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TECHNIQUES D'ANALYSES BIOLOGIQUES

EPREUVE DE MOYENNE DURE
ANNE 2003/2004

1- Exercice 1 :
Une prpara on de Lactate Dshydrognase (LDH) est u lise dans lexprimenta on suivante. On cons tue une srie de 3 essais dont la composi on est la suivante ;

Essai n H2O Solu on talon (ml) Prpara on de LDH (ml) Rac f du Biuret(ml) Absorbance mesure aprs 30 min

1 2

2 2 8 0.02 8 0.25 8 0.29

Concentra on de la solu on talon : 1mg/ml. Trajet op que : 1 cm. Quelle est la concentra on en protines dans la prpara on de LDH ? Rponse : 2La LDH catalyse la rac on :

Pyruvate + NADH + H+ - - - > Lactate + NAD+

Dans la cuve dun spectrophotomtre, on introduit 2.95 ml dun tampon adquat contenant du pyruvate et du NADH+H+ en concentra ons saturantes. On ajoute 50 l de la prpara on de LDH prcdemment u lise. Comment varie labsorbance ? jus er votre rponse. Rponse : Jus ca on : On suit la varia on dabsorbance en fonc on du temps, elle est gale 0.048 min -1. Le coecient dabsorbance molaire de NADH+ H est de 6300 M-1.cm . a) Rponse : b) Rponse : Calculer la quan t de NADH transforme en 1 min. Donner la dni on du coecient dabsorp on molaire et sa rela on avec labsorbance.
+ -1

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Exercice 2 :

Dans un protocole opratoire ncessitant une dprotinisa on, il est indiqu de centrifuger 10min 3500 tours/min. Sachant que lon u lise un rotor dont le rayon de centrifuga on est de 50 mm, calculer la valeur de lacclra on en mul ple de g. Quelle serait la valeur de lacclra on centrifuge si on u lise un autre rotor de rayon de centrifuga on gale 8 cm ? Quelle conclusion en rez vous ? Rponse :

Exercice 3 :

Une solu on dacide sulfurique a les concentra ons suivantes : Densit 1.83, degr de puret en masse 94%. a) b) Quelle est sa concentra on molaire ? Comment procdez vous pour prparer 300 ml dune solu on dacide sulfurique de concentra on molaire 0.125 par r de la solu on concentre ayant les caractris ques ci-dessous ? b)

Rponse : a)

Exercice 4 (Ques ons de cours) Citez les techniques de photomtrie dmission atomique que vous connaissez ? Quelle est celle qui donne les meilleurs rsultats exprimentaux ? Quels inconvnients prsente t-elle ? Rponse :

EmailA.Bedrane & F.Lahfa

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