UNIVERSIDAD PERUANA LOS ANDES

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA PROFESIONAL DE TECNOLOGA MDICA

INMUNOHEMATOLOGIA Y BANCO DE SANGRE (DETECCION E IDENTIFICACION DE ANTICUERPOS

CLINICAMENTE SIGNIFICATIVOS)
2012- I Lic. TM. JUAN CORTEZ ALEJANDRO

Transfundir .. o no transfundir

DETECCION E IDENTIFICACION DE ANTICUERPOS

rea cautivante de inmuno hematologa 0.2 a 2% (38%) del tipo de Poblacin Acs: inmunizacion antigenos extraos embarazos, transfusiones o inyeccin Detectado por prueba que use suero Necesario identificacin : significado

DETECCION E IDENTIFICACION DE ANTICUERPOS

Base : AGLUTINACION 1ra Tcnica: suero + hemates sol isot. Incubacin de la mezcla a 37C Resuspensin de hemate con plasma Utilizacin sangre citratada en portas Resuspensin de hemates en albmina

Identificacin Acs irregulares

Empleo de Clulas de Gentica conocida Cels Pantalla: Estndar, Caliente, otras Cels Panel: A, B y C Uso de Reactivos : Antiglobulina Uso de Potenciadores : Albmina Bob. 22%

DETECCION E IDENTIFICACION DE ANTICUERPOS

Polivinilpirrolidona (PVP), Dextrano Prueba de Antiglobulina ( 1942 ) Uso de Enzimas, Tripsina ( 1947 ) Papaina ( 1950 ), Ficina ( 1957 ) Solucin L I S S ( 1960 )

DETECCION E IDENTIFICACION DE ANTICUERPOS

Donantes sangre Candidatos receptor Politransfundidos Evaluacin Prenatal Neonatos. EHRN

DETECCION E IDENTIFICACION DE ANTICUERPOS

Investigacin de RHT Investigacion AHAI Investigacion de PCM incompatible Discrepancias ABO

DETECCION DE ANTICUERPOS

Cel. rojas detentoras Ags mas importante

Mayor Fza antignica

Estructura Ag. varia considerablemente 99% Ac sign Clnica

Se realiza variedad condiciones centrifugacin inmed Incubacion T Amb. Con/sin Rx estimulo Incubacion a 37C Fase Antiglobulina

REACTIVOS UTILIZADOS PARA LA INVESTIGACION DE ANTICUERPOS

Hemates Gentica Conocida Clulas Pantalla Clulas Panel Clulas dirigidas ANTIGLOBULINAS Poli- Mono especifico

Rx de Estimulo o Potenciadores Albmina bovina LISS Enzimas PEG Polibrene

DETECCION DE ANTICUERPOS
I
Alb Bov

Salino
CEL
I

II

37C
KELL
K + 0

Fase AGH
LEWIS
Lea + 0

N Nro
II

D C E c e + + 0 0 + + 0 ++ 0

Rh-Hr

k 0 +

Leb 0 +

Identificacin de Anticuerpos

En que fase(s) ocurri la reaccin Autocontrol Pos / Neg Todas las cels reaccionaron : igual/dif. fase, fuerza Rx real, hemlisis

Identificacin de Anticuerpos

Determinar su especificidad del Ac (s) Se disea un protocolo: acorde Cel I-II Evaluar caractersticas : Rango trmico, reactivo en uso, clase Ac, hemlisis, etc. Conocer : antecedentes, Hcl, Dx. Utilizar panel de clulas A, B y/o C.

Que Acs Identificamos ?

Acs simples Acs mltiples Acs para Ag baja frecuencia Acs para Ag alta incidencia

Acs Fros Acs alto titulo baja afinidad Acs para Ag privado Acs ABH adquiridos pasivamente

TECNICAS DE IDENTIFICACION

Enzimas Var. Temperatura Modif. del pH Inhibicin Ags solub. Absorcin y Elucin Uso Comp Tiol Cels Rh Nulo

TIPOS DE PANELES EN IDENTIFICACION DE ANTICUERPOS

Panel con / sin reactivo de estimulo Panel enzimtica Panel fro y Caliente Panel Mono especifico Ig G Panel para Ac. concentrado

TIPOS DE PANELES DE IDENTIFICACION DE ANTICUERPOS

Panel Acidificado (pH) Panel dirigidos para Ags especficos Panel para Anticuerpo inhibido Panel para Ac. Absorbido y/o Eluido

Modificacin de Tcnicas de Identificacin de Acs.

RX DE ESTIMULO Cloruro de sodio Albmina bovina LISS PEG

CAMBIOS T

Incubacion a 4C Incubacion 12- 24C Incubacion a 30C Incubacion a 37C

MODIFICACION DE TECNICAS EN IDENTIFICACION DE ACS.

ESPECIFICIDAD AGH Poli especifica AGH Mono especficos Ig G, Complemento

USO DE ENZIMAS
+ -+ + + - - + + +

+ + - - -+ +- - + +

Tratamiento Enzimtico

* PANEL ENZIMATICO * TRATAMIENTO DE CELULAS * FICINA * BROMELINA * PAPAINA

-+ ++

+ -

+ -

VARIACIONES DE TEMPERATURA
37C * PANEL CALIENTE * PANEL FRIO * EVALUACION RANGO TERMICO

4C

VARIACIONES TIEMPO INCUBACION

15 min 60 min
* AUMENTO PUEDE SER DE 15 a 60 * DIFERENTES TEMPERATURAS

INCREMENTO PROPORCION DE SUERO

* PUEDE VARIAR DE 2 gts a 10 gts * REACCIONES MAS FUERTES

MODIFICACION DEL pH
+ + -

pH
PUNTO ISOELECTRICO 7.5

- 8.5 + + ++ + + + + + + ++ + + +

- 6.5
+ + +

7.0

INHIBICION AGS SOLUBLES

* ORINA : AG Sda * PLASMA: AGS Cha, Rga * LIQ. QUISTE HIDATIDICO: P1 * LECHE MATERNA : AG I *SALIVA : SUSTANCIA LEWIS

+
NO AGLUTINACION

ANTICUERPOS INESPERADOS

Deteccin de anticuerpos inesperados, tamizacin de anticuerpos, rastreo de anticuerpos, bsqueda de anticuerpos irregulares.

PAI Positivo

Condiciones de la reaccin: Diferentes temperaturas diferentes medios (salino, potenciadores -albmina, LISS, polietilenglicol. Polibreno- antiglobulina, enzimas).

DETERMINACIN DEL GRUPO RH

Determinacin del fenotipo Rh.

DETERMINACIN DEL GRUPO RH

Variante D dbil Du: Se presenta en individuos que poseen en sus glbulos rojos pocos determinantes antgenos D o que por causas genticas se manifiestan dbilmente. Para su deteccin se realiza un coombs indirecto. Los anticuerpos del sistema Rh, no son naturales, solo se encuentran como resultado de una inmunizacin por transfusin embarazo incompatible.

ANTICUERPOS INESPERADOS

Celulas I, II, III Con dotacin antigenica conocida. Utilidad conocer la presencia de Anticuerpos inesperados.

Panel de clulas Utilidad determinar el anticuerpo Especifico.

1- PAI

2- PAI

LISS-Coombs

ANTICUERPOS INESPERADOS

Buscar Ag clnicamente significativos

Panel de Glbulos O con dotacin Antigenica conocida.

D ,C, E, c, e, M, N, S, s, P1, Lea,Leb,K, k, Fya , Fyb, Jka, JKb.

Rh-hr
D C E c e C
w

Kell
K k

Duffy Kidd Lewis

Fya Fyb Jk
a

P
b 1

MNS
M N S

Luteran
s Lua L ub

Jk
b

Le Le P
a

1 2 3 4 5 6

+ + 0 0 + 0 0 + 0 + 0

+ + + 0 + 0

0 + 0 0 0 +

+ + + 0 + 0 + + + + + +

+ + 0 0 0 +

0 0 + + + +

+ + + 0 0 +

0 0 + 0 0 +

0 0 + 0 + 0

+ + + + 0 + 0 0 + 0

+ 0 + 0 + 0 + 0 + + + 0

+ + + + + +

+ + 0 0

+ 0

+ + 0 0

+ + + 0 + + 0 0 0 0 + 0

+ + 0 + 0

+ 0 0

+ + 0

7
8
9

0 0
0 0

+ + 0

0
0

+ 0
+ 0

+
+

+
+

+
0

+
0

+
0

+ + 0 +
+ + + +

0 +
+ 0

+
+

+ + + 0

0 0

0
0

+ + 0
+ + 0

0
0

+ +
+ +

+
+

+
+

0
0

0
0

+
0

+ + +

+ 0
0 0

+
+

10 0 0 11

+ + 0 +

0 0 0 + + 0

+ +

+ +

0 + Fros

0 + 0 + IgM

+ 0

Fya

GRACIAS