UNIVERSIDADE DE SO PAULO

INSTITUTO DE QUMICA

Departamento de Qumica Fundamental

Disciplina QFL2201 Qumica Analtica

Turma 21 Grupo 09

Alunos: Celso Maurcio Pereira de Oliveira Leandro Nobushi Hoshiko Victor Postal Weverton Lria Baldin

6851327 6846766 6846596 6847472

Professor: Paulo Celso Isolani

Ttulo: Relatrio da experincia FL Fluorimetria

So Paulo, 06 de julho de 2011

INTRODUO

O objetivo desta experincia consiste em determinar a concentrao de quinino em amostra de gua tnica atravs da tcnica de emisso chamada fluorimetria. Quinino, , massa molar 324,43 g, um alcalide extrado da casca da Quina, que contm uma mistura de 35 alcalides, que devem ser separados do quinino, e que est presente em 1% (m/m) nas cascas. Assim, so necessrias mil rvores ou 100 toneladas de cascas para produzir 1 tonelada de quinino. A sntese de substncias naturais por vezes extremamente difcil. Apesar de ter sido isolado em 1820, a sntese do quinino s foi possvel em 1944. O quinino tem sido utilizado por muitos anos como um agente no combate a malria, sendo efetivo no tratamento dos sintomas dos ataques da malria. As formas de uso medicinal podem ser como dihidrocloridrato de quinino ) ( )( ) , de massa molar 782,97 gramas. ou sulfato de quinino, ( Quinino um composto de alta fluorescncia, especialmente em solues cidas diludas, podendo ser determinado em nveis de trao atravs da tcnica de fluorimetria.

Figura 1 - Estrutura molecular do quinino

Tcnicas espectrofotomtricas de fluorescncia so fundamentadas em fenmenos decorrentes da absoro de radiao eletromagntica de um determinado comprimento de onda, produzindo uma espcie excitada, e na emisso de radiao (que segue a desativao) de comprimento de onda maior que o de excitao e, portanto, de menor energia. O comprimento de onda da luz emitida no processo de fluorescncia pode ser empregado para se reconhecer qual espcie est presente na amostra (anlise qualitativa) e a intensidade da radiao caracterstica emitida pode ser usada para quantificar a espcie. Ou seja, a tcnica de fluorimetria uma tcnica de anlise baseada na propriedade de certas espcies qumicas de emitirem fluorescncia. A quantificao das espcies qumicas se d pela medida da fluorescncia da substncia a ser analisada. Entende-se por fluorescncia a capacidade de uma substncia de emitir luz quando exposta a radiaes do tipo ultravioleta (UV), raios catdicos ou raios X.

PARTE EXPERIMENTAL

Materiais utilizados: 2 pipetas de 5 mL; 6 bales volumtricos de 10 mL; 8 tubos de ensaio; 1 bquer de 25 mL; Reagentes utilizados: Soluo padro de sulfato de quinino a 2 ppm; cido sulfrico a 0,3 molar; gua tnica Antrtica. Aparelho utilizado: Fluormetro. Procedimento experimental: Foram preparadas diversas diluies da soluo padro de sulfato de quinino com cido sulfrico, a fim de levantar a reta padro no fluormetro. Seguem as concentraes a seguir. Tabela 1 Concentrao de sulfato de quinino nos bales volumtricos Balo 1 2 3 4 5 Concentrao (ppm) 0,2 0,4 0,5 0,6 0,7

6 0,8

A seguir, essas solues foram transferidas para os tubos de ensaio, bem como o cido sulfrico e a amostra de gua tnica. Seguem os contedos dos tubos de ensaio a seguir. Tabela 2 Contedo dos tubos de ensaio 0 1 2 3 4 5 cido Contedo Balo 1 Balo 2 Balo 3 Balo 4 Balo 5 sulfrico Tubo

A Amostra de Balo 6 gua tnica

O fluormetro foi ento preparado para receber as amostras. Colocou-se inicialmente o filtro primrio (nmero 360), e em seguida escolheu-se um filtro secundrio. Existiam dois filtros, o de nmero 415 e 430. O primeiro foi inserido, por mera questo de escolha ao acaso, j que o outro tambm dever ser utilizado logo a seguir. A calibrao do aparelho foi feito com o tubo de ensaio nmero 0, que representa o branco da soluo (sem quinino). O boto da calibrao do zero do aparelho foi ento ajustado para que sua leitura acusasse valor 0. A calibrao do valor mximo de fluorescncia foi feita com o tubo nmero 6, e o boto span foi ajustado at o aparelho acusar o valor 100 no mostrador. Aps a calibrao, os tubos de marcao 1 a 5 e A foram inseridos no aparelho, um de cada vez, e os valores indicados pelo aparelho anotados.

O segundo filtro foi ento inserido aps a retirada do primeiro (mas sem remover o filtro primrio), a calibrao foi efetuada da mesma forma anteriormente explicada e as medies foram novamente efetuadas, anotando sempre os valores fornecidos pelo aparelho. Observaes acerca desta experincia so as mesmas no que se refere preparao de solues, como a impercia dos alunos ao efetuar as diluies, o cuidado com a contaminao de reagentes e materiais.

RESULTADOS

Tabela 3 Concentrao das amostras, volume de soluo de quinino diludo e intensidade de fluorescncia para os filtros disponveis Concentrao Volume de soluo de Fluorescncia Fluorescncia Soluo (ppm) quinino adicionada (mL) filtro 415 filtro 430 1 0,2 1,0 10 15 2 0,4 2,0 40 47 3 0,5 2,5 54 57 4 0,6 3,0 64 67 5 0,7 3,5 81 84 6 0,8 4,0 100 100 Com o intuito de verificar qual dos filtros o mais apropriado para a situao, plotou-se os dados acima tabelados e verificou-se a linearidade dos pontos.

Filtro 415
120 100 Fluorescncia 80 60 40 20 0 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 Concentrao (ppm)
Figura 2 - Grfico da concentrao de sulfato de quinino pela fluorescncia com o filtro 415

y = 113.45x R = 0.9393

Filtro 430
120 100 Fluorescncia 80 60 40 20 0 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 Concentrao (ppm)
Figura 3 - Grfico da concentrao de sulfato de quinino pela fluorescncia com o filtro 430

y = 118.2x R = 0.9715

Como o filtro 430 apresentou uma maior linearidade (j que apresentou um maior valor de R) ele ser usado na determinao da concentrao de quinino na gua tnica. Para o grfico do filtro de 430 foi encontrada a seguinte equao: IF = 118,2C Logo, C = IF/118,2 Onde IF intensidade de fluorescncia e C a concentrao da soluo em ppm. Para a soluo problema (soluo preparada de gua tnica) foi encontrada uma intensidade de fluorescncia igual a 44. Portanto, substituindo na frmula acima se encontra a concentrao de quinino na amostra: C = 44/118,2 = 0,372 ppm Portanto, h 0,0372 mg de quinino em 100 mL de soluo preparada. Assim, possvel calcular a concentrao de quinino na gua tnica original: C = 0,0372/0,001 = 37,2 ppm

DISCUSSO DOS RESULTADOS

Os valores de R exibidos pelos grficos indicam uma forte correlao linear. Com isso pode-se concluir que o objetivo do experimento foi alcanado com sucesso. De acordo com dados fornecidos pelo fabricante, a concentrao de quinino no produto analisado de 37,5 ppm. Comparando com o resultado obtido, vemos que a diferena de apenas 0,8%. Durante o experimento alguns cuidados foram tomados para que o mesmo se realizasse da maneira mais adequada possvel, porm no podemos desprezar alguns erros provenientes do preparo das solues e do ajuste do aparelho. Tais erros influenciam diretamente as medidas realizadas. Pode-se dizer que a instruo dos monitores, juntamente com a aparelhagem usada, serviu de grande valia durante a realizao do experimento.

QUESTES
1) A fluorescncia provocada pela absoro de energia radiante e reemisso de parte

desta energia sob a forma de luz. A luz emitida tem quase sempre comprimento de onda maior que o da luz absorvida (lei de Stokes). Na fluorescncia, a absoro e a emisso ocorrem em um curto intervalo de tempo, porm mensurvel, da ordem de 10-12 a 10-9 segundo. Se a luz for emitida em um tempo maior que 10-8 segundo o fenmeno conhecido como fosforescncia; esse tempo excedido pode durar at algumas semanas. Com isso podemos dizer que a diferena est apenas na rapidez em que a luz emitida.

2)

O rendimento quntico de uma reao definido como:

fx

nmero de molculas de x formadas ou decompostas ) nmero de quanta absorvido

Medindo-se a velocidade da reao e a quantidade de radiao absorvida, consegue-se determin-lo. O valor de fx uma propriedade intrnseca de uma molcula e fortemente influenciada pela sua estrutura. Em geral, um valor elevado de fx est associado a molculas que possuem um sistema extenso de duplas ligaes conjugadas, com uma estrutura rgida devida formao de anis. Espcies que no apresentam fluorescncia em escala aprecivel possuem rendimento quase nulo. J para espcies altamente fluorescentes, o rendimento pode chegar perto da unidade. O rendimento quntico afetado pela temperatura, pois temperaturas mais altas aumentam a frequncia das colises, fazendo crescer a probabilidade de desativao atravs da interao e transferncia de energia entre a molcula excitada e as molculas do solvente e outros solutos. A diminuio da viscosidade do solvente tambm faz diminuir o rendimento quntico. 3) Pois o cido sulfrico melhora a fluorescncia da soluo. Isso ocorre principalmente

por causa de dois fatores: pH: o quinino uma base orgnica e quando protona conjuga a substncia. Quando uma substncia mais conjugada, ela mais fluorescente, desse modo a protonao aumenta a fluorescncia do quinino; polaridade: quando o quinino excitado, ele tem os eltrons na forma * que mais polar do que na forma . Devido ao cido ser mais polar que a gua, o * tambm fica excitado, assim, quando decai a molcula, gera-se mais fluorescncia. 4) O filtro primrio seleciona, do feixe que vem da fonte, a radiao de comprimento de

onda adequada excitao da amostra. Logo, deve apenas permitir a passagem de uma estreita faixa em uma regio de comprimento de onda selecionada para excitar a amostra a um determinado estado eletrnico. O filtro secundrio, por sua vez, tem como funo permitir a passagem apenas da radiao fluorescente a ser medida no detector. Deve, ento, ser opaco a qualquer radiao primria refletida ou espalhada e transparente radiao fluorescente.

5)

Os fluormetros mais simples so instrumentos manuais que operam num nico

comprimento de onda. Contudo, so perfeitamente apropriados para as medies quantitativas, pois estas so feitas, geralmente, em um comprimento de onda fixo. Os espectrofluormetros mais avanados podem fazer a varredura automtica do espectro de fluorescncia entre 200 e 900 nm e emitir o registro grfico do espectro. Podem tambm operar num comprimento de onda fixo e so igualmente apropriados para realizar um trabalho quantitativo; a principal aplicao dos espectrofluormetros a deteco e a determinao de pequenas concentraes e substncias orgnicas. 6) A fluorescncia aparece em um comprimento de onda maior que a excitao, pois as

molculas excitadas aps um curto intervalo de tempo (10-7 a 10-9 segundo) perdem a energia absorvida e voltam ao estado fundamental. Essas perdas de energia se devem as colises, perda do movimento de rotao e vibrao das molculas. Portanto, como a energia inversamente proporcional ao comprimento de onda, ao se diminuir a energia promove-se um aumento no comprimento de onda.

7)

A transio da fluorescncia permitida e a da fosforescncia proibida. Sendo

proibida, a transio demora mais a acontecer, fazendo com que o tempo de vida aumente. Na fosforescncia, a molcula permanece algum tempo em um estado intermedirio ou estado tripleto, enquanto na fluorescncia a molcula passa direto do estado excitado para o estado fundamental.

BIBLIOGRAFIA

Sawyer, D. T., Heineman, W. R., & Beebe, J. M. (1984). Chemistry Experiments for Instrumental Methods. New York: John Wiley and Sons. Skoog, D. A., & Leary, J. J. (1992). Principles of Instrumental Analysis (4th ed.). New York: Saunders College Publishing.

http://www.ambev.com.br/pt-br/nossas-marcas/refrigerantes/agua-tonica-antarctica/aguatonica-antarctica (Acessado em 14/07/2011 s 14:15 hrs)