Tirado-Arreola et. al.

/Revista Latinoamericana el ambiente y las ciencias, 1 (1):50-69, 2010

HIDROCABUROS AROMTICOS POLICCLICOS: UNA AMENAZA POTENCIAL PARA LA SALUD

Pas. IQ Leslie Gabriela Tirado Arreola, Pas. QA Omar Del Jess Gonzlez Aragn, M. en C. Rolando Salvador Garca Gmez, Dra.-Ing. Carmen Durn Domnguez De Baza. UNAM, Facultad de Qumica, Laboratorios 301 a 303, Conjunto E, Paseo de la Investigacin Cientfica s/n, Ciudad Universitaria, Delegacin Coyoacn, 04510 Mxico D.F. Tels. 5622-5300 al 04. Fax. 5622-5303. Correo-e: mcduran@unam.mx

Resumen Entre los proyectos realizados con relacin al rea de proteccin ambiental a la salud destaca la inocuidad de los alimentos. En los laboratorios de Ingeniera y Qumica Ambientales de la Facultad de Qumica de la UNAM se han realizado estudios sobre la presencia de hidrocarburos aromticos policclicos en muestras de ostiones comerciales, alimentos asados de pollo y enlatados de mejillones. La identificacin y cuantificacin realizadas en estas investigaciones se bas en los mtodos UNEP-7 (1992) y EPA (1986), modificados por la UNAM, en los laboratorios de IQA y de QA empleando tcnicas como la cromatografa de gases, la espectrometra de masas y la espectrometra de infrarrojo. Se lograron identificar en ostiones al fenantreno, fluoranteno, pireno, criseno y benzo(a)pireno en concentraciones de 0.350.01, 0.960.26, 0.50.09, 0.860.09 y de 0.590.04 0.970.04, mg kg-1, respectivamente, y en los alimentos ahumados se registraron fluoranteno, pireno y benzo(a)pireno en un intervalo de concentracin que oscila entre 1.520.20 -4.780.41 mg/kg, 1.820.32 -5.530.62 mg/kg y de 0.620.0.05 0.970.0.04 mg kg-1, respectivamente. Por ello, se presentarn ahora algunos datos sobre la forma de determinar estos contaminantes en alimentos crnicos muestreados al azar en algunas zonas del rea metropolitana de la Ciudad de Mxico. En una de ellas, se encontr la presencia de 6 HAP, los cuales son: Fenantreno, pireno, benzo(k)fluoranteno, acenafteno, fluoreno y benzo(a)pireno. Tomando como ejemplos al pireno, al fenantreno y al benzo(k)fluoranteno se encontraron las concentraciones de 4.96, 1.02 y 1.56 mg kg-1, respectivamente. As mismo, para otra de las muestras se encontraron y cuantificaron

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pireno, fenantreno y benzo(a)pireno, con concentraciones de 3.75, 1.29 y 3.45 mg kg-1, respectivamente. La presencia de pireno en las muestras analizadas, es indicativa de que stas fueron sometidas a un proceso de ahumado, ya que este compuesto se genera a partir de la pirlisis de la madera a temperaturas relativamente elevadas (400C). Para comparar los resultados obtenidos de las muestras con las normas propuestas por la Unin Europea a travs de la Organizacin Mundial de la Salud, se encontr que se considera como lmite mximo permisible para los HAP en alimentos frescos o sin procesar 0.03 m kg-1, tomando como base al benzo(a)pireno. Este parmetro no ha sido fijado an para alimentos ahumados, aunque algunos pases como Francia, Alemania, Suiza y Austria han establecido valores de 1 g kg-1 para el benzo(a)pireno como mximo tolerable y la suma de todos los HAP presentes menor o igual a 5 m kg-1. Se puede ver que en las muestras analizadas, una de ellas contiene benzo(a)pireno y que su concentracin est muy por arriba de lo que proponen estos pases (3.45 mg kg-1 = 3450 g kg-1, ms de tres mil veces), lo cual puede afectar a largo plazo a la salud de quienes consumen este tipo de alimentos en exceso. PALABRAS CLAVE: Identificacin, cuantificacin, hidrocarburos aromticos policclicos, productos asados comerciales y/o al carbn, espectroscopia, cromatografa. PROBLEMTICA Los primeros antecedentes histricos documentados sobre compuestos que se dedicaban a limpiar chimeneas con el contacto constante del tizne de las chimeneas (Manahan, 2007).

carcinognicos ambientales datan desde hace ms de 200 aos y parten de las observaciones de Persivall Pott, en Inglaterra, un fsico ingls que asoci la elevada incidencia de cncer escrotal en los deshollinadores, es decir, jvenes

Posteriormente, en 1933, se realizaron estudios de la carcinognesis con la extraccin del benzopireno a partir del alquitrn de hulla (Albert, 1990). A partir de los estudios realizados por Doves (1954), reportados por Multon (1981), se

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abrieron nuevas lneas de investigacin enfocadas al estudio de la formacin y liberacin de estos compuestos en el ambiente, as como tambin de los compuestos transformacin (cncer). La presencia de los hidrocarburos responsables celular de la

crnicos y marinos e, incluso, tambin otro factor que origina a estos

compuestos es la forma de cocinarlos (ya sea directamente sobre el fuego, a la parrilla, a las brasas, a la lea, con o sin carbn, etc.) (Burdaspal et al., 2001; Valencia-Prez-Rea y Ruiz-Monterrubio, 2004). Dentro de los hidrocarburos

irreversible

aromticos policclicos (HAP) en los alimentos se ha constatado a travs de datos expuestos (Castillo, en 2001; importantes Valencia-

aromticos policclicos reportados en la literatura, slo se han comprobado las propiedades carcinognicas y/o

revisiones

mutgenas de algunos de ellos, lo cual ha despertado un inters particular en la comunidad cientfica. El benzo(a)pireno (BaP) es uno de los hidrocarburos aromticos policclicos ms conocido y ms estudiado debido a que se ha podido analizar con relativa facilidad en diferentes complejas propiedades y matrices ha ambientales tener Es

Prez-Rea y Ruiz-Monterrubio, 2004), en donde los orgenes de estos compuestos han sido relacionados ya sea con los residuos de la industria petrolera refinadora,

(prospectiva,

extractiva,

petroqumica) o simplemente de las condiciones de procesamiento a la cual son sometidos algunos de los alimentos de consumo frecuente entre la poblacin mexicana. Como ejemplo de ello puede citarse al proceso de ahumado, en donde los compuestos generados por la accin del humo son incorporados en la piel y en los tejidos grasos de productos

demostrado

carcingenas.

importante sealar que en pases de la Unin Europea del consideran benzo(a)pireno como modelo que la

deteccin puede

(BaP) de la

servir

presencia del resto de los hidrocarburos

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aromticos policclicos. La forma en que estos compuestos causan mutaciones radica en su ingreso al organismo, ya que se experimenta una activacin

hidrocarburos

aromticos

policclicos

clasificado dentro de la categora 2A por la Agencia Internacional de Investigacin del Cncer de Lyon, IARC (Burdaspal et al., 2001), lo cual indica evidencia en cuanto a su comportamiento como

metablica en las clulas de mamferos superiores, formando enlaces de tipo covalente con las macromolculas

agente carcinognico en animales de experimentacin y muy probablemente pueda serlo para el ser humano. De ah radica la importancia en cuanto a la identificacin y cuantificacin en

celulares, como el ADN, generndose errores durante la replicacin o

codificacin entre las bases pricas y pirimdicas iniciando as el proceso de mutacin entre las especies (Phillips, 1999). Las concentraciones en las que se han encontrado estos tipos de

alimentos de consumo humano. Un dato importante es que los alimentos

ahumados as como todos aquellos que son sometidos a un proceso trmico como el asado al carbn, presentan una relacin importante con la alta incidencia de cncer en el estmago entre las personas que los consumen

compuestos, dependiendo de la matriz bajo estudio, ha estado en funcin de varios factores destacndose la cercana de zonas industriales y/o el proceso de coccin del alimento (asado con o sin la adicin de algn agente externo como es el humo o sustancias voltiles que se impregnan en el alimento y las cuales son compuestos del carbn aromticos vegetal al

frecuentemente. As mismo, el producto resultante de la combustin de los hidrocarburos como son los combustibles de fuentes fijas y mviles, se han relacionado con el desarrollo de cncer en pulmn. Por otro lado, tambin es conocido que el benzo(a)pireno (BaP)

desprendidos

generarse el proceso de combustin). El benzo(a)pireno (BaP) es uno de los

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produce

daos en

citotxicos animales

y de

A continuacin se menciona el objetivo de esta fase de la investigacin:

teratognicos

experimentacin (Albert, 1990). Por ello, dada la problemtica anterior, en este estudio se plantea realizar un estudio sobre la presencia de estos hidrocarburos aromticos policclicos

Determinar la presencia y contenido de algunos policclicos hidrocarburos (HAP) en aromticos alimentos

sometidos a un tratamiento trmico (asados comerciales y/o al carbn).

reportados en la literatura como agentes carcingenos y/o mutgenos, en METODOLOGA En la Figura 1 se presenta la

alimentos sometidos a un proceso de asado a la parrilla (carne asada) y/o con la adicin o no de sustancias procedentes del carbn vegetal, como las hamburguesas a la parrilla y al carbn y las carnes asadas en tipo

metodologa seguida. Los equipos y materiales empleados durante el

desarrollo experimental se presentan en la literatura (Gonzlez-Aragn, 2007). Para la obtencin de las muestras de carnes al carbn, primeramente se llev a cabo una encuesta, en la cual se les pregunt a los consumidores el trmino de coccin que preferan, con la finalidad de conocer el trmino de grado de coccin de la carne, eligiendo para la fase analtica aquellas muestras de mayor preferencia. El cuestionario

arrachera,

tomados

diferentes

establecimientos fijos y clandestinos para, de esta manera, poder corroborar la presencia o ausencia de este tipo de compuestos en este tipo de alimentos y las cantidades en que posiblemente se encuentran, mtodos empleando para ello, y

espectroscpicos

cromatogrficos para su identificacin y cuantificacin.

empleado (Gonzlez-Aragn, 2007) y los resultados del universo encuestado

arrojaron los resultados presentados en

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la Tabla 1. En la Figura 2 se muestran los cortes de carne de acuerdo con la Tabla 1. Se eligieron, para esos cortes de carne, tres diferentes

establecimientos conocidos de

fijos cadenas

(restaurantes comerciales)

ubicados en la zona sur de la ciudad de Mxico.

Figura 1. Diagrama de bloques de la metodologa propuesta

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Tabla 1. Resultados de la encuesta realizada en forma aleatoria con personas que ingeran alimentos crnicos asados al carbn en establecimientos comerciales y clandestinos de la ciudad de Mxico (Gonzlez-Aragn, 2007).

Figura 2. Cortes de carne de vacuno con los trminos de coccin

Para las muestras de hamburguesas al carbn se eligieron tres establecimientos mviles al aire libre (puestos

mayor actividad industrial. En las Figuras 3 y 4 se observan las muestras de hamburguesas al carbn y carnes al carbn (tipo Arrachera),

ambulantes clandestinos) ubicados en la zona norte de la ciudad de Mxico, en donde se sabe que se lleva a cabo una

respectivamente, a las cuales se les realiz el anlisis de identificacin y

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cuantificacin de algunos de los HAP. Una vez adquiridas las muestras, se transportaron en bolsas de plstico

una temperatura de 60C durante 12 horas y molidas para obtener harinas que favorecieran la manipulacin de la

obscuras y bajo hielo al Programa de Ingeniera Qumica Ambiental y de

muestra. El producto obtenido de cada una de las muestras fue guardado en frascos de vidrio color mbar a una temperatura de 10C para su mayor conservacin. Se tomaron muestras para realizar siguiendo estandarizadas su anlisis las (AOAC, bromatolgico metodologas 1990). Era

Qumica Ambiental (ahora conocido como Laboratorios de Ingeniera Qumica

Ambiental y de Qumica Ambiental) de la Facultad de Qumica de la UNAM para proceder a su anlisis. Las operaciones unitarias que se siguieron con el objetivo de tratar la muestra despus de su adquisicin fueron las siguientes:

importante conocer el contenido de grasa ya que, segn la literatura, los lpidos al entrar en contacto directo con la flama se funden espontneamente formndose por pirosntesis hidrocarburos aromticos

Homogeneizacin, secado y molienda. Una vez obtenidas las muestras, se homogeneizaron cada una por separado en una licuadora marca Osterizer, a 300 rpm. La pasta fina obtenida fue secada a

policclicos (Derache, 1990).

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Extraccin, limpieza y fraccionamiento de los HAP La extraccin de los compuestos de inters se llev a cabo empleando el mtodo UNEP-7 (UNEP/IOC/IAIEA,

cromatogrfico, manteniendo en reflujo durante 8 horas. Como siguiente paso, se aaden 40 mL de KOH (0.7 M) en solucin metanlica y 60 mL de H2O en un matraz de bola de 500 mL con la finalidad de saponificar los lpidos

1993), realizando ligeras modificaciones segn lo propuesto por Valencia-PrezRea y Ruiz-Monterrubio (2004). Las muestras obtenidas se colocan en

presentes en la muestra, por lo que el extracto se mantiene durante tres horas adicionales en el reflujo. Finalmente, los extractos se transfieren en embudos de separacin de 500 mL y se extraen los compuestos de inters (50:50) con grado

cartuchos de extraccin de asbesto, se introducen en el equipo de extraccin Soxhlet, con la adicin de 250 mL de hexano:diclorometano (50:50) grado

hexano:diclorometano

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cromatogrfico en tres tiempos de 50 mL cada uno. Las fracciones se mezclan y se concentran evaporador a 5 mL al mediante vaco. un Los

adiciona 1 g de sulfato de sodio anhidro para eliminar el agua que pudiesen tener las muestras. La elucin de la fraccin aliftica se lleva a cabo empleando 20 mL de hexano la cual corresponde a la salida de los hidrocarburos alifticos, los

rotatorio

extractos obtenidos se almacenan en viales de color mbar bajo refrigeracin (10C), para su posterior anlisis. La limpieza extractos y fraccionamiento la obtencin se de de los los

hidrocarburos aromticos en general y los hidrocarburos aromticos policclicos

para

corresponden a la segunda fraccin obtenida diferentes mediante mezclas el de empleo de

hidrocarburos

aromticos

realiz

empleando el mtodo EPA 3630a (EPA, 1990), con ligeras modificaciones

disolventes

hexano:diclorometano (empleando 30 mL de una mezcla hexano:diclorometano (9:1) ms 20 mL de una mezcla

(Valencia-Prez-Rea y Ruiz-Monterrubio, 2004). Para ello se utilizan columnas cromatogrficas de 2 cm de dimetro interno por 30 cm de longitud, a las cuales se les colocan en el fondo un gramo de lana o fibra de vidrio con la finalidad de poder empacar los

hexano:dicloromentano (50:50) ms 20 mL de diclorometano), con la finalidad de variar la polaridad del eluyente. Se colectan las tres a las las fracciones mezclas cuales se

correspondientes

adsorbentes. Posteriormente, se colocan 8 g de slice y 8 g de almina (activadas a 200C durante 8 horas y desactivadas parcialmente con agua al 5% p/p), para transferirse a la columna en vasos de precipitado de 250 mL con hexano. Se

hexano:diclorometano

concentran bajo presin reducida hasta un volumen de 5 mL. Las fracciones obtenidas son almacenan en viales de color mbar bajo refrigeracin (-10C), para su posterior anlisis (Fotos 1-4).

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Identificacin y confirmacin de los HAP Para la identificacin y cuantificacin de los hidrocarburos aromticos policclicos, en esta fase de la investigacin

sus

siglas

en

ingls).

La

columna

cromatogrfica a emplearse ser una columna capilar (DB-5), de 30 m de longitud con un dimetro interno de 0.25 mm y de 0.25 m de espesor de capa de fase estacionaria de 5% fenil y 95% metilpolisilano. Las condiciones de

solamente se tomaron las muestras de carne de hamburguesas. Se emple un equipo de cromatografa de gases con detector de ionizacin de flama (FID, por

temperatura utilizadas en el equipo sern las utilizadas por Valencia-Prez-Rea y

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Ruiz-Monterrubio

(2004).

La

determinar a partir de la siguiente ecuacin.

concentracin de cada uno de los HAP identificados en las muestras se

y = mx+b
donde: y= rea bajo la curva m= pendiente de la curva x= concentracin de la muestra b= ordenada al origen

En caso de presencia de algunos de los compuestos de inters se realizar su confirmacin con un cromatgrafo de gases acoplado a un detector de masas. Las condiciones de operacin del

(Grfico 1), incluyendo una comparacin con respecto a los datos reportados por el Instituto Nacional de Nutricin Salvador Zubirn (ahora Instituto Nacional de Ciencias Mdicas y Nutricin,

detector de masas (MD800) sern las reportadas por Valencia Prez-Rea y Ruiz Monterrubio (2004). El modo de identificacin ser el de evaluacin

INCMyNSZ), en donde se aprecia que los porcentajes de humedad se ven

disminuidos en un 17%, mientras que los resultados de grasa aumentaron en un 9%. Asimismo, los porcentaje de protena se incrementaron en un 1%, por lo que se piensa que la disminucin de la humedad se debe al tratamiento trmico al que fue sometido la carne. Por otro lado, las posibles variaciones en cuanto al

selectiva de iones (MSI), con 4 ciclos/min. La confirmacin de los compuestos en estudio se realizar mediante la

identificacin de los iones moleculares correspondientes a cada compuesto en estudio frente a los obtenidos en los estndares de estos compuestos. RESULTADOS Y DISCUSIN Los resultados obtenidos del anlisis bromatolgico se muestran en la Tabla 2

contenido de grasa y protena pueden deberse al tipo de carne adquirida por el comerciante para hacer la carne de hamburguesas. Este seguimiento queda

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fuera del alcance de esta investigacin. En la Tabla 3 (Grfico 2) se aprecia la comparacin del anlisis qumico de las carnes cocidas al carbn con respecto a los reportados por el INNSZ. De la misma forma que pasa con las carnes de hamburguesa, porcentajes de se observa que se los

Asimismo

el

porcentaje

de

protena

disminuy en un 2%. Se puede decir tambin que la disminucin del contenido de humedad se debe al tratamiento trmico al que fue sometida la carne. En cuanto a los resultados de grasa y protena las posibles variaciones pueden deberse a la raza del animal y al tipo de corte que se emple para su consumo.

humedad

vieron

disminuidos en un 11%, mientras que los resultados de grasa aumentaron un 25%.

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Espectros de IR de los estndares a analizar En las Figuras 5 y 6 se observan las bandas caractersticas de IR de los HAP evaluados en las regiones de 3100-3000, 2000-1400 y de 900-700cm-1. Si se comparan los dos espectros obtenidos en la biblioteca del equipo, se puede observar la similitud entre ellos, debido a la similitud entre su estructura qumica. En las Figuras 7 y 8 se aprecian resultados preliminares de los espectros

de IR de una muestra de carnes cocidas al carbn y de las hamburguesas de res cocidas al carbn. Se observa en los espectros que se eluy una banda dbil en la regin de 3020 y se observaron varias bandas de mediana intensidad en 1600-1610 cm-1, correspondientes a la seal (bending, en ingls) de

compuestos aromticos, acompaados de algunos sobretonos caractersticos de estos compuestos en la regin de 600 cm-1.

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La segunda etapa de esta investigacin, que fue realizada durante la estancia acadmica del Programa de Verano de Estancias Cientficas y Tecnolgicas

de dos de las muestras de carne de hamburguesas. Los resultados obtenidos indicaron la presencia de tres HAP en cada una de ellas. Las Tablas 4 y 5 presentan los datos obtenidos de las muestras MH-1 y MH-2.

2008 de la primera autora, consiste en la identificacin y cuantificacin de los HAP

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Si estos datos se comparan con lo reportado por la Organizacin Mundial de la Salud, a travs de sus publicaciones (Environmental Health Criteria 202, 1998; Vives et al., 2001), en las que se considera que el lmite mximo permisible para los HAP en alimentos frescos o sin procesar es de 0.03 g kg-1 tomando como base al benzo(a)pireno ya que puede representar del 1 al 15% del contenido total de HAP en los alimentos. Como este parmetro no ha sido fijado an para alimentos ahumados, aunque algunos pases como Francia, Alemania, Suiza y Austria han establecido valores de 1 g kg-1 alimento, como mximo tolerable. En Espaa, debido a un problema con aceite comestible se

estableci una normativa que no permite ms de 5 1 g kg-1 aceite, como mximo tolerable de 8 HAP especficos, entre ellos el benzo(a)pireno. Se puede ver que la muestra MH2, que es la que present este HAP, est muy por arriba de lo que proponen estos pases (3.45 mg kg-1 = 3450 g kg-1, ms de tres mil veces para Francia, Alemania, Suiza y Austria). Esto indicara que el consumo de este tipo de alimentos en exceso puede afectar a largo plazo a la salud de quienes los ingieren.

CONCLUSIONES Recordando el objetivo de esta

investigacin de determinar la presencia y contenido de algunos hidrocarburos

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aromticos policclicos (HAP) en alimentos sometidos a un tratamiento trmico

Laboratorios del IQAyQA (ValenciaPrez-Rea 2004) para y Ruiz-Monterrubio, minimizar posibles

(asados comerciales y/o al carbn), de los resultados obtenidos en este estudio, incluyendo la parte realizada por la primera autora en su Programa de Verano de Estancias Cientficas y Tecnolgicas 2008, puede concluirse lo siguiente: Los resultados de grasa obtenidos, cuando se compararon con las Tablas del INCMyNSZ, indicaron que sus contenidos eran mayores en ambos casos (9% y 25% para carne de res de hamburguesa cocida al carbn y de la muestra de carne cocida al carbn tipo

errores del contenido de HAP ya que se absorberan ms de ellos en la grasa saponificada que se

separa Se lograron obtener los extractos de cada una de las muestras en los cuales se encontraban los

hidrocarburos policclicos.

aromticos Mediante

espectrometra infrarroja fue posible observar bandas caractersticas en las regiones de 3020 cm-1y se observaron varias bandas de

arrachera, respectivamente). Esto puede ser debido a la fraccin de la carne tomada en el caso de las hamburguesas, as como a la

mediana intensidad en 1600-1610 cm-1 correspondientes a la seal (bending, en ingls) de

compuestos aromticos, por lo que es necesario caracterizar y

variacin de la raza y de la zona de corte de la carne de res cocida al carbn. Esto hizo que en la

cuantificar su presencia mediante mtodos cromatogrficos (Garca, 2000) Se encontr la presencia de 6 HAP en dos de las muestras estudiadas

metodologa

propuesta

para

separar los HAP se empleara la modificacin propuesta en los

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de carne de hamburguesa, los cuales son: fenantreno, pireno,

sus iones: Se puede observar que el fenantreno presenta un ion

benzo(k)fluoranteno,

acenafteno,

molecular de 177, el pireno de 199, el benzo(k)fluoranteno de 251 y el benzo(a)pireno de 253. Si se considera que el lmite mximo permisible para los HAP en alimentos frescos o sin procesar es de 0.03 g kg-1 tomando como base al benzo(a)pireno ya que puede representar del 1 al 15% del contenido total de HAP en los alimentos (Environmental Health

fluoreno y benzo(a)pireno Al realizar la cuantificacin se

tuvieron datos reproducibles de 3 en una muestra y 3 en la otra, encontrando en la primera

concentraciones de 4.96, 1.02 y 1.56 mg kg-1, para pireno,

fenantreno y benzo(k)fluoranteno, respectivamente. As mismo, los cromatogramas de la muestra MH-2 permitieron encontrar las

Criteria 202, 1998) y como este parmetro no ha sido fijado an para alimentos ahumados, aunque algunos pases como Francia,

concentraciones de 3.75, 1.29 y 3.45 mg kg-1, y para pireno,

fenantreno

benzo(a)pireno,

respectivamente La comprobacin de la presencia de estos compuestos se efectu mediante el detector de masas en el modo selectivo de iones. En el equipo se tienen bancos de

Alemania, Suiza y Austria han establecido valores de 1 g kg-1 alimento, como mximo tolerable, las cantidades encontradas en esta investigacin son muy altas. En Espaa, debido a un problema con aceite comestible se estableci una normativa que no permite ms de 5 1 g kg-1 aceite, como mximo

informacin

computarizada

(biblioteca), con la que pueden identificarse los compuestos por

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tolerable de 8 HAP especficos, entre ellos el benzo(a)pireno. Se puede ver que la muestra MH2, que es la que present este HAP, est muy por arriba de lo que proponen estos pases (3.45 mg kg-1 = 3450 RECONOCIMIENTOS

g kg-1, ms de tres mil veces para Francia, Alemania, Suiza y Austria). Esto indicara que el consumo de este tipo de alimentos en exceso puede afectar a largo plazo a la salud de quienes los ingieren.

La primera autora agradece al Cocytech, Consejo de Ciencia y Tecnologa del Estado de Chiapas, la beca otorgada para realizar una estancia acadmica en el Programa de Verano de Estancias Cientficas y Tecnolgicas 2008. Asimismo, los autores agradecen a la joven estudiante de Qumica de la Universidad Autnoma de Ciudad Jurez, Elvia Macas Berumen, quien tambin particip en esta estancia acadmica de verano para 2008 bajo los auspicios de la Academia Mexicana de Ciencias con su XVIII Verano de la Investigacin Cientfica, la realizacin del anlisis de la tercera muestra de carne de hamburguesa y de un control interno para validar la confiabilidad, exactitud y precisin de la fase analtica.

REFERENCIAS AOAC (1990). Official Methods of Analysis. Association of Official Analytical Chemists. 30a Ed. AOAC, Washington, D.C. EEUU. Albert, L. (1990). Curso Bsico de Toxicologa Ambiental. Editorial Limusa. Pp. 247-277. Mxico D.F., Mxico. Burdaspal, P. A., Legarda, T. M. y Snchez, J. J. (2001). Revista de Tecnologa e Higiene de los Alimentos. Nm. 327, Pp.11-17. Castillo, P. (2001). Determinacin de hidrocarburos aromticos policclicos (HAP) en muestra de ostiones. Tesis profesional, UNAM, Facultad de Qumica. Pp. 19-21. Mxico D.F., Mxico. Derache, R. (1990). Toxicologa y Seguridad de los alimentos. Editorial Omega S.A. Pp. 295-310. Barcelona, Espaa. EPA. (1990). Method 3630a. Silica gel cleanup. Agencia de Proteccin Ambiental de los Estados Unidos de Amrica. Pp. 1-7. Washington, D.C. EEUU. Garca, R. S. (2000). Estudios de espectroscopas de fluorescencia y masas en suelos contaminados Tesis de Maestra. UNAM, Programa de Maestra y Doctorado en Ciencias Qumicas, Facultad de Qumica. Pp. 3-30. Mxico D.F., Mxico.

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