Metabolismo cidos Nucleicos

SNTESIS DE PURINAS

METABOLISMO CIDOS NUCLEICOS

Requerimientos de Nucletidos
Las clulas que se dividen rpidamente necesitan grandes cantidades de RNA y DNA. Estas clulas tienen grandes requerimientos de nucletidos. Por esta razn, las vas de sntesis de nucletidos son blancos atractivos para el tratamiento del cncer y las infecciones por microorganismos. Muchos antibiticos y drogas anticancergenas son inhibidoras de la sntesis de nucletidos.

Requerimientos de Nucletidos

No hay reservas de nucletidos (slo 1% disponible) y la absorcin intestinal de bases es mnima (un 5% de lo presente en la dieta) Por lo tanto es fcil comprender que las bases nitrogenadas, pricas y pirimdicas, se han de sintetizar segn se necesiten para sintetizar DNA y RNA Hay rutas de biosntesis de novo y de recuperacin. Las de biosntesis de novo son rutas idnticas en todos los seres vivos

Biosntesis de Nucletidos
o Los organismos pueden sintetizar nucletidos de purina y
o Por esto, las purinas y las pirimidinas no son requeridas en la dieta. o No constituyen nutrientes esenciales.

pirimidina de novo, es decir a partir de molculas pequeas

o Tambin pueden, de manera muy limitada, utilizar

nucletidos de la dieta, va de salvamento o de ahorro.

o Los cidos nucleicos ingeridos son digeridos con endonucleasas de origen pancretico (desoxirribonucleasasy ribonucleasas), por fosfodiesterasas y nuclesido fosforilasas. o El epitelio intestinal tiene fosfatasa alcalina y otras enzimas que degradan los nuclesidos, produciendo la liberacin de bases libres. o Las bases obtenidas, si no se utilizan, se degradan a nivel intestinal. o Solo 5% de los nucletidos ingeridos pasa a la circulacin, como base libre o nuclesido, por eso la sntesis de novo de purinas y pirimidinas es muy importante.

RUTA DE NOVO
Sntesis de nucletidos de purina y pirimidina a partir de precursores de bajo peso molecular en cantidades suficientes para satisfacer las necesidades de cada organismo Estas rutas son idnticas en todo el mundo biolgico.

RUTA DE SALVAMENTO
Sntesis de nucletidos de purina y pirimidina a partir de los nucletidos o las bases disponibles, obtenidos por la ingestin de los alimentos o por el catabolismo de los cidos nucleicos del organismo mismo.

Degradacin de cidos Nucleicos

INTRACELULAR

Recambio de las especies de RNA Reparacin del ADN

MUERTE CELULAR INGESTION DE CIDOS NUCLEICOS DE LOS ALIMENTOS

Ribonucleasa pancretica Desoxiribonucleasa pancretica Intestino delgado

Vas de salvamento

Fosforibosiltransferasa

Permite sintetizar nucletidos a partir de las bases nitrogenadas y de la fosfo-ribosil-pirofosfato. La degradacin del pirofosfato a fosfato inrganico conduce la reaccin hacia la derecha. La direccin del sustituyente anomrico se invierte

Fosforibosiltransferasa

Vas de Salvamento o ahorro

Las bases libres de purina, adenina, guanina, e hipoxantina, pueden ser reconvertidas a sus correspondientes nucletidos mediante el proceso enzimtico conocido como fosforibosilacin. Dos fosforibosil transferasas importantes estn implicadas en la va de salvamento, o ahorro, de las purinas: la adenosina fosforibosil transferasa (APRT), que cataliza la siguiente reaccin: adenina + PRPP <> AMP + PPi la hipoxantina-guanina fosforibosil transferasa (HGPRT), que cataliza las siguientes reacciones: hipoxantina + PRPP <> IMP + PPi guanina + PRPP <> GMP + PPi Una problema importante de la va de salvamento de purinas en clulas de rpida divisin es la adenosina deaminasa (ADA), que cataliza la deamination de adenosina a inosina. La deficiencia de ADA resulta en el llamado trastorno grave de inmunodeficiencia combinada, SCID

FOSFORILACIN DE LOS NUCLEOTIDOS MONOFOSFATOS

GMP + ATP GMP + ATP
Guanilato Cinasa

GDP + ADP GDP + ADP

AMP + ATP

Adenilato Cinasa

2 ADP

GDP + ATP

GTP + ADP

G0 = 0

Biosntesis de Nucletidos de Purina

El sitio principal de la sntesis de purinas es el hgado. Las enzimas y coenzimas necesarias se encuentran en el citoplasma.

Las purinas se construyen a partir de la ribosa y su sntesis comienza con la conversin de D-ribosa-5-fosfato a la 5fosfato- D-ribosa-1-pirofosfato (fosforibosil-pirofosfato, PRPP) y conduce al primer nucletido completamente formado, inosina-5'-monofosfato (IMP), que despus es transformado a AMP y GMP. PRPP es tambin precursor de la histidina y el triptofano La sntesis de IMP requiere de cinco ATPs, dos glutaminas, una glicina, un CO2, un aspartato y dos formatos. Las partes de formil son cedidas por el tetrahidrofolato (THF) en forma de N5,N10- metenil-THF y de N10- formil-THF.

Fosfo-ribosil-pirofosfato (PRPP)
Metabolito Central en el Metabolismo de Nucletidos

PRPP : 5-fosfo--D-ribosil-1-pirofosfato RUTA DE SALVAMENTO ALTERNA

La ribosa-5-fosfato sintetizada en la va de las pentosas es activada por ATP para formar PRPP. La sntesis de PRPP es un paso controlado, la actividad de la enzima vara con la concentracin de muchos metabolitos. La PRPP es precursor de purinas, pirimidinas, histidina y triptofano.

En las clulas NO hay el anlogo deoxirribosafosfato del PRPP, las enzimas anteriores NO participan directamente en el metabolismo de los desoxirribonucleotidos.

Sntesis de purinas
Requiere 10 Enzimas
1) 2) 3) 4) 5) 6) 7)

glutamina fosforibosil pirofosfato amidotransferasa glicinamida ribtido sintasa glicinamida ribtido transformilasa formil-glicinamida sintasa amino-imidazol ribtido sintasa amino-imidazol ribtido carboxilasa Succinil-amino-imidazol carboxamida ribtido sintasa

8) 9) 10)

adenilo-succinato liasa amino-imidazol carboxamida ribotide transformilasa IMP ciclohidrolasa

BIOSNTESIS DE NOVO DE LOS NUCLETIDOS DE PURINA

Con excepcin de los tres tomos cedidos por la glicina, todos los dems tomos constituyentes del anillo purnico se derivan cada uno de un precursor diferente en una reaccin diferente

PRPP Amido Transferasa

El paso limitante en la

sntesis de novo de los nucletidos de purina es la sntesis de la 5-fosforribosilamina a partir de PRPP y glutamina. El grupo amida, que procede de la cadena lateral de la glutamina, desplaza al grupo pirofosfato unido al C1 del PRPP, reaccin que es favorecida por la rpida hidrlisis del pirofosfato. La orientacin del grupo anmero cambia de a Ntese que la reaccin requiere dos enlaces de alta energa

Transfiere glicina Se utiliza ATP

Necesita como cofactor el 10-formilTHF. Se transfiere el grupo formilo

Las transformilasa (reaciones 3 y 9) forman parte de un complejo multienzimtico Una enzima trifuncional tambin es parte del complejo

Varias enzimas de la sntesis de nucletidos utilizan glutamina y son un potente blanco para la diseo de agentes anticancergenos. Estas enzimas tienen actividad de Glutamina Amidotransferasa y catalizan la transferencia, dependiente de ATP, del nitrgeno amdico de la glutamina a un aceptor. Comprese en la figura de la izquierda la estructura de la glutamina con la de algunas drogas que se utilizan como sus anlogos en el tratamiento del cncer

Inhibidores de la GLUTAMINA AMIDOTRANSFERASAS

ATP ADP

ACEPTOR

En muchas reacciones se requieren tambin derivados del cido flico (Pteroil-glutmico)

Y, por lo tanto, los antifolatos, como el inhibidor de la dihidrofolato reductasa Methotrexate, tienen utilidad como drogas anticancergenas.

Reacciones 4 y 5
Amidotransferasa Dependiente de ATP

Cierre del anillo imidazol de la purina Dependiente de ATP

5
AIR Sintasa

+H2O

REACCIN 6
Descarboxilacin reversible No requiere biotina AIR carboxilasa

SAICAR Sintasa

Inicia la transferencia de un nitrgeno del aspartato mediante un mecanismo idntico al que se emplea para convertir citrulina en arginina en el ciclo de la Urea. Requiere ATP 7.- Se transfiere todo el aspartato al 4-Carboxi-5-amidoimidazol ribonucletido para formar SAICAR

Adenilo-succinato liasa
8.-

Reaccin de eliminacin , que da lugar al AICAR

REACCIN 7 y 8
Dan lugar a la transferencia de un nitrgeno del aspartato mediante un mecanismo idntico al que se emplea para convertir citrulina en arginina en el ciclo de la Urea. 1. Se realiza en dos pasos 2. Se transfiere todo el aspartato al 4Carboxi-5-amidoimidazol ribonucleotido (Reaccin 7) 3. Reaccin de eliminacin , que da lugar al AICAR (reaccin 8) y a Fumarato

SAICAR carboxilasa

Dan lugar a la transferencia de un nitrgeno del aspartato mediante un mecanismo idntico al que se emplea para convertir citrulina en arginina en el ciclo de la Urea. 1. Se realiza en dos pasos 2. Se transfiere todo el aspartato al 4Carboxi-5-amidoimidazol ribonucleotido (Reaccin 7) 3. Reaccin de eliminacin , que da lugar al AICAR (reaccin 8) y a Fumarato

SAICAR carboxilasa

Reaccin transformilasa Transferencia de un grupo formilo Reaccin de condensacin interna Produce el primer compuesto de PURINA

Interconversin de

purinas, a partir del IMP

Regulacin de la Sntesis de los Nucletidos de Purina

Los pasos limitantes en la biosntesis de purinas se encuentran en los dos primeros pasos de la va. La sntesis de PRPP por la PRPP sintetasa es inhibida por los 5' nucletidos de purina (predominantemente AMP y GMP). Los efectos combinados de estos dos nucletidos son mucho mayores, e.g., la inhibicin es mxima cuando se logra la concentracin correcta de los nucletidos de adenina y guanina. La reaccin de amidotransferasa catalizada por la PRPP amidotranferasa, se inhibe alostricamente por la unin con ATP, ADP y AMP en un sitio inhibitorio y por la unin con GTP, GDT y GMP en otro. La actividad de la enzima es estimulada por PRPP. Existe, adems, la regulacin de la sntesis final de AMP y GMP a partir del IMP, mencionada anteriormente

REGULACIN DE LA SNTESIS

Se regula por retroalimentacin negativa de los primeros pasos La PRPP sintetasa se inhibe por diversos nucletidos de purina en especial:

AMP ADP GDP

La PRPP amidotransferasa se inhibe alostericamente por:

AMP ADP GMP GDP

Regulacin sntesis AMP - GMP

El IMP representa un punto de ramificacin para la biosntesis de purinas, y puede ser convertido tanto en AMP como en GMP a travs de dos rutas metablicas distintas. La va que conduce al AMP requiere energa en forma de GTP. Aquella que lleva al GMP requiere energa en forma de ATP. Esta relacin en la sntesis de AMP y GMP, permite que la clula controle las proporciones de estos nucletidos para que sean aproximadamente equivalentes. La acumulacin de un exceso de GTP tendr como consecuencia una sntesis acelerada de AMP a partir del IMP, con el consiguiente gasto de GTP, y la disminucin en la sntesis de GMP. Inversamente, puesto que la conversin de IMP a GMP requiere de ATP, la acumulacin excesiva de ATP conduce a la sntesis acelerada de GMP y la disminucin en la sntesis de AMP.

REGULACIN

GMP inhibe la conversin de IMP a XMP

AMP inhibe la sntesis de adenilosuccinato

DEGRADACIN DE PURINAS

Degradacin de Purinas

Los cidos nucleicos ya existentes en el organismo son hidrolizados por endo y exonucleasas que dan mononucletidos que a su vez son degradados a nuclesidos por la Fosfomonoesterasa, esta enzima libera guanosina y adenosina. Estos 2 nuclesidos no pueden seguir exactamente la misma va. La adenosina debe ser desaminada previamente por la Adenosina Desaminasa para formar inosina. Sobre la inosina acta la Nuclesido Fosforilasa que la despoja de su ribosa y da hipoxantina. La Nuclesido Fosforilasa acta directamente sobre la guanosina liberando guanina.

Xantino Oxidasa

Desde la hipoxantina y la guanina, como bases pricas, se forma un compuesto llamado xantina, que da origen al cido rico. Estos ltimos 2 pasos son catalizados por la Xantina Oxidasa (esta enzima contiene FAD, molibdeno y hierro no hemo). La actividad de la Xantino Oxidasa da lugar a la formacin de cido rico y luego al urato monosdico.

FORMACIN DEL CIDO RICO

La degradacin de purinas da lugar a cido rico AMP se desamina para producir IMP (Msculo) AMP se hidroliza para producir adenosina (Resto de los tejidos)

FORMACIN DEL CIDO RICO

*
* Abundante en Cerebro e Hgado de mamferos

CATABOLISMO DEL ACIDO RICO A AMONIACO Y CO2

TRANSTORNOS CLNICOS DEL METABOLISMO DE LAS PURINAS

GOTA: Acumulacin excesiva del cido rico

El cido rico y sus sales de urato son muy insolubles. Ventaja para los animales que ponen huevos (eliminacin de exceso de nitrgeno) Humanos: 3/1000 sufren hiperuricemia Elevacin crnica del cido rico en sangre (GOTA) Formacin de cristales de urato sdico en el lquido sinovial de las articulaciones Inflamacin de las articulaciones (artritis) Degeneracin de articulaciones Sobre produccin de nucletidos de purina Se puede deber a varios defectos enzimticos

Falta de inhibicin por los nucletidos de purina

Falta de inhibicin por los nucletidos de purina

ALOPURINOL, anlogo estructural de la hipoxantina

SINDROME DE LESCH-NYHAN

Rasgo ligado al sexo El gen de la HGPRT esta en el cromosoma X Artritis gotosa grave Disfuncin dramtica del sistema nervioso Discapacidad para el aprendizaje Comportamiento hostil o agresivo Autodestruccin, los pacientes se muerden los extremos de los dedos, los labios y otras partes del cuerpo

SNDROME DE INMUNODEFICIENCIA COMBINADA GRAVE

Vulnerables a las enfermedades infeciosas. Afectados los linfocitos B y T Ausencia hereditaria de la enzima degradativa adenosina desaminasa (ADA) Aumento en la deoxiadenosina lo que inhibe la sntesis de deoxinucleotidos No permite la replicacin del ADN No permite la proliferacin de los linfocitos

La renovacin celular se acompaa de la hidrlisis de los nucletidos por enzimas llamadas nucleotidasas. Las purinas no reutilizadas por las vas de salvamento son transformadas en compuestos que pueden ser excretados. En el hombre, las purinas son degradadas a cido rico por la actividad de la xantino oxidasa una flavoprotena que contiene fierro y molibdeno La actividad de esta enzima puede ser bloqueada por un inhibidor, el allopurinol, muy utilizado en teraputica en caso de hiperproduccin de cido rico, como es el caso de la gota y de algunos sndromes mieloproliferativos