Familia Enterobacteriaceae

Taxonomie Familia Enterobacteriaceae cuprinde cel puin 27 de genuri i 127 de specii, la care se mai adaug 8 grupuri enterice.

Genuri:
Escherichia Shigella Salmonella Klebsiella Proteus Citrobacter Serratia

Hafnia Enterobacter Edwardsiella Morganella Providencia Kluyvera Yersinia

Habitat
Enterobacteriile sunt germeni ubicuitari - se izoleaz din sol, ap, plante, intestinul omului i animalelor. Majoritatea (Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis etc.) fac parte din flora normal a organismului i pot produce infecii oportuniste. Unele specii ca, ex. Salmonella typhi - au habitat exclusiv uman (bolnav sau purttor sntos).

Din punct de vedere al patogenitii, distingem:

nalt patogeni (Salmonella, Shigella, Yersinia) patogeni (E.coli, Klebsiella, Enterobacter, Proteus, Serratia, Citrobacter) lipsii de importan n patologia uman.

condiionat

sau

Rezistena la factori fizici, chimici sunt rezisteni n mediul extern.

Rezist 5-6 luni n apele poluate cu materii fecale (genul Shigella rezist doar 2-6 sptmni). Supravieuiesc i se multiplic la temperatura camerei n medii umede, n alimente, n soluii perfuzabile. De aici decurg posibilitile largi de rspndire a lor n colectiviti i n spitale (enterobacteriile se izoleaz frecvent din infecii nosocomiale).

Sunt distrui de cldur (n 30' la 55-60C i instantaneu la fierbere), antiseptice i dezinfectante. Din ce n ce mai multe specii sunt rezistente la numeroase antibiotice, n special prin transfer de plasmide.

Caractere morfologice i tinctoriale: - Bacili Gram negativi, de dimensiuni medii cu capetele rotunjite, cu dispoziie n general necaracteristic. - Pot fi mobili (cili peritrichi) sau imobili. - Fcultativ anaerobe,nu sporuleaz. - Majoritatea enterobacteriilor snt necapsulate.

Proprietile culturale Enterobacteriile sunt nepretenioase nutritiv.

Se dezvolt bine att pe mediile uzuale (bulion peptonat, geloz peptonat), ct i pe mediile diferenial-diagnostice lactozate (Endo, Levin, Ploschirev, Mac Conkey), pe care putem diferenia enterobacteriile lactozo-pozitive de cele lactozo-negative. Tulbur uniform mediile lichide (bulionul). Pe medii solide se dezvolt sub form de colonii S sau R. ntre cele dou tipuri pot exista i forme intermediare sau uneori colonii mucoase de tip M (Klebsiella). Proteusul prezint pe unele medii solide (geloz, geloz-snge) fenomenul de invazie.

Clasificarea enterobacteriilor se bazeaz pe studiul caracterilor biochimice (determinarea genului i speciei) Caractere biochimice comune care le permit ncadrarea n familia Enterobacteriaceae: fermenteaz glucoza reduc nitraii la nitrii sunt catalazo-pozitivi sunt oxidazo-negativi Unii germeni fermenteaz lactoza (lactozo-pozitivi), iar alii nu (lactozo-negativi), fermentarea fiind un criteriu practic de difereniere preliminar.

Structura antigenic a) Antigenul somatic O (polizaharidul O). Sunt antigene cu specificitate de grup - mpart genul n grupe. Cu anticorpii omologi aglutineaz granular (grunji mici, care nu dispar la agitare).

b) Antigenele flagelare H, prezente la bacteriile mobile sunt de natur proteic, pot prezenta variaii.

c) Antigenul capsular K este de natur polizaharidic sau proteic -La Salmonella typhi, Salmonella paratyphi C acest antigen de suprafa se numete AgVi. Studiul antigenic bazat pe determinarea antigenelor somatice O, capsulare K i flagelare H permite ncadrarea bacteriilor aparinnd unui gen n specii sau serotipuri. Tipizarea serologic se efectueaz n mod obinuit n reacia de aglutinare pe lam. n prima etap se execut reacia de aglutinare cu seruri polivalente, apoi cu seruri monovalente.

Patogenitate Pricipalii factorii de virulen ai enterobacteriilor sunt:

Endotoxina sau lipopolizaharidul (LPZ) Capsula, prezent la enterobacteriile capsulate, este un factor de virulen - asigur rezistena la fagocitoz. Sinteza de exotoxine. -Enterotoxine termolabile au fost evideniate la E.coli i ocazional la Klebsiella, Salmonella. -Enterotoxine termostabile au fost evideniate la E.coli i ocazional la Yersinia enterocolitica i Citrobacter freundii. Ambele tipuri de enterotoxine sunt responsabile de apariia unor scaune diareice. Shigella dysenteriae elaboreaz o exotoxin cu efect neurotoxic, enterotoxic i citotoxic.

Supravieuirea i multiplicarea intracelular protejeaz bacteria fa de numeroase antibiotice i de rspunsul imun al gazdei.
Rezistena la puterea bactericid a serului. Rezistena la antibiotice - apare n special prin transfer de plasmide. Fimbriile sunt factori de ptrundere i aderen.

Semnificaie clinic

Enterobacteriile sunt germeni responsabili de producerea a numeroase infecii intestinale i extraintestinale. Foarte rar pot aprea infecii generalizate pe un fond de rezisten sczut a organismului. Enterobacteriile reprezint 80 din totalitatea bacililor gramnegativi izolai i peste 50 din totalul germenilor izolai implicate n etiologia septicemiilor, n peste 70 din infeciile urinare i n majoritatea toxiinfeciilor alimentare. Sunt cauza frecvent a infeciilor nosocomiale Sursa de germeni este reprezentat de un rezervor animal (infeciile cu Salmonella), un purttor uman (Shigella, Salmonella typhi) sau flora oportunist a organismului (E.coli etc.).

Rspunsul imun, profilaxie i tratament Rspunsul imun este n general slab, deoarece infeciile sunt localizate la poarta de intrare. n febra tifoid, care este o infecie generalizat, rspunsul imun este foarte puternic. Profilaxia este nespecific, dar exist i situaii n care se efectueaz profilaxia specific:

vaccinarea antitifoidic, la anumite persoane care lucreaz n sectorul alimentar sau al apelor vaccinare antidizenteric cu vaccin atenuat, mai ales n colectiviti vaccinare antipestoas - cu germeni inactivai, persoanelor care pleac n zone endemice.

Tratamentul antiinfecios se face conform antibiogramei, deoarece foarte multe tulpini i mai ales cele izolate din infeciile nosocomiale au dobndit multirezisten.

 1. 2. 3.

4.
5. 6. 7. 8. 9.

Testele biochimice primare: (determinarea genului) Utilizarea citratului de sodiu Utilizarea malonatului de sodiu Mobilitatea Testul cu rou metil Formarea de H2S Testul Voges-Proskauer Producerea de ureaz Producerea de fenilalanindezaminaz Producerea de lizindecarboxilaz

Testele biochimice secundare (determinarea speciei i biovariantei)

Genul Escherichia

Habitat

Colibacilii sunt foarte rspndii n mediul nconjurtor odat cu coninutul intestinal al omului i al animalelor. Numrul acestor germeni pe unitatea de volum n ap i alimente - reprezint indicele coli care este un criteriu de apreciere a gradului de poluare a apei, mediului i a alimentelor cu materii fecale. E.coli face parte din flora normal a intestinului la om i animale. Formeaz aproximativ 80 din flora rezident a colonului cu rol n sinteza unor vitamine din grupul B i K i contribuie la meninerea unui echilibru al biocenozei.

Morfologie. Caractere culturale i biochimice

Sunt bacili gram-negativi, scuri, cu capetele rotunjite, nesporulai, necapsulai (rar unele tulpini pot avea o pseudocapsul), n general mobili (cu cili peritrichi). Sunt germeni aerobi, facultativ anaerobi, nepretenioi nutritivi. Se dezvolt pe mediile uzuale i pe mediile lactozate pe care formeaz colonii lactozo-pozitive (n proporie de 95%)-de tip S, iar tulpinile pseudocapsulate formeaz colonii cu aspect mucos. Prezint caracterele comune enterobacteriilor. Caracterele biochimice se cerceteaz pe setul de teste biochimice care permit identificarea genului.

 Factori

de virulen

Secret diverse substane biologic active, de tipul:

- enterotoxine, hemolizine, enzime care asigur rezistena la antibiotice, - endotoxina, responsabil de ocul septic; - capsula (antigenul K1) -de natur polizaharidic, are rol antifagocitar. Structura antigenic

Structura antigenic la E.coli este complex, fiind descrise 165 antigene O (pe baza crora bacilii sunt mprii n grupe serologice), 54 H (grupele sunt mprite n tipuri) i 103 K.

Semnificaie

clinic i patogenitate

Sunt germeni condiionat patogeni (cei mai izolai n laboratorul de bacteriologie). n anumite condiii, mai ales cnd scade rezistena local sau general a organismului sau dac ajung n zone normal sterile, produc infecii cu localizare i gravitate diferit grupate n:
infecii enterale infecii extraenterale.

Infeciile enterale sunt produse de 5 grupe de E.coli: E.coli enterotoxigene (ETEC) - secret enterotoxine termolabile sau termostabile codificate plasmidic- are capacitatea de a coloniza intestinul subire prin pilii de aderen. ETEC produce forme uoare de enterit sau un sindrom diareic holeriform. E.coli enteroinvazive (EIEC) - penetreaz enterocitele colonului n care se multiplic i pe care le distrug, determinnd un sindrom diareic dizenteriform, cu scaune mucopurulente, sangvinolente.

E.coli enteropatogene (EPEC) - este principalul agent etiologic al sindromului diareic la copii mici. Factorii de patogenitate sunt pilii de aderen i o toxin Shiga-like. Aceasta determin distrugerea enterocitelor intestinului subire. E.coli enterohemoragic (EHEC) - produce dou toxine Shiga-like. Iniial apare o diaree apoas care devine hemoragic. Febra este mic sau absent. Boala se declaneaz predominant n sezonul cald i la copii sub 5 ani, prin consum de carne de vit insuficient preparat termic i de lapte nepasteurizat. Aproximativ jumtate din EHEC aparin serotipului O157 : H7.

E.coli

enteroaderente, denumit n prezent "Enteroaggregative E.coli" (EAggEC), este considerat o cauz a diareei persistente la copiii din rile subdezvoltate. de infecie al tulpinilor de EIEC, ETEC, EPEC este uman, iar al celor EHEC este bovin.

Rezervorul

Infeciile extraenterale:
Infecii ale tractului urinar (ITU) - produce 5090 din ITU. - Cel mai frecvent se izoleaz serotipurile O4, O6 i O75. - Sursa infeciei este cel mai frecvent cea enteral (n infeciile ascendente). - Calea descendent, este mai rar i se datoreaz unor diseminri septice secundare. - O alt posibilitate de contaminare frecvent ntlnit n mediul spitalicesc este cea iatrogen (prin intermediul unor sonde, catetere, etc.). De obicei germenii de spital achiziionai sunt deosebit de rezisteni la agenii antimicrobieni.

 septicemii

- E.coli este bacilul gram-negativ cel mai frecvent izolat din septicemii. Diseminarea hematogen se produce de obicei de la un focar infecios urinar sau gastrointestinal. meningite neonatale - 75 din tulpinile de E.coli izolate posed antigenul capsular K1. infecii biliare infecii respiratorii infecii O.R.L. suprainfecii ale plagilor i arsurilor infecii genitale

infecii nosocomiale (deseori infeciile enumerate: urinare, ale plgilor chirurgicale, etc. pot lua caracter nosocomial

Diagnosticul de laborator
Prelevate: scaunul diareeic, voma, urina, exudate purulente, sput, hemoculturi, biopsii, LCR. 1. Izolarea culturii pure - Preparat Gram GS Endo

2. Acumularea culturii pure

3. Identificarea culturii pure

Rspunsul imun, profilaxie i tratament

Rspunsul imun este n general slab, nesemnificativ. Profilaxia este nespecific. Tratamentul se face n funcie de rezultatul antibiogramei i de localizarea antigenului patogen.