DIAGNSTICO DE LA INFECCIN POR EL VIH El diagnstico definitivo de la infeccin por el VIH slo puede establecerse por mtodos de laboratorio,

ya que en ningn caso las manifestaciones clnicas son lo suficientemente especficas. Los mtodos directos detectan al propio virus o alguno de sus componentes, como protenas o cidos nucleicos, mientras que los indirectos reconocen los anticuerpos especficos producidos por el sistema inmunitario. La deteccin permite reconocer a las personas infectadas, constituye una ayuda esencial en el seguimiento de los pacientes para conocer el pronstico de la enfermedad y la eficacia del tratamiento utilizado.

MTODOS INDIRECTOS La deteccin de anticuerpos especficos anti-VIH es la forma habitual de diagnosticar una infeccin por VIH. Los mtodos se dividen en: a) pruebas de screening, diseadas con un mximo de sensibilidad para detectar todas las muestras positivas, tiene un 99% de sensibilidad

b)

pruebas confirmatorias, caracterizadas por su especificidad y que permiten asegurar la positividad de una muestra previamente reactiva con un test de screening. Presenta 95% especificidad.

Pruebas de screening Las tcnicas inmunoenzimtica (EIA) son las ms empleadas debido a su metodologa simple, alta sensibilidad, nivel de automatizacin y diseo para realizar un gran nmero de tests de forma simultnea. Existen 4 generaciones siendo la cuarta Estas tcnicas tenan una mejor especificidad pero planteaban problemas de sensibilidad en el diagnstico de la infeccin aguda, debido a que detectaban la seroconversin de seis a doce semanas despus de producirse la infeccin. Para resolver esta cuestin se han diseado tcnicas que detectan en una misma prueba anticuerpos de distinta clase (IgG, IgM IgA) utilizando como antgenos protenas recombinantes o pptidos sintticos especficos del VIH-1 (a veces asociados con otros especficos del VIH-2). De este modo se consigue reducir el periodo ventana a tres semanas (ensayos de tercera generacin). Los ELISA de cuarta generacin permiten la deteccin de antgeno y anticuerpos desde la segunda semanas de la infeccin. Aunque estos ensayos tienen una excelente sensibilidad para la deteccin de casos de infeccin aguda, pierden algo de sensibilidad analtica en cada uno de sus componentes, de modo que el umbral de deteccin de antgeno es mayor, y lo mismo ocurre con los anticuerpos. De cualquier modo en la comparacin con ELISA de tercera generacin demuestra una sensibilidad del 100% y una especificidad del 99,7-100% Existen otras pruebas que caracterizadas por la obtencin de resultados en menos de 30 minutos. Son muy tiles aplicados en situaciones que requieren un resultado inmediato, como trasplantes, accidentes laborales o antes del parto en una embarazada que no ha sido controlada con respecto a la infeccin por el VIH. Suele tratarse de tcnicas en dot blot. En el caso de las tcnicas inmunocromatogrficas se requiere simplemente la adicin de la muestra que reaccionar con los distintos reactivos al ser arrastrada por una solucin tamponada en una tira de papel. Los tests de screening tambin pueden ser realizados a partir de muestras de saliva y orina, para lo cual existen mtodos adaptados, con la ventaja que supone sobre la muestra de suero en cuanto a facilidad en la obtencin, menor riesgo de contagio accidental y coste econmico.
Pruebas de confirmacin

Pruebas de confirmacin Las muestras positivas en la prueba de screening requieren ser confirmadas con el Western blot gold standard, la inmunofluorescencia indirecta (IFI) o la radioinmunoprecipitacin (RIPA). El WB es el mtodo recomendado y permite discriminar, por la aparicin de bandas reactivas, frente a qu antgenos vricos se dirigen los anticuerpos presentes en la muestra. La interpretacin del WB se puede realizar segn diversos criterios aunque el ms aceptado es el de la OMS que exige la presencia de al menos dos bandas de la envoltura. La muestra negativa implica una ausencia de bandas reactivas y cualquier situacin intermedia se interpreta como reaccin indeterminada

La reactividad indeterminada puede ocurrir en casos de seroconversin reciente en las que an no han aparecido todas las bandas, en recin nacidos de madres seropositivas, estn infectados o no, y en pacientes con enfermedad avanzada y grave deterioro inmunolgico, infeccin por el VIH-2 o por un subtipo del VIH-1 distinto al habitual. La hipergammaglobulinemia en individuos africanos, por estimulacin antignica inespecfica, as como tambin es posible la reactividad cruzada con enfermedades autoinmunes, en pacientes con WB negativo se debe repetir el test a los 3-6 meses siendo recomendable utilizar mtodos de diagnstico directo. Una alternativa al WB es el inmunoensayo lineal, consistente en pegar a una tira denitrocelulosa diversos antgenos del VIH. Su sensibilidad es similar al WB y presenta menos reacciones cruzadas. Las tcnicas de IFI y RIPA, debido a su subjetividad y complejidad tcnica, respectivamente, no se consideran adecuadas para el uso rutinario como mtodo confirmatorio. MTODOS DIRECTOS Se incluyen el cultivo vrico, la determinacin de antgeno p24 en plasma o suero y la demostracin de genoma vrico mediante tcnicas moleculares. Cultivo celular Aunque es la tcnica ms especfica para el diagnstico de la infeccin su utilizacin suele reservarse para estudios bsicos de variabilidad gentica, epidemiologa molecular, patognesis vrica o resistencia a frmacos, debido a la complejidad y riesgo que supone su realizacin. El mtodo consiste en un cocultivo de clulas mononucleares de sangre perifrica del paciente junto a otras del mismo tipo procedentes de donantes. El cultivo se considera positivo por la demostracin del efecto citoptico o la deteccin de productos vricos como el antgeno p24 o la transcriptasa inversa. Antigenemia de p24 El antgeno p24 de la cpside del VIH se detecta en suero o plasma mediante una reaccin de ELISA, es un marcador precoz de infeccin aguda por VIH. A lo largo de la infeccin su deteccin es variable debido al incremento de anticuerpos anti-p24 neutralizantes o a la escasa replicacin del virus. Las tcnicas que rompen los inmunocomplejos formados por el antgeno p24 y su anticuerpo aumentan la sensibilidad de la determinacin y ha sido propuesto para monitorizar el tratamiento antirretroviral en pases en desarrollo. La deteccin de antgeno p24 puede ser de utilidad en el screening de donantes, combinado con EIA de cuarta generacin, diagnstico de la infeccin aguda y del recin nacido, monitorizacin de la terapia y como confirmacin del crecimiento del virus en los cultivos celulares. Tcnicas moleculares Aunque el diagnstico de la infeccin por el VIH debe establecerse mediante la deteccin de anticuerpos especficos del virus, puede ser conveniente la utilizacin de tcnicas moleculares basadas en el reconocimiento de fragmentos del genoma del virus. Estas situaciones especiales se producen en casos de hipogammaglobulinemia, infeccin perinatal, infeccin silente o

infeccin por variantes del virus que pueden escapar a la deteccin con las tcnicas habituales serolgicas, como son el VIH-2 y el subtipo O del VIH-1. La reaccin en cadena de la polimerasa (PCR) es el mtodo de eleccin para el diagnstico molecular de la infeccin por el VIH. Puede aplicarse directamente a la deteccin de ADN provrico, o bien mediante una reaccin de retrotranscripcin previa (RT-PCR), realizada habitualmente en plasma. Su utilizacin es imprescindible para el diagnstico de VIH en los nios recin nacidos de madres seropositivas y en los pacientes con patrones serolgicos atpicos. Con la prueba podra diagnosticarse a un paciente infectado tan solo una semana despus de su contacto con el virus, se ha desarrollado recientemente un mtodo basado en amplificacin mediada por transcripcin (TMA) que detecta de forma simultnea desde 100 copias/ml de VIH-1 y virus de la hepatitis C, con una sensibilidad y especificidad >99,5%. La carga viral, es una prueba esencial aplicada al seguimiento de los pacientes ms que al diagnstico de los mismos, constituyndose en un marcador predictivo de la infeccin de inestimable ayuda.

Diagnostico diferencial
Patologa Infeccin por VIH Agente etiolgico VIH Manifestaciones clnicas Fiebre Adenopatas generalizadas Exantema cutneo Dolor farngeo Meningitis asptica Infecciones oportunistas Fiebre Exudado farngeo Hepatomegalia y Esplenomegalia Laboratorio: Linfocitosis (>50%) con > 10% de linfomonocitos atpicos Adenopatas Inflamacin de ganglios linfticos (cuello) Fiebre Fatiga Anorexia Malestar Mialgias Erupcin cutnea Dolor de garganta Inflamacin de los ganglios linfticos en cabeza y cuello Cefalea Mialgia Dolor de garganta Erupciones en la piel de color rosceo que inician en cabeza y progresan hacia los pies, hacindose ms intensa en el tronco Prurito Malestar general Fiebre poco intensa Faringitis Adenopatas dolorosas (nuca y retroauricular) Erupcin papuloescamosa generalizada de color violceo o rojo pardo, de 1-2 a 15-20 mm Lesiones mucosas Adenopatas Erupcin de vesculas agrupadas en racimo sobre una base eritematosa (labios) Se rompen y dejan lceras superficiales que a su vez se cubren de costras hemorrgicas Astenia y anorexia Artralgias Mialgias Cefalea Fotofobia Fiebre Nuseas, vmito T os y coriza Ictericia. Coluria Acolea Dolor en cuadrante superior derecho

Mononucleosis Infecciosa

Virus de Epstein-Barr

Infeccin aguda por CMV

CMV

Toxoplasmosis

Toxoplasma Gondii

Rubola

Virus de la rubola que es un Rubivirus perteneciente a la familia Togaviridae

Sifilis Secundaria

Treponema pallidum

Primoinfeccin Herpes Simple

por VHS

Hepatitis Viral

VHA, VHB, VHC, VHD, VHE