LAS BASES MOLECULARES DE LA INFLAMACIN

La respuesta inflamatoria aguda Es la respuesta coordinada del organismo al dao o lesin tisular producida por agentes fsicos, qumicos o biolgicos

Traumatismo Operacin quirrgica Quemaduras Irritacin por txicos Invasin por parte de un agente infeccioso

Inflamacin: Rubor, Calor, dolor y tumor (edema)

La importancia de la reaccin inflamatoria en Patologa se justifica porque en casi dos tercios de la totalidad de las enfermedades intervienen los mecanismos patognicos propios de la respuesta inflamatoria

Inflamacin (I):
Se trata de un estado morboso complejo con fenmenos anormales y complejos frente a una agresin. La agresin puede ser qumica, fsica o biolgica. No es especfica. Hay muy poca diferencia entre especies: incluso entre vertebrados e invertebrados. No hay mucha diferencia entre tejidos ni entre las causas. Ocurre fundamentalmente en tejidos vascularizados. Celsius en el siglo I a. C. Define rubor, tumor, calor y dolor a la inflamacin, a los que Galeno aadi la functio laesa (el trastorno funcional) El fenmeno inflamatorio se ha conservado a lo largo de la evolucin porque es importante y til Una vez se resuelve, desaparece. Solo se debe actuar cuando no consigue por s solo resolver el problema, cuando se perpeta en el tiempo o es una reaccin exagerada.

Inflamacin (II):
Gran parte de los fenmenos observados es debida a mediadores liberados por las clulas del entorno. El fenmeno comienza en la pared vascular de las clulas inflamatorias Atravs de un cambio en la concentracin intracelular de calcio, la calmodulina activa enzimas (hidrolasas, fosfolipasas, oxigenasas) que liberan y oxidan el cido araquidnico por dos vas: ciclooxigenasa (PG, PCs, TBX) y lipooxigenasas (Leucotrienos). Hay ciclooxigenasas en todas las clulas madres excepto en los eritrocitos. La lipooxigenasa est ms restringida. Hay otras substancias mediadoras de la inflamacin: bradiquininas, citoquinas, complemento, histamina...

Tejidos implicados en la reaccin inflamatoria: 1. La sangre que aporta clulas que acuden y participan en la respuesta inflamatoria, as como el plasma que aporta las protenas del sistema de activacin del complemento y los anticuerpos 2. El endotelio vascular que aporta molculas que regulan la reactividad vascular y el intercambio de plasma. Asimismo expresa en su superficie las molculas de adhesin para el reclutamiento de clulas al intersticio celular. 3. Las clulas del tejido conectivo: como fibroblastos y macrfagos.

Componentes celulares principales en la inflamacin

Fagocitos mononucleares: Monocitos Macrfagos Granulocitos: Neutrfilos (PMN) Basfilos Mastocitos Plaquetas Clulas linfoides: Linfocitos B Linfocitos T

HEMATOPOYESIS HEMATOPOYESIS

Mediadores moleculares de la inflamacin

La inflamacin est bajo el control de los sistemas enzimticos plasmticos y de los mediadores que liberan las clulas que intervienen en la respuesta inflamatoria

1) Derivados de sistemas enzimticos plasmticos 2) Mediadores liberados por clulas: - Accin rpida o inmediata (pre-sintetizados) - Accin lenta o tarda

Los sistemas enzimticos plasmticos de activacin en la reaccin inflamatoria Son un conjunto de protenas, coordinadas en sus funciones, que se encuentran en el plasma y funcionan de acuerdo con unas propiedades funcionales comunes: - activacin rpida - activacin secuencial definida - amplificacin

1.- El sistema de la coagulacin 2.- El sistema fibrinoltico (plasmina) 3.- El sistema de las quininas 4.- El sistema del complemento

El sistema de la coagulacin

La coagulacin es la modificacin del estado fsico de la sangre, pasando de un estado lquido a otro de gel. Esta transformacin se debe a que el fibringeno se transforma en una red de fibrina, que refuerza el trombo plaquetario, para interrumpir la hemorragia. Necesita una serie de reacciones en cadena para transformar varias protenas plasmticas de un estado inactivo (zimgeno) a otro activo (proteasa) Se denominan "Factores de coagulacin", de los cuales hay 12 que se denominan con nmeros romanos, ms otros factores que son los factores contacto o tisulares.

El sistema de la coagulacin: Va extrnseca e intrnseca

F. Hageman

El sistema de la coagulacin: Va extrnseca e intrnseca

El sistema de la coagulacin: Fibringeno y fibrina

El sistema de las quininas

Se encarga de: - Aumentar la luz vascular para aumentar el aporte sanguneo - Contraer el msculo liso para evitar la difusin del agente proinflamatorio. El sistema de las cininas genera los mediadores bradicinina y lisilbradicinina (kalidina). - La bradicinina es un nonapptido que se produce tras la activacin del factor de Hageman (XII) del sistema de coagulacin sangunea - La kalidina es generada tras la activacin del sistema de la plasmina o por la accin de las enzimas que liberan los tejidos daados.

EL SISTEMA DEL COMPLEMENTO: EL SISTEMA DEL COMPLEMENTO: CARACTERISTICAS GENERALES CARACTERISTICAS GENERALES
Consta aproximadamente de 20 protenas solubles Existen varios grupos de componentes tempranos, que pertenecen a las vas clsica,

alternativa y de las lectinas

La va alternativa y la va de las lectinas pueden activarse directamente sobre la superficie de muchos microorganismos Los componentes tempranos de ambas vas actan localmente activando C3 La ltima consecuencia de la activacin del complemento es el ensamblaje de los denominados componentes tardos del complemento Forman grandes complejos proteicos, denominados complejos de ataque de membrana. Resultado de la activacin: lisis directa del patgeno o su opsonizacin. Si el complemento no logra eliminar el patgeno: - Su activacin sostenida genera anafilotoxinas (C3a y C5a). - Se induce inflamacin. - Aumenta el flujo de clulas y molculas a la zona de infeccin

Fases principales de la activacin del complemento Fases principales de la activacin del complemento por la va clsica y alternativa por la va clsica y alternativa
Unin del anticuerpo Polisacrido microbiano

Anafilotoxinas

C3a C5a

Fases principales de la activacin del complemento Fases principales de la activacin del complemento por la va clsica y alternativa por la va clsica y alternativa
Va Clsica Clq Clr Cls C4, C2 C3 C5 Va MB Lectina MBL MASP-1 MASP-2 D P B Va Alternativa C3b

C6 C7 C8 C9

Complejo de ataque a la membrana

Lisis celular

Ensamblaje de los componentes tardos del complemento. Ensamblaje de los componentes tardos del complemento. Formacin del complejo de ataque de membrana Formacin del complejo de ataque de membrana

C6

C7

C8

C6 C7 C6 C7 C8 C9

SISTEMA DEL COMPLEMENTO: FORMACION DEL CANAL TRANSMEMBRANA SISTEMA DEL COMPLEMENTO: FORMACION DEL CANAL TRANSMEMBRANA

Actividades biolgicas mediadas o inducidas por componentes del complemento

Mediadores de accin rpida preformados en clulas auxiliares Los mastocitos, los basfilos y las plaquetas, son importantes fuentes de los mediadores vasoactivos histamina y 5-hidroxitriptamna (serotonina), que producen vasodilatacin y aumentan la permeabilidad vascular.

Prostaglandinas y leucotrienos

Prostaglandina sintasa (PGS / COX)

COOH

arachidonic acid
2 O2 O O

Cyclooxygenase
COOH

PGG2
2e O O

OOH

Peroxidase
COOH

PGH2

OH

PGD2, PGE2, PGF2, PGI2 Prostaciclina

Prostaglandina H2 sintasa

The membrane-binding domain is 4 short amphipathic -helices that insert into the membrane bilayer, facing the ER lumen. Arachidonate, derived from membrane lipids, approaches the heme via a hydrophobic channel extending from the membrane-binding domain.

La produccin de prostaglandinas es inhibida por agentes antiinflamatorios esteroides y no esteroides

Va de la Lipooxigenasa. Sntesis de leucotrienos

LTB4

CARACTERISTICAS GENERALES DE LAS CITOQUINAS

DEFINICION: DEFINICION: Protenas de bajo peso molecular, aamenudo glicosiladas, sintetizadas por Protenas de bajo peso molecular, menudo glicosiladas, sintetizadas por clulas del sistema inmunitario oorelacionadas, en respuesta aapatgenos, clulas del sistema inmunitario relacionadas, en respuesta patgenos, sus productos uuotras seales asociadas. sus productos otras seales asociadas. Controlan: Controlan: La respuesta inflamatoria local yysistmica La respuesta inflamatoria local sistmica La reparacin tisular La reparacin tisular La defensa frente aala infeccin viral La defensa frente la infeccin viral Las respuestas inmunes innatas yyespecficas Las respuestas inmunes innatas especficas Proliferacin yyregulacin de linfocitos T yyB Proliferacin regulacin de linfocitos T B

CARACTERISTICAS GENERALES DE LAS CITOQUINAS

Suelen ser monomricas Suelen ser monomricas Tienen vida media corta: Tienen vida media corta: Sntesis yyliberacin de forma breve yyautolimitada Sntesis liberacin de forma breve autolimitada No se almacenan como molculas preformadas No se almacenan como molculas preformadas Sntesis iniciada mediante transcripcin gnica de novo Sntesis iniciada mediante transcripcin gnica de novo En algunos casos su activacin requiere modificacin post-traduccional En algunos casos su activacin requiere modificacin post-traduccional La misma citokina puede sintetizarse por tipos celulares diferentes La misma citokina puede sintetizarse por tipos celulares diferentes Slo estimulan aaclulas con receptores especficos en la membrana Slo estimulan clulas con receptores especficos en la membrana Accin extremadamente potente: Kd ~ 1010-1012 M Accin extremadamente potente: Kd ~ 1010-1012 M Pueden modular la sntesis de otras citokinas: Mensajeros secundarios Pueden modular la sntesis de otras citokinas: Mensajeros secundarios

La mayora de citoquinas (grupo 1) se caracterizan por una estructura caracterstica con 4 hlices

TIPOS DE ACCIONES DE LAS CITOQUINAS TIPOS DE ACCIONES DE LAS CITOQUINAS

Estmulo inductor

Accin Autocrina

Clula productora
Citokina

Seal

Accin Paracrina

Clula diana

Efectos biolgicos

Accin Endocrina

MODOS DE ACCION DE LAS CITOQUINAS MODOS DE ACCION DE LAS CITOQUINAS

Clula B

Pleiotropa IL-4

Activacin Proliferacin Diferenciacin Proliferacin

Timocito

Mastocito

Proliferacin

Redundancia IL-2 IL-4 IL-5 Sinergismo

IL-5 IL-4 IFN-

Proliferacin
Clula B

Cambio de Isotipo
Clula B

Antagonismo

Bloqueo del Cambio de Isotipo

NOMENCLATURA DE LAS CITOKINAS NOMENCLATURA DE LAS CITOKINAS

Interleucinas Interleucinas Interferones Interferones IL IL IFN IFN IL-1, IL-2, etc. IL-1, IL-2, etc. IFN, IFN, IFN IFN, IFN, IFN TNF, TNF TNF, TNF EGF, HGF EGF, HGF

Factores de necrosis tumoral Factores de necrosis tumoral Factores de crecimiento Factores de crecimiento

Factores estimuladores de colonias CSF Factores estimuladores de colonias CSF Quimiocinas RANTES Quimiocinas RANTES

TNF TNF GF GF

M-CSF, G-CSF, GM-CSF M-CSF, G-CSF, GM-CSF MCP-1, MIP-l MCP-1, MIP-l

CITOQUINAS PROINFLAMATORIAS
Interleuquina-1 (IL-1)
Aumenta flujo sanguneo local, fiebre, produccin de otros mediadores solubles, aumenta expresin molculas de adhesin.

Factor de Necrosis Tumoral alfa (TNF-)

Aumenta expresin de molculas de adhesin, expresin de otros mediadores solubles (quemokinas, IL-1), fiebre, alteraciones metablicas de caquexia, shock sptico.

Interleuquina-6 (IL-6)
Promueve diferenciacin de monocitos, aumenta nmero de plaquetas circulantes y protenas reactantes de fase aguda.

CITOQUINAS PROINFLAMATORIAS
Interleuquina-4 (IL-4)
Relacionada a inflamacin alrgica Propiedades antiinflamatorias

Interleuquina-8 (IL-8)
Quimiotctico de neutrfilos

Interferon Gamma (IFN-)

Funcin en inmunidad celular contra microbios intracelulares

Interleuquina 12 (IL-12)

CTOQUINAS EN ARTRITIS REUMATOIDEA

Activacin de clulas T, amplificacin cascada de citoquinas inflamatorias TNF es la citoquina principal en la patologa de la AR. Inhibicin del TNF produce beneficio clnico, estructural y funcional en los pacientes con AR

ENDOTELIO E INFLAMACIN
El endotelio es mucho ms que una simple barrera fsica que separa la sangre de los tejidos subyacentes La clula endotelial participa en todas las fases de la inflamacin: produce mediadores de la vasodilatacin (xido ntrico y prostaciclina), expresa molculas de adhesin que facilitan la adherencia y transmigracin de los leucocitos. En reposo, la clula endotelial es muy adherente a la lmina basal subyacente del tejido conectivo como colgeno, laminina y proteoglicanos; esta adherencia es dependiente de las integrinas Como consecuencia de una lesin prxima se liberan citoquinas proinflamatorias (IL-1 y TNF ) y aminas vasoactivas que incrementan el flujo sanguneo tisular y modifican la permeabilidad endotelial. Las citoquinas modifican las propiedades adhesivas de la clula endotelial, lo que permite la migracin de los leucocitos hacia el sitio de la lesin.

CLULAS ENDOTELIALES
Interactan con neutrfilos en la migracin (adherencia). Sintetizan y liberan numerosos mediadores inflamatorios.

Molculas de adhesin Las molculas de adhesin son protenas de superficie celular que participan en la interaccin entre clulas, usualmente leucocitos (unos con otros), unin a clulas endoteliales o a matriz extracelular. Existen dos tipos de interacciones. Homotpica: ocurre entre molculas de superficie de dos clulas idnticas (caderinas) como sucede en el reclutamiento de las plaquetas en la formacin del cogulo; Heterotpica: ocurre entre dos clulas diferentes o durante la adhesin celular a componentes de la matriz extracelular (integrinas) como acontece en la interaccin entre leucocitos y la clula endotelial Los principales grupos de molculas son: las selectinas, la familia de las integrinas, la superfamilia de las inmunoglobulinas y las caderinas

Selectinas Tres tipos de selectinas diferentes: - (leucocito), - (endotelio) y L E P (plaquetas) selectinas, las cuales participan en los sistemas vascular y hematopoytico. La - selectina se une a su ligando glicoprotena P P selectina (PSGL 1 la - selectina interacta con el GLYCAM 1y el - ); L CD34 y la - selectina posiblemente con el ESL 1 E - . Las selectinas median la primera etapa de la adhesin de los leucocitos facilitando una unin tenue al endotelio. Esta adherencia leve y transitoria permite que las clulas rueden a lo largo de la pared vascular endotelial. En consecuencia, los leucocitos circulantes se unen a las selectinas expresadas en las vnulas del endotelio activado enlenteciendo su movimiento, rodando sobre la clula endotelial

Integrinas
Molculas de ms amplia distribucin; se expresan en casi todas las clulas nucleadas (linfocitos T no activados y monocitos) Son glicoprotenas de membrana con dos subunidades alfa y beta, asociadas no covalentemente; median interacciones fuertes entre clulas y la matriz extracelular. Segn la cadena B se subdividen en 8 familias (B1B8). Las integrinas B1 son molculas de activacin tarda, expresadas en la clula T, dos a cuatro semanas despus de su estimulacin. Poseen receptores que se unen a componentes de la matriz extracelular (fibronectina, laminina y colgeno). Es el ligando del receptor VCAM-1, molcula de expresin endotelial. Las B2 se expresan exclusivamente en los leucocitos y son crticas en la migracin de los leucocitos a los sitios de inflamacin; son importantes en la adhesin de leucocitos a otras clulas y al endotelio vascular. La B2 se conoce tambin como CD11/CD18

Superfamilia de las inmunoglobulinas

Estructura similar a la de las inmunoglobulinas; comprende molculas importantes en la respuesta inmune e inflamatoria; otras son las molculas del complejo mayor de histocompatibilidad. Son cruciales en la adherencia celular entre la clula endotelial y los leucocitos: ICAM-1, ICAM-2, ICAM-3, VCAM-1 y el PECAM-1. Los niveles de expresin de estas molculas se pueden aumentar y regular por varias citoquinas. ICAM-1 e ICAM-2 facilitan el paso de leucocitos del espacio vascular a travs de los tejidos mediante su unin con la integrina B2 (CD11a/CD18). Su expresin endotelial comienza a las 4 horas y es mxima a las 24 horas. ICAM-2 se expresa constitutivamente y su expresin no se incrementa por citoquinas. La molcula VCAM-1 se expresa en las clulas endoteliales activadas por mediadores de la inflamacin y su interaccin con la integrina VLA-4 constituye un segundo mecanismo de adhesin de los linfocitos con el endotelio.

Cadherinas Molculas de adherencia celular dependientes de Ca2+. Adems de mantener la integridad de la capa epitelial, son fundamentales en la organizacin de su arquitectura. Median interacciones celulares homotpicas por unin a sus homlogas en clulas adyacentes, y a miembros de otras familias Entre las identificadas inicialmente (N, P, R, B y E), las ms conocidas son la cadherina E que se encuentra en las clulas epiteliales. Un defecto de interaccin entre las molculas de adhesin es importante en cncer; la falta de expresin de las caderinas en algunas clulas tumorales facilita su desprendimiento dando origen a metstasis.

La respuesta inflamatoria de fase aguda

Cambios significativos en los niveles plasmticos de ciertas protenas que ocurren en las etapas primeras de la respuesta inflamatoria Consecuencia de la accin de citoquinas pro inflamatorias sobre los hepatocitos IL6, IL1 y TNF las citoquinas ms importantes Cambios en las propiedades fisicoqumicas del plasma (descenso de la viscosidad y aumento de la velocidad de sedimentacin eritrocitaria)

Indicadores analticos de la inflamacin

Aumento velocidad de sedimentacin (>10 mm/h) Protenas (reactantes) de Fase Aguda (protena C rectiva, amiloide srico A, fibringeno) Complemento, factor C5b (9) Citoquinas: IL-6, TNF ICAM-1 srica Activador tisular del plasmingeno (tPA)