FIWE Extracteur de fibre pour dosage du contenu en fibre brute

Rfrences 10521 & 10522

Mode d'Emploi
IMPORTANT : LIRE LES INFORMATIONS CONTENUES DANS CE MANUEL AVANT D'UTILISER L'APPAREIL. LE FABRICANT NE RECONNAIT AUCUNE RESPONSABILIT EN CAS D'UTILISATION INCORRECTE DE L'QUIPEMENT NE CORRESPONDANT PAS AUX INSTRUCTIONS D'UTILISATION. Les tiquettes prsentes sur l'appareil avertissent l'utilisateur des dangers auxquels il est expos pendant l'utilisation ou l'entretien. Les tiquettes doivent tre laisses sur l'appareil et remplaces si elles ne sont plus lisibles. Avertissement d'un danger Pour viter les accidents pouvant tre causs par l'appareil.

Dmarrage du fonctionnement Ne pas dmarrer le fonctionnement de l'appareil avant de lire les instructions d'utilisation et d'entretien.

REGLES DE SECURITE 1) Le monotube infrarouge et les creusets peuvent atteindre une temprature leve pendant la phase de chauffage mais galement pendant la phase de refroidissement. Mettre en place l'cran thermique avant de dmarrer un cycle. 2) Les rcipients et les produits utiliss pendant le travail doivent tre compatibles avec la temprature rgle sur l'appareil. NETTOYAGE Toujours dbrancher l'appareil avant de le nettoyer. La plaque chauffante doit tre froide. Utiliser un chiffon humide et ininflammable, et des dtergents non agressifs. EQUIPEMENT DE PROTECTION INDIVIDUELLE L'quipement utilis pour la protection individuelle doit tre compatible avec les dangers potentiels dcoulant des matriaux de travail et des rcipients en verre.

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ENTRETIEN L'entretien par les utilisateurs doit tre limit aux aspects dcrits dans ce manuel. Toujours dbrancher l'appareil avant d'effectuer un entretien. Conformment aux lois s'appliquant la garantie des produits, notre appareil doit tre rpar dans notre usine, sauf accords diffrents avec nos agents. GARANTIE Commence la date du bulletin de livraison et se rfre au numro d'immatriculation de l'appareil seul.

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Sommaire
Introduction Vrification de l'appareil la rception Montage et installation Contrles de fonctionnement Entretien Schma lectrique Schma hydraulique Pices de rechange et accessoires 5 6 6 7 11 14 15 17

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Mthodes d'analyse
Prtraitement des chantillons Dosage des fibres dans des chantillons trs finement broys Dosage des fibres brutes (Weende) Modification de la mthode de Weende selon Wijkstrom Dosage des fibres avec un dtergent neutre (NDF selon Van Soest) Dosage des fibres avec un dtergent acide (ADF selon Van Soest) Dosage de la lignine avec un dtergent acide (ADL selon Van Soest) Dosage de la silice Dosage de la lignine et de la cellulose avec du permanganate Fibres alimentaires totales dans les aliments. Mthode enzymatique 18 18 19 21 22 23 24 25 26 29

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Introduction
Les vgtaux et les produits alimentaires qui en sont drivs sont composs de substances appartenant diffrentes catgories de glucides, lipides, protines, sels minraux et polymres complexes comme la lignine. Le dosage des diffrents composants est ralis par une srie d'extractions avec des ractifs alcalins et acides, chacun tant capable d'extraire un composant en laissant les autres intacts. Par exemple une solution d'hydroxyde de sodium 5-10% permet de solubiliser les hmicelluloses, alors que l'acide sulfurique 72% hydrolyse la cellulose en laissant la lignine sous forme de rsidu poudreux brun-noir. Une catgorie essentiellement empirique de ce qui est appel fibres brutes a t largement adopte dans l'valuation de la nourriture et des aliments, car elles reprsentent par convention le rsidu non assimilable des aliments. En pratique, elles reprsentent le rsidu provenant d'un chantillon dgraiss aprs bullition avec des solutions dilues de bases et d'acides minraux forts. Il existe de nombreuses mthodes analytiques (Van Soest pour les fibres avec des dtergents acides ou neutres, Weende, etc.) dont les rsultats ne sont pas comparables. De plus, pour chaque mthode, les mthodes analytiques doivent tre soigneusement standardises pour permettre d'obtenir des rsultats reproductibles. L'utilisation d'un extracteur conu dans ce but pour ces mthodes tel que le FIWE rend trs simple la standardisation des conditions d'analyse.

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Vrification de l'appareil la rception

L'extracteur FIWE est livr dans une bote en carton, envelopp dans une feuille de polythylne antichoc et protg par de la mousse de polystyrne. A la rception, vrifier l'intgrit de l'appareil aprs l'avoir dball. L'ensemble du FIWE est constitu d'un rflecteur, de tuyaux pour la connexion sur l'eau du robinet, 3 ou 6 creusets en verre, une plaque chauffante, 2 bouteilles de ractifs, un support pour creusets et un support pour 3 ou 6 creusets.

Montage et installation
Les tuyaux fournis pour la connexion sur l'eau du robinet doivent tre raccords sans tre plis sur les quatre branchements sur la partie arrire de l'appareil (1), ce qui correspond : VACUUM (vide), DISCHARGE (vidange), INLET (admission). VACUUM (vide) : brancher un tube de silicone sur la connexion suprieure de la pompe et le diriger vers la sortie. DISCHARGE (vidange) : brancher un tube en PVC (aussi court que possible) pour l'coulement de l'eau de refroidissement. DISCHARGE (vidange) : brancher un tube en PVC (aussi court que possible) pour l'coulement des ventuelles coulures. INLET (admission) : brancher le tuyau fourni sur l'eau du robinet pour le refroidissement (environ 2 litres par minute). L'alimentation lectrique de 230 V (ou 115 V) (2) doit pouvoir supporter un courant d'au moins 10 A et tre relie la terre.

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Contrles du fonctionnement
Mettre en place les six creusets en verre (3) avec le levier sur le ct gauche de l'appareil en position haute (4). Abaisser le levier (5) et le maintenir en place. Les creusets doivent tre retenus fermement. Ouvrir le robinet d'eau et rgler le dbit de l'eau sur environ 2 litres par minute. Mettre l'appareil sous tension l'aide du commutateur d'alimentation (6), les lampes incorpores s'allument. La capacit de chauffage est contrle de 0 100% (1000 W - FIWE 6 - 600 W - FIWE 3) l'aide du rgulateur de tension (7) l'avant de l'appareil. Une minuterie avec alarme (8) est galement prsente sur l'avant de l'appareil pour rgler le temps jusqu' 60 minutes.

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La range de trois ou six vannes de position permet les fonctions suivantes : 1. Ferme - lorsque le contenu du creuset doit tre port bullition; 2. Pression - admission d'air comprim sur le bas en verre fritt des creusets pour permettre de mlanger leur contenu; 3. Vide - connexion au vide pour l'vacuation des ractifs ou de l'eau de lavage. Le compresseur d'air et la pompe pristaltique (9) sont actionns par leur commutateur d'alimentation respectif (11 - 10) sur l'avant de l'appareil. La pompe pristaltique utilise pour la vidange des liquides est actionne par un moteur engrenages quip d'un thermostat de scurit contre la surchauffe due un travail en force ou en continu. L'intervention du thermostat arrte le moteur. Lorsque la temprature du moteur diminue en-dessous de la temprature compatible avec un fonctionnement correct, la restauration est automatique. Il est possible d'utiliser la pince multiple (12) pour l'extraction simultane de 3 ou de 6 creusets. Important : la hauteur des 3-6 creusets doit tre identique 0,2 mm. Nous fournissons des jeux de 3-6 creusets adapts. Les nouveaux creusets doivent tre gards une heure dans un four 500C. En cas de ncessit, nous conseillons de remplacer le jeu complet de creusets. Nous conseillons d'utiliser les creusets Velp d'origine (rf. art. 11.1140). En cas de coulure de ractif, le rglage de l'tanchit des creusets est effectu l'aide d'une cl hexagonale sur les 2 vis situes sur les deux prises (13) fixes aux barres de guidage.

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Porosit des creusets

Les creusets normalement utiliss sont de qualit 2 suivant la dfinition Jena, avec des pores de 45 m (40 - 60 m) (ASTM), qualit C aux U.S.A. Pour doser le contenu en fibres de certains matriaux (par exemple la farine de soja), il peut tre utile d'ajouter de la terre diatomes, lave pour une utilisation analytique, comme aide la filtration. Ajouter 3-4 mm de terre diatomes dans chaque creuset avant de la pese pour dterminer la tare.

Prcautions prendre avec les creusets en verre pendant la minralisation

Les creusets en verre utiliss pour le dosage des cendres demandent une attention particulire pendant le chauffage et le refroidissement afin d'viter qu'ils se cassent. Le chauffage et le refroidissement du verre effectus trop rapidement produisent des tensions dans les diffrentes parties, ce qui peut les faire casser, surtout aux endroits rays ou trs tchs comme la zone de connexion entre le corps du creuset et le filtre en forme de disque. Conserver l'esprit qu'une temprature de 550C correspond au dbut de l'tat plastique (dformable) du verre et ne doit par consquent pas tre dpasse. Les vitesses maximum de chauffage et de refroidissement des creusets en verre sont les suivantes : Chauffage C 20 350 350 480 480 550 Refroidissement C 350 20 480 350 550 480 Vitesse C/min. 350 24 12 Temps ncessaire 1 6 6

Des vitesses plus faibles ne modifient manifestement pas un relchement de tension correct du verre. Eviter galement les chocs thermiques de plus de 90C; les creusets doivent par exemple tre manipuls avec des pinces prchauffes.

Poids constant
Le refroidissement des creusets extraits du four ou du four moufle doit se faire dans un dessiccateur. Nous conseillons d'utiliser du sulfate de calcium granulaire anhydre (drierite) comme agent de dessiccation. Ceci permet d'atteindre une humidit rsiduelle correspondant un point de rose de -70C. La vrification de l'tat sec complet de l'chantillon se fait en effectuant deux peses 30 minutes d'intervalle jusqu' ce que le mme poids soit obtenu (poids constant).

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Procdure d'oxydation pour le nettoyage des creusets

La verrerie peut tre lave normalement l'aide d'une solution prpare en dissolvant 30 g d'hydroxyde de sodium (NaOH, qualit technique), 10 g de triphosphate de sodium (Na5P3O10, qualit technique) et 2 g de lauryl sulfate de sodium (C12H25NaSO4, mlange commercial). Les filtres en verre fritt peuvent tre nettoys par oxydation l'acide chromique (dichromate et acide sulfurique concentr), par oxydation l'acide sulfonitrique (acide sulfurique concentr chaud avec de petites quantits de nitrate de potassium ou de sodium ou d'acide nitrique), ou par oxydation l'oxyde nitreux (nitrite de sodium et acides sulfurique ou chlorhydrique concentrs). Le mlange d'acide chromique-sulfurique est prpar en ajoutant lentement 1 l d'acide sulfurique concentr (H2SO4, d. 1,84, qualit technique) 35 ml de solution aqueuse sature de dichromate de sodium (Na2Cr2O7, 73% p/p 20C, qualit technique) tout en remuant. Laisser le mlange froid au contact de la verrerie nettoyer pendant au moins 15 minutes, toute la nuit de prfrence. La solution frachement prpare est rouge orange et devient verte aprs plusieurs utilisations du fait de la rduction du Cr VI en Cr III. Le mlange chromiquesulfurique usag doit tre correctement limin du fait de la toxicit du chrome pour l'environnement. L'oxydation par l'oxyde nitreux de rsidus organiques peut tre obtenue en lavant les creusets avec de l'acide sulfurique concentr chaud (H2SO4, 70%, d. 1,62, qualit technique) auquel auront t pralablement ajoutes avant utilisation quelques gouttes de solution aqueuse sature de nitrite de sodium (NaNO2, qualit technique, 100 g dans 150 ml d'eau du robinet). Une autre mthode est base sur l'oxydation par l'acide nitrique concentr : l'addition de quelques gouttes d'thanol produit aprs quelques minutes une raction exothermique et l'volution de l'oxydation en oxyde nitreux. Attention : tous ces traitements doivent tre effectus sous une hotte aspirante du fait de la toxicit trs leve des vapeurs nitriques-nitreuses libres. Aprs la traitement par oxydation, les filtres doivent tre soigneusement rincs l'eau du robinet puis finalement avec de l'eau dionise puis schs. Lors de l'utilisation d'acide nitrique, se protger les mains avec des gants en PVC et non en caoutchouc qui est attaqu.

Nettoyage mcanique des creusets

Les rayures de la surface rduisent la solidit du verre. Eviter les rayures, surtout proximit de la connexion du corps du creuset et du filtre en forme de disque, car cette zone subit un maximum de tension sous vide. Un nettoyage mcanique en toute scurit est obtenu en inversant le dbit du lavage, mais la pression ne doit pas dpasser 1,06 kg/cm2.

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Entretien
Joints d'tanchit des creusets Lorsque cela est ncessaire, retirer les joints (14) et (15) en plaant la lame d'un tournevis entre le joint et l'anneau mtallique de bordure et en le soulevant. Vrifier la fente du logement qui doit tre propre. Insrer un nouveau joint plat en Viton ACGU004 en appuyant lgrement pour le mettre correctement en place. Nettoyage du filtre de l'eau du robinet de refroidissement Dbrancher l'appareil de son alimentation lectrique et le dconnecter du robinet d'eau. Retirer le tube d'eau de refroidissement de l'appareil et retirer le filtre l'aide d'une petite pince. Nettoyer le filtre sous l'eau courante ou avec de l'air comprim (16). Remplacement du fusible Dbrancher l'appareil de son alimentation lectrique. Les fusibles peuvent tre atteints en dvissant avec un tournevis cruciforme les couvercles situs l'arrire de l'appareil. Retirer les fusibles en les tirant dehors. L'appareil est quip d'un fusible pour chaque phase (17). Remplacement du tube de la pompe pristaltique Dbrancher l'appareil de son alimentation lectrique. La pompe pristaltique est situe sur le ct droit de l'appareil. Retirer le couvercle en Plexiglas en tournant les deux verrous d'un quart. Dvisser et retirer la fourche maintenant le tube. Retirer le tube usag. Remonter la fourche et le couvercle aprs avoir remplac le tube usag par un nouveau (18). 14 15 16

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Remplacement du monotube infra rouge (IR) ELRE 023 600 W pour le FIWE 3 ELRE 022 1000 W pour le FIWE 6 Dbrancher l'appareil de son alimentation lectrique. Faire reposer l'appareil sur le ct et retirer le panneau du fond en dvissant les vis cruciformes enfilement automatique (19). Dvisser le support du tube IR et le couvercle de la rsistance (20). Dbrancher les deux cbles du monotube du terminal de connexion (21). Retirer le monotube IR en le dconnectant des deux pinces pression. Installer le nouveau monotube IR en effectuant les oprations dcrites ci-dessus dans l'ordre inverse. 19 20 21

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Remplacement des condenseurs de vapeur en verre VTTC001 Pousser les tubes vers le haut et les extraire de leur logement, puis les librer en les tirant vers l'extrieur (22). Dbrancher le tube de silicone de 8x5 mm pour l'eau de refroidissement et le connecter aux nouveaux condenseurs (23). Les joints d'tanchit du rcipient de rcupration des coulures ELPA003 sur la section suprieure des condenseurs peuvent tre enlevs en les retirant de leur emplacement (24) et en mettant les nouveaux en place en appuyant lgrement dessus. * Effectuer toutes les interventions d'entretien aprs avoir dbranch l'appareil de son alimentation lectrique. 22 23 24

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Schma lectrique 230 V/50 Hz

1) Fusible retardement 5x20 8A (FIWE 6) 5A (FIWE 3) 2) Commutateur principal lumineux 3) Rgulateur de tension 4) Rsistance

5) Commutateur de la pompe cartouche ressort 6) Pompe cartouche ressort 7) Commutateur du compresseur d'air 8) Compresseur d'air

Schma lectrique 115 V/60 Hz

1) Fusible retardement 5x20 16A (FIWE 6) 10A (FIWE 3) 2) Commutateur principal lumineux 3) Rgulateur de tension 4) Rsistance

5) Commutateur de la pompe cartouche ressort 6) Pompe cartouche ressort 7) Commutateur du compresseur d'air 8) Compresseur d'air

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Schma hydraulique du FIWE 3

Schma hydraulique du FIWE 6

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FIWE 3 Puissance Poids Alimentation Alimentation FIWE 6 Puissance Poids Alimentation Alimentation

800 W 35 kg 230 V / 50 Hz 115 V / 60 Hz 1200 W 46 kg 230 V / 50 Hz 115 V / 60 Hz

code 10.0201 code 10.1201

code 10.0200 code 10.1200

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Pices de rechange
Description Condenseur refroidi par eau Pompe air HI-TOP 3500 pour FIWE 3/6 Pompe pristaltique M 160 325 Monotube infrarouge 600 W pour FIWE 3 Monotube infrarouge 1000 W pour FIWE 6 Rgulateur de tension pour FIWE 3 Rgulateur de tension pour FIWE 6 Fusible action retarde 5x20 mm 5 A pour FIWE 3 Fusible action retarde 5x20 mm 8 A pour FIWE 6 Joint Viton Tube de silicone de diamtre 5 x 8 mm Tube en Viton de diamtre 5 x 8 mm Vanne tournant sphrique 3 voies inox-Viton Tte de chauffe, peinte (pour RC2) Rf. art. 230V/50Hz VTTC001 ELPM026 10.0191.18 ELRE023 ELRE022 EESH016 EESH018 ELFU016 ELFU015 ACGU004 TBSI002 TBVI002 MEVA001 10.0162.04 Rf. art. 1150V/60Hz VTTC001 ELPM026 ELPM004 10.0191.18 ELRE025 ELRE024 EESH016 EESH018 ELFU017 ELFU013 ACGU004 TBSI002 TBVI002 MEVA001 10.0162.04

Accessoires
Description Creuset en verre avec fond en verre fritt Bouteilles de ractif Rflecteur pour FIWE 3 Rflecteur pour FIWE 6 Tube PVC Plaque chauffante deux places de type RC2 Pince pour creusets Support pour 3 creusets pour FIWE 3 Support pour 6 creusets pour FIWE 6 Rf. art. 11.1140 VTBR001 10.0201.22 10.0200.22 TBPV001 10.0172 ACPZ001 10.0201.21 10.0200.21

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Prtraitement des chantillons

Doser les fibres brutes dans les chantillons secs dont les composants ont t tamiss sur une grille avec des ouvertures de 1 mm (ASTM 18 mesh par pouce). Si ncessaire, broyer sec la partie de l'chantillon qui ne passe pas travers le tamis. Le schage des chantillons est obtenu en les chauffant dans un four 105-110C pendant quelques heures ou dans des fours vide des tempratures plus basses (par exemple 70C). Si l'chantillon ne peut pas tre chauff, le lyophiliser avant de le broyer. La plupart des matriaux perdent de l'eau pendant le broyage. Si les rsultats doivent tre exprims en poids frais, le contenu en humidit doit tre dtermin sur un chantillon non broy prlev avec celui destin au dosage des fibres. Un contenu en matires grasses suprieur 5-10% empchera un broyage correct. L'chantillon peut tre dgraiss en utilisant 25 ml d'hexane ou d'ther de ptrole (P.E. 40-60C, rsidu d'vaporation infrieur 1mg/100ml) par gramme de matire. La perte de poids due l'extraction des matires grasses doit tre enregistre et utilise pour le rsultat final. Tenir compte du fait que les tubes en silicone ou en Noprne ne rsistent pas aux hydrocarbures.
Rfrence : AOAC (1993). Methods of analysis for nutrition labeling. Airlington, USA.

Dosage des fibres dans des chantillons trs finement broys (par exemple farine de soja)
Il est possible que de trs fines particules engorgent les filtres en verre fritt des creusets, affectant ainsi la filtration. Dans ce cas, nous conseillons d'utiliser une sous-couche de terre diatomes (diatomite, silice diatomes, lave l'acide). Ajouter une couche de quelques mm dans chaque creuset avant la pese pour dterminer la tare. Cette procdure n'empche pas le dosage des cendres mais ne permet pas le dosage de la silice si le contenu de l'chantillon est trs faible.

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Dosage des fibres brutes (Weende)

La mthode est base sur la solubilisation des composs non-cellulosiques dans des solutions d'acide sulfurique et d'hydroxyde de potassium. Ractifs : a) Acide sulfurique (H2SO4) 1,25% - 0,255 0,005 N. 12,5g d'acide concentr 98% complt 1000 ml avec de l'eau distille. Vrifier la concentration par titrage. b) Hydroxyde de potassium (KOH) 1,25% - 0,223 0,005 N, sans carbonate. 12,5 g complt 1000 ml avec de l'eau distille. Vrifier la concentration par titrage. c) n-octanol comme agent anti-moussant. d) Actone anhydre. 1. Dterminer sparment l'humidit de l'chantillon en le chauffant dans un four 105C jusqu' poids constant. Refroidir dans un dessiccateur. 2. Peser sparment 1 g environ d'chantillon broy (1 mm environ) avec une prcision de 1 mg. 3. Ajouter de l'acide sulfurique 1,25% jusqu'au repre de 150 ml, aprs prchauffage l'aide de la plaque chauffante afin de rduire le temps ncessaire l'bullition. 4. Ajouter 3-5 gouttes de n-octanol comme agent anti-moussant. 5. Faire bouillir pendant exactement 30 minutes partir du dbut de l'bullition. 6. Brancher le vide pour vidanger l'acide sulfurique. 7. Laver trois fois avec 30 ml (creuset rempli jusqu'en haut) d'eau distille chaude, en connectant chaque fois l'air comprim pour mlanger le contenu des creusets. 8. Aprs avoir vidang le dernier lavage, ajouter 150 ml d'hydroxyde de potassium (KOH) 1,25% prchauff et 3-5 gouttes d'agent anti-moussant. 9. Faire bouillir 30 minutes. 10. Filtrer et laver comme l'tape 7. 11. Effectuer un dernier lavage avec de l'eau dionise froide pour permettre aux creusets de refroidir, puis laver trois fois le contenu des creusets avec 25 ml d'actone, en mlangeant chaque fois l'aide d'air comprim. 12. Retirer les creusets et dterminer le poids sec aprs schage dans un four 105C pendant une heure ou jusqu' poids constant. Laisser refroidir dans un dessiccateur. Ce poids reprsente les fibres brutes plus la teneur en cendres en comparaison du poids initial. 13. Lorsque la teneur en cendres est galement ncessaire, les creusets sont placs dans un four moufle 550C pendant trois heures et repess aprs refroidissement dans un dessiccateur. La diffrence de poids en comparaison avec l'tape 12 reprsente le contenu en fibre brute sans les cendres. 14. Retirer les cendres et si ncessaire nettoyer les creusets par un procd oxydant. Remarque : le dosage des fibres brutes selon la mthode de Weende est une mthode officielle en Italie, en France, au Royaume-Uni, en Sude, aux Etats-Unis d'Amrique, etc. Selon U.S. AOAC, 15th Ed., la solution d'hydroxyde de potassium est remplace par une solution d'hydroxyde de sodium 0,313 0,005 N, 12,5 g NaOH complt 1000 ml par de l'eau distille.

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Fibres brutes (Weende)

Procdure analytique
A B C D E F G H I L M N O P Q R S T U Broyer l'chantillon. Peser l'chantillon dans le creuset (F0) Insrer 6 creusets dans l'appareil. Ajouter le 1er ractif prchauff dans les colonnes. Ajouter 3-4 gouttes d'agent anti-moussant. Faire bouillir pendant exactement 30 minutes. Filtrer le ractif restant. Laver 3 fois avec de l'eau chaude. Ajouter le 2me ractif prchauff dans la colonne. Ajouter 3-4 gouttes d'agent anti-moussant. Faire bouillir pendant exactement 30 minutes. Filtrer le ractif restant. Laver 3 fois avec de l'eau chaude. Laver 1 fois avec de l'eau froide. Laver 3 fois avec du solvant froid. Scher (105C) le rsidu dans les creusets. Peser le rsidu dans les creusets (F1). Rduire en cendres (550C) le rsidu dans les creusets. Peser le rsidu dans les creusets (F2).

% en fibre brute =

F1 F 2 100 F0

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Modification de la mthode de Weende selon Wijkstrom

Parmi les diffrentes modifications proposes, celle de T. Wijstrom rduit l'bullition de 30 10 minutes en utilisant des ractifs plus concentrs. Toutes les autres tapes de la mthode de Weende restent inchanges. Ractifs : a) Acide sulfurique (H2SO4) 0,640 N, 32,0 g d'acide concentr ( 98%, d. 1,84 qualit ractif) complt 1000 ml avec de l'eau distille. b) Hydroxyde de potassium (KOH) 0,556 N, 31,2 g (qualit ractif sans carbonate) complt 1000 ml avec de l'eau distille.

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Dosage des fibres avec un dtergent neutre (NDF selon Van Soest)
La mthode est base sur la solubilisation, par une solution neutre d'un agent tensioactif, de : a) hydrates de carbone, y compris les pectines b) la plupart des protines c) lipides d) substances minrales solubles, y compris une partie de la silice Le contenu soluble est dfini comme tant soluble dans les dtergents neutres (NDS). Le rsidu est constitu des composs fibreux des cellules vgtales; hemicelluloses, cellulose, lignine, cutine, substances minrales insolubles et certaines protines de la paroi cellulaire. Ractifs : 1. Solution de dtergent neutre : a) Borate de sodium dcahydrate (Na2B4O7 10 H2O) 6,81 g b) Ethylnediaminettraactate disodium (EDTA, C10H14N2Na2O8) 18,61 g c) Lauryl sulfate de sodium neutre (C12H25NaO4S) 30 g d) 2-thoxythanol (thylne glycol monothyle ther, Cellosolve, C4H10O2) 10 ml e) Phosphate disodium anhydre (Na2HPO4) 4,56 g f) Eau distille 1000 ml. Verser le borate de sodium et l'EDTA disodium dans un bcher et les dissoudre avec une partie de l'eau distille en chauffant. Ajouter le lauryl sulfate et le 2thoxythanol. Dissoudre part le phosphate disodium dans une partie de l'eau distille en chauffant jusqu' solubilisation complte. Mlanger les deux solutions et l'eau distille restante et vrifier le pH qui doit se situer entre 6,9 et 7,1. 2. n-octanol (C8H18O), alcool octylique 3. Sulfite de sodium anhydre (Na2SO3) 4. Actone Procdure pour le dosage NDF (Neutral Detergent Fiber) A - Broyer les chantillons schs l'air et les passer travers un tamis de 1 mm. B - Peser dans un creuset 1 g d'chantillon broy avec une prcision de 1 mg. C - Ajouter 100 ml de solution de dtergent neutre temprature ambiante dans le creuset avec 0,5 g de sulfite de sodium et quelques gouttes de n-octanol. D - Chauffer bullition sous reflux pendant 60 minutes partir du dbut de l'bullition. E - Filtrer et laver 3 fois avec de l'eau bouillante, puis 2 fois avec de l'actone froid. F - Scher 8 heures 105C et laisser refroidir dans un dessiccateur. G - Peser. H - Calculer les fibres insolubles dans le dtergent neutre : % NDF = (poids du creuset + poids du rsidu) - poids du creuset / poids de l'chantillon x 100. Composs solubles dans le dtergent neutre : % NDS = 100 - % NDF. I - Rduire en cendre dans un four moufle 550C pendant 2 heures et laisser refroidir dans un dessiccateur. L - Peser. M - Calculer les cendres insolubles dans le dtergent neutre : perte de cendres / poids de l'chantillon x 100.

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Dosage des fibres avec un dtergent acide (ADF selon Van Soest)
La mthode est base sur la solubilisation, par une solution acide d'un agent tensioactif, de : a) hydrates de carbone solubles b) protines c) lipides d) hmicelluloses e) substances minrales solubles Le rsidu fibreux est constitu par la cellulose, la lignine, la cutine et par les substances minrales insolubles dans un environnement acide (silice) et est dfini comme tant l'ADF. La diffrence entre le NDF et l'ADF est constitu essentiellement par l'hmicellulose. Ractifs : 1. Solution de dtergent acide : a) Bromure de ctyltrimthylammonium de qualit technique (C19H42BrN) 20 g b) Acide sulfurique 1 N (H2SO4, 49,04 g/l) 1 l Dissoudre le tensioactif dans l'acide tout en remuant pour favoriser la dissolution. 2. n-octanol (C8H18O), alcool octylique 3. Actone Procdure pour le dosage ADF (Acid Detergent Fiber) A - Broyer les chantillons schs l'air et les passer travers un tamis de 1 mm. B - Peser dans un creuset 1 g d'chantillon broy avec une prcision de 1 mg. C - Ajouter 100 ml de solution de dtergent acide temprature ambiante et quelques gouttes de n-octanol. D - Chauffer bullition sous reflux pendant 60 minutes partir du dbut de l'bullition. E - Filtrer et laver 3 fois avec de l'eau bouillante, puis 2 fois avec de l'actone froid. F - Scher 8 heures 105C et laisser refroidir dans un dessiccateur. G - Peser. H - Calculer les fibres insolubles dans le dtergent acide : % ADF = (poids du creuset + poids du rsidu) - poids du creuset / poids de l'chantillon x 100. I - Rduire en cendre dans un four moufle 550C pendant 2 heures et laisser refroidir dans un dessiccateur. L - Peser. M - Calculer les cendres insolubles dans le dtergent acide : perte de cendres / poids de l'chantillon x 100.

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Dosage de la lignine avec un dtergent acide (ADL selon Van Soest)

Cette mthode est base sur la solubilisation de la cellulose dans l'acide sulfurique 72% et donne la "lignine brute" pouvant contenir galement la cutine (excrte l'extrieur des membranes des cellules vgtales avec une structure lipidique complexe). Ractifs : Solvant pour la cellulose : acide sulfurique 72% en poids (H2SO4, 24,00 N) d 1,634 (20C). Dans un flacon gradu de 1 l, ajouter lentement 1200 g d'acide concentr (H2SO4, 98%, d 1,84) 440 ml d'eau distille sous refroidissement. Standardiser par titrage et ajouter de l'eau ou de l'acide concentr si ncessaire pour obtenir le titre exact. Procdure pour le dosage ADL (Acid Detergent Lignin) A - Broyer les chantillons schs l'air et les passer travers un tamis de 1 mm. B - Peser dans un creuset 1 g d'chantillon broy avec une prcision de 1 mg. C - Ajouter 100 ml de solution de dtergent acide temprature ambiante et quelques gouttes de n-octanol. D - Chauffer bullition sous reflux pendant 60 minutes partir du dbut de l'bullition. E - Filtrer et laver 3 fois avec de l'eau bouillante, puis 2 fois avec de l'actone froid. Remarque : il est possible de dmarrer en utilisant le rsidu du dosage des fibres avec le dtergent acide (ADF). Voir la mthode prcdente. F - Ajouter environ 25 ml d'acide sulfurique 72% temprature ambiante (solvant pour la cellulose) et poursuivre l'extraction froid pendant 3 heures, en mlangeant toutes les heures. G - Filtrer et laver 3 fois avec de l'eau bouillante ou jusqu' l'absence de raction acide. H - Scher 8 heures 105C et laisser refroidir dans un dessiccateur. I - Peser. L - Calculer la lignine insoluble dans le dtergent acide : % ADL = (poids du creuset + poids du rsidu) - poids du creuset / poids de l'chantillon x 100. M - Rduire en cendre dans un four moufle 550C pendant 2 heures et laisser refroidir dans un dessiccateur. N - Peser. O - Calculer le % de silice et de cendres insolubles = (poids du creuset + poids du rsidu) poids du creuset / poids de l'chantillon x 100.

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Dosage de la silice
Le dosage de la silice peut tre effectu en utilisant les cendres prcdemment peses et en les lavant l'acide bromhydrique. Le rsidu est compos uniquement de silice. Ractifs : 1. Acide bromhydrique 48% (HBr) d 1,46 (20C) 2. Actone Procdure de dosage de la silice A - Ajouter environ 4 ml d'acide bromhydrique 48% sur les cendres dans le creuset temprature ambiante et laisser reposer pendant 90 minutes. B - Filtrer et laver le rsidu une fois avec de l'actone froid. C - Rduire en cendre dans un four moufle 550C pendant 2 heures et laisser refroidir dans un dessiccateur. D - Peser. E - Calculer le % de silice = (poids du creuset + poids du rsidu) - poids du creuset / poids de l'chantillon x 100.

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Dosage de la lignine et de la cellulose avec du permanganate

La mthode est base sur l'oxydation de la lignine contenue dans les fibres extraites par la mthode du dtergent acide (ADF) par le permanganate en vue de librer la cellulose de la lignine qui la recouvre. Ractifs : Solvant pour la lignine 1. Solution concentre de permanganate a) Permanganate de potassium (K2MnO4) 50 g b) Sulfate d'argent (Ag2SO4) 0,05 g comme agent de dhalognisation c) Eau distille 1 l Les sels sont ajouts et mlangs dans l'eau pour obtenir une meilleure dissolution. Les conserver l'obscurit. 2. Solution tampon a) Nitrate ferrique (Fe (NO3)3) 6,0 g b) Nitrate d'argent (AgNO3) 0,15 g c) Acide actique glacial (C2H4O2) 500 ml d) Actate de potassium (C2H3KO2) 5 g e) Alcool tertio-butylique (C4H10O) 400 ml f) Eau distille 1 l Dissoudre dans l'eau distille les nitrates de fer et d'argent. Ajouter, dans l'ordre, l'acide actique, l'actate de potassium et le butanol. 3. Solution mlange de permanganate Mlanger 2 volumes de solution de permanganate et 1 volume de solution tampon. La solution mlange doit tre claire et rouge. La solution mlange peut tre conserve dans un rfrigrateur 4C jusqu' une semaine. Les solutions concentres ont une dure de vie plus longue. 4. Solution de dminralisation a) Acide oxalique dihydrate (C2H2O4 2H20) 50 g b) Acide chlorhydrique 37%, d 1,18 (HCl environ 12 N) 50 g c) Ethanol 95% (C2H6O) 700 ml d) Eau distille 250 ml Dissoudre l'acide oxalique dans l'thanol, ajouter l'acide chlorhydrique et l'eau tout en mlangeant. 5. Ethanol 80% 6. Actone

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Procdure pour le dosage de la lignine et de la cellulose. A - Broyer les chantillons schs l'air et les passer travers un tamis de 1 mm. B - Peser dans un creuset 1 g d'chantillon broy avec une prcision de 1 mg. C - Ajouter 100 ml de solution de dtergent acide temprature ambiante et quelques gouttes de n-octanol. D - Chauffer bullition sous reflux pendant 60 minutes partir du dbut de l'bullition. E - Filtrer et laver 3 fois avec de l'eau bouillante, puis 2 fois avec de l'actone froid. Remarque : il est possible de dmarrer en utilisant le rsidu du dosage des fibres avec le dtergent acide. Voir la mthode ADF. F - Ajouter 25 ml de solution mlange de permanganate (solvant de la lignine) et mlanger. Laisser la temprature de la pice pendant 90 minutes. La couleur rouge du permanganate doit tre visible pendant toute cette priode; dans le cas contraire, ajouter du ractif frais. G - Filtrer. H - Ajouter lentement 25 ml de solution de dminralisation. Attention : de la mousse peut se former. I - Filtrer aprs 5 minutes et rpter le traitement de dminralisation au moins une fois. Le rsidu doit tre blanc (20-30 minutes). L - Laver deux fois avec de l'thanol 80% et deux fois avec de l'actone. M - Scher 8 heures 105C et laisser refroidir dans un dessiccateur. N - Peser le rsidu compos de cellulose, de cutine et de silice. O - Calculer le % de rsidu : (poids du creuset + poids du rsidu) - poids du creuset / poids de l'chantillon x 100. P - Ajouter environ 25 ml d'acide sulfurique 72% temprature ambiante (solvant pour la cellulose) et poursuivre l'extraction froid pendant 3 heures, en mlangeant toutes les heures. Q - Filtrer et laver 3 fois avec de l'eau bouillante (jusqu' l'absence de raction acide). R - Scher 8 heures 105C et laisser refroidir dans un dessiccateur. S - Peser. T - Calculer le % de cutine (+ la silice) insoluble dans le dtergent acide = (poids du creuset + poids du rsidu) - poids du creuset / poids de l'chantillon x 100.

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Analyses squentielles
Les diffrents constituants des vgtaux peuvent tre dtermins de faon squentielle en respectant le schma suivant : Echantillon 1 g Rsidu du dtergent neutre (NDF) Rsidu du dtergent acide (ADF) Complexe lignine-cutine (lignine brute) Cutine et cendres Cendres
Rfrence : Van Soest P.J., Robertson J.B. (1979). Systems of analysis evaluating fibrous feeds. Cornell University - Ithaca, N.Y.

le dtergent neutre extrait le contenu de la cellule le dtergent acide enlve les hmicelluloses l'acide sulfurique 72% dissout la cellulose la lignine est extraite par le permanganate la cutine est dtruite par la rduction en cendre 550C

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Fibres alimentaires totales dans les aliments. Mthode enzymatique

Les chantillons doubls, schs, dgraisss (s'ils contiennent plus de 5% de matires grasses) et broys sont digrs avec une amylase, une protase et une amyloglucosidase thermostables. Le rsidu final est filtr, lav avec de l'thanol 78%, de l'thanol 95% puis avec de l'actone. Aprs schage, l'chantillon est pes et si ncessaire incinr 500C pour la dtermination des cendres. Si l'appareil FIWE est disponible, la filtration, le lavage et l'incinration peuvent tre effectus l'aide des creusets en verre fritt Velp (rf. art. 11.1140), avec une porosit de n.2 comme ncessaire pour cette mthode, avec l'addition d'environ 0,5 g de poudre fossile (diatomite, terre diatomes), sch 130C, 1 heure dans un four et entrepose dans un dessiccateur jusqu' utilisation.
Rfrence : AOAC (1993). Methods of analysis for nutrition labeling. Airlington, USA.

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Dclaration de conformit
Nous adresse du fabricant VELP SCIENTIFICA s.r.l. Via Stazione, 16 USMATE (MI) Italie

dclarons sous notre responsabilit que le produit est conforme aux prescriptions de scurit et d'hygine de la directive sur les appareils 89/392/CEE, de la directive sur les basses tensions 73/23/CEE, de la directive de compatibilit lectromagntique 89/336/CEE et leurs modifications, et que les documents numrs dans l'annexe V sont disponibles aux bureaux de Velp suivant la directive sur les machines.

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