Filire BioIndustrie-ESTA Q1:

Epreuve denzymologie

Anne 2008-2009

1- Ecrire lquation de Michaelis-Menten et en dduire celle de lineweaver-Burk. 2- Dfinir Vmax et Km et montrer comment les obtenir graphiquement partir des reprsentations V versus [S] et 1/V versus 1/[S]. 3- Dcrire les effets des inhibiteurs comptitifs et non comptitifs sur la cintique des ractions enzymatiques. Q2: Les cintiques dune raction enzymatique en prsence et en absence de diffrents inhibiteurs ont permis de tracer les courbes de la figure ci-contre. Identifier les courbes correspondantes : Absence dinhibiteur Inhibiteur comptitif Inhibiteur non comptitif Inhibiteur incomptitif. Q3: L'ure (O=C(NH2)2 ) peut tre dcompose en CO2 et NH4+. Des tubes contenant diffrentes concentrations d'ure et 0,1 g d'urase (sauf le tube 12) ont t incubs pendant 10 min. 30C. Aprs incubation, la concentration de NH4+ a t dtermine. Les rsultats sont prsents dans le tableau suivant : Tube No. 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Ure (mM) 1.0 2.5 5.0 10 25 50 100 500 1000 2000 4000 4000 NH4+ (mol) 0.10 0.20 0.40 0.68 1.20 1.61 1.92 2.26 2.32 2.35 2.36 0.00

1- quelle tait la vitesse de raction dans le tube 5 (exprimez la vitesse en mol/min)? 2- Pourquoi ny a-t-il pas eu production de NH4+dans le tube 12 ? 3- Dans cette exprience quels sont les paramtres dont dpendait la vitesse de raction ?

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4- Quels changements dans le contenu des tubes pourraient-il vous donner une plus grande vitesse de raction ? Q4: Ltude de la cintique dune raction enzymatique a permis dobtenir les rsultats du tableau 1. Les concentrations de substrat et les vitesses sont exprimes en M et mol/min respectivement. La concentration denzyme utilise est gale 10-3 mol Tableau 1 : 1/[S] 400000 250000 100000 50000 25000 10000 500 100 1/V 0,035714 0,025 0,01428 0,010526 0,008928 0,007813 0,00719 0,00714

1- dterminer Km et Vmax. 2- dfinir et calculer la constante catalytique. 3- dfinir et calculer lefficacit enzymatique.