Algoritmos bacterianos

QBP. DOMINGO SANCHEZ FRANCIA HOSPITAL DEL NIO MORELENSE

CUERNAVACA MORELOS.

I.-Puntos a tomar en cuenta en las marchas bacterianas

1.-Toma de muestra
2.-Transporte de la muestra 3.- Anlisis Microscopico

4.- Cultivo y primoaislamiento

5.- Identificacin Bacteriana

II.- Origen de muestras clnicas

1.Las muestras para el estudio bacteriolgico, se dividen en dos tipos:

a).- las que proceden de sitios en los que no hay flora bacteriana normal presente.

b).- aquellas que se toman de lugares que tienen flora bacteriana normal.

Flora bacteriana
Es importante que el bacterilogo tenga conocimiento de los siguientes aspectos: cuales son los agentes etiolgicos aislados con mayor frecuencia en procesos infecciosos de sitios anatmicos normalmente estriles. cuales son los microorganismos, presentes, bajo condiciones normales, en la piel y en las mucosas.

Presencia de biota normal en diferentes zonas corporales del humano.

ZONAS CORPORALES LIBRES DE BIOTA NORMAL Aparato respiratorio inferior -Laringe -Traquea -Bronquiolos Aparato genitourinario -Ureteros -Vejiga -Rin -tero Lquidos -Sangre -Mdula sea -L.C.R. -Lquido seroso -Lquido sinovial -Lquido pleural -Orina Tejidos ZONAS CORPORALES CON DE BIOTA NORMAL Piel Mucosas -Boca -Orofaringe -Nasofaringe Odo externo Ojo Aparato genitourinario -Uretra anterior -Vagina Aparato gastrointestinal -Estmago -Intestino delgado -Intestino grueso

III.- TRANSPORTE DE LA MUESTRA

1.-La cantidad de material debe ser adecuado.

2.-La muestra debe ser representativa del proceso infeccioso (por ejemplo, expectoracin, no saliva; pus de la lesin subyacente, no de su trayecto fistuloso; una muestra de lo profundo de la herida, no de la superficie).
3.-Se debe evitar la contaminacin de la muestra utilizando slo equipo estril y precauciones aspticas. 4.-Las muestras para ser enviadas al laboratorio deben colocarse en un medio de transporte, el cual tiene como propsito mantener la viabilidad de las bacterias presentes en la muestra e impedir su multiplicacin. Se han diseado diferentes medios de transporte, el que ms se utiliza es el de Stuart.

Medios de transporte de uso en Bacteriologa Mdica.

MEDIO
STUART STUART REDUCIDO CARY-BLAIR AMIES GLICEROL SOLUCIN SALINA AMIES Y DOUGLAS HAJNA

PROPOSITO
Aerobios y anaerobios facultativos Anaerobios estrictos Shigella y Campylobacter

CARBN ACTIVADO CAS REGAN-LOWE 2SP TRANSGROWN PIKE CALDO UREA CAMPYTIO SP4

Streptococcus pyogenes Bordetella pertussis Bordetella pertussis Chlamydia Neisseria gonorrhoeae Strptococcus pyogenes Helycobacter pylori Campylobacter jejuni Micoplasma

IV.- Condiciones apropiadas para el transporte de muestras

1.-La orina, las expectoraciones y el material de absceso, se pueden colocar en frascos estriles de boca ancha.

2.-Los lquidos corporales como el Lquido Cefalorraqudeo en tubos estriles (la sangre se coloca en frascos diseados ex profeso). 3.-Los trozos de tejido se pueden colocar en frascos estriles.

V.-Criterios para el rechazo en la evaluacin de las muestras

a) Muestras no aptas para su procesamiento: Punta de sonda foley Orina de bolsa de sonda Lquidos coagulados Cultivos para anaerobios enviados en medio de transporte inadecuado. b).-Muestras remitidas en condiciones inadecuadas.

c).-Solicitud de estudios especiales innecesarios.

VI.- MICROSCOPIA
Este procedimiento evidencia lo siguiente: 1.- La presencia de bacterias, cantidad, morfologa y agrupacin. 2.-Permite evaluar el grado de respuesta inmunolgica con la presencia de clulas fagocticas, cuyo quimiotactismo est orientado hacia un morfotipo bacteriano en particular (Criterios de Bartlett), donde se observen clulas bacterianas adheridas a la membrana de los PMN y dentro de las vacuolas digestivas formadas en el citoplasma de la clulas inflamatorias.

VI.- Microscopia
3.-La observacin microscpica es el primer paso, el cual permitir orientar el mtodo a desarrollar en el estudio bacteriolgico para el diagnstico clnico.

4.-Se pueden realizar preparaciones en fresco para la observacin en campo oscuro, ( treponemas y leptospiras), preparaciones en fresco de muestras de vagina para la observacin de clulas indicativas de vaginosis bacteriana.

VII.- Tinciones
1. Simples: Azul de metileno Fucsina fenicada Verde de malaquita
2. Diferenciales: Gram Ziehl-Neelsen Tan Thiam-Hok Machiavello Jimnez

VIII.- Tinciones Estructurales: a) Flagelos - Rhodes - Tribondeau - Leifson b) Esporas - Shaeffer-fulton - Moeller c) Cpsula - Hiss - Tinta china d) Grnulos metacromticos - Ernst-Neisser - Albert - Loeffler

Tincin Gram (cultivo fresco)

Forma
Agrupacin Crecimiento aerobio Crecimiento anaerobio Esporas Movilidad

coco
racimos +

coco
racimos + +

coco
cadenas + +

coco
tetradas + +

bastn

bastn

bastn

bastn

bastn

bastn

bastn

bastn

coco
pares

+ +

+ + +o

+ + + +o

+ + +o

+ +o

+ +o

+ + +o-

+ + +

Catalasa
Oxidasa Fermentacin de glucosa a acido o a acido+gas O/F

+
+

+
+ O

+
+ F

+
+ + F

+
+ O

+ (o )

Micrococcus Staphylococcus Streptococcus Lactococcus Enterococcus Leuconostoc Pediococcus Aerococcus Lactobacillus Clostridium Bacillus Alcaligenes Pseudomonas
Enterobacterias

X X X X X X X X X X X X X X X X X X X

Aeromonas Chromobacterium Neisseria

IX.-Caractersticas fenotipicas para la identificacin bacteriana

A).- Criterios Generales:

Requerimientos de Oxigeno (atmsfera) y temperatura de incubacin. Morfologa colonial. Tipo de hemlisis en GS carnero al 5%. Requerimientos nutricionales. Produccin de pigmentos. Tinciones: Afinidad a la tincin de Gram. Morfologa bacteriana. Presencia de enzimas. Reacciones inmunoserolgicas. Sensibilidad antimicrobiana.

X.- Criterios de Cowan y Steel

B).

Pruebas de seleccin Primaria :

Reaccin de catalasa Reaccin de oxidasa Prueba de movilidad Pruebas de O/F de carbohidratos Presencia de Esporas Tincin de Ziehel Neelsen Tincin de Gram

XI.-Requerimientos nutricionales
1.-Conocer que suplementos nutricionales que requiere MO para crecer ptimamente. 2.-Ejemplo: dependencia de factor NAD (V) o factor Hemina (X) ambos en el gnero Haemophilus.
3.-Familia Enterobacteraceae: no son organismos nutricionalmente exigentes.

XII.- Atmsfera
1.-Conocer cuales son los requerimientos de O2 de los MO. 2.-Aerobios. 3.-Microaeroflicos. 4.-Anaerobios facultativos. 5.-Anaerobios estrictos

XIII.- Temperatura
1.-Conocer la desarrollo. temperatura ideal para su

2.-Mesoflicos (35 a 37C): la mayoria de las especies bacterianas de inters clnico. 3.-Termoflicos (>37C): Pseudomonas aeruginosa (41C), Campylobacterias (42C).
4.-Psicroflicos(<ATM): Yersinia enterocoltica (4C), Listeria monocytogenes (ATM)

Morfologa colonial

Tipo de hemlisis en GS carnero al 5%

XIV.-Produccin de pigmentos
1.-Los pigmentos insolubles en agua incluyen los carotenoides (amarillo-naranja), la violacena (violeta o prpura) y las fenazinas (rojo, castao, marrn). 2.-Los pigmentos hidrosolubles y difusibles incluyen las fluorescenas (pioverdina), piocianinas, piorrubina, melanina y otros varios subproductos pigmentados, que cambian el color del medio de cultivo.

Pigmentos insolubles en agua

Carotenoides (amarillo-naranja)

Fenazinas (rojo, castao, marrn)

Pigmentos hidrosolubles y difusibles

Fluorescenas (pioverdina- piocianinas) Lampara de Wood (UV)

XV.-Tinciones: Afinidad a la tincin de Gram.

Morfologa bacteriana

XVI.-Reaccin de catalasa
Esta prueba detecta la presencia citocromooxidasas en las Micrococcaceae. de

La prueba se hace con perxido de hidrgeno (H2O2) al 3% sobre un portaobjetos. La produccin inmediata y abundante de burbujas indica la conversin del H202 en agua y oxgeno gaseoso. La prueba de la catalasa debe realizarse a partir de un medio que no contenga sangre porque los eritrocitos pueden producir una reaccin de catalasa dbil.

Prueba de la catalasa

Reaccin de citocromo oxidasa

Los

citocromo son hemoproteinas que contienen hierro y actuan como ltimo eslabn de la cadena de la respiracin aerobia ; transfireren electrones de Hidrgeno al Oxgeno, con la formacin de agua. El sistema citocromo se encuentra presente en microorganismos aerobios, microaeroflicos y en algunos anaerobios facultativos, pero nunca en anaerobios estrictos.

Dimetil-p-fenilendiamina al 1%

Prueba de movilidad

En agar semislido por gota pendiente

Pruebas de fermentacin de carbohidratos

1.-El medio OF de Hugh y Leifson contiene peptona al 0,2% y 1,0% de hidratos de carbono, de tal forma que la relacin entre peptona e hidrato de carbono es 1:5, a diferencia de la relacin 2:1 que existe en los medios utilizados para fermentacin de hidratos de carbono.
2.-La disminucin de la peptona minimiza la formacin de productos de oxidacin a partir de los aminocidos, que tienden a elevar el pH del medio y pueden neutralizar los cidos dbiles producidos por los bacilos no fermentadores.

Medio O/F

Los microorganismos oxidativos producen cido slo en el tubo abierto expuesto al oxgeno atmosfrico.

Los microorganismos fermentadores producen cido en ambos tubos.

Medio O/F
Izquierda tubo de OF inoculado con un organismo de metabolismo no fermentador y no oxidativo para la glucosa. Observe el ligero vire a alcalino (azul) debido a la utilizacin de proteinas (peptonas) del medio.

XVII.-Pruebas de fermentacin de carbohidratos

XVIII.-Presencia de enzimas
Deteccin de enzimas y vas metablicas

a) RM-VP

(KOH + Alfa-naftol).

b) O.N.P.G.

Prueba de la ONPG (o-Nitrofenil-D-galactopiransido)

Es un compuesto estructuralmente similar a la lactosa, excepto en que la glucosa ha sido reemplazada por un grupo o-nitrofenilo. Esta prueba permite detectar con mayor rapidez la fermentacin de la lactosa, al evidenciar la enzima galactosidasa ms rpidamente.

XIX.Reacciones inmunolgicas
Utilizacin de antisueros especficos para determinar el fenotipo antignico de grupo y tipo (seroagrupar, serotipificar)

MARCHAS BACTERIOLGICAS. 1.- Sistema gastrointestinal

1.-Coprocultivo rutina: A).- Salmonella sp 2.-Coprocultivo especfico A).- E. coli patgenas.

B).- Shigella sp

B).- Campylobacter sp. C).- Vibrios.

D).- Otras entidades .

A).- Coprocultivo
Las enfermedades infecciosas del aparato gastrointestinal representan una de las principales causas de mortalidad y morbilidad infantil por la diarrea aguda de nios menores de cinco aos. La patognesis de la diarrea involucra a varios microorganismos como agentes causales, pertenecientes en su mayora a la familia Enterobacteriaceae, entre los que destacan: Salmonella, Shigella, Yersinia y Escherichia coli.

Escherichia coli
Escherichia coli forma parte de la biota normal, sin embargo las cepas patgenas se clasifican de acuerdo con su mecanismo de patogenicidad en seis grupos:

1. Enteropatgena 2. Enterohemorrgica 3. Enterotoxignica 4. Enteroagregativa 5. Enteroadherente difusa 6. Enteroinvasiva

EPEC EHEC ETEC EaggEC DAEC EIEC

 Algunas especies de Campylobacter y Helicobacter se incluyen como causantes de enfermedad en el aparato gastrointestinal, al igual que Vibrio, Aeromonas y Plesiomonas.

Recoleccin de la muestra
Las muestras se recolectan directamente en un frasco limpio y de boca ancha con tapa hermtica, al inicio de la enfermedad y preferentemente antes de iniciar tratamiento antimicrobiano.
Cuando se sospecha de la posible recuperacin de Shigella y Campylobacter, es necesario tomar dos hisopos rectales impregnados de materia fecal, los cuales se colocan en medio de transporte Cary-Blair (se pueden usar otros medios de transporte como Stuart o Amies).

MATERIA FECAL
(MEDIO DE TRANSPORTE CARYBLAIR)

MAC CONKEY

XLD

CALDO SELENITO

INCUBAR 37C, 24h

INCUBAR 37C, 24h

INCUBAR 37C, 8 12 h

Seleccionar colonias Lac(+) y Lac (-). Resembrar en agar nutritivo para realizar pbas. bioqumicas

Resembrar en Agar SS VB Seleccionar colonias lac (-), LD(+ -) y/o produccin de H2S

AGAR NUTRITIVO Oxidasa OF

Identificar colonias sospechosas de Salmonella Lac(-) H2S(+)

OX(-) OF: (+/+)

OX(+ ) OF: (+/+)

OX(+ -) OF: (+/-) OF: (-/-)

AGAR NUTRITIVO Oxidasa OF

Pbas. Bioqumicas: KIA,ONPG,LD, OD, CIT, SIM MR-VP, UREA, FD Serotipificar AB CLSI

E.coli patgenas Shigella sp Salmonella spp Yersinia enterocolitica Plesiomonas Aeromonas

Pbas. Bioqumicas: KIA,ONPG,LD, OD, CIT, SIM MR-VP, UREA, FD Serotipificar AB CLSI

HISOPADO RECTAL CARY BLAIR

2.-Tracto genitourinario
I.V.U : Urocultivo Vaginitis Vaginosis: : Cultivo Vaginal

Cultivo vaginal

Uretritis:

Cultivo sec. uretral

A).- Urocultivo
La orina de personas sanas es estril debido a su vaciado frecuente, lo cual evita la colonizacin.
La acidez inhibe algunos microorganismos, y en los pacientes masculinos, la secrecin prosttica contiene espermita y zinc que impiden el desarrollo de algunas bacterias. Cuando la orina es turbia debido a la presencia de leucocitos (piuria), en ocasiones de eritrocitos (hematuria) y de bacterias, es sugestivo de infeccin de las vas urinarias (IVU). La bacteriuria puede ser asintomtica o presentarse como una enfermedad crnica o aguda.

 En la colonizacin de las vas urinaria, intervienen varios factores predisponentes que pueden ser de origen local como por ejemplo: la contaminacin fecal del meato urinario, el cateterismo, la patologa urinaria congnita o adquirida y el reflujo vesical.
Entre los factores generales se mencionan: la diabetes mellitus, el transplante de rganos, el SIDA, el embarazo, la hipertensin arterial y la terapia con frmacos de amplio espectro. Escherichia coli es el agente etiolgico en ms del 80% de estas infecciones; ocasionalmente pueden encontrarse dos o ms especies bacterianas involucradas.

 La muestra de eleccin, es la primera orina de la maana; sin embargo en la IVU aguda la carga bacteriana es representativa a cualquier hora del da. En pacientes femeninas se indica que deben lavarse el rea periuretral y la periferia del meato urinario, utilizando una gasa estril humedecida con agua y jabn, con movimientos de adelante hacia atrs.
posteriormente se limpiar el rea con una gasa estril humedecida con agua o solucin salina estril.

la recoleccin de la orina debe hacerse separando los labios mayores con una mano, la otra mano sostiene el frasco donde se deposita la muestra.

 A los pacientes masculinos se les indica que se limpien el glande y la periferia del meato urinario con una gasa impregnada con solucin salina estril antes de la miccin.
En ambos sexos la muestra debe tomarse por el mtodo del Chorro medio, que consiste en que el paciente debe desechar la primera porcin de orina y recolectar la parte media del chorro en un frasco de boca ancha estril.

En recin nacidos, nios y ancianos la muestra puede recibirse en una bolsa de plstico estril; las muestras tomadas en esas condiciones fcilmente se contaminan de biota fecal, en un resultado positivo debe considerarse la posibilidad de una contaminacin.

 El criterio que se aplica para evaluar la presencia de bacterias en la orina es el de Kass (1957) y Sanford (1956), el cual considera que las bacterias provenientes de las porciones superiores aparato urinario durante su residencia en la vejiga, utilizan la orina como medio de cultivo, alcanzando un poblacin superior a 100,000 UFC/ml de muestra. Por el contrario las bacterias que son arrastradas durante la miccin, nunca llegan a esas cifras por lo que en estos casos se les considera como contaminantes. Cuentas menores de 100,000 UFC/ml podran corresponder a infecciones en las vas superiores en pacientes que han recibido antimicrobianos, o en aquellos cuya orina est muy diluida por la terapia hidratante; por ltimo cuentas menores de 10,000 UFC/ml se toman como contaminantes.

Criterios para el diagnstico de IN

6.5 Infecciones de vas urinarias. (Sintomticas, cont.....) Independientemente de los hallazgos de urocultivo: 6.5.1.11 Chorro medio: muestra obtenida con asepsia previa, mayor de 50,000 UFC/ml (una muestra). 6.5.1.12 Cateterismo: ms de 50,000 UFC/ml (una muestra). 6.5.1.13 Puncin suprapbica: cualquier crecimiento es diagnstico. 6.5.1.14 El aislamiento de un nuevo microorganismo en urocultivo es diagnstico de un nuevo episodio de infeccin urinaria. 6.5.2 Asintomticas. Pacientes asintomticos de alto riesgo con un sedimento urinario que contenga 10 o ms leucocitos por campo ms cualquiera de los siguientes: 6.5.2.1 Chorro medio: muestra obtenida con asepsia previa mayor de 50,000 UFC/ml (una muestra). 6.5.2.2 Cateterismo: mayor de 50,000 UFC/ml (una muestra). 6.5.2.3 Puncin suprapbica: cualquier crecimiento es diagnstico.

ORINA Homogenizar

DILUIR LA MUESTRA DE ORINA EN SOLUCION SALINA ESTERIL

Lectura del Sedimento

DILUCIN 1:100 0.1 ml ORINA+9.9 ml SS ESTERIL Mezclar

Tincin de Gram

Inocular con asa bacterilogica de 0.01 ul o con una pipeta automatica 10l con una puntilla esteril

GS 5% u otro medio nutritivo Estriar de forma masiva 37C x 24 48 hrs COCOS GRAM POSITIVOS BACILOS GRAM NEGATIVOS

Agar de Mac Conkey con estria central 37C x 24 48 hrs

BGN AGAR NUTRITIVO

CONTAR EL NUM DE COLONIAS QUE DESARROLLARON Y MULTIPLICARLAS POR EL FACT. DE DIL. REPORTAR EN UFC/ml

IDENTIFICAR Y REALIZAR AB CLSI

B).- Exudado crvico vaginal

En las mujeres con signos y sntomas de infeccin genital aguda las muestras ms comunes son de cuello uterino y de uretra. Este estudio es util para determinar el posible agente causal de la vaginitis e incluso de la vaginosis bacteriana. Las muestras cervicales se obtienen con un espculo, despus de eliminar el moco cervical con una torunda seca y esteril.

Agentes potencialmente patgenos:

Vaginitis Neisseria gonorrhoeae Streptococcus agalactiae Candida albicans Mycoplasmas y ureaplasmas Chlamidia Trichomonas vaginalis

Vaginosis Gardnerella vaginalis Mobiluncus Bacteroides Peptostreptococcus

Toma del producto

Con la paciente en posicin ginecolgica se introducir un espculo lubricado con agua sol. salina estril. Recoger la muestra, bajo visin directa, con un hisopo de dalcrn, de la zona con mayor exudado, o en su defecto, del fondo del saco vaginal posterior. Repetir la operacin con la segunda torunda. Se obtendrn 3 hisopados, uno destinada al estudio microscpico del Gram, otro para cultivo y el tercero para el fresco. El envo de la muestra debe ser inmediato siempre que sea posible. El medio de transporte de Stuart-Amies, mantiene viables a los MO hasta por 3-6 horas.

Determinar pH insito 1er. Hisopo para laminilla Gram

Tincin de Gram compatible con vaginosis bacteriana

Mediante el uso de un espejo vaginal estril lubricado con agua estril, se toman 3 hisopados de muestrra de la secrecin de fondo de saco y cervix.
2do. Hisopo medio de transporte para cultivo Seleccionar medios de cultivo primarios

3er. Hisopo: Observar Fresco, KOH al 10% Criterios de Gardner y De Nugent Pseudohifas (+) Prrsitos

GS carnero 5%

GCh TM

Agar Dextrosa Sabouraud Agar Biggy Aagr Micosel

CGP Cadenas Col.hem. Cat(-) TaxoA= R TSX= R CAMP(+)

CGP cadenas Col. hem. Cat(-) PYR(+) BE(+) NaCl 6.5 (+)

Col. Grises, brillantes de DCGN oxidasa positiva. Cat(+) Identificacin de Neisserias Gilu(+), Mal(-), Fruc(-) pruebas de sensibilidad.

TG(+) Mal(+), Sac(-), Tre(+), Lac(-) Ure(-)

Streptococcus hem. Gpo. B Enterococos

Neisseria gonorrhoeae

Candida albicans

Pruebas de susceptibilidad (CLSI)

C).-Exudado uretral masculino

El diagnstico de gonorrea puede establecerse en los hombres que se presentan con uretritis supurativa aguda, en quienes es posible identificar los diplococos intracelulares gramnegativos. Cuando la descarga uretral es escasa y los diplococos intracelulares no aparecen en una muestra al azar, la toma de la primera muestra de la maana, antes de orinar, suele ser til. La incidencia de C. trachomatis excede la de N. gonorrhoeae como causa de infecciones supurativas agudas en los genitales. Los signos y sntomas son indistinguibles; C. trachomatis tiende a generar menos exudado y menor concentracin de neutrfilos segmentados que N. gonorrhoeae.

 Hasta un 20% de hombres y un 40% de las mujeres con gonorrea pueden estar coinfectados por C. trachomatis. En muchos casos pueden requerirse procedimientos de cultivo para recuperar ambos microorganismos, en particular cuando el tratamiento falla. Con frecuencia, tanto en hombres como en mujeres la infeccin es asintomtica, en particular cuando el agente infeccioso es C. trachomatis.

Toma del producto

Limpiar cuidadosamente la mucosa circundante con gasas estriles. Introducir el hisopo suavemente con un movimiento de rotacin hasta penetrar unos 2 cm dentro de la uretra (3-5 cm para la investigacin de Chlamydia trachomatis) y depositar en el medio 2SP. Repetir operacin con un segundo hisopo para tincin Gram. El medio de transporte de Stuart-Amies, mantiene viables a los MO hasta por 3-6 horas.

3.- Vas respiratorias A).- Infecciones de las VRS

Exudado faringeo : Diagnstico de Faringo amigdalitis, amigdalitis, epiglotitis. Portadores de patgenos oportunistas Exudado nasal. Exudado Otico: Diagnstico de otitis media.

B).- Infecciones de las VRI

Cultivo de Expectoracin. Cultivo de Lavado Bronco Alveolar. Cepillado Bronquial (CB).

A).- Exudado faringeo

Este estudio bacteriolgico esta encaminado como una herramienta para el diagnostico confirmatorio de la faringo amigdalitis de origen pigena, La confirmacin de patologas complejas, tales como la difteria, la angina de Vincent, la faringitis clamidiana y micoplsmica, as como las infecciones virales, no pueden ser evidenciadas por este procedimiento. El clnico debe de formular el cuadro diagnstico complementario cuando esto sea necesario.

 Los microbilogos deben orientar a los mdicos para realizar un diagnstico adecuado entre "investigacin de estreptococos" y cultivos de rutina. La confusin surge cuando los mdicos ordenan cultivos de rutina de garganta para faringitis agudas y el laboratorio reporta la presencia de Staphylococcus aureus, Enterobacterias y BGN no fermentadores, Haemophilus influenzae y otros microorganismos que no causan faringoamigdalitis primaria.

 Bajo visin directa, con la ayuda de un depresor lingual, se tocar con un hisopo de dacrn en todas las partes con exudado, membranas o inflamacin.

Se deben frotar las criptas tonsilares y la faringe posterior.

No tocar nunca la mucosa oral, lengua o vula. Se investigar rutinariamente la presencia de Streptococcus beta-hemoltico del grupo A (S. Pyogenes), la posible presencia de los Streptococcus beta-hem. De los grupos C y G.

 Se le solicita al paciente que abra bien la boca y que emita un "ah". La lengua se abate suavemente con una esptula y se gua un hisopo hacia la faringe posterior. La mucosa detrs de la vula y entre los pilares amigdalinos es recolectada con un movimiento suave de barrido de atrs hacia delante.

EXUDADO FARINGEO

GS de carnero al 5% Sembrar por estra cruzada Picar el medio 3-5 ocasiones Incubar en CO2 al 3% 24 48 hrs 37C

CGP Cadenas Col hem. Cat(-)

BAC (S) 0.04U TSX (R) 1.25/23.75 ug CAMP (-) Grupo A PYR (+)

BAC (S) 0.04U TSX (S) 1.25/23.75 ug CAMP (-) Posible Grupo C PYR (-)

BAC (R) 0.04U TSX (S) 1.25/23.75 ug CAMP (-) Posible Grupo G PYR (-)

Seroagrupar preferentemente Realizar susceptibilidad (CLSI)

B).- Cultivo nasal

Es la muestra indicada para la investigacin de Bordetella pertussis y de otros patgenos
oportunistas (S. pneumoniae, H. influenzae, Neisseria meningitidis). En pacientes inmuno comprometidos se evaluara la colonizacin de: K. pneumoniae subesp. Rhinoscleromatis K. pneumoniae subesp. ozaenae

Toma del producto

Las muestras nasofarngeas se obtienen usando iluminacin por encima del hombro. Con el pulgar de la mano, se eleva delicadamente la punta de la nariz, se humedece la punta de un hisopo nasofarngeo delgado de alambre flexible con agua o solucin salina estril y se lo inserta con suavidad en uno de los orificios nasales. El hisopo se gua hacia atrs y hacia arriba a lo largo del septo hasta encontrar resistencia, que indica que se ha llegado a la faringe posterior, se retira con delicadeza y se deposita en el medio de transporte Stuart.

Secrecin nasal
Toma de ambas narinas

GS al 5% al 5% CO2 al 5% 24-48hrs 37C

GCh al 5% CO2 al 5% 24-48hrs 37C

Mac Conkey 24-48 Hrs 37C

Agar Dextrosa Sabouraud (Opcional)

CGP racimos Col. hem Cat(+) Furazolidona(S) Oxidasa (-)

CGP Cat(-)

BGN Pleomrficos F(V) F(X)

BGN LAC (+ -)

INV. Hongos ms comunes En pacientes Inmunodeprimidos

Coag(+) Manitol(+) Lac(+)

DCGP Col.hem Taxo P(S) 16mm OPT 5ug Sol. en bilis (+)

F(V) (+) F(X) (+) IND ORN URE

F(V) (+) F(X) (-) IND ORN URE

Agar Nutritivo OX OF Pigmentos

OX(-) OF: (+/+)

OX(+ -) OF: (+/-) OF: (-/-)

Staphylococcus aureus AB. CLSI Solo en manejadores De alimentos

S. pneumoniae
Serotipificar AB. CLSI

H. influenzae
Serotipificar AB CLSI

H. parainfluenzae Serotipificar AB CLSI

FENOTIPO KIA, ONPG,RM-VP Citrato,LD,OD,SIM, URE, FD

K. Rhinoscleromatis K. ozaenae

BGNF

C).- Otitis media

Se define otitis media como la presencia de exudado en la cavidad media del odo. Los lactantes y nios pequeos son los ms propensos a padecer otitis media,
Los dos principales patgenos son: Cocos gram positivos como: Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes, Staphylococcus aureus. Bacilos Gram negativos como: E. coli o Pseudomonas aeruginosa,Haemophilus influenzae y anaerobios

Cultivo de secrecin de odo

El Cultivo bacteriolgico de aspirado de odo medio adecuadamente recolectados, permite determinar cules son los microorganismos responsables de la otitis media aguda.
La timpanocentesis para obtener lquido para cultivos, solo es til si existe exudacin. Puede ser necesario el cultivo simultneo e LCR y sangre, si existen signos y sntomas sistmicos.

Exudado de odo
Toma de ambas narinas

GS al 5% al 5% CO2 al 5% 24-48hrs 37C

GCh al 5% CO2 al 5% 24-48hrs 37C

Mac Conkey 24-48 Hrs 37C

Agar Dextrosa Sabouraud (Opcional)

CGP racimos Col. hem Cat(+) Furazolidona(S) Oxidasa (-)

CGP Cat(-)

BGN Pleomrficos F(V) F(X)

BGN LAC (+ -)

INV. Hongos ms comunes En pacientes Inmunodeprimidos

Coag(+) Manitol(+) Lac(+)

DCGP Col.hem Taxo P(S) 16mm OPT 5ug Sol. en bilis (+)

F(V) (+) F(X) (+) IND ORN URE

F(V) (+) F(X) (-) IND ORN URE

Agar Nutritivo OX OF Pigmentos

OX(-) OF: (+/+)

OX(+ -) OF: (+/-) OF: (-/-)

Staphylococcus aureus AB. CLSI Solo en manejadores De alimentos

S. pneumoniae
Serotipificar AB. CLSI

H. influenzae
Serotipificar AB CLSI

H. parainfluenzae Serotipificar AB CLSI

FENOTIPO KIA, ONPG,RM-VP Citrato,LD,OD,SIM, URE, FD

K. Rhinoscleromatis K. ozaenae

BGNF

D).-Cultivo de expectoracin
Las infecciones del tracto respiratorio inferior son de las ms frecuentes dentro del conjunto de las infecciones,tanto entre las adquiridas en el ambiente comunitario como en el medio nosocomial. La bronquitis crnica se define, como proceso caracterizado por un descenso los flujos espiratorios que no cambian manera significativa tras varios meses seguimiento. un de de de

 El diagnstico viene sugerido por el cuadro clnico, por lo que el cultivo no es la herramienta de Dx de mayor utilidad para esta patologa. Un gran nmero de los pacientes son fumadores,o estn expuestos de forma prolongada a substancias nocivas para la mucosa bronquial, y que refiere tos y expectoracin habitual; segn la definicin clsica, durante un mnimo de 3 meses y hasta por dos aos consecutivos.

Esputo inducido
No es el tipo de muestra ms representativa

de las inefcciones VRI, por su mezcla con secreciones procedentes de todo el arbol traqueo-bronquial y con la flora saprfita de la orofaringe.
El resultado depender en gran medida de su correcta obtencin, control de calidad antes de iniciar su proceso, tipo de agente que se pretenda detectar.

Obtencin del producto.

Enjuagar la boca con agua estril o solucin salina. Obtener el esputo tras una expectoracin profunda, preferentemente matinal. De no producirse expectoracin espontnea, puede inducirse el esputo con nebulizaciones de suero fisiolgico estril (15 ml durante 10 minutos. Recolectar en un frasco de boca ancha esteril por lo menos 2 ml de la secrecin. Procesar lo antes posible. Muestra de calidad =>25 PMN CE <=10 en promedio de 30 campos a 10x.

Criterios para el diagnstico de IN

Infecciones del tracto respiratorio.
6.1.2 Infecciones de vas respiratorias bajas. CIE-10 (J12-J18, J20, J86.9, J98.5). 6.1.2.1 Neumona. CIE-10 (J12-J18). Cuatro criterios hacen el diagnstico. Criterios 6.1.2.1.4 y 6.1.2.1.5 son suficientes para el diagnstico de neumona. 6.1.2.1.1 Fiebre, hipotermia o distermia. 6.1.2.1.2 Tos. 6.1.2.1.3 Esputo purulento o drenaje purulento a travs de cnula endotraqueal que al examen microscpico en seco dbil muestra <10 clulas epiteliales y > 20 leucocitos por campo. 6.1.2.1.4 Signos clnicos de infeccin de vas areas inferiores. 6.1.2.1.5 Radiografa de trax compatible con neumona. 6.1.2.1.6 Identificacin de microorganismo patgeno en esputo, secrecin endotraqueal o hemocultivo.

Muestra de Expectoracin

Gram: Criterios de Murray-Bartlett PMN =>25 CE <=10

GS al 5% al 5% CO2 al 5% 24-48hrs 37C

GCh al 5% CO2 al 5% 24-48hrs 37C

Mac Conkey 24-48 Hrs 37C

Agar Dextrosa Sabouraud (Opcional)

CGP racimos Col. hem Cat(+) Furazolidona(S) Oxidasa (-)

CGP Cat(-)

BGN Pleomrficos F(V) F(X)

BGN LAC (+ -)

INV. Hongos ms comunes

Coag(+) Manitol(+) Lac(+)

DCGP Col.hem Taxo P(S) 16mm OPT 5ug Sol. en bilis (+)

F(V) (+) F(X) (+) IND ORN URE

F(V) (+) F(X) (-) IND ORN URE

Agar Nutritivo OX OF Pigmentos

OX(-) OF: (+/+)

OX(+ -) OF: (+/-) OF: (-/-)

OX(+) OF: (+/+)

Staphylococcus aureus AB. CLSI

S. pneumoniae
Serotipificar AB. CLSI Coag(-) Manitol (V) Lac(V)

H. influenzae
Serotipificar AB CLSI

H. parainfluenzae Serotipificar AB CLSI

FENOTIPO KIA, ONPG,RM-VP Citrato,LD,OD,SIM, URE, FD

ECN

Enterobacterias

BGNF

Vibronaceae

E).- Neumona adquirida en la comunidad (NAC).

Constituye una causa muy importante de morbilidad y mortalidad. La mortalidad varia desde el 5% a ms del 30%, segn el agente causal y diversos factores de riesgo individuales. En los pases industrializados, la NAC es la primera causa infecciosa de muerte y la sexta de mortalidad general. El nmero de personas que fallecen cada ao en el mundo como consecuencia de esta infeccin se cifra en aproximadamente 5 millones.

F).- Cultivo de LBA CB

Neumona nosocomial: La mayora de los estudios consideran la neumona nosocomial como la segunda causa de las infecciones adquiridas en el hospital. La neumona nosocomial se adquiere a travs de tres mecanismos: la aspiracin, la inhalacin de aerosoles y la diseminacin hematgena a partir de otro foco de sepsis. La flora orofarngea normal est formada principalmente por cocos grampositivos.

 La colonizacin de la orofaringe por BGN se observa en menos del 10% de los individuos sanos, aumenta con hospitalizaciones prolongadas y alcanza el 60-75% en enfermos crticos ingresados en unidades crticas. La implicacin de los (enterobacterias como Klebsiella coli, Serratia marcescens, Pseudomonas aeruginosa) en la muy frecuente (20-60%). bacilos gramnegativos pneumoniae, Escherichia Enterobacter spp., y neumona nosocomial es

En el enfermo ventilado, Staphylococcus aureus se situara en segundo lugar (10-30%), mientras que otros microorganismos ms prevalentes en la comunidad, como Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae o Chlamydia pneumoniae seran menos frecuentes.

LBA CB

Gram: Criterios de Murray-Bartlett PMN =>25 CE <=10 Presencia de cel. ciliadas

GS al 5% al 5% CO2 al 5% 24-48hrs 37C

GCh al 5% CO2 al 5% 24-48hrs 37C

Mac Conkey 24-48 Hrs 37C

Agar Dextrosa Sabouraud (Opcional)

CGP racimos Col. hem Cat(+) Furazolidona(S) Oxidasa (-)

CGP Cat(-)

BGN Pleomrficos F(V) F(X)

BGN LAC (+ -)

INV. Hongos ms comunes

Coag(+) Manitol(+) Lac(+)

DCGP Col.hem Taxo P(S) 16mm OPT 5ug Sol. en bilis (+)

F(V) (+) F(X) (+) IND ORN URE

F(V) (+) F(X) (-) IND ORN URE

Agar Nutritivo OX OF Pigmentos

OX(-) OF: (+/+)

OX(+ -) OF: (+/-) OF: (-/-)

OX(+) OF: (+/+)

Staphylococcus aureus AB. CLSI

S. pneumoniae
Serotipificar AB. CLSI Coag(-) Manitol (V) Lac(V)

H. influenzae
Serotipificar AB CLSI

H. parainfluenzae Serotipificar AB CLSI

FENOTIPO KIA, ONPG,RM-VP Citrato,LD,OD,SIM, URE, FD

ECN

Enterobacterias

BGNF

Vibronaceae

Muestras sistmicas
a) b) c) LCR Sangre Mdula sea Lquidos diversos: L. Pleural L. Sinovial L.Peritonial

4.- Lquido cefalorraqudeo (LCR)

El lquido cefalorraqudeo (LCR) es la muestra clnica representativa cuando hay sospecha de meningitis sptica.
Los agentes infecciosos ms comunmente identificados incluyen N. meningitidis, S. pneumoniae , H. influenzae, S. agalactiae Otros agentes menos frecuentes son: Enterobacterias, C. neoformans, C. albicans, algunos BGNF, S. aureus entre otros.

Obtencin de lquido cefalorraqudeo (LCR)

La coleccin del LCR solamente debe ser tomada por personal especializado y bajo condiciones de estricta asepsia. Por lo general, se sacan tres tubos de LR para qumica, microbiologa y citologa. Si solamente hubiera disponible un tubo, este debe enviarse al laboratorio de microbiologa para su inmediato anlisis.

Transporte de las muestras de LCR

Enviar inmediatamente al laboratorio de microbiologa para su anlisis (en un plazo no mayor de 1 hora a partir del momento de la obtencin de la muestra
No refrigerar ni exponer extremo o a la luz solar. a calor

LCR
Centrifugar el LCR 3000 RMP/15min SEDIMENTO: Tinciones Gram Ziehl Neelsen Tinta china

Sobrenadante Ag capsulares: N. meningitidis, H. influenzae, S. pneumoniae, S. del gpo.B, Escherichia coli.

GS al 5% al 5% CO2 al 5% 24-48hrs 37C

GCh al 5% CO2 al 5% 24-48hrs 37C

Mac Conkey 24-48 Hrs 37C

Agar Dex. Sabouraud (Opcional)

CGP racimos Col. hem Cat(+) Furazolidona(S) Oxidasa (-)

CGP Cat(-)

Coag(+) Manitol(+) Lac(+)

DCGP Col.hem Taxo P(S) 16mm OPT 5ug Sol.en bilis (+)

CGP Col. hem Cadenas cortas Taxo A (R) SXT(R) CAMP (+)

BGN Pleomrficos F(V) F(X)

DCGN Cat(+) OX(+) Glu(+) Mal(+) Fru(-) Neisseria meningitidis AB CLSI

BGN LAC (+ -)

INV. Hongos ms comunes

S. agalactiae
Seroagrupar AB CLSI

F(V) (+) F(X) (+) IND ORN URE

F(V) (+) F(X) (-) IND ORN URE

Agar Nutritivo OX OF Pigmentos

Staphylococcus aureus AB. CLSI

OX(-) OF: (+/+)

OX(+ -) OF: (+/-) OF: (-/-)

OX(+) OF: (+/+)

S. pneumoniae
Coag(-) Manitol (V) Lac(V) Serotipificar AB. CLSI

H. influenzae
Serotipificar AB CLSI

H. parainfluenzae Serotipificar AB CLSI

FENOTIPO KIA, ONPG,RM-VP Citrato,LD,OD,SIM, URE, FD

Novobiocina (S) 16mm

S. epidermidis
AB CLSI

Novobiocina (R) <16mm S. saprophyticus

Enterobacterias

BGNF

Vibronaceae

5.- Sangre (Hemocultivo)

El estudio bacteriolgico de la sangre debe realizarse principalmente en pacientes con neumona, meningitis o fiebre de origen desconocido, entre otros sndromes.

DEFINICION
Bacteriemia: es la presencia de bacterias viables en el torrente sanguneo, evidenciada por la obtencin de cultivos en sangre, sea por puncin venosa o por aspiracin a travs de un catter intravascular.

DEFINICION (NOM-045-SSA22005 )
Este diagnstico se establece en un paciente con fiebre, hipotermia o distermia con hemocultivo positivo. El diagnstico de bacteriemia nosocomial (BN) puede darse aun en pacientes con menos de 48 horas de estancia hospitalaria si se les realizan procedimientos de diagnstico invasivos o reciben terapia intravascular.

Interpretacin del Hemocultivo Positivo.

Un hemocultivo positivo para Gramnegativos, Grampositivos u hongos es suficiente para hacer el diagnstico. En caso de aislamiento de un bacilo Grampositivo o

estafilococo coagulasa-negativo, puede considerarse

bacteriemia si se cuenta con dos o ms de los siguientes criterios:
Alteraciones hemodinmicas. Trastornos respiratorios. Leucocitosis o leucopenia no inducida por frmacos. Alteraciones de la coagulacin (incluyendo trombocitopenia). Aislamiento del mismo microorganismo en otro sitio anatmico.

Los grmenes identificados como causales de

Bacteriemia Nosocomial segn la bibliografa

internacional son principalmente: 1.- Cocos gram positivos: Estafilococo Coagulasa-Negativo Staphylococcus aureus Enterococcus spp. 2.- Hongos levaduriformes: Candida spp 3.- Bacilos Gramnegativos: Pseudomonas spp E. coli Klebsiella pneumoniae Enterobacter cloacae Acinetobacter spp Serratia spp

RHOVE-DGE

Material necesario
Guantes, jeringuilla, aguja, ligadura, torundas, contenedor de punzocortantes, botella de cultivo, tintura de yodo, alcohol isoproplico al 70%.
El tamao de la aguja depender del lugar de la del tamao de la vena y la edad del paciente.

Venopucin
1) Seleccione el brazo y aplique el torniquete para restringir el paso de la sangre venosa. 2) Normalmente se selecciona la vena ms prominente para la puncin. 3) Limpie completamente la piel con alcohol al 70%; y a continuacin limpie con solucin yodo povidona, frotando el rea seleccionada y deje secar. 4) Introduzca en la vena la aguja con el bisel hacia arriba. Una vez que la vena se haya canalizado, extraiga la sangre jalando el mbolo de la jeringuilla de manera lenta y con continuidad. 5) Una vez que se ha obtenido la cantidad de sangre necesaria, retire el torniquete y coloque un algodn con alcohol sobre el sitio de Insercin. 6) Retire la aguja y haga que el paciente sostenga firmemente el algodn hasta que cese el sangrado. 7) Inocule el medio de cultivo con los volmenes de sangre que recomienda el fabricante.

Sangre
Inoculacin de la botella
Incubar a 35C

Monitoreo de produccin consumo de gas, hemlisis y turbidez Durante las 6 -18hrs posteriores Incubando la botella 35C Monitoreo de produccin consumo de gas, hemlisis y turbidez Diariamente si se mantiene negativo Subcultivar en Agar Chocolate Incubar a 35-37C 24 48 y realizar tincin de Gram Directo de la botella Repetir la operacin cda 3er. da

Cultivo (+)

Cultivo (-)

Descartar el frasco si despus de 7 das de incubacin no se compruba positivo

ID. Bacteriana AB CLSI

Mdula sea
Inoculacin de la botella
Incubar a 35C

Monitoreo de produccin consumo de gas, hemlisis y turbidez Durante las 6 -18hrs posteriores Incubando la botella 35C

Monitoreo de produccin consumo de gas, hemlisis y turbidez Diariamente si se mantiene negativo

Subcultivar en Agar Chocolate Incubar a 35-37C 24 48 y realizar tincin de Gram Directo de la botella Repetir la operacin cda 3er. da

Cultivo (+)

Cultivo (-)

Descartar el frasco si despus de 7 das de incubacin no se compruba positivo

ID. Bacteriana AB CLSI

LIQUIDOS
Centrifugar 3000 RMP/15min

SEDIMENTO: Tinciones Gram Ziehl Neelsen

GS al 5% al 5% CO2 al 5% 24-48hrs 37C

GCh al 5% CO2 al 5% 24-48hrs 37C

Mac Conkey 24-48 Hrs 37C

Agar Dex. Sabouraud (Opcional)

CGP racimos Col. hem Cat(+) Furazolidona(S) Oxidasa (-)

CGP Cat(-)

Coag(+) Manitol(+) Lac(+)

DCGP Col.hem Taxo P(S) 16mm OPT 5ug Sol.en bilis (+)

CGP Col. hem Cadenas cortas Taxo A (S) SXT(R) CAMP (-)

BGN Pleomrficos F(V) F(X)

DCGN Cat(+) OX(+) Glu(+) Mal(+) Fru(-) Neisseria meningitidis AB CLSI

BGN LAC (+ -)

INV. Hongos ms comunes

S. pyogenes
Seroagrupar AB CLSI

F(V) (+) F(X) (+) IND ORN URE

F(V) (+) F(X) (-) IND ORN URE

Agar Nutritivo OX OF Pigmentos

Staphylococcus aureus AB. CLSI

OX(-) OF: (+/+)

OX(+ -) OF: (+/-) OF: (-/-)

OX(+) OF: (+/+)

S. pneumoniae
Coag(-) Manitol (V) Lac(V) Serotipificar AB. CLSI

H. influenzae
Serotipificar AB CLSI

H. parainfluenzae Serotipificar AB CLSI

FENOTIPO KIA, ONPG,RM-VP Citrato,LD,OD,SIM, URE, FD

Novobiocina (S) 16mm

S. epidermidis
AB CLSI

Novobiocina (R) <16mm S. saprophyticus

Enterobacterias

BGNF

Vibronaceae

6.- Piel y tejidos blandos

Cultivo de secrecin de herida

Cultivo de absceso Cultivo para anaerobios

A).- Cultivos de secrecin de Heridas, lceras y abscesos

Lavar cuidadosamente la superficie de la herida. La aspiracin percutnea requiere una desinfeccin severa, previa similar a la realizada en la toma de hemocultivos. Recoger el pus mediante jeringa y aguja, aspirando preferentemente de zonas profundas. Esta tcnica tambin es adecuada para obtener muestras de celulitis, lceras, escaras o abscesos abiertos y heridas superficiales. Cuando la muestra sea insuficiente, instilar solucin salina estril y aspirarlo nuevamente en la jeringa. Cuando los procedimientos anteriores no sean factibles podr efectuarse un frotis de las partes profundas de la herida con un hisopo para tincin de Gram.

Criterios para el diagnstico de IN 6.8 Infeccin de piel y tejidos blandos. 6.8.2 Infecciones de tejidos blandos. CIE-10 (L04, L08). Fascitis necrosante, gangrena infecciosa, celulitis, miositis y linfadenitis. Con tres o ms de los siguientes criterios: 6.8.2.1 Dolor localizado espontneo o a la palpacin. 6.8.2.2 Inflamacin. 6.8.2.3 Calor. 6.8.2.4 Rubor, palidez o zonas violceas. 6.8.2.5 Crepitacin. 6.8.2.6 Necrosis de tejidos. 6.8.2.7 Trayectos linfangticos. 6.8.2.8 Organismo aislado del sitio afectado. 6.8.2.9 Drenaje purulento. 6.8.2.10 Absceso o evidencia de infeccin durante la ciruga o por examen histopatolgico.

Heridas, abscesos lceras

GRAM Respuesta inflamatoria Zona de necrosis proteoltica
GS al 5% al 5% CO2 al 5% 24-48hrs 37C GCh al 5% CO2 al 5% 24-48hrs 37C Mac Conkey 24-48 Hrs 37C

Agar Dex. Sabouraud (Opcional)

CGP racimos Col. hem Cat(+) Furazolidona(S) Oxidasa (-)

Coag(+) Manitol(+) Lac(+)

CGP Col. hem Cadenas cortas Taxo A (S) SXT(R) CAMP (-)

BGN Pleomrficos

BGN bipolares Cat(+) OX(+) Glu(+) OF(+/ -))

BGN LAC (+ -)

INV. Hongos ms comunes

S. pyogenes
Staphylococcus aureus AB. CLSI Seroagrupar AB CLSI

Fositas Cat(-) OX(+) OF(-/ -)) LD(+) OD(+)

F(V) (-) F(X) (-) IND ORN URE

Pasteurella sp AB CLSI OX(-) OF: (+/+)

Agar Nutritivo OX OF Pigmentos

OX(+ -) OF: (+/-) OF: (-/-)

OX(+) OF: (+/+)

E. corrodens
Coag(-) Manitol (V) Lac(V) Serotipificar AB

H. aphrophilus Serotipificar AB

FENOTIPO KIA, ONPG,RM-VP Citrato,LD,OD,SIM, URE, FD

Novobiocina (S) 16mm

S. epidermidis
AB CLSI

Novobiocina (R) <16mm S. saprophyticus

Enterobacterias

BGNF

Vibronaceae

B).- Cultivo de catter

Desinfectar con alcohol una zona de piel de unos 10 cm correspondiente a la zona de entrada del catter.
Hacerlo en forma de crculos comenzando par el centro. Repetir la misma operacin, pero con el alcohol iodado o iodopovidona.

Retirar el catter con la mxma asepsia.

Con pinzas y las tijeras estriles, cortar los 3 cm distales del catter que corresponden a la porcin intravascular. Introducir el segmento de catter en un recipiente estril correctamente identificado.

Criterios para el diagnstico de IN Bacteriemias.

6.9.6 Bacteriemia relacionada a lneas y terapia intravascular.

Hemocultivo positivo perifrico y a travs del catter con dos o ms de los siguientes criterios: 6.9.6.1 Relacin temporal entre la administracin de terapia intravascular y la aparicin de manifestaciones clnicas. 6.9.6.2 Ausencia de foco evidente. 6.9.6.3 Identificacin de contaminacin de catter o solucin endovenosa. 6.9.6.4 Desaparicin de signos y sntomas al retirar el catter o la solucin sospechosa. 6.9.6.5 Cultivo de punta de catter >15 UFC/ml.

Cateter 3cm Mtodo de Maki

AGAR NUTRTIVO Rodarlo sobre toda la Superficie del agar

Caldo BHI

Distribuir con una asa bacterilogica en estria masiva

Incubar por 24 -48hrs Hrs 35 37C

Incubar de 8 a 12 Hrs 35 37C

Agar Nutritivo 35 - 37C x 24 48 hrs COCOS GRAM POSITIVOS BACILOS GRAM NEGATIVOS BGN AGAR NUTRITIVO

<15 UFC no representativo =>15 UFC Representativo

IDENTIFICAR Y REALIZAR AB CLSI