VALIDACION DE PROCESOS CRITICOS Y

SISTEMA DE APOYO
CRITICO
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OBJETIVO
Realizar un estudio terico y prctico que nos sirva:
1 Como conocimiento de cuales son los conceptos de cualificacin y validacin de procesos y, 2 Como aplicar estos conceptos a aquellos sistemas y procesos empleados en la manufactura de medicamentos que deban ser estriles

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PRINCIPIOS GENERALES
Esterilidad: completa ausencia de microorganismos

viables. La esterilidad es una condicin absoluta. No hay un mtodo capaz de medir tal condicin. Todos los procesos de esterilizacin tienen una capacidad FINITA de destruir microorganismos, por lo que no es posible asegurar que se llegue a esa ausencia total, habr siempre una probabilidad terica de No- esterilidad. Por razones prcticas la designacin de estril se aplica a productos que se han tratado de tal modo que cada fase que interviene en el proceso tenga una probabilidad de resultar no estril igual o menor de 10-6 .
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PRINCIPIOS GENERALES
La prueba de esterilidad, segn se realiza actualmente,

slo sirve como una indicacin de esterilidad del lote muestreado.(Farmacopea) Esta prueba es destructiva y no permite determinar la condicin microbiolgica de cada uno de los recipientes que integran el lote. Un resultado satisfactorio slo indicar que no se ha encontrado ningn microorganismo contaminante en la muestra examinada. La extensin de este resultado a todo el lote requiere la seguridad de que cada unidad del lote, se haya preparado de tal modo que habra pasado la prueba con un alto grado de probabilidad.

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PRINCIPIOS GENERALES
Las Normas de Buenas Prcticas de Manufactura de

Productos Farmacuticos - DIGEMID 1999 / Cp. V y XVII - y la aplicacin de mtodos adecuados de validacin proporcionarn mayor seguridad que el control del producto terminado. Es imprescindible entonces, establecer para un rea estril un programa de validaciones de los distintos procesos.

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PRINCIPIOS GENERALES
La validacin de un proceso de esterilizacin debe:

Demostrar que los procesos se han llevado a cabo dentro de los lmites prescritos por el protocolo. Demostrar que la probabilidad de supervivencia microbiana en los procesos replicados no es mayor que la prescrita por los lmites. Monitorear el proceso validado durante la operacin de rutina. Recalificar los equipos segn sea necesario. Si el equipo de esterilizacin es computarizado, el sistema (hardware y software) tiene que ser validado.
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PRINCIPIOS GENERALES
Nivel de Aseguramiento de Esterilidad (siglas en

ingls

SAL

Sterility

Assurance

Level):

Probabilidad de que un microorganismo viable est presente en una unidad de un producto luego de la esterilizacin.

Esterilizacin Terminal.- SAL de 10-6

Llenado Asptico.- SAL de 10-3
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PRINCIPIOS GENERALES
Procesos involucrados en la manufactura de productos

estriles: Validacin de la esterilizacin por calor seco. Validacin de la esterilizacin por calor hmedo. Validacin de la esterilizacin por xido de etileno. Validacin de la esterilizacin por filtracin. Validacin de las condiciones ambientales. Validacin de sistemas de agua. Validacin de procesos de llenado.

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CALIFICACION DE PROVEEDORES

Sistemas de agua, aire, gases, vapor, etc

Validacin de los sistemas

Mat. primas estriles y apirgenas

Materiales de envase
Validacin de lavado y esterilizacin en horno (250 C)

Equipos calificados Inst. calibrados

Validacin de limpieza y esterilizacin

FABRICACIN Filtracin Esterilizante ENVASADO Esterilizacin Terminal

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Ambiente Estril
(Validacin de condiciones ambientales y limpieza)

Llenado Asptico

PERSONAL
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x3
9

ACONDICIONADO

ESTERILIZACION POR FILTRACION

FILTROS ESTERILIZANTES

Definicin:La filtracin consiste en la eliminacin fsica de los microorganismos por adsorcin

sobre el filtro o mecanismos de retencin.

Producirn un efluente estril cuando se retan con Pseudomonas diminuta a una concentracin

de 107 microorganismos por cm2 de superficie del

filtro.
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ESTERILIZACION POR FILTRACION

VALIDACION

Variables que influyen el proceso de filtracin:

El n de bacterias inicial (Bioburden) Las especies de los microorganismos presentes. El proceso de filtracin: - compatibilidad del material - pH y viscosidad del material a filtrarse; - velocidad de flujo; - Presiones, temperaturas; tamao de poro (0.22 micras o menos) - Mtodo de esterilizacin; etc.

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ESTERILIZACION POR FILTRACION

PRINCIPIO:
* Se humedece el filtro con lquido, se aplica presin a la solucin a filtrar y se mide el flujo del fluido filtrado. ESTRATEGIA DE VALIDACION DE MATRIZ * Aceptable extrapolar conclusiones de validacin del producto que tiene los atributos y las condiciones de procesamiento ms exigentes dentro de la familia de productos relacionados.

* La justificacin para la extrapolacin debe ser documentada.

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ESTERILIZACION POR FILTRACION

La filtracin es el mtodo de esterilizacin menos deseable que aparece en las regulaciones de Canad, el Reino Unido, Australia, la Convencin Europea de Inspeccin Farmacutica, y en las normas de Buenas Prcticas de Manufactura de la Comunidad Econmica Europea.
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Validacin de la Esterilizacin

por Calor Hmedo

(Esterilizacin Terminal)

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ESTERILIZACION POR CALOR HUMEDO

Probablemente el proceso ms utilizado para

esterilizar drogas farmacuticas.

El proceso de esterilizacin termal utilizando

vapor saturado bajo presin se lleva a cabo en

una cmara llamada autoclave.
Tres elementos crticos: tiempo, temperatura y

humedad.
F0 = 15 minutos a 121C
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OBJETIVO
Demostrar

experimentalmente repetidos, que tiene el la

en

ciclos

equipo

(autoclave)

capacidad de operar dentro de los parmetros requeridos para que el proceso de esterilizacin

que se lleva a cabo en l cumpla

con el objetivo toda la terico de eliminar poblacin
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microbiana del material.

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CALIFICACION DE LA OPERACIN
Verificacin Instrumental 1. Sistema de regulacin del autoclave (basado en temperatura y presin). 2. Sensores (sondas) de temperatura. 3. Sensores y/o transductores de presin. 4. Vacumetro. 5. Registradores de temperatura/tiempo. 6. Registradores de presin/tiempo. 7. Temporizadores. 8. Filtros de aire/agua.
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CALIFICACION DE LA OPERACIN
Verificacin Funcional 1. Verificacin de la hermeticidad al vaco (prdida de vaco no > 3 mbar/min). 2. Verificacin de prestaciones de la bomba de vaco. 3. Ciclos manual/automtico. 4. Alarmas y luces (tiempo, temperatura y presin). 5. Sistema de puertas interlock. Verificacin de Servicios 1. Vapor limpio. 2. Aire comprimido.
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CALIFICACION DEL DESEMPEO

Pasos del Proceso
1. 2. 3. 4.

Ingreso del material a esterilizar. Vaco inicial. Entrada de vapor filtrado. Esterilizacin.

5.
6.

Enfriamiento.
Retiro del material.

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CALIFICACION DEL DESEMPEO

Materiales a Esterilizar(ejemplos) Materiales de vidrio: 121 C x 25 min 30 min Uniformes y guantes: 121 C x 30 min Equipo de filtracin: 121 C x 30 min Ampollas y Viales: 121 C x 25 min 30 min Equipos para Validacin 1. Registrador de temperatura multicanal. 2. Termocuplas (termopares o sensores).

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CALIFICACION DEL DESEMPEO

Control de Distribucin del Calor
Determinar el punto ms fro de la cmara. Hacer la prueba por triplicado. El punto ms fro debe alcanzar la T especificada.

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CALIFICACION DEL DESEMPEO

Control de la Penetracin de Calor
Determinar el punto ms fro dentro de los materiales.
Hacer la prueba por triplicado. El punto ms fro debe alcanzar la T especificada. La determinacin se hace por cada tipo de material que

entra al autoclave.

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CALIFICACION DEL DESEMPEO

Criterios de Aprobacin
Chequeo de termocuplas: +/- 1 C
Calor de distribucin sin carga: +/- 1 C Calor de distribucin con carga: +/- 1 C Calor de penetracin: F0 15 min Rechequeo de termocuplas: +/- 1 C

Ampollas

de

Sterikon

(esporas

de

B.

stearotermophylus): Negativo
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Validacin de la Esterilizacin por Calor Seco

(Esterilizacin Terminal)

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ESTERILIZACION POR CALOR SECO

Utilizado para esterilizar artculos que puedan tolerar temperaturas relativamente altas.
Usado ms frecuentemente para esterilizar artculos tales como polvos, aceites, vaselina, cristalera y equipo de acero inoxidable. Se requieren temperaturas ms altas y tiempos de exposicin ms largos porque la letalidad microbiana asociada con calor seco es mucho menor que la de vapor saturado a la misma temperatura.
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OBJETIVO
Garantizar

que

la totalidad

del

proceso

se

desempea de acuerdo con los requisitos de

fiabilidad y reproducibilidad de las condiciones de eliminacin de grmenes y despirogenizacin que se hayan prefijado.

LAL
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CALIFICACION DE LA OPERACIN
Verificacin Instrumental
1. Sensores (sondas) de temperatura.
2. Termmetros de control. 3. Termorresistencias. 4. Registradores de temperatura/tiempo. 5. Reguladores de temperatura.

6. Temporizadores.
7. Filtros de aire.
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CALIFICACION DE LA OPERACIN
Verificacin Funcional
1.
2.

Uniformidad trmica (no > 2,5%).

Sistema de filtracin y de la calidad del aire (conteo de partculas).

3.

Equilibrio de la velocidad del flujo de aire (entre 0,45 y 0,85 m/s).

Verificacin de la sobrepresin.

4.

5.
6.

Verificacin de las luces de seguridad.

Sistema de puertas interlock.
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CALIFICACION DEL DESEMPEO

Pasos del Proceso
1. 2. 3.

Ingreso del material a esterilizar y despirogenizar. Fase de secado, se elimina el aire hmedo y se renueva con aire caliente. Fase de calentamiento y recirculacin de aire hasta alcanzar la T de despirogenizacin en forma homognea. Fase de esterilizacin y despirogenizacin.

4.

5.
6.

Fase de enfriamiento.
Retiro del material a una temperatura cercana a la del ambiente.
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CALIFICACION DEL DESEMPEO

Materiales a Esterilizar Viales: 250 C x 1,5 h Ampollas: 250 C x 1,0 h Equipos para Validacin 1. Registrador de temperatura multicanal. 2. Termocuplas (termopares).

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CALIFICACION DEL DESEMPEO

Control de Distribucin del Calor
Determinar el punto ms fro de la cmara. Hacer la prueba por triplicado. El punto ms fro debe alcanzar la T especificada.

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CALIFICACION DEL DESEMPEO

Control de la Penetracin de Calor con Cmara Llena
Determinar el punto ms fro dentro de los materiales.
Hacer la prueba por triplicado. El punto ms fro debe alcanzar la T especificada. La determinacin se hace por cada tipo de material que

entra al horno.

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CALIFICACION DEL DESEMPEO

Criterios de Aprobacin
Calibracin de termocuplas: +/- 1 C Calor de distribucin sin carga: +/- 5 C Calor de distribucin con carga: +/- 2,5% Calor de penetracin: FT 30 min (250 C)

Rechequeo de termocuplas: +/- 1 C

Presin diferencial filtro HEPA: Mx. 2 pulg agua Bioindicador de Bacillus subtilis: Negativo

Bioindicador de endotoxinas de E. coli: Negativo

Prueba de endotoxinas (LAL): < 0,5 EU/recipiente
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Validacin del Llenado Asptico

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LLENADO ASEPTICO
Es una de las ms complejas operaciones de la Ind.

Farmacutica por los estrictos requerimientos para el uso final del producto (Inyeccin).
Consiste en el llenado o ensamblaje de productos

farmacuticos pre-esterilizados bajo condiciones aspticas en envases pre-esterilizados

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LLENADO ASEPTICO
El nivel de aseguramiento de esterilidad que se puede

lograr se limita por: Las muchas manipulaciones de los componentes separadamente esterilizados durante el ensamblaje del producto final; y La ausencia de un proceso de esterilizacin terminal despus del sellado del producto en su envase final.
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OBJETIVO
Demostrar que el proceso de llenado asptico de

productos estriles, en condiciones normales de trabajo (utilizando un medio de cultivo

previamente esterilizado en lugar de producto), se realiza de manera adecuada para obtener en forma continua, un producto que cumple con los requerimientos de esterilidad.
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CALIFICACION DEL DESEMPEO

Previamente se validarn los siguientes sistemas:
Esterilizacin por calor seco: Horno.
Esterilizacin por calor hmedo: Autoclave. Mtodo de limpieza de la instalacin. Mtodo de limpieza de la envasadora. Condiciones ambientales del rea estril. Calificacin de la envasadora.
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CALIFICACION DEL DESEMPEO

Descripcin del Proceso 1. Presentacin a validar: Ampollas, viales, frascos oftlmicos, etc. 2. Volumen del contenedor: 1 mL, 3 mL, 5 mL, 15 mL, etc. 3. Cantidad de contenedores ( 20 mL): Mnimo 3 000 4. Volumen de llenado: 1 mL, 3 mL, 10 mL, etc. Relacin de Equipos a Utilizar en el Proceso Autoclave. Horno. Lavadora de ampollas o viales. Envasadora de ampollas o viales.
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CALIFICACION DEL DESEMPEO

Pasos del Proceso 1. Determinacin de la presentacin del contenedor y el volumen de llenado. 2. Preparacin del medio de cultivo. 3. Esterilizacin del medio de cultivo y de los contenedores. 4. Realizacin del proceso de llenado. 5. Monitoreo microbiolgico del personal, del ambiente y del aire. Estos monitoreos se hacen paralelamente al proceso de llenado. 6. Limpieza cuidadosa del equipo y del ambiente. 7. Desinfeccin del equipo y del ambiente. 8. Autoclavado de los desperdicios generados.
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CALIFICACION DEL DESEMPEO

Monitoreo del Ambiente (por triplicado)
Mtodo: Exposicin de placas Medio usado: TSA Tiempo de exposicin: 4 horas

Lmites:

Cuartos
Aire Acond. Flujo Laminar

:
: :

10 UFC/placa
10 UFC/placa 0 UFC/placa
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CALIFICACION DEL DESEMPEO

Monitoreo del Aire (por triplicado)
Equipo usado: Muestreador de aire Medio usado: TSA Volumen de muestreo: 1 000 L

Lmites:

Clase 100 (A)

Clase 10 000 (C)

:
:

< 1 UFC/m3
100 UFC/m3

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CALIFICACION DEL DESEMPEO

Monitoreo del Personal (por triplicado)
Mtodo: Impresin por contacto
Medio usado: Agar D/E Neutralizante Zonas muestreadas:

Capucha

Uniforme
Botas Guantes

Lentes
Lmites:
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Mximo 3 colonias por placa

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CALIFICACION DEL DESEMPEO

Prueba de Validacin del Proceso de Llenado
Se realizar en condiciones normales de rutina. Los recipientes llenados con medio de cultivo debern

dividirse en 3 fracciones: inicio, medio y final del proceso de llenado.

Los recipientes llenados sern sometidos a prueba de

fugas.

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CALIFICACION DEL DESEMPEO

Incubacin de los Envases Incubar la mitad de cada fraccin a: a) 30 C 35 C por 14 das b) 20 C 25 C por 14 das Los envases se revisarn a las 48 h, 72 h, 7 das y al final de los 14 das.

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CALIFICACION DEL DESEMPEO

Control Negativo Recipientes con medio de cultivo que no pasan por el proceso de llenado, se incuban de la misma manera. Control Positivo Unidades envasadas + inculo de Bacillus subtilis. Unidades envasadas + inculo de Candida albicans.

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CALIFICACION DEL DESEMPEO

Interpretacin de Resultados
Lmite aceptable: Contaminacin 0,1% del nmero de

envases en cada T de incubacin.

Si el test no es aceptable, el organismo contaminante

deber ser identificado mediante coloracin Gram y morfologa. En este caso se deben tomar medidas correctivas para eliminar el foco de contaminacin. Hasta no obtener resultados satisfactorios, slo se podrn envasar productos con esterilizacin terminal.
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