La cromatografa de intercambio inico (o cromatografa inica) es un proceso que permite la separacin de iones y molculas polares basado en las propiedades

de carga de las molculas. Puede ser usada en casi cualquier tipo de molcula cargada, incluyendo grandes protenas, pequeos nucletidos y aminocidos. La solucin que debe inyectarse es usualmente llamada "muestra" y los componentes separados individualmente son llamados analitos. Es usada a menudo en purificacin de protenas, anlisis de agua o control de calidad.

Principios
La cromatografa de intercambio inico conserva los analitos basandse en las interacciones de Coulomb. La fase estacionaria muestra en la superficie grupos funcionales inicos que interactan con iones de carga opuesta del analito. Este tipo de cromatografa se subdivide a su vez en la cromatografa de intercambio catinico y cromatografa de intercambio aninico:

La cromatografa de intercambio catinico retiene cationes cargados positivamente debido a que la fase estacionaria muestra un grupo funcional cargado negativamente, como un cido fosfrico La cromatografa de intercambio de aniones retiene aniones usando grupos funcionales cargados positivamente, como un catin de amonio cuaternario.

R-A-H+ + M+ + B- <--> R-A-M+ + H+ + B-

Separacin de protenas
Las protenas tienen numerosos grupos funcionales que tienen cargas postivas y negativas. La cromatografa de intercambio inico separa las protenas de acuerdo a su carga neta, la cual depende la composicin de la fase mvil. Ajustando el pH o la concentracin de iones de la fase mvil, varias molculas de protena pueden ser separadas. Por ejemplo, si la protena tiene una carga positiva con un pH de 7, entonces puede unirse a una columna cargada negativamente, mientras que una protena con carga negativa no lo podra hacer. Tambin podra eliminarse cambiando el pH para que la carga neta de la protena sea negativa. La elucin por el cambio de la fuerza inica en la fase mvil tiene un efecto ms sutil, trabaja como iones de la fase mvil interactuando con los iones inmovilizados en preferencia sobre estos en la fase estacionaria. Estos "escudos" de la fase estacionaria de la protena, (y viceversa), y permite a la protena eluirse.

Tcnica tpica
Un muestra es introducida, de forma manual o con autosampler, dentro de un ciclo de muestras de volumen conocido. Una solucin buffer acuosa conocida como fase mvil del bucle a la columna que contiene alguna forma de material en fase estacionaria. Esto es tpicamente una resina o matriz de gel que consiste en agarosa o celulosa unido a grupos funcionales cargados. Los analitos objetivo (aniones o cationes) son conservados en la fase estacionaria pero pueden ser eliminados incrementando la concentracin de especies de similar carga que pueden desplazar los iones analitos de la fase estacionaria. Por ejemplo, en la cromatografa de intercambio catinico, los analitos cargados

positivamente pueden ser desplazados agregando iones de sodio cargados positivamente. Los analitos de inters pueden entonces ser detectados de varias maneras, tpicamente por conductividad o por absorcin de luz UV/Visible. Para controlar un sistema CI, usualmente es necesario un Sistema de Datos Cromatogrficos (Chromatography Data System, CDS). Adems de los sistemas CI, algunos de estos CDS tambin pueden controlar sistemas de cromatografa de gas y HLPC
Esta cromatografa est basada en las interacciones electrostticas que se producen entre los grupos ionizables de los productos a separar y los grupos cargados unidos a un soporte inerte (fase estacionaria). Existen dos clases principales de soportes (cambiadores), segn el tipo de grupos enlazados que posea: Catinicos: con grupos cargados negativamente y que intercambian iones del medio con carga positiva. Aninicos: con grupos positivos y que intercambian iones negativos. Los grupos cargados de la matriz insoluble determinan el tipo y la fuerza del cambiador. La fase cargada inmvil est inicialmente neutralizada por cationes o aniones (contraiones), dependiendo de su naturaleza. Cuando la mezcla inica a separar se pone en contracto con la fase inmvil, en condiciones oportunas de fuerza inica y pH, se produce el intercambio inico formndose sales y asociaciones inicas entre la fase estacionaria y la mvil: Los grupos fenlico, carboxilo y sulfnico se utilizan como cambiadores catinicos. Los grupos amino, aliftico y aromtico, se utilizan como cambiadores aninicos. Este tipo de cromatografa se usa para la separacin de aminocidos, pptidos, protenas, nucletidos y, en general, para los compuestos que tengan naturaleza inica. En clnica, se utilizan para la separacin de hemoglobinas, isoenzimas, esteroides, etc.