P P Les plantes mdicinales: de lusage traditionnel aux mdicaments modernes

Kurt Hostettmann Institut de Pharmacognosie et Phytochimie, Universit de Lausanne, Switzerland

Importance des plantes mdicinales

Environ 80 % de la population mondiale se soigne exclusivement avec des plantes mdicinales En Europe, 35 % des mdicaments prescrits par les mdecins sont d'origine naturelle Plus de 50 % des mdicaments en vente libre sont base de plantes mdicinales

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Formes d'utilisation des plantes mdicinales

Heilpflanzen Plantes mdicinales

Infusions Aufguss

Extraits Extrakt

Constituants Reine Bestandteile purs

Essentielle Huiles essentielles le

Tisanes Krutertee

Phytomedikamente Phytomdicaments

Assurance de qualit
Phytomdicament

Critres pour lenregistrement

Efficacit Qualit

Scurit

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Lcorce de saule dans lhistoire

Hippocrate (5me sicle av. J.-C.) contre les douleurs de laccouchement Fait partie de louvrage De Materia Medica de Dioscoride (1er sicle de notre re) Galien (2me sicle de notre re) dcrit les proprits antipyrtiques et anti-inflammatoires des feuilles de saule Trs utilise au Moyen-ge contre la fivre et les douleurs

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Lcorce de saule dans lhistoire

Description dtaille de l'effet analgsique, antipyrtique et anti-inflammatoire de l'corce de saule en 1763 Isolement de la salicine en 1829 Vers 1840, obtention de l'acide salicylique par oxydation chimique de la salicine L'acide salicylique, isol pour la premire fois de la reine des prs (Filipendula ulmaria L., Rosaceae), est le prcurseur de l'aspirine

Salicine : de la prodrogue au principe actif

CH2O-Gluc CH2OH COOH

OH

OH

OH

Salicine Flore intestinale

Salignine Foie Cyt. P450

Acide salicylique

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Utilisations de la digitale
Egypte et Rome ancienne: diurtique et toxique 1785 (Withering): diuretique pour le traitement des oedmes 1799 (Ferriar): bnfique en cas de problmes cardiaques 1890: traitement de la folie Aujourdhui: traitement de linsuffisance cardiaque, sous forme de monosubstances exclusivement

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Intoxication par la digitale

Problmes visuels (coloration jaune de la vision)

T.C. Lee, Van Gogh's vision, Digitalis intoxication ?, Journal of the American Medical Association, 8, 727 (1981)

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Vincent Van Gogh Portrait du Dr. Gachet (1890) Muse dOrsay Paris

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Labsinthe
Artemisia absinthium L. (Asteraceae) Constituants principaux : - principes amers (lactones sesquiterpniques) : absinthine, artabasine - huile essentielle : thujone, thujylalcool, sabinol comme monoterpnes principaux

H3C O

(-)-thujone

Vincent Van Gogh La vie toujours avec labsinthe (1887) Van Gogh Museum Amsterdam

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Interdiction de labsinthe
Entre dans la Constitution fdrale le 5 juillet 1908 (acceptation de linitiative populaire) Loi sur labsinthe : 7 octobre 1910 Interdiction raye de la Constitution le 1er janvier 2000, ds lors linterdiction est rgie par : - LF sur les denres alimentaires du 9.10.1992 - Ordonnance du 1.3.1995 sur les denres alimentaires - Ordonnance sur les additifs Teneurs en thujone lgales : - 5 mg/kg pour les boissons moins de 25% dalcool - 10 mg/kg pour les boissons plus de 25% dalcool - 25 mg/kg dans les prparations base de sauge - 35 mg/kg dans les amers

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Page 10

morphine codine papavrine

hrone

Papaver somniferum

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Page 12

Page 13

Page 14

Alcalodes du tropane
H 3C N O O O H 3C N

OH H

H O O

OH H

(-)-scopolamine

(-)-hyoscyamine atropine (ml. racmique)

prsents dans tous les organes de ces Solanaceae (0.08 - 0.9%)

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Intoxications par la stramoine odorante (Angels trumpet) (Datura suaveolens)

1996 : 57 cas Munich (90% des intoxiqus ont moins de 18 ans) 23 juillet 1998 : 8 cas Zurich (mort dune jeune femme de 20 ans) 26 juillet 1998 : 1 cas Berne

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Ginkgo biloba (Ginkgoaceae)

Ginkgolides
HO R2 O O H3C R1 O O

O O

Flavonoids
R2O O

R1 OH

O R3

OR3 OH O

Synthesis of ginkgolide B
O OH O O H3C HO O O O HO O

The Royal Swedish Academy of Sciences has awarded this year's Nobel Prize in Chemistry to Harvard University, Cambridge, MA, USA for his development of the theory and methodology of organic synthesis.

The Nobel Prize in Chemistry 1990

Elias J. Corey

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Ginkgo biloba tree

air pollution low temperature (< -20C) fungal attack viral attack Insects fire radiation (survived to the atomic bomb of Hisroshima)

Resistant to

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Hypericum perforatum (Hypericaceae)

OH O OH

HO

HO HO
O O

CH3 R

OH

OH

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Millepertuis et interactions mdicamenteuses

interactions par induction enzymatique, par exemple avec : la ciclosporine taux plasmatiques rejet de greffe les anticoagulants oraux taux plasmatiques les contraceptifs oraux risque de grossesse l'indinavir (anti-HIV) chec thrapeutique rsistance
Bon et al. (1999) JSPh 137, 537-538. Ernst (2000) Lancet 354, 2014-2016. Piscitelli et al. (2000) Lancet 355, 547-548. Ruschitzka et al. (2000) Lancet 355, 548-549.

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Taxus baccata (Taxaceae)

taxol
O HO O NH Ph O

AcO O OH

HO Ph O

AcO

Taxol
Taxus brevifolia (if du Pacifique)
10'000 Kg dcorces 1 Kg taxol

Taxus baccata (if europen)

3'000 Kg daiguilles 1 Kg taxol

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Bataille de Crecy, 26 aot 1346

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Artemisia annua (Asteraceae)

O O O

artemisinin

Registered antimalarial medicines

HO N

O O

Cl

Cl

artemether Paluther

OM e

lumefantrine
Cl

Association in Riamet and Co-artem

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Galanthus nivalis (Amaryllidaceae)

OH

CH3

H3CO

galanthamine

Production de la galanthamine

Extraction partir des bulbes de jonquilles (Narcissus sp.) Extraction acide/base & recristallisation 1kg de galanthamine est produit partir de 5000 kg de bulbes Une voie synthtique existe

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Le Matin 9 avril 2002

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Peter Paul Rubens (1577-1640). The Union of Earth and Water. c.1618. Oil on canvas. The Hermitage, St. Petersburg, Russia.

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Severe intoxications due to slimming regimens containing Chinese herbs

NO2 H3CO COOH

L Express , November 2000 aristolochic acid I 1990s : over 100 cases of intoxications (end-stage renal insufficiency) in Belgium due to commercialised preparations based on Chinese herbs

October 2000: death of a patient in Nice (end-stage renal failure) confusion between Aristolochia fangchi and Stephania tetrandra due to their similar Chinese names evidence for the mutagenicity, nephrotoxicity and carcinogenicity of aristolochic acid
Stengel B, Jones E. End-stage renal insufficiency associated with Chinese herbal consumption in France. Nephrologie. 19:15-20, 1998 Vanherweghem JL. et al. Rapidly progressive interstitial renal fibrosis in young women: association with slimming regimen including Chinese herbs. Lancet. 341: 387-91, 1993

confusion between Aristolochia fangchi andStephania tetrandra due to their similar Chinese names

Aristolochia fanchi
http://www.whiob.ac.cn/cbiswh1/qdbh/bhcs/bhcs_img/gl_3.jpg

Stephania tetrandra
http://china.tyfo.com/int/art/medicine/pictures/stephania-tetrandra.jpg

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Rapid detection of aristolochic acid in plant preparations by thin layer chromatography

NO2

lab light

366 nm

H3CO

COOH

limit of detection 1 E+1 E 1 E+1 E 0.6 g

E = MeOH extract of Aristolochia acuminata (leaves) Eluant : CHCl3 / MeOH / acetic acid 75 : 20 :5 Revelation : 0.5 % diphenylamine in H2SO4 followed by 10 min at 100C

Stupfiants dorigine naturelle interdits

Le cannabis, sa rsine et ses constituants psychotropes (THC) La coca, ses feuilles et ses constituants (cocane, ecgonine) Le pavot, lopium et les substances drives (morphine, hrone) Le khat, ses feuilles et ses constituants (cathinone) Les champignons des genres Psilocybe, Conocybe, Panaeolus et Stropharia et leurs constituants (psilocine et psilocybine) Les cactus hallucinognes (peyotl, cactus de San Pedro) : mescaline Libogane Le LSD

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Chanvre ou Cannabis sativa L. (Cannabaceae)

6000 av. J.-C. : utilisation des fibres (cordes, vtements) 5500 av. J.-C. : utilisation des graines et de lhuile en alimentation 1er sicle aprs J.-C. : proprits analgsiques (Dioscoride) 1090 : secte des haschischin (mangeurs de haschisch) 1798 : Napolon interdit la consommation du cannabis

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Constituants du cannabis

OH COOH O

OH

- CO2
O

Acide THC (inactif)

THC (actif)

Limite de la teneur en THC : 0,3 %

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Mise en vidence du cannabis et du THC

Analyse microscopique (poils caractristiques)

Utilisation de chiens dresss ( 1 mg de caryophyllne poxyde -> 1 g de haschisch dans une valise)

Mthodes chromatographiques : analyse de lurine (drivs du THC dcelables une semaine aprs la consommation dun joint)

Pourquoi les cochons recherchent-ils les truffes (Tuber melanosporum)?

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Cochons et truffes (Tuber melanosporum)

Le 5-androst-16-en-3-ol est synthtis dans les testicules du verrat et transfr dans leur salive Cette hormone attire et excite les truies Le 5-androst-16-en-3-ol se trouve dans les truffes (une truffe noire du Prigord en contient env. 60 ng/g) Les truies peuvent dtecter les truffes jusqu' 1 m sous terre!
Claus et al. (1981) Experientia, 37, 1178

Hormones sexuelles mles dans la nature

Pinaceae Apiaceae Pinus sp. (graines) Apium graveolens L. Pastinaca sativa L. Truffe noire . testostrone androstnone androstnone

Tuber melanosporum Vitt. androstnol

O H

Androstnone

HO

Androstnol

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Etudes pidmiologiques
Incidence (par 100 000) 0 20 40 60 80 100
0 20 40

Incidence (par 100 000)

60 80 100

Chine Japon Inde Italie Ecosse Finlande Sude Suisse USA(blancs) USA(noirs)

Chine Japon Inde Espagne Finlande Sude Ecosse Suisse USA(blancs)

Incidence du cancer de la prostate

Parkin et al., Cancer Incidence in Five Continents, VI (1992)

Incidence du cancer du sein

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Composition chimique du soja

15-25% de glucides, 35-40% de protines, 15-20% de lipides Prsence de saponines Isoflavones: la plupart sous forme de glycosides de la gnistine, de la daidzine, de la glycitine Coumestrol en faibles quantits

OH

OH

OH

HO

gnistine

HO

daidzine

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Lamanite tue-mouches
Amanita muscaria Hooker (Agaricaceae)
1730 : utilisation en Sibrie (consommation de lurine des personnes qui ont ingr le champignon) 1953 : isolement de la muscarine par Eugster 1964 : isolement de lacide ibotnique par le japonais Takemoto (ibo tengu take)

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Lamanite tue-mouches
Amanita muscaria Hooker (Agaricaceae)

Par voie orale : hallucinations, mais troubles gastrointestinaux svres Fum : moins de troubles gastro-intestinaux, mais effets hallucinognes moins intenses Urine de consommateurs de champignons par voie orale : peu de troubles gastro-intestinaux, effets hallucinognes intenses

Lamanite tue-mouches

HO

HO

N O

- CO2
CHNH2 COOH

N O

CHNH2 H

Acide ibotnique

muscimol

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Crapauds hallucinognes
- Bufo

alvarius et Bufo marinus : scrtions de la peau drivs de la N,N-dimthyltryptamine (structure proche de celle de la psilocine)

- Voie orale (lchage du crapaud) hallucinations, mais troubles gastro-intestinaux srieux - Fum : pas de troubles gastro-intestinaux Le lchage de certains crapauds peut tre mortel ! (substances cardiotoniques)

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H3C N CH3

OH

H3C N CH3

NH

NH

N,N-dimthyltryptamine

psilocine

HO

H3C N CH3

H3CO

H3C N CH3

NH

NH

bufotnine

5-mthylbufotnine

Plants: an unexplored source of chemical entities

Over 350000 species of higher plants have been identified Only 10% have been investigated from a phytochemical and pharmacological point of view One plant can contain up to several thousand secondary metabolites

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Procedure for obtaining the active principles from plants

Spectroscopical data on-line: - LC/UV - LC/MS - LC/NMR

synthesis

structure elucidation

Spectroscopical data off-line: - UV - MS - NMR - IR ...

extraction medicinal plants extract(s)

separation fractions pure constituent(s) toxicology

bio-assay

bio-assay

structure modification

bio-assay

General setup for LC/UV/MS and LC/NMR analyses

INJECTION - Extract - Fraction - Mixture

Post-column addition of the LC/MS additives

HPLC pump
waste

Splitting dependent of the LC/MS interfaces used

spectra
MS

1
HPLC pump
HPLC column

MS
LC/MS INTERFACE

UV

UV

Computer control of pump, UV and NMR for stop-flow experiments

2
NMR
waste

LC probe NMR

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Targets for bioassay

Lower organisms
microorganisms, insects, crustaceans, molluscs

Isolated subcellular systems

enzymes receptors, organelles

Cultured cells
human or animal origin

Isolated organs of vertebrates Whole animals

Galanthamine
New drug used for the treatment of Alzheimer disease Isolated in the mid 50's from different Galanthus spp. (Amaryllidaceae) Inhibitor of acetylcholinesterase Improves cholinergic transmission
O

OH

CH3

H3CO

Galanthus nivalis

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TLC detection of acetylcholinesterase inhibitors reaction scheme

O-COCH3 OH

AChE Naphthyl acetate -Naphthol

+
H3CO N N +

CH3COOH

N N + OCH3

2Cl-

Fast Blue Salt B

OH H3CO N N N N OCH3 OH

Azo dye (purple)

A. Marston, J. Kissling, K. Hostettmann (2002) Phytochem. Anal. 13, 51-54

Inhibition of acetylcholinesterase on TLC plates

Rf 1

E1

E2

E3

E4

E5

E6

E7

E8

Rf 0

Galanthamine 0.01 g

Extracts of different Amaryllidaceae species 15 g

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Plants have always been and always will be a source of our medicines

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