Trofobiose

PESQUISA
Srgio Batista Alves
Prof. Adjunto do Depto. de Entomologia, Fitopatologia e Zoologia (ESALQ/USP) Piracicaba SP sebalves@esalq.usp.br

e Microrganismos na Proteo de plantas

Biofertilizantes e entomopatgenos na citricultura orgnica

Marcos Barros de Medeiros

Prof. Assistente do Depto. de Agropecuria UFPB - Campus de Bananeiras - PB barros@cft.ufpb.br

Marco Antnio Tamai

Doutorando em Entomologia (ESALQ/USP) maatamai@esalq.usp.br

Rogrio Biaggioni Lopes

Doutorando em Entomologia (ESALQ/USP) rblopes@esalq.usp.br Fotos cedidas pelos autores

s pragas e doenas que ocorrem em citros so responsveis por elevados gastos com produtos fitossanitrios. Somente o controle dos caros que ocorrem em quase todas as regies citrcolas do Brasil tem gerado gastos da ordem de 90 a 100 milhes de dlares/ano, segundo informaes procedentes de empresas ligadas comercializao desses agroqumicos. As conseqncias da utilizao de grandes quantidades de defensivos na

qumicos no suco e nos frutos, repercutindo na comercializao desses produtos no Brasil e no exterior. O uso de microrganismos para o controle de pragas dos citros representa um grande avano ecolgico para solucionar esses problemas, tornando o agroecossistema mais sustentvel, econmica e biologicamente. Os microrganismos podem agir diretamente, causando a morte da praga pelo desenvolvimento de doena (entomopatgenos), ou indiretamente, pelo equilbrio nutricional e induo de resistn-

Figura 1. Produo do biofertilizante lquido no sistema de compostagem lquida contnua (CLC): A) Fazenda Vahali II (So Carlos SP). B) Fazenda So Manoel (Borborema - SP)
Fotos: P.A. DAndra

citricultura podem ser consideradas sob o aspecto das pragas e sob o do ambiente. Com relao s pragas, estas podem desenvolver resistncia aos produtos, exigindo aumento das concentraes e do nmero de aplicaes anuais. Persistindo esse sistema, podese provocar elevado nvel de contaminao do solo, da gua, da planta, do homem e de todos os organismos vivos componentes do agroecossistema ctrico. Como conseqncias inevitveis, os inimigos naturais sero eliminados e novas pragas devero surgir, alm do aumento de casos de intoxicao e o aparecimento de resduos

cia sistmica na planta (biofertilizantes lquidos), neste caso gerando proteo por trofobiose. A TEORIA DA TROFOBIOSE NA PROTEO DE PLANTAS As pesquisas tm mostrado que a maior parte dos insetos e dos caros fitfagos dependem de substncias solveis existentes na seiva das plantas ou no suco celular, tais como aminocidos livres e acares redutores, pois estes no so capazes de desdobrar protenas em aminocidos. Foi a partir da relao entre o estado nutricional da

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planta e sua resistncia s doenas, que Dufrenoy (1936) postulou que toda circunstncia desfavorvel ao crescimento celular tende a provocar um acmulo de compostos solveis no utilizados, como acares e aminocidos, diminuindo a resistncia da planta ao ataque de pragas e doenas. A partir disso, Francis Chaboussou formulou, em 1967, a teoria da trofobiose, ao afirmar que todo processo vital est na dependncia da satisfao das necessidades dos organismos vivos, sejam eles vegetais ou animais, ou seja, a planta, ou mais precisamente o rgo vegetal, ser atacado somente quando seu estado bioqumico, determinado pela natureza e pelo teor de substncias nutritivas solveis, corresponder s exigncias trficas (de alimentao) da praga ou do patgeno em questo (Chaboussou, 1980; 1985). Assim, a explicao para o aumento de pragas ou desequilbrios biolgicos nos agroecossistemas pode estar associada ao estado dominante de protelise nos tecidos das plantas. Alguns adubos minerais solveis, especialmente os nitrogenados, como tambm agrotxicos orgnicos sintticos, quando absorvidos pelas plantas, podem interferir na fisiologia do vegetal, reduzindo a proteossntese e acumulando aminocidos livres e acares redutores, utilizveis pelas pragas e agentes fitopatognicos. Na agricultura orgnica, os processos empregados no controle das pragas e doenas baseiam-se no equilbrio nutricional da planta (trofobiose), pelo melhor equilbrio energtico e metablico do vegetal (Pinheiro & Barreto, 1996). O emprego de produtos que contenham microrganismos e seus metablitos vem sendo amplamente difundido. Alm de funcionarem como indutores de resistncia, atuam como promotores de crescimento (equilbrio nutricional) e como protetores da planta, a exemplo dos entomopatgenos e fermentados microbianos (biofertilizantes lquidos). Este ltimo pode atuar como repelente ou fagodeterrente (inibidores de alimentao) ou afetando o desenvolvimento e reproduo das pragas. Biofertilizantes lquidos e sua aplicao na proteo de plantas Os biofertilizantes so compostos bi-

Figura 2. Adultos do caro-daleprose dos citros infectados por Verticillium lecanii

oativos, resduo final da fermentao de compostos orgnicos, que contm clulas vivas ou latentes de microorganismos (bactrias, leveduras, algas e fungos filamentosos) e por seus metablitos, alm de quelatos organo-minerais. Tambm podem ser definidos como sendo compostos biodinmicos e biologicamente ativos, produzidos em biodigestores por meio de fermentao aerbica e/ou anaerbica da matria orgnica. Esses compostos so ricos em enzimas, antibiticos, vitaminas, toxinas, fenis, steres e cidos, inclusive de ao fitohormonal. No existe uma frmula padro para a produo de biofertilizantes. Receitas variadas vm sendo testadas e utilizadas por pesquisadores para diversos fins. A China e a ndia so os maiores produtores e consumidores dessa biotecnologia, com mais de 150 mil unidades instaladas, abrangendo a produo do biogs ou gs metano. No

Brasil, a frmula mais conhecida o Supermagro, que est sendo utilizado com sucesso em culturas como ma, pssego, uva, tomate, batata e hortalias em geral. Na citricultura, os biofertilizantes so produzidos pelo mtodo de compostagem lquida contnua em piscinas cavadas no solo, revestidas de lona plstica, com volume de at 10 mil litros. No processo so utilizados gua no clorada e inoculante base de esterco de rmen bovino (obtido de abatedouro) e, posteriormente, enriquecido com o composto orgnico Microgeo, um preparado no estril base de turfa, rochas modas com 48% de silicatos de magnsio, clcio, ferro e uma grande diversidade de minerais. O biofertilizante obtido pulverizado sobre as plantas em concentraes entre 1% e 5% (DAndra, 2001), sendo utilizado atualmente em mais de 8 milhes de ps de laranja. Esses produtos esto previstos na agricultura orgnica e regulamentados pelo Ministrio da Agricultura (Instruo Normativa 07/99) e tambm pelas normas dos institutos que fornecem selo verde ou certificado de origem controlada. Existem poucos estudos sobre a composio do biofertilizante. Os metablitos resultantes do processo fermentativo dos microrganismos, como enzimas, coenzimas, cofatores (metaloporfirinas, citocromos, vitaminas etc.), mesmo diludos, ativam e catalisam as oxidaes e reaes biolgicas nas plantas superiores (Pinheiro & Barreto, 1996). Seus efeitos so eminentes, desde que sejam observadas as condies de estresse a que o vegetal possa estar

Figura 3. Acrogonia sp. (cigarrinha transmissora da CVC) infectada por Zoophthora radicans

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submetido, para se obter melhores resultados. Alm da ao nutricional j conhecida do biofertilizante, existem tambm as aes fungisttica e bacteriosttica sobre fitopatgenos (Bettiol et al. 1998). A potncia biolgica do biofertilizante expressa pela grande quantidade de microrganismos ali existentes, responsveis pela liberao de metablitos, entre eles antibiticos e hormnios. Castro et al. (1992) isolaram de um biofertilizante vrias leveduras e bactrias, destacando Bacillus subitilis, um reconhecido produtor de antibiticos. Mais recentemente, Bettiol et al. (1998) verificaram a presena de diferentes espcies de fungos filamentosos, leveduriformes e bactrias, entre elas Bacillus spp. Esses microrganismos, quando aplicados, atuam eficientemente na converso e pontencializao de diversos nutrientes e substncias ativas que servem para incrementar e acelerar os processos microbianos no agroecossistema. Tambm j foi encontrado nos biofertilizantes de uso na citricultura o fungo entomopatognico Beauveria bassiana, importante inimigo natural de pragas (Alves, comunicao pessoal). Os efeitos do biofertilizante no controle de pragas e doenas de plantas

no biofertilizante que adesiva. Essa quando pulverizada sobre os insetos, provocava sua aderncia sobre a superfcie do tecido vegetal, impedindoo de se locomover e alimentar. Os autores destacaram tambm o efeito repelente e deterrente contra pulges e moscas-das-frutas. Santos & Akiba (1996) relatam que o biofertilizante Vairo, aplicado em concentraes acima de 50%, possui efeito inseticida e acaricida. A utilizao do produto puro no ocasionou efeito sobre formigas, abelhas, marimbondos e gafanhotos. Medeiros et al. (2000a) verificaram que o biofertilizante base de contedo de rmen bovino e o composto orgnico Microgeo reduziram a fecundidade, o perodo de oviposio e a longevidade de fmeas do caro-daleprose dos citros, Brevipalpus phoenicis, quando pulverizado em diferentes concentraes. Medeiros et al. (2000b) comprovaram ainda que esse biofertilizante agiu sinergicamente com Bacillus thuringiensis e B. bassiana, reduzindo a viabilidade dos ovos e a sobrevivncia de larvas do bicho-furo dos citros, Ecdytolopha aurantiana, em laboratrio. Apesar de todas essas caractersticas dos biofertilizantes, consideradas

final? Atualmente, sabe-se que a composio biolgica e bioqumica do biofertilizante muito dinmica e varivel, mesmo para fermentaes de larga escala e controladas. O descontrole do processo como um todo pode favorecer o desenvolvimento de microrganismos oportunistas. Como parte da matria-prima orgnica e, em alguns casos, de origem animal (restos de peixes, sangue ou leite) e esse material pode estar contaminado por microrganismos indesejveis, inclusive patognicos ao homem, a fermentao inadequada promove a multiplicao desses e o aparecimento de compostos tambm txicos. De forma contrria, podese imaginar que as condies de fermentao, principalmente relacionadas acidez do meio e matria-prima utilizada, no permitam o desenvolvimento dessa microfauna. Deve-se considerar tambm a inibio por competio e antagonismo entre os microrganismos no benficos e o inoculante proveniente de contedo do rmem bovino, por exemplo. Este ltimo, certamente em quantidade bem maior no sistema, tende a reproduzir a fauna microbiana proveniente do pasto e do trato intestinal do animal. MICRORGANISMOS CAUSADORES DE DOENAS EM PRAGAS Diversos microrganismos podem ocorrer causando doena em insetos e caros, entre eles destacam-se os fungos, os vrus e as bactrias. Os fungos entomopatognicos so os organismos mais estudados e os que tm grande potencial para o controle de pragas. Aproximadamente 80% das doenas em insetos tm como agentes etiolgicos os fungos, pertencentes a cerca de 90 gneros e mais de 700 espcies, sendo que a maioria dos gneros j foram relatados em citros, no Brasil (Alves, 1998; Alves et al., 1999). Fungos do gnero Hirsutella e da Ordem Entomophthorales so os mais comuns infectando populaes de caros pragas da cultura. A espcie mais comum H. thompsonii, conhecida desde 1924, quando foi observada provocando doena em populaes de Phyllocoptruta oleivora (caro da ferrugem). Esse fungo bastante especfico e pode ser encontrado em pomares de citros no Brasil, onde atacam, em especial, caros eriofideos. Dentre os hospedeiros importantes citam-se o P.

Figura 4. Colnia de mosca branca infectada por Aschersonia aleyrodis

tm sido pouco estudados. Entretanto, segundo Santos & Akiba (1996), foram constatados efeitos fungisttico, bacteriosttico e repelente sobre diversos agentes fitopatognicos e insetos. Santos & Sampaio (1993) verificaram a presena de uma substncia coloidal
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por muitos como vantagens incontestveis, pode-se abrir um novo ponto de discusso sobre o assunto. O que ser que uma produo caseira do biofertilizante, sem o controle adequado do processo fermentativo e da matriaprima utilizada, gera como produto

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oleivora e o Eriophyes sheldoni (caro das gemas). Entomophthorales esto normalmente associados a espcies de tetraniqudeos, principalmente Panonychus citri (caro purpreo), controlando naturalmente populaes em condies de campo. As epizootias naturais de fungos esto diretamente correlacionadas com pocas chuvosas e com elevada densidade de hospedeiros. Trabalhos recentemente desenvolvidos pelo Setor de Entomologia da ESALQ-USP e Fundecitrus vm demonstrando o grande potencial do uso de isolados de B. bassiana, Metarhizium anisopliae e Verticillium lecanii para o controle de caros em citros. Alm dos fungos, alguns vrus podem ocorrer infectando caros no agroecossistema ctrico. comum a ocorrncia de um vrus de partcula livre em populaes naturais do caro purpreo, na Flrida (Muma, 1955). Esse patgeno ainda no foi relatado no Brasil, entretanto, futuramente, poder ser considerado um promissor agente de controle de P. citri na citricultura. Dentre os insetos mais importantes citam-se o bicho-furo, cochonilhas e cigarrinhas. O bicho-furo, E. aurantiana, ocorre em qualquer poca do ano nos pomares, com picos crescentes nos meses de janeiro, fevereiro e maro, e atacam todas as variedades de laranjas doces. Para o seu controle, tm sido recomendados os inseticidas biolgicos Dipel e Ecotech (Bacillus thuringiensis var. kurstaki), em pulverizao a alto volume, com perfeita cobertura das plantas. Podem ser observadas vrias espcies de cochonilhas que colonizam todas as partes da planta. Alm da suco da seiva, elas injetam toxinas e excretam substncias aucaradas sobre as quais desenvolve-se a fumagina, que prejudica a fotossntese. No Brasil, vm sendo conduzidas pesquisas com os fungos B. bassiana, M. anisopliae e Colletotrichum gloeosporioides para o controle da cochonilha Orthezia praelonga. Cesnik et al. (1996) obtiveram reduo significativa na infestao dessa cochonilha quando aplicaram o fungo C. gloeosporioides, em pomares da regio de Limeira-SP. Foi observada uma reduo de 43% a 82% no nmero de insetos encontrados nas folhas das plantas tratadas, 35 dias aps a aplicao do patgeno. Aps 70 dias da aplicao, a reduo

Figura 5. Pulverizao de Beauveria bassiana em pomar de laranja Pera, utilizando-se atomizador tratorizado

na populao da praga atingiu 85% a 96%. A espcie Aschersonia aleyrodis, conhecida como fungo vermelho, ataca cochonilhas e moscas-brancas Dialeurodes citri e D. citrifolii. O fungo coloniza a fase imvel dessas pragas, deixando-as com aparncia rseo-avermelhada. A poca mais favorvel s epizootias coincide com a maior precipitao pluviomtrica. Assim, nas condies do Estado de So Paulo, o patgeno ocorre de novembro a fevereiro e, nos Estados do Nordeste, nos meses de maio a agosto. O fungo V. lecanii tambm ocorre sobre pulges e cochonilhas. No Brasil, vem causando epizootia em populaes de cochonilhas e principalmente sobre a cochonilha verde Coccus viridis, mantendo as populaes dessas pragas em nveis de danos noeconmicos. Diversas doenas de plantas de importncia econmica esto associadas direta ou indiretamente com artrpodos. Alguns grupos de procariotos fitopatognicos, como as bactrias fastidiosas, do gnero Xylella, so obrigatoriamente transmitidos por hempteros, em sua maioria cigarrinhas. Mais recentemente, comprovou-se que 3 espcies de cigarrinhas mais comuns, Acrogonia sp., Oncometopia facialis e Dilobopterus costalimai, transmitiam a bactria de plantas contaminadas para plantas sadias (Gravena et al., 1997).

Em estudos recentes realizados no Laboratrio de Patologia e Controle Microbiano de Insetos da ESALQ/USP, em colaborao com o Fundecitrus, foi observada a ocorrncia natural de fungos Entomophthorales, M. anisopliae e B. bassiana infectando cigarrinhas adultas, em campo. Tambm constatou-se a patogenicidade de V. lecanii em condies de laboratrio. ESTRATGIAS PARA UTILIZAO DOS MICRORGANISMOS EM CITROS Os patgenos, para serem eficientes, necessitam ser empregados corretamente, utilizando-se uma estratgia que dever ser selecionada considerando as caractersticas da cultura, bioecologia do inseto alvo e o tipo de patgeno. Entre as principais estratgias de uso de patgenos para o controle de pragas, destacam-se as seguintes: a) Introduo inoculativa - visa lenta e contnua eliminao da praga em locais onde o patgeno ainda no est presente. Pode ser feita pela transferncia de pequena quantidade de inculo, introduzindo insetos contaminados, cadveres, pedaos das plantas, meios de culturas e iscas com os patgenos, e at mesmo pela pulverizao de pequenas reas ou de algumas plantas. Um exemplo a introduo de A. aleyrodis usando galhos de citros
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Tabela 1. Principais pragas dos citros, seus patgenos e estratgias de emprego. Praga caros Phyllocoptruta oleivora Brevipalpus phoenicis Panonychus citri Mosca das frutas Thephritidae Bicho furo Ecdytolopha aurantiana Cochonilhas Chrysomphalus spp. Coccus viridis Parlatoria spp. Orthezia praelonga Cigarrinhas Cigarrinhas da CVC Patgeno Hirsutella thompsonii Verticillium lecanii Metarhizium anisopliae vrus de partcula livre Hirsutella thompsonii Entomphthorales Metarhizium anisopliae Bacillus thuringiensis Myiophagus Nectria e Myriangium Fusarium sp. Verticillium lecanii Aschersonia aleyrodis Fusarium sp. (=Atractium) Nectria e Myriangium Beauveria bassiana Colletotrichum gloesporioides Metarhizium anisopliae Verticillium lecanii Metarhizium anisopliae Beauveria bassiana Entomophthorales Beauveria bassiana Metarhizium anisopliae Beauveria bassiana Verticillium lecanii Entomophthorales Beauveria bassiana Aschersonia aleyrodis Metarhizium anisopliae Estratgia de emprego introduo inundativa e inoculativa; proteo introduo inundativa e inoculativa; proteo introduo inoculativa (C.B. clssico) incremento e proteo proteo introduo inundativa (solo) introduo inundativa proteo introduo inundativa e inoculativa; proteo introduo inundativa e inoculativa; proteo proteo introduo inundativa e inoculativa; proteo

introduo inundativa e inoculativa; proteo proteo introduo inoculativa (iscas atrativas) introduo inoculativa proteo introduo inoculativa e inundativa proteo e introduo inoculativa introduo inundativa
antecipar as epizootias, antes que a praga atinja nveis de danos econmicos. Oferecem condies para ser usados dentro dessa estratgia os fungos H. thompsonii para o caro da falsaferrugem e os fungos amigos que ocorrem nos pomares de citros. d) Conservao ou proteo - trata-se de uma estratgia das mais importantes e, quando bem conduzida, pode atingir resultados significativos na preservao do inculo natural, contribuindo para a formao de focos primrios da doena e posterior desencadeamento de epizootias. A conservao pode ser realizada pela manipulao do ambiente (escolha de variedades, espaamento, tratos culturais e cultivo mnimo) e utilizao de defensivos qumi-

Cupins Pulges

Outras

Moscas-brancas Coleobrocas

com mosca branca atacadas pelo fungo. Tambm pode-se efetuar a introduo inoculativa dos fungos amigos em locais onde eles no ocorrem, como Hirsutella, Myriangium, Myiophagus, Nectria spp., Tetracrium (Telemorfo = Podonectria), Verticillium spp. e Fusarium coccophilum, Atractium. b) Introduo inundativa - visa supresso rpida da praga pela aplicao de uma grande quantidade de inculo de um patgeno, onde ele pode ou no estar presente. O patgeno deve atuar independentemente da densidade populacional da praga e do inculo existente na rea. A aplicao de B. thuringiensis para o controle de lagartas desfolhadoras e do bicho furo so exemplos de introdues inun20

dativas que podem levar a um eficiente controle dessas pragas, desde que os patgenos sejam aplicados em concentraes corretas e com equipamentos adequados. c) Aumento ou incremento - admite-se que o patgeno j se encontre presente no local, porm que a sua ocorrncia sobre as pragas seja tardia e, assim, normalmente, no se consiga evitar os danos nas plantas. Como o entomopatgeno j se adaptou ao ambiente, existe grande probabilidade de sucesso no controle da praga quando se utiliza esse procedimento de controle. Assim, o patgeno necessita de um aumento ou incremento na sua densidade de inculo, visando formao de focos primrios e de um potencial de inculo capaz de

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cos seletivos. Essa ltima tcnica uma das mais importantes dentro do esquema de preservao dos patgenos, e visa utilizao de agrotxicos (acaricidas, inseticidas, fungicidas e herbicidas) e outros insumos (adubos foliares), seletivos para os patgenos. Os defensivos e insumos no-seletivos devem ser evitados, e os compatveis devem fazer parte dos programas de conduo da cultura, podendo, s vezes, ser misturados com o patgeno. As estratgias de utilizao de entomopatgenos em pomares de citros para as principais pragas da culturas podem ser observadas na Tabela 1. CONSIDERAES FINAIS A dificuldade de se quebrar o paradigma do uso do controle qumico em citros est no fato do citricultor desconhecer e de no acreditar no potencial de outras prticas, de cunho alternativo ou ecolgico. o prprio citricultor quem, usando tcnicas inadequadas, torna o controle de pragas pouco eficaz nessa cultura. Estudos com vistas a empregar microrganismos e caldas fertiprotetoras no sistema de produo so de grande importncia para o controle sustentvel das pragas e, sobretudo, para a reduo dos custos de produo dessa cultura. A utilizao de biofertilizantes ou de entomopatgenos visando ao controle de uma praga deve, obrigatoriamente, fazer parte de um projeto de manejo ecolgico, levandose em conta o conhecimento das interaes desses produtos e de seus impactos sobre as relaes trofobiticas dos organismos envolvidos (planta, pragas e inimigos naturais) no agroecossistema ctrico. BIBLIOGRAFIA Alves, S.B. (Coord.) Controle Microbiano de Insetos. 2. ed. Piracicaba: Fealq, 1998. 1163p. Alves, S.B.; Tamai, M. A.; Lopes, R. B.; Alves Jr, S.B. Utilizao de entomopatgenos na citricultura. In: Abreu Jr., H. de (Coord.) Citricultura Sustentvel: controle alternativo de pragas e doenas. Limeira: agroecolgica, 1999. p.33-44.

Figura 6. Frutificao do fungo Fusarium sp. (=Atractium sp.) sobre cochonilhas dos citros
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