DETERMINAREA AZOTULUI 1.

Determinarea azotului organic din ap Generaliti: azotul organic este azotul provenit de la compuii biologici (proteine, peptide, aminoacizi). Principiul metodei: mineralizarea azotului organic, dup ndeprtarea azotului amoniacal i determinarea lui prin titrare sau colorimetrie, sub form de amoniac. Modul de lucru: ntr-un balon Kjeldahl se introduce o anumit cantitate de ap de analizat n funcie de concentraia aproximativ de azot organic, astfel: 250 ml ap de analizat pentru un coninut de 0,10 mg/l; 100 ml ap de analizat pentru un coninut de 10-20 mg/l; 50-100 ml ap de analizat pentru un coninut de 25 mg/l; 20-30 ml ap de analizat pentru un coninut de 50 mg/l; Se dilueaz proba la 300 ml cu ap distilat, se neutralizeaz la pH = 7 n prezena roului de bromfenol (viraj rou) i se adaug 25 ml soluie tampon de fosfai pentru a aduce la pH = 7,4. Se fierbe proba pn la ndeprtarea amoniacului (se ncearc o poriune de distilat cu reactivul Nessler). Coninutul rmas n Kjeldahl se mineralizeaz n prezena a 20 ml H2SO4 concentrat i 5 g amestec catalizator, se pune o plnie n gtul balonului i se monteaz nclinat. La nceput balonul se nclzete la flacr mic apoi flacra se mrete ncetul cu ncetul. Mineralizarea se continu pn ce lichidul devine complet clar, continundu-se mineralizarea nc 20-30 minute. Dup rcire la temperatura camerei, se dilueaz pn la 300 ml cu ap distilat, se adaug 2-3 buci de piatr ponce i apoi se distileaz folosind un aparat de distilare tip Parnas Wagner. Distilatul se prinde ntr-un vas de titrare n care s-a introdus 50 ml acid boric i 0,5 ml amestec de indicatori. n timpul distilrii captul refrigerentului trebuie s fie introdus n acidul boric din vasul de titrare. Prin plnia aparatului se introduce soluia de hidroxid de sodiu tiosulfat de sodiu, pn ce mineralizatul devine rou, n prezena fenolftaleinei ca indicator. Se distileaz pn cnd volumul din vasul de titrare atinge aproape 200 ml. Se scoate captul refrigerentului din lichid, se spal cu ap distilat i apoi se titreaz distilatul cu H2SO4 0,02 N pn ce indicatorul vireaz de la violet la albastru-gri. Paralel se lucreaz i un martor n aceleai condiii ca proba. Calcul: mg N organic/l =

V V1 = ml H2SO4 0,02 N folosii la titrarea probei; V2 = ml H2SO4 0,02 N folosii la titrarea martorului; f = factorul soluiei H2SO4 0,02 N; 2,8 = echivalentul n mg azot a unui ml de H2SO4 0,02 N; V = cantitatea de ap de analizat luat n lucru , n ml.
1

(V1 V2 )f 2,8 1000

Observaii: determinarea azotului organic se face foarte repede dup recoltarea probei de ap pentru a nu surveni modificri n concentraia acestui element. 2. Determinarea azotului total din ap Generaliti: azotul total din ap este format din azot organic i azot mineral (amoniac, nitrii, nitrai). Principiul metodei: azotul din ap este mineralizat cu acid sulfuric concentrat i transformat n sulfat de amoniu care este distilat n mediul alcalin. Reactivi: acid sulfuric concentrat (d=1,84) hidroxid de sodiu 50%; amestec catalizator: 4 pri sulfat de potasiu i o parte sulfat de cupru, se mojareaz mpreun; acid sulfuric 0,01 N; hidroxid de sodiu 0,01 N; rou de metil, indicator 0,1%. Modul de lucru: o cantitate de ap de analizat n funcie de coninutul de azot (vezi determinarea azotului organic) se introduce ntr-un balon Kjeldahl, se adaug 10 ml acid sulfuric concentrat i 5 g amestec catalizator, se mineralizeaz direct pe sit la nceput la foc mic, apoi la o flacr mai mare. Mineralizarea se continu pn ce lichidul devine complet clar. Se las s se rceasc , dup care se adaug n balonul Kjeldahl cca 100 ml ap distilat i se trece coninutul cantitativ n balonul de distilare. Se adaug hidroxid de sodiu pn ce mineralizantul devine rou n prezena fenolftaleinei ca indicator. Distilatul este prins n 40 ml H2SO4 0,01 N msurai exact. n timpul distilrii, captul refrigerentului trebuie s se menin n soluia de acid sulfuric. Dup distilare (vezi distilarea amoniacului) se titreaz excesul de acid sulfuric cu hidroxid de sodiu 0,01 N n prezena a 2-3 picturi de rou de metil. Calcul: vezi determinarea amoniacului - metoda distilrii.