PREGUNTAS PARA EL EXAMENDE BIOTECNOLOGA INDUSTRIAL Produccin de enzimas 1. Qu tipo de metabolitos son las enzimas?

Las enzimas son metabolitos de tipo primario, porque tienen una funcin metablica directa, Ser compuestos esenciales intermedios en las vas
catablica y anablica.

2. Indique que operaciones de recuperacin empleara en la produccin de enzimas. La mayor totalidad de las enzimas microbianas comerciales son producidas en cultivo sumergido. Es por esta razn que dentro de las operaciones de recuperacin uno de los principales objetivos es eliminar agua al menor costo posible. Las operaciones son: Extraccin: En ciertos casos es posible extraer enzima que se encuentra ligada a la pared celular o a alguna membrana, mediante tratamientos especficos de autolisis (invertasa de levadura) o bien con solventes, dentro de los cuales es isobutanol es el ms indicado para enzimas ligadas a membranas. Ruptura Celular: Para la ruptura de clulas y la consecuente liberacin de los componentes intracelulares, existe una diversidad de tcnicas a nivel laboratorio, pero slo dos mtodos mecnicos son empleados a grande escala: el homogenizador de alta presin basado en el diseo de MAnton-Gaulin para la leche (4 a 21 kg de levadura seca por hora) y el molino de esferas de alta velocidad, el Dyno mill (20 kg de levadura seca por hora) tanto vertical como horizontal. Separacin de Slidos: La eliminacin de clulas al final de la fermentacin, la eliminacin de residuos celulares despus de la ruptura y la recuperacin o eliminacin de precipitados (protenas y cidos nucleicos), se efecta por centrifugacin o por filtracin. Las operaciones de separacin ms empleada en la recuperacin de enzimas es la centrifugacin y la configuracin ms empleada por ser la de mayor velocidad y eficiencia es la centrfuga tubular Sharples, aunque tambin son empleadas las centrifugas de discos, de canastas, de cmaras mltiples, etctera. Ultrafiltracin: La ultrafiltracin se basa en el diseo de membranas o fibras con una estructura de poros pequeos (50 a 500 mm), por lo que molculas pequeas podrn atravesar, mientras que las grandes sern retenidas, bajo la presin de un gradiente de presin

3.

Indique tres ejemplos en los cules menciones sustrato, microorganismo y tipo de enzima que se producir.
Enzima Celulasas Proteasas Pectinasas microorganismo Trichoderma vidide Aspergillus niger Espergillus soyae sustrato Salvado de trigo Salvado de trigo Salvado de trigo

4. Que tipo de fermentacin se emplea en la produccin industrial de enzimas. Mediante la fermentacin microbiana se ha logrado la elaboracin de diferentes productos como lo son: alimentos, vitaminas, bebidas alcohlicas, productos farmacuticos, qumicos, combustibles, enzimas, biomasa, protenas, entre otros. Los productos antes mencionados se generan por medio de diferentes tipos de fermentacin. La fermentacin lctica (queso, yogurt), fermentacin alcohlica (vino, cerveza, alcohol, cigarrillos, chocolate, pan y otros) y la fermentacin actica (vinagre).
5.

Menciones las principales caractersticas del biorreactor empleado en la produccin de enzimas.

6. Haga un diagrama de bloques sobre la produccin de enzimas

7. Mencione 4 enzimas y su aplicacin industrial.

Nombre comercial de la enzima Aquazym Ultra Carezyme Cellusoft Clear-Lens LIPO

Tipo de enzima

Principal aplicacin

Alpha-amilasa Celulasa Celulasa Lipase

Industria textil Industria detergentes Industria textil Limpieza personal

Produccin de Vitaminas 1. Qu tipo de metabolitos son las vitaminas? Metabolitos primarios. 2. Indique que operaciones de recuperacin empleara en la produccin de vitaminas. a. Filtracin. b. Centrifugacin. c. Cromatografa d. Decantacin 3. Indique tres ejemplos en los cules menciones sustrato, microorganismo y tipo de vitamina que se producir. Ejemplo 1 Sustrato: Extracto de levadura 0.2%, fosfato de amonio 0.5 %, sulfato de magnesio 0.1%, sulfato de manganeso 0.02%, Cobalto, 5,6-dimetil benzimidazol y melaza de remolacha (betana) 10% Microorganismo: Pseudomonas denitrificans

Vitamina B12 Ejemplo 2 Sustrato: Glucosa, lquido de maceracin de maz al 2,25%, Peptona al 3,5%, aceite de soja al 4,5%, Microorganismo: Eremothecium ashbyii Vitamina B2 Ejemplo 3 Sustrato de inculos: Agar M-200. Sustrato para fermentador: Sacarosa 1.5 %, aceite de maz 2 %, extracto de malta 0.5%, extracto de levadura 0.5 %, fosfato diamnico 0.025 % y glicina. 4. Que tipo de fermentacin se emplea en la produccin industrial de vitaminas. Para la produccin de Vitamina B12 por Pseudomonas denitrificans se usa fermentacin aerbica. Produccin de Riboflavina por Eremothecium ashbyii. Se usa fermentacin anaerbica. Produccin de Riboflavina por Ashbya gossypii se usa fermentacin aerbica. 5. Menciones las principales caractersticas del biorreactor empleado en la produccin de vitaminas. Biorreactor de tanque agitado Biorreactor discontinuo Biorreactor multipropsitos 6. Haga un diagrama de bloques sobre la produccin de vitaminas. Produccin de Riboflavina por Ashbya gossypii Preparacin de inculos Ashbya gossypii mantenido en cuas de agar M-200. Incubacin 30C en un agitador orbital a 200 r.p.m por 24 horas

Preparacin de solucin para fermentacin Sacarosa 1.5 %, aceite de maz 2 %, extracto de malta 0.5%, extracto de levadura 0.5 %, fosfato diamnico 0.025 % y glicina. A 6.5 pH, el cual se esteriliza a 121C por 20 minutos.

Fermentacin 7 das (30 C). Aerbica, sin agitacin

Fitrado

Secado En estufa a 30 C

Decantado Butanol en embudo de decantacin

Evaporacion de disolventes Rotavapor bajo vaco a 80C.

Purificacin (Cromatografa) Columna seca de silica gel, y una mezcla de solventes formada por butanol/etanol/agua en proporcin 7:2:1.

Secado y cristalizado al vaco. Evaporador al vaco

Riboflavina (Vitamina B2) 7. Indique los parmetros para la produccin de vitaminas. Temperatura. (tanto en proceso fermentativo, como en extraccin y purificacin) Cantidad de fuentes carbonadas (alimento para el microorganismo). Presin. Presencia o ausencia de oxigeno (fermentacin aerbica o anaerbico) pH. En algunos agitacin.

Produccin de Biogs 1. Qu es digestin anaerbica. Beneficios La digestin anaerbica es el proceso en el cual microorganismos descomponen material biodegradable en ausencia de oxgeno. Este proceso genera diversos gases, entre los cuales el dixido de carbono y el metano son los ms abundantes (dependiendo del material degradado). En biodigestores se aprovecha esta liberacin de gases para luego ser usados como combustible. La intensidad y duracin del proceso anaerbico varan dependiendo del diversos factores, entre Hay varias ventajas de la digestin anaerobia como una tecnologa de tratamiento de residuos y produccin de biogs: Es un proceso natural para el tratamiento de residuos orgnicos. Requiere menos espacio que el vertedero o compostaje. Reduce el volumen de residuos que deben eliminarse. Puede reducir el olor del residuo en 80%. Es una fuente de energa renovable. Produce un combustible de alta calidad y ecolgicamente correcto (combustin de metano produce slo agua y dixido de carbono, no genera gases txicos). Maximiza los beneficios del reciclaje / reutilizacin de la materia orgnica. Produce como residuo abono, rico en nutrientes y libre de microorganismos patgenos. Reduce significativamente la cantidad de emisin de dixido de carbono y metano, gases que causan el efecto invernadero. El dixido de carbono producido en la digestin anaerbica de carbono es de ciclo corto, es decir, el carbono de la materia orgnica ha sido recientemente eliminado de la atmsfera, por lo que la energa producida en este proceso no se considera como una contribucin al cambio climtico. En la mayora de los casos es una buena inversin econmica ya que reduce el gasto energtico. 2. Cul es el impacto de la produccin de biogs. El aprovechamiento de los residuos ganaderos para la produccin de energa tiene tres ventajas bsicas: recuperacin energtica inmediata y como consecuencia recuperacin econmica, depuracin ambiental y ecolgica, y como subproductos fertilizantes de gran calidad. Sin lugar a duda las energas renovables constituiran la mayor parte de la energa del futuro en el planeta y en nuestro pas existen condiciones naturales propicias para el aprovechamiento de algunas de esas fuentes que pueden dar su contribucin no solo a la solucin de parte de nuestra demanda energtica sino a la proteccin del medio ambiente. El biogs, que es producido a partir de la biofermetacin anaerobia de la materia orgnica, se ha convertido en los ltimos aos en una de las alternativas ms atractivas La produccin de biogs presenta un impacto social, puesto que las familias y/o comunidades que lo emplean o que lo elaboran obtienen diferentes beneficios, entre ellos el econmico; pues al producir biogs pueden ahorrar en energa trmica (gas de cocina).

3. Cules son los microorganismos que participan en la produccin de biogs. Etapa de solubilizacin: En esta etapa la materia orgnica es hidrolizada por la accin de enzimas producidas por bacterias hidrolticas, facultativas, transformndose en compuestos simples y solubles tales como: aminocidos, glicridos, ppticos y azucares. Etapa de acido gnesis: En esta etapa los compuestos simples solubles de la primera etapa sufren un proceso de fermentacin por cido- bacterias que los convierten en cidos simples de cadena corta. Estas bacterias formadoras de cidos, llamadas acidognicas son tambin facultativas, es decir viven tanto en presencia como ausencia de oxgeno. Etapa de metanognesis: En esta etapa los cidos orgnicos simples producidos en la etapa anterior, devienen en substratos para la descomposicin, estabilizacin y produccin de metano mediante la produccin de bacterias metanognicas, estrictamente anaerbicas, las cuales producen CH4 por dos vas: fermentacin de cido actico y reduccin de CO2 por hidrgeno naciente. La accin de las metanobacterias en la tercera etapa es el factor clave para el desarrollo de la fermentacin anaerbica de las bacterias metanognicas, pues estos microorganismos son muy sensibles a los cambios bruscos de temperatura, viven solo en un rango muy estrecho de pH (6.6- 8.0). Adems son sensibles a la toxicidad de ciertos materiales reducindose o hasta paralizndose la digestin.

4. Cul es la composicin qumica del biogs. El biogs lo constituye una mezcla de gases y su composicin depende del tipo de residuo orgnico utilizado para su produccin y de las condiciones en que se procesa La mezcla debe purificarse, si va a ser utilizada como combustible en motores de explosin. Se eliminan: el gas carbnico haciendo burbujear el biogs a travs de agua, el cido sulfhdrico hacindolo burbujear a travs de una solucin de soda custica en agua que contiene sulfato de cobre disuelto o pasndolo por una trampa de limadura de hierro (esponjilla de alambre), o con la introduccin de pequeas cantidades de aire (3% a 5% del volumen del depsito para el biogs) reduciendo as hasta en un 95% el cido sulfhdrico producido. La humedad se elimina circulando el biogs entre cloruro de calcio o slice gel.

5. Qu es un biodigestor y qu parmetros debe tomarse en cuenta para la produccin industrial de biogs. El biodigestor o digestor de desechos orgnicos es, en su forma ms simple, un contenedor cerrado, hermtico e impermeable (llamado reactor), dentro del cual se deposita el material orgnico a fermentar (excrementos de animales y humanos, desechos vegetales determinada dilucin de agua para que se descomponga, produciendo gas metano y fertilizantes orgnicos ricos en nitrgeno, fsforo y potasio.

Se deben controlar ciertas condiciones pH, presin y temperatura a fin de que se pueda obtener un ptimo rendimiento. Aunque el rango de pH ptimo, para alcanzar la mayor eficiencia en la fermentacin anaerbica de la materia orgnica, puede variar, el proceso de digestin bacteriana produce biogs a valores de pH entre 6.7 y 7.5, un medio prcticamente neutro. El pH se mantiene en ese rango, solo si, el biodigestor est operando correctamente. Si el pH se torna muy cido, la accin de las bacterias metanognicas se inhibe, aumentando la proporcin de gas carbnico en el biogs. Las causas por las cuales se puede acidificar la fase lquida contenida dentro del biodigestor son: Un cambio excesivo de la carga. El permanecer por largo tiempo sin recibir carga. La presencia de productos txicos en la carga. Un cambio amplio y repentino de la temperatura interna. En algunos casos la alta acidez puede corregirse adicionndole agua con cal a la fase lquida 6. Haga un diagrama de bloques sobre la produccin de biogs.

7.

Principales usos del biogs

En el siguiente cuadro se han listado las principales aplicaciones en artefactos que utilizan Biogs juntamente a su consumo medio y su eficiencia. ARTEFACTO CONSUMO RENDIMIENTO (%) Quemador de cocina 300 - 600 l/h 50 60 Lmpara a mantilla (60W) 120 - 170 l/h 30 50 Heladera de 100 L -30 - 75 l/h 20 30 Motor a gas 0,5 m 3 /Kwh o Hph 25 30 Quemador de 10 Kw. 2 m 3 /h 80 90 Infrarrojo de 200 W 30 l/h 95 99 Co generador 1 kW elect. 0,5 m/ hasta 90 kwh 2kW trmica

Las cocinas y calentadores son fcilmente modificables, agrandando el paso del gas de los quemadores. La amplia disponibilidad de este tipo de equipos hace promisoria e interesante su utilizacin a gran escala. Las lmparas a gas tienen una muy baja eficiencia y el ambiente donde se las utilice debe estar adecuadamente ventilado para disipar el calor que generan. Las heladeras domsticas constituyen un interesante campo de aplicacin directo del Biogs debido a que tienen un consumo parejo y distribuido a lo largo de las 24 horas del da lo cual minimiza la necesidad de almacenaje del gas. Los quemadores infrarrojos comnmente utilizados en la calefaccin de ambientes (especialmente en criadores y parideras) presentan como ventaja su alta eficiencia lo cual minimiza el consumo de gas para un determinado requerimiento trmico. El Biogs puede ser utilizado en motores de combustin interna tanto a gasolina como diesel. El gas obtenido por fermentacin tiene un octanaje que oscila entre 100 y 110 lo cual lo hace muy adecuado para su uso en motores de alta relacin volumtrica de compresin, por otro lado una desventaja es su baja velocidad de encendido. A los motores Diesel se les agrega un mezclador de gases con un sistema de control manteniendo el sistema de inyeccin convencional. De esta manera estos motores pueden funcionar con distintas proporciones de Biogs diesel y pueden convertirse fcil y rpidamente de un combustible a otro lo cual los hace muy confiables. El gasoil no puede ser reemplazado en los motores funcionando a campo del 85% al 90%, debido a que la autonoma conseguida menor comparada con la original. La proporcin de H2S en el Biogs causa deterioros en las vlvulas de admisin y de escape de determinados motores obligando a un cambio ms frecuente de los aceites lubricantes. El grado de deterioro en los motores vara considerablemente y los resultados obtenidos experimentalmente suelen ser contradictorios. Los motores a Biogs tienen amplio espectro de aplicacin siendo los ms usuales el bombeo de agua, el picado de raciones y el funcionamiento de ordeadoras en el rea rural. El otro uso muy generalizado es su empleo para activar generadores de electricidad. Un prrafo aparte merecen los sistemas de cogeneracin. Dichos sistemas buscan la mayor eficiencia en el aprovechamiento de la energa contenida en el Biogs. En estos casos la potencia mecnica provista por el eje del motor es aprovechada para generar electricidad a travs d un generador. Simultneamente y por medio de una serie de intercambiadores de calor ubicados en los sistemas de refrigeracin (agua y aceite) del motor y en la salida de los gases de escape, se recupera la energa trmica liberada en la combustin interna. De este modo se logra un mejor aprovechamiento de la energa. La difusin de estos sistemas estar condicionada por la rentabilidad final. Sin embargo representa la utilizacin ms racional del Biogs ya que se obtiene una forma de energa extremadamente dctil como la electricidad al mismo tiempo que una fuente de calor muy necesaria para la calefaccin de digestores en zonas fras. El uso vehicular del Biogs es posible y en la realidad se ha empleado desde hace bastante tiempo. Sin embargo su difusin est limitada por una serie de problemas: A fin de permitir una autonoma razonable el gas por su volumen debe ser almacenado en contenedores cilndricos de alta presin (200 a 300 bar.); este tipo de almacenamiento implica que el mismo deba ser purificado antes de su compresin. La conversin de los motores es cara (instalacin similar a la del GNC) y el peso de los cilindros disminuye la capacidad de carga de los vehculos. Por ltimo la falta de una adecuada red de abastecimiento y la energa involucrada en la compresin a gran escala de este tipo de uso.

Tratamiento de aguas residuales 1. Qu son las aguas residuales y cmo se clasifican Son aquellas que resultan del uso domstico o industrial del agua. Son residuales pues, habiendo sido usada el agua, constituyen un residuo, algo que no sirve para el usuario directo. Clasificacin: Aguas Residuales Urbanas: Son los vertidos que se generan en los ncleos de poblacin urbana como consecuencia de las actividades propias de stos. Aguas de lavado domstico, Aguas de drenaje de calles y avenidas, Aguas de lluvia. Aguas Residuales Industriales: Son aquellas que proceden de cualquier actividad o negocio en cuyo proceso de produccin, transformacin o manipulacin se utilice el agua. Estas son ms contaminadas que las aguas residuales urbanas 2. Cules son los microorganismos que participan en los tratamientos de aguas residuales Beggiatoa, thiothrix, sphaerotilus, nocardia, vorticella 3. Beneficios de los tratamientos aerobio y anaerobio en el tratamiento de aguas residuales Aerobio: Tratamientos de bajo coste Anaerobio: Los productos finales de la digestin anaerobia son el biogs Es un proceso de transformacin y no de destruccin de la materia orgnica La digestin anaerobia puede ser utilizada para la biodegradacin o biotransformacin de contaminantes txicos 4. Describa en qu consisten los tratamientos: primario, secundario y terciario. Tratamiento primario: para reducir aceites, grasas, arenas y slidos (maquinaria como: cmaras de rejas y colector de arena). Tratamiento secundario: designado (tratamiento biolgico de slidos flotantes y sedimentados) como comida, detergentes. Tratamiento terciario: (pasos adicionales como lagunas, micro filtracin o desinfeccin) para aumentar la calidad del afluente al estndar requerido.

5. Mencione las principales caractersticas de los biorreactores empleados Los Biorreactores de Membranas: Alto rendimiento y fiabilidad de depuracin obteniendo un agua con calidad de reutilizacin. El birreactor de membranas es insensible a los problemas de sedimentacin.

Efluente de excelente calidad Sustitucin del clarificador secundario 6. Haga un diagrama de bloque indicando cada una de las operaciones que se emplean para tratar aguas residuales.

7. Si Ud. es ingeniero de produccin de una industria quesera que tratamientos aplicara antes de eliminar los residuos.

8. Cul es la importancia del DBO y DQO. DBO: Porque funciona como un indicador de la eficacia de las plantas de tratamiento de aguas residuales. Ellos no solo consumen grandes cantidades de oxgeno sino que tambin dan lugar a complejos procesos en la recuperacin del agua. Para prevenir una amenaza sobre la salud humana sobre las especies, es esencial determinar la calidad de una fuente de agua antes de que sta sea enviada para su consumo. DQO: Importantes para oxidar todos los compuestos presentes en el agua, tanto orgnicos como inorgnicos. La contaminacin orgnica es evaluada a travs de la DQO Biotecnologa Ambiental
1. Qu es biorremediacin. De ejemplos de su aplicacin. Se define como biorremediacin a cualquier proceso que utilice microorganismos, hongos, plantas o las enzimas derivadas de ellos para retornar un medio ambiente alterado por contaminantes a su condicin natural. La biorremediacin puede ser empleada para atacar contaminantes especficos del suelo, por ejemplo en la degradacin bacteriana de compuestos organoclorados o de hidrocarburos. Un ejemplo de un tratamiento ms generalizado es el de la limpieza de derrames de petrleo por medio de la adicin de fertilizantes con nitratos o sulfatos para estimular la reproduccin de bacterias nativas o exgenas (introducidas) y de esta forma facilitar la descomposicin del petrleo crudo.

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Qu es un biofilm. De ejemplos de su aplicacin. Los biofilm se definen como comunidades de microorganismos que crecen embebidos en una matriz de ex polisacridos y adheridos a una superficie inerte o un tejido vivo Por qu se prefieren las enzimas en los procesos de biorremediacin Como biorremediacin a cualquier proceso que utilice microorganismos, hongos, plantas o las enzimas derivadas de ellos para retornar un medio ambiente alterado por contaminantes a su condicin natural. Cules son los microorganismos que emplea la biotecnologa ambiental y cul es su funcin. Una gran variedad de microorganismos que incluyen bacterias, mohos, levaduras, algas y virus, son utilizados en Biotecnologa debido a sus caractersticas, ya que con ellos se obtienen productos con propiedades de inters para el humano, con fines especficos. Qu tcnicas existen en la degradacin de residuos. A. Biodegradacin aerobia: Compostaje Vermicompostaje B. Biodegradacin anaerobia Biodigestor Cul es el impacto de la biotecnologa ambiental a nivel Regional y Nacional. La biotecnologa se aplica actualmente en sectores tan diversos como la Salud Animal y humana, Agroalimentacin, Suministros industriales, Produccin de energa y Proteccin del medio ambiente. El desarrollo a la biotecnologa aplicada a la sanidad humana ha sido el ms rpido, tanto en l campo de la teraputica, como en le diagnstico de enfermedades. Desde que en 1978 se demostr que mediante la modificacin gentica de E. coli se puede obtener grandes cantidades de insulina humana, se han probado ms de cincuenta frmacos o vacunas de origen recombinante y hay en fase avanzada de estudio o pendiente de su aprobacin, ms de un centenar de productos. Cree Ud. Que los microorganismos genticamente modificados son la solucin a la contaminacin. Los detractores de los OGM, sin embargo, argumentan acerca de su peligro potencial para el medio ambiente, para la salud humana y para la estabilidad de otros seres vivos. De la misma forma, sealan que estas tecnologas estn diseadas de tal forma de profundizar la influencia y el control de las empresas del sector biotecnolgico sobre la produccin mundial de alimentos