MUNDO

MICROBIANO

MICROBIOLOGA
La Microbiologa es la ciencia que se centra en el estudio de organismos microscpicos.

La Microbiologa comenz y se desarroll ligada a dos grandes eventos.

El primero de ellos fue la aparicin de grandes epidemias que asolaban Europa, lo que llev a los cientficos a preguntarse quines eran los causantes de stas. El segundo fue el desarrollo de una adecuada tecnologa para proceder al estudio de estos seres; esta tecnologa fue la microscopa

Anton Van Leeuwenhoek (1632-1723),

aficionado naturalista, desarrollo el primer microscopio, con el que observ microorganismos a los que l llam animculos.

GRANDES GRUPOS DE ORGANISMOS

Helmintos

R. animal I- EUCARIOTAS
R. protista
Artrpodos Algas Hongos Protozoos

II- PROCARIOTAS

R. Procaryotae

Archaeobacteria Cyanobacteria Bacteria

Virus ARN

III-VIRUS

Virus ADN

TAMAO: clula eucariota - clula procariota

SISTEMATICA BACTERIANA
LA SISTEMATICA BACTERIANA ESTUDIA LOS ORGANISMOS Y SUS RELACIONES E INCLUYE: DIVERSOS

La CLASIFICACION: ordenacin de los organismos en

grupos taxonmicos( familia, gnero, especies, etc. )

LA TAXONOMIA: ciencia que estudia la clasificacin y

denominacin correcta de los organismos. LA IDENTIFICACION: permite encuadrar un organismo determinado en un grupo taxonmico particular de una clasificacin previamente establecida. LA NOMENCLATURA: trata de asignar a los organismos vivos un nombre cientfico, correcto y admitido internacionalmente.

LA FILOGENIA: estudia la historia evolutiva de los

organismos

CATEGORIA TAXONOMICA

REINOS
PHYLLUM

CLASES
ORDENES FAMILIAS

TRIBUS
GENEROS ESPECIES

MORFOLOGIA CELULAR
TAMAO 0,2 2 um de dimetro y 1 6 um de largo

ELEMENTOS CELULARES
Pared celular

Membrana citoplasmtica

ELEMENTOS OBLIGADOS

Citoplasma Ribosomas

Ncleo
Cpsula Flagelos

ELEMENTOS FACULTATIVOS

Fimbrias Esporos Glicocalix

Estructura bacteriana

 MEMBRANA CELULAR

ESTRUCTURA DE LA MEMBRANA BACTERIANA

Estructura Membrana plasmtica Constituyente qumico Fosfolpidos, protenas y enzimas que participan en los mecanismos de produccin de energa, creacin de un potencial de membrana y transporte Cadenas tipo glucano de N-acetilglucosamina y cido N-acetilmurmico, unidas mediante un puente peptdico

Pared celular Bacterias grampositivas Peptidoglucano

Acido teicoico Acido lipoteicoico

Bacterias gramnegativas Peptidoglucano Espacio periplsmico

Fosfato de polirribitol o glicerol-fosfato unidos al peptidoglucano cido teicoico unido a lpidos

Versin ms delgada del peptidoglucano que se encuentra en las bacterias grampositvas Enzimas que participan en los mecanismos de transporte, degradacin y sntesis

Membrana externa Protenas

Lipopolisacrido

Fosfolpidos con cidos grasos saturados Porinas, lipoprotenas, protenas de transporte

Lpido A, polisacrido central (core),antgeno 0

ESTRUCTURA DE LA MEMBRANA BACTERIANA

Estructura Cpsula Constituyente qumico Polisacridos (disacridos y trisacridos) y polipptidos Pilina, adhesinas Protenas motoras, flagelina

Pili Flagelos

FUNCIONES DE LA ENVOLTURA BACTERIANA

FUNCIN Estructura Rigidez Envoltura de las estructuras internas COMPONENTE Todos Todos

Funciones bacterianas Barrera de permeabilidad Captacin metablica Produccin de energa

Motilidad Apareamiento

Membrana externa o membrana plasmtica Membranas y porinas, permeasas y protenas de transporte periplsmica Membrana plasmtica
Flagelos Pili

Interaccin en el rgano anfitrin Adhesin a las clulas del anfitrin Identificacin inmunolgica por el anfitrin
Evasin del anfitrin de la identificacin inmunolgica Relevancia mdica Sensibilidad a los antibiticos Resistencia a los antibiticos

Pili, protenas, cido teicoico Todas las estructuras externas

Cpsula, protena M Enzimas para la sntesis de peptidoglucano Membrana externa

COLORACION DE GRAM
PERMITE CLASIFICAR A LOS GERMENES EN DOS GRUPOS:

GRAM POSITIVOS

BACTERIAS QUE SE COLOREAN DE VIOLETA BACTERIAS QUE SE COLOREAN DE ROSADO

GRAM NEGATIVOS

Paredes celulares Gram (+) y Gram(-)

Las bacterias se agrupan en base a su tincin por la tcnica de coloracin de Gram.
Gram positivos - Pared celular con grueso peptidoglicano que retiene un colorante especfico. No tienen membrana externa. Gram negativos - pared celular compleja, con membrana externa y un espacio entre membrana interna y externa -el periplasmaque contiene el saco de murena y abundantes enzimas. El peptidoglicano es fino, por lo que no retienen el colorante.

EL PEPTIDOGLUCANO

(Monmero)

COLORACION DE GRAM
Los reactivos empleados son:
Cristal violeta o Violeta de genciana (colorante bsico o primario) Lugol (mordiente o fijador) Alcohol-Acetona (decolorante) Safranina (contraste o colorante secundario)

PARED DE LAS BACTERIAS GRAMPOSITIVAS

PARED DE LAS BACTERIAS GRAMNEGATIVAS

DIFERENCIAS

LA TINCIN DE GRAM
Cul es gram (+) y cul gram (-)?

Gram (-) : Color rojo

(Escherichia coli)

Gram (+): color prpura

Otras coloraciones
COLORACION DE ZIEHL NEELSEN: Se usa para reconocer las bacterias del gnero Mycobacterium y del gnero Nocardia. Los reactivos empleados son: Fucsina (colorante bsico), calor (mordiente), alcohol-cido clorhdrico (decolorante) y azul de metileno (contraste). Los grmenes que se colorean con la fuscina bsica( rojo ), y resisten a la decoloracin por el cido y el alcohol, se denominan bacilos cidos alcohol resistentes ( B.A.A.R ).

COLORACION DE GIEMSA: Se utiliza para estudiar parsitos, principalmente protozoarios de la sangre y de los tejidos. Las clulas y los protozoarios presentan el ncleo de color rojo vinoso y el citoplasma de color azul claro

Citoplasma
Espacio que se encuentra dentro de la membrana plasmtica. Contiene inclusiones cristalinas, sustancias de reserva, gotas lipdicas, enzimas y otras protenas. Se encuentran ribosomas 70s y una regin densa, donde se encuentra el ADN bacteriano (nucleoide). El ADN bacteriano es ADN bicatenario, circular. Plsmidos: constituidos por ADN extracromosmico, estn relacionados con la resistencia a antibiticos.

CPSULA

Se trata de una cubierta glucdica. Preferentemente en patgenos. Procura proteccin frente a fagocitosis y a anticuerpos. Colonias con aspecto mucilaginoso.

FLAGELOS
Son apndices largos y finos que se encuentran fijos a la clula por uno de sus extremos y libres en el otro extremo.
DISTRIBUCION
DISPOSICION

Polar
Lofotrico

Anftricos
Pertricos

EL FLAGELO
Unidades proteicas

Conjunto de anillos mviles (L, P y MS)

Protenas motor

El movimiento se produce por rotacin

PILI Y FIMBRIAS
PILI Estructuras tubulares para intercambio de material gentico.

FIMBRIAS. Ms cortas que los flagelos. Misin: adherencia a sustratos

Foto al ME

CONJUGACIN

Endospora
Estructuras de supervivencia producidas por esporulacin. Resistentes al calor, desecacin, radiacin, cidos, desinfectantes y qumicos fuertes. Pueden tener largos perodos de latencia y permanecer viables por muchos aos. Presentes en bacterias del suelo (ej Clostridium y Bacillus). Su descubrimiento ayud al desarrollo de mtodos y tcnicas adecuadas de esterilizacin.

FISIOLOGIA

BACTERIANA

NUTRICION Y METABOLISMO
AGUA

ELEMENTOS ENERGETICOS Y CONSTITUTIVOS

IONES MINERALES( fosfatos, sulfatos, calcio, sodio y cloruros) CARBOHIDRATOS PROTEINAS

HIDROGENO y OXIGENO

Captado del agua, del aire atmosfrico y de los compuestos orgnicos e inorgnicos

NITROGENO

Del aire atmosfrico, sales inorgnicas y las protenas Obtenido del CO2 del aire o de las sales inorgnicas ( Na2CO3 ) y de las sustancias orgnicas terciarias y cuaternarias

CARBONO

LAS BACTERIAS SE PUEDEN CLASIFICAR EN:

BACTERIAS AEROBIAS

SEGN LA NECESIDAD DE OXIGENO

BACTERIAS ANAEROBIAS BACTERIAS MICROAEROFILAS

BACTERIAS FACULTATIVAS

SEGN LA HABILIDAD DE USAR EL CARBONO

BACTERIAS AUTOTROFICAS (CO2)

BACTERIAS HETEROTROFICAS (C orgnico)

SEGN LA TEMPERATURA OPTIMA DE CRECIMIENTO

BACTERIAS PSICRFILAS: 15-20C BACTERIAS TERMOFILAS: 55C BACTERIAS MESOFILAS: 25-40C

METABOLISMO BACTERIANO
DIGESTION EXOENZIMAS
PASIVA

ABSORCION

ACTIVA ENDOENZIMAS PROCESOS ANABOLICOS

En el Citoplasma

OXIDACION

OBTENCION DE ATP

Pigmentos
Ciertas bacterias son capaces de secretar pigmentos en el medio en que se desarrollan:
Exopigmentos: segregan pigmentos en el medio de cultivo colorendolo. Ej.: Pseudomonas aeruginosa Endopigmentos: retienen el pigmento en su citpoplasma, coloreando la colonia. Ej.: Estafilococcus aureus, gnero Chromobacterium

TOXINAS
Se pueden clasificar por su localizacin celular, por su mecanismo de accin.

Por su localizacin existen dos grandes tipos, las endo y las exotoxinas.

EXOTOXINAS
Muchas bacterias producen protenas (exotoxinas) que por su accin enzimtica modifican o bien destruyen determinadas estructuras celulares.

Sus efectos usualmente se observan de manera aguda, ya que son suficientemente potentes para producir efectos serios (ej. la muerte) como resultado. Ejemplos de estos son el botulismo, el ntrax, el clera y la difteria.
Pueden tener subunidades o no. Una subunidad A con actividad txica y otra B, que media la adherencia del complejo toxina-clula husped, facilitando la entrada de la subunidad A produciendo modificaciones metablicas en la clula sobre la cual ejerce su accin.

EXOTOXINAS

Las vacunas se elaboran a partir de estas toxinas (son antgenos a los cuales se los denomin "toxoides"), que se modifican de tal manera para no hacer dao pero s generando la respuesta inmunitaria deseada.

ENDOTOXINAS
Son componentes txicos de la envoltura (membrana y pared) de la clula bacteriana.

La endotoxina clsica lipopolisacrido (LPS).

la

ms

potente

es

el

El peptidoglicano despliega muchas propiedades similares a la endotoxina. Ciertos peptidoglicanos (PG) son poco biodegradables y su presencia puede causar dao tisular, tanto de tipo crnico como de tipo agudo.

Las endotoxinas son disparadores "no-especficos" de la inflamacin. Por ejemplo, las clulas del sistema inmune y otras ms se estimulan y liberan citocinas (incluyendo la interleucina 1 y el factor de necrosis tumoral), produciendo como manifestaciones ms importantes: fiebre leucopenia (seguida de leucocitosis) hipoglucemia (ya que aumenta la gluclisis en muchas clulas) hipotensin (debido a que aumenta la permeabilidad capilar, dilatacin vascular, disminuyendo el retorno venoso y as el volumen minuto) estimula la va alterna del complemento activa el factor XII de la coagulacin produciendo coagulacin intravascular diseminada

MEDIOS DE C U L T I V O S

Son un conjunto de sustancias que tratan de reproducir las condiciones ideales que la bacteria tena en el husped para que se multiplique, se manifieste y se pueda estudiar.
Estriles Fuente de C Fuente de N Requiere: Fuente de energa qumica (si no son auttrofos)
CONSISTENCIA: slidos, semislidos y lquidos.
incubacin

Una bacteria, una colonia

MEDIOS DE CULTIVO
De acuerdo a su estado fsico: Slidos, lquidos y semislidos. De acuerdo a su origen: Medios sintticos (componente qumico definido disuelto en agua) y Medios naturales (sustancias naturales vegetales o animales)
Por su composicin: Medios comunes (crecimiento de microorganismos poco exigentes) y Medios enriquecidos (para bacterias exigentes).

OTROS MEDIOS DE CULTIVO

Medios de enriquecimiento: medios lquidos que favorecen la multiplicacin de unas bacterias, inhibiendo parcialmente la de otras.

Medios selectivos: La selectividad se consigue alterando factores fsicos o aadiendo compuestos qumicos, que sean nocivo para las bacterias cuyo crecimiento no interesa.

 Medios de identificacin: En estos las bacterias adems de crecer, actan sobre ciertos componente demostrando algunas de sus propiedades (pruebas bioqumicas).

Medios de transporte: Asegura la viabilidad de las bacterias desde el momento de la toma de muestra hasta la llegada al laboratorio para su procesamiento ( medio de Stuart)

IDENTIFICACION BACTERIANA
Estudios morfolgicos: se realizan en la etapa logartmica de crecimiento. Estudio de flagelos, cpsulas, esporas. Coloraciones: Gram, Ziehl Neelsen. Cultivos: Necesidades nutritivas, aspecto y tamao de las colonias, forma de crecimiento en medios slidos y lquidos. Propiedades metablicas: requerimientos de O2 y CO2, temperatura ptima de desarrollo, pigmentos, resistencia al calor, cidos y lcalis. Propiedades qumicas Estructura antignica: antgenos somticos, capsulares, flagelares, esporulares, y otros.

DIVISION O MULTIPLICACION BACTERIANA.

Se realiza por FISIN SIMPLE O BINARIA.

Tiempo de generacin:
Tiempo en el que se produce la duplicacin de las clulas. Proceso que no alcanza la misma velocidad para todas las especies, es distintivo, aunque hay factores estimulantes que pueden influir algo. E. coli: 20-30 minutos M. tuberculosis: 20 horas en promedio.

VELOCIDAD DE CRECIMIENTO
Crecimiento bacteriano: no se caracteriza por aumento de tamao, sino del nmero

En condiciones adecuadas las bacterias aumentan en nmero con ritmo de progresin geomtrica (2-4-8-16.) La velocidad de crecimiento de las bacterias depende del pH, temperatura, medio de cultivo, tensin del oxgeno y del anhdrido carbnico.

Curva de crecimiento bacteriano