Sunteți pe pagina 1din 3

CROMATOGRAFIA DE STRAT SUBIRE Introducere.

Cromatografia in strat subire (CSS),const ntr-o separare croma tografic pe o faz staionar sub forma unui strat de aproximativ 0,25 mm ,aezat pe o plac, dintr-un material inert de obicei sticl,cu dimensiunea de exemplu de 10x20 cm sau 20x20 cm (putndu-se alege ns i alte dimensiuni). Separarea depinde ca i n alte tipuri de cromatografie,n primul rnd de faz staionar i de sistemul de solveni utilizat*7,8+. Din acest punct de vedere CSS poate fi de repartiie(n faz direct sau invers), de absorbie sau de schimb ionic. Tehnica uzual const n aplicarea unei cantiti foarte mici de soluie coninnd amestecul de substane care urmeaz a fi separate,la mic distan (de exemplu 1,5 cm)de unul din capetele plcii,dup care se introduce placa ntr-un vas cu posibiliti de nchidere etane in care atmosfera a fost saturat n prealabil cu vaporii solventului sau al amestecului de solveni folosii pentru separare.Se inverseaz apoi captul unde s-au aplicat probele n lichidul aflat pe fundul vasului ,astfel nct punctele de aplicare al probelor s fie la aproximativ 1 cm deasupra nivelului lichidului. Faza mobil (developantul) se deplaseaz prin ascensiune capilar (se cunosc i tehnici descendente)printre particulele de faz staionar avnd loc concomitent un proces de separare a componentelor probei. Astfel , pe msur ce progreseaz frontul fazei mobile, substanele din amestec se separ in zone distincte situate de-a lungul stratului de adsorbant. Cnd frontul fazei mobile s-a apropiat de extremitatea plcii cromatografice ,aceasta se scoate ,se usuc i apoi prin diferite procedee (eventual chiar vizual )se identific substanele separate. CSS are o serie de avantaje fa de alte tehnici cromatografice si anume :eficien mare de separare a substanelor ,cantitile mici de substane necesare pentru a fi luate n prob ,simplitatea si rapiditatea metodei ,reproductibilitatea rezultatelor ,posibilitatea separrii simultane a mai multor probe,posibilitatea utilizrii tehnicii att n scopuri analitice ct i preperative ,posibilitatea de a efectua direct pe placa cromatografic a unor reacii. Elemente din teoria separrii pe strat subire. Teoria separarii pe strat subire particularizeaz teoria general a separrii cromatografice.Astfel ,n funcie de natura fazei staionare putem avea CSS de absorbie (solid lichid)sau de repartiie(lichid-lichid).

Pe cromatoplac ,caracterizarea si diferenierea substanelor se poate face prin valoarea care msoar viteza de deplasare a zonelor de substan, pata era a frontului de developant. -ul este raportul ntre -distana de la start pn n punctual de concentraie maxim a unei zone de substan (eventual revelat printr-un procedeu oarecare)i distana parcurs de frontul developantului ,n acelai timp .Aadar, Msurarea i se face n mm sau cm ,prin diverse procedee, ncepnd cu cele mai simple(cu ajutorul unei rigle). n cazul n care petele sunt simetrice se msoar distana pn la centrul petei. ntre valoarea i coeficientul de repartiie D exist urmtoarea relaie (v. de ex.[7]) D= ( - 1) unde i sunt seciunile transversale ale fazei i respectiv staionare. SEPARAREA CROMATOGRAFIC A UNOR INDICATOARE DE pH . Aparatur i reactivi. Separarea realizndu-se prin tehnica cromatografic circular, vasul cromatografic va fi cel adecvat acestei tehnici de obicei un explicator. Hrtia cromatografic Whatman nr.1 sau 2 se decupeaz sub form de discuri. Indicatori folosii sunt rou de metil ,fenolftaleina i albastru de bromtimol.Soluiile s-au preparat prin dizolvarea a 0,02 g indicator in 100 g alcool etilic sau metilic 50% . Developantul este format dintr-un amestec de alcool butilic,alcool etilic i ap in proporie 40:10:50.Amestecul se agit bine n plnia de separare i se va folosi drept developant stratul inferior apos.Ca revelator se folosete amoniacul si acidul clorhidric . Modul de lucru. Se procedeaz ca de obicei n cazul unei cromatografii circulare.Se vor apotula separat cei trei indicatori si al patrulea apot va fi cel corespunztor amestecului de indicatori.Dup developare ,cromatograma se usuc pentru ndeprtarea complet a solvenilor organici ,apoi se pulverizeaz cu ap distilat i se introduce n vapori de amoniac .Vor aprea coloraiile caracteristice acestor indicatori n mediu bazic :rou pentru fenoftolein ,galben pentru rou de metil i albastru pentru albastru de Br-timol.Se vor contura petele obinute .Se usuc apoi cromatograma ,se umezete cu ap distilat i se introduce n vapori de HCl .Se

vor modifica culorile corespunztor mediului :pentru fenoftalein incolor,rou pentru rou de metil i galben portocaliu pentru albastru de Br-timol. Conturul petelor va fi acelai cu cel notat anterior. Rezultate. Cunoscnd distana de migrare a frontului solventului i distana de migrare a frontului fiecrui indicator n parte ,se determin ul pentru indicatorii determinai att pentru probele martor ct i pentru amestec.