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UNIVERSIDADE DE PASSO FUNDO FACULDADE DE ENGENHARIA E ARQUITETURA ENGENHARIA DE ALIMENTOS

Las Oraide Manica Camila Silveira Bruna Seguenka Andressa Centenaro Luciane Maria Colla Prof. Dra: Telma Elita Bertolin Passo Fundo 2010

Envelhecimento

Fenmeno progressivo Todos os seres vivos Modificaes

Morfolgicas, fisiolgicas, bioqumicas e psicolgicas

Diversas teorias

RADICAIS LIVRES, mais abrangentes e aceitas na atualidade.

Estresse oxidativo na mitocndria e a peroxidao

lipdica, maiores precursores de radicais livres.

Estratgias como a restrio calrica e o uso de

antioxidantes, podem contribuir na atenuao de


radicais livres, e no retardo do envelhecimento.

Ficocianina
Principal

pigmento da Spirulina platensis antioxidante

Potencial

Minimizar a peroxidao lipdica


Estimulante

sistema imunolgico leuccitos

Aumentando

Manter

sade dos rgos


contra cncer, lceras e hemorridas

Proteger

Levedura Saccharomyces cerevisiae

Ncleo e organelas com metabolismo semelhante

eucariotos.

melhores modelos de sistema para estudo de estresse

oxidativo.

Verificar como a restrio calrica conjugada com o uso de antioxidante natural, a ficocianina, podem contribuir

para a atenuao do processo de


envelhecimento, atravs da diminuio

do dano oxidativo, em leveduras


Saccharomyces cerevisiae.

Saccharomyces cerevisiae. isolada de fonte comercial e mantida a 4 C cultivo das clulas, meio GYMP 1 % extrato de malte ; 0,5 % extrato de levedura; 0,2 % fosfato de sdio monobsico e 2 % de glicose

Foram realizados seis tratamentos experimentais.


Meio 01 02 03 04 05 Cultivo Cultivo controle (C) Cultivo com restrio calrica de 30% ( R 30%) Cultivo com restrio calrica 20% (R 20%) Cultivo com restrio calrica de 10% (R 10%) Cultivo com restrio calrica de 30 % acrescida de ficocianina (R 30% + F) Cultivo controle acrescido de ficocianina ( C+F)

06

Cultivos aerbicos shaker 30C, e 16 seg- . erlenmeyers de 250 mL, volume til 160 mL. A cada 24 h foram realizadas as determinaes de:

acar redutor

pH

Contagem de clulas viveis

Dosagem do dano oxidativo (TBARS)

Atividade da enzima catalase.

pH
Entre 4,5 e 5,5 Ideal para a levedura

No manuteno do pH
Gasto de energia Desnaturao de protenas

alterao na atividade das enzimas - metabolismo Menor velocidade de crescimento

Consumo de glicose (acar redutor)


3 Controle 2,5 Restrio 30% 2 1,5 1 0,5 0 0 24 48 Tempo (h) 72 96 Restrio 20 % Restrio 10 % Controle + Ficocianina. Restrio 30% + Ficocianina

Acar Redutor (mg/mL)

Crescimento exponencial
Concomitante com o consumo de substrato

Glicose consumida, nas primeiras 48 h.

Contagem de clulas viveis (log UFC/mL)


10 9,5 9 Controle Restrio 30% Restrio 20% Restrio 10% Controle + Ficocianina Restrio + Ficocianina

log (UFC/mL)

8,5 cultivos com restrio 8Aps 48h, menor apoptose. 7,5 7 6,5 6 0 24 48 Tempo (h) 72

menor crescimento celular

96

Controle maior concentrao de glicose

Maior crescimento celular.

Cultivos com restrio-menor crescimento celular

Percentual de morte celular em 72 horas com relao ao cultivo em 48 horas.


Tratamento Controle Restrio 30% Restrio 20% Restrio 10% Controle + Ficocianina Restrio 30% + Ficocianina Morte celular (%) 92,73 0,00 51,41 72,03 18,77 52,60

Efeito pr-oxidante, quando aplica-se o sinergismo da restrio calrica associada a ficocianina

Restrio e ficocianina isoladas auxiliam na viabilidade celular

TBARS
Controle +
Tempo (h) Controle* Restrio* Ficocianina* 0 24 28,9896,421 4,9510,304 27,4413,264a 5,5930,949a 18,0252,249a 5,1660,731 Ficocianina* 17,8011,064a 8,0821,774

Restrio +

48
72

10,7330,242
10,1271,005

6,6740,885a
7,5440,345b

6,6560,968
6,4150,523b

7,4801,641
6,1330,336b

Tempo 0 a 24 horas de cultivo - valores decrescentes Aps 24 horas oscilaes

72 horas Tratamentos com restrio e com ficocianina menores que o controle. Restrio calrica e ficocianina atenuaram o processo oxidativo.

CATALASE
800 700 Controle Controle + Ficocianina Restrio 600 500 400 300 200 100 0 0 24 48 Tempo (h) 72 96 Restrio + Ficocianina

Atividade enzimtica (UB/mg protena)

No traduz o comportamento da ao antioxidante dos tratamentos restrio calrica e ficocianina.

Atividade no tempo de 48 horas e aps um declnio.

A restrio calrica, com valores de 20 e


30% e a ficocianina quando utilizada de forma isolada promovem a manuteno da viabilidade celular.

O sinergismo restrio calrica mais


ficocianina no favorecem a manuteno da viabilidade celular.

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