Espectrofotometra

Principios Bsicos y Fundamentos Tericos

Definicin
La espectrofotometra es el mtodo de anlisis ptico ms usado en las investigaciones qumicas y biolgicas. Es una de las tcnicas experimentales ms utilizadas para la deteccin especfica de molculas. Se caracteriza por su precisin, sensibilidad y su aplicabilidad a molculas de distinta naturaleza (contaminantes, biomolculas, etc.) y estado de agregacin (slido, lquido, gas).

Leyes en las que se basa

Ley de Beer; Declara que la cantidad de luz absorbida por un cuerpo depende la concentracin de la solucin Ley de Lambert; en un cuerpo que radia su luminancia espectral energtica es la misma para un elemento cualquiera y no depende de la direccin de emisin Ley de Bouguer-Beer-Lambert; Combinacin de las mencionadas anteriormente

Ley de Bouguer- Beer- Lambert

La absorbancia de una especie en solucin homognea es directamente proporcional a su actividad ptica y su concentracin. Es una relacin emprica que relaciona la absorcin de luz con las propiedades del material atravesado

 La ley de Bouguer-Lambert-Beer se puede escribir de las siguientes formas: It/Io== 10 -abC -log T = -abC -log T = A= abC Donde C es la concentracin del soluto , a el coeficiente de absortividad molar y b la absorbancia es adimensional. Al no conocer el peso molecular de la sustancia de se puede expresar como: A=abC Donde a el coeficiente de absortividad molar

Espectro Electromagnetico
Comprende una gama de diferentes longitudes de onda de energa radiante desde una muy corta ( 0.0001 A) de rangos csmicos hasta las ondas de radio (30 mts).

Radiacin Electromagntica
Se representa como un campo elctrico y otro magntico que esta en fase con oscilaciones sinusoidales en un ngulo recto de uno respecto al otro y respecto a la direccin de la propagacin es una combinacin de campos elctricos y magnticos oscilantes, que se propagan a travs del espacio transportando energa de un lugar a otro. A diferencia de otros tipos de onda, como el sonido, que necesitan un medio material para propagarse, la radiacin electromagntica se puede propagar en el vaco.

Transmitancia
La transmitancia se refiere al porcentaje de luz que puede pasar por una sustancia. Puede presentar valores de 0% (Sustancia que no permite el paso de la luz) a 100% (Sustancia totalmente transparentes).

Absorbancia
La absorbancia o extincion presenta valores de 0 ( cuando la sustancia no absorbe la luz o es transparente) a 2 ( Para sustancias muy absorbentes u opacas)

Espectrofotometro
El espectrofotmetro es un instrumento que permite comparar la radiacin absorbida o transmitida por una solucin que contiene una cantidad desconocida de soluto, y una que contiene una cantidad conocida de soluto.

Componentes de un espectrofotmetro
1 Fuente de luz La misma ilumina la muestra. Debe cumplir con las condiciones de estabilidad, direccionabilidad, distribucin de energa espectral continua y larga vida. Las fuentes empleadas son lmpara de tungsteno y lmpara de arco de xenn.

2 Monocromador Para obtener luz monocromtica, constitudo por las rendijas de entrada y salida, colimadores y el elemento de dispersin. El monocromador asla las radiaciones de longitud de onda deseada que inciden o se reflejan desde el conjunto.

3 Fotodetectores

En los instrumentos modernos se encuentra una serie de 16 fotodetectores para percibir la seal en forma simultnea en 16 longitudes de onda, cubriendo el espectro visible. Esto reduce el tiempo de medida, y minimiza las partes mvils del equipo.

Utilidad.
Los espectrofotmetros son tiles debido a la relacin de la intensidad del color en una muestra y su relacin a la cantidad de solute dentro de la muestra. El espectrofotmetro tiene la capacidad de proyectar un haz de luz monocromtica (de una longitud de onda particular) a travs de una muestra y medir la cantidad de luz que es absorbida por dicha muestra. Esto le permite al experimentador realizar dos funciones:

Utilidad
1. Nos da informacin sobre la naturaleza de la sustancia en la muestra. Esto podemos lograrlo midiendo la absorbancia (Abs) a distintos largos de onda (l) y graficar estos valores en funcin del largo de onda, formando un espectrograma. Como cada sustancia tiene unas propiedades espectrales nicas, distintas sustancias producen distintos espectrogramas. Esto se debe a que cada sustancia tiene un arreglo de tomos tridimensional particular que hace que cada sustancia tenga caractersticas nicas. 2. Nos dice cuanta cantidad de la sustancia que nos interesa est presente en la muestra. La concentracin es proporcional a la absorbancia, segn la Ley Beer-Lambert: a mayor cantidad de molculas presentes en la muestra, mayor ser la cantidad de energa absorbida por sus electrones.

Ejemplos de distintos tipos de Espectrofotmetros

ESPECTROFOTOMETRO DE ABSORCIN ATMICA

ESPECTROFOTMETRO SMART SPECTRO

Porttil e ideal para anlisis de aguas.

Seleccin automtica de longitud de onda.

Espectrofotmetro UV-Visible UVmini-1240

Aplicaciones Estndar con Espectrofotmetro UV Mini Modo fotomtrico para longitud de onda fija Con el modo fotomtrico, Ud. puede medir la absorbancia o la transmitancia en la longitud de onda fija. Modo espectro para barrido de longitud de onda Con ese modo estndar, Ud. puede lograr espectro UV-Visible completo de muestras de 190nm a 1100nm. Modo cuantificacin para anlisis de longitud simple Este modo le permite a Ud. preparar curva de calibracin para determinaciones fciles de concentraciones de muestras desconocidas.

ESPECTROFOTOMETRIA UV-VIS TU 1800 Uv-Vis Spectrophotometer

El TU1800/1800S es el ms popular espectofotmetro de P-General. Su ptica adopta el sistema de medicin SPLIT-BEAN con un detector formado por dos fotodiodos de estado slido de alta sensibilidad.

Bibliografa.
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www.cas-instrumental.com.ar/aa6vario.htm www.chm.davidson.edu/ChemistryApplets/ spectrophotometry/Spectrophotometry.html