinase inhibitors in plant leaves. Proc. Nati. Acad. Sci. USA, vol. 87, pp. 7713-7716. Frost C.J., Mescher M.C., Carlson J.E., Consuelo M. De Moraes, 2008. Plant defense priming against herbivores: getting ready for a different battle. Plant Physiology, vol. 146, p. 818-824. Hilker M., Stein Claudia, Schrderi R., Varama M., Mumm R., 2005. Insect egg deposition induces defense responses in Pinus sylvestris: characterisation of the elicitor. The Journal of experimental Biology, 208, p. 1849-1854. Hiltpold I., Turlings T.C.J., 2008. Enhancing the attractiveness of maize roots for entomopathogenic nematodes. State College, Pensylvania, Symposium, International Society of Chemical Ecology, USA. Howe G.A., Jander G., 2008. Plant immunity to insect herbivores. Annu Rev Plant Biol, 146, p. 801-803. Koornneef A., Pieterse C.M.J., 2008. Cross talk in defense signaling. Plant Physiology, vol. 146, p. 839-844. Little D., Caroline Gouthier-Darimont, Brussow, Reymond Ph., 2007. Oviposition-induced changes in Arabidopsis genome expression. Joint International Workshoop on: PR proteins and induced resistance against pathogens and insect, The Netherlands. Maffei M.E., Mithfer A., Boland W., 2007. Before gene expression early events in plant-insect interaction. Trends Plant Sci, 12, p. 310-316. Mithfer A., Boland W., 2008. Recognition of herbivory-associated molecular patern. Plant Physiology, vol. 146, p. 825-831. Par P.W., Tumlinson J.H., 1999. Plant volatiles as a defense against insect herbivores. Plant Physiol, vol. 112, p. 325-332. Pickett J.A., 2008. Constitutive and induced plant-plant signaling: hypotheses and practical developments. State College, Pennsylvania, Symposium, International Society of Chemical Ecology, USA, Summary. Schmelz E.A., Engelberth J., Alborn H.T., Tumlinson III J.H., Teal P.E.A., 2009. Phytohormone-based activity mapping of insect herbivore-produced elicitors. PNAS, vol. 106, p. 653-657. Steppuhn A., Baldwin I.T., 2007. Resistance management in a native plant:

nicotine prevents herbivores from compensating for plant protease inhibitors. Ecol. Lett, 10, p. 499-511. Vick B.A., Zimmerman D.C., 1984. Biosynthesis of jasmonic acid by several plants species. Plant Physiol., 75, p. 458-461. Wasternack C, 2006. Oxylipins: biosynthesis, signal transduction and action (p. 185-228). In: Plant Hormone Signalind edited Hedden P. and Thomas S G, 2006, Blackwell Publishing Ltd, pp. 347. Wu J., Hettenhausen C., Schuman M.C., Baldwin I.T., 2008. A comparation of two Nicotiana attenuata accessions reveals large differences in signaling induced by oral secretions of the specialist herbivore Manduca sexta. Plant Physiol, 146, p. 927-939. Zheng S.J., Dicke M., 2008. Ecological genomics of plant-insect interactions: from gene to community. Plant Physiology, vol. 146, p. 812-817. Abstract

The prospect of molecular approaches in fundamental research and management of insects

Jasmonates are the main signals in plant defence against herbivores, also being new weapons in plant defences. Oral secretions of insects are molecular patterns that trigger tritrofic relationships plant-pest-entomophagous, by releasing volatile. Priming plant by influence of volatile or internal signals produced by jasmonates, provides an increased resistance to pest attack. Only molecular approach in fundamental researches and in the management of the pests, assures knowledge of life phenomenology between plant and insect. Keywords: jasmonates, priming, molecular pattern, tritrofic relation, protease inhibitors, plant volatiles, insect elicitors Conf. dr. Valentin BRUDEA Universitatea tefan cel Mare Suceava Facultatea de Silvicultur vbrudea@yahoo.com