INFORME 5: DROGAS CON CARBOHIDRATOS DROGAS CON POLISACRIDOS: HOMOGNEOS Y HETEROGNEOS

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DROGAS CON CARBOHIDRATOS: Drogas con polisacridos: homogneos y heterogneos

Kenneth Chaupis Pahuachn, Miguel Csser Carpio, Everando Huari Meja, David Velsquez Villafuerte, Walther Vicente Mallma. (Mesa 2- Grupo Mircoles) LABORATORIO DE FARMACOGNOSIA Y MEDICINA TRADICIONAL, FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUMICA, UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS. RESUMEN

La siguiente prctica de laboratorio tuvo por objetivo la identificacin de polisacridos heterogneos y homogneos con muestras otorgadas por la ctedra de farmacognosia. Mtodos: Se realiz anlisis organolptico y anlisis cualitativo para cada muestra; en primer lugar reacciones de caracterizacin de almidn, reacciones de identificacin de celulosa; reacciones de caracterizacin de pectinas, reacciones de caracterizacin de mucilagos, reacciones de identificacin de gomas del tipo karaya. Resultados: Todos los resultados obtenidos luego del anlisis cualitativo para la identificacin de los respectivos tipos de polisacridos de las muestras problema, fueron positivos y en algunos casos valores opuestos con respecto a los estndares comparados. Conclusin: los resultados de la reaccin de identificacin de los tipos de polisacridos en las muestras problema fueron corroborados con la gua de prctica de la ctedra de farmacognosia. Palabras clave: polisacridos, heterogneos, homogneos, farmacognosia, reacciones de identificacin, almidn, celulosa, pectina, gomas, muclagos, anlisis cualitativo y estndares.

CARBOHYDRATE DRUGS: Drugs Polysaccharides: homogeneous and heterogeneous

ABSTRACT

The next lab was aimed at the identification of heterogeneous and homogeneous polysaccharide with samples provided by the professor of pharmacognosy. Methods: Sensory analysis and qualitative analyzes for each sample: first characterization reactions of starch, cellulose identification reactions, reactions characterization of pectins, mucilages characterization reactions, reactions of the type identification karaya gums. Results: All the results obtained after the qualitative analysis for identification of the respective types of polysaccharides of the test samples were positive and sometimes conflicting values with respect to the standards compared. Conclusion: The results of the reaction identification of the types of polysaccharides in the test samples were corroborated with the practice guidelines of the department of pharmacognosy. Keywords: polysaccharides, heterogeneous, homogeneous, pharmacognosy, identification reactions, starch, cellulose, pectin, gums, mucilages, qualitative analysis and standards. 1

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INTRODUCCIN
Los polisacridos se forman por condensacin de un elevado nmero de monosacridos (ms de 10 monosacridos o derivados) que estn unidos por enlace glucosdico. La distribucin, secuencial o no, de fragmentos de polisacrido condicionan sus propiedades fisicoqumicas y su uso como viscozantes, gelificantes, espesantes y estabilizantes. Generalmente Son sustancias solubles en agua e insolubles en disolventes orgnicos, lo cual permite su separacin mediante extracto acuoso y su posterior precipitacin con alcohol para aislarlos y purificarlos. La solubilidad en agua de los diferentes tipos de polisacridos es variable y dependiente de una serie de factores como la estructura del polisacrido, la composicin de monosacridos y, del tamao y peso molecular del polisacrido. (1) todos estos factores, antes mencionados, sern tomados en cuenta para el anlisis en el laboratorio. Se clasifican, segn la naturaleza de los monosacridos, en homogneos y heterogneos: Entre los polisacridos homogneos procedentes de microorganismos encontramos el dextrano y la goma xantan, mientras que a partir de algas podemos citar principalmente al acido algnico (obtenido de las algas pardas) que se utiliza como adelgazante ya que tienen efectos saciante y laxante; los carragenanos y el agar-agar (de algas rojas). Tambin podemos encontrar polisacridos procedentes de plantas superiores siendo el ejemplo ms caracterstico la celulosa y el almidn. Entre

los polisacridos heterogneos encontramos las gomas (karaya, tragacanto y arabica), mucilagos y pectinas; cabe destacar que en la actualidad tienen una gran importancia en la dieta las denominadas fibras dietticas, que en realidad lo constituyen paredes de clulas vegetales formadas por diversos componentes (celulosas, pectina entre otros) como productos ricos en la fibra diettica podemos mencionar los salvados de trigo, centeno y el arroz integral. (2) Los polisacridos tienen diferentes propiedades teraputicas de inters: 1. Ejercen una accin protectora sobre las mucosas y la piel irritadas. Dicha accin protectora se debe a varios factores: a) una accin mecnica de recubrimiento de las zonas irritadas e inflamadas, aislndolas de los agentes agresivos. b) una accin antiinflamatoria. c) un efecto emoliente: rehidratan y suavizan la zona irritada debido a su capacidad para captar agua. 2. Son laxantes. Esta accin mecnica es debida a su capacidad de absorber agua, lo cual aumenta el volumen del bolo fecal y la motilidad intestinal 3. Presentan una accin inmunomoduladora: es decir, son capaces de estimular y aumentar la respuesta inmunitaria del organismo. Por ello son interesantes en el desarrollo de antitumorales y en la profilaxis y tratamiento de enfermedades infecciosas, sobre todo de tipo vrico. Los polisacridos tambin tienen aplicaciones interesantes en tecnologa farmacutica como excipientes, espesantes y aglutinantes. (1)

INFORME 5: DROGAS CON CARBOHIDRATOS DROGAS CON POLISACRIDOS: HOMOGNEOS Y HETEROGNEOS POLISACRIDOS Son estructuras formadas por ms de 10 monosacridos, unidos por enlaces glucosdicos. Son generalmente macromolculas y en ciertos casos, incluso se desconoce su peso molecular. (2) Funciones principales:(2) Componentes plsticos con una funcin estructural para dar rigidez a las paredes, como la celulosa y la hemicelulosa. Sustancias de reserva energtica, como el almidn, el glucgeno y la inulina. Sustancias que evitan y previenen la desecacin de los tejidos vegetales, como los muclagos. Sustancias de defensa que protegen del ataque de microorganismos o insectos, como las gomas. Clasificacin:(2) Segn la naturaleza:(2) Homogneos: Proceden de la polimerizacin de un tipo de monosacridos (osa), como el almidn y la celulosa. Heterogneos: Poseen diferentes osas o derivados, como las gomas y muclagos. Segn el tipo de cadena:(2) Lineales: Como la celulosa. Ramificados: Como el almidn. Segn la distribucin de osas en el polisacrido:(2) Con secuencia peridica: Cuando un fragmento se repite a lo largo del polisacrido como en el caso de la celulosa. Con secuencia interrumpida: Cuando los fragmentos que se repiten llevan 3

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intercalados fragmentos heterogneos. Sin secuencia o con secuencia heterognea: No se produce una repeticin de fragmentos en al estructura del polisacrido.

Principales polisacridos procedentes de vegetales superiores (2) Celulosa: Se encuentra en las membranas celulares, donde aporta rigidez al vegetal. Almidn: Denominado fcula, sustancia de reserva de los vegetales. Gomas: Exudados vegetales. Son resultado de la agresin al vegetal por la picadura de un insecto, incisin artificial, desecacin de la savia, etc. Muclagos: Productos fisiolgicos del vegetal. Se localizan en clulas mucilaginosas y se encargan de retener el agua y contribuir con el proceso de germinacin. Pectina: Se localizan en la laminilla media de la membrana celular de ciertos frutos y races. Proporcionan azcares y cidos grasos cuando se degradan los frutos.

INFORME 5: DROGAS CON CARBOHIDRATOS DROGAS CON POLISACRIDOS: HOMOGNEOS Y HETEROGNEOS MATERIALES Y MTODOS: R. Molish R. Antrona Agua caliente y fra Solucin de yodo 2.5% Microscopio Porta objetos Solucin de KI 40% Solucin tornasol H2SO4 80% H2SO4 60% Acetona Capsula de porcelana Mechero Cristales de floroglucinol HCl CC HCl 10% HCl diluido KOH 5% Y 2% NaOH 3N Ba (OH)2 10% Alcohol Potencimetro Subacetato de plomo neutro, bsico Acido tnico Acido oxlico 10% Etanol (alcohol 95%) FeCl3 Papa Chuo Algodn Yute Pectina estndar Granadilla Goma Karaya Emoliente (linaza)

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MTODOS POLISACARIDOS HOMOGNEOS ALMIDN: Ensayo con papa y chuo OBTENCIN 1.- Se ralla, exprime con una tela, deja sedimentar, lava por decantacin a la papa; se coge una pequea muestra (MP) y se hace las siguientes pruebas: (3) Reacciones generales MOLISH 0.5ml de MP +0.5ml de reactivo A y B Anillo purpura en la base

R.Antrona

0.5ml de MP +0.5ml de sol. reactivo

Color verde azulado en la base

Reacciones de identificacin Solubilidad: Se combina 0.5g de MP con 0.5mL de agua caliente se observa que solubiliza y se observa la formacin de un engrudo. Cuando se utiliza agua fra no solubiliza, se forman pelotas.(3)

INFORME 5: DROGAS CON CARBOHIDRATOS DROGAS CON POLISACRIDOS: HOMOGNEOS Y HETEROGNEOS Solucin de yodo 2.5%: Se mezclan 0.5g de MP con gts de R. yodo 2.5%, se forma un complejo azul en caliente y en frio.

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Al quemar el yute en una capsula se observo la salida de mucho humo y ceniza negra.

Yodo en cido sulfrico: Al empapar las fibras con la solucin de lugol se le deja secar y luego se le aade unas gotas de H2SO4 80% En el caso del algodn se tio azul. En el caso del yute no cambio de color. Floroglucinol: A las fibras se le aade un poco de cristales de floroglucinol y unas gotas de HCl. Las fibras de algodn no colorearon. Las fibras de yute se tieron de rojo. KOH 5%: Se le adiciona unas gotas de KOH 5% a las fibras y se observa que las fibras de algodn y las de yute no solubilizan.

Observacin microscpica: Se prepara una solucin en la placa porta objetos, se observ corpsculos incoloros, presenten estras claras y oscuras. Reaccin de pureza Determinacin de cloro: A 0.1g de MP se le aade una gota de KI 40% Acidez: A 0.1g de muestra humectada se le aade 2 gotas de solucin tornasol, se observa una coloracin rojo-vinosa.

POLISACRIDOS HETEROGENEOS PECTINA (3) Ensayo con pectina estndar y pectina de granadilla Reacciones de caracterizacin de pectinas NaOH : A 0.5mL de MP se le aade 0.5 mL de Ba (OH)2 10%, en el caso de la P.de granadilla se forma un pp. Amarillo gelatinoso, y en el caso de la P. estndar no ocurre esto. Ba(OH)2 10% : A 0.5mL de MP se le aade 0.5 mL de NaOH 3N, en el caso de la P.de granadilla se forma un pp. Blanco, y en el caso de la P. estndar no ocurre esto.

CELULOSA Ensayo con algodn y yute Solubilidad: (3) Se coge la fibra y se le somete a 3 soluciones diferentes: H2SO4 80%algodn (insoluble); H2SO4 80%yute (insoluble) H2SO4 60%... algodn (insoluble); H2SO4 60%yute (insoluble) Acetona.. Algodn (insoluble); Acetona.. yute (insoluble) Ignicin: Al quemar el algodn en una capsula se observo la salida de poco humo y dejo ceniza negra.

INFORME 5: DROGAS CON CARBOHIDRATOS DROGAS CON POLISACRIDOS: HOMOGNEOS Y HETEROGNEOS Formacin de gel: A 0.5mL de MP se le aade 2.5 mL de alcohol, en la P.de granadilla y la P. estndar se forma un gel incoloro. Formacin de acido pctico: A 2 mL de MP se le aade 1mL de KOH 2%, se lleva a ebullicin y luego se deja enfriar, se le adiciona HCl diluido, se le hace ebullir y luego se le deja enfriar. En el caso de la P. de granadilla se forma precipitado gelatinoso, blanco y floculanto. En el caso de la P. estndar esto no ocurre. GOMAS (3) Ensayo con goma Karaya y goma Arbiga Se olfatea la MP y se descartan algunas reacciones. Reaccin de azucares reductores: 0.5g de MP y 1mL de HCl diluido se lleva a bao mara por 15 minutos , se neutraliza y luego se realiza las siguientes reacciones. pp blanco al 2%: 1ml de goma al 2% + subacetato de plomo, se observ pp blanco pp blanco al 10%: 1ml de goma al 10% + subacetato de plomo, no se observ pp blanco. Reaccin de iodo:

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A 0.5g de MP se le aade gotas de iodo al 2.5%, no se colorea. Reaccin de FeCl3: A 0.5g de MP se le aade gotas de R.FeCl3, se observa que no reacciona. MUCILAGOS (3) Ensayo con emoliente (linaza) Reacciones de caracterizacin de mucilagos Acetato de plomo neutro: A 0.5mL de MP se aade R. acetato de plomo neutro, se produjo un precipitado gelatinoso incoloro. Acetato de plomo bsico: A 0.5mL de MP se aade R. acetato de plomo bsico, se produjo un precipitado gelatinoso blanco. Acido tnico: A 0.5mL de MP se aade gotas de acido tnico, se produjo un precipitado gelatinoso. Etanol: A 0.5mL de MP se aade 0.5mL de alcohol de 95, se vio que no forma un pp. Translcido. Acido oxlico: A 0.5mL de MP se aade 0.5mL de acido oxlico 10%, se produce un precipitado gelatinoso. Lugol: A 0.5mL de MP se aade gotas de R. lugol, se tio de azul-rojizo.

INFORME 5: DROGAS CON CARBOHIDRATOS DROGAS CON POLISACRIDOS: HOMOGNEOS Y HETEROGNEOS RESULTADOS ANALISIS CUALITATIVO POLISACARIDOS HOMOGENEOS ALMIDON MUESTRA PROBLEMA: papa/chuo REACCIONES MOLISH ANTRONA SOLUBILIDAD RESULTADOS PAPA CHUO + + + + Soluble: Soluble: covalente caliente Insoluble: Insoluble: frio frio + + Corpsculo s incoloros de forma ovalada Coloracin rojo vinosa Corpsculo s incoloros de forma ovalada Coloracin rojo vinosa

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POLISACARIDOS HETEROGENEOS PECTINA MUESTRA: REACCIONES RESULTADOS Pectina Pectina estndar (granadilla) NaOH + Ba(OH)2 10% + FORMACION + + DE GEL FORMACION + DE ACIDO PECTICO GOMA REACCIONES GOMA KARAYA SOLUBILIDAD En agua: soluble En alcohol: insolubl e Con presenc ia de restos celulare s

SOLUCION DE YODO 2.5% OBSERVACION MICROSCOPICA

RESULTADOS GOMA GOMA TRAGACA ARABICA NTO

DETERMINACIO N DE CLORO ACIDEZ

CELULOSA MUESTRA PROBLEMA: algodn y yute REACCIONES RESULTADOS Algodn yute SOLUBILIDAD Solo con Solo con H2SO4 al H2SO4 al 80% 80% y 50%, y acetona IGNICION Ceniza Ceniza negro, poco negro, humo y poco olor humo y olor YODO EN ACIDO Coloracin No SULFURICO azul colorea FLOROGLUCINOL + no tie + se tie rojo KOH 5% + insoluble + insoluble 7

OBSERVACIO NES AL MICROSCOPIO

INFORME 5: DROGAS CON CARBOHIDRATOS DROGAS CON POLISACRIDOS: HOMOGNEOS Y HETEROGNEOS REACCIONES ACETATO DE PLOMO NEUTRO ACETATO DE PLOMO BSICO ACIDO TNICO ETANOL ACIDO OXLICO LUGOL RESULTADOS + + + + + +

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MUCILAGO MUESTRA: emoliente

REACCIONES

REACCIN DE AZUCARES REDUCTORES PRECIPITADO BLANCO AUSENCIA DE PRECIPITADO BLANCO REACCIN CON YODO/ AUSENCIA DE COLORACIN REACCIN CON FeCl3

REACCIONESRESULTADO GOMA KARAYA -

+ +

Discusin: Al igual que el almidn estndar (chuo) otorgada por el laboratorio, la muestra de almidn presente en la papa tuvo resultados equivalentes a los valores dados por la gua de prctica de laboratorio. En el ensayo de ignicin del algodn segn la separata del laboratorio la ceniza es blanca, pero en la prctica se observ que era de color negro,
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posiblemente porque este algodn tal vez es adulterado industrialmente. A diferencia de la pectina patrn otorgada por el laboratorio, la pectina obtenida en el laboratorio, de acuerdo a los procedimientos citados en la gua de prcticas, si reaccion de manera positiva a todas las pruebas de reconocimiento. La muestra de goma analizada en el laboratorio result ser goma arbica debido a que la mayora de reacciones realizadas dieron positivas, adems que la muestra problema no presenta el olor caracterstico de la goma karaya, olor que es semejante al vinagre. En cuanto a la goma tragacanto solo la nica reaccin que dio positivo fue al tratar la muestra (1mL de goma al 10%) con acetato de sodio bsico reacciono dando un precipitado blanco que posiblemente se deba a que tanto la goma tragacanto como la goma arbica poseen en su composicin la arabinosa. La goma arbica a comparacin de las otras gomas, posee en su composicin sal de calcio, cido arbico, lactosa, arabinosa, oxidasas y arabina; la serie de reacciones realizadas es especifico para el reconocimiento de la misma. El nico inconveniente que se present, para su anlisis, fue en la reaccin de azcares reductores, debido a que es un procedimiento muy detallado donde la muestra se trata con HCl y despus es sometido a Bao Mara durante 15 minutos y posteriormente se neutraliza para proceder a realizar la reaccin de azucares reductores ,hay que tener en cuenta la temperatura que se encuentre en Bao Mara, temperatura que ser necesario para que se produzca la hidrlisis, a una temperatura constante. Quiz al tratar la muestra a fuego directo, altero la reaccin de hidrolisis,

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puesto que se modifico la temperatura, dando como resultado una variacin en el anlisis. En la determinacin de muclagos se utiliz como muestra problema la linaza que luego de hervir semillas en agua por media hora y luego de dejarlas enfriar, se procedi a realizar las reacciones con acetato de plomo neutro, acetato de plomo bsico, cido tnico, etanol, cido oxlico y lugol. Todas las reacciones resultaron positivas las cuales coincidieron con la bibliografa consultada. Es importante mencionar que en el ensayo con lugol, se observ la presencia de dextrinas, que se reconoci por zonas de coloracin roja; pero adems se observ la presencia de algunos pequeos puntos de color azul, los cuales indican que en la muestra de linaza tambin contenan trazas de almidn. Conclusiones: Los resultados obtenidos de la muestra de almidn analizada presente en la papa cumplen con las caractersticas descritas en la gua de prctica y fueron confirmadas con el estndar (chuo). El algodn analizado no es puro. La goma karaya se caracteriza por tener el olor semejante al vinagre La goma tragacanto como la goma arbica poseen en su composicin la arabinosa.
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La muestra de linaza contiene muclagos adems de la presencia de dextrina y trazas de almidn. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS (1) Kuklinski C. Farmacognosia, estudio de las drogas y sustancias medicamentosas de origen natural. Barcelona: Ediciones Omega S.A; 2000. Pg. 62-64 (2) Kuklinski C. Farmacognosia, estudio de las drogas y sustancias medicamentosas de origen natural. Barcelona: Ediciones Omega S.A; 2000. Pg. 62-74. (3) Ctedra de farmacognosia y medicina Tradicional, gua de prctica- Farmacognosia,2012.